1.

El proceso de aireación tiene la finalidad de suministrar el oxígeno a la célula

microbiana, describa el comportamiento de la solubilidad del O2 desde un
comportamiento de fenómeno de transporte y comportamiento fisicoquímico,
establezca cuales son los problemas que se deben solucionar para que tener una
concentración adecuada a los requerimientos de la actividad metabólica de la
actividad celular.

Oxígeno disuelto en agua Toda la vida acuática depende de la disponibilidad de oxígeno disuelto
(OD) en el agua. Mientras que los organismos terrestres viven en una atmósfera compuesta
aproximadamente de un 20% de oxígeno, los organismos acuáticos sobreviven con una cantidad de
oxígeno considerablemente menor. La solubilidad del oxígeno en agua dulce varía entre 14.6 mg/L
a 0 o C hasta aproximadamente 7 mg/L a 35 o C bajo una presión de 760 mmHg. La concentración
de oxígeno disuelto en agua está determinada por la ley de Henry, que describe la relación de
equilibrio entre la presión parcial de oxígeno atmosférico y la concentración de oxígeno en agua.
Otros factores que influyen la concentración de oxígeno disuelto en agua son: la presión atmosférica
(y por lo tanto la altitud sobre el nivel del mar), el contenido de sales en el agua, y la temperatura
del agua.

El método iodométrico es el más exacto de los dos. La concentración de oxígeno disuelto se

determina a través de una serie de reacciones de oxidación-reducción. Primero se añade Mn2+ (en
forma de sulfato de manganeso) a una muestra de 250 mL de agua. Después se añade un reactivo de
KI en NaOH. Bajo estas condiciones cáusticas, el oxígeno presente en la muestra oxidará el Mn2+ a
Mn4+, que precipita como un óxido hidratado de color marrón. Esta reacción es relativamente lenta
y la solución debe ser agitada varias veces hasta que la reacción se complete. Las siguientes
ecuaciones explican esta reacción:

La concentración de oxígeno disuelto se determina usando la siguiente ecuación que refleja la serie
de reacciones de oxidación-reducción de las ecuaciones anteriores:

La solubilidad de los gases en los líquidos no solo depende de la temperatura, además, está afectada
por la presión parcial del gas sobre el líquido en el que se disuelve.
De acuerdo con la Ley de Henry, la solubilidad de un gas en un líquido a cierta temperatura es
proporcional a la presión parcial del gas sobre el líquido.
C=kP
donde C es la solubilidad, P la presión parcial y k es una constante característica del soluto, el
disolvente y la temperatura

Los peces respiran oxígeno disuelto en agua. Moléculas de oxígeno que se han mezclado con
moléculas de agua, sobre todo en las capas superficiales de los lagos, rios, mares, ..

No confundir el oxígeno disuelto con el oxígeno combinado con hidrógeno que tiene el agua.

La aplicación de la ley de Raoult  para la especie i, requiere de un valor para la presión de

saturación Pi° a la temperatura del sistema. Si se desea calcular la fracción mol de un componente
donde la temperatura crítica es menor a la temperatura del sistema, en tal caso no es posible aplicar
la ley de Raoult. Dicho problema es posible resolverlo mediante la ley de Henry, en este caso
aplicada a presiones lo suficientemente bajas como para suponer que la fase vapor es un gas ideal.
Para una especie presente como un soluto muy diluido en la fase líquida, en tal caso la ley de Henry
establece que la presión parcial de la especie en la fase vapor es directamente proporcional a su
fracción mol en la fase líquida.

Yi=Xi*H
P=X1*H+X2*P2° 

Donde : H es la constante de Henry.

Oxígeno

El oxígeno (O2) se encuentra comúnmente pero es muy reactivo. Todos los mundos jóvenes poseen
poco oxígeno molecular y solo tenemos una atmósfera rica en oxígeno debido a la fotosíntesis.
6CO2 + 6H2O + luz solar -> C6H12O6 + 6O2

equilibrado por la oxidación de los alimentos (glucosa en este caso) para dar a los organismos la
energía para los procesos de la vida

C6H12O6 + 6O2 -> 6CO2 + 6H2O + energía vital

El oxígeno disuelto en agua se puede determinar mediante un electrodo redox que tiene una
membrana permeable al oxígeno colocada sobre los electrodos. La membrana solo permite que el
oxígeno molecular pase de la solución.

El oxígeno es una molécula hidrófoba poco soluble que existe en jaulas de clatrato (H2O) 20 en
disolución. La solución se acompaña de una reducción en la entalpía y la entropía de la solución. A
pesar de su menor capacidad de formación de clatrato, se ha propuesto una mayor solubilidad en
equilibrio de O2 sobre N2 (ver abajo a la derecha y solubilidad en gases) debido a su formación de
enlaces de hidrógeno débiles al agua. La formación de enlaces de hidrógeno O = O ··· H-OH puede
verse como la primera etapa en la formación natural de bajo nivel de productos redox de oxígeno
(por ejemplo, H2O2) en agua. Como la relación de solubilidades O2 / N2 tiene un máximo de 290
K, hay una indicación de que las jaulas de clatrato parciales pueden ser responsables de la
polarización que estimula la formación de enlaces de hidrógeno. En superficies y dentro de espacios
confinados con humedades relativas medias (HR, 55%), la solubilidad del oxígeno (O2) aumenta
hasta dos veces.

El agua almacena y transmite información sobre solutos a través de su red unida por hidrógeno. Los
cambios en esta red de agrupamiento provocados por solutos gaseosos pueden tomar algún tiempo
para reequilibrarse. Se ha demostrado que un campo magnético alto tiene un efecto insignificante
sobre el contenido de equilibrio del oxígeno disuelto (<0.3 mM a 20 ° C en condiciones
atmosféricas) pero mejora significativamente su velocidad de disolución. Hay un informe de que el
agua tratada magnéticamente (también del mismo laboratorio, agua tratada electromagnéticamente)
retiene un efecto significativamente cambiado en la germinación de esporas de hongos durante al
menos 24 horas; sin embargo, otros parámetros (por ejemplo, niveles reducidos de oxígeno
disuelto) pueden ser responsables de tales efectos. Se ha informado que la ruptura del enlace de
hidrógeno inducida mecánicamente, causada por la agitación, dura varias semanas.
Los campos eléctricos altos (E ≈ 109 V m-1) reducen la permitividad del agua, lo que aumentará la
solubilidad de los gases. El agua puede estar sobresaturada con oxígeno (≈ 3-6 mM; equivalente a
menos de una respiración de aire en cada litro de agua sobresaturada) bajo presión. Cabe señalar
que, dejándolo solo, el agua desgasificada puede tardar días en reequilibrarse con todos los gases
atmosféricos, excepto el CO2 que se disuelve mucho más rápido. Como incluso se informa que
pequeñas cantidades de gases disueltos tienen efectos relativamente grandes sobre la estructuración
del agua, no es irracional suponer que las condiciones metaestables inducidas artificialmente con un
mayor contenido de gas pueden durar algún tiempo. Beber agua oxigenada produce un aumento
moderado transitorio de los radicales ascorbilo en suero (con consecuencias desconocidas), un
efecto que desaparece con el consumo regular. Sin embargo, no aumentará significativamente la
ingesta de oxígeno del cuerpo y no tiene efectos nocivos aparentes o que promuevan la salud.

El oxígeno triplete puede convertirse en oxígeno singlete bajo irradiación de infrarrojo cercano en
solución, a pesar de que esta transición está 'prohibida' en moléculas aisladas.

La producción de oxígeno singlete (1O2; 1Δg +, electrones emparejados en sus orbitales

moleculares π-antienvejecimiento, compare 3O2, oxígeno triplete normal, 3Σg-, donde dos
electrones están en equivalentes pero separados orbitales π-antienvejecimiento con el mismo giro no
apareado) durante el procesamiento puede hacer que la concentración de peróxido disuelto aumente
a través de la reacción de oxidación de H2O catalizada por agua;

x.1O2 + 2H2O -> (1 –x) .3O2 + 2H2O2

con posibles efectos farmacológicos consecuentes. Curiosamente, el oxígeno singlete participa en la

oxidación del agua catalizada por anticuerpos, produciendo de manera similar el oxígeno triplete y
el peróxido de hidrógeno. Sin embargo, como se espera que la vida útil del oxígeno singlete esté en
el rango de μs cuando se disuelve hacia arriba durante 45 minutos en la fase gaseosa (baja presión),
no se espera que las moléculas de oxígeno singlete permanezcan en el agua embotellada procesada.

Los radicales libres (por ejemplo, los radicales hidroxilo) y los electrones libres (hidratados) pueden
introducirse en el agua mediante técnicas como la electroquímica, los ultrasonidos, la producción de
nanoburbujas, la fotólisis directa del agua, la radiación ultravioleta (≈ 150 nm, 253.7 nm, radiación
de desinfección de hielo a temperaturas muy bajas, o simplemente por agitación. Tales procesos son
catalizados por las cantidades traza (ppb) de Fe2 + / Fe3 + a menudo presentes incluso en agua
purificada.

El agua puede descomponerse de varias maneras para formar productos reactivos,

H2O -> e- (aq) + H2O · ++ H3O + + · OH + OH- + OH + + H · +

      H2O2 + HO2 · + H2 + O2 · - + 1O2

El catión radical del agua (H2O · +) a menudo se forma primero a partir de la ionización del agua,
pero tiene una vida útil muy corta (≪1 ps). H2O · + es la forma ácida del radical hidroxilo · OH, y
el agente oxidante más fuerte en agua líquida. Debido a sus átomos de hidrógeno cargados
positivamente (~ + 0.5 e-), sus longitudes de enlace son 4% más largas que las de H2O y su ángulo
de enlace H-O-H se ha expandido a casi 113 ° (usando el conjunto básico 6-31G. Por lo general,
reacciona rápidamente como un ácido fuerte mediante transferencia de protones para formar el
radical · OH.

H2O · + + H2O -> · OH + H3O +

Los radicales pueden iniciar reacciones en cadena que involucran cascadas de reacciones; por
ejemplo, un solo radical hidroxilo · OH puede dar como resultado la formación de 34 moléculas de
peróxido. Dichos radicales hidroxilo también pueden crearse mediante una radiación de 190-300
nm que excita un electrón del ion hidróxido. El agua también se puede dividir mediante electrólisis
o métodos mecánicos, como ultrasonidos o agitación con un catalizador, para dar H2 y O2, más
algunos radicales libres asociados, como el radical hidroxilo altamente reactivo. En particular, se
pueden producir bajas concentraciones de peróxido de hidrógeno (H2O2) a partir del agua (H2O)
mediante cualquier proceso que mueva grupos de agua entre sí, como la vibración mecánica y la
agitación.

La rotación torsional alrededor del enlace O-O central proporciona dos posiciones de energía
mínima (116.26 ° y 243.74 °, ver a la izquierda) y una barrera rotacional alta debido a la repulsión
entre los pares solitarios de los átomos de oxígeno (cis, a 0 °). Estos dos mínimos están conectados
por un punto de montura de baja energía (trans, a 180 °) de aproximadamente energía térmica (se
muestra en naranja) para que la molécula de H2O2 cambie rápidamente su ángulo de torsión entre
estos mínimos pero no gire completamente.

2. Explica y discute la aplicación de Monod para estimar la concentración del oxígeno

cuando actúa como sustrato.

La ecuación de Monod es un modelo matemático para el crecimiento de microorganismos. Lleva el

nombre de Jacques Monod, quien propuso usar una ecuación de esta forma para relacionar las tasas
de crecimiento microbiano en un ambiente acuoso con la concentración de un nutriente limitante. 123
La ecuación de Monod tiene la misma forma que la ecuación de Michaelis-Menten, pero se
diferencia en que es empírica, mientras que la última se basa en consideraciones teóricas.

La ecuación de Monod se usa comúnmente en ingeniería ambiental. Por ejemplo, se utiliza en el

modelo de lodo activado para el tratamiento de aguas residuales.
Las partículas gruesas en el sustrato crean poros más grandes que mantienen un espacio vacío y
facilitan el drenaje. Las partículas finas crean poros más pequeños que facilitan la retención de agua
disponible y no disponible. La cantidad de poros grandes y pequeños caracteriza el espacio poroso
total del sustrato. La combinación de los componentes y el tamaño de sus partículas determinan la
aireación, la porosidad total y la capacidad de retención de agua en un sustrato. La porosidad total
es la medida del volumen total de estos espacios porosos en el sustrato. La aireación se refiere a la
medida del volumen de espacio poroso en un sustrato ocupado por el aire después de que se satura y
se le permite drenar. La aireación se calcula como un porcentaje del volumen del sustrato y es
inversamente proporcional a la densidad aparente del sustrato.

Como ejemplo:

La porosidad total y la aireación son importantes para el movimiento del agua y nutrientes, y para el
intercambio de aire dentro y en toda la zona de la raíz. Las raíces de la planta necesitan una
aireación adecuada para que pueda producirse la transferencia de oxígeno y otros gases. Con la
aireación correcta en un sustrato, el oxígeno puede alcanzar todas las células de la raíz, donde se
utiliza para respirar. Luego, el dióxido de carbono se puede liberar en el espacio poroso y
finalmente salir del sustrato mediante el proceso de difusión. Si la aireación de un sustrato no es
adecuada, no hay suficiente oxígeno disponible para la respiración de las raíces. Esto puede afectar
negativamente la tasa de crecimiento de las plantas, el sustrato se secará con mayor lentitud debido
al menor consumo de agua por parte de plantas más pequeñas, por lo tanto, la programación de
ventas de las plantas puede resultar afectada. En el peor de los casos, la baja aireación puede
ocasionar la mala salud de la planta, lo que aumenta la susceptibilidad de esta a los ataques de
patógenos e insectos, y posibles pérdidas de plantas.

La ecuación de Monod es:

donde:

 μ es la tasa de crecimiento específica de los microorganismos

 μmax es la tasa de crecimiento específica máxima de los microorganismos
 S es la concentración del sustrato limitante para el crecimiento.
 Ks es la "constante de media velocidad": el valor de S cuando μ/μmax = 0.5

μmax y Ks son coeficientes empíricos de la ecuación de Monod. Difieren entre especies y en función

de las condiciones ambientales.
La tasa de utilización del sustrato está relacionada con la tasa de crecimiento específica de la
siguiente manera:

donde:

 X es la biomasa total (ya que la tasa de crecimiento específica, μ se normaliza a

la biomasa total)
 Y es el coeficiente de rendimiento.

rsu es negativo por convención.

En algunas aplicaciones, los términos múltiples de la forma se multiplican entre sí, donde más de un
nutriente o factor de crecimiento tiene el potencial de ser limitante (por ejemplo, la materia orgánica
y el oxígeno son necesarios para las bacterias heterotróficas). Cuando el coeficiente de rendimiento,
al ser la proporción de masa de microorganismos por la masa de sustrato utilizado, se vuelve muy
grande, esto significa que hay una deficiencia de sustrato disponible para la utilización.

Limitaciones

La relación entre µ y S se describe mejor mediante un tipo de curva de “saturación” en la que a una
alta concentración de sustrato, el organismo crece a una velocidad máxima (µmax) independiente de
la concentración del sustrato). El modelo de Monod satisface este requisito, pero ha sido criticado
particularmente por las derivaciones de µ a una baja concentración de sustrato.

Debido a las limitaciones del modelo de Monod, se propusieron varias expresiones cinéticas
estructuradas y no estructuradas para describir la característica hiperbólica de la curva del
crecimiento microbiano. Sin embargo, el desarrollo de modelos estructurados había sufrido graves
contratiempos debido a la complejidad del crecimiento celular. Así, la mayoría de los modelos de
crecimiento propuestos son desestructurados. Se utilizaron tres enfoques para desarrollar las
ecuaciones para la cinética de crecimiento de las células en suspensión:

 Describir la influencia de los factores fisicoquímicos en los parámetros de crecimiento de

Monod
 Inclusión de constantes adicionales en el modelo Monod original para corregir la inhibición
del sustrato o producto, la difusión del sustrato, el mantenimiento o los efectos de la
densidad celular en µmax.
 Proponer diferentes teorías cinéticas, que resultan en formas empíricas y modelos
mecánicos

3. De acuerdo a las siguientes figuras explique con detalle que información

proporcionan cada una de las líneas de comportamiento: OUR, DO, q02 Co2, el punto
Air off, Air on, dC/dt = -qo2Cx; dC/dt = kLa (Cӿ - C)-OUR

OUR: = Consumo neto del oxigeno que se incorpora a la célula que produce biomasa y energía

OUR=Q/V(CO2entra -CCO2sale)-C/t

Cuando el cultivo se encuentra en fase exponencial de crecimiento, se suspende el suministro de

aire permitiendo que se reduzca la concentración de oxígeno disuelto hasta un valor cercano a la
concentración crítica, en este momento se permite la reaireación bajo las condiciones de operación
evaluadas. Se utiliza para la determinación de kla en cultivos empleando la técinca dinámica.

DO: Variación del porcentaje de saturación de oxígeno disuelto en cultivos

qO2: Tasa específica de consumo de oxígeno por la población microbiana mol g-1 s-1

dC/dt = kLa (Cӿ - C)-OUR: En ausencia de biomasa, cuando se cuenta con células que no están
respirando o cuando no se están llevando a cabo reacciones bioquímicas, OUR = 0. Se utiliza la
ecuación dC/dt = kLa (Cӿ - C)-OUR.

En el estado estacionario, la tasa de transferencia de oxígeno desde las burbujas es igual a la tasa de
consumo de oxígeno por parte de las células. Una vez que se determina la tasa de utilización de
oxígeno a partir de la medición de este en el gas de salida y al mismo tiempo se mide la
concentración de oxígeno disuelto en el medio

dC/dt = -qo2Cx: Los métodos dinámicos se basan en la técnica propuesta por Taguchi (1967) que
mide la actividad respiratoria de los microorganismos que están creciendo activamente en el
biorreactor. Si la entrada de aire al biorreactor se restringe, la concentración de oxígeno disuelto
disminuirá́ a una tasa equivalente al consumo de oxígeno producto de la respiración del
microorganismo. Bajo estas condiciones, se utiliza dC/dt = -qo2Cx

Punto AIR OFF: la entrada del aire al biorreactor se restringe y la concentración de oxigeno disuelto
disminuirá a una tasa equivalente al consumo de oxígeno producto de la respiración del
microorganismo.
Punto AIR ON: Cuando la aireación se reanuda, la concentración de oxígeno disuelto aumenta hasta
que alcanza la concentración del estado estacionario. Utilizando el valor estimado de OUR el kLa
puede ser determinado a partir del perfil de concentración de oxígeno disuelto.

4. y en los puntos de cruce y contacto con las ordenadas que información

proporcionan

Figura 1

La línea punteada qO2 Tasa especifica de consumo de oxígeno por la población microbiana a lo
largo del tiempo transcurrido (eje X), la línea de CO2 indica los niveles de producción de CO2 y la
línea OUR el consumo neto del oxigeno que se incorpora a la célula que produce biomasa y energía.

Figura 2

En el eje X se muestra el tiempo en el que se restringe la entrada de aire (AIR OFF) y se reanuda la
entrada de aire (AIR ON) al biorreactor y en el eje Y se muestra la concentración de CO2 % cuando
existe la entrada de aire y cuando solo es el producto de la respiración del microorganismo.

La entre los puntos AIR OFF y AIR ON proporciona el valor estimado de OUR.

5. Explica de forma detallada como actúa la agitación en la oxigenación de las células,

su nutrición y cuando el biorreactor se programa para la producción de biomasa;
¿cómo se establecen las condiciones de operación de mezclado y la concentración del
oxígeno en el volumen de crecimiento microbiano.

Es necesario establecer condiciones adecuadas de agitación-aireación, que garanticen la

transferencia continua de nutrientes desde el medio de cultivo hasta las células sin generar
problemas de estrés hidrodinámico que afecten el crecimiento celular, la producción del metabolito
de interés y que no permitan la caída de la concentración de oxígeno disuelto en el medio de
cultivo, hasta valores críticos que puedan generar limitaciones en el proceso.
En el caso de procesos microbianos el mezclado del fluido afecta la fisiología celular y la
producción de metabolitos.

En el aumento de escala, la eficiencia del mezclado tiende a disminuir debido a la necesidad de

aumentar las velocidades de agitación-aireación, que mantengan las condiciones de mezclado de
pequeña escala, pero la sensibilidad de las células vegetales a los esfuerzos cortantes impiden este
incremento lo que puede generar la sedimentación celular, disminuir el crecimiento celular y al
mismo tiempo la productividad del proceso.

En el caso de la velocidad específica de consumo de oxígeno (SOUR) se encontró un efecto

significativo de la velocidad de agitación y de aireación, mientras que para la OUR hubo un efecto
significativo de la interacción entre estos factores.

El estrés hidrodinámico creado por velocidades de agitación superiores a 180 rpm tuvo un efecto
significativo sobre la acumulación de biomasa dentro del biorreactor. Al comienzo del cultivo (fase
lag) no hubo crecimiento celular como respuesta a la intensidad de mezclado. Al aumentar la
velocidad de agitación se presentaron fases de acoplamiento más largas (9, 12 y 15 días a 120, 180
y 240 rpm, respectivamente) indicando aumentos en los tiempos de adaptación celular a las nuevas
condiciones del cultivo.

En cuanto al caudal de aire suministrado al medio de cultivo, no se encontró un efecto significativo

de esta variable operacional sobre el crecimiento celular dentro del rango ensayado. Aunque, en
general, existió una disminución en la velocidad de crecimiento al aumentar el caudal de aire
manteniendo constante la velocidad de agitación.

La velocidad de agitación y el caudal de aire suministrado al medio de cultivo afectaron

considerablemente los contenidos de oxígeno disuelto en el medio de cultivo y los valores de kL a,
OTR y SOUR.

Hay que recordar que para esta misma velocidad de agitación se formaron agregados celulares más
grandes los cuales probablemente afectaron la transferencia de oxígeno entre el medio de cultivo y
las células disminuyendo la SOUR. A velocidades de 180 rpm los valores de SOUR superaron los
obtenidos a 120 rpm durante la fase estacionaria lo cual es debido, probablemente, a que el aumento
en la velocidad de agitación disminuye el tamaño promedio de los agregados celulares y mejora la
velocidad de transferencia de oxígeno entre el medio de cultivo y las células

La presencia de gradientes de concentración oxigenada disuelto como resultado de un mezclado y

una trasferencia de masa insuficiente. Su existencia ha sido inferida a partir de análisis de régimen y
en algunos casos por medio de mediciones directas. Estos gradientes pueden ser perjudiciales en
fermentadores ya que, al existir agitación, las células circulan desde las zonas con buena mezcla a
las zonas con baja mezcla y experimentaran fluctuaciones en la concentración de oxigeno
El desempeño puede ser gobernado por la eficiencia con la cual los nutrientes como la glucosa son
mezclados. La falta de homogeneidad también se presenta cuando se da la adiciono la remoción de
un componente de una manera no uniforme.
Es importante puesto que la agitación nos ayuda a que haya menos gradientes en la oxigenación y
en la nutrición de la célula

La aireación ocurre al introducir aire u oxigeno por un burbujeador el cual se encuentra localizado
debajo del propulsor inferior. El burbujeador puede consistir de un tubo abierto simple, o un anillo
con orificios pequeños. El burbujeador de anillo por lo general tiene un diámetro ligeramente menor
que el del propulsor.

La razón entre el flujo volumétrico de aire y el área de sección transversal de un reactor se conoce
como la velocidad superficial del gas. Esta velocidad no debe ser grande para asegurar una
dispersión eficiente y una buena utilización del gas. A velocidades superficiales muy altas, el
propulsor llega a estar completamente envuelto en el gas y la capacidad de dispersión cae
dramáticamente. A este fenómeno se le conoce como inundación
La determinación del k L a en biorreactores es esencial para establecer la eficiencia de la aireación y
para cuantificar los efectos de las variables de operación en la provisión de oxígeno disuelto.
Diferentes métodos se han desarrollado para determinar la tasa de trasferencia de oxígeno en
biorreactores y la selección de un método en particular depende de distintos factores
1 Los sistemas de aireación y de homogenización utilizados
2El tipo de biorreactor y su diseño mecánico
3 La composición del medio de fermentación
4El posible efecto de la presencia de microorganismo
El balance de masa para el oxígeno disuelto en una fase liquida bien mezclada puede verse como
dC
=OTR−OUR
dt
Donde:
dC
= tasa de acumulación del oxigeno en la fase liquida , mol. L−1 . s−1
dt
OTR= tasa de trasferencia del oxigeno del gas al liquido , mol. L−1 . s−1
OUR= tasa de utilización del oxígeno por parte de los ,microorganismos, mol. L−1 . s−1