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Biologia 2 PDF
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ÍNDICE
Unidad 2: Célula:
Práctica No.2: Microscopía
Práctica No.3: Célula: Crenación, Hemólisis, Plasmólisis y Turgencia
Práctica No.4: Permeabilidad selectiva del eritrocito
Unidad 3: Genética
Práctica No.5: Mitosis y Meiosis
Práctica No.6: Extracción de ADN
Práctica No.7: Genética humana
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OBJETIVO
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INTRODUCCIÓN
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básica apoyada en ciencias básicas y dan coherencias al entendimiento
desde la biología, bioquímica y genética a los distintos fenómenos
celulares. El estudio de las propiedades de la célula permite comprender
el funcionamiento y la constitución de las estructuras y las interacciones
celulares, las aplicaciones de este conocimiento a desarrollo de
biotecnológicos.
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 1
“Bioseguridad”
Introducción
Objetivo
Hipoclorito de sodio.
Procedimiento:
1. Normas de Bioseguridad
Utilizar la "bata de Laboratorio" debidamente abotonada y
limpia y retirarla antes de salir del laboratorio.
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Usar guantes para manipular muestras, evitar contaminar el
área de trabajo y los implementos personales (esfero, libros,
apuntes); descartarlos cuidadosamente en la caneca roja.
Dar uso adecuado a los guantes, ya que son un “arma de
doble filo”
Utilizar mascarillas de respiración, la cual debe encajar
cómoda y adecuadamente sobre el puente de la nariz para
evitar el empañamiento de las gafas protectoras. Esta protege
sobre todo la mucosa nasal que es más susceptible a
infecciones que la bucal, debido a que esta última tiene mayor
cantidad de flora normal que la protege contra infecciones.
Utilizar anteojos de protección para evitar lesiones oculares
causadas por partículas proyectadas hacia el rostro del
operador, a la vez que protege contra infecciones
considerando que muchos gérmenes de la flora oral normal
son patógenos oportunistas.
No entrar al Laboratorio implementos que no tengan que ver
con la práctica.
No comer, beber, fumar ni colocar otros objetos en la boca,
mientras esté en el Laboratorio.
Jamás llevarse el lapicero, bolígrafo o cualquier otro
implemento a la boca.
No almacenar alimentos en la nevera ni en los estantes del
Laboratorio.
Hablar lo mínimo mientras está trabajando en el Laboratorio.
No pipetear con la boca.
No usar jeringas o agujas para manipular líquidos o
especímenes clínicos.
Utilizar únicamente mecheros comerciales, NUNCA
improvisados.
Mantener el Laboratorio limpio y aseado.
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Descontaminar las áreas de trabajo antes de iniciar la práctica
de laboratorio, cada vez que se derrame una sustancia y, una
vez terminada la práctica.
Descartar todo el material contaminado en los recipientes
destinados para ello.
Lavarse las manos luego de manipular cultivos, muestras,
animales y, antes de abandonar el Laboratorio.
Conocer las reglas del uso y cuidado de todos los equipos.
Leer y entender los pasos de cada procedimiento antes de
proceder a realizarlo.
Preguntar al docente cualquier duda sobre los procedimientos
a seguir.
No permitir el ingreso de personas ajenas a las áreas de
trabajo.
Notificar de inmediato al docente cualquier accidente.
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Tabla 1. Elementos de Bioseguridad y sus características
EQUIPO CARACTERÍSTICAS DE
PELIGRO EVITADO
SEGURIDAD
Abertura trasera
Bata Contaminación de ropa
Cubren la ropa de calle
Lentes resistentes a los
Gafas de
Impactos impactos
seguridad
Protección Lateral
De látex, vinilo o nitrilo,
Contacto directo con
aprobados para uso
Guantes fluidos y/o
microbiológico, desechables
microorganismos
Protección de las manos
Varios diseños disponibles
Tapabocas/Masc
Inhalación de aerosoles Desechables
arillas
De cara entera o media cara
4. Lavado de manos.
Fuente:
http://www.who.int/gpsc/information_centre/gpsc_lavarse_manos_poster_es.
pdf?ua=1
2. Manejo de residuos
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precauciones necesarias para no exponerse a ellas innecesariamente. Los
fluidos corporales incluyen la orina, heces, sangre, saliva, leche materna,
secreciones nasales y oculares, y secreciones segregadas por heridas o
tejidos. La segregación en la fuente es la base fundamental de la
adecuada gestión de residuos y consiste en la clasificación y disposición
de los residuos en las canecas y contenedores adecuados, de acuerdo con
el código de color adoptado por la legislación vigente. Los residuos se
deben depositar en los recipientes adecuados, los cuales deben ser del
color correspondiente a la clase de residuos que se va a depositar en ellos
y deben estar marcados e identificados de acuerdo con la siguiente tabla:
Fuente: Plan-de-gestion-integral-de-residuos-hospitalarios-y-similares-en-su-
componente-interno
3. Uso de Reactivos
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su contacto directo; si este ocurriera, deberá informar inmediatamente al
docente
4. Uso Equipos
Microscopio:
Balanza:
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Utilice siempre un recipiente para pesar, no ubique las sustancias o
especímenes directamente en el platillo.
Al pesar mantener las puertas cerradas para mejorar la estabilidad.
No pese sustancias corrosivas, calientes o que puedan degradar el
interior de la balanza.
No mover bajo ninguna circunstancia las balanzas de su posición.
Revise la capacidad máxima del equipo.
Espectrofotómetro:
Estos equipos son muy delicados por lo cual es conveniente leer las
instrucciones de uso antes de ser utilizados.
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1. Defina los conceptos de bioseguridad, limpieza, contaminación,
desinfección, descontaminación y esterilización.
2. ¿Cómo puede usted evitar en el laboratorio daños a su salud?
3. Teniendo en cuenta la fórmula V1xC1=V2xC2; en una tabla
presente diluciones al 0.5%, 1%, 1.5% y 5% de hipoclorito de sodio
que tiene una concentración inicial de 10% y un volumen inicial de
1 litro, indicando la concentración inicial, concentración final,
volumen inicial de hipoclorito, volumen de agua y volumen final
para cada dilución.
4. En una tabla, compare e identifique las características principales
tales como descripción, uso, cuidados y breve fundamento científico
de su funcionamiento de los equipos espectrofotómetro, balanza y
microscopio.
5. En una tabla identifique el nombre, uso y elabore el gráfico de los
siguientes materiales de uso en el laboratorio de Biología celular y
molecular:
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Nombre Descripción Uso Gráfico
Tubo de ensayo
Erlenmeyer
Aceite de
inmersión
Embudo
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Nombre Descripción Uso Gráfico
Pinzas
Gradilla
Cápsula
Mortero
Vaso de precipitado
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Nombre Descripción Uso Gráfico
Probeta
Laminas
portaobjetos
Laminas
cubreobjetos
Papel de arroz o
papel para limpieza
de lentes
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 2
“Microscopía”
Introducción
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Su sistema óptico posee un lente condensador (que concentra la luz
proveniente de la fuente), una serie de lentes objetivos (que recogen los
rayos difractados por la muestra), con diferentes poderes de aumentos
(usualmente 4x, 10x, 40x y 100x) y uno o dos lentes oculares (cerca de
los ojos) que generalmente proporcionan un aumento de 10x. Los
términos de aumento se expresan en x, de tal forma que un aumento de
10x (“diez por”) significa que una imagen está aumentada 10 veces el
tamaño original. El aumento total del microscopio es el producto de los
aumentos del lente objetivo más el lente ocular.
Objetivos
Microscopio.
Goteros.
Beakers o frascos pequeños con agua.
Aceite de inmersión.
Lugol al 1%
Azul de metileno.
Placas con sangre humana.
Agua estancada
Papel milimetrado (media hoja)
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Hilos de colores (2 cm cada uno)
Tela de cuadros (2 cm)
Recorte de periódico con la letra asimétrica
Bulbos de cebolla
Elodea (Anacharis sp.)
Papa (Solanum tuberosun).
Laminas portaobjetos
Laminillas
Elementos de protección personal (Bata, gorro, guantes, tapabocas,
gafas de bioseguridad).
Palillos de dientes
Bisturí
Procedimiento:
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1. Funciones del Microscopio
Encienda el microscopio.
Coloque el objetivo de menor aumento 4X.
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Baje la platina completamente girando el tornillo
macrométrico.
Tome la lámina con la preparación.
Coloque la lámina con la preparación sobre la platina
sujetándola con las pinzas.
Procure que la preparación quede centrada, girando el tornillo
para desplazamiento del carro móvil.
Gire el tornillo Macrométrico en sentido contrario a las agujas
del reloj para subir la platina hasta el tope.
Debe hacerlo mirando directamente y no a través del ocular,
ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la
preparación.
Cierre o abra el diafragma hasta una posición intermedia,
accionando su perilla en sentido contrario a las agujas del
reloj para que la luz no sea ni muy brillante ni demasiado
tenue.
Inicie la observación con el objetivo de 4X.
Mirando a través de los oculares, separe lentamente el
objetivo de la preparación con el tornillo macro métrico en
sentido de las agujas del reloj hasta ver la imagen.
Cuando se observe algo nítido la muestra, gire el tornillo
micrométrico hasta obtener un enfoque fino.
Gire el revólver.
Coloque el objetivo de 10X
Visualice con el objetivo de 10X y detalle las estructuras
Gire el revólver y visualice con el objetivo de 40X enfoque con
el tornillo micrométrico y detalle las estructuras.
Al finalizar las observaciones, apaga la luz del microscopio y
deje el microscopio en posición de reposo; es decir con el
objetivo de menor aumento y la platina en su posición más
baja.
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Coloque el objetivo de inmersión de manera que el orificio de la
platina quede entre el objetivo de 100X y el de 40X.
Suba totalmente el condensador para ver claramente el círculo de
luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habrá
que aplicar el aceite.
Coloque una gota de aceite de inmersión sobre la preparación en
el círculo de luz.
Coloque una lámina coloreada sobre la platina.
Ubique el objetivo de 100x.
Suba la platina lentamente hasta que la lente toque la gota de
aceite.
Observe la imagen con aumento de 100X.
En esta preparación se muestran los glóbulos blancos, glóbulos
rojos y plaquetas coloreados con colorante de Wright.
Cuando termine limpie el objetivo de inmersión con un papel
especial para óptica y alcohol isopropílico.
Deje el microscopio en objetivo de menor aumento.
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Calcule el diámetro del campo de visión para aumentos de 4X, 10X,
40X del mismo cuadrado de 1 cm de lado de papel milimetrado.
7. Células vegetales.
a. Cebolla
Tome una cebolla y divídala en ocho partes. Note que consta de varias
partes o escamas. Cada capa está recubierta, en ambas superficies por
una membrana transparente formada por células epidérmicas o
epiteliales. Separe una porción pequeña de la membrana externa (que es
más pigmentada y coloreada que la interna). Extiéndala sobre un
portaobjetos, agregue una gota de agua y póngale un cubreobjetos
tratando de evitar la formación de burbujas. Dibuje varias células en 10X
y en 40X. ¿Qué forma tienen las células?
Agregue una gota de solución de lugol a un lado del cubreobjetos y al lado
opuesto ponga un pedazo de papel absorbente para facilitar la entrada
del colorante a la muestra.
Observe nuevamente en 10x y en 40x. ¿Qué diferencia encuentra en
relación con la observación que hizo anteriormente?
b. Elodea
c. Papa
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Coloree una preparación de lugol. ¿Qué coloración toman los plastidios?
¿Por qué?
8. Células animales
b. Sangre humana
¿Cuántas clases diferentes de células hay? ¿Qué función tiene cada una
de los diferentes tipos de células sanguíneas? Dibuje lo observado con el
objetivo de 40x y con el de 100x.
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Coloque con una pipeta una muestra de agua de acuario o laguna.
Cúbrala con una laminilla.
Observa a menor y mayor aumento, diferenciando los organismos
unicelulares.
Dibujar lo observado.
Presentación de resultados
Cuestionario
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7. ¿Cuál es la utilidad del microscopio en el campo de la biología y las
ciencias en general?
8. Fuera de las estructuras u organelas que se observaron, hay otras que
no se hicieron visibles, explique ¿Por qué y cómo podrían observarse?
10. ¿Tienen todas las células observadas la misma forma? ¿En general
qué factores podrían determinar la forma de las células?
13. ¿Qué función desempeñan los cloroplastos en las células que los
poseen? ¿Todas las células vegetales presentan cloroplastos?
15. Explicar algunas razones por las cuales ciertos colorantes son
específicos para las estructuras celulares.
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 3
“Célula: crenación, hemólisis, plasmólisis y turgencia”
Introducción
Fuente: https://www.youtube.com/watch?v=GxrttjDkmWs
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Fuente: https://www.youtube.com/watch?v=GxrttjDkmWs
Objetivo
Material
Microscopio compuesto.
6 portaobjetos y 6 cubreobjetos.
Vasija con agua destilada.
Pipeta Pasteur.
Solución de NaCl al 0.2%
Solución de NaCl al 0.9%
Solución de NaCl al 20%
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No realice las preparaciones al mismo tiempo, para obtener resultados
satisfactorios es muy importante que concluya con la observación de una
muestra antes de preparar la siguiente.
Células sanguíneas
Células vegetales
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11. Lámina 9 - Repita el paso 7, retire el exceso de agua con ayuda de
papel absorbente y adicione a la muestra, gotas de NaCl al 0.9%.
12. Lámina 10 - Repita el paso 7, retire el exceso de agua con ayuda de
papel absorbente y adicione a la muestra gotas de NaCl al 20%.
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 4
“Permeabilidad selectiva de la membrana del eritrocito”
Introducción
Objetivo
Material
Reactivos
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Solución de Fructuosa 0.25 M
Solución de Ácido cítrico 0.26 M
Material biológico Sangre desfibrinada (10 ml) por grupo de trabajo.
Sangre de cordero
Procedimiento
Nota
- Los datos obtenidos servirán para realizar la curva estándar para
Hemólisis de la sangre, graficando % de Transmitancia contra % de
Hemólisis.
*Posteriormente en un vaso de precipitados coloque 29.5 ml de una de
las soluciones
(Oxalato de amonio, Metanol, Fructosa, Butanol, Glicerol o Ácido cítrico),
en seguida adicione 0.5 ml de solución “STOCK”, agitando suavemente y
llenando una celda con la mezcla. Ponga la celda en el espectrofotómetro
calibrando de antemano y tome las lecturas cada 60 segundos hasta los
5 minutos o bien hasta obtener una lectura de 100% de Transmitancia.
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Presentación de resultados
Cuestionario
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 5
“Meiosis y Mitosis”
Introducción
Fuente: https://www.youtube.com/watch?v=GxrttjDkmWs
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Objetivo
Aprender a diferenciar los periodos del ciclo celular.
Material
• Microscopio.
• Aceite de inmersión
• Acetocarmín
• Metanol
• Bisturí
• Micropreparados que ilustran los procesos de mitosis y meiosis.
Procedimiento
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7. Coloque el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raíz. Con ayuda
de la punta de una lanceta, de unos golpecitos sobre el cubre objetos
sin romperlo, de modo que la raíz quede extendida.
8. Use papel absorbente para retirar el exceso de colorante realice una
suave presión, evitando que él cubre objetos resbale. Si la preparación
está bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presión que se
realice.
9. Selle todos los bordes del cubre objetos con esmalte transparente, para
evitar que se seque y de esta manera conservar la preparación durante
varios días.
10. Coloque la preparación al microscopio e inicie la observación con el
objetivo de 10x e identifique las células.
11. Cambie al objetivo de 40X para detallar las células. Observe los
núcleos y cromosomas en color rosáceo – morado.
12. Ubique el objetivo de 100 x y escriba sus observaciones anotando
las diferencias en cada uno de los aumentos mencionados.
13. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga
células en interfase y células en división y dentro de estas, las
diferentes etapas de la mitosis.
Presentación de resultados
Cuestionario
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5. ¿Qué es la cromatina?
6. ¿Qué es la interfase?
7. ¿Cuáles son las etapas del ciclo celular y que caracteriza a cada una de
ellas?
8. ¿En cuál fase del ciclo celular se duplica el material genético y por qué?
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 6
“Extracción de ADN”
Introducción
Objetivo
Materiales y reactivos
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Procedimiento
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14. Adicionar 8 ml de detergente líquido lavaplatos y remover con la
espátula o cuchara, despacio para no hacer burbujas (así rompemos
las membranas celulares y podemos extraer el ADN de estas).
Repetir los pasos del 5 al 11 del procedimiento anterior.
Presentación de resultados
Cuestionario
7. ¿En qué parte exacta del tubo se observan los filamentos de ADN? ¿qué
se deduce sobre la solubilidad de ADN en el agua salada y el etanol?
8. ¿Cuáles son las técnicas de biología celular y/o molecular que requieren
la extracción de ADN? (Explique al menos 3 técnicas e incluya
imágenes).
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DESCRIPCIÓN DE LA ACTIVIDAD PRÁCTICA No. 7
“Genética humana”
INTRODUCCIÓN
En el laboratorio se estudiarán algunas características humanas
conocidas, para demostrar la herencia Mendelina simple. Con esta
actividad práctica, los estudiantes investigarán acerca de la herencia de
las de características humanas y se fortalecerán los conocimientos
teóricos de la Unidad 3.
Fuente: http://criadeperiquitos.blogspot.com/2015/12/herencia-genetica-guia-basica.html
Objetivo
Determinar caracteres heredables en una población.
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Procedimiento
1. Enrollamiento de lengua
3. Pulgar en escuadra
Algunas personas pueden separar el dedo pulgar hasta formar un ángulo
de 90°. Esto se llama “pulgar en escuadra”. Un alelo recesivo p determina
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esta cualidad. Un alelo dominante P, que se encuentra en la mayoría de
las personas, evita que esta separación sea mayor de 45°
4. Pico de viuda
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6. Dedo anular más corto que el dedo índice
Algunos genetistas creen que, si el dedo anular es más corto, se debe a
un gen influido por el sexo del individuo. De acuerdo con esta teoría, los
varones poseen un gen dominante A y las mujeres uno recesivo a.
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Estudiante No. 1 Estudiante No. 2 Estudiante No. 3 Estudiante No. 4
Enrollamiento de lengua
de las orejas
Pulgar en escuadra
Pico de viuda
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BIBLIOGRAFÍA
Pérez Avila, J., Valenciaga Rodríguez, J. L., Acosta, A., Nicolau Mena, O.,
Turcios Tristá, S. E. & Navaroli Fernández, F. (2012). Mecanismos
de acción hormonal a través de receptores ubicados en la
membrana celular. Retrieved 11/27, 2013, from
http://www.cpicmha.sld.cu/hab/pdf/vol11_1_05/hab08105.pdf
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