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UNIVERSIDAD INTERAMERICANA PARA

EL DESARROLLO
Facultad de Farmacia y Bioquímica

GUIA DE PRACTICA

TOXICOLOGIA Y QUIMICA LEGAL

Mg. Q.F. JAVIER CHURANGO VALDEZ


Q.F. JOSE AVILA PARCO
INDICE

PRÁCTICA Nº 1 y 2
ANALISIS TOXICOLOGICO. MANEJO DE LA MUESTRA PROBLEMA.
TOMA, ENVIO Y RECEPCION DE LA MUESTRA.
PRÁCTICA Nº 3
ANALISIS PRELIMINAR, ANALISIS ORGANOLEPTICO Y PAPELES
SENSIBLES
PRÁCTICA Nº 4
MARCHA ANALITICA DE AISLAMIENTO DE TOXICOS GASEOSOS
Y VOLATILES

PRÁCTICA Nº 5
MARCHA ANALITICA DE AISLAMIENTO DE TOXICOS METALICOS.

PRACTICA Nº 6
DETERMINACIÓN DE ALCOHOLES. ALCOHOLEMIA.

PRÁCTICA Nº 7
DETERMINACION DE INSECTICIDAS ORGANO FOSFORADOS,
CARBAMICOS Y CLORADOS

PRÁCTICA Nº 8
DETERMINACION DE AINEs

PRÁCTICA Nº 9
DETERMINACION DE DEPRESORES DEL SNC: BARBITURICOS,
BENZODIAZEPINAS Y FENOTIAZINICOS

PRACTICA Nº 10
DETERMINACION DE MARIHUANA - COCAINA
OBJETIVO

El presente manual está dirigido a los alumnos de la Facultad de Farmacia y


Bioquímica para comprender los procesos toxicológicos que se darán en el ámbito
laboral.

Es una herramienta básica para el estudiante toda vez que orienta la ejecución de las
prácticas y a la vez ayuda a mejorar el entendimiento de los procesos analíticos
cualitativos y cuantitativos elegidos en las determinaciones químico toxicológicos.

Se espera que la presente guía sea una valiosa herramienta de enseñanza y aprendizaje
que ayude a los estudiantes a desarrollar las habilidades de análisis y síntesis de los
temas de estudio, los mismos que contribuirán al desarrollo del pensamiento crítico y el
pensamiento superior, e irán consolidando los rasgos del perfil que demanda la carrera
profesional de Farmacia y Bioquímica.

EL AUTOR.
SISTEMATICA ANALITICA TOXICOLOGICA (SAT)

Una Sistemática Analítica Toxicológica (SAT) puede definirse como el conjunto de


procedimientos analíticos, concisos, bien planeados, encaminados a poner de manifiesto
la presencia o ausencia de sustancias de relevancia toxicológica, en una muestra
determinada.
Comprende varias etapas:
1. Pre tratamiento de las muestras: homogeneización, desproteinización, hidrólisis de
conjugados, etc.
2. Extracción - purificación: extracción líquido-líquido (LLE), en fase sólida (SPE),
en el espacio en cabeza (HSE), micro extracción en fase sólida (SPME), etc.
3. Análisis instrumental.
Es deseable que la sistemática sea compatible con un elevado número de sustancias
potencialmente tóxicas, aunque lo usual en un laboratorio de nivel superior es que para
abordar el análisis de sustancias de muy diversa naturaleza como medicamentos, drogas
de abuso, metales, plaguicidas, alcoholes, etc, se realicen más de una SAT, pues existen
muchas sustancias no detectables mediante un único procedimiento. Los tóxicos más
numerosos son compuestos orgánicos que pueden poseer carácter ácido, básico o ambos
a la vez o ser sustancias neutras. Los tóxicos más volátiles (Alcohol etílico, metílico,
etilenglicol, hidrocarburos derivados del petróleo y monóxido de carbono), requieren
unos procedimientos analíticos especiales y distintos también de la SAT para los tóxicos
inorgánicos (metales y aniones). Los diversos procedimientos analíticos se aplicaran
según requerimiento del caso.
Por ello la presente Guía de Practicas proporcionara a los alumnos los conocimientos
básicos teórico. Practico para la identificación y cuantificación de los principales
tóxicos que están ocasionando intoxicaciones agudas y que ponen en peligro la salud de
las personas.
PRÁCTICA No. 1 y 2
ANALISIS TOXICOLOGICO. MANEJO DE LA MUESTRA PROBLEMA.
TOMA, ENVIO Y RECEPCION DE LA MUESTRA

1. Introducción
El Peritaje Toxicológico de vísceras y tejidos es de gran interés criminalístico, requiere de
un adecuado procedimiento en la toma de la muestra, en su fijación o preservación,
embalaje y envío con la solicitud específica de lo que se desea determinar en el examen a
informar, porque sus resultados servirán para una buena administración de justicia.
2. Competencias
 El estudiante comprenderá las implicancias del Análisis Químico Toxicológico
así como los diferentes tipos de muestras problemas y su procesamiento.
 Emplear el método descriptivo de asesoría permanente.
 Identificar el tipo de intoxicación. Toma de las muestras para el análisis
toxicológico
 Envíar y recepcionar las muestras. Preparar los protocolos de envío y recepción
de las muestras. Actitud del perito.
 Procesamiento de los diferentes tipos de muestra para el análisis toxicológico
adquiriendo los conocimientos para diferenciar los tipos de agentes tóxicos que
pueden causar intoxicaciones. Cumplir y hacer cumplir las medidas de
bioseguridad.
3. Materiales y equipos
 Campana extractora.
 Frascos de vidrio de boca ancha.
 Equipo de disección.
 Cinta adhesiva.
 Muestras de alimentos, líquidos biológicos y otros.
 Equipos de conservación en frió portátiles.

4 Procedimiento
El Peritaje Toxicológico de vísceras y tejidos de interés criminalistico, requiere de un
adecuado procedimiento en la toma de la muestra, en su fijación o preservación, embalaje
y envío con la solicitud específica de lo que se desea determinar en el examen a informar,
para ello se hace necesario considerar lo siguiente:
a. Toda muestra de pieza anatómica, vísceras, fragmentos de tejido, órganos,
coágulos sanguíneos, etc. debe tener un tamaño significativo y remitirse al
Laboratorio.
b. En el caso de Exámenes Anatomopatológicos, todas las muestras como restos
placentarios, embrión, feto, órganos completos, etc. Deben remitirse fijados en
formol al 1% que
resulta de mezclar una parte de formol puro vendido al 40% con nueve (09) partes
de agua corriente. El volumen del líquido fijador debe ser mayor que el de la
muestra cubriéndola con exceso.
Si el órgano o víscera es de gran volumen puede cortársele con cuchillo para
facilitar el proceso de fijación.
c. Cuando se solicita Examen Toxicológico debe remitirse por separado muestra de
vísceras, estómago y contenido gástrico sin agregarle ninguna sustancia como
preservador o fijador, ya que estas sustancias tienen poder de interferencia en los
análisis toxicológicos.
d. El recipiente para cualquier muestra debe ser de vidrio o de plástico inerte de
boca ancha y con tapa esmerilada o de rosca cerrado y sellado con cinta adhesiva
o esparadrapo, lacrado y/o sellado. No utilizar recipientes metálicos.
Las muestras de sangre donde se determinara el Dosaje Etílico y Sustancias
Estupefacientes y/o drogas afines; se enviarán en frasco vial llenos con tapa a
presión y rotulado con cinta adhesiva.

e.- En el oficio de remisión debe consignarse, nombre, edad, sexo de la persona o del
cadáver; naturaleza y tamaño aproximado de la muestra y región del cuerpo
humano, de donde procede la muestra. Señalar necesariamente en forma sumaria datos
referenciales o antecedentes del hecho.
Si se ha practicado necrópsia es indispensable el Protocolo de Necrópsia o en su defecto
los diagnósticos macroscópicos y conclusiones finales. Si el paciente hubiera estado en
algún Centro de Salud enviar la hoja clínica.

f.- Para el embalaje, el recipiente debe colocarse en una caja de madera o cartón grueso
rodeado de viruta, telas o papeles para evitar el movimiento y la consiguiente ruptura o
derrame de la muestra.

g.- Las muestras deberán ser transportados por Agencia o por un Efectivo Policial o el
perito toxicólogo debidamente acreditado, por ningún motivo enviar con personal civil
ya que se pondrá en duda la identidad de las muestras.

1. Condiciones para la toma de muestra


- Líquido biológico (Análisis de Emergencia).
- Alimentos.
- Vísceras.

2. Condiciones para el envío de la muestra


- Envase.
- Sellado.
- Etiquetado.
- Conservadores.

3. Condiciones de recepción de la muestra


- Envase.
- Sello.
- Protocolo.

4. Técnicas de cuarteo de la muestra


- Médico-legal
* 50 % devolver.
* 50 % análisis.
- 25 % Análisis cuantitativo.
- 5 % Ensayos preliminares.
- 5 % Tóxicos Volátiles y gaseosos.
- 5 % Tóxicos. Orgánicos Fijos.
- 5 % Tóxicos Metálicos y no Metálicos.
- 5 % Dirimencia.
- Análisis general
* 50 % Análisis cuali-cuantitativo.
* 50 % Contramuestra.

MUESTRAS REQUERIDAS EN EL EXAMEN TOXICOLÓGICO

a.- VICTIMA CON VIDA:


Vómitos.
Sangre (de 15 a 50 mL).
Lavado estomacal (Todo lo posible).
Orina (de 200 a 300 mL, muestra en 24 horas).
Grasa corporal (biopsia).
Pelos (Todo lo posible).
A PARTIR DE OTRAS SUSTANCIAS:
Alimentos (Todo lo posible).
Raíces (Todo lo posible).
Tierras (Todo lo posible).
Gaseosas (Todo).
Vinos (Todo).
Jarabes (Todo).

b.- VICTIMA SIN VIDA:

Muestra Cantidad Mínima Venenos Que Se Estudian En La Muestra

Orina
Toda Valiosa en casi todos los tipos de tóxicos
Estomag
oy Casos en que el toxico es conocido o ha sido ingerido
Todo
Contenid por vía oral pocas horas antes de la Muerte.
o
Contenid
Casos en que el toxico ha sido tomado uno o dos días
o Alrededor de 150 G
antes de la muerte
Intestinal
Sangre Para venenos gaseosos.
Determinación de meta
Alrededor de 30 mL
hemoglobina, Carboxihemoglobina
Sulfonamidas, bromuros, sumersión.
Barbitúricos, alcaloides, venenos volátiles y gaseosos,
Cerebro Alrededor de 500 G alcoholismo agudo
Hígado Metales, barbitúricos, fluoruros, oxalatos, fulfonal
Alrededor de 500 G
y otros.
Riñones Uno entero Metales especialmente mercurio, sulfonamida.
Plomo, Arsénico, Radio: especialmente por
Huesos Alrededor de 200 G
intoxicación crónica.
Pulmón Uno entero Tóxicos por inhalación.
Cabellos
Intoxicación crónica por arsénico y drogas como la que
Tanto como sea
producen dependencia
Posible
Casos de intoxicaciones agudos y órganos
Músculo Alrededor de 200 G
Internos en putrefacción.
Liquido
céfalo Todo lo posible Alcoholismo agudo.
raquídeo
1.5 Resultados
Los alumnos deben traer en la siguiente práctica una muestra correctamente embalada de
acuerdo a las caracteristicas de la muestra, del análisis solicitado y de las normas legales para
un análisis toxicológico.
1.6 Cuestionario
1. Normas legales que rigen el análisis toxicológico.
2. Procedimiento en caso de la exhumación de un cadáver.
3. Responsabilidad legal del profesional Químico-Farmacéutico en el análisis toxicológico.

1.7 Fuentes de información


1- Loomis, T. “Fundamentos de Toxicologia”. Acribia. Espana. 1982
2- Gisbert, J. “Medicina Legal y Toxicología”. 5ta. Edición. Masson.
España. 2001
3- Fabre R, Truhaut R Tatado de Toxicología. Paraninfo 1977 Madrid España.
PRÁCTICA Nº 3

ANALISIS PRELIMINAR, ANALISIS ORGANOLEPTICO Y PAPELES SENSIBLES

1. INTRODUCCION
El Análisis Organoléptico sirve como ayuda en la orientación del análisis toxicológico de la
misma manera que la técnica de los Papeles Sensibles.

2. COMPETENCIAS

 El estudiante comprenderá y evaluará el ingreso de los tóxicos para conocer las diferentes
características organolépticas de una muestra problema y su significancia.
 Dará a conocer las técnicas de los Papeles Sensibles y su interpretación, para ello:
 Realizar los análisis preliminares y organolépticos.
 Preparar, ejecutar e interpretar los resultados de los papeles sensibles.
 Aplicar las normas de bioseguridad al evaluar la separación de las muestras para el
análisis toxicológico y la aplicación de las técnicas preliminares.

3. MATERIALES Y EQUIPOS

a. Muestra problema de la práctica.


b. Tiras para determinar el pH.
c. Tiras reactivas
c.1. Tira Picrosodada (Acido. Pícrico 1%, luego Na2CO3 10%).
c.2. Tira de Acetato de Plomo (Acetato de Plomo 10%).
c.3. Tira de Hematoxilina. (Hematoxilina 2%).
c.4. Tira de Nitrato de Plata. (AgNO3 10%).

4. PROCEDIMIENTO

Se procede a realizar el reconocimiento de todas aquellas características reconocibles por los


sentidos:
a. Olor.
b. Color.
c. Sabor (cuando se pueda, por no ser recomendado en toxicología).
d. Aspecto.
e. Consistencia.
f. pH.

1.4.2. Todos estos datos se anotarán en un protocolo de análisis.


1.4.3. Se colocará la muestra, finamente picada, en un frasco de boca ancha y poner las
tiras reactivas humedecidas en el borde del frasco sin tocar la muestra ni entre
ellas, añadir ácido tartárico sin que contamine las tiras reactivas y tapar
inmediatamente en forma hermética.
Esperar 15’.
Interpretar los resultados.

5. RESULTADOS
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica que tóxicos
tenía la muestra, el informe es individual.

6. CUESTIONARIO

A. Aparte de los ejemplos organolépticos mencionados en clase, mencione otros


hallados en la bibliografía.
B. ¿Puede el análisis indicar otra patología además de una intoxicación?, ejemplos.
C. Mecanismo de reacción de las pruebas de las tiras reactivas.

FUENTES DE INFORMACIÓN.

1. Calabrese, A y Astolfi E; “Toxicología”. Kapeluz, Buenos Aires. Argentina. 1969.


2. Dreisbach, R; “Toxicología Clínica”. Manual Moderno. México D.E.1989.
3. Loomis, T; “Fundamentos de Toxicología”. Acribia, Zaragoza. España. 1982.
4. Pineda, E; “Toxicología Alimentaria, Plaguicidas”. Iram, Buenos Aires, Argentina.
1980.
5. Simonin C; “Medicina Legal Judicial”. Juhs, Barcelona, España.. 1982.

6. Gisbert Calabuig, J; “Medicina Legal y Toxicología”; 5ta Edición. Masson.


Barcelona. 1998.
7. Albert, L; “ Introducción a la Toxicología Ambiental”; Centro Panamericano de Ecología
Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México. Secretaría de Ecología Metepec,
México D.E. 1997.
PRÁCTICA Nº. 4

MARCHA ANALITICA DE AISLAMIENTO DE TOXICOS GASEOSOS


Y VOLATILES
1. Marco teórico

Los Tóxicos gaseosos y volátiles son un grupo importante dentro de las sustancias que
causan daño debido a sus particulares propiedades de allí que sea vital su extracción sin
pérdidas.
Se denominan tóxicos gaseosos a todas aquellas sustancias que a temperatura ambiente se
encuentran en estado gaseoso. Ello determina el medio en que preferentemente se
encuentran (aire), así como su vía de ingreso más importante (pulmones). Se consideran
como tales al CO, HCN, SH2, AsH3, SbH3 , NH3, Cl2, Br2.
Se denominan tóxicos volátiles a todas aquellas sustancias que independientemente de su
estado físico pueden separarse del material que las contiene a través de los siguientes
métodos: destilación simple destilación por arrastre con vapor, microdifusión, espacio
cabeza Comprenden, entre otros, compuestos tales como alcoholes primarios, aldehídos,
cetonas, fenoles y solventes orgánicos como éter, cloroformo, tetracloruro de carbono, etc.

2. Competencias
 Extraer los tóxicos volátiles de una muestra con un mínimo de pérdida
 Emplear el método conductivista de participación permanente
 Separar los tóxicos volátiles y gaseosos a través de la destilación simple y por
arrastre de vapor, en medio ácido y en medio alcalino.
 Adquirir las destrezas para el manejo de sustancias altamente corrosivas y
gaseosas, empleando equipos y materiales de seguridad.
3. Materiales y equipos
 Tubos de prueba de 13 x 100 mm.
 Equipo de microdestilación.
 Baño Maria.
 Tira indicadora de pH.
 NaOH 10 %.
 HCl 10 %.
 H2O destilada.
 Acido Tartárico 10 %.
 Pipetas de 1mL y 5 mL.

4. Procedimiento
 Se procederá a hacer una destilación en pH ácido (por adición de Acido Tártárico c.s. y
se recibirá en un volumen. adecuado de NaOH 5 %.
 Luego, la misma muestra ácida se llevará hasta pH alcalino con c.s. de Hidróxido
de amonio 10% y se recibirá en un volumen adecuado de HCl 5 %.
 Ambos destilados (ácido y alcalino) se guardarán para futuras prácticas.

5. Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica que tóxicos
tenia la muestra, el informe es individual.
6. Cuestionario
 Tóxicos que se pueden hallar en al destilado ácido.
 Tóxicos que se pueden hallar en el destilado alcalino.
 Precauciones al realizar la micro destilación.

7. Fuentes de información
1. Simonin C; “Medicina Legal Judicial”. Juhs, Barcelona, España. 1982.
2. Gisbert Calabuig, J; “Medicina Legal y Toxicología”; 5ta Edición. Masson. Barcelona.
1998.
3. Albert, L; “Introducción a la Toxicología Ambiental”; Centro Panamericano de
Ecología Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México. Secretaría de
Ecología Metepec, México D.E. 1997.
4. Martínez, A; Romieu, Isabelle; “Introducción al Monitoreo Atmosférico”; Centro
Panamericano de Ecología Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México.
Secretaría de Ecología, Metepec, México D.E.1997.
PRÁCTICA Nº 5

MARCHA ANALITICA DE AISLAMIENTO DE TOXICOS METALICOS

1. Marco teórico

Los tóxicos metálicos causan una serie de enfermedades a nivel laboral y ambiental de allí
su importancia toxicológica y el valor de su determinación en una muestra problema.
2. Competencias
 Aprender los diferentes métodos en el aislamiento de los tóxicos metálicos en
muestras problemas.
 Realizar la destrucción de la materia orgánica para aislar los tóxicos metálicos y no
metálicos para llevarlos a su forma ionizada por el método de la vía húmeda.
 Adquirir las destrezas para el manejo de sustancias altamente corrosivas y
gaseosas, empleando equipos y materiales de seguridad.
 Emplear el método constructivista con participación permanente.
3. Materiales y equipos
 Erlenmeyers de 200 mL.
 Muestras problemas variadas.
 Campana extractora.
 Cocinilla eléctrica.
 Pipetas de 1mL y 5 mL.
 HNO3 q.p.
 H2SO4 q.p.
 HClO4 q.p.

4. Procedimiento
Se explicará los diferentes tipos de tratamiento de las muestras problemas para aislar los
tóxicos metálicos en base a las características de estos.
 Destrucción de la Materia Orgánica (DMO) (Técnica. Kahane)
 Trabajar en campana extractora.

* Muestra problema 05-10 G.

* HNO3 Q.P. 10 mL.

* HClO4 Q.P. 0,5 mL.

* H2SO4 Q.P. 1 mL.

* Calor hasta disolucion total.

5. Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de destrucción de la materia orgánica. El informe es
individual.
6. Cuestionario
 Precauciones para la extracción de los tóxicos metálicos.
 Función de cada reactivo en la técnica empleada.
7. Fuentes de información.
1. Calabrese, A y Astolfi E; “Toxicología”. Kapeluz, Buenos Aires. Argentina. 1969.
2. Dreisbach, R; “Toxicología Clínica”. Manual Moderno. México D.E.1989.
3. Loomis, T; “Fundamentos de Toxicología”. Acribia, Zaragoza. España. 1982.
4. Pineda, E; “Toxicología Alimentaria, Plaguicidas”. Iram, Buenos Aires, Argentina.
1980.
5. Simonin C; “Medicina Legal Judicial”. Juhs, Barcelona, España. 1982.
6. Gisbert Calabuig, J; “Medicina Legal y Toxicología”; 5ta Edición. Masson. Barcelona.
1998.
7. Albert, L; “ Introducción a la Toxicología Ambiental”; Centro Panamericano de
Ecología Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México. Secretaría de
Ecología Metepec, México D.E. 1997.
8. Martínez, A; Romieu, Isabelle; “Introducción al Monitoreo Atmosférico”; Centro
Panamericano de Ecología Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México.
Secretaría de Ecología, Metepec, México D.E.1997.
PRACTICA Nº 6

DETERMINACIÓN DE ALCOHOLES. ALCOHOLEMIA.

1. Marco teórico
El Etanol es una de las causas más frecuentes de intoxicación intencional, de accidentes de
transito y de abuso, asi mismo es común la adultareción de bebidas alcohólicas con
Metanol que es un alcohol mucho más tóxico.

2. Competencias
 Determinar la alcoholemia e interpretar los resultados, evaluar los grados de
ebriedad.
 Adquirir destrezas para reconocer los grados de intoxicación y tratamiento de
urgencia a realizar.
 Emplear el método constructivista de asesoria permanente.

3. Materiales y equipos

 Tubos de 13 x 100 mm.


 Muestras problemas diversas de bebidas alcohólicas.
 Equipo de microdestilación.
 Cocinilla eléctrica, mechero.
 Baño Maria.
 Mezcla sulfocrómica (K2CrO7 al 2.5 % en H2SO4 al 50%).
 Acido sulfurico.
 Dicromato de potásio (solido).
 Sorbete.
 Alcohol primário, secundário , terciário.
 Gradillas, pipetas,
 Beacker 200 mL,

4. Procedimiento
 Se procederá a preparar la mezcla sulfonitrica.
 Realizar el procedimiento de alcoholemia en aliento.
 Otras reacciones de alcoholes.
* Mezcla Sulfocrómica 5 mL.
* Observar la coloración que aparece (se puede cuantificar leyendo a 450 nm).
- Diferenciación mediante Rx con el Ac. Cromotrópico.

* Observar coloración.

Realizar las reacciones químicas correspondientes.


5. Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la práctica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e indicar el grado de alcoholemia y
su implicancia legal.
6. Cuestionario
 Mecanismos de reacción de las pruebas de la práctica.
 Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas.

7. Fuentes de información.
1 Calabrese, A y Astolfi E; “Toxicología”. Kapeluz, Buenos Aires. Argentina. 1969.
2 Dreisbach, R; “Toxicología Clínica”. Manual Moderno. México D.E.1989.
3 Loomis, T; “Fundamentos de Toxicología”. Acribia, Zaragoza. España. 1982.
4 Pineda, E; “Toxicología Alimentaria, Plaguicidas”. Iram, Buenos Aires, Argentina. 1980.
5 Simonin C; “Medicina Legal Judicial”. Juhs, Barcelona, España. 1982.
6 Gisbert Calabuig, J; “Medicina Legal y Toxicología”; 5ta Edición. Masson. Barcelona.
1998.
7 Albert, L; “ Introducción a la Toxicología Ambiental”; Centro Panamericano de Ecología
Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México. Secretaría de Ecología
Metepec, México D.E. 1997.
8 Martínez, A; Romieu, Isabelle; “Introducción al Monitoreo Atmosférico”; Centro
Panamericano de Ecología Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México.
Secretaría de Ecología, Metepec, México D.E.1997.
PRÁCTICA Nº 7

DETERMINACION DE INSECTICIDAS ORGANO FOSFORADOS,


CARBAMICOS Y CLORADOS
1. Marco teórico
Los Insecticidas y raticidas muchas veces son causantes de intoxicaciones en el hogar ya sea por
descuido o intencionalmente y son las sustancias quimicas que causan el mayor porcentajes de
muertes.

2. Competencias

 Determinar la presencia de Insecticidas en diferentes muestras problemas.


 Extraer, purificar e identificar por cromatografía en capa fina los plaguicidas organo
fosforados, organo carbámicos y organo clorados. -Evaluar los diferentes métodos de
extracción, purificación e identificación de los plaguicidas.
 Adquirir destreza para extraer e identificar rápidamente los plaguicidas para darle el
tratamiento respectivo por ser los tóxicos que causan la mayor incidencia de muertes.
 Emplear el método constructivista de asesoria permanente.

3. Materiales y equipos
 Placas cromatográficas de 20 x 20 cm de Silicagel G.
 Cámara de revelado cromatográfico.
 Sistema de solventes Benceno:acetona 5:1 o Hexano:Acetona 4:1.
 Cloruro de Paladio 1% (I.O.F.).
 Azul de Bromofenol (I.O.F.).
 * Azul de Bromofenol 0,05 G.
 * Acetona 10 mL.
 * AgNO3 1% (en H2O:acetona,3:1) csp 100 mL.
 Difenilamina 0.2% (en etanol) (I.O.Cl.).
 p-Dimetilaminobenzaldehido 1% (EtOH) (I.O.C.).
 . Acido Acético 5%.

4. Procedimiento
Se trabajará con el residuo neutro de la práctica de aislamiento de los T.O.F., pero tambien
se puede trabajar con muestras problemas sin tratar mediante las técnicas de extración rápida
(M.P. más n-Hexano csp cubrir, agitar por 30’ y separar).
La determinación de los Insecticidas se realiza por c.c.f. y revelado diferencial con diferenes
reveladores.

 En una cromatoplaca de 20 x 20 cm estriada sembrar las muestras a una distancia


superior a la del nivel del sistema de solventes.

 Colocar la placa en la cámara de revelado y dejar correr aproximadamente el 70%.

 Sacar la placa y dejar secar, aplicar a cada zona los diferentes reveladores y observar la
coloración.
 Cloruro de Paladio : Manchas amarillas o rojas.
 Azul de Bromofenol : (previo rociado con Acido Acético 5%) Manchas azules o
marrones sobre fondo amarillo.
 Difenilamina : Manchas verdes, castañas o violetas.
 p-Dimetilaminobenzaldehido : Manchas amarillas.
 Comparar los colores contra standares.

5. Resultados
Interpretar los resultados de la práctica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
desventajas de los diferentes métodos de identificación e indicar el plaguicida encontrado
y su implicancia legal. El informe es individual.
6. Cuestionario
 Valores tóxicos de los insecticidas estudiados
 Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas

7. Fuentes de información.
1 Calabrese, A y Astolfi E; “Toxicología”. Kapeluz, Buenos Aires. Argentina. 1969.
2 Dreisbach, R; “Toxicología Clínica”. Manual Moderno. México D.E.1989.
3 Loomis, T; “Fundamentos de Toxicología”. Acribia, Zaragoza. España. 1982.
4 Pineda, E; “Toxicología Alimentaria, Plaguicidas”. Iram, Buenos Aires, Argentina. 1980.
5 Simonin C; “Medicina Legal Judicial”. Juhs, Barcelona, España. 1982.
6 Gisbert Calabuig, J; “Medicina Legal y Toxicología”; 5ta Edición. Masson. Barcelona.
1998.
7 Albert, L; “ Introducción a la Toxicología Ambiental”; Centro Panamericano de Ecología
Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México. Secretaría de Ecología
Metepec, México D.E. 1997.
8 Martínez, A; Romieu, Isabelle; “Introducción al Monitoreo Atmosférico”; Centro
Panamericano de Ecología Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México.
Secretaría de Ecología, Metepec, México D.E.1997.
PRÁCTICA Nº 8

DETERMINACION DE AINEs
1. Marco teórico
Los AINEs son fármacos que muchas veces, por no decir siempre, se comercializan sin
receta médica, por lo cual pueden originar intoxicaciones por automedicación y sobredosis.
2. Competencias
 Determinar los diferentes tipos de AINEs en la muestra procesada en la práctica de
Aislamiento de T.O.F.
 Extraer e identificar los derivados de las pirazolonas y el paracetamol por
cromatografía en capa fina. Extraer, purificar, identificar y cuantificar los salicilatos
e interpretar toxicológicamente su concentración en líquidos biológicos.
 Valorar su importancia como agente tóxico causal de intoxicaciones, y propone
medidas de prevención y tratamiento.
 Emplear el método descriptivo de asesoria permanente.
3. Materiales y equipos
 Tubos de 13 x 100 mm.
 Pipetas de 1 y 5 mL.
 Diferentes estandares de AINEs (Salicilatos, Paracetamol, Pirazolonas).
 Extractos de la práctica de aislamiento de T.O.F.
 FeCl3 5%.
 Rvo de Trinder:
* HgCl2 40 G.
* HCl 1N 120 mL.
* Fe(NO3)3 40 G.
* H2O csp 1000 mL.
 AgNO3 10%.
 HCl 5N.
 NaNO2 q.p.
 HCl q.p.
 o-Cresol 1%.
 NH4OH 4M.
 Etanol q.p.
 Silica gel para la ccf.

4. Procedimiento
Se trabajará en el residuo ácido de la práctica de extracción de T.O.F., el residuo se
reconstituye con Etanol y se realizarán las Sgtes. determinaciones

Determinación de Salicilatos
 * M.P. 5 mL.
 * FeCl3 5% 2 mL.
 * Observar la coloración.

 Cuantificación de Salicilatos.
 * M.P. 1 mL.
 * Rvo Trinder 5 mL.
 * Agitar por 5’ y leer a 540 nm contra Standard de 5 mg %.

Determinación de Pirazolonas:
 * M.P. 1 mL.
 * AgNO3 10% 0.5 mL.
 HCl 5N 1 mL.
 * NaNO2 q.p. 1 mg.
 Observar el color.

Determinación de Paracetamol:

 * M.P. 1 mL.
 * o-Cresol 1% 1 mL.
 * NH4OH 4M 2 mL.
 * Observar la coloración.
 Comparar los resultados contra los standares.

5. Resultados
Interpretar los resultados de la practica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
desventajas de los diferentes metodos de identificación e interpretar las reacciones y la
concentración de salicilato encontrado. El informe es individual.
6. Cuestionario
 Mecanismos de reacción de las pruebas efectuadas.
 Concentraciones tóxicas de las sustancias determinadas.
 Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas
7. Fuentes de información
1 Calabrese, A y Astolfi E; “Toxicología”. Kapeluz, Buenos Aires. Argentina. 1969.
2 Dreisbach, R; “Toxicología Clínica”. Manual Moderno. México D.E.1989.
3 Loomis, T; “Fundamentos de Toxicología”. Acribia, Zaragoza. España. 1982.
4 Pineda, E; “Toxicología Alimentaria, Plaguicidas”. Iram, Buenos Aires, Argentina. 1980.
5 Simonin C; “Medicina Legal Judicial”. Juhs, Barcelona, España. 1982.
6 Gisbert Calabuig, J; “Medicina Legal y Toxicología”; 5ta Edición. Masson. Barcelona.
1998.
7 Albert, L; “ Introducción a la Toxicología Ambiental”; Centro Panamericano de Ecología
Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México. Secretaría de Ecología
Metepec, México D.E. 1997.
8 Martínez, A; Romieu, Isabelle; “Introducción al Monitoreo Atmosférico”; Centro
Panamericano de Ecología Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México.
Secretaría de Ecología, Metepec, México D.E.1997.
PRÁCTICA Nº 9

DETERMINACION DE DEPRESORES DEL SNC: BARBITURICOS,


BENZODIAZEPINAS Y FENOTIAZINICOS
1. Marco teórico
Los Depresores del SNC pueden causar depresión de tipo selectivo o no selectivo y
además sinergisarse con otros depresores lo que aumenta su toxicidad.
2. Competencias
 Reconocer los diferentes depresores centrales más frecuentes en casos de
intoxicación.
 Evaluar las intoxicaciones producidas por los derivados barbitúricos. Su
dependencia y su implicancia social.
 Evaluar las intoxicaciones producidas por los derivados benzodiazepínicos. Su
dependencia y su implicancia social.
 Toxicidad de los derivados fenotiazínicos. Tratamiento en casos de intoxicaciones.
 Emplear el método constructivo de asesoria permanente.

3. Materiales y equipos

 Tubos de 13 x 100 mm.


 Pipetas de 1 y 5 mL.
 Diferentes standares (Barbitúricos, benzodiacepinas, fenotiazinas).
 Baño maria de glicerina.
 HCl q.p.
 NaNO2 0.1%.
 Sulfamato de Amonio 0.5%.
 N-Naftiletilendiamino.HCl 0.1%.
 Co(NO3)2 5% (en Etanol).
 Isopropilamina 5% (en Etanol).
 CuSO4 0.5%.
 Piridina 5% (en cloroformo).

Rvo FPN:

* FeCl3 5% 5 mL.
* HClO4 20% 45 mL.
* HNO3 50% 50 mL.

4. Procedimiento
Se usarán los extractos obtenidos en el aislamiento de los T.O.F. y se procederá a realizar l
as diferentes reacciones de reconocimiento.

Rx de reconocimiento de Barbitúricos:

 Rx de Parry-Coppangy
 M.P. 5 mL.
 * Co(NO3)2 5% en EtOH III Gts.
 * Isopropilamin 5% en EtOH IV Gts.
 * Observar la coloración.

Rx de Zwiker:

 * M.P. 5 mL.
 * CuSO4 0.5% 0.5 mL.
 * Agitar fuertemente
 * Piridina 5% (CHCl3) 0.5 mL.
 Observar coloración de la fase orgánica.

Rx de reconocimiento de Benzodiacepinas.

Rx de Bretton-Marshall :
 * M.P. 1 mL.
 HCl 6N. 5 mL.
 * Baño maria de Glicerina a 125 *C/ 45’.
 NaNO2 0.1% 0.25 mL.
 Agitar y reposo por 3’.
 NH4 Sulfamato 0.5% 0.25 mL.
 Agitar y reoposo por 3’.
 N-Naftiletilendiamino.HCl 0.1% 0.25 mL.
 Observar la coloración (Se puede cuantificar leyendo a 550 nm).

Rx de reconocimiento de Fenotiazinas.

Rx de Forrest:
 * M.P. 5 mL.
 * Rvo FPN V gotas.
 * Observar la coloración.
 Comparar los resultados contra los standares.

5. Resultados
Interpretar los resultados de la practica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
desventajas de los diferentes metodos de identificación e interpretar las reacciones encontradas.
El informe es individual.
6. Cuestionario
 .Mecanismos de reacción de cada prueba.
 Posibles interferencias y manera de detectarlas.

7. Fuentes de información
1 Calabrese, A y Astolfi E; “Toxicología”. Kapeluz, Buenos Aires. Argentina. 1969.
2 Dreisbach, R; “Toxicología Clínica”. Manual Moderno. México D.E.1989.
3 Loomis, T; “Fundamentos de Toxicología”. Acribia, Zaragoza. España. 1982.
4 Pineda, E; “Toxicología Alimentaria, Plaguicidas”. Iram, Buenos Aires, Argentina. 1980.
5 Simonin C; “Medicina Legal Judicial”. Juhs, Barcelona, España. 1982.
6 Gisbert Calabuig, J; “Medicina Legal y Toxicología”; 5ta Edición. Masson. Barcelona.
1998.
7 Albert, L; “ Introducción a la Toxicología Ambiental”; Centro Panamericano de Ecología
Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México. Secretaría de Ecología
Metepec, México D.E. 1997.
PRACTICA 10

DETERMINACION DE MARIHUANA - COCAINA


1. Marco teórico
La Marihuana es una de las drogas de abuso más comun en nuestro medio, consumida por amplios
grupos de la sociedad, además es causa de un gran mercado negro
2. Competencias
 Determinar la presencia de Marihuana en diferentes muestras.
 Identificar la marihuana por el métodos macroscópicos y microscópicos.
Extraer, purificar e identificar por cromatografía en capa fina y
colorimétricamente los cannabinoides en líquidos biológicos y en la planta de
marihuana.
 Adquirir destrezas para identificar los principios activos de la marihuana en
líquidos biológicos y la planta teniendo en cuenta las normas de bioseguridad y
ética.
 Emplear el método constructivo de asesoria permanente.

3. Materiales y equipos
 Tubos de 13 x 100 mm.
 Pipetas de 1 y 5 mL.
 Microscopio.
 Cocinillas.
 Mecheros.
 Tubos de centrifuga.
 Gradillas.
 Pipetas de 1, 2, 5, 10 mL.
 Placas de vidrio de 10 ´por 10 cm.
 Rociador.
 Cuba de ccf
 Capilares.
 Muestras sospechosas de Marihuana.
 Acido clorhídrico al 20 %
 Cloroformo.
 Etanol.
 Silica gel para ccf.
 Reactivo de Draguendorf
 Reactivo de tiocianato de cobalto.
 Permanganato de potasio.
 Rvo de Duquenois:
* Vainillina 0.4 G.
* Acetaldehido IV Gts.
* Etanol (96°) 20 mL.
Benceno q.p.

Bencidina Diazotada:
A. Bencidina 0.5 G.
HCl q.p. 1.5 mL.
H2O csp 100 mL.

B. NaNO2 10%.
4. Procedimiento
Determinación de Marihuana.
 Rx de Duquenois.
 * M.P. mas Rvo de Duquenois csp cubrir, hacer un machacado y
luego decantar, trabajar con el líquido decantado.

* HCl q.p. 2 mL (en zona).


* Observar.
* CHCl3 2 mL.
* Agitar (La Marihuana debe pasar a la fase clorofórmica).
 c.c.f.
 Sembrar la muestra en la cromatoplaca y correr en Benceno.
 * Revelar con Bencidina Diazotada (mezclar A. y B. y rociar).
 * Observar la coloración y Rf.
Cannabidiol Amarillo naranja 0.12.
Delta9-THC Rojo naranja 0.71.
Cannabinol Rojo castaño 0.38.

5. Resultados
Interpretar los resultados de la practica e indicar en el informe de la practica las ventajas y
desventajas de los diferentes metodos de identificación e interpretar las reacciones
encontradas.
El informe es individual.
6. Cuestionario
1. Mecanismos de reacción de las pruebas efectuadas en la práctica.
2. Posibles interferencias y procedimientos para detectarlas.
3. Otras técnicas de determinación.
7. Fuentes de información
1 Calabrese, A y Astolfi E; “Toxicología”. Kapeluz, Buenos Aires. Argentina. 1969.
2 Dreisbach, R; “Toxicología Clínica”. Manual Moderno. México D.E.1989.
3 Loomis, T; “Fundamentos de Toxicología”. Acribia, Zaragoza. España. 1982.
4 Pineda, E; “Toxicología Alimentaria, Plaguicidas”. Iram, Buenos Aires, Argentina.
1980.
5 Simonin C; “Medicina Legal Judicial”. Juhs, Barcelona, España. 1982.
6 Gisbert Calabuig, J; “Medicina Legal y Toxicología”; 5ta Edición. Masson. Barcelona.
1998.
7 Albert, L; “ Introducción a la Toxicología Ambiental”; Centro Panamericano de
Ecología Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de México. Secretaría de
Ecología Metepec, México D.E. 1997.
8 Martínez, A; Romieu, Isabelle; “Introducción al Monitoreo Atmosférico”; Centro
Panamericano de Ecología Humana y Salud – OMS / Gobierno del Estado de
México. Secretaría de Ecología, Metepec, México D.E.1997.

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