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Cromatografía de (CEA)
Gases
Q.F.B. Luis Durán Moreno
Mayo 18, 2006
Conceptos Básicos de GC
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Cromatografía
Conceptos Básicos de GC
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Modelo del Proceso Cromatografíco
Flujo
A
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Técnicas de separación
HPLC HPLC
• Ningún requisito de • Separa los compuestos
volatilidad polares y no polares
• La muestra debe ser • PAH (hidrocarburo
soluble en la fase móvil aromático policíclico) -
iones inorgánicos
GC GC
• Las muestras son
• La muestra debe ser
polares y no polares
volátil
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Comparación de la HPLC y la GC
Ácidos Colorantes
carboxílicos alimentarios Azúcares
Glifosatos sintéticos Alcoholes
volátiles de azúcares
Cetonas de
Enzimas
aldehídos
PG, OG, DG
Sulfonamidas Glicoles fenoles Aflatoxinas
Hidrófobo
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Comparación de la HPLC y la GC
HPLC HPLC
• El análisis se puede
• En teoría, no existe un
realizar a temperatura
límite superior
ambiente o por debajo
• En la práctica, la
de la misma
solubilidad es el límite.
GC GC
• La muestra debe
• Normalmente
resistir la temperatura
< 500 uma
elevada del puerto de
inyección y de la
columna
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Comparación de la HPLC y la GC
Preparación de la muestra
Tamaño de la muestra
HPLC HPLC
• La muestra debe
• Tamaño de la muestra
filtrarse
basado en d.i. de la
• La muestra debe estar
columna
en el mismo disolvente
que la fase móvil
GC GC
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Comparación de la HPLC y la GC
HPLC HPLC
• Participan la fase • UV-Vis más habituales
estacionaria y la fase • Amplia gama de detectores
móvil no destructivos
• Detectores
tridimensionales
• Sensibilidad a pg
GC GC
• FID (detectores de
• La fase móvil es sólo ionización de llamas)
un portador de la más habituales,
muestra compuestos
universales a
orgánicos
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Típico Cromatógrafo de Gases
TRAMPAS RESTRICTORES
MOL-SIEVE FIJOS
REGULADORES ELECTROMETRO
PUERTO DE
CONTROLADOR INYECCION DETECTOR
DE FLUJO
HIDROGENO
ACARREADOR
COLUMNA INTEGRADOR
AIRE
HORNO
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PUERTO DE INYECCIÓN
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Puerto de Inyección
Propósito:
Permitir la inyección de una muestra en el cromatógrafo de
gases de una forma reproducible y repetible. La muestra
debe ser representativa y sin ningún cambio químico
especifico.
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Puerto de Inyección Empacado
Tuerca del Septum Retainer
Septa
Liner
Inserto de Vidrio
Gas Acarreador
Ferrul de grafito
Swage-tipo
Tuerca y Ferrules
Columna
HP 5890A Ref Manual pages 10-1 to 10-5
HP 5890 Series II Op Manual pages 4-4 to
4-5
HP 5890 Series II Ref Manual pages 6-1 to 6-7
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Puerto de Inyección Capilar
Flujo Total
Ferrul:
GRAFITO: suave- buen sellado COLUMN
COLUMNA HEAD
VESPEL: duro-Excelente sellado PRESSURE
GRAFITO/VESPEL: Muy buen sellado TOTAL FLOW SEPTUM
PURGE
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Diagrama de Flujos para Puerto de Inyección
Capilar
(SEPTUM)
VENTEO DE LA PURGA
FLUJO TOTAL
(INLET)
VALVULA DE PURGA
= MUESTRA LIQUIDA
= GAS ACARREADOR
FLUJO DE COLUMNA
COLUMNA
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Sistemas de Inyección
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Jeringas
Aguja punta estilo 2. Punta con 22/20 grados de corte. Para uso manual.
Aguja cónico/ Agilent. Punta en forma cónica exclusiva para automuestradores Agilent 7673.
Aguja punta estilo 2. Punta con 22/20 grados de corte. Para uso manual con aguja removible
Aguja punta estilo 3. Punta con 90 grados de corte. Para uso de HPLC
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Inyección de Automuestreador
AUTOMUESTREADORES
Inyección con jeringa: Muestras líquidas
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Inyeccion Manual
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Inyección Purga & Trampa
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Inyección Purga & Trampa
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Estado de purga
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Desorbción y drenado
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INYECCIÓN CON HEADSPACE
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Inyección con Headspace
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Inyección con Headspace
Jeringa Gas-Tight
Headspace
Muestra
15 min 10 min
Columna: HP-1 (Cross-Linked Methyl Silicone) Columna: HP-1 (Cross-Linked Methyl Silicone)
30 m x 0.53 mm x 2.65 μ m film 30 m x 0.53 mm x 2.65 μm film
(Part No. 19095Z-123) (Part No. 19095Z-123)
Acarreador: Helio, 5.2 psi Acarreador: Helio, 5.2 psi
horno: 40 C Horno: 60 C
Injeccion: 1cc, splitless Injeccion: 1 cc, split 5:1
Detector: FID Detector: FID
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Mecanismos de separación
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TIPO DE COLUMNAS
Adsorbentes
(10% de las aplicaciones)
Columna empacada
Acarreador
Gas Acarreador
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Cromatografía Gas-Sólido (GSC)
Empaques.
Carbón Vegetal
Gel de sílice
Tamices moleculares (zeolita sintéticas)
Soporte
Usos
Separación de gases ligeros
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Cromatografía Gas Líquido (GLC)
90% de la Aplicaciones
Empaque de
Partición
Columna Empacada
Gas Acarreador
Fase Líquida
Soporte Sólido
Muy porosa con alta
Superficie de área
Capilar
W all C oated O pen Tubular (WCOT)
Fase Liquida
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Cromatografía Gas Liquido (GLC)
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TIPO DE COLUMNAS
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Tipos de Columnas
Empacada Capilar
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Longitud de Columna.
Retención y Resolución
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Diámetro Interno y Eficiencia
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Análisis de Gasolina – Espesor de película vs.
Tiempo de Retención
Gasoline Premium
Column 15 m/0.3 mm SE-52 Espesor de película
(um)
0.05
2 3 4
5
6
0.15
1 2 3
5 0.80
20 programmed 2 /min 80
Analysis of gasoline on columns with varying stationary phase
film thickness. (K. Grob and G. Grob, HRC & CC, 2
(1979) 109, reprinted with permission)
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Columnas Capilares vs. Empacadas
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HORNO
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Horno
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Operación de la temperatura del horno
Isotérmico
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Operación de la temperatura del horno
Temperatura Programada
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Temperatura vs. Tiempo de Retención
o
A. 30 C.
1 2
o
B. 40 C.
1 2
o
C. 50 C.
1 2
o
D. 60 C.
12
Frompg. 58 - BASIC GAS CHROMATOGRAPHY by A.M. McNair & E.J. Bonelli, VARIAN
Conceptos Básicos de GC
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Características de los programas de temperaturas
•Utilizar cuando los componentes tienen una diferencia de los puntos de ebullición (>
100 grados).
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DETECTORES
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Condiciones de Operación de los Detectores
comúnmente utilizados con CG Capilar
Rango de flujo (ml/ min.)
Rango de Acarreador +
Tipo Muestras típicas H2 Aire
Sensibilidad Auxiliar
10-100 pg
FID Hidrocarburos 20-60 30-40 200-500
10 ppb-99%
5-100 ng
TCD General 15-30 n.a. n.a.
10 ppm-100%
Solventes y
0.05-1 pg
ECD plaguicidas, órgano- 30-60 n.a. n.a.
50 ppt-1 ppm
halogenados clorados
Compuestos órgano
0.1-10 pg
NPD fosforados y órgano 20-40 1-5 70-100
100 ppt-0.1%
nitrogenados
FPD 10-100 pg
Compuestos azufrados 20-40 50-70 60-80
(393 nm) 10 ppb-100 ppm
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Condiciones de Operación de los Detectores
comúnmente utilizados con CG Capilar (Cont.)
Rango de flujo (ml/ min.)
Acarreador +
Tipo Muestras típicas Rango de Sensibilidad H2 Aire
Auxiliar
Compuestos ionizados
PID 2pg C/sec 30-40 * n.a.
por UV
0.5 pg Cl/sec
ELCD Halógenos, N, S 2 pg S/sec 20-40 80 n.a.
4 pg N/sec
Vibraciones
FTIR 1000 pg de absorbancia 3-10 n.a. n.a.
moleculares
10 pg a 10 ng
Especies
MSD (dependiendo en SIM o 0.5-30** n.a. n.a.
fragmentables
scan)
0.1 - 20 pg/sec
AED Para metales (dependiendo de los 60-70 PRESENTE PRESENTE
elementos)
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DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD
TÉRMICA
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Detector de Conductividad Térmica
salida
El flujo de la COLUMNA entra en el
centro de los tres orificios
REFERENCIA
AUXILIAR
REFERENCIA
VALVULA
SOLENOIDE COLUMNA
REFERENCIA
FLUJO DE REFERENCIA = 1.5 x ( FLUJO DE COLUMNA + FLUJO AUXILIAR )
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Señal TCD
AUX GAS
OFF
20 mL/Min
Columna 30 mL/Min REF
Referencia
Filamento
Lectura de referencia
30 mL/Min
20 mL/Min Referencia 20 mL/Min
Columna 20 mL/Min Columna
Referencia
+
10 mL/Min Referencia
Filamento
30 mL/Min
Referencia 20 mL/Min
Columna
Señal = Muestra - Referencia
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Detector de Conductividad Térmica
Estabilidad Buena
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DETECTOR DE IONIZACIÓN DE FLAMA
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Detector de Ionización de Flama
Los compuestos son quemados en una flama, produciendo iones que son
colectados y convertidos en corriente.
CO2 H20
+ + El detector FID es un
CHO CHO
Detector destructivo
H20 + CO 2 De masa
CHO
+ +
CHO CHO
CO 2 Los cationes generados
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Respuesta del FID
o
en
lu
10
To
ol
an
co
l
ex
no
8
Respuesta
oi
H
ta
an
Relativa
Bu
co
ex
o l
6
ni
an
(por wt.)
H
io
Et
op
ol
o
an
Ac o
Pr
ic
4
ic
ét
et
rm
M
fo
2
o
id
Ac
H H H H H H H
H C OH H C C OH H C C C C OH
H H H H H H H
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Detector de Captura de Electrones
Análisis de trazas:
Purga del Ánodo Compuestos halogenados
Venteo Compuestos nitrogenados
Ánodo
Compuestos conjugados con
Superficie
De Ni 63 dobles ligaduras
Aplicaciones comunes:
Liner de silica
fundida Ambiental (plaguicidas Órgano
clorados)
Gas auxiliar
Adaptador
Columna
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Detector de Captura de Electrones
Moléculas de gas acarreador Electrones
e
-
e
-
ANODO
Moléculas de muestra con Electrones
e
electrón capturado.
-
• ANODO
e
- = GAS
e
ACARREADOR
IONIZADO
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Detector de Captura de Electrones
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APLICACIONES
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Columnas Empacadas y PLOT
Aplicaciones
Gases Permanentes
2
1. Hidrogeno 5%
2. Nitrógeno 48.5%
3Oxigeno 13%
.4. Argon 0.5%
5. Monoxido de carbono 33%
5
Columnas
Empacadas 3
4
1
9 min
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Columnas Empacadas y PLOT
Aplicaciones
PLOT
1. Argon
2. Oxygen
3. Nitrogen
o 8 min
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Ejemplo de Aplicaciones
Drogas
Drug Standard Mixture Underivitized Drugs
1. Caffeine
2. Methadone
280 C (2 to 4 min)
3. Cocaine
1 2
4. Codeine
50 C 50 C/min
5. Monoacetyl morphine
6. Diacetylmorphine
1. Phenobarbital
TOTAL ION CHROMATOGRAM
2.0E+6 2. Primidone
1 3
1.8E+6
2
1.6E+6
1.4E+6
1.2E+6 6
1.0E+6
4
8.0E+5
6.0E+5 5
4.0E+5
2.0E+5
0.0E+5
4.0 5.0 6.0 7.0 3 min
Time (min.)
Column: HP-1 (Cross-Linked Methyl Silicone)
Column: HP-1 (Cross-Linked Methyl Silicone) mm film
10m x 0.53mm x 2.65
12m x 0.2mm x 0.33um film (use 5m only)
(HP Part No. 19091-60312) (HP Part No. 19095Z-121)
Carrier: Helium Carrier: m(He) = 30 cm/sec
Oven: Temperature program listed above Oven: 200 C
Injection: Splitless, 2ml Injection: 100 ng phenobarbital, 200 ng primidone
Detector: MSD, HP 5970A Detector: FID
Pub. No. 23-5956-4127 Pub. No. 43-5953-1735
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Ejemplo de Aplicaciones (cont.)
Drogas
Amphetimines Injected as the Salts Alkaloid Street Drugs
2 280 C
1. Procaine
Column: HP-1 (Cross-Linked Methyl Silicone) Column: HP-1 (Cross-Linked Methyl Silicone)
mm film
10m x 0.53mm x 2.65 mm film
10m x 0.53mm x 2.65
(HP Part No. 19095Z-121) (HP Part No. 19095Z-121)
Carrier: m(He) = 30ml/min Carrier: u(He) = 20ml/min
Oven: 120 C Oven: Temperature program listed above
Injection: Packed column injection port with Series 530u Injection: 12 ng/component, packed column injection port
adapter installed madapter installed
with Series 530
Detector: MSD, HP 5970A Detector: NPD
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Agilent Technologies México
Centro Educacional Analítica
01-800-506-48-00
01-55-91-71-75-74
www.agilent.com/chem
CEA: 01-55-56-15-72-70
01-55-56-11-99-85
01-55-56-15-72-71
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