UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS 

Universidad del Perú, Decana de América 

 
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA 
 
 
    
 
Práctica n° 4: “Desplazamiento de bandas y 
determinación espectrofotometrica del pKa de un 
indicador” 
     
 
   
Docentes: ​Dr. Rubén Cueva Mestanza 
 
Grupo :​ ​Martes 9:00 am - 12: 30 pm 
 
 
Alumnos :  
 
❖ Espinoza portuguez Luis 
❖ Huamancaja Raymundo,Karla 
❖ Huamán Motta, Carmen 
❖ Loarte Ticse, Mishel Teresa 
❖ Cruz Palacios, Eduardo Moises 
❖ Jáuregui Rojas, Raúl  
 
 
 
 
 
 
 
 
 
Lima – Perú 
2020 
INTRODUCCIÓN

En el presente informe de laboratorio, referente a la práctica 4 sobre “La

determinación espectrofotometrica del pKa de un indicador” mediante el equilibrio de
ionización del indicador anaranjado de metilo.
El indicador es una sustancia que puede ser de carácter ácido o base débil, que
posee la propiedad de presentarse dependiendo del ph de la disolución en la que
dicha sustancia se encuentra diluida. Por lo general, los indicadores son ácidos o
bases orgánicos débiles que, por disociación o asociación experimentan cambios
estructurales internos que originan cambios de color. 1
HIn + H​2​O ↔ H​3​O​+​ + In​-
Color del Color de la
acido base

In + H​2​O ⇆ lnH​+​ + OH​-

Color de la Color del
base ácido
Un indicador ácido- base es una sustancia cuyas formas conjugadas ácido y base
tienen diferentes espectros de absorción.
Si se entrecruzan los espectros de absorción de las formas ácida y básica puras de
una sustancia, las absortividades de las dos formas han de ser iguales en el punto
en se cruzan. 2
Para determinar el Pk a partir de la Absorbancia
pK = pH - log[A​HLn​ - A] / [A - A​In​-​]
A​HIn​ absorbancia de una disolución con HIn
A​In​-:​ absorbancia de una disolución con In
A :absorbancia de una con HIn y In

Para finalizar esta práctica nos centramos en el cálculo de pK del indicador. El pKa
puede ser determinado por el método algebraico utilizando la ecuación. En el
método algebraico, el conjunto de valores de pH y absorbancias son sustituidos en
la ecuación y el pKa es calculado para cada valor de pH y su correspondiente
absorbancia. El pKa reportado será el promedio de todo los pKa calculados.
En el método gráfico, el gráfico de log[A – Aln-] / [AHln- A] en función del pH, el pKa
del indicador será el punto de intercepción de la recta obtenida en el eje x.
El método descrito se puede aplicar a los siguientes indicadores: azul de
bromofenol, verde de bromocresol, púrpura de bromocresol, azul de bromotimol,
anaranjado de metilo, rojo de metilo, rojo de fenol y fenolftaleína. 3

OBJETIVOS
● Obtener los espectros de absorción del anaranjado de metilo en disoluciones
ácida , básica y buffer.
● Determinar el pK del anaranjado de metilo mediante cuantificación de
muestra.

MATERIALES Y MÉTODO
● Reactivos:
○ Disolución de naranja de metilo al 0.002%
○ Ácido clorhídrico (concentrado)
○ Ácido fórmico 0.1M
○ Hidróxido de sodio
● Instrumentación:
○ Espectrofotómetro UV-visible
○ Celdas de cuarzo
○ Matraces de diferentes volúmenes
○ Fiolas de diferentes volúmenes
○ Pipetas de diferentes volúmenes

El método de análisis es el ​espectro de absorción​, en el cual se evaluará

tanto la forma ácida y básica del naranja de metilo, también se analizará el
comportamiento del indicador en un tampón, y por último en una disolución
donde estén presentes ambas formas de indicador.
PARTE EXPERIMENTAL
1. Preparación del Blanco para la forma ácida del indicador. Pipetear 10 mL de
agua y añadir 4 gotas de HCl cc y aforar a 25 mL.
2. Preparación de la solución ácida. Pipetear 10 mL de la solución ácida,
agregar 4 gotas de HCl cc y aforar a 25 mL.
3. Preparación del Blanco de la forma básica del indicador. Pipetear 10 mL de
agua, añadir 24 gotas de NaOH 2M y aforar a 25 mL.
4. Preparación del Blanco para la disolución de indicador en el tampón. Pipetear
10 mL de agua y enrasar a 25 mL con la solución amortiguadora.
5. Preparación de la disolución del indicador. Pipetear 10 mL de solución ácida
y enrasar con la solución amortiguadora.
6. Hacer las lecturas en el espectrofotómetro.

RESULTADOS
 DETERMINACIÓN DE LOS VALORES DEL PK A DOS DIFERENTES
LONGITUDES DE ONDA

1. Hallamos el pK a la longitud de 465 nm

2. Hallamos el pK a la longitud de 505 nm

DISCUSIÓN

El pKa es la fuerza que tienen los compuestos para disociarse. Para el anaranjado
de metilo el valor de pKa es 3.7 Al igual que otras constantes de equilibrio, el pKa
depende de la temperatura. Normalmente el pKa de un compuesto corresponde a
una temperatura de 25º C . El pKa obtenido fue 2.67 y con respecto al valor teórico
(3.7) el % de error fue 30.00%. El porcentaje de error fue muy alto, esto porque la
temperatura del día estuvo entre los 17-19º C y no a 25º C. También el error
corresponde a los factores de corrección en las preparaciones de las soluciones de
NaOH e HCl que se debieron determinar por titulación. Otra probabilidad de error es
en el análisis de la mezcla. Hay dos casos que se puede presentar en el análisis de
una mezcla: el primero es que los espectros de absorción de cada componente se
solapen en la mayor cantidad de regiones y el segundo caso es que los espectros
de absorción de cada componente casi ni se solapen. El procedimiento que se tomó
en la práctica fue para un supuesto segundo caso, pero si el caso hubiera sido como
el primero, se debió haber tomado las absorbancias para diferentes longitudes de
onda y se procede a tabular valores para encontrar una relación haciendo el uso de
la regresión lineal por mínimos cuadrados.

La presente practica trato sobre como calcular el pKa de un ácidos débil y como
absorberá luz con la influencia de un indicador. Se preparó 3 soluciones y se obtuvo
sus absorbancias en medio básico ácido y buffer .El ácido y la base fueron los datos
y la muestra problema el buffer, Se halló las concentraciones reales del ácido y la
base con la ley de Beer y se siguió el principio que dice: “las absorbancias son
aditivas y se sobrelapan para formar una sola banda ancha”. La absorbancia se
tomó para cada longitud de onda ya que la absortividad molar depende ella y del
tipo de sustancia. Se obtuvo un pKa= 2.67, pero esto no salió igual al pH=3.8 ya que
lo ideal es que la mezcla el pKa sea igual al PH 13 para cuando hay amortiguadores
varía en lo más mínimo se puede decir que hay una mayor % disociado de ácido
que de base.

CUESTIONARIO
1.- ¿Qué es el punto isobéstico? En la gráfica ubique su punto.

El punto isosbéstico es el punto por el cual pasan todos los espectros de absorción
de las formas ácida y básica de una sustancia en diferentes condiciones, las
absortividades de las dos formas han de ser iguales en el punto en que se cruzan.
Estos puntos se llaman isosbésticos, nombre que viene a significar “igual extinción”
en referencia al coeficiente de extinción o absorción molar, ε de la ley de Beer .El
punto o los puntos isosbésticos (pues pueden aparecer varios) corresponden a una
longitud de onda determinada, cumpliéndose que para esa longitud de onda la
absorbancia total de la muestra no cambia aunque esta experimente una reacción
química o cambio físico. Esta longitud de onda se utiliza como dato para su
identificación. Así pues, un punto isosbéstico es un valor de la longitud de onda para
el que la absorbancia se mantiene constante aunque se modifiquen algunas
variables como la temperatura, el pH, etc.

2. La constante de acidez de un ácido débil se determinó preparando tres

disoluciones, cada una de las cuales tenía una concentración total de 5x10-5
M. La primera se acidifico con HCl y dio una absorbancia de 0.25. La segunda
se alcalinizo y dio una absorbancia de 1.4. El pH de la tercera disolución era
2.9, con una absorbancia de 0.662. ¿Cuál es el valor de ka?

2.9 = pK + log (0.25 - 0.662/ 0.662 - 1.4)

2.9 = pK + 0.0595
pK = 2.8405
3.- ¿Qué efecto tiene el solvente en el espectro de absorción de las moléculas
orgánicas?

● Desplazamiento Batocrómico: ​(Desplazamiento rojo). Desplazamiento de

un máximo de absorción a una mayor longitud de onda causado por efecto
del solvente o un sustituyente.
● Desplazamiento Hipsocrómico: ​(Desplazamiento azul). Desplazamiento de
un máximo de absorción a una menor longitud de onda, ocasionado por
efecto del solvente o un sustituyente.
● Efecto Hipercrómico:​ Aumento en la intensidad de un máximo de absorción.
 ● Efecto Hipocrómico:​ Disminución en la intensidad de un máximo de
absorción.

La necesidad de emplear un solvente para determinar el espectro U.V. de una

molécula orgánica y la consecuente variación de la posición de la banda de máxima
absorción, inducen a preguntar si existe alguna interacción soluto-solvente que
influya en el desplazamiento de la misma. En general, se cree en la existencia de
dicha interacción; pero no hay un modelo que aclare el fenómeno.

Como se ha enunciado anteriormente, en un solvente no polar, las estructuras

polares contribuyen en buena forma a estabilizar el estado excitado. De esto se
deduce que cualquier factor que favorezca estas interacciones podría disminuir la
energía de transición y por consiguiente correr la banda hacia mayor longitud de
onda. Esta estabilización puede resultar de la interacción electrostática o polar de
tipo puente de hidrógeno, entre la estructura polar del estado excitado del soluto y el
componente polar de la molécula del solvente, donde un fotón es absorbido por el
complejo débil formado entre el donor y el aceptor de electrones.

La variación en la longitud de onda hacia un mayor valor, puede aumentar con el

incremento de la migración electrónica y que ésta crece con la constante dieléctrica
de la solución y por consiguiente del solvente.

CONCLUSIONES
● Las absorbancias del anaranjado de metilo en disoluciones de diferentes pH
fueron: ácida 0.93, básica 0.322 y en buffer 0.554.
● Se determinó que el pK del anaranjado de metilo mediante las absorbancias
medidas fue 2.26.

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Skoog​,D; West​, D; ​Holler​, J. ​Fundamentos de química analítica. 4ta Ed.
Barcelona: Reverte. vol(1),1996 ​pp. 218- 219.
2. Connors​, K. ​Curso de Análisis Farmacéutico: Ensayo Del Medicamento.
España: Ed. Reverte. 1981 ​pp. 212.
3. Ospina, G. Análisis instrumental ll. Fundamentación Experimental. 1ra.
edición. Colombia: ELIZCOM, 2008. Pp. 92-93.
4. Gavira, J. Qué es un punto isosbéstico en espectroscopía y qué revela.
TRIPLENLACE [Internet] [Consultado el 24 de enero del 2020]. Disponible
en:
https://triplenlace.com/2013/11/29/que-es-un-punto-isosbestico-en-espectrosc
opia-y-que-revela/