UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Universidad del Per, DECANA DE AMRICA

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA

ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUIMICA
Departamento Acadmico de Qumica Bsica y Aplicada

QUMICA ANALITICA INSTRUMENTAL

Desplazamiento de bandas y determinacin

espectrofotomtrica del pKa de un indicador

APELLIDOS NOMBRES

GRUPO

PROFESOR

Viernes de
2 pm a 6 pm

Quispe
Jacobo Fredy

Cueva Flores Leonardo Gabriel

Julca Alcntara Katerin Milagros
Villar Calero Kaysser Alberto

INTRODUCCIN

En esta experiencia, la espectrofotometra se utilizara para medir el

pKa de un indicador cido-base conocido como anaranjado de metilo.
Este indicador (HIn) es un cido monoplico y podemos representar su
disociacin como sigue:
HIn H+ + InLa expresin de equilibrio para esta disociacin se puede escribir como
pH = pKa - log (HIn)/(In)
Un indicador es una sustancia que permite medir el pH de un medio, es
ordinariamente un cido o una base dbil que presenta color diferente
dependiendo del estado de protonacion; capaz de captar o donar
protones generando un cambio de color al producirse esta donacin o
captacin

de

protones.

Su uso

y aplicacin

principal es la

determinacin del punto final de una neutralizacin, tambin puede

servir para comprobar si un pH es acido o bsico.
El pH es una medida de acidez o alcalinidad de una solucin; y el pK
es la fuerza que tienen las molculas para disociarse.
Los espectros de absorcin de la luz del indicador a diferentes valores
de pH constituyen un mtodo excelente para el estudio de los cambios
de color que se producen en los indicadores acido-base. Al representar
un indicador, el espectro de absorcin a diferentes valores de pH en las
proximidades del pK, se obtienen diferentes curvas con dos mximos
cada uno de ellos se cortan en un punto isosbestico.

1. OBJETIVOS
o Determinar el pK de un indicador (anaranjado de metilo) acido-base
utilizando la espectrofotometra basndonos en la ley de Lamber-Beer.
o Obtener el espectro de absorcin del naranjado de metilo en disoluciones
de diferente pH.

2. PARTE EXPERIMENTAL
2.1. Materiales y Reactivos
o Anaranjado de metilo
o Celdas de vidrio y cuarzo
o Espectrofotmetro UV-visible:
- Thermo scientific genesys 10s uv-vis
- Unic soo uv-2100 spect

o Agua
o cido clorhdrico
o Hidrxido de sodio

2.2. Metodologa
Se prepararon tres soluciones de anaranjado de metilo; una solucin
en donde se observe la forma bsica del indicador, otra en donde la
forma cida del indicador predomine y por ultimo una en medio donde
estn presentes ambas formas del indicador.

Espectro de absorcin de la forma cida del indicador: La

forma cida del indicador se prepar en simultneo con su muestra en
blanco. En el cual el blanco se prepar pipeteando 10 mL de agua
3

destilada, se aadi 4 gotas de HCl concentrado y se aforo a 25 mL. La

disolucin se pas a una celda de cuarzo, luego al espectrofotmetro.
La disolucin de naranja de metilo se prepar pipeteando 10 mL de
disolucin 0.002 % de naranja de metilo, se aadio 4 gotas de HCl
concentrado y se aforo a 25 mL. El pH de esta disolucin fue
aproximadamente de 1 y el indicador se encuentro completamente en
su forma cida. La disolucin se pas a una celda de cuarzo del
espectrofotmetro.
En el espectrofotmetro para cada longitud de onda a la que se vaya a
trabajar, se ajust el espectrofotmetro al 100% de transmitancia, con el
blanco, y se medi a continuacin la absorbancia de la disolucin
problema. Se registr la absorbancia de la disolucin en un rango de
longitudes de onda de 390 nm a 560 nm cada 5 nm.

Espectro de absorcin de la forma bsica del indicador:

Se preparar sucesivamente las disoluciones de la forma bsica del
indicador y el blanco.
El blanco se prepar pipeteando 10 mL de agua, aadiendo 24 gotas de
NaOH 2 M y aforando a 25 mL. La disolucin se pas a una celda de
cuarzo, luego al espectrofotmetro.
La disolucin de naranja de metilo se prepar pipeteando 10 mL de
disolucin 0.002% de naranja de metilo, se aadi 24 gotas de NaOH
2 M y se aforo a 25 mL. El pH de esta disolucin fue aproximadamente
de 13 y el indicador se encuentro completamente en su forma bsica.
La

disolucin

se

pas

una

celda

de

cuarzo,

luego

al

espectrofotmetro para su lectura correspondiente, procediendo como

en el registro del espectro de absorcin de la forma cida del indicador.

Espectro de absorcin de una disolucin donde estn

presentes ambas formas del indicador:
Se procedi a registrar el espectro de una disolucin tampn mediante
el siguiente procedimiento:
Se prepar

las disoluciones tampn de disolucin 0.1 M de cido

frmico y de NaOH 0.1 M cuyo pH fue 3.8.

El banco se prepar pipeteando 10 mL de agua y se enraso a 25 mL
con la disolucin amortiguadora (pH=3.8). La disolucin se pasa a una
celda de cuarzo, luego al espectrofotmetro.
Disolucin de indicador se prepar pipeteando 10 mL de naranja de
metilo 0.002% y se enraso a 25 mL con la disolucin amortiguadora. La
disolucin se pasa a una celda de cuarzo, luego al espectrofotmetro,
procediendo como en el registro del espectro de absorcin de la forma
cida del indicador.

3. RESULTADOS
En las siguientes tablas se reportan tanto las concentraciones del cido
y base utilizados en la prctica, as como los pH de cada solucin;
adems las lecturas de absorbancia para el espectro de absorcin y
para la determinacin del pK del indicador. Tambin incluimos grficas
de los resultados en donde se observa el punto donde pH=pK (los
clculos se reportan en los anexos)

Tabla 1: Lecturas de absorbancia de soluciones con indicador anaranjado de

metilo a diferentes pH para la determinacin de los espectros de absorcin
correspondientes

Longitud de
onda (nm)

A solucin a
pH 1

A solucin a
pH 3.8

A solucin a pH 13

390
395
400
405
410
415
420
425
430
435
440
445
450
455
460
465
470
475
480
485
490
495
500
505
510
515
520
525
530
535
540
545
550
555
560

0.0084
0.012
0.0175
0.0253
0.0354
0.0487
0.0662
0.0876
0.1146
0.1472
0.1876
0.2342
0.2867
0.3431
0.4108
0.4804
0.5543
0.6292
0.7013
0.7694
0.8375
0.8996
0.9478
0.9758
0.9783
0.9608
0.9357
0.9078
0.8806
0.8357
0.7604
0.6589
0.5277
0.3889
0.2652

0.2158
0.2413
0.2663
0.2905
0.3133
0.3333
0.3539
0.3727
0.3915
0.4107
0.4292
0.4477
0.4647
0.4787
0.4918
0.4984
0.4992
0.4938
0.4804
0.4613
0.4363
0.4057
0.3717
0.3342
0.2937
0.2533
0.2154
0.1787
0.1508
0.1243
0.0998
0.0788
0.0578
0.0393
0.0245

0.2184
0.2444
0.2704
0.2946
0.3167
0.3364
0.3564
0.3741
0.3919
0.4089
0.4255
0.4408
0.4548
0.4655
0.4735
0.4752
0.4708
0.4597
0.4405
0.4168
0.3856
0.3493
0.3114
0.2705
0.2292
0.1891
0.152
0.1168
0.09
0.0661
0.0467
0.0326
0.0215
0.0123
0.0066

Tabla 2: Grafica de los espectros de absorcin de las soluciones de pH = (1; 3.8 y 13)
1

0.9

0.8

Absorbancia

0.7

0.6

0.5

A
B

0.4

0.3

0.2

0.1

0
0

100

200

300

400

500

600

Longitud de onda (nm)

DETERMINACION DEL pK
LONGITUDES DE ONDA PTIMA (max)
4.1.1. Para el CIDO (max A)
max A = 510 nm
4.1.2. Para la BASE (max B)
max B = 465 nm

ABSORBANCIAS (A)
4.1.3. Para el CIDO (AA)
AA ( = 510 nm) = 0.968
AA ( = 465 nm) = 0.4804
4.1.4. Para la BASE (AB)
AB ( = 510 nm) = 0.2292
AB ( = 465 nm) = 0.4752
4.1.5. Para la MEZCLA (AM)
AM ( = 510 nm) = 0.2937
AM ( = 465 nm) = 0.4984

ABSORTIVIDAD ()

Donde:

A: absorbancia
b: longitud de la celda
C: concentracin

Se sabe que las concentraciones de los estndares son 6x10 -5 M y la

longitud de la celda es 1 cm

Para el CIDO ( A)

)(

)(

)(

)(

Para la BASE (B)

Ahora desarrollamos las ecuaciones:

Para cada max

)(

(
(

)
(

)(
(

)(
)

(1)

(3)

(2)

)(
)

(4)

Multiplicando a (3) por

y a (4) por

(5)

(6)

Luego (5) (6)

Reemplazando en (3)

( )

Luego, la ecuacin de Henderson-Hasselbalch para un buffer es:

Se sabe que el buffer tiene un pH = 3.8, entonces:

(
(

)
)

10

Usando la ecuacin deducida de la ley de Beer

pH = pK + lg

3.8= pK + lg

3.8= pK + lg10.45426357

3.8= pK + 1.019293445

11

4. DISCUSION
1. El pKa es la fuerza que tienen los compuestos para disociarse. Para
el anaranjado de metilo el valor de

pKa es 3.7 Al igual que otras

constantes de equilibrio, el pKa depende de la temperatura.

Normalmente el pKa de un compuesto corresponde a una temperatura
de 25 C. El pKa obtenido fue 2.67 y con respecto al valor terico (3.7) el
% de error fue 30.00%. El porcentaje de error fue muy alto, esto porque
la temperatura del da estuvo entre los 17-19 C y no a 25 C. Tambin
el error corresponde a los factores de correccin en las preparaciones
de las soluciones de NaOH e HCl que se debieron determinar por
titulacin. Otra probabilidad de error es en el anlisis de la mezcla. Hay
dos casos que se puede presentar en el anlisis de una mezcla: el
primero es que los espectros de absorcin de cada componente se
solapen en la mayor cantidad de regiones y el segundo caso es que los
espectros de absorcin de cada componente casi ni se solapen. El
procedimiento que se tom en la prctica fue para un supuesto segundo
caso, pero si el caso hubiera sido como el primero, se debi haber
tomado las absorbancias para diferentes longitudes de onda y se
procede a tabular valores para encontrar una relacin haciendo el uso
de la regresin lineal por mnimos cuadrados.

2. La presente practica trato sobre como calcular el pKa de un cidos

dbil y como absorber luz con la influencia de un indicador. Se prepar
3 soluciones y se obtuvo sus absorbancias en medio bsico cido y
buffer .El cido y la base fueron los datos y la muestra problema el
buffer, Se hall las concentraciones reales del cido y la base con la ley
de Beer y se sigui el principio que dice: las absorbancias son aditivas
y se sobrelapan para formar una sola banda ancha. La absorbancia se
tom para cada longitud de onda ya que la absortividad molar depende
ella y del tipo de sustancia. Se obtuvo un pKa= 2.67, pero esto no sali
igual al pH=3.8 ya que lo ideal es que la mezcla el pKa sea igual al PH
12

para cuando hay amortiguadores varia en lo ms mnimo se puede

decir que hay una mayor %disociado de acido que de base.

13

5. CONCLUSION
La cuantificacin de los sistemas multicomponentes se rige bajo el
principio que las absorbancias son aditivas y se sobrelapan para formar
una sola banda. La absorbancia de un indicador en medio cido y
bsico vara en funcin al pH.
Se concluy que la espectrofotometra UV-vis tambin sirve para
determinar las concentraciones de cada componente en una mezcla
partiendo de los espectros de absorcin de cada uno, as como
determinar su pKa a diferentes medidas de pH.
En base al trabajo desarrollado utilizando el punto isosbestico pudimos
concluir que 465nm y 560nm son las longitudes de onda de trabajo que
usaremos para determinar el pKa del anaranjado de metilo
La determinacin del pKa de un indicador es uno de los procedimientos
ms sencillos e ilustrativos de la tcnica espectrofotomtrica. Pero en
general cumplimos nuestros objetivos para esta prctica, determinamos
el pKa del indicador y nos familiarizamos con los principios
aplicaciones, conceptos y ecuaciones que nos permitieron determinar el
valor del pKa

14

6. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS

Daniel C. Harris. Quantitative chemical analysis. Sixth edition. W. H. Freeman

and company, New York and Basintong, 2007, pag 462.

Skoog D, Principios de analtica instrumental ,6 edicin , Saunders College

Pub ,2007

[1] Vogel Arthur Qumica Analtica Cuantitativa: Teora y Prctica 2da edicin,
Vol. II, Cap.V, Editorial Kapelusz, Buenos Aires, 1969.

Universidad de valencia. Determinacin espectrofotomtrica del pK de un

indicador. Revisado el 18 de

septiembre del 2014.

Disponible en:

http://www.uv.es/qflab/2009_10/descargas/cuadernillos/experi_quimi1/castellan
o/3ING_pKindicadorCas.pdf

15

7. ANEXO
7.1. Cuestionario
1. Que es el punto isobestico?
Es el punto en la grfica donde al superponerse la lnea acido con la bsica se
cortan en un punto, y siempre las diferentes concentraciones de cido o de base
formaran curvas que pasen por ese punto

2. La

constante de acidez de un cido dbil se determine

preparando tres disoluciones, cada una de las cuales
tenan una concentracin de 510^-5 M. La primera se
acidifico con HCl y dio una absorbancia de 0.25. La
segunda se alcalinizo y dio una absorbancia de 1,4. El pH
de la tercera disolucin era 2.91, con una absorbancia de
0.662. Cul es el valor de Ka?
Un cido dbil se disocia de la siguiente manera

Est en equilibrio con esta ecuacin

Si las concentraciones se mantienen constantes tenemos:

Donde A es la absorbancia de la solucin cuando tiene acido-base, AIn es la

absorbancia en la zona bsica mientras que AHIn es la absorbancia en la zona
acida. Obtenindose la siguiente ecuacin:

Reemplazamos los datos:

16

3. Qu

efecto tiene el solvente en el espectro de

absorcin de las molculas orgnicas?
De haber reacciones entre el soluto y el disolvente se puede visualizar desplazamientos
espectrales, ensanchamiento de bandas y otros fenmenos. Por eso se debe elegir el
disolvente adecuado para las sustancias estudiadas.

17