Documentos de Académico
Documentos de Profesional
Documentos de Cultura
Espectrofotómetro UV-Vis
Espectrofotometría UV-Vis:
Fundamento
• Se basa en que las moléculas absorben las
radiaciones electromagnéticas y a su vez que la
cantidad de luz absorbida depende de forma
lineal de la concentración. La espectroscopia de
absorción UV-Vis involucra la absorción de luz
UV/visible por parte de una molécula
promoviendo el paso de un electrón desde un
orbital molecular fundamental a un orbital
excitado. La separación energética entre estos
orbitales moleculares corresponde a las
longitudes de onda del visible.
Espectrofotómetro UV-Vis:
Instrumentación
• Fuente
▫ Lámpara de deuterio e hidrogeno. (170-375 nm)
▫ Lámpara de filamento de wolframio. (350-2500
nm)
▫ Lámpara de arco de xenón. (200-1000 nm)
• Selectores de longitud de onda
• Recipiente para la muestra
• Detectores de radiación
• Procesadores de señal y dispositivos de lectura
Espectrofotómetro UV-Vis:
Tipos de Instrumentos
Haz Sencillo
Mantenimiento
DQ DQ Uso OQ Uso
Preventivo
IQ PQ
Evaluación OQ
Reparación
Proveedor PQ
Avería
Validación
Traslado
Reubicación
• EQ Es un proceso formal que aporta evidencia
documentada de que un instrumento es
apropiado para un propósito y se mantiene en
un estado de mantenimiento y calibración
consistente con su uso.
• Ciclo de vida de la calificación de equipos.
Calificación de Diseño (DQ)
Característica Consideraciones
Rango de longitud de onda Habilidad para seleccionar y monitorear una longitud de onda con
o sin cambio de fuente, filtro o detector
Rango linear dinámico Habilidad para una cuantificación precisa sobre un amplio rango
de absorbancia.
Ruido óptico y electrónico Bajo ruido mejora la sensibilidad y bajos limites de detección.
Calificación de Diseño (DQ)
Característica Consideraciones
6 mediciones de 0,006% w / v de
𝑆𝐷 Dicromato de potasio en 235, 257,
Precisión RSD =
𝑥 313, y 350 nm debe ser inferior a
0,5% RSD.
EXACTITUD fotométrica
Patrón Ventajas Desventajas
Cristal de Perfil de absorbancia No es adecuado para el rango UV
densidad muy llano en elrango No es absolutamente estable; debe
neutra visible de longitud de recalibrarse regularmente
onda
Dicromato Picos anchos a 257 y 350 No absorbancia en el rango visible
potásico en nm y valles Muy sensible al pH y, como agente
ácido anchos a 235 y 313 nm oxidante potente, puede ser inestable
perclórico o
sulfúrico
• La exactitud fotométrica se determina comparando
la
• absorbancia de una solución de referencia (Tabla 3)
con la
• lectura de ésta, obtenida en el espectrofotómetro.
Para
• cubrir satisfactoriamente el rango UV-Vis del
espectro, se
• utilizan dos soluciones diferentes: dicromato de
potasio,
• para el espectro UV y sulfato de cobre, para el
espectro Vis.
Luz dispersa