UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERÍA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA Y TEXTIL

Departamento Académico de Ingeniería Química

LABORATORIO DE QUÍMICA ORGÁNICA (QU328-A)

Laboratorio N° 4
Tema: “Cromatografía de capa fina y de columna”
GRUPO N° 5

Integrantes:

 Salas Torres Ian Branco

 Vásquez Plasencia Michael

Docentes:

 Emilia Hermoza Guerra

 Tarsila Tuesta Chávez

LIMA – PERÚ
2019
 Índice
Objetivos ............................................................................................................. 3

FUNDAMENTO TEÓRICO .................................................................................. 3

1. Cromatografía............................................................................................. 3

DATOS EXPERIMENTALES Y TEÓRICOS ......................................................... 4

o Datos experimentales................................................................................... 4

DIAGRAMA DE FLUJO DE PROCESOS .............................................................. 5

DISCUSIÓN DE RESULTADOS .......................................................................... 7

1. Observaciones ...................................................................................... 7

2. Resultados ........................................................................................... 7

CONCLUSIONES ................................................................................................ 8

REFERENCIAS ................................................................................................... 9

Anexos ............................................................................................................. 9

 Aplicaciones Industriales ............................................................................. 9

 CROMATOGRAFÍA DE CAPA FINA Y DE COLUMNA

Objetivos

 Realizar técnicas de separación e identificación de pigmentos naturales

por cromatografía.
 Conocer y comprender las distintas técnicas cromatográficas.
 Conocer los fundamentos físico-químicos implicados en los procesos de
separación por cromatografía.

FUNDAMENTO TEÓRICO
1. Cromatografía
Una de las técnicas más empleada en la separación de componentes de una mezcla
para un estudio respectivo. Esta técnica toma en cuenta el movimiento de una
mezcla mediante algún soporte ya sea papel o tela, los elementos de la mezcla se
mueven a diferentes velocidades separándose, notando que uno se mueve más
fácilmente que el otro, esto hace que se separen por bandas.

Tipos de cromatografía

Existen diversos tipos de técnicas de cromatografías, el cual tiene como finalidad

separar las sustancias de una mezcla y enviarlas a un detector para cuantificarlas.

 Cromatografía sólido-líquido: la fase estática o estacionaria es un sólido y

la móvil un líquido.
 Cromatografía líquido-líquido: la fase estática o estacionaria es un líquido
anclado a un soporte sólido.
 Cromatografía líquido-gas: la fase estática o estacionaria es un líquido no
volátil impregnado en un sólido y la fase móvil es un gas.
 Cromatografía sólido-gas: la fase estacionaria es un sólido y la móvil un
gas.
 Cromatografía de absorción: la fase estacionaria es un sólido polar capaz
de adsorber a los componentes de la mezcla mediante interacciones de tipo
polar.
  Cromatografía de partición: la separación se basa en las diferencias de
solubilidad de los componentes de la mezcla en las fases estacionaria y
móvil, que son ambas líquidas.

DATOS EXPERIMENTALES Y TEÓRICOS

o Datos experimentales

Tabla 1: Distancias recorridas por los puntos en las placas.

DISTANCIAS (cm)
Hexano-acetona (1:1) Hexano-acetona (3:1) Hexano-acetona (5:1)
X1 X2 Y X1 X2 X3 Y X1 X2 X3 X4 X5 Y
1.4 2 6.2 1.4 2.4 5.8 7.2 1.4 2.2 2.4 3.2 5.7 6.2
 DIAGRAMA DE FLUJO DE PROCESOS

a) Experimento N°1: Cromatografía de capa fina.

1 cuchara de
sílica gel con
agua

Lavar y secar 3 Preparación

Depositar la papilla sobre las
portaobjetos de la papilla
placas y uniformizar la capa

En 3 vasos de 250 mL Aplicar una gota Colocar las

forrados con papel pigmento usando placas en una
añadir: n-hexano puro, un capilar a 1cm estufa por unos

Y
X
X

Colocar el portaobjeto en el vaso, sin

Medir las distancias
que la muestra esté inmersa en el
recorridas
solvente

Ilustración 1: Diagrama de flujo del proceso de cromatografía de capa fina. Fuente:

Propia.
b) Experimento N°2: Cromatografía de columna.

Éter de
petróleo
Algodón

En una columna cromatográfica limpia Llenar lentamente la columna con alúmina.

y seca echar éter de petróleo hasta Añadir arena lavada y seca (2mm de espesor)
dos tercios de su longitud

Cambiar de tubo de ensayo para recoger la Adaptar la columna al kitasato teniendo

primera fracción cuando descienda. dentro un tubo de ensayo, adicionar 1mL
de pigmento cuando el solvente se
encuentre a 1cm del nivel de la arena

Para eluir la segunda fracción, añadir

acetona+éter 3:1. Cambiar de tubo de
ensayo para recoger la segunda fracción

Ilustración 2: Diagrama de flujo del proceso para la cromatografía de columna.

Fuente: Propia.
 DISCUSIÓN DE RESULTADOS
1. Observaciones

1.1. Experimento N°1: Cromatografía de capa fina.

o En el experimento de cromatografía de capa fina se utiliza como fase
estacionaria la alúmina.
o En este experimento se utiliza la luna de reloj para que no se escape el
solvente.
o La papilla mencionada en la guía se preparó con agua destilada y silica
gel.
o En la primera placa se encuentran dos puntos.
o En la segunda placa se encuentran cinco puntos.
o En la tercera placa se encuentran tres puntos.

1.2. Experimento N°2: Cromatografía de columna.

o En este experimento se utiliza como fase estacionaria la silica.
o Observamos que cuando aparece el color amarillo esta recorre la parte en
la que se encuentra la alúmina para llegar a la parte inferior de la columna
y así recuperarse en el tubo de ensayo la solución.
o Se observa que cuando el solvente está a la altura de la arena se añade la
solución con pigmentos y que se colorea verde la alúmina debajo de la
arena.

2. Resultados

2.1. Experimento N°1: Cromatografía de capa fina.

Tomando distancias desde un punto base, hallaremos la relación de distancias
recorridas por el eluyente y el compuesto.
o Hexano-acetona (1:1)
2
𝑹𝒇 = = 0.323
6.2

1.4
𝑹𝒇 = = 0.226
6.2
 o Hexano-acetona (5:1)
5.8
𝑹𝒇 = = 0.189
7.2

2.4
𝑹𝒇 = = 0.333
7.2
1.4
𝑹𝒇 = 7.2 = 0.194

o Hexano-acetona (3:1)
5.7
𝑹𝒇 = = 0.919
6.2

3.2
𝑹𝒇 = = 0.516
6.2

2.4
𝑹𝒇 = = 0.387
6.2
2.2
𝑹𝒇 = = 0.355
6.2
1.4
𝑹𝒇 = = 0.226
6.2

CONCLUSIONES

 Se concluye que la primera lámina que corresponde a la mezcla de hexano-acetona

(5:1) debido a que presenta dos puntos uno amarillo y otro verde, se puede identificar
que el punto amarillo corresponde al beta caroteno y el punto verde a la clorofila.
 Concluimos que la placa de hexano-acetona (3:1) tiene una polaridad adecuada debido
a que tiene cinco puntos y están parejos entre ellos.
 Concluimos que la polaridad y la afinidad de las moléculas es la base para este
laboratorio.
 Concluimos que la cromatografía fina es muy efectiva para identificar en una muestra.
 En este experimento el responsable de separar el pigmento amarillo es el n-hexano.
 El responsable de separar el pigmento verde es la alúmina.
 Este experimento es mejor para separar los componentes debido a que nos dio los
componentes clorofila (verde) y el componente beta caroteno (amarillo) por separado.

REFERENCIAS
Cromatografía de capa fina Capa Fina, Kurt Randerath, 1982 España.

Abbott D. Y Andews R. S., Introducción a la Cromatografía, Madrid

1970.

Cromatografía de Gases, Laura Olguin; Hector Rodriguez, Instituto de

Biotecnología, Universidad Nacional Autónoma de México ,2004

Anexos
Aplicaciones Industriales

La cromatografía de gases tiene amplia aplicación, en las industrias se

enfoca principalmente a evaluar la pureza de los reactantes y productos
de reacción o bien a monitorear la secuencia de la reacción, para los
fabricantes de reactivos químicos su aplicación para la determinación de
la pureza es lo más importante.

En la investigación es un auxiliar indispensable para diversas técnicas de

evaluación, entre las principales están los estudios cinéticos, análisis de
adsorción a temperatura programada, determinación de áreas específicas
por adsorción de gas y determinación de isotermas de adsorción. En el
campo también pueden ser aplicados, principalmente en estudios de
contaminantes del agua: insecticidas en agua, pesticidas en aguas de
lagos, lagunas, ríos; desechos industriales descargados en ríos o lagunas.

En la industria del petróleo juega una función primordial, por medio de la

cromatografía se pueden analizar los constituyentes de las gasolinas, las
mezclas de gases de refinería, gases de combustión.
FUENTE: Cromatografía de Gases, Laura Olguin; Hector Rodriguez,
Instituto de Biotecnología, Universidad Nacional Autónoma de
México ,2004