Informe 5 Microbiología ambiental (2019)

Análisis microbiológico de aguas

Paulina Jara, Elias Meneses, Cristóbal Leal, Fernanda Valenzuela.

Carrera de Ingeniería Civil Ambiental, Universidad de La Frontera

1.​Resumen
El crecimiento de la población y el incremento en el uso del agua para diferentes
actividades, ha aumentado los niveles de contaminación. Se pueden presentar problemas de
contaminación a través de patógenos, metales pesados y materia orgánica causante de
eutrofización de ríos y lagos.
En el caso de los residuos de origen doméstico, la carga contaminante está representada por
altos porcentajes de materia orgánica y microorganismos de origen fecal. Estos
microorganismos son causantes de enfermedades de origen hídrico, peligrosas para la salud
de las personas, pudiendo poner en riesgo sus vidas.
El análisis microbiológico del agua tiene como objetivo determinar la presencia de
microorganismos de origen intestinal, lo que se puede lograr mediante la determinación de
coliformes y de E. coli. Estas bacterias son habitantes normales del intestino del hombre y
de animales y si abundan en una muestra de agua, significa que el agua tiene presencia de
contaminación fecal. Existen varios métodos para la detección de coliformes, en este caso,
fueron expresados a través de la técnica del número más probable (NMP).
Se obtuvo una muestra proveniente del Río Cautín de Temuco para analizar la presencia de
coliformes, obteniéndose un resultado positivo para coliformes y Escherichia coli.

2.​Resultados y discusión​:
En el análisis cualitativo, se prepararon tubos de ensayos con caldo lactosado, 3 réplicas,
con la muestra original, con dilución 10​-1 y con dilución 10​-2​, se incubaron y pasado las 24
hrs se revisó, se obtuvo presencia de gas y turbidez para 2 de los tubos que contenían la
muestra de agua sin dilución y para 1 tubo con la dilución 10​-2​, por lo tanto, se confirmó la
presencia de coliformes en esos tubos.
Se transfirieron las muestras positivas a tubos con caldo bilis verde brillante, que inhibe el
desarrollo de bacterias gram positivas y nos quedamos con las coliformes, para así
confirmar coliformes totales, donde se obtuvieron 2 positivas. Para confirmar la presencia
de coliformes fecales, se analizan, diferenciándolos de los totales por la temperatura, ya que
los coliformes fecales son termotolerantes, por lo tanto E. coli requiere incubación a 44,5ºC
en tubos con caldo EC, que es un medio selectivo, para la diferenciación de coliformes
fecales y confirmación de Escherichia coli. (Gamazo et al.​ , 2005) y la incubación de tubos
con agua triptona para la realización de las pruebas bioquímicas, luego de la incubación se
añadió reactivo de Kovacs, los resultados positivos debían generar un color rojo en la
superficie del tubo. En este caso resultó 1 de los tubos como positivo para E. coli.
Por lo tanto, se consigue el número más probable, a partir del número de tubos que dieron
resultado positivo. En el primer caso, para la muestra con caldo lactosado se obtuvieron
resultados en la muestra original 2 positivos y para la dilución 10​-2 un resultado positivo,
por lo tanto se busca en la tabla de NMP la combinación 2,0 y 1, y se obtiene un resultado
de 14 NMP/100 mL.

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Para la prueba confirmativa de coliformes se obtuvieron solo 2 tubos positivos de la

muestra sin dilución, por ende la combinación para el NMP sería 2,0 y 0, dando como
resultado 9 NMP/100 mL.

Tablas y figuras​:
Tabla utilizada en la asignación del número más probable (NMP)

Muestras que presentaban presencia de gas y turbidez

Equipo utilizado para la incubación de la muestra para la determinación de E. coli

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3.​Conclusión

Con respecto a los resultados obtenidos para coliformes totales y fecales se puede comparar
con la legislación vigente para conocer los usos que se le puede dar a esa agua a través de la
Norma Chilena 1333, Requisitos de calidad de agua para diferentes usos, en relación a los
valores estipulados de coliformes para cada uno de los usos. En este caso, el agua del punto
de muestreo, respecto a los valores obtenidos, podría ser utilizada, de acuerdo a los
requisitos bacteriológicos, para riego y para uso recreacional.

4.​Referencias​.

Gamazo, C.; López-Goñi, I.; Díaz, R.; Alonso-Urmeneta, B. (2005). Manual práctico de
microbiología. Edición Nº 3

Norma Chilena NCh 1.333 Of. 78, Requisitos de Calidad del Agua para diferentes Usos

Ítems Nota:
Resumen (20%)
Resultados y discusión (50%)
Conclusión (25%)
Referencias (5%)
Nota Final: