Capítulo 3.

Las curvas de calibración

¿Qué se entiende por curva de calibración?

Se trata de una curva de referencia construida con cantidades conocidas de una sustancia (por
ejemplo la albúmina sérica bovina que vimos antes) que se utiliza para determinar la cantidad de esta
sustancia (proteínas) presente en una muestra incógnita.
En muchas determinaciones se cumple una relación proporcional entre la magnitud o intensidad de
color que da una reacción y la cantidad del reactivo que la provoca. Por ejemplo: si la presencia
de 10 ug de proteínas en una solución genera la aparición de un color azul pálido cuando es agregada
a una mezcla reactiva, la presencia de 20 ug de proteína dará lugar a que la solución se torne azul
más oscuro y así sucesivamente.

Para realizar la experiencia debemos preparar unas diluciones seriadas de albúmina sérica bovina
como las que hicimos antes (será nuestro estándar o patrón) y dispondremos así de por lo menos 5
concentraciones, luego realizaremos la reacción química correspondiente para desarrollar color y
mediremos la intensidad de color de cada solución. Por ej., partiendo de una solución madre de
1mg/ml, tendremos 6 tubos así:
La relación entre intensidad de color y concentración de la sustancia (una medida de la cantidad de
esa sustancia) es proporcional y así, si se grafica el valor de intensidad de color medido con un
aparato adecuado (espectrofotómetro o colorímetro) en función de las concentraciones crecientes de
la sustancia se obtiene una recta. Es decir, a mayor cantidad de proteína, mayor cantidad de producto
de reacción y por lo tanto, mayor intensidad de color.

Curva de Calibración

Dado que se ha trabajado con datos reales, los gráficos que se obtienen no son tan ideales, pero
esta situación no es un obstáculo ya que dentro de ciertos valores es posible trazar la recta más
probable que une una serie de puntos, con el uso de los programas de cálculo de las computadoras.

Hay que advertir que una respuesta lineal no se obtiene en todo el rango de concentraciones posibles
sino dentro de un conjunto de valores que dependen de numerosos factores dependientes del método
de medición. Por otra parte, este tipo de curvas no se limita solamente a la determinación de un
elemento o compuesto químico sino que tiene múltiples aplicaciones.

Disolución y dilución

Las disoluciones más comunes en un laboratorio son las que se obtienen de la mezcla homogénea
entre uno o más solutos en estado sólido o líquido y un disolvente en estado líquido. Las disoluciones
se pueden preparar mediante dos procedimientos:

Disolución: tiene lugar cuando el soluto en estado sólido es disuelto en el solvente líquido.

Dilución: tiene lugar cuando el soluto líquido es diluido en el solvente líquido.

Dilución:

En química, la dilución es la reducción de la concentración de una sustancia química en una

disolución.

La dilución consiste en rebajar la cantidad de soluto por unidad de volumen de disolución. Se logra
adicionando más diluyente a la misma cantidad de soluto: se toma una poca porción de una solución
alícuota y después esta misma se introduce en más disolvente.

Disolucion
Una disolución es una mezcla homogénea a nivel molecular o iónico de dos o
más sustancias puras que no reaccionan entre sí, cuyos componentes se encuentran en
proporciones variables.12 También se puede definir como una mezcla homogénea formada por
un disolvente y por uno o varios solutos.
Un ejemplo común podría ser un sólido disuelto en un líquido, como la sal o el azúcar disueltos en
agua; o incluso el oro en mercurio, formando una amalgama. También otros ejemplos de
disoluciones son el vapor de agua en el aire, el hidrógeno en paladio o cualquiera de las aleaciones
existentes.
El término también es usado para hacer referencia al proceso de disolución.
Disolvente y soluto
Una disolución es una mezcla homogénea de sustancias puras. Frecuentemente formada por
un solvente, disolvente, dispersante o medio de dispersión, medio en el que se disuelven uno o más
solutos. Los criterios para decidir cuál es el disolvente y cuáles los solutos son más o menos
arbitrarios; no hay una razón científica para hacer tal distinción.
Densidad
la densidad es una magnitud referida a la cantidad de masa contenida en determinado volumen, y
puede utilicarse en términos absolutos o relativos.
La densidad absoluta o densidad normal, también llamada densidad real, expresa la masa por
unidad de volumen. Cuando no se hace ningunaaclaracion al respecto, el termindo “densidad” suele
entenderese en el sentido de densidad absoluta.
La densidad relativa o aparente expresa la relación entre la densidad de una sustancia y una
densidad de referencia, resultando una magnitud adimensional y por lo tanto sin unidades.