DETERMINACION ESPECTROFOTOMETRICA DE FIERRO EN AGUA.

METODO DEL 1,10-

FENANTROLINA

I. OBJETIVOS
- Preparar soluciones estándares.
- Construir curva patrón de Fe
- Hacer una ecuación que relacione la Absorbancia con la concentración del Fe en ppm
- Calcular la concentración de Fe en ppm de una muestra

II. FUNDAMENTO TEORICO:

El presente método se basa en la reacción que produce el 1,10-Fenantrolina con el Fe2+ para formar un complejo de color rojo
naranja estable. El color formado obedece a la Ley de Beer y se mide por comparación visual o espectrofotométrica. Tener en
cuenta que la muestra análisis expuesta a la atmósfera puede presentar alguna oxidación del Fe2+ a Fe3+ y, con ello una
precipitación del Hidróxido Férrico, es por lo tanto necesario asegurar su total solubilización adicionando HCl para producir:
Fe (OH)3 + 3 H+ → Fe3+ + 3 H2O
En este punto es necesario reducir el Fe3+ a Fe2+ utilizando para tal fin la Hidroxilamina para producir:
4 Fe3+ + 2 NH2OH → 4 Fe2+ + H2O + N2O + 4 H+
Ahora que ya está totalmente reducido a Fe2+, adicionamos el 1,10-Fenantrolina para producir un complejo de coordinación
polidentado intensamente rojo: Fenatrolina + Fe2+ ==== Fenatrolina(Fe)
rojo
NOTA: Es importante resaltar que en la presente determinación podemos hacer uso de los cloruros del Hidroxilamonio y de la Fenantrolina
por ser éstas más solubles. Asimismo, que el Fe2+ reacciona cuantitativamente a un pH entre 3-4, por lo que se hace necesario verificar el mismo
antes de adicionar el 1,10- Cloruro de Fenantrolina.

COLORES DE LA RADIACION VISIBLE

Rango aproximado de Color Complemento
longitud de onda en nm

400-465 Violeta Verde amarillo

465-482 Azul Amarillo
482-487 Azul verdoso Naranja
487-493 Azulverde Rojo-naranja
493-498 Verde azuloso Rojo
498-530 Verde Rojo púrpura
530-559 Verde amarillento Púrpura rojizo
559-571 Amarillo verde Púrpura
571-576 Amarillo verdoso Violeta
576-580 Amarillo Azul
580-587 Naranja amarillento Azul
587-597 Naranja Azul-verdoso
597-617 Naranja rojizo Azul-verde
617-780 Rojo Azul-verde
ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN UV-VIS

Principios Teóricos.
Introducción.
Muchas moléculas absorben luz V o UV. La absorbencia de una solución aumenta cuando la
atenuación del haz aumenta. La absorbencia es directamente proporcional a la longitud del paso
óptico, b, y la concentración, c, de las especies absorbentes. La Ley de Beer establece que

A = 𝜀 bc, donde 𝜀 es una constante de proporcionalidad, llamada absortividad molar.

Muchas moléculas absorben radiación a longitudes de onda diferentes. Un espectro de absorción
mostrará un número de bandas de absorción correspondientes a grupos estructurales que están dentro
de la molécula. Por ejemplo, la absorción que se observa en la región UV para el grupo carbonilo en
la acetona es de la misma longitud de onda que la absorción del grupo carbonilo en la dietilcetona.
Transiciones electrónicas
La absorción de radiación UV o V corresponde a la excitación de los electrones externos. Hay tres
tipos de transiciones electrónicas a considerar:

1. Transiciones que involucran electrones 𝜎, 𝜋, y n.

2. Transiciones que involucran electrones de transferencia de carga.
3. Transiciones que involucran electrones d y f.

Cuando un átomo o molécula absorbe

energía, sus electrones son promovidos de
su estado basal a un estado excitado. En
una molécula los átomos pueden rotar o
vibrar con respecto a ellos.

Estas vibraciones y rotaciones también tienen estados de energía discretos, que pueden ser
considerados como empacados arriba de cada nivel electrónico.
Especies absorbentes que contienen electrones 𝜎, 𝜋, y n.

La absorción de radiación ultravioleta y visible en las moléculas orgánicas está restringida a ciertos
grupos funcionales (cromóforos) que contienen electrones de valencia de baja energía de excitación.
El espectro de una molécula que contiene estos cromóforos es complejo. Esto es debido a la
superposición de transiciones rotacionales y vibracionales en las transiciones electrónicas que da una
combinación de líneas sobrepuestas. Esto da como resultado una banda de absorción continua.
2.61
Espectro de absorción UV-Vis
de la cafeína, correspondiente 2.4
a las transiciones 𝜋 → 𝜋 ∗
2.2

2.0

1.8

1.6

1.4
ABS 1.2
1.0

0.8

0.6

0.4

0.2

-0.01
190.0 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700 750 800850 900.0
NM
Las transiciones electrónicas posibles para los electrones 𝜎, 𝜋, y n son;

Transiciones 𝝈 → 𝝈∗
Un electrón en un orbital 𝜎 es excitado al orbital de antienlace correspondiente. La energía requerida
es grande. Por ejemplo, el CH4 (que solo tiene enlace sencillos C-H, y sus electrones únicamente
pueden efectuar transiciones 𝝈 → 𝝈∗ ) muestra una absorción máxima a 125 nm. La absorción máxima
debida a transiciones 𝜎 → 𝝈∗ no se observa en un espectro típico UV-V (200 nm a 700 nm).
Transiciones n→ 𝝈∗
Los compuestos saturados que contienen átomos con pares de electrones solos (e- de no enlace) son
capaces de efectuar transiciones n→ 𝝈∗ . Estas transiciones generalmente necesitan menor energía que
las transiciones 𝝈 → 𝝈∗ . Pueden ser iniciadas por una radiación de longitud de onda en el rango de
150 nm a 250 nm. El número de grupos funcionales orgánicos con señales n→ 𝝈∗ es pequeño.
Transiciones n →π* y π→π*
La mayoría de los estudios de espectroscopía de absorción, en la región UV, de compuestos orgánicos
está basada en las transiciones de los electrones n y π al estado excitado π *. Esto es debido a que las
bandas de absorción para estas transiciones caen en una región del espectro (200 nm a 700 nm)
experimentalmente útil. Estas transiciones necesitan un grupo insaturado en la molécula que
proporcione los electrones π.

La absortividad molar de las transiciones n →π* son relativamente pequeñas, con un rango de 10 L
mol-1cm-1 a 100 L mol-1cm-1. En cambio las transiciones π→π* dan absortividades molares del orden
de 1 000 L mol-1cm-1 a 10 000 L mol-1cm-1.
El disolvente de la muestra también tiene un efecto notable sobre el espectro de absorción. Las bandas
de absorción de las transiciones n →π* son desplazadas a longitudes de onda menores
(desplazamiento azul o hipsocrómico) cuando se incrementa la polaridad del disolvente. Esto es
debido al incremento de la solvatación de los electrones n que da como consecuencia una disminución
de la energía de su orbital.
Generalmente (aunque no siempre), el efecto opuesto (el desplazamiento rojo o batocrómico) se
observa para las transiciones π→π *. Esto es debido a las fuerzas polares de atracción entre el
disolvente y el absorbente, que disminuye la diferencia de energía entre los niveles basal y
excitado.Este efecto es mayor para el estado excitado, y así la diferencia de energía entre los estados
basal y excitado es ligeramente disminuida, dando como resultado un aumento en la longitud de onda
de absorción (desplazamiento rojo o batocrómico). Este efecto también influye en las transiciones n
→π *, pero es eclipsado por el efecto azul que resulta de la solvatación de los pares de electrones
solos. Ejemplos de grupos que absorben en la región UV:
 Absorción Máxima para las Transiciones π→π *
de algunos Grupos Funcionales
TRANSICION, nm
GRUPO FUNCIONAL π→π * n →π *
ABSORCION ABSORCION
INTENSA DEBIL

170

170

166 280

190 300

340

500

665

Absorción Máxima y Absortividad Molar aproximada de la Transición

π→π * en varios Enlaces de Carbono.
ESTRUCTURA 𝜆max nm

-C=C- 170 16 000

-C=C–C=C- 220 21 000
-C=C–C=C–C=C- 260 35 000

Absorción Máxima para las Transiciones π→π *

de algunos Grupos Funcionales
TRANSICION, nm
π→π * n →π *
GRUPO FUNCIONAL
ABSORCION ABSORCION
INTENSA DEBIL
-C=O 166 280
-C=C–C=O 240 320
-C=C–C=C–C=O 270 350

1,4-Benzoquinona 245 435

 Absorción de transferencia de carga

Muchas especies inorgánicas muestran absorción de transferencia de carga y se las llama

complejos de transferencia de carga. Para que un complejo muestre el comportamiento de
transferencia de carga, uno de sus componentes debe tener propiedades de donador de
electrones y otro debe ser capaz de aceptar electrones. Así la absorción de radiación
involucra la transferencia de un electrón del donador a un orbital asociado con el aceptor.
Las absortividades molares de transferencia de carga son grandes (mayores de 10 000 Lmol-
1
cm-1).

Transiciones que involucran electrones d y f.

Los compuestos y iones de los metales de transición presentan dos tipos de espectros
electrónicos. Además de las bandas intensas de absorción por transferencia de carga (ε de
103 a 104) descritas anteriormente, presentan bandas débiles de absorción debidas al campo
ligante (con valores de ε 10-1 a 10-2). Mientras que las bandas de transferencia de carga
ocurren completamente en la región ultravioleta, las bandas de campo ligando, generalmente
se encuentran en la zona visible, aun cuando pueden extenderse, ocasionalmente, al cercano
IR o al cercano UV.

El color característico de los iones y complejos de los metales de transición puede ser
atribuido siempre a la absorción del campo ligante. El nombre de campo ligante es debido
a que el átomo o ion del metal de transición en el vacío tiene orbitales d los cuales están
degenerados, o iguales en energía, mientras que la presencia de los ligantes produce un
campo electrostático que fracciona los orbitales en niveles de energía diferentes.Si las
subcapas d o f están parcialmente llenas la radiación de longitud de onda puede causar
transiciones electrónicas entre estos niveles de diferente energía.

El patrón de los fraccionamientos de los niveles de energía en un campo ligando depende

de la simetría del complejo formado, puede tener estructura tetraédrica, octaédrica,
tetragonal, o plano cuadrada., y la distribución de energía de los orbitales d será distinta. Y
en el caso de que para un mismo metal haya varios compuestos con la misma simetría, los
ligantes definirán las diferencias de energía, lo que se llama "abertura del campo ligante" y
este efecto se apreciará en los espectros de absorción, que servirán para caracterizarlos.

La Ley de Lambert-Beer

Muchos compuestos absorben luz ultravioleta (UV) o visible (Vis.). En el siguiente

diagrama se muestra un haz de radiación monocromático de poder radiante P0 dirigido a una
solución de muestra. Se efectúa la absorción del haz y al salir de la muestra tiene un poder
radiante P.

La cantidad de radiación absorbida

puede ser medida en distintas formas:
Transmitancia, T = P / P0
% Transmitancia, %T = 100 T
Absorbencia,
 A = log 10 (P0 / P)
A = log 10 1 / T
A = log 10 (100 / %T )

A= 2 - log10 %T

Ahora veamos la Ley de Lambert-Beer y exploremos su significado. Esto es importante

porque quien usa la ley a menudo no la entiende, incluso aunque la ecuación que la
representa es tan simple como: A=𝜀bc
Donde A es absorbencia, adimensional, puesto que A = log10 P0 / P, y
𝜀 es la absortividad molar con unidades de L mol-1 cm-1
c es la longitud del paso óptico de la muestra; que es, el espesor de la celda en que la muestra
esta contenida y la expresaremos en centímetros.
d es la concentración del compuesto en solución, expresada en mol L-1

La razón por la que se prefiere expresar la ley con esta ecuación es porque así la absorbencia
es directamente proporcional a los otros parámetros, cuando la ley es obedecida. Por ahora
no consideraremos las desviaciones de la ley de Lambert - Beer.

III. REACTIVOS
1. Preparación de 250 mL de Solución Madre de Fierro:
Mezclar 5 mL de H2SO4 cc en unos 50 mL de agua destilada y disolver en ella exactamente 0,1754 de
FeSO4.(NH4)2(SO4).6H2O (peso molecular= 392,14).. Diluir en una fiola volumétrica a 250 mL con agua
destilada. Esta solución es de 100 ppm Fe.
2. Preparación de 100 mL de Solución de Trabajo de 10 ppm Fe 2+: Tomar 10 mL de la solución madre y
aforar a 100 mL con agua destilada. Esta solución es de 10 ppm Fe.
3. Solución de cloruro de hidroxilamonio (NH4ClO) : Pesar 2 g de la sal y aforar a 10 mL con agua destilada.
Sólo se conserva por 7 días.
4. Solución de cloruro de 1,10-fenantrolina ( C12H9ClN2.H2O ): Pesar 0,125 g de la sal y llevar a 25 mL con
agua destilada. Solo se conserva por 7 días
5. Preparación de 250 mL de Ácido Sulfúrico 1M: Tomar 13,5 mL H2SO4cc (sp = 1,84 ; % = 98 ), y aforar
a 250 mL con agua destilada.
6. Preparación de 100 mL de Buffer Acetato de Amonio - Ácido Acético Glacial :
Pesar 40g CH3COONH4.y adicionar 50 mL de CH3COOH glacial (sp = 1,06; mínimo 96%), aforando a 100
mL con agua destilada.
7. Preparación de 100 mL de Buffer de CH3COONa- CH3COOH Glacial : Pesar 27,40 g CH3COONa.3H2O
y adicionarle 11,50 mL de CH3COOH glacial, aforando a 100 mL con agua destilada
8. Preparación de 50 mL de ácido ascórbico al 10% : Pesar 5 g de C6H8O6 y aforar a 50 mL con agua destilada.
9. Preparación de 100 mL de NaOH 2M : Pesar 8 g de NaOH a aforar a 100 mL con agua destilada.

IV. PROCEDIMIENTO:
PREPARACIÓN DE LA CURVA DE CALIBRACIÓN:
1. Tomar 6 fiolas de 100 mL, numerarlas y colocar en c/u de ellas: 0; 2,0; 4,0; 6,8,0 y 10,0 mL de la
solución de Fe 10 ppm. Cada fiola contendrá al aforarla después de adicionar reactivos que desarrollen el
color: 0,00; 0,20; 0,40;0,60; 0,80 y 1,00 ppm Fe.
2. Añadir agua destilada a c/u hasta aproximadamente 50 mL.
3. Colocar 2 mL de solución de CH3COONH4 - CH3COOH glacial.
4. Adicionar 1 mL de Cloruro de Hidroxilamonio .
5. Adicionar 1 mL de ácido ascórbico (para eliminar el PO43- que es interferente).
6. Verificar que el pH se encuentre entre 3 y 4. Se recomienda un valor fijo de 3,50.
 7. Ajustar si es necesario con H2SO4 1M o NaOH 2M
8. Adicionar 2 mL del cloruro de 1,10 Fenantrolina.
9. Aforar a la marca con agua destilada.
10. Dejar reaccionar durante 15 min. a oscuras.
11. Usando la fiola N° 1 (blanco) calibrar el Espectrofotómetro (con  508 nm), y proceder a determinar la
absorbancia de cada fiola
12. Graficar Absorbancia vs ppm Fe. Que partiendo del origen debe ser una recta

PREPARACION Y MEDICION DE LA MUESTRA.

1. La muestra debe ser incolora, fíltrela si es necesario con carbón activado para quitarle la coloración o de lo
contrario centrifugarla.
2. Colocar en una fiola de 50 mL una cantidad determinada de muestra (10 mL), previamente tratada según el
paso anterior.
3. Adicionar cada uno de los reactivos al igual que a las soluciones patrón.
4. Si la absorbancia estuviera fuera del rango de la curva de calibración, entonces se debe tomar un volumen
menor de muestra (o mayor si la absorbancia es muy pequeña).
5. Con el valor de absorbancia determinar a partir de la curva de calibración la concentración de Fe presente en
la fiola, para luego multiplicar por el factor de dilución de la muestra. De esta manera obtenemos la ppm Fe
presente en el agua examen.

Para la presente marcha tenemos:

ppm Fe (muestra) = ppm Fe (gráfica) * mL de muestra diluida

mL de alícuota muestra
ppm Fe (muestra) = ppm Fe (gráfica) * (50 /100)

V. CÁLCULOS:

1. Construir la Curva de Calibración para el Fierro.

ppm de Fe de la solución = ppm de solución de trabajo * mL de solución de trabajo

mL de aforo
ppm de Fe de la solución =

ppm Fe Absorbancia
0,00
0,20
0,40
0,60
0,80
1,00

2. ¿Cuál es la ecuación que relaciona la ppm Fe con la Absorbancia? De preferencia se debe usar la recta
que parta del origuen

3. Determinar la concentración de Fierro en muestra problema.

ppm Fe (muestra) = ppm Fe (gráfica) * mL de muestra diluida

mL de alícuota muestra

ppm Fe (muestra) = 0.008 * (50/100) = 0.004