INFLUENCIA DE LA DIETA SOBRE LA FORMACION Y ALMACENAMIENTO DEL GLUCOGENO

HEPATICO.

2. Resumen:
El glucógeno almacenado en el hígado principalmente tiene la cantidad adecuada de glucosa en la sangre
disponible para ser utilizada por la célula durante los periodos comprendidos entre las comidas y durante
la actividad muscular. Las concentraciones de glucógeno en el hígado y en el musculo sufren variaciones
relacionadas con diferentes estados fisiológicos: ingesta de alimentos, ayuno prolongado (12 a 18 horas)
ejercicios físicos, etc.

La finalidad de la presente práctica es utilizando homogenizado de hígado de pollo en ayunas y

postprandial seremos capaces de analizar los valores de glucógeno obtenidos en amas muestras, de
acuerdo al procedimiento señalado.

3. Introducción.
El glucógeno es el principal polisacárido de reserva de las células animales al igual que la amilipectina es
un polisacárido ramificado de la D-glucosa con enlaces alfa-1,4 y alfa-1,6. El glucógeno es abundante en
el hígado, puede alcanzar hasta el 7% del peso húmedo, se le haya en musculo esquelético; en las células
hepáticas el glucógeno se encuentra almacenado en gránulos grandes contiene enzimas responsables de su
síntesis y degradación. Puede hidrolizarse por la acción de alfa-amilasa se encuentra en la saliva y jugo
pancrático, rompen los enlaces alfa-1,4 en las ramas exteriores del glucógeno para dar glucosa, maltosa y
un núcleo resistente llamado dextrina limite.

El glucógeno está presente en el citosol en forma de gránulos con un diámetro variable entre 100 y 400
amstroms.estos gránulos contienen firmemente enlazadas las enzimas glucógeno fosforilasa, glucógeno
sintetasa y algunas otras que regulan la síntesis y degradación.

El glucógeno puede ser aislado de los tejidos por digestión con soluciones de KOH caliente, en los cuales
los enlaces no reductores alfa 1,4 y alfa 1,6 son estables, el glucógeno también es altamente hidrolizable
por alfa y beta amilasa para rendir glucosa y maltosa respectivamente, la acción de una beta amilasa
también rinde una dextrina limite; el glucógeno es una forma de almacenamiento de glucosa de fácil
disponibilidad. Se encuentra glucógeno o se puede sintetizar en cualquier célula del organismo pero las
concentraciones varían en los diferentes tejidos, correspondiendo las concentraciones más altas al hígado
y al musculo esquelético, lugares principales de almacenamiento.

El glucógeno almacenado en el hígado principalmente tiene la cantidad adecuada de glucosa en la sangre

disponible para ser utilizada por la célula durante los periodos comprendidos entre las comidas y durante
la actividad muscular. Las concentraciones de glucógeno en el hígado y en el musculo sufren variaciones
relacionadas con diferentes estados fisiológicos: ingesta de alimentos, ayuno prolongado (12 a 18 horas)
ejercicios físicos, etc.

La finalidad de la presente práctica es cuantificar el glucógeno hepático en ayunas y después de la ingesta

de alimentos y evaluar los valores encontrados relacionándolos con los factores que determinan su
síntesis y degradación.

4. Objetivos:

 Utilizando homogenizado de hígado de pollo en condiciones de ayuno y postprandial

seremos capaces de analizar los valores de glucógeno obtenidos en ambas muestras, de
acuerdo al procedimiento señalado.

Marco teórico:

El glucógeno representa la principal forma de almacenamiento de carbohidratos tanto en animales como

en las plantas. Cuando existe una disminución significativa de glucosa en sangre, el glucógeno es
degradado por medio de una serie de enzimas para cubrir las necesidades energéticas de nuestro
organismo. Las glucogenosis son enfermedades en donde existen deficiencias congénitas de la mayoría de
las enzimas relacionadas con el metabolismo del glucógeno, en donde los órganos más afectados s son: el
hígado y el musculo esquelético.

El glucógeno es la forma principal de almacenaje de carbohidratos en los animales, se encuentra en

proporción mayor en el hígado (hasta 6%) y en el musculo, donde rara vez excede del 1%. sin embargo,
debido a su masa mayor, el musculo almacena tres a cuatro veces la cantidad de glucógeno que tiene el
hígado como reserva. al igual que el almidón, es un polímero ramificado de alfa – glucosa.

GLUCOGENESIS El glucógeno es la forma principal de almacenamiento de carbohidratos en los

animales y corresponde el almidón de a las palntas.se encuentra ene l hígado (hasta 6%) en el musculo
excede de 1% al igual que el almidón, es un polímero Ramificado de glucosa. La función del glucógeno
muscular es actuar como una fuente de fácil disponibilidad de unidades de hexosa para la glucolisis
dentro del propio musculo. El glucógeno hepático sirve de gran parte `para exportar unidades de hexosa
para la conservación de la glucosa sanguínea, entre comidas. Después de 12 a 16 hrs de ayuno, el hígado
casi agota su reserva de glucógeno. El glucógeno muscular solo disminuye de manera significativa
después de ejercicio vigoroso prolongado. Puede inducirse en almacenaje mayor de glucógeno muscular
con dietas ricas en carbohidratos después de la depleción por el ejercicio. Las enfermedades son un grupo
de trastornos hereditarios se caracterizan por movilización deficiente del glucógeno depósito de formas
anormales del mismo.

CONSIDERACIONES TEÓRICAS

El hígado es un órgano o víscera del cuerpo humano y, a la vez, la glándula más voluminosa de la
anatomía y una de las más importantes en cuanto a la actividad metabólica del organismo. Desempeña
funciones únicas y vitales como la síntesis de proteínas plasmáticas, función desintoxicarte, almacén de
vitaminas, glucógeno, etc. Además, es el responsable de eliminar de la sangre las sustancias que pueden
resultar nocivas para el organismo, transformándolas en otras innocuas. Glucógeno muscular El
glucógeno muscular es la energía que usamos en la mayoría de los entrenamientos o ejercicios físicos. Es
el que aporta energía en ejercicios de media y alta intensidad. En los ejercicios de máxima intensidad de
menos de quince segundos de duración la energía proviene directamente del ATP. El glucógeno por
medio de distintos procesos se convierte en ATP que es la forma de energía más básica. Si el proceso
requiere de gran cantidad de energía se realizara por la glucólisis y parte se convertirá en ácido láctico,
para este proceso no hace falta oxígeno. Por el contrario si el proceso es menos intenso el glucógeno o
glucosa pasara por el ciclo Krebs y será necesaria la utilización del oxígeno, esto es lo denominado
ejercicio aeróbico. Un deportista entrenado puede tener suficiente glucógeno en los músculos para
entrenar entre el 80/110% de su máximo consumo de oxigeno durante casi dos horas, incluso más. Si el
entrenamiento continua por encima de las dos horas y no hay ingesta de glucosa y/o hidratos de carbono,
el organismo empezara a utilizar las grasas acumuladas, lo que reducida el nivel de ejercicio hasta
alrededor del 50% del máximo consumo de oxigeno del deportista. Glucógeno Estructura molecular del
glucógeno 7 El glucógeno es un polisacárido de reserva energética de los animales, formado por cadenas
ramificadas de glucosa; es soluble en agua, en la que forma dispersiones coloidales. Abunda en el hígado
y en el músculo.

5. Materiales y métodos
a) Materiales b) reactivos

 Gradilla - KOH al 60%

 Tubos de ensayo
 Pipetas fotocolorímetro
 Cocina
 Papel filtro
- NA2S04 Solución saturada.
- alcohol absoluto
- fenol al 80%
-H2SO4 concentrado
- homogenizado del hígado de pollo al 10 %

Procedimiento experimental:

1) Para esta práctica se utilizó hígado, bilis y páncreas de un pollo en ayunas y un pollo que ha
comido.
2) Armamos el siguiente sistema
 Componentes I II
Homogenizado de hígado en ayunas 0.5 ml
Homogenizado de hígado postprandial o.5 ml
KOH al 60 % 0.5 ml 0.5 ml
Al añadir koh, el homogenizado de pollo en ayunas toma un color rojizo, mientras que el
segundo toma un color crema

3) Calentar en el baño maría a 100°C por 5 minutos

Componentes I II
Alcohol al 98% 5.0 ml 5,0 ml
Solución saturada de NA2SO4 0.1 ml 0.1 ml
Al añadir alcohol el primer tubo toma un color blanco lechoso, mientras que el segundo un color
verdoso:

4) Dejar en reposo por una hora

5) Centrifugar a 3, 500 r.p.m por 10 minutos
6) Eliminar el sobrenadante y colocar boca abajo los tubos sobre el papel filtro por 5 minutos
7) Agregar agua destilada 5 ml a cada uno de los tubos
8) Disolver el precipitado por agitación
Tubo n°1: se forma espuma en la parte de arriba
Tubo n2: se forma un precipitado

9) Armar el otro sistema

COMPONENTES I II
Muestra del tubo I del sistema anterior 1ml
Muestra del tubo II del sistema anterior 1ml
Agua destilada 1ml 1ml 2ml
Fenol al 80% 0.1 0.1 0.1 ml
ml ml
El tubo n°1 toma un color amarillo al añadir fenol

10) Colocar los tubos en agua helada durante 5 minutos y sin retirar los tubos del baño helado.
 11) Agregar H2SO4 concentrado, gota a gota en el centro de cada tubo 5ml a cada sistema. mesclar y
dejar en el baño helado durante 5 minutos más.
12) Leer en el fotocolorímetro con filtro verde 540 nm.

CUESTIONARIO
1) ¿Cómo espera encontrar las concentraciones de glucógeno en la muestra de hígado de rata
en condiciones de ayuno? De usted las razones metabólicas que expliquen su resultado?.
Durante esta fase el metabolismo de la glucosa se acerca a un equilibrio dinámico (producción hepática
de glucosa, en gran parte de la glucogenólisis iguala a la captación de glucosa por los tejidos. Después de
ayuno nocturno, la secreción de insulina disminuye y la secreción de glucagón aumenta. Esto permite un
descenso en la síntesis de glucógeno y un incremento de la glucogenólisis, gradualmente el hígado
empieza a ser un órgano productor de glucosa.En la fase postabsorcional (ayuno), aproximadamente el
80% de toda la glucosa es captada por los tejidos independientes de la insulina. De este 80%, el 50 % va
al cerebro y el 20% a los eritrocitos. En esta fase, los tejidos dependientes de insulina utilizan una
cantidad escasa de glucosa.

Después de 12 horas de ayuno, el 65 – 75% de la glucosa endógena procede del glucógeno, y el resto de
la gluconeogénesis.Sin embargo la contribución de la gluconeogénesis aumenta. El músculo libera
lactato, que después de haber sido oxidado a piruvato en el hígado entra en la gluconeogénesis. La
glucosa que se forma retorna al músculo esquelético; esto se conoce como ciclo de CorEn el hígado, el
glucagón estimula la lipólisis a través de la activación de la lipasa sensible a hormonas. Esto libera
glicerol, el tercer sustrato gluconeogénico en importancia, y proporciona ácidos grasos libres como
energía metabólica en el músculo.
La activación de la lipólisis en el hígado estimula secundariamente la cetogénesis a partir de la acetil-
CoA, produciéndose acetoacetato, hidroxibutarato y el producto de la descarboxilación espontánea del
acetoacetato, la acetona. Estos tres metabolitos se conocen como los cuerpos cetónicos y se oxidan en el
músculo esquelético y cardiaco.

2) ¿Cómo espera encontrar las concentraciones de glucógeno en la muestra de hígado de rata en

condiciones postprandial?
Los constituyentes de la comida estimulan la liberación de insulina y suprimen la secreción de glucagón.
Esto cambia el metabolismo del hígado, el tejido adiposo y el músculo. Después de las comidas no hay
cambios en la utilización de la glucosa por el cerebro, pero aumenta mucho la captación de glucosa en los
tejidos dependientes de la insulina, principalmente en el músculo esquelético. Se estimula la oxidación de
la glucosa y la síntesis de glucógeno en el hígado, tejido adiposo y el músculo: se inhibe la lipólisis. La
glucosa captada por el hígado se fosforila inmediatamente a glucosa 6-P a través de una enzima inducible,
la glucocinasa.
El exceso de glucógeno entra en la vía de las pentosas fosfato para dar NADPH+H+, que es esencial para
diferentes biosíntesis reductoras, como son la lipogénesis y la síntesis de colesterol.

3.¿Qué relaciones metabólicas puede usted establecer entre los valores de glucógeno obtenidos en
ambas muestras de hígado de rata, motivo del experimento?

REGULACIÓN ENDOCRINA DE GLUCÓGENO:

3.1Adrenalina y glucagón desencadenan la síntesis de AMPc e inhiben la síntesis del glucógeno

al fosforilr la Glucógeno sintasa b.

3.3La insulina tiene el efecto contrario de glucagón y adrenalina. Cuando los niveles de azúcar
sanguínea son altos, la insulina se enlaza a su receptor y desencadena una ruta de activación
de la fosfatasa-1.Se desfosforilan las tres enzimas y activan la síntesis de glucógeno.

Adrenalina y glucagón , además de bloquear la síntesis de glucógeno,

4) ¿Por qué mecanismo metabólico el glucógeno se incrementa cuando la concentración de glucosa

en sangre es mayor de 150 mg/100?
 Insulina

G lucógeno Sint etasa(-) AMPc (-)Glucógeno Fosforilasa

Glucagón
Adrenalina

Las principales enzimas que controlan el metabolismo del glucógeno, glucógeno

fosforilasa y la glucógeno sintetasa, son reguladas por mecanismos alostericos y
modificaciones covalentes debido a fosforilación y desfosforilación reversible de la
proteína enzimática como respuesta de la acción hormonal.

Cuando la concentración de glucosa en la sangre esta aumentada permite que las células
β del páncreas secreten insulina, la insulina en el hígado aumentado a la actividad de la
fosdiesterasa quien hidroliza el AMPc, por lo tanto no está disminuida la actividad del
AMPc y no puede inhibir a la glucógeno sintetasa, que es indispensable para la
formación de glucógeno (GLUCOGÉNESIS).

6) Resultados:
 Tubo n°1: la lectura inicial en el espectrofotometro es 0.70 y la abosrla absorvancia es 0.77
 Tubo n°2:la lectura inicial es 138.8 y la absorvancia es – 1.57
 Tubo n°3:la lectura inicial es 153.8 y la absorvancia es – 179
7) Conclusions
 Se conclusiones es que nuestra práctica nos dio los resultados deseados, y hemos aprendido
de forma satisfactoria los que es la influencia de la dieta sobre la formación y almacenamiento
del glucógeno hepático.

8) Referencias

Sloan, A.W; Koeslag, J.H.; Bredell, G.A.G. (1973). «Body composition work capacity
and work efficiency of active and inactive young men». European Journal of Applied
Physiology

Zechner R., Strauss J.G., Haemmerle G., Lass A., Zimmermann R. (2005) Lipolysis:
pathway under construction. Curr. Opin. Lipidol. 16, 333-340

Owyang C. Pancreatitis. In: Goldman L, AusielloD, eds. Cecil Medicine. 23rd ed.
Philadelphia, Pa:Saunders Elsevier; 2007:chap 147
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