Familia Pseudomonadaceae y Familia Rhizobiaceae

I. Introducción:

En el suelo existe una notable población microbiana, entre la que se

encuentran los microorganismos beneficiosos para el desarrollo vegetal,
caracterizados por realizar funciones como la fijación del nitrógeno atmosférico,
la solubilización del fósforo insoluble, la antibiosis y la estimulación del
crecimiento y desarrollo vegetal, entre otras. Todas ellas revisten gran importancia
para el normal establecimiento y aumento de la productividad de especies
cultivables de importancia económica.

La utilización de estos microorganismos constituye una de las alternativas

nutricionales más aceptadas dentro del contexto agrícola mundial y desempeña un
papel importante no solo en los modelos de agricultura sostenible, donde su
aplicación es imprescindible, sino también, dentro de los sistemas agrícolas de
alta productividad, debido a su bajo costo de producción y la posibilidad de su
fabricación a partir de recursos locales renovables.

Las bacterias del género Azotobacter han sido utilizadas extensamente en

la producción agrícola mundial, ya que le aportan a las plantas hasta el 50 % de
sus necesidades de nitrógeno mediante la fijación asociativa del elemento que
llevan a cabo a partir de la atmósfera, además de suministrarles sustancias activas
estimuladoras del desarrollo vegetal.

La simbiosis entre la bacteria del género Rhizobium y las leguminosas

tiene una gran importancia tanto en la agricultura, como en el medio ambiente. En
cuanto a la agricultura, se dice que se ve beneficiada ya que causa un aumento
significativo de nitrógeno combinado en suelos desnudo y que carecen de este.
Además las leguminosas, parte esencial de la agricultura, se ven favorecidas al
poder crecer en zonas donde otras plantas no podrían. Por otro lado, ya que el
nitrógeno es uno de los nutrientes esenciales limitados para el crecimiento de las
plantas, esta simbiosis aumenta el nivel de fijación del nitrógeno atmosférico,
aumentando así la producción agrícola. En cuanto a la parte ambiental, los
fertilizantes son uno de los principales causantes del deterioro ambiental, pues
causan la eutrofización de masas de aguas, la erosión de suelos y generación de
lluvias ácidas.

II. Competencia:

 Explica y Diferenciar los aspectos morfológicos, fisiológicos y de hábitat

de las bacterias pertenecientes a las familias Pseudomonadaceae y
Rhizobiaceae.
III. Desarrollo temático:
Características generales de las familias Pseudomonadaceae y Rhizobiaceae.
Tabla 1: Características de las familias Pseudomonadaceae y Rhizobiaceae.

Características / Pseudomonadaceae Rhizobiaceae

Familias
-Comparten las
características de ser -Son bacilos Gram-
bacilos Gramnegativos negativos,
rectos o ligeramente -Forma de bastones
Generalidades curvos, no esporulados. pleomórficos.
-Algunos son patógenos -Bacterias fijadoras de
para las plantas, animales nitrógeno (Rhizobium).
y el hombre
(Pseudomonas), y otras
son fijadoras de
Nitrógeno (Azotobacter).

Aerobios estrictos, no
Requerimiento de fermentadores ni Aerobios estrictos
oxígeno productores de gas.

Motilidad Son móviles (flagelos Son móviles (flagelos

peritricos) peritricos)
P. Catalasa Positiva Positiva
P. Oxidasa generalmente positiva Positiva
Nutrición Quimiorganotrofos Quimiorganótrofos
Metabolismo Respiratorio Respiratorio

Muchos miembros del

grupo producen
Producción de diferentes derivados del No produce pigmentos
pigmentos pigmento fluorescente
pioverdina, de color
amarillo verdoso o verde
azulado.
 Clasificación taxonómica familias Pseudomonadaceae y Rhizobiaceae
Tabla 2: Clasificación taxonómica familias Pseudomonadaceae y Rhizobiaceae

Según BERGEY’S MANUAL OF Según BERGEY’S MANUAL OF

SYSTEMATIC BACTERIOLOGY SEGUNDA SYSTEMATIC BACTERIOLOGY
EDICIÓN, en el VOLUMEN II Las Proteobacterias SEGUNDA EDICIÓN, en el VOLUMEN II
Las Proteobacterias
Dominio: Bacteria VP
Phylum BXII: Proteobacteria NP Dominio: Bacteria
Clase III: Gammaproteobacteria NP Phylum: Proteobacteria
Orden IX: Pseudomonadales AL Clase I: Alphaproteobacteria
Familia I: Pseudomonadaceae AL Orden VI: Rhizobiales
Género III: Azotobacter AL Familia I: Rhizobiales
Especies: Género I: Rhizobium
Azotobacter chroococcum AL Agrobacterium
Azotobacter armeniacus VP Carbophilus
Azotobacter beijerinckii AL Chelatobacter
Azotobacter macrocytogenes AL Especies:
Azotobacter nigricans subsp. nigricans AL Rhizobium leguminosarum AL
Azotobacter nigricans subsp. achromogenes VP Rhizobium ciceri VP
Azotobacter paspali AL Rhizobium etli VP
Azotobacter salinestris AL Rhizobium fredii VP
Azotobacter nidelandii AL Rhizobium galegae VP
Rhizobium gallicum VP
Rhizobium giardinii VP
Rhizobium indigoferae VP
Rhizobium japontkum AL
Rhizobium loti VP
Rhizobium mediterraneum VP
Rhizobium mongolense VP
Rhizobium phaseoli AL
Rhizobium radiobacter VP
Rhizobiumr rhizogenes VP
Rhizobium rubi VP
Rhizobium tianshanense VP
Rhizobium trifolii AL
Rhizobium undicola VP
Rhizobium vitis VP

Según BERGEY`S MANUAL of DETERMINATIVE Según BERGEY`S MANUAL of

BACTERIOLOGY – NOVENA EDICIÓN 1994 DETERMINATIVE BACTERIOLOGY –
NOVENA EDICIÓN 1994
Categoría I: Bacterias Gram negativas que tienen pared
Categoría I: Bacterias Gram negativas que tienen
celular
pared celular
Grupo 4: Cocos y Bacilos Gram negativos aerobios o
Grupo 4: Cocos y Bacilos Gram negativos
microaerófilo
aerobios o microaerófilo
 Características diferenciales de los Géneros Azotobacter y Rhizobium
Tabla 3: Características diferenciales de los Géneros Azotobacter y Rhizobium

Características / Géneros Géneros Azotobacter Géneros Rhizobium

Reacción Gram Negativos Gram Negativo
Gram
Morfología Son pleomórficas, cuyas Forma de bastones
formas varían entre bacilos pleomórficos
Características y cocos
morfológicas Tamaño 1.5 a 2 um de diámetro (A. Aproximadamente 0.5 a
chroococum que llegan a 0.9 µm. de ancho y 1.2 a
medir hasta 6 um,) 3.0 µm. de largo.
Disposición Se disponen aislados, en Se disponen aislados
pares o en pequeñas
cadenas
Presencia de Gránulos sudanofílicos y Gránulos poli - B –
gránulos metacromáticos hidroxibutirato
Formación de Forman quistes a medida No forma quistes
quistes que el cultivo envejece
Motilidad Móviles (flagelos Móviles (flagelos
peritricos) peritricos)
Requerimiento de oxígeno Aerobio Aerobio

Catalasa Positiva Positiva

Oxidasa Positiva Positiva
Fijan nitrógeno de forma no Forman asociación
Fijación del nitrógeno simbiótica simbiótica con
leguminosas.
Contenido de G + C 63.2 a 67.5 % mol 66 % mol
Forma Circulares Circulares

Tamaño 2 – 6 mm de diámetro 2 a 4 mm de diámetro

Elevación convexas Convexas

Morfológicamente Color matices de pardo Generalmente blanca u

las colonias opacas
Aspectos viscosas mucilaginosas
Reducción Nitrato Iones de amonio
Producen sulfuro de hidrógeno No producen sulfuro de
hidrógeno
Hidrolizan El almidón No hidrolizan la caseína
pH Máximo 8,5 6–7
Mínimo 4,8 – 6,0
Temperatura óptima 30°C 25°C
Susceptibles a pH ácido, altas Puede o no crecer en NaCl
concentraciones de NaCl y al 2%
temperaturas mayores a
35°C
 Catalasa, oxidasa, tolerancia a pH, tolerancia a
utilización de azúcares, cloruro de sodio (NaCl),
Pruebas bioquímicas producción de pigmentos, resistencia a metales
formación de quistes y pesados, Catalasa, oxidasa,
motilidad. utilización de azúcares

Género Azotobacter EN AGAR Observación microscópica

ASHBY del Género Azotobacter

Medio TY Género Rhizobium Observación microscópica del

en agar Género Rhizobium
Tabla 4: Movilidad, formacion de filamentos y pruebas bioquimicas utilizadas para la caracterización del género
Azotobacter spp. Fuente: Holt, 2000
Tabla 5: Identificacion de las especies del género Rhizobium

Hábitat de las especies Azotobacter chroococum y Rhizobium leguminosarum

Tabla 6: Hábitat de las especies Azotobacter chroococum y Rhizobium leguminosarum

Especie Azotobacter chroococum Rhizobium leguminosarum

Hábitat Es ubicuo, comúnmente
encontrada en suelos de pH
neutro o débilmente básico.
Suele estar asociado también
con las plantas y encontrarse
en la rizósfera.
Se encuentran en las raíces de las
leguminosas dentro de estructuras
llamadas nódulos, en asociaciones
simbióticas
 Morfología de las especies Azotobacter chroococum y Rhizobium leguminosarum
Tabla 7: Morfología de las especies Azotobacter chroococum y Rhizobium leguminosarum

Morfología Azotobacter chroococum Rhizobium leguminosarum

Pleomórficas, variando su morfología Es una bacteria que tiene forma
Forma desde bacilo hasta célula en forma de de bastón,
coco.

Individual, como pares o formando Individual

Disposición agregados irregulares, y algunas veces
formando cadenas de tamaño variable.

Pueden medir de 1.6 a 2.5 um de Mide aproximadamente 0.5 a

Tamaño diámetro y alcanzar hasta los 6 um. de 0.9 µm. de ancho y 1.2 a 3.0
longitud. µm. de largo

Formación de Formar quistes esféricos resistentes a la No forman esporas

esporas desecación

Presencia de Gránulos sudanofílicos y Gránulos poli - B –

gránulos metacromáticos hidroxibutirato

Son móviles, poseen flagelos

Motilidad Se mueve por flagelos peritrícos perítricos en número de 2 a 6,
que permite aproximarse a las
leguminosas para infectarlas

Fisiología de las especies Azotobacter chroococum y Rhizobium leguminosarum

Tabla 8: Fisiología de las especies Azotobacter chroococum y Rhizobium leguminosarum

Fisiología / Azotobacter chroococum Rhizobium leguminosarum

Especies
Azúcares, alcoholes y sales Utilizan la glucosa, galactosa,
Fuente de inorgánicas para crecer. manosa, lactosa y maltosa, no
carbono producen acidez orgánica en
cantidades apreciables.

Nitrógeno; en vida libre fijan al Fijación del nitrógeno atmosférico a

Fijación menos 10 mg de N2 por gramo de través de la asociación simbiótica en
carbohidrato (glucosa) las raíces de varias especies de plantas
leguminosas
consumido.

Requerimiento de Aerobia Aerobia

oxígeno
 Requerimiento Molibdeno para fijar nitrógeno
que puede ser parcialmente Cobalto para su crecimiento.
reemplazado por vanadio.

Fuente de Utiliza nitrato y sales de amonio Sales de amonio, de nitratos y la

Nitrógeno y ciertos aminoácidos mayoría de aminoácidos

Características culturales de las especies Azotobacter chroococum y Rhizobium

leguminosarum
Tabla 9: Características culturales de las especies Azotobacter chroococum y Rhizobium leguminosarum

Azotobacter chroococum Rhizobium leguminosarum

-Los cultivos crecen a 30ºC de 24-48 h. -En agar extracto de levadura manitol, un
medio selectivo en el desarrollo de Rhizobium
-Son cultivables en medios sólidos como el leguminosarum es rápido y con tendencia a la
Agar Azotobacter y el Agar Ashby, ya que desiminación.
presentan una composición química similar,
con los nutrientes necesarios que requiere -Las colonias son esféricas, pueden ser
brillantes, semitranslúcidas, blancas,
Azotobacter para desarrollar colonias.
cremosas, gomosas o gelatinosas
-En medio selectivo como el Agar Ashby
-El color de la colonia varía desde blanco
Sacarosa se observan colonias pequeñas
opaco o lechoso hasta trasnlúcido oscuro.
opacas, convexas y de borde circular. La
mayoría de las cepas son mucoides, brillantes. -Algunas veces se presentan rosados

-En medios libres de nitrógeno produce un -Su tamaño varía de 4 – 5 mm

pimento café-negro no difusible, estos se
producen en presencia de benzoato. -Crecen a una temperatura de 25 – 30ºC
durante 3 – 5 días.
-Produce también pigmentos grises-café en
medios adicionados con 0.2% de gluconato.

-Presenta colonias mucosas opacas,

inicialmente el color del pigmento es claro y
brillante, pero a medida que la colonia se
desarrolla se torna de color café-oscuro, la
fuente principal de carbono es el manitol.
PIGMENTACIONES EN AGAR ASHBY DE DIFERENTES ESPECIE DEL
GÉNERO AZOTOBACTER

Tabla 10: Colores de pigmentos solubles en agua producidos por bacterias del género Azotobacter. Fuente: Holt,
2000
 Rhizobium leguminosarum en medio TY y Agar levadura manitol

Agar levadura manitol (ALM) o Agar

Medio TY: YMA

Importancia de las especies Azotobacter chroococum y Rhizobium leguminosarum

Tabla 11: Importancia de las especies Azotobacter chroococum y Rhizobium leguminosarum

Azotobacter chroococum Rhizobium leguminosarum

-Por ser un microorganismo diazótrofo (es capaz de
convertir el dinitrógeno atmosférico, N2, a amonio,
NH4 mediante la acción de la enzima nitrogenasa), se
utiliza como biofertilizante.
-En presencia de estas bacterias, las le-guminosas
pueden crecer en suelos que no tienen nitrato o
amonio suficiente para un desarrollo normal, por ello
los rizobios pueden ser utilizados en lugar de abonos

-También sintetiza sustancias estimuladoras del-El Nitrogeno es el nutriente más común-mente

deficitario en muchos suelos del mundo y el más
crecimiento vegetal, tales como, vitaminas y
comúnmente agregado al suelo. La fertilización
hormonas vegetales que intervienen directamente con
nitrogenada a través de fertilizantes tiene fuertes im-
el desarrollo de la planta. pactos medioambientales. En cambio la fijación de
Nitrogeno por estas bacterias es muy beneficiosa
-Capacidad de biodegradar compuestos tóxicos y para el ambiente
contaminantes.

-Metaboliza compuestos fenólicos que se encuentran

en aguas residuales procedentes de la extracción de
aceite de oliva, estos ácidos tienen un efecto
antibacterial, fitotóxico y generan coloración a las
aguas residuales, debido a esto son compuestos con
alta carga contaminante para el ambiente.
-Tiene la capacidad de degradar plaguicidas
cloroaromáticos contaminantes como el endosulfán
por medio de enzimas deshalogenasas, dioxigenasas e
hidroxilasas.

SIMBIOSIS: Diferenciación del simbiosoma

Rhizobium se distribuye por el mismo a través de los canales de infección, o a través de
la división de células previamente infectadas. En un simbiosoma se pueden distinguir los
siguientes componentes:
1) Membrana peribacteroidea (mpb):

 Está envoltura es absolutamente necesaria ya que sirve de intermediario

de señales y nutrientes entre la bacteria y la planta.
 Su origen es en la porción de la membrana plasmática vegetal que rodea a
Rhizobium durante la invasión.
 Se ha podido determinar que en el simbiosoma se acumula Ca2+ y que
además participa en la regulación de protein–quinasas de membrana que
controlan el transporte de malato y amonio a través de la mpb.

2) Fluido peribacteroideo (fpb):

 Definido como el material

soluble existente entre la
mpb y el bacteroide,
mantiene en contacto la
superficie de ambos,
estableciendo una zona
que permite la interacción.

3) Bacteroide:

 La diferenciación de los bacteroides fue

observada por primera vez por Beijerinck en
1888.
 Adquieren la forma de “Y”.
 Apareciendo nódulos determinados y nódulos no
determinados
Ciclo infectivo de Rhizobium
1. Rhizobium libre.
2. Rhizobium atraído por el pelo radical.
3. Inicio de la infección por Rhizobium en el pelo radical.
4. Cayado del pastor (pelo radicales infectados por Rhizobium
5 y 6. El cordón de infección de Rhizobium invade la matriz de células corticales de la
leguminosa en la raíz.
7.Se reproducen en células haploides de la raíz y pierde su pared celular, produce
auxina.
8. Se produce hipertrofia radical y aparece el nódulo.
9.Los rizobios sin pared (Bacteroide) en las células corticales del nódulo fijan nitrógeno.
10.El nódulo con leghemoglobina fija N2.

Etapas de la formación de Nódulos:

Las etapas en la infección y desarrollo de nódulos incluyen:
1.- Reconocimiento: de la simbiosis efectuada y adherencia de las bacterias a los
pelos radicales.
2.- División: del pelo radical y formación por parte de la bacteria de un tubo de
infección.
 3.- Desplazamiento: hacia la raíz principal a través del tubo de infección.
4.- Aparición: de las células bacterianas deformen, llamadas bacteroides dentro
de las células de la planta y desarrollo de estado de fijación de Nitrógeno.
5. Proceso continuado de división de las células bacterianas y vegetales y
formación del nódulo radical maduro.

IV. Bibliografía:

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 PRESCOTT, L. HARLEY, J; KLEIN, D. Microbiología. 2009. 7ma Edición. Edit.
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 http://bibliotecadigital.univalle.edu.co/bitstream/10893/10176/1/7720-
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 https://es.slideshare.net/HansJc/familia-pseudomonadaceae-genero-
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ento%20de%20los%20Rhizobium%20simbiontes%20radicular....pdf?sequence=
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