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Factores de Virulencia Candida PDF
Factores de Virulencia Candida PDF
net/publication/286816593
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Laura Castrillon
Metropolitan Autonomous University
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Artículo de revisión
Laura Estela Castrillón Rivera,* Alejandro Palma Ramos,* Carmen Padilla Desgarennes**
RESUMEN
pdf elaborado
La incidencia cada vez mayor de infecciones intrahospitalarias por Candida por en
y su asociación medigraphic
individuos susceptibles que cursan con
ciertas inmunodeficiencias hacen posible que estos microorganismos, considerados comensales, se vuelvan patógenos. Conocer los
factores de virulencia del microorganismo hace posible determinar, de manera más precisa, cómo se modifica la relación que establece
con su huésped una vez que los mecanismos de resistencia se han deteriorado. Los principales factores de virulencia asociados con
Candida se relacionan con su dimorfismo, secreción enzimática, cambio de fenotipo, expresión diferencial de genes en respuesta al
ambiente, síntesis de adhesinas y su capacidad para formar biopelículas. En este trabajo se presenta una revisión de la descripción de
estos factores y cómo éstos se relacionan con el proceso infeccioso.
Palabras clave:Candida, factores de virulencia, morfogénesis, adhesinas, enzimas, biopelículas.
ABSTRACT
The higher incidence of intrahospitalary infections by Candida and its association in susceptible individuals that course with certain
immunodeficiency states make possible that these microorganisms considered commensals become pathogens. To know the virulence
factors of this microorganism allows to determine in a more precisely way how the relationship that it establishes with the host is modified
once the resistance mechanisms have been deteriorated. The main virulence factors associated with Candida are related to dimorphism,
enzymatic secretion, phenotype change, differential gene expression to environmental response, adhesions synthesis and their ability to
form biofilms. In this work we present a review of the description of these factors and how they are related to the infection process.
Key words: Candida, virulence factors, morphogenesis, adhesins, enzymes, biofilms.
C
andida sp son organismos comensales en el ocasionar candidiasis gastrointestinal o diseminación
intestino de individuos sanos; se ha visto hematógena.1
que están presentes universalmente. La Candida albicans es un microorganismo muy versátil,
colonización por Candida albicans puede por su capacidad para sobrevivir como comensal en
llevar a la infección sistémica cuando el huésped tiene varios sitios anatómicamente distintos (intestino,
varios factores de riesgo, como el uso de antibióticos cavidad oral y vagina), y puede causar enfermedad
de amplio espectro, esteroides u otros agentes cuando se le presenta la oportunidad. La limitación
inmunosupresores, diabetes mellitus, SIDA, depresión por nutrientes y la competencia entre bacterias y
de las funciones fagocíticas o alteraciones locales del hongos (microbiota) en las superficies mucosas
sistema gastrointestinal. Estas situaciones pueden proporcionan una presión selectiva que ocasiona la
eliminación de los microorganismos menos adaptados.
* Departamento de sistemas biológicos, Universidad Autónoma
Candida albicans tiene varios atributos de virulencia
Metropolitana Xochimilco. para colonizar el huésped y ocasiona daño de forma
** Centro Dermatológico Pascua. directa, al activar, resistir o desviar los mecanismos
Correspondencia: Dra. Laura Estela Castrillón Rivera. Departamen- de defensa del mismo. Los factores de virulencia
to de sistemas biológicos, Universidad Autónoma Metropolitana expresados o requeridos por el microorganismo para
Xochimilco. Calzada del Hueso 1100, colonia Villa Quietud, CP
04960, México, DF. E-mail: lcrivera@correo.xoc.uam.mx causar infección pueden variar según el tipo, el sitio y
Recibido: noviembre, 2004. Aceptado: diciembre, 2004. la naturaleza de las defensas del huésped.2
El delicado equilibrio entre el huésped y el hongo
patógeno puede convertirse en una relación parásita
y resultar en enfermedad grave. Los hongos no son hifa es uno de los atributos de virulencia que capacitan
participantes pasivos en el proceso infeccioso. La a Candida albicans para invadir los tejidos. Se ha
interacción entre el hongo y el medio ambiente está comprobado que el crecimiento de forma filamentosa
afectada por su variabilidad antigénica, el cambio tiene ventajas sobre la levadura en la penetración de
fenotípico y la transición dimórfica. la célula o tejido, y aunque la hifa puede ser idónea
Existen diversos factores potenciales de virulencia, para abrir la brecha entre las barreras tisulares, gracias
como la morfología celular, la actividad enzimática a que su punta es el sitio de secreción de enzimas
extracelular, el cambio fenotípico y los factores de capaces de degradar proteínas, lípidos y otros
adhesión, que favorecen la formación de biopelículas. componentes celulares, ésta facilita su infiltración en
A continuación se describen, de manera indepen- sustratos sólidos y tejidos.3 En general, las levaduras
diente, cada uno de estos factores. predominan durante la colonización de la mucosa en
el huésped sano, pero la hifa emerge cuando las
MORFOGÉNESIS defensas de éste declinan. Por lo tanto, ambas formas
de crecimiento podrían desempeñar un papel
Candida albicans es polimórfica, ya que existe en forma importante en la patogénesis y encontrarse en muchos
de levadura (blastosporas) o como filamentos microambientes diferentes en el huésped.4
(pseudohifa o hifa). La morfogénesis se refiere a la La hifa se produce en el estado temprano de la
transición entre las levaduras (unicelulares) y la colonización, mientras que las levaduras se observan
forma de crecimiento filamentosa del microorga- comúnmente durante la enfermedad o en el tejido
nismo, que puede convertirse de forma reversible a necrótico, justo cuando el crecimiento de la hifa se
células de levadura, con crecimiento de hifa o revierte por el suero a la forma de levadura y las
pseudohifa. proteínas se degradan por proteinasas in vivo e infiltran
pdfLa conversión
elaborado porde la forma unicelular de levadura
medigraphic tejidos haciéndolos necróticos. En otras palabras, la
al crecimiento filamentoso es esencial para la morfogénesis de levadura a hifa se revierte conforme
virulencia de Candida albicans. La morfogénesis, por sí avanza la infección y quizá sea el resultado de cambios
misma, está bajo múltiples controles y rutas de temporales en señales que el hongo recibe de su medio
transducción de señales. La transición de levadura a ambiente (figura 1).
Activación de genes de
polimorfismo y señalización
celular
También se ha propuesto que existe asociación entre infección crónica que semejen la enfermedad en
la morfogénesis y la virulencia en los hongos humanos y por ello es importante reconocer que un
dimórficos, ya que un morfotipo existe en el medio modelo experimental inapropiado puede llevar a
ambiente o durante el comensalismo y el otro, en el conclusiones erróneas, en relación con los factores de
huésped durante el proceso de la enfermedad.5 Sin virulencia de los hongos.11
embargo, se ha sugerido que es el cambio de la forma La morfogénesis de levadura a hifa es reversible in
de levadura a hifa (morfogénesis) y no la forma del vivo y se controla por redes reguladoras que modifican
hongo lo que es importante para la virulencia.6 otros aspectos de la biología de Candida albicans.
Otro tipo de pruebas que apoyan a la morfogénesis Durante la infección evolucionan distintas fases
como factor de virulencia es que las lesiones clínicas a morfogenéticas
pdf elaborado porquemedigraphic
pueden ser influidas por microam-
menudo se marcan por la existencia de células de bientes locales en el huésped, éstas son:4
varias morfologías, por lo que es legítimo asumir que 1) Episodios tempranos en la colonización por
todas las formas del hongo son necesarias para células de levadura que pueden afectar su decisión
mantener la infección por Candida albicans. de generar un tubo germinativo hasta la formación
Existen tres hallazgos que sustentan la hipótesis de de la hifa.
que la filamentación se requiere para la virulencia por 2) Episodios subsecuentes que promueven el
este hongo:7 crecimiento de la hifa extendida.
1. La formación de filamentos se estimula a 37 ºC 3) En las fases tardías de la infección, las células
en presencia de suero, con pH neutro. necróticas a menudo se acompañan de la transición
2. Los filamentos recién formados (llamados tubos de hifa a levadura y generan células en gemación.
germinativos) son más adherentes a las células Estas fases implican cambios sutiles en el ciclo
mamíferas que las levaduras y la adherencia es el celular, cambios importantes en la polaridad de
requisito para la penetración tisular. crecimiento, alteraciones en la composición de la pared
3. Las levaduras capturadas por macrófagos celular y modulación de factores de virulencia. De ahí
producen filamentos y son capaces de lisar a éstos, que las rutas morfogenéticas se integran con rutas de
por lo tanto, la formación de filamentos es una forma señalización que controlan otros procesos.
de evadir los mecanismos de defensa del huésped.8,9 Por lo que se refiere a la respuesta del huésped ante
Se han realizado varios intentos para demostrar la el dimorfismo de Candida, se ha observado que la
relación que existe entre la forma filamentosa de capacidad de Candida albicans para cambiar entre la
Candida albicans con su virulencia, pero hasta ahora forma de levadura saprofita y la forma filamentosa
no hay una demostración inequívoca acerca de este patogénica del hongo permite a las células dendríticas
punto, aunque hay datos de que la virulencia se atenúa (responsables de la inmunidad innata) detectar una
cuando se obtienen mutantes que se confinan a la forma específica, al ocasionar respuestas dependientes
forma de levadura o filamentosa. Por ejemplo, cepas de células T cooperadoras, protectoras o no protec-
mutantes de Candida albicans incapaces de formar hifas toras. Lo anterior, en virtud de que dichas células
son generalmente avirulentas en modelos de ratón con poseen distintos tipos de receptores y a que contri-
candidiasis diseminada. Por lo tanto, se sugiere que buyen a disparar patrones diferentes de reactividad,
los defectos de la cepa, para formar hifas, podrían observados de forma local en respuesta al desafío por
reducir la virulencia del hongo.7-10 Candida albicans.12 Estos hallazgos ofrecen nuevas
La correlación de la morfogénesis del hongo con la claves para interpretar los mecanismos de virulencia
virulencia se basa en los estudios realizados en de los hongos: más que el dimorfismo, la inclusión de
animales; no obstante, el análisis de la virulencia diferentes tipos de receptores en las células dendríticas
fúngica se limita por los modelos inadecuados puede seleccionar el modo de internalización del
comparados con la enfermedad en humanos. Una hongo y de la presentación antigénica, lo que
limitante importante para poder llegar a estas condiciona las respuestas de las células T cooperadoras
conclusiones es que aún no existen los modelos de y favorece el saprofitismo o la infección 2 (figura 1).
Genética molecular del polimorfismo de Candida SAP en Candida albicans proporciona al hongo un
Candida albicans crece como levaduras o como hifas. sistema proteolítico eficiente y flexible que puede
La hifa es la forma de adaptación para la adherencia y garantizar su éxito como patógeno oportunista.3
penetración de los epitelios y células endoteliales. Se Se ha sugerido que las aspartil proteasas secretadas
identificó que el gen EFG1 en Candida albicans codifica desempeñan un papel importante en la patogénesis
para un regulador transcripcional que tiene de C. albicans, ya que se han obtenido mutantes con
homologación con las proteínas PHD1 y StuA, que son varios genes SAP alterados y se ha demostrado que
las proteínas que controlan la morfogénesis en SAP1-3 y SAP6 son importantes en la infección oral,
Saccharomyces cerevisiae y Aspergillus nidulans, respecti- mientras que SAP1 y SAP2 lo son en la candidiasis
vamente. Los estudios del EFG1 sugieren que es un vaginal. El papel de dichas enzimas es esencial en las
activador transcripcional y un represor esencial para infecciones de mucosas en las fases iniciales, pero no
la morfogénesis de la levadura, hifa y pseudohifa.1 cuando el hongo se ha infiltrado en los vasos
Los estudios bioquímicos que establecen las rutas sanguíneos. Asimismo, hay pruebas clínicas que
de transducción de señales, que activan la filamen- correlacionan la secreción de estas enzimas con la
tación de Candida albicans, concluyen que existen dos candidiasis vaginal.1
rutas principales, una es la cascada de cinasas MAPK
y la segunda está representada por el factor Caracterización de las aspartil proteinasas de Candida
transcripcional EFG1p. Las mutantes que les faltan a albicans
ambas rutas no son filamentosas y son avirulentas.13 Los diez genes SAP codifican pre y proenzimas de
aproximadamente 60 a 200 aminoácidos, mayor que
ENZIMAS la proteína madura. El segmento señal N-terminal es
fragmentado por una señal peptidasa en el retículo
Las
pdf enzimas
elaboradopueden proponerse como determinantes
por medigraphic endoplásmico. El propéptido se remueve para activar
de virulencia en Candida, ya que tienen la capacidad la enzima por una proteinasa semejante a subtilisina
de romper polímeros que proporcionan nutrientes Kex-2 en el aparato de Golgi, antes de que sea
accesibles para el crecimiento de los hongos, así como transportada, vía vesículas, hacia la superficie de la
de inactivar las moléculas útiles en la defensa del célula para la secreción o glucosilación. Se sabe que
organismo. Las principales enzimas extracelulares existen otros procesos alternativos para la activación
relacionadas con la patogénesis de Candida son las de las SAP de C. albicans, como la autoactivación que
proteasas, fosfolipasas y lipasas. ocurre extracelularmente para SAP1, SAP2, SAP3 y
SAP6 a ciertos valores de pH.14 Las proteínas maduras
Proteasas contienen una secuencia de motivos típicos de todas
En Candida albicans se han descrito varios miembros las aspartil proteasas, que incluyen los dos residuos
de una gran familia de enzimas de secreción aspártico aspartato conservados en el sitio activo. Es posible que
proteinasas (SAP), que han sido bastante estudiadas los residuos cisteína conservados mantengan la
en estos hongos. En particular, las aspartil proteinasas estructura tridimensional de las enzimas.15
secretadas (Saps) son codificadas por los genes de la Las proteínas que comprenden la familia SAP no
familia SAP, que cuenta con diez miembros y que está se limitan sólo a Candida albicans, ya que se ha
regulada diferencialmente; además, sus distintos demostrado su presencia en C. dubliniensis, C. tropicalis
miembros se expresan bajo una variedad de condi- y C. parapsilosis.16,17,18 La presencia de los genes de la
ciones de crecimiento de laboratorio y durante las familia SAP es única en las especies patógenas de
infecciones experimentales in vivo e in vitro. La contri- Candida y están ausentes en la levadura no patógena
bución de las aspartil proteinasas secretadas a la S. cerevisiae, lo cual apoya que estas proteinasas están
patogénesis de Candida albicans se ha demostrado con implicadas en su virulencia.
el uso de mutantes deficientes en SAP e inhibidores Aunque las consecuencias de la secreción de estas
de proteasas. La presencia de los genes de la familia enzimas durante las infecciones en humanos aún no
se conocen con precisión, los estudios in vitro, en Los antígenos SAP1 a SAP3 se encontraron en las
animales y en humanos, han implicado a las células de levadura e hifa, mientras que los antígenos
proteinasas de C. albicans en una de las siguientes SAP4 a SAP6 se apreciaron sobre todo en las células
formas:1 9 de hifa que están en contacto muy estrecho con las
1. Correlación entre la producción de SAP in vitro y células del huésped, en particular con leucocitos y
la virulencia. eosinófilos.22
2. Degradación de proteínas humanas y análisis La presencia de los genes SAP indica que diferentes
estructural al determinar la especificidad del sustrato proteinasas pueden tener distintas acciones en las
de SAP. células del huésped y en los tejidos durante el proceso
3. Asociación de la producción de SAP con otros infeccioso, lo cual
pdf elaborado por sugiere que su expresión puede ser
medigraphic
procesos de virulencia de C. albicans. regulada de manera diferencial bajo diversas
4. Producción de la proteína SAP y reacción condiciones de laboratorio y durante el proceso
inmunitaria en infecciones animales y humanas. infeccioso. En este sentido, se ha demostrado que bajo
5. Expresión de genes SAP durante las infecciones condiciones de laboratorio la principal enzima
por Candida. proteolítica expresada por C. albicans es SAP2, que está
6. Modulación de la virulencia de C. albicans por regulada por un mecanismo de retroalimentación
inhibidores de aspartil proteinasas. positiva donde los péptidos resultantes de su acción
7. Uso de mutantes de SAP para analizar la inducen su síntesis.23 En cambio, los genes de SAP1 y
virulencia de C. albicans. SAP3 se expresan diferencialmente durante el cambio
Las proteínas SAP tienen funciones especializadas de fenotipo en ciertas cepas, 24 mientras que la
durante el proceso infeccioso e incluyen la digestión expresión de SAP8 está regulada por la temperatura.25
de moléculas proteínicas para adquirir nutrientes, Se ha demostrado que las diferentes Saps tienen un
digerir o distorsionar las membranas del huésped y valor de pH óptimo para su actividad. La SAP2 actúa
facilitar la adhesión, la invasión a tejidos y la digestión sobre todo en valores de pH ácidos (cercanos a 4.0),
de moléculas del sistema inmunitario del huésped las Saps 4 a 6 son activas al pH fisiológico y la SAP3 al
para evitar o resistir el ataque antimicrobiano de éste. pH de 2.0. Esta característica proporciona a C. albicans
Aunque la actividad proteolítica extracelular se un rango muy amplio de actividad proteolítica, que
descubrió a mediados de la década de 1960,20 no fue va de 2.0 a 7.0, lo que es esencial para la adaptación
sino hasta el inicio de 1990 cuando los métodos específica hacia diferentes condiciones ambientales del
moleculares se introdujeron al campo de Candida y los huésped.26
científicos comenzaron a comprender la complejidad La contribución de los genes de la familia SAP en
genética de este hongo, demostrando diez genes SAP la manifestación de la enfermedad se ha estudiado por
que codifican para estas enzimas. Mientras se hacían RT-PCR, cepas mutantes y por métodos inmunoquí-
esfuerzos por recolectar datos de los genes SAP se micos. Con estos estudios se ha demostrado que las
despertó el interés hacia su papel y función durante Saps 1 a 6 se requieren para la enfermedad invasiva,
el proceso infeccioso. mientras que en modelos experimentales de vaginitis
Es claro que hay diferencias temporales y espaciales la SAP2 se necesita para el desencadenamiento de la
en la expresión de los genes SAP, cada uno de los cuales enfermedad.
desempeña diferente papel en el establecimiento de En modelos in vitro de epidermis humana se midió
la enfermedad y en la invasión de los tejidos.21 la expresión temporal de Saps por la técnica de RT-
Se investigó el papel de las aspartil proteinasas PCR. El orden de expresión fue SAP1, SAP2, seguido,
secretadas durante la invasión de tejidos y su de forma secuencial, por SAP8, SAP6 y SAP3. La
asociación con las diferentes morfologías de C. albicans. expresión tuvo correlación con la invasión del tejido,
Se demostró que dentro de las primeras 72 horas es decir, invasión temprana (SAP1 y 2), penetración
postinfección, las proteinasas SAP1, SAP2, SAP4, extensiva (SAP8) y crecimiento extensivo de la hifa
SAP5 y SAP9 fueron los principales genes expresados. (SAP6).
Correlación entre morfogénesis y secreción enzimática a SAP6 reducen su capacidad invasiva, aunque pue-
La pared celular es el punto de contacto entre Candida dan lograr la transición a hifa. Por lo tanto, las cepas
albicans y su huésped. Durante la morfogénesis de que producen hifas pero que carecen de las proteinasas
levadura a hifa ocurren cambios distintos en la asociadas con este morfotipo son menos invasivas.
arquitectura de la pared, como resultado de la Esto se demostró con mutantes deficientes de uno o
regulación de las enzimas biosintéticas de la pared de ambos genes y de su interacción con el epitelio oral
celular. En resumen, los genes que codifican a las y con neutrófilos polimorfonucleares, que en
enzimas de secreción aspartil proteinasas se regulan comparación con la cepa silvestre, las mutantes cph,
diferencialmente durante el desarrollo de la hifa: los efg1 y las cph/efg1 fueron incapaces de producir hifas,
genes SAP4 a 6 se activan cuando la formación de la de dañar a las células, de expresar los genes SAP1 y
hifa se induce en un medio que contiene polipéptidos SAP3 y de disminuir la expresión de SAP4, que es un
como única fuente de nitrógeno. También la hifa de C. gen asociado con la morfología de hifa. Con estos
albicans es capaz de producir rompimientos en las resultados se concluye que la virulencia reducida de
superficies, lo que quizás promueva la penetración del mutantes deficientes en la formación de hifa no sólo
hongo en células y membranas endoteliales del se debe a esta propiedad, sino a la expresión
huésped. Esta propiedad (conocida como tigmotro- modificada de los genes SAP, que por lo general se
pismo) depende del crecimiento de la hifa. La asocia con esta morfología. Por lo tanto, estos estudios
morfogénesis de levadura a hifa está muy relacionada ofrecen una prueba de la regulación combinada de
con otros factores de virulencia, que incluyen la factores de virulencia, como el polimorfismo y la
biosíntesis de la pared celular, la adhesión, la pro- expresión de genes SAP.29
ducción de enzimas hidrolíticas extracelulares y el Las principales características de estas enzimas se
tigmotropismo. presentan en el cuadro 1.
pdfLa demostración
elaborado de los diferentes patrones de
por medigraphic
expresión de las distintas Saps en la levadura e hifa, Posibles blancos de las proteinasas de Candida
así como en células que han cambiado su fenotipo A nivel más básico, un papel de las Saps de Candida es
indican que dicha expresión es un proceso altamente la digestión de proteínas para proporcionar nitrógeno
regulado; sin embargo, no aseguran si este proceso a las células; sin embargo, las Saps también pueden
contribuye a la patogenicidad de C. albicans in vivo. haberse adaptado y participar en funciones de
Por tal motivo, es decisivo saber si la expresión dife- virulencia. Por ejemplo, podrían contribuir a la
rencial también ocurre durante el proceso infeccioso, adhesión en tejidos del huésped y a la invasión por
para lo cual se han utilizado modelos de infección in degradación o distorsión de las estructuras en la
vitro e infecciones experimentales en animales. Con superficie de las células del huésped o por destrucción
estos estudios se demostró que las SAP1 a SAP3 son de moléculas del sistema inmunitario del huésped
las proteinasas principales expresadas durante las para evitar o resistir el ataque antimicrobiano.
infecciones superficiales,27 en contraste con las SAP1 La matriz extracelular y las proteínas de superficie
a SAP4, que se expresan sobre todo en la enfermedad del huésped, como queratina, colágena, laminina,
sistémica.28 Estos hallazgos se apoyan en el uso de fibronectina y mucina, son degradadas de manera
cepas mutantes de enzimas específicas en diferentes eficaz por SAP2. Varias proteínas de defensa también
modelos de infección. son susceptibles de la hidrólisis por SAP, como la
Las mutantes de EFG1 (gen del factor transcrip- lactoferrina salival, el inhibidor de proteinasa α-
cional Efg1) tienen capacidad reducida para formar macroglobulina, las enzimas del estallido respiratorio
hifas. También se asocian con la capacidad limitada del macrófago y casi todas las inmunoglobulinas, que
de sintetizar las enzimas SAP4 a SAP6, y se ha incluyen la IgA de secreción, la cual es resistente a
demostrado que las mutantes que carecen de SAP1 a muchas proteinasas bacterianas.30
SAP3 tienen propiedades invasivas comparables con La SAP2 de Candida también puede actuar en las
las cepas silvestres. En cambio, las mutantes de SAP4 cascadas proteolíticas del huésped, como los
Característica Sap1 Sap2 Sap3 Sap4 Sap5 Sap6 Sap7 Sap8 Sap9
genes de esta familia. El dominio de repetición variable tanto O- y N- en el hongo. La manana es el principal
incluye una secuencia interna de cinco aminoácidos: constituyente de la pared celular.
Val-Ala-Ser-Glu-Ser (VASES).
Los genes Als están regulados diferencialmente en FORMACIÓN DE BIOPELÍCULAS
C. albicans por condiciones fisiológicas relevantes,
como cambios en el medio de cultivo (Als1), Las especies de Candida se reconocen como los
morfología (Als3/Als8) y fase de crecimiento.46,49 principales agentes de infecciones adquiridas en el
La expresión de los genes Als se ha realizado por hospital. Son el tercer o cuarto patógeno aislado de
detección inmunohistoquímica in vivo de las sangre que sobrepasa la frecuencia de los bacilos
proteínas en la superficie de Candida albicans en gramnegativos. Su aparición como patógeno
pdf elaborado por52medigraphic
tejidos de enfermedad diseminada en ratón. Con esta nosocomial es importante, ya que es un factor de riesgo
metodología se demostró que las proteínas Als se asociado con los procedimientos médicos modernos,
distribuyen en la superficie celular, más que en sitios sobre todo con el uso de fármacos inmunosupresores
específicos. o citotóxicos, de antibióticos potentes que suprimen
la flora bacteriana normal y de los dispositivos
Hwp1p implantados de varias clases. Casi siempre, los dispo-
El gen Hwp1 codifica una manoproteína de la sitivos, como catéteres intravasculares o urinarios y
superficie externa que se cree se orienta por su tubos endotraqueales, se asocian con infecciones y se
dominio amino terminal expuesto hacia fuera. El detecta la formación de biopelículas en su superficie.53
carboxilo terminal se integra de manera covalente con Otros dispositivos, como válvulas cardiacas,
el β-glucano de la pared celular. La proteína marcapasos y reemplazos de articulaciones (cadera o
codificada por este gen (o Hwp1) sirve como sustrato rodilla), son susceptibles de infección por Candida,
de las transglutaminasas y, por lo tanto, la unión de generalmente durante el tiempo de su colocación.
la hifa de C. albicans a las células epiteliales de la boca La mayor capacidad de C. albicans para formar
debería ser estable y covalente y no revertirse por el biopelículas en estas superficies es la razón por la que
uso de agentes que interrumpen la unión no esta especie es más patogénica que las que son menos
covalente. capaces de formar estas estructuras, como C. glabrata,
C. tropicalis, C. parapsilosis y C. keyfr.54
Int1p La percepción de los microorganismos como formas
Candida albicans se une a varios ligandos de las unicelulares de vida se basa en el modo de crecimiento
proteínas de la matriz extracelular, que incluyen como cultivo puro; sin embargo, la mayor parte de los
fibronectina, laminina y colágenas tipo I y IV. Las cepas microbios persisten unidos a las superficies dentro de
que tienen deleción en los genes Int1 son menos un ecosistema estructurado, como biopelículas y no
virulentas o se adhieren con más lentitud a las líneas como organismos libres en flotación (planctónico). Una
celulares epiteliales. También tienen deficiencias en la biopelícula es una comunidad de microorganismos
filamentación en su crecimiento en leche-tween y agar unidos irreversiblemente a una superficie que contiene
Spider, por lo tanto, el gen Int1 juega un papel matriz exopolimérica y que muestra propiedades
importante en la adherencia y filamentación de C . fenotípicas distintivas.55 En las biopelículas, las células
albicans.50 desarrollan características fenotípicas que son dife-
rentes de sus contrapartes planctónicas, como el
Mnt1p incremento en la resistencia a los agentes antimicro-
Las cepas de C. albicans que tienen deleción en el gen bianos y la protección de las defensas del huésped.56
α-1,2 manosil tranferasa (Mnt1) son menos capaces Las biopelículas formadas por C. albicans están
de adherirse in vitro y son avirulentas.51 La proteína compuestas por una capa de células en forma de leva-
que codifica a este gen o Mnt1p es una proteína de dura que se adhieren a la superficie en la parte de
membrana tipo II que se requiere para la manosilación arriba. Esta capa la forman las células filamentosas en
forma de hifa, rodeadas por una matriz extensiva densa red de células de levadura e hifas embebidas
exopolimérica.57,58 El material extracelular producido dentro de un material extracelular que demuestra
por C. albicans en esta biopelícula contiene carbohidratos, heterogeneidad espacial y la arquitectura típica de
proteínas y otros componentes desconocidos y difiere microcolonias, con ramales de canalizaciones de
en la composición del material extracelular producido agua.65 La formación de biopelículas se manifiesta en
por las células planctónicas (de flotación libre). 59 tres fases: temprana (0 a 11 horas), intermedia (12 a 30
Se han distinguido diversos sistemas para estudiar horas) y madura (38 a 72 horas) (figura 2). La
las propiedades de la formación de biopelículas en estructura detallada de las biopelículas, después de
Candida, como los modelos de crecimiento en discos 48 horas de incubación, consiste en una densa red de
de catéter, tiras de acrílico, placas de microtitulación levaduras, hifas y pseudohifas. La mezcla de leva-
y filtros de celulosa.60-64 El crecimiento se monitorea duras, hifas y material de matriz no se ha visto cuando
por ensayos colorimétricos, que dependen de la el organismo crece en medio líquido o en una super-
reducción de la sal de tetrazolio (técnica XTTx) o de la ficie de agar, lo que sugiere que la morfogénesis se
incorporación de 3H-leucina. Todos estos sistemas se dispara cuando un organismo hace contacto con la
realizan en condiciones estáticas de incubación; sin superficie y que las células de la capa basal pueden
embargo, el método de biopelículas perfundidas en tener un papel importante en el anclaje de la
fermentador permite el control preciso de la velocidad biopelícula a la superficie.66,67
de crecimiento.64 Las cepas mutantes de C. albicans, con defectos en
La formación de biopelículas de C. albicans s e las rutas de filamentación, son incapaces de formar
distingue por la adhesión inicial de las células de biopelículas tridimensionales, lo que indica que la
levadura, seguida por la germinación y formación de formación de hifa es importante para la formación,
microcolonias, filamentación, desarrollo de monocapa, desarrollo y mantenimiento de biopelículas.
proliferación
pdf elaboradoypormaduración. Con el uso de microscopía
medigraphic Hay dos consecuencias importantes y con
electrónica de barrido y confocal se han visualizado profundas implicaciones clínicas en la formación de
las biopelículas de C. albicans, que consisten en una biopelículas: el marcado aumento en la resistencia a
Figura 2. Fases de formación de biopelículas de Candida sp in vitro.74 La morfogénesis se activa cuando la levadura entra en contacto
con la superficie y la capa de las células basales. Tiene un papel importante de anclaje de la biopelícula a la superficie, siguiendo el orden:
adhesión temprana, crecimiento, proliferación y maduración.75
los agentes antimicrobianos y la protección contra las Las biopelículas crecen poco a poco porque los
defensas del huésped. nutrientes están limitados, lo que ocasiona dismi-
La resistencia clínica se define como la persistencia nución del metabolismo de los microorganismos. Con
o progresión de una infección, a pesar del tratamiento frecuencia, la lenta velocidad de crecimiento se asocia
antimicrobiano apropiado. La resistencia a antifún- con la adopción de diferentes fenotipos por los
gicos por biopelículas de Candida se demostró por microorganismos, como cambios en la cubierta celular,
primera vez en 1995, en ensayos de catéteres en disco.68 con lo cual se afecta la susceptibilidad del microor-
También se ha estudiado en biopelículas en celulosa, ganismo a los agentes antimicrobianos. Para
poliestireno, elastómero de silicón, poliuretano y comprobar si la velocidad de crecimiento es un
acrílicos de dentadura. Aunque las biopelículas de C. parámetro importante
pdf elaborado en la adquisición de resistencia
por medigraphic
albicans y C. parapsilosis son claramente resistentes a a los antifúngicos, se generaron biopelículas con
los nuevos triazoles (voriconazol y ravuconazol), hay diferentes velocidades de crecimiento y se comparó
reportes de actividad antibiopelículas de formula- la susceptibilidad a la anfotericina B de las células de
ciones con lípidos de anfotericina B y dos la biopelícula contra la de las células planctónicas que
equinocandinas, la micafungina y la caspofungina crecían a la misma velocidad. Se encontró que las
(inhibe la síntesis de β1,3 glucano, principal células de la biopelícula fueron resistentes al fármaco
componente estructural de las paredes celulares de a todas las velocidades de crecimiento probadas,
Candida). mientras que las planctónicas fueron resistentes sólo
Se han propuesto tres posibles mecanismos de a bajas velocidades de crecimiento.64,70 Por lo tanto, la
resistencia de las biopelículas a los fármacos y son: resistencia depende de otros factores, además de
1) Penetración restringida a través de la matriz de la forma de crecimiento.
la biopelícula. Dado que la resistencia a los antibióticos en las
2) Cambios de fenotipo que ocasionan dismi- biopelículas de C. albicans no puede atribuirse a la
nución del crecimiento o limitación de los nutrientes. exclusión por la matriz o a la lenta velocidad de
3) Expresión de genes de resistencia inducidos por crecimiento, quizá exista un mecanismo adicional,
el contacto con la superficie. como la expresión de genes inducidos por contacto,
Por lo que se refiere a la penetración restringida, se para adquirir otras propiedades y mediante el cual se
ha sugerido que la matriz extracelular excluye o limita adquiera la resistencia a los antibióticos.71
el acceso de los medicamentos a los organismos Los principales genes que contribuyen a la
profundos de la biopelícula. Muchos estudios indican resistencia de los medicamentos son los que codifican
que la matriz no forma una barrera para la difusión, a las bombas de eflujo multifármacos; su regulación
aunque para ciertos compuestos se retrasa la resulta en un fenotipo resistente a varios agentes.72 Se
penetración.69 determinó que cuando un microorganismo se une a la
Se ha propuesto que el glicocalix causa la dismi- superficie y forma una biopelícula expresa un fenotipo
nución de la difusión o secuestro de los antimicrobianos. alterado . C. albicans y C. dubliniensis poseen dos
Sin embargo, al disgregar las biopelículas, ajustar a diferentes tipos de bombas de eflujo: unión adenosin
una densidad celular y realizar la prueba de suscep- trifosfato cassette (ABC), transportadores que
tibilidad en las biopelículas preformadas, utilizando codifican los genes CDR (CDR1 y CDR2), y los
el ensayo XTTk, los resultados demostraron que las facilitadores codificados por los genes MDR. Ambos
biopelículas preformadas fueron intrínsecamente tipos de genes se regulan durante la formación y
resistentes a los antifúngicos y que las células móviles desarrollo de las biopelículas.65,73 Sin embargo, las
mantenían su fenotipo de resistencia después de la cepas mutantes que llevan deleción simple o doble de
resuspensión. Lo anterior sugiere que la integridad estos genes son susceptibles al fluconazol cuando
de la estructura de la biopelícula y el glicocalix crecen de forma planctónica, pero retienen su fenotipo
confieren efecto mínimo en la resistencia de las de resistencia cuando crecen en biopelículas.74 Por lo
células móviles. tanto, el mecanismo de resistencia es un proceso que
no puede explicarse por un solo tipo de mecanismo 7. Mitchell AP. Dimorphism and virulence in Candida albicans .
Curr Opin Microbiol 1998;1:687-92.
molecular.
8. Cutler JE. Putative virulence factors of Candida albicans. Annu
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CONCLUSIÓN 9. Gow NAR, Alistair JPB, Odds FC. Fungal morphogenesis and
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10. Haynes K. Virulence in Candida species. Trends Microbiol
Los factores que contribuyen a la patogénesis de C . 2001;9(12):591-6.
albicans incluyen la morfogénesis (transición entre las 11. Latgé JP, Calderone R. Host-microbe interactions: fungi
células de levadura unicelulares y las formas de invasive human fungal opportunistic infections. Curr Opin
Microbiol 2002;5:355-8.
crecimiento filamentosas), las enzimas secretadas aspartil 12. Romani L, Bistoni F, Pucceti P. Fungi, dendritic cells and
proteasas (SAP) y fosfolipasas y las biomoléculas de receptors: a host perspective of fungal virulence. Trends
reconocimiento del huésped (adhesinas), que le permiten Microbiol 2002;10(11):508-14.
13. Lo HJ, Kohler JR, DiDomenico BK, Loebenberg D, Cacciapuoti
iniciar el proceso de formación de biopelículas. A, Fink GR. Nonfilamentous C. albicans mutants are avirulent.
Asimismo, el cambio de fenotipo se acompaña por Cell 1997;90:939-49.
alteraciones en la expresión de antígenos, morfología 14. Koelsh G, Rockwell N, Wang GT, Krafft GA, Fuller RS.
Enzymatic characteristics of secreted aspartic proteases of
colonial y afinidades de C. albicans a los tejidos.
Candida albicans . Biochim Biophys Acta 2000;1480:117-31.
La información experimental de la contribución de 15. Hube B. Candida albicans secreted aspartic proteinases. Curr
estos factores de virulencia ha determinado que su Top Med Mycol 1996;7:55-69.
participación individual no es suficiente para explicar 16. Gilfillian GD, Sullivan DJ, Haynes K, Parkinson T, Coleman
DC, Gow NA. Candida dubliniensis: phylogeny and putative
los mecanismos de daño en el huésped, sino que existe virulence factors. Microbiology 1998;144:829-38.
una regulación combinada entre ellos. Esto se 17. Zaugg C, Borg-Von Zepelin M, Reichard U, Sanglard D, Monod
demostró con el polimorfismo y la expresión genética M. Secreted aspartic proteinase family of Candida tropicalis.
Infect Immun 2001;69:405-12.
para las aspartil proteasas. 18. Monod M, Tongi G, Hube B, Sanglard D. Multiplicity of genes
pdfLos estudiospor
elaborado quemedigraphic
se realizan hoy en día en relación encoding secreted aspartic proteinases in Candida species.
con la expresión genética de los factores de virulencia, Mol Microbiol 1994;13:357-68.
19. Naglik JR, Challacombe SJ, Hube B. Candida albicans
en función de diferentes condiciones ambientales,
secreted aspartyl proteinases in virulence and pathogenesis.
permitirán entender con mayor precisión cómo se va Microbiol Mol Biol Rev 2003;67(3):400-28.
modificando la actividad biológica de Candida para 20. Staib F. Serum-proteins as nitrogen source for yeast like fungi.
favorecer la adhesión o penetración y, en consecuencia, Sabouraudia 1965;4:187-93.
21. Schaller M. Invasion of Candida albicans correlates with
modificar su papel como comensal para transformarse expression of secreted aspartic proteinases during experimen-
en microorganismo patógeno. tal infection of human epidermis. J Invest Dermatol
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22. Felk A, Kretschar M, Albretch A, Schaller M, Beinhauer S,
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5. Kobayashi SD, Cutler JE. Candida albicans hyphal formation Microbiology 1998;144:2731-7.
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Microbiol 2002;4:127-37. Microbiol 1998;28:543-54.
EVALUACIÓN
4. ¿Cuál de los siguientes hallazgos que apoyan que 7. El gen EFG1 de Candida:
la filamentación es un factor de virulencia es a) Codifica para las enzimas proteolíticas (Sap)
incorrecto? b) Codifica para un regulador transcripcional que
a) La virulencia se incrementa con mutantes que no participa en la morfogénesis
forman hifa c) Es el principal componente de virulencia de
b) Los tubos germinativos son más adherentes Aspergillus nidulans
c) La fagocitosis de hifas induce la muerte de los d) Se expresa únicamente en infecciones orales
macrófagos e) Codifica para las adhesinas que participan en la
d) La presencia de suero induce la formación de formación de biopelículas
filamentos
e) La virulencia se atenúa con mutantes que no 8. Las enzimas aspartil- proteasas (o Saps) de Candida:
forman hifas a) Son reguladas por cinco genes
b) Se expresan de forma secuencial en infecciones
5. Las diferentes fases de la morfogénesis de Candida gastrointestinales
implican los siguientes episodios, excepto: c) Las mutantes de estos genes han demostrado que
c) Es una proteína de membrana tipo II que se c) Consta de cuatro fases: temprana, intermedia,
requiere para la manosilación madura y tardía
d) Las cepas que tienen deleción de este gen tienen d) La presencia de la matriz exopolimérica se aprecia
deficiencias en filamentación y crecimiento en leche- hasta la fase madura
tween e) El anclaje de la forma filamentosa a la superficie
e) Codifica para una manoproteína de secreción inicia el proceso
17. La descripción de una biopelícula es: 19. La morfogénesis en las biopelículas se dispara
a) Comunidad de microorganismos unidos cuando:
irreversiblemente a una superficie formada por a) Los filamentos sintetizan adhesinas que permiten
levaduras e hifas embebidas por una matriz la unión a la superficie
exopolimérica b) Cuando se inicia la síntesis de matriz
b) Comunidad de microorganismos compuesta de exopolimérica
células de levadura que se adhieren a la superficie c) La levadura hace contacto con la superficie y hace
y que están rodeadas por una matriz el anclaje en la base
c) Comunidad de microorganismos unidos a una d) Cuando se alcanza el máximo nivel de expresión
superficie y cuyos integrantes mantienen sus de proteasas
características fenotípicas idénticas e) Cuando la hifa expresa el gen EFG1
d) Comunidad de microorganismos unidos
reversiblemente a una superficie y que está 20. Los mecanismos de resistencia a los antimicro-
formada por hifas y levaduras embebidas por una bianos inducidos en la formación de biopelículas
matriz exopolimérica pueden explicarse por los siguientes hechos,
e)
pdf Comunidad
elaborado por compuesta por células filamentosas
medigraphic excepto:
que se adhieren a una superficie y que se rodea a ) Se producen cambios en el fenotipo de las
por una matriz células
b) Hay diferencias en la velocidad de crecimiento
18. En relación con las fases de formación de biopelículas c) Hay expresión de genes de resistencia por las
de Candida, ¿cual aseveración es la correcta? células que hacen contacto en la superficie
a) El orden de aparición de las fases es: adhesión, d) Hay penetración restringida a través de la matriz
crecimiento, maduración y proliferación de la biopelícula
b) En estudios in vitro se aprecia la estructura e) Las células filamentosas inducen genes de
completa de 38 a 72 horas resistencia (bombas de eflujo)