EXTRACCIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE VITAMINA C EN NARANJA (Citrus sinensis).

1
Alexandra Zambrano 20142150050; Luisa M. Tamayo 20142150085; Generitd Ramírez Rojas
20131150075
Grupo 4
2
Harold Salamanca.
1
Estudiante Bioquímica, 2 Docente
Universidad Distrital Francisco José de Caldas
Proyecto curricular de licenciatura en química
Bogotá D. C., 4 de septiembre del 2018.

RESUMEN

La vitamina C conocida como ácido ascórbico popular por su actividad antioxidante, está presente
en muchos vegetales y frutas; el ácido ascórbico es vital en muchas funciones del organismo del ser
humano, principalmente en el desarrollo del sistema inmune protegiendo de muchas enfermedades.
Por lo tanto, el objetivo de este estudio fue la cuantificación de vitamina C que contiene la naranja
(citrus sinensis) empleando el método colorimétrico de la 2- Nitroanilina la cual da la formación de
una sal sódica de color rojo-violeta el cual absorbe en 543 nm. Obteniendo una concentración de
6,648 mg de vitamina C / 100mL en la naranja (citrus sinensis) esta cantidad no muestra un valor
significativo para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares debido a que sería necesario
ingerirla en mayor cantidad para suplir la dosis diaria recomendada.

PALABRAS CLAVE
Ácido ascórbico, extracción, antioxidante, enfermedades cardiovasculares, vitamina C.

INTRODUCCIÓN. en su totalidad, por ende, es necesaria su

1) La naranja es el fruto obtenido del naranjo;
su nombre sistemático es Citrus Sinensis, y es
un fruto nativo de Asia. Dentro de las
sustancias destacadas que componen la
naranja se encuentran: azúcares que son
beneficiosas para el organismo (sacarosa,
dextrosa y levulosa); minerales (potasio,
calcio, hierro y magnesio); vitaminas
(vitamina C, A, B1, B2 y B9); y, elementos
fitoquímicos (flavonoides y limonoides) que
son los responsables del aroma de la naranja).
[1] Está, por hacer parte de los cítricos, es un
cultivo subtropical, donde el suelo ideal para
este debe ser de textura limo-arenosa, muy
drenado y profundo, y puede ser de baja
fertilidad y pH entre 4 y 9, que por lo menos
contenga de 2 a 4% de materia orgánica, de 1
a 3% de carbonato de calcio, 7ppm de fósforo
y 156ppm de potasio. [2]
2) Las vitaminas son un amplio grupo de
compuestos orgánicos primordiales para la
vida, participan en funciones bioquímicas en
el cuerpo humano, estos no son sintetizados
ingesta externa. [3] Dependiendo de la
solubilidad de las vitaminas estas se clasifican
en liposolubles (solubles en grasas) e
hidrosolubles (solubles en agua); dentro de las
vitaminas hidrosolubles se encuentra el
complejo B y la vitamina C (ácido ascórbico).
9) La vitamina C es esencial para el ser
humano, sin embargo, esta no es producida
por el organismo debido a la ausencia de la
enzima L-gulonolactona oxidasa. Funciona
como un antioxidante, reduciendo así la
cantidad de radicales libres y a su vez la de
oxígeno reactivo que puede afectar lípidos,
proteínas y ADN. También funciona como
cosustrato de unas coenzimas en específico e
interviene en el metabolismo del colágeno,
acelerando la síntesis de procolágeno e
hidrolizando los residuos de prolina y lisina.
Las mejores fuentes incluyen frutas y
verduras. Vitamina C es el nombre genérico
de la forma L del ácido ascórbico. [4]
5) El
ácido ascórbico se obtiene por biosíntesis actividad biológica de otras vitaminas como
como L-ascorbato partiendo desde la glucosa es el caso de la Vitamina B12 que aumenta si
por la vía del ácido gulónico teniendo en se suministra gran cantidad de Vitamina C.
cuenta la presencia de actividades catalíticas, [9]
metabólicas y químicas apropiadas, en este
caso las diversas enzimas de la vía del ácido 3 La Junta de Alimentos y Nutrición del
gulónico, incluyendo la L-gulonolactona Instituto de Medicina recomienda las
oxidasa. [5] siguientes cantidades de vitamina C [11]:
12
La vía del ácido urónico es una vía Bebés y Niños.
alternativa para la oxidación de la glucosa que • 0 - 6 meses: 40 miligramos / día (mg / día) •
no proporciona un medio para producir ATP, 7 - 12 meses: 50 mg / día
pero se utiliza para la generación de la forma • 1 - 3 años: 15 mg / día
activada de glucuronato de UDP, el • 4 - 8 años: 25 mg / día
glucuronato de UDP que se utiliza • 9 - 13 años: 45 mg / día
principalmente para la destoxificación de
productos químicos extranjeros y para La Adolescentes.
síntesis de Mucopolisacaridos. Esta vía • Niñas de 14 a 18 años: 65 mg / día
también produce ácido ascórbico en ciertos • Niños de 14 a 18 años: 75 mg / día
animales. [6]
Adultos.
7 Los cítricos son una rica fuente de • Hombres mayores de 19 años: 90 mg / día
compuestos fenólicos bioactivos y flavononas • Mujeres mayores de 19 años: 75 mg / día
que poseen propiedades antioxidantes Las mujeres que están embarazadas o
altamente deseadas. Mediante diferentes amamantando y las que fuman necesitan
estudios epidemiológicos se ha demostrado cantidades más altas.
que el consumo elevado de cítricos reduce el
riesgo de accidente cerebrovascular, 4-10)El consumo excesivo de esta vitamina
enfermedades cardiovasculares y diferentes puede resultar beneficioso ya que aparte de
tipos de cáncer, reduce el tubo neural infantil. sus funciones antes mencionadas, puede
Además, los cítricos son uno de los aumentar la absorción de hierro [12] al
principales contribuyentes de la vitamina C a reducirlo a su estado ferroso en el estómago,
los seres humano. [7] Un vaso (200 ml) de ya que no es posible absorber el estado
jugo de naranja puede administrar 30-80% de férrico. El ácido ascórbico (AA), con sus
la ingesta diaria recomendada de vitamina C. propiedades reductoras y quelantes, es el
[8] potenciador más eficaz de la absorción de
hierro no hemo cuando se garantiza su
Vegetal/ fruta Porción Vitamina C (mg) estabilidad en el vehículo alimenticio. [16]
Pimientos
(rojos, 125 mL (½ 11) Actualmente se ha estudiado el uso de
101-144
amarillos) taza) Vitamina C para tratar diversas patologías
crudos.
Pimientos
entre estas la inmunodepresión, leucemia y
125 mL (½ cáncer; las dosis utilizadas en medicina
(rojos, verdes) 121-132
taza)
crudos. natural varían entre 7,5 y 30 g al día hasta 100
Guayaba 1 fruta 206 g, y esto durante semanas o meses, según la
Papaya ½ fruta 94 evolución del cáncer. Estas dosis excesivas de
Kiwi 1 fruta 84 vitamina C han demostrado tener pocos
Naranja 1 y media 59-83
efectos secundarios. Los tumores en los que
Tabla 1. Mayores fuentes en frutas y
se ha evidenciado disminución del desarrollo
vegetales de vitamina. [10]
del cáncer son: cáncer de próstata, páncreas,
8 colon, leucemias, melanomas y mama entre
No es posible que la Vitamina C inhiba otra
otro. [13]
vitaminas, por lo contrario potencia la
6) La determinación de vitamina C, por el
método colorimétrico de la 2-Nitroanilina
presenta como interferencia que se precise la
conversión total del ácido ascórbico en
dehidro-ascórbico. De igual manera, el
contenido de vitamina C en las frutas y
verduras varía dependiendo del grado de
madurez, la cantidad es menor cuando se
encuentran verdes pero en su punto de
cosecha aumenta y luego vuelve a disminuir.
[14]

METODOLOGÍA

Se realizó la extracción y cuantificación de Figura 1. Reacciones involucradas en la

vitamina C de una naranja (Citrus sinensis),
por el método colorimétrico de la 2-
Nitroanilina descrito en la guía de laboratorio
Nº 3: Extracción y cuantificación de vitamina
c de Ayala, A.2012. [15]
determinación de vitamina C.
En la tabla 2 se presentan los valores de la
densidad determinada a cada una de las
muestras.

RESULTADOS.
Relación
Los datos mostrados a continuación se Peso Densidad v/v o p/v
Muestra Fd1
obtuvieron a partir del método colorimétrico 1 mL (g/mL) Fruta/Ac
de la 2-Nitroanilina, el cual se fundamenta en ox
Grupo
la producción de un complejo coloreado; la 4 0,3974
Fruta 1,1924 0,24212 1/3
g/mL
reacción implica en un primer momento la
0,4025
formación de 2-nitrofenilhidrazida. Jugo 1,2106 0,23848
g/mL
1/3
Para la determinación de ácido ascórbico en Mp 1/4
solución por el método colorimétrico es
necesario obtener la 2-nitrofenilhidrazida, por Tabla 2. Densidades determinadas
medio de la reacción de la 2-nitroanilina con experimentalmente
nitrato de sodio en medio acido.
La intensidad del color es directamente A continuación, en la tabla 3 se presentan los
proporcional a la concentración inicial de datos con los cuales se elaboró la curva de
vitamina C, lo que nos permite determinar calibración, junto con la concentración de
dicha concentración mediante la lectura de la vitamina C de las muestras (Naranja, jugo y MP);
absorbancia de la solución coloreada. se identificó un coeficiente de correlación de
0,9827
Posteriormente la 2- nitrofenilhidrazida mg
F.d
reacciona con el dehidroascorbato oxidándose Grupo mg/mL A VitC/
Total
a 2-nitrofenilhidrazida del ácido ascórbico. 100 mL
0,00198 0,11
Este producto reacciona posteriormente con el 1 101
48
ácido ascórbico en presencia de NaOH 0,00396 0,12
formando así la sal correspondiente, 2 50.5
24
responsable del color violeta, este producto de 3 25.25 0,00792 0,27
reacción se leyó a una longitud de onda 543 95
nm, (región de máxima absorción). 0,0118 0,47
4 16.83
46
0,0158 0,59
5 12.62
41
 6 10.1 0,0198 0.63 Tabla 4. Datos obtenidos por el método de
51 mínimos cuadrados.
0.25
F 5.85 0,0066504 0,6648
31 Cálculos realizados para determinar la
0,10 pendiente.
MP 40.4 0,002175 0,217
60
0.20 ∑ x(∑ y)
JUGO 5.85 0,00523 ∑ xy − ( )
65 0,5233 n
m= 2
b 0.0344 (∑ x)
∑ X2 −
m 32,87 n
r* 0,9657 0,06126)(2,2205)
0,03048 − ( )
Nombre 6
de la Naranja (citrus sinensis) m=
(0,06126)2
fruta 0,000863248 −
6
VitC
teórico m = 32,8395
50 mg/100g
fruta
VitC
teórico
60 mg/2 00mL
jugo
Cálculos para obtener el intercepto en el eje
Tabla 3. Datos curva de calibración y valores de Y.
cuantificación de Vitamina C.
𝑏 = 𝛾 − 𝑚𝑥
En la gráfica 1 se presenta la curva de 𝑏 = 0,370 − (32,839)(0,01021)
calibración elaborada a partir del método
𝑏 = 0,03471
colorimétrico de la 2-Nitroanilina.
Ecuación de la recta obtenida por mínimos
cuadrados
Curva de calibración
𝑦 = 32,839𝑋 + 0,03471
0.8
absorbancia

0.6 En la tabla 5 se presentan los valores de la

0.4 absorbancia corregidos por medio de
0.2 mínimos cuadrados para cada una de las
0 diluciones.
0 0.005 0.01 0.015 0.02 0.025 Concentración Absorbancia
Tubo
Concentración mg/ml mg/L corregida.
1 0,00198 0,09902
2 0,00396 0,1640
Grafica 1. Curva de calibración. 3 0,00792 0,2940
4 0,0118 0,4215
Corrección de los datos experimentales por 5 0,0158 0,5528
medio del método mínimos cuadrados. 6 0,0198 0,684
F 0,002173
En tabla 4 se presentan los valores calculados
Mp 0,00510
para la corrección de los datos experimentales
por medio del método de mínimos cuadrados. Jugo 0,00170
b 0.034
Concentración Absorbancia m 32,839
∑ x*y ∑X2
M (x) Experimental (y) r* 1
0,01
Promedio Promedio 0,370 Tabla 5. Valores corregidos mínimos cuadrados.
021 0,000863
0,03048
0,06 2
∑x ∑y 2,2205 A continuación, se encuentra la tabla 6 que
126
indica el porcentaje de error del contenido de
ácido ascórbico en la naranja.
 depende de la concentración que presentan las
Nombre Dato Valor %Error muestras que contienen ácido ascórbico.
El valor teórico de la concentración de ácido
F Teórico ascórbico en la naranja es de 50 mg/100mL.
Vitamina C 50 Al compararlo con el valor experimental,
mg/ 100mL 86%
6,648 mg/100mL se obtuvo un porcentaje de
Experimental error del 86%, este alto valor se debe a la
Vitamina C 6,648 sensibilidad del compuesto trabajado a la luz
mg/ 100mL y al calor.
J Teórico
Vitamina C 60 99%
Otro factor importante es la maduración de la
mg/ 100mL fruta, pues se presenta variación en cuanto al
porcentaje de Vitamina C por los cambios
Experimental 0,5233 fisicoquímicos durante el crecimiento y
Vitamina C maduración de la misma, los cuales tienen
mg/ 100mL
efectos sobre los componentes finales de esta.
F Teórico [12]
Vitamina C
mg/ 100g 60 99% Además, el ácido ascórbico en los alimentos
Fruta entera
(naranja) se degrada fácilmente ante la
Experimental radiación solar y el oxígeno del ambiente por
Vitamina C 1,60x10- su sensibilidad a reacciones de oxidación.
3
mg/ [13]
100g Fruta
entera
La muestra problema asignada posee un valor
Muestra Teórico Dp de 0,217 mg Vitamina C/100 mL, obtenida
problema Vitamina C por medio de extrapolación de la curva de
mg/ 100mL calibración realizada. Esta concentración de
vitamina C en la muestra es insuficiente para
Experimental 0,217
Vitamina C realizar un tratamiento en pacientes con
mg/ 100mL cáncer, ya que, de acuerdo con algunos
estudios realizados, los pacientes con cáncer
Dp= determinado por el profesor deben ingerir una concentración diaria de
Tabla 6. Datos de porcentaje de error en entre 4 a 7 g de vitamina C por cada Kg de
cuantificación de Vitamina C. peso corporal, por lo que para que el
tratamiento sea efectivo utilizando la muestra
asignada, se necesitaría un consumo superior
DISCUSIÓN DE RESULTADOS a 2 L de esta solución de vitamina C por parte
del paciente. [15]
La cuantificación de vitamina C puede
realizarse por diferentes métodos, ya sean CONCLUSIONES.
volumétricos, cromatógrafos o colorimétricos.
Para este caso se realizó la cuantificación de El contenido de Vitamina C en la naranja
vitamina C en una muestra de naranja. hallada en el laboratorio está influenciado por
varios factores postcosecha, como el
La interacción del ácido ascórbico (Vitamina
revestimiento superficial, los tratamientos
C) con el hidróxido de sodio se da mediante la
térmicos y la irradiación.
siguiente reacción:
La generación de protones del medio ácido no
H C H O + NaOH ⟶ NaHC H O + H O
2 6 6 6 6 6 6 2
fue suficiente como para llegar a generar las
concentraciones adecuadas para la no
El ácido ascórbico forma un complejo color
oxidación del ácido L-ascórbico.
violeta al ceder un protón, y este color
La cantidad de ácido ascórbico que se
encontró en la naranja es muy bajo, pero
alcanza a entrar en el rango para suplir el
requerimiento diario en niños que es de (25-
40) mg/día Vitamina C, pero por el contrario
no alcanza a suplir el requerimiento diario en
adultos 45 mg/día, por lo tanto, la ingesta
debe ser mayor a una sola naranja para nivelar
el valor requerido. al igual al ser una vitamina
soluble en agua e inestable al calor se desecha
con facilidad por la orina en caso de
hipervitaminosis.
El porcentaje de error en la concentración de
ácido ascórbico en comparación con los datos
teóricos de la naranja, está ocasionado por su
sensibilidad a cambios de temperatura,
exposición a la luz solar y concentración de
oxígeno en el ambiente, lo cual va
produciendo la degradación de la Vitamina C
con lo cual se obtiene una cuantificación
equivoca.
REFERENCIAS.
1. PAMPLONA ROGER, J. D. (2002).
Salud por los alimentos. Madrid, España:
Safeliz, S. L.
2. BARAONA COCKRELL, M., &
SANCHO BARRANTES, E. (s.f.).
Cítricos, fruticultura especial. Costa Rica:
Universidad Estatal a distancia.
3. ESTEVINHO, B. N., CARLAN, I.,
BLAGA, A., & ROCHA, F. (2015).
Soluble vitamins (vitamin B12 and
vitamin C) microencapsulated with
different biopolymers by a spray drying
process. Elsevier, 71-78
4. COMBS, G. F., & MCCLUNG, J. P.
(2017). The vitamins; Fundamental
Aspects in Nutrition and Healt . El Sevier
. organicos. Revista
5. COMBS, G. F., & MCCLUNG, J. P.
(2008). The vitamins; Fundamental
Aspects in Nutrition and Healt . El Sevier
6. CAHHBRA, N. (2017). Biochemistry for
medics: Namrata. Obtenido de
http://www.namrata.co/mai n-menu/
7. MDITSHWA, A., MAGWAZA, L. S.,
TESFAY, S. Z., & LINUS OPARA, U.
(2017). Postharvest factors affecting
vitamin C content of citrus fruits: A
review. Scientia horticulturae - servier,
95-104.
8. A. GLISZCZYNSKA-SWIGLO, J.
WROBLEWSKA, K. LEMANSKA, I.
KLBMCZAK, & B. TYRAKOWSKA
(2004).The contribution of polyphenols
and vitamin C to the antioxidant activity
of commercial orange juices and drinks
Proceedings of the 14th IGWT
Symposium Focusing New Century:
Commodity-trade Environment, 121–126
9. Lumley, I.D. Vitamin analysis in foods.
In: Ottaway, P.B., ed. The technology of
vitamins in foods.
10. S.A. (2016) Food Sources of Vitamin C.
Dietitians of Canada. Tomado de:
http://www.dietitians.ca/Download
s/Factsheets/Food-Sources-ofVitamin-
C.aspx.
11. ZIEVE, D. (2009). In Vitamin C:
MedlinePlus Medical Encyclopedia.
Tomado de: http://www.nlm.nih.gov/
medlineplus/ency/article/002404.ht m
12. MURRAY, R. K., BENDER , D. A.,
BOTHAM, K. M., KENELLY, P. J.,
RODWELL, V. W., & WEIL, P. A.
(2009). HARPER, bioquímica ilustrada .
México, D.F.: Mc. Graw Hill . 9.
13. PANTASTICO, E. 1984. Fisiología de la
postre colección, manejo y utilización de
frutas y hortalizas tropicales y
subtropicales. Editorial Continental, S.A.,
México
14. HERRERA MENDEZ, R., & PEREZ, D.
A. (2013). Determinación de vitamina C
por método colorimétrico de 2
nitroanilina del (Limón, Naranja,
Guayaba y Kiwi). Armenia, Quindío:
Universidad La Gran Colombia.
15. Ayala, A. (2012). Extracción y
cuantificación de vitamina C. Bogotá:
Universidad distrital francisco José de
caldas
16. Teucher B, Olvares M, Cori H. (2004).
Potencioadores de la absorción de
hierro:acido ascórbico y otros acidos
internacional de
investigación sobre vitaminas y nutrición.
EEUU.