Manual Toma de Muestras Microbiologia. Hospital de Rancagua. 2011 PDF

Manual Toma de Muestras
Microbiología.
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

TM. M. Elena Díaz F.
Dr. Sonia Correa Dr. Adriana Pinto T.
TM. Maximiliano
Ramírez A. BQ. Rodrigo González.
TM. Antonio Sanaguas

I.
Fecha: 01/08/2011 Fecha: 21/09/2011 Fecha: 21/09/2011

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Manual Toma de Muestras Microbiología

Código: SGC-LC-TMB V0
Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

Microbiologia. Versión: 0
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INDICE
INTRODUCCION 3
Requisitos para una buena toma de muestra 3
Uso correcto de las órdenes de exámenes 5
NORMA DE TOMA DE CULTIVOS 6
COMITE DE INFECCIONES ASOCIADAS
A LA ATENCION DE SALUD IAAS 7
Criterios de Rechazo de Solicitudes y/o Muestras 7
CULTIVO DE ANAEROBIOS 8
CULTIVO ASPIRADO ENDOTRAQUEAL CUANTITATIVO (AET) 10
CULTIVO LÍQUIDO BILIAR 12
CULTIVO CATETER VENOSO CENTRAL 13
COPROCULTIVO 14
EXPECTORACION 15
CULTIVO FARINGEO 16
HEMOCULTIVO 17
Relación sangre / caldo y tipos de frascos 18
HEMOCULTIVOS CUANTITATIVOS 20
BACTEREMIA ASOCIADA A CVC. 22
INFECCIONES A LA PIEL Y TEJIDO SUBCUTANEO 23
LESIONES SUPERFICIALES ERITOMATOSAS 23
ULCERAS Y NODULOS 25
SENOS PARANASALES 26
INFECCIONES DE HERIDAS 27
MORDEDURAS 28
LAVADO BRONCO-ALVEOLAR 29
LEUCOCITOS FECALES 30
LIQUIDO ASCITICO 31


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LIQUIDO ARTICULAR O SINOVIAL 32

CULTIVO LÍQUIDO CEFALORRAQUIDEO (LCR) 34
LIQUIDO PERITONEAL 36
LIQUIDO PLEURAL 37
CULTIVO NASAL 38
MYCOPLASMA HOMINIS Y UREAPLASMA UREALYTICUM 39
CULTIVO OCULAR 40
CULTIVO OTICO 41
ROTAVIRUS Y ADENOVIRUS en deposiciones. 42
CULTIVO SENOS PARANASALES 43
CULTIVO TEJIDOS, BIOPSIAS y ABSCESOS. 44
MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO. 46
MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL MASCULINO 48
UROCULTIVO. 50
VIRUS RESPIRATORIOS POR IFI. 53
BORDETELLA POR IFD. 55
BIBLIOGRAFIA. 58


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INTRODUCCION
El diagnostico de las enfermedades infecciosas, se basa en el estudio de

los síntomas y signos clínicos, así como en la demostración de la presencia del
agente, de sus productos o de la huella que este ha dejado en su contacto con el
sistema inmune del individuo.
El diagnóstico clínico es, en muchos casos, orientador luego de evaluar los
datos que ofrecen la historia clínica y la exploración, pero, la confirmación de un
diagnóstico clínico, requiere, en enfermedades infecciosas, del diagnóstico
etiológico que confiere el laboratorio de Microbiología Clínica.
La información diagnostica que el laboratorio de Microbiología puede
proporcionar, depende de la calidad de la muestra recibida.
Una muestra mal tomada, en escasa cantidad o mal transportada,
determinara un posible fallo en la recuperación de o los agentes patógenos,
induciendo errores en el diagnóstico, como también en un tratamiento inadecuado
del enfermo.
Requisitos para una buena toma de muestra.
1. Personal idóneo en la toma de muestra.
2. Indicaciones claras al paciente respecto del examen se le va a realizar.
3. Preparación adecuada del paciente, como aseo previo, uso de antisépticos,

uso de tapón vaginal, cuando corresponda.
4. Muestra representativa del proceso infeccioso.
5. Muestra tomada antes del tratamiento antimicrobiano. De lo contrario

especificar en la orden.
6. Muestra tomada con la cantidad adecuada.
7. Uso correcto de los medios de transporte.


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MUESTRA MEDIO DE TRANSPORTE
Aspirado nasofaríngeo para virus respiratorios. Buffer pH 7.2.
Aspirado nasofaríngeo para Bordetella. Suero fisiológico.
Coprocultivo. Cary Blair.
Secreciones en tórula. Stuart.
8. Número de muestras adecuada.
9. Las muestras recolectadas en tubos estériles sin medio de transporte, deben

enviarse al laboratorio a la brevedad.
10. Como bioseguridad, las muestras deben transportarse al laboratorio, dentro de

unidades térmicas, sin hielo o unidad refrigerante, a excepción de los
aspirados nasofaríngeos para pesquisa de virus respiratorios.
11. Especificar examen solicitado, bacteria o grupo de microorganismo que se

desea pesquisar, Ej.
 Anaeróbios.
 Hongos, Levaduras.
 Difteria.
 Gonococo.
 Vírus Respiratório.
 Enterococo de deposición.
12. Frente a cualquier duda o consulta referente a determinada muestra, resultado

de examen, toma de muestra que no aparezca en este manual, etc.,
contactarse con el laboratorio de Microbiología, en horario de 8.00 – 16.50 hrs.
de lunes a viernes o con el tecnólogo médico de turno fuera de este horario.
13. Es importante que la solicitud de examen, especifique la edad del paciente, ya

sea porque algunos hallazgos bacteriológicos se deben enviar al Instituto de
Salud Pública con todos los datos o porque algunos procedimientos de uso de
algún determinado medio de cultivo, depende exclusivamente de la edad del
paciente: flujos vaginales se les agrega Agar Mac Conkey en menores de 14
años; la vigilancia de Vibrio cholerae difiere en aquellos pacientes mayores de
18 años, de los que tienen menos de ésta edad.


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Uso correcto de las órdenes de exámenes.
EXAMEN ORDEN
Orden normal de Bacteriología adicionada
VIRUS RESPIRATORIO
de IRA grave en caso de estudio de
(inmunofluorescencia)
virus influenza AH1N1.
BORDETELLA PERTUSSIS
Orden normal de bacteriología
(inmunofluorescencia):
PARALISIS FLACCIDA: Formulario especial del ISP
SARAMPION: Formulario especial del ISP
HANTA VIRUS: Formulario especial del ISP


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NORMA DE TOMA DE CULTIVOS.
En relación a la solicitud de cultivos microbiológicos, se recomienda lo

siguiente:
 La solicitud de toma de cultivo debe corresponder a una hipótesis

diagnóstica de infección, que requiere su confirmación por laboratorio junto
a la identificación del agente causal y el antibiograma para realizar
tratamiento específico.
 No está indicado realizar cultivos rutinarios de vigilancia, como escaras y

úlceras de decúbito, TET, CUP, Catéter Venoso Central o al trasladar
pacientes desde un servicio a otro, sin una clara sospecha clínica de
infección, ya que es sabido que el paciente en menos de 48 hrs. desde su
ingreso al establecimiento, es colonizado por microorganismos
intrahospitalarios y sus resultados (+) pueden producir confusión y estimular
el uso inadecuado de antimicrobianos con el consiguiente aumento de los
costos de atención.
 Se debe consignar la toma de muestras en la ficha clínica y hoja de

enfermería en el caso de traslado de paciente desde un servicio a otro,
evitando repetir la toma de muestra.
 En el caso de múltiples heridas o escaras con signo de infección, se

recomienda la toma de solo una muestra del sitio más representativo
(mayor presencia de secreción purulenta), previo aseo con suero fisiológico.
 Se debe considerar además, que al solicitar un cultivo se debe esperar su

resultado final (hasta 72 hrs.) antes de solicitar nueva muestra, ya que las
muestras seriadas en 24 hrs. no han demostrado mejor rendimiento
diagnóstico (excepto hemocultivos).
 No está indicado tomar muestras de loquios, objetos inanimados, manos y

nariz del personal (excepto en estudios de portación en casos de brotes) y
de antisépticos y desinfectantes (estudios en casos y condiciones
especiales).


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COMITE DE INFECCIONES ASOCIADAS A LA ATENCION DE SALUD IAAS.
Criterios de Rechazo de Solicitudes y/o Muestras
Si las solicitudes y/o las muestras no cumplen los requisitos mínimos

indispensables para su correcto procesamiento el laboratorio deberá aclarar las
discrepancias con el servicio que las envío, previo a su realización y en algunos
casos será imposible su procesamiento hasta tanto se envíe la muestra correcta.
Los siguientes son algunos ejemplos de ello:
A. Discrepancia entre la identificación del paciente que figura en la solicitud del

examen y la que figura en el rotulo de la muestra. Acción: Rechazo de la
muestra, hasta que se envíe correctamente, por parte del Servicio
Clínico.
B. No se indica en la solicitud de examen, el tipo de muestra a analizar y/o
procedencia anatómica del mismo. Acción: Llamar al servicio que lo envió.
No se procesará hasta tanto se conozcan esos datos, imprescindibles
para la realización del estudio.
C. Muestra enviada en frasco no estéril o con conservantes (formol). Acción:
Rechazo de la muestra, hasta que se envíe correctamente, por parte del
Servicio Clínico.
D. Muestra enviada en envase o tubo con pérdida o derrame Acción: No
procesar. Esterilizar la muestra y solicitar una nueva.
E. Muestra inadecuada para realizar el estudio solicitado. Acción: No procesar.
Informar al servicio que la muestra es inadecuada e indicar cual muestra
deberá enviar.
F. Cultivo anaerobio solicitado en exudado faríngeo, expectoración, orina,
secreciones vaginales, úlceras o fístulas entre otras. Acción: No procesar
.Comunicarse con el servicio y explicar las razones.
G. Muestra en cantidad insuficiente para realizar los exámenes solicitados:
Acción: Solicitar muestra adicional, si no es posible establecer
prioridades de procesamiento en acuerdo con el médico tratante.
H. Muestras repetidas por más de una vez en el mismo día, excepto
hemocultivos. Acción: Procesar una sola muestra por día y comunicarse
al servicio para que justifique el procesamiento de las muestras
restantes.
I. Muestra evidentemente contaminada. Acción: Descartar la muestra y
solicitar otra.


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CULTIVO DE ANAEROBIOS
TOMA DE MUESTRA: Debe ser realizada por profesional idóneo
SITIO ANATOMICO MUESTRA METODO

LCR
Abscesos Punción Lumbar
SNC Biopsias de tejidos Aspiraciones con aguja
Autopsias o material y jeringa
quirúrgico
Abscesos
AREA DENTAL Material de Biopsias
(Oído-Nasal-Garganta Sinusal en Sinusitis Aspiraciones con jeringa
Senos paranasales) crónica.
Quirúrgica.
Transtraqueal Aspiración con jeringa
AREA PULMONAR Pulmón Punción percutánea
Broncoscopía Catéter con protector
de doble envoltura.
AREA ABDOMINAL Líquido de paracentesis Aspiración con jeringa
Abscesos profundos libre de contaminación
Cirugía intestinal.
Laparoscopía quirúrgica
TRACTO GENITAL Cavidad endometrial Aspiración con jeringa.
FEMENINO Líquido amniótico
Placenta
TRACTO URINARIO Orina Aspiración supra púbica
Artritis supurativa Aspiración de Articulaciones.
HUESOS Y Material de drenaje Aspiración profunda.
ARTICULACIONES después de cirugía: Ej.:
Osteomielitis.


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Abrir y hacer aspiración

Heridas. profunda del margen
orilla o lesión ósea
subyacente.
Del fondo de la herida
Biopsias después de limpieza por
arrastre con suero
fisiológico.
Aspiración con jeringa y
TEJIDOS BLANDOS: Senos paranasales pequeño catéter plástico
después de asepsia de piel
con alcohol 70%
Abscesos profundos
Celulitis anaerobia. Aspiración con jeringa.
Gangrena vascular
infectada.
Mionecrosis gangrenosa
Muestras quirúrgicas. Aspiración con jeringa.
Biopsias.
Superficies ulcerosas.
Pus.
Cantidad de muestra: En lo posible 1-5 ml
Transporte de la Muestra: Se utiliza un medio de transporte comercial para

anaerobios: Portagem de Biomerieux, diseñado
para muestras líquidas. Una vez colocada la
muestra dentro del frasco de transporte,
mantener a temperatura ambiente. Enviar a
laboratorio.
Entrega de Resultados: Informe preliminar a las 48 - 96 horas.


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CULTIVO ASPIRADO ENDOTRAQUEAL CUANTITATIVO (AET).
INDICACIONES:
A todo paciente con sospecha de neumonía asociada a ventilación

mecánica, por más de 48 horas y presencia de criterios clínicos radiológicos, en el
cual no se hayan efectuado cambios de tratamiento antimicrobiano durante las
últimas 72 horas.
TOMA DE MUESTRA:
Debe ser tomada en forma estéril utilizando un catéter de aspiración

introducido en el tubo endotraqueal y conectado el otro extremo del catéter, a un
colector o trampa estéril apropiada.
El procedimiento debe ser realizado por un profesional entrenado con
ayudante. El catéter debe ser introducido hasta encontrar resistencia y no se debe
diluir la muestra con el fin de facilitar su recolección.
Si las secreciones son espesas, se deben aplicar aspiraciones intermitentes
hasta conseguir la muestra.
La muestra debe ser enviada rápidamente al laboratorio, especificando que
se requiere cultivo de aspirado endotraqueal cuantitativo ( AETC ).
TRANSPORTE:
Se transporta en trampa de aspiración, cerrada a temperatura ambiente.
HORARIO DE RECEPCION:
De Lunes a Viernes hasta las 12 AM. No enviar fuera de este horario ni en

días festivos (sin excepción).
ENTREGA DE RESULTADOS:
A las 48 –72 horas. Se informará cada microorganismo aislado con su

recuento de colonias y estudio de sensibilidad correspondiente.


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PUNTO DE CORTE:
Recuento >= 1.000.000 UFC /ml.
Sensibilidad para NAVM : 71 –82 %
Especificidad para NAVM : 83-86 %
Recuento <= 1.000 UFC / ml.: Exclusión de diagnóstico de NAVM.
Recuento entre > 1.000 y < 1.000.000 UFC / ml.: Interpretación según criterios
médicos.


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CULTIVO LÍQUIDO BILIAR.
INDICACIONES:
 Colangitis
 Estudio de portación de Salmonella typhi.
TOMA DE MUESTRA:
La bilis se puede recolectar:
 Por punción directa de la vía biliar durante la cirugía.

 A través de endoscopia digestiva alta, desde la ampolla de vater.
 Recolectar en un tubo estéril sin medio de transporte.
CANTIDAD:
 4 a 5 ml. es suficiente. Recolectar en tubo de polietileno estéril, tapa rosca.
TRANSPORTE:
 Transportar al laboratorio lo más pronto posible, dentro de unidad de transporte

térmico
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 hrs. mínimo.


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CULTIVO CATETER VENOSO CENTRAL
INDICACIONES:
El estudio de catéteres que se realiza en forma rutinaria a nivel del

Laboratorio de Microbiología es la técnica semicuantitativa de Maki. Esta técnica
permite valorar la contaminación extraluminal del catéter, principal mecanismo por
el cual se contaminan los catéteres de corta permanencia y pueden llegar a ser el
origen de una bacteriemia.
Paciente con catéter venoso central que presente fiebre sobre 38 grados C.
aumento de volumen, enrojecimiento, aumento de temperatura local en sitio de
inserción del catéter, ò que presente fiebre > 38º, sin foco detectado, que se
sospeche bacteremia asociada a CVC, y que se retire el catéter.
TOMA DE MUESTRA:
 Desinfectar con alcohol al 70% una zona de piel de unos 10cm

correspondientes a la zona de entrada del catéter. Hacerlo en forma de
círculos comenzando por el centro.
 Retirar el catéter con la máxima asepsia.
 Ayudándonos de las pinzas y las tijeras estériles, cortar los 3 cm dístales del
catéter que corresponden a la porción intravascular.
 Introducir el segmento de catéter en un tubo de polietileno, tapa rosca, estéril,
correctamente identificado, o tubo de vidrio sin medio de transporte.

TAMAÑO DE LA MUESTRA:
3 cm de la porción más distal. Porciones mayores dificultan el procesamiento en el

laboratorio. Debe acompañarse de 2 hemocultivos periféricos.
TRANSPORTE:
La muestra deberá enviarse al laboratorio en un periodo inferior a 30

minutos. Cuando esto no sea posible deberá conservarse a 4°C por 12 horas
como máximo. Llevar a laboratorio.


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COPROCULTIVO.
TOMA DE MUESTRA:
La muestra para el cultivo microbiológico puede obtenerse de 2 formas,

dependiendo del estado del paciente:
TORULA RECTAL O SONDA RECTAL:
 Estas técnicas se utilizan especialmente en el niño menor.

 Con tórula: con tórula de algodón, humedecer en el medio de transporte Cary
y Blair en introducir por el recto aproximadamente 2 cm., haciéndole girar
suavemente. Volver la tórula al tubo con medio de transporte.
 Sonda rectal: Se debe emplear una sonda de NELATON fina y se aspira con
jeringa.
 Agregar sobre el medio de transporte Cary y Blair sin la tórula, 1-2 ml. del
aspirado.
 Volver a colocar la tórula.
RECOLECCION DE DEPOSICION EMITIDA:
 El paciente debe emitir la deposición en un recipiente muy limpio, desde el

cual se recolecta, con la tórula de algodón, la fracción de deposición que
muestra mayor alteración (sangre, pus, mucosidad).
 Colocar la tórula en el medio de transporte.
NUMERO DE MUESTRAS:
 Se deben tomar 2 a 3 muestras de deposición en tiempos diferentes. Enviar

juntas al laboratorio.
 Para estudio de portadores, se deben tomar 3 a 4 muestras seriadas (en días
diferentes)
TRANSPORTE:
Las muestras se mantienen y se transportan a temperatura ambiente, en medio

de transporte Cary y Blair.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 72 horas.


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EXPECTORACION
INDICACIONES:
 Paciente con neumonía

 Enfermedad bronquial crónica reagudizada.
TOMA DE MUESTRA:
1. Paciente debe lavarse los dientes y realizar enjuagues con agua corriente,
para limpiar la cavidad oral.
2. Obtener el esputo tras una expectoración profunda, luego de un esfuerzo de
tos, preferentemente matinal.
3. El kinesiólogo o enfermera debe asistir al paciente durante la obtención de
ésta. La muestra debe provenir del sector bajo del tracto respiratorio.
4. La saliva no sirve para realizar este estudio.
5. De no producirse expectoración espontánea, puede inducirse el esputo con
nebulizaciones con suero fisiológico.
6. Obtener muestra previo inicio de la terapia antimicrobiana.
7. Depositar muestra en placa Petri estéril, diseñada para este propósito, o en
frasco de boca ancha tapa rosca estéril.
VOLUMEN: De 2 a 10 ml. si es posible.
TRANSPORTE:
La muestra debe enviarse de inmediato al Laboratorio. No debe demorar

más de dos horas en llegar al laboratorio. Transportar placa dentro de una unidad
de transporte térmico.
NOTA: Una muestra representativa debe presentar al Gram las siguientes

características, en cuyo caso contrario el examen se debe repetir:
≥ 25 Polimorfonucleares por campo.

≤ 10 Células epiteliales por campo.
HORARIO DE RECEPCION: De 8.00 a 12.00 horas, de Lunes a Viernes.
ENTREGA DE RESULTADOS: A LAS 48 – 72 hrs.


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CULTIVO FARINGEO.
INDICACIONES:
 El agente principal de faringitis es Streptococcus pyogenes.

 El estudio de Neisseria meningitidis se realiza con propósitos
epidemiológicos.
 El estudio de faringitis gonocócica debe ser solicitada en forma específica
por el médico.
 El estudio de Corynebacterium difhtheriae se realiza sólo cuando se solicita
expresamente.
TOMA DE MUESTRA:
1. SECRECION FARINGEA.
 Buena iluminación y exposición de la faringe del paciente.
 Deprimir la lengua con baja lengua.
 Frotar la tórula con la pared posterior de la faringe y las amígdalas tocando
cualquier exudado.
 Evitar tocar la lengua, úvula y pared de la boca.
2. ESTUDIO PARA CORYNEBACTERIUM DIPTHERIAE: Tomar 2 muestras con

tórula, utilizando baja lengua, pasándola por el reborde de la
pseudomembrana.
3. ESTUDIO PARA NEISSERIA MENINGITIDIS: Muestra nasofaríngea. Tomar la
muestra con tórula, por detrás de la úvula en la porción nasal de la faringe.
4. ESTUDIO PARA N. GONORRHOEAE: Tomar la muestra con tórula como en
cultivo faríngeo.
TRANSPORTE:
Enviar la tórula en medio de transporte Stuart, a temperatura ambiente,

dentro de una unidad de transporte térmica.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 – 72 hrs


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HEMOCULTIVO.
INDICACION:
Compromiso del estado general asociado a:
 Fiebre > 38 ° C.
 Hipotermia < 36° C.
 Leucocitosis > 10.000
 Granulocitopenia < 1.000 polimorfonucleares x ml.
 O una combinación de ellos.
 En pacientes que por su condición debilitada no responden con fiebre,
guiarse por los síntomas y signos clínicos de sepsis: taquicardia,
palidez, hipotensión, sudoración.
 Paciente con antimicrobianos, en que se sospecha falla de tratamiento,
previo al cambio de terapia.
MOMENTO DE LA OBTENCION:
 Lo antes posible después de constatada el alza febril (38°)
INTERVALO DE TIEMPO:
 Tomar en forma simultánea, el set de hemocultivos pero de sitios de

punción diferentes. (brazo izquierdo, brazo derecho).
VOLUMEN DE SANGRE POR FRASCO Y N° DE MUESTRAS:
 En adultos tomar 10 ml. de sangre por frasco, completando set de 2

muestras.
 Endocarditis infecciosa : 3 frascos en 24 hrs.
Esperar hasta 24 hrs. antes de repetir un nuevo set de 3 frascos adicionales; si

los 3 frascos primeros están negativos hasta ese momento.


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1. RECIEN NACIDOS: 1 ml. de sangre por frasco completando un set de 2

frascos.
2. LACTANTES 1 MES- 1 AÑO: 1,5 ml. de sangre por frasco, completando un set
de 2 frascos.
3. MAYORES DE 2 AÑOS: 2,5 ml. de sangre por frasco, completando un set de
2 frascos.
4. ADOLESCENTES: 5 – 10 ml. de sangre por frasco, completando un set de 2
frascos.
Relación sangre / caldo y tipos de frascos:
Se debe mantener una relación 1/5 a 1/10 respecto de la dilución sangre /

caldo de cultivo. Se utilizan frascos comerciales BACT ALERT.
 Frascos verdes, con 40 ml. de medio de cultivo, para pacientes adultos:
agregar 10 ml. sangre por frasco.
 Frascos amarillos, con 20 ml. de medio de cultivo, para pacientes
pediátricos, máximo de 4 ml. de sangre por frasco. Contienen partículas de
carbón para inactivar antibióticos.
Ambos tipos de frascos permiten el crecimiento de bacterias aerobias,

anaerobios facultativos, hongos. Para anaerobios se necesitan frascos especiales.
TOMA DE MUESTRA:
1. Muestra tomada por personal adiestrado (enfermera), con guantes de

procedimiento.
2. Seleccionar la vena periférica de más fácil acceso.
3. Lavar la extremidad elegida con agua y jabón.
4. Aplicar con tórula de algodón, alcohol 70 %, en forma concéntrica,
partiendo desde el lugar donde se va a puncionar, hacia la periferia.
5. Puncionar la vena y aspirar sangre.
6. Desinfectar la tapa frasco donde se va a inocular la sangre, con alcohol
70%
7. Pinchar la tapa de goma e inocular la sangre que se mezcla con el medio
de cultivo. No cambiar de aguja para hacer este proceso.


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TRANSPORTE:
A temperatura ambiente, como máximo 6 horas antes de incubarse en el

laboratorio.
HORARIO DE RECEPCION: Las 24 hrs. del día.
Los hemocultivos se mantienen por 5 días antes de darlos por negativos.

La excepción se da ante la sospecha de algún microorganismo fastidioso,
de hongo o ante un diagnóstico de Endocarditis bacteriana, en el cual se incuban
hasta 10 días.
En caso de estar positivos. Se da un informe preliminar.


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HEMOCULTIVOS CUANTITATIVOS
PROPOSITO: Detectar en forma oportuna las infecciones asociadas a catéter

venoso central, con el fin de indicar con justificación el retiro del catéter. Se basa
en el recuento diferencial de bacterias presentes en la circulación sistémica
periférica y en el catéter venoso central. No se requiere infección en el sitio de
inserción del catéter para indicar bacteriemia asociada a CVC.
Sensibilidad: > 80%
Especificidad: 94 – 100 %
INDICACIONES: A todo paciente con catéter venoso central, de más de 24 horas,

con fiebre mayor o igual a 38° C, sin otro foco infeccioso documentado.
ORDEN MÉDICA: Se debe especificar en la orden médica, cultivo de hemocultivos

cuantitativos, central y periférico.
MUESTRAS: Rotular 2 jeringas CENTRAL Y PERIFERICA.
1. Preparación de la piel para punción periférica, del mismo modo que para
toma de hemocultivos.
2. Extraer 1.0 ml. de sangre por vena periférica con jeringa heparinizada.
3. Taponar jeringa.(tapones estériles)
4. Destapar catéter central.
5. Con técnica aséptica, retirar suero del catéter con una jeringa.
6. Extraer con jeringa heparinizada 1.0 ml. de sangre por el catéter central.
7. Taponar jeringa (tapones estériles)
8. Colocar 5 ml. de suero fisiológico estéril por el catéter y cerrar el circuito
9. Colocar apósitos y tela.
TRANSPORTE:
Enviar inmediatamente al laboratorio, el par de jeringas taponadas, rotuladas, a

temperatura ambiente. La orden debe indicar hemocultivos cuantitativos.
Se debe acompañar de 2 hemocultivos tradicionales.


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HORARIO DE RECEPCION:
De lunes a viernes hasta las 12 hrs. AM. No enviar fuera de este horario ni en
días Sábado y festivos.
ENTREGA DE RESULTADOS: 48 – 72 horas.
INTERPRETACION:
 Sin crecimiento de bacterias o menos de 5 colonias por placa: Negativo a

las 72 hrs.
 Si el recuento bacteriano es superior 5 a 10 veces, en el cultivo del catéter
central, sobre el cultivo periférico, con crecimiento de más de 5 colonias por
placa: Infección del torrente sanguíneo asociado a catéter venoso central
(CVC). Se realizará identificación y estudio de sensibilidad para tratamiento
antibiótico específico y es orden de retiro del catéter.
 Si por el contrario, el resultado del recuento del catéter central, no es
superior al recuento periférico, con más de 5 colonias por placa: Probable
infección del torrente sanguíneo asociado a catéter: Interpretación según
clínica y agente identificado.


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BACTEREMIA ASOCIADA A CVC.
Los hemocultivos automatizados permiten agregar un método adicional de

diagnóstico de bacteriemia asociada a catéter central.
Se toma una muestra de sangre, del CVC y otra muestra de sangre
periférica, según procedimiento indicado previamente.
ROTULAR: frasco 1: CVC y frasco 2: periférico.
VOLUMEN:5- 10 ml. en pacientes adultos. Hasta 4 ml. en pacientes pediátricos.
IMPORTANTE: Igual volumen en ambos frascos.
ORDEN MEDICA: Indicar Hemocultivos CVC y periférico.
TRANSPORTE: Enviar inmediatamente al Laboratorio, a temperatura ambiente.
HORARIO RECEPCION: Las 24 hrs. del día.
Se incuban en forma habitual en equipo automatizado, y si la muestra

central es positiva con más de 2 horas de diferencia con respecto a la muestra
periférica, es diagnóstico de bacteriemia asociada a CVC.


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INFECCIONES DE LA PIEL Y TEJIDO SUBCUTANEO
LESIONES SUPERFICIALES ERITEMATOSAS
ENFERMEDADES MICROORGANISMOS
TOMA DE MUESTRA Y
Y QUE COMUNMENTE
TRANSPORTE
SINTOMAS LA CAUSAN
EXUDATIVAS: Con tórula

Desde el borde de la lesión.
Con limpieza previa.
Streptococos grupo A.
ERISEPELA
(piógenes)
COSTRAS: Remover la
Costra con suero fisiológico
y frotar la tórula.
Streptococcus grupo A.
CELULITIS Staphylococcus aureus. INFECCIONES PURULENTAS
Anaerobios. Aspirar en la zona de inflamación
más aparente (bordes) con aguja
y jeringa con 0.2 ml. de suero
Erisipelothrix fisiológico estéril.
ERSIPELOTHRIX
insidiosa
TRANSPORTE AEROBIO:


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Tórulas en medio de
Transporte Stuart.
Secreciones purulentas en medio
de transporte Stuart sin tórula.
Enviar dentro de unidad de
transporte térmico.
Streptococcus
grupo A.
IMPETIGO:
Staphylococcus TRANSPORTE ANAEROBIO:
aureus.
En medio de transporte comercial
para anaerobios dentro de unidad
Staphylococcus
aureus.
FOLICULITIS:
Pseudomonas
aeruginosa.
Staphylococcus
PARONIQUIA aureus.
Candida spp.
Staphylococcus
PANADIZO aureus.
Virus herpes simplex.


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ULCERAS Y NODULOS
MICROORGANISMOS
ENFERMEDADES Y TOMA DE MUESTRA
QUE COMUNMENTE
SINTOMAS Y TRANSPORTE
LA CAUSAN
DIFTERIA CUTANEA. Corynebacterium Toma de exudados con tòrula.

Diphteriae.
Toma de exudados y heridas

con tòrula.
Tejidos o material contaminado

con B. anthracis.
Sangre.
ANTHRAX. Bacillus anthracis. TRANSPORTE:
Tórulas en medio de transporte

Stuart.
Tejidos en tubo estéril.
Frascos de hemocultivo en caso
de sangre.
Enviar dentro de unidad de trans-
porte térmico.


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SENOS PARANASALES:
MICROORGANISMOS
ENFERMEDADES Y TOMA DE MUESTRA Y
QUE COMUNMENTE
SINTOMAS TRANSPORTE
LA CAUSAN
Desinfectar la piel con

alcohol 70°.
Aspirar con aguja y jeringa desde

abscesos.
Actinomyces spp.
ACTINOMICOSIS Proopribacterium Material desde biopsias.
propiónica.
TRANSPORTE:
para anaerobios dentro de unidad
Aspiración con aguja y jeringa

desde abscesos.
Diversos focos Staphylocccus aureus.
de infecciones Enterobacterias.
profundas o crónicas. Pseudomonas spp. TRANSPORTE:
En tubo estéril o en medio de
transporte Stuart sin la tórula;
dentro de unidad de transporte
térmico.


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INFECCIONES DE HERIDAS
MICROORGANISMOS
ENFERMEDAD Y TOMA DE MUESTRA Y
QUE COMUNMENTE
SINTOMAS TRANSPORTE
LA CAUSAN
-Limpieza por arrastre con

suero fisiológico, luego aplicar
de la lesión.
-Pus por aspiración con aguja y
INFECCIONES Staphylococcus aureus jeringa.
DE HERIDAS Streptococcus Grupo A -Tejidos desde biopsias.
POST Enterococcus TRANSPORTE:
OPERATORIA Enterobacterias
Bacteroides AEROBIO:
Clostridium Medio de transporte Stuart
Tubo estéril.
ANAEROBIO:
Medio de transporte
comercial para anaerobios.


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MORDEDURAS
MICROORGANISMOS
ENFERMEDAD Y TOMA DE MUESTRA Y
QUE COMUNMENTE
SINTOMAS TRANSPORTE
LA CAUSAN
-Limpieza por arrastre con suero

fisiológico, luego aplicar tòrula
en el fondo de la lesión.
-Pus, por aspiración con aguja y
jeringa.
TRANSPORTE:
Pasteurella multocida.
MORDEDURAS AEROBIO:
Streptobacillus moniliformes.
ANIMALES
Spirillum minus.
Tórula en medio de transporte
Stuart.
ANAEROBIOS:

para anaerobios.
AEROBIO: 48 - 72 Hrs. Mínimo.
ANAEROBIO: Informe preliminar a las 48 - 96 hrs.


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LAVADO BRONCO-ALVEOLAR
INDICACIONES:
 Paciente con neumonía de difícil diagnóstico

 Pacientes inmunodeprimidos con neumonía.
TOMA DE MUESTRA:
 Debe ser tomada por un médico especialista.
TRANSPORTE:
 En el mismo set de toma de muestra, de inmediato al laboratorio,

sin refrigerar .
ENTREGA DE RESULTADOS: a las 48 – 72 hrs.


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LEUCOCITOS FECALES
TOMA DE MUESTRA:
1.- Deposición por emisión espontánea.
2.- Deposición obtenida por sonda rectal.
En ambos casos de deposición se deposita en una frasco de polietileno
limpio, entregar a laboratorio.
LIMITACIONES:
FALSOS NEGATIVOS: deficiente toma de muestra.
FALSOS POSITIVOS: dermatitis del pañal.
COLITIS ULCEROSA: leucocitos abundantes.
ENTREGA DE RESULTADOS: Durante el día.


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LIQUIDO ASCITICO
GENERALIDADES:
Liquido peritoneal: líquido ubicado entre el peritoneo parietal y visceral (cavidad

abdominal, peritoneal)
 Ascitis: acúmulo anormal de líquido en la cavidad abdominal.

 Peritonitis: inflamación del peritoneo.
 Peritonitis primaria: peritonitis bacteriana sin evidencia de ruptura de
víscera.
 PBE: peritonitis bacteriana espontáneas Ascitis (cirrosis).
TOMA DE MUESTRA:
Por punción y aspiración de líquido de cavidad abdominal.

-Personal entrenado
-Técnica aséptica
NUMERO DE MUESTRAS:
1. Tubo con Heparina, tapa verde: para análisis bioquímico (glicemia, proteínas,
otros ).
2. Tubo con EDTA, tapa lila: para recuento celular y diferencial.
3.-Tubo estéril para microbiología, ò tubo tapa roja estéril, sin anticoagulante:3-5ml
para gram y cultivo..
4. Inoculación directa en frasco de hemocultivo pediátrico (amarillo), con 1-3 ml de
líquido.
TRANSPORTE:
-Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente.
HORARIO RECEPCION:
Durante las 24 horas.
A las 48 horas, mínimo.


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LIQUIDO ARTICULAR O SINOVIAL
INDICACIONES:
Fundamentalmente para evaluar las alteraciones del líquido sinovial en las artritis.
La inflamación de estas articulaciones se puede producir por:
 Agente físico o mecánico (traumatismos, gota)

 Agentes químicos (hemofilia)
 Artritis supuradas o sépticas
 Artritis por reacciones inmunológicas o autoinmunes
 Artritis reumatoide y fiebre
TOMA DE MUESTRA: Se realiza por punción articular:
 Personal entrenado
 Técnica aséptica
 Anestesia local
 Procesar antes de 4 horas de obtenido
NUMERO DE MUESTRAS:
1. Tubo con Heparina, tapa verde: para análisis bioquímico.

3. Tubo estéril para microbiología o tubo tapa roja estéril, sin anticoagulante: 3
a 5 ml, para gram y cultivo.
4. Inoculación directa en frasco de hemocultivo pediátrico (amarillo) con 1-3
ml. de líquido.
TRANSPORTE:
Piedra angular del diagnóstico etiológico:
 Antes de iniciar antibióticos

 Transporte y procesamiento rápido
 Sensibilidad de Gram y Cultivo: 60-90%.
Transportar las muestras tomadas, lo más rápido posible al laboratorio, a

temperatura ambiente.


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HORARIO RECEPCION: Durante las 24 horas.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 horas, mínimo.


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CULTIVO LÍQUIDO CEFALORRAQUIDEO (LCR)
INDICACIONES:
-meningitis infecciosa -poliomielitis

-hemorragias meníngeas -LES
-encefalitis -sarcoidosis
-neuropatías -vasculitis
-hipertensión intracraneal benigna -sífilis nerviosa
-epilepsia -hidrocefalia normo-tensa
-demencia de origen metabólico -síndrome Guillain Barre
-esclerosis múltiple y sus variantes -personas VIH +
-linfoma, leucemia y otro tipo de tumores que involucran al SNC.
TOMA DE MUESTRA:
 Muestra obtenida por un médico entrenado en la técnica de punción lumbar.

 Técnica aséptica.
PROCEDIMIENTO:
 Limpieza por arrastre de la región lumbar del paciente con agua y jabón.
 Limpiar la piel con tórula de algodón impregnada con alcohol 70% mediante
movimientos concéntricos que van desde el lugar donde se realizará la
punción, hacia afuera.
 Proceder a la punción lumbar con técnica aséptica (campo estéril y equipo
de profesionales con vestimenta de protección estéril.
 Recolectar el LCR en frascos estériles plásticos con tapa rosca
(citoquímico, bacteriológico y TBC cuando se sospeche).
1.-Tubo con Heparina, tapa verde: para análisis bioquímico. (Glucosa,
y proteínas) .
2.- Tubo con EDTA, tapa lila: para recuento celular y diferencial.
3.- Tubo estéril para microbiología,o tubo tapa roja estéril sin anticoa-
gulante, 1-2 ml.: para gram y cultivo.
4.- Tubo estéril sin anticoagulante para ADA (TBC).
5.- Tubo estéril para cultivo Koch sin anticoagulante.


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Inocular además, 1 frasco de hemocultivo pediátrico (amarillo), con 1
ml. de LCR. si es posible.
 Lo adecuado para el estudio bacteriológico es de 2 ml. de LCR.

 En aquellos casos en que se obtiene escasa cantidad de muestra, el clínico
debe indicar orden, cuál de los estudios que se realizan con el LCR reviste
mayor importancia.
 Otra forma de tomar muestra de líquido cefalorraquídeo es por drenaje
ventricular y por punción de fontanela.
TRANSPORTE:
 Se debe enviar a la mayor brevedad posible al laboratorio, en un tubo

estéril plástico tapa rosca, a temperatura ambiente (no refrigerar), junto
con el frasco de hemocultivo.
 Transportar dentro de una unidad de transporte térmico.
ENTREGA RESULTADOS: A las 48 hrs. mínimo.
NOTA: Si se envía frasco de hemocultivo con LCR ,no deje de enviar además LCR
en tubo tapa roja para gram directo y siembra de la muestra.


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LIQUIDO PERITONEAL
En el caso de:
 Peritonitis bacteriana 2ª: perforación víscera (apendicitis, trauma).

 Peritonitis 3ª: complicación de peritonitis secundaria.
TOMA DE MUESTRA:
Se realiza durante el intra-operatorio con jeringa estéril.
 Personal entrenado
 Técnica aséptica
Recolectar muestra, en tubo de polietileno, tapa rosca estéril o tubo tapa roja, sin
anticoagulante, para estudio microbiológico, de 3 a 5 ml es suficiente para realizar
el estudio de gram y cultivo.
No se recomienda inocular frasco de hemocultivo, ya que este tipo de muestras

viene con una carga bacteriana alta.
TRANSPORTE:
-Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente, dentro de

una unidad de transporte térmico.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 horas, mínimo.


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LIQUIDO PLEURAL
INDICACIONES:
 Todo paciente que presente signos clínicos y/o radiológicos de derrame

pleural de etiología no precisada.
TOMA DE MUESTRA:
Debe ser realizada por un médico entrenado en la técnica de toracentesis, la

punción aspirativa debe realizarse bajo rigurosa técnica aséptica. Se debe
recolectar:
1. Tubo con Heparina, tapa verde: para análisis bioquímico (glicemia,

proteínas, otros)
3. Tubo estéril para microbiología, o tubo tapa roja estéril, sin anticoagulante:
3-5ml, para gram y cultivo.
4. Inoculación directa en frasco de hemocultivo pediátrico (amarillo), con 1-3
ml de líquido.
5. Tubo para ADA (TBC) con citrato.
6. Tubo estéril para cultivo de Koch.(TBC)
TRANSPORTE:
Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente, dentro de una

unidad de transporte térmico.


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CULTIVO NASAL
Portación nasal de Staphylococcus aureus está presente en 20 – 25 % de

individuos sanos en la comunidad y con frecuencia en el ambiente hospitalario
aumenta, de modo que solo se tomarán muestras del personal del hospital en
caso de un brote intrahospitalario bien documentado, que permita establecer que
se trata de la misma cepa, indicado por comité IAAS.
MUESTRA: Secreción nasal.
TOMA DE MUESTRA:
 Introducir tórula humedecida en solución salina y rotar en el vestíbulo de

ambas fosas nasales (tabique y cara interna de aletas nasales)
TRANSPORTE:
 Tórula en medio de transporte Stuart , a temperatura ambiente.


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MYCOPLASMA HOMINIS Y UREAPLASMA UREALYTICUM
Se envía información para el cultivo, identificación y estudio de sensibilidad de

micoplasma urogenitales. Para el diagnóstico de micoplasma urogenitales se
realiza:
 Cultivo
 Identificación
 Recuento
 Test de sensibilidad
TOMA DE MUESTRA:
 Para muestras vaginales, friccionar bien la mucosa para recoger la mayor

cantidad de células posibles.
 Efectuar la toma de muestra antes de cualquier antibioterapia.
 Se debe aplicar técnica para evitar las contaminaciones por otras bacterias.
 Después de tomar la muestra, colocar inmediatamente la tórula de
DRALON en el frasco R 1 (cortar con tijeras)
 Enviar el frasco R 1 al laboratorio.
Identifica: Micoplasma hominis, Ureaplasma urealyticum.
ANTIBIOTICOS A ESTUDIAR:
Doxicilina Ofloxacina Claritromicina Azitromicina

Eritromicina Tetraciclina Ciprofloxacino
TRANSPORTE:
-Transportar lo antes posible al Laboratorio, a temperatura ambiente, dentro de

una unidad de transporte térmico.
Informe de resultados: A las 48 horas.
Muestras diarias máximas a enviar al laboratorio: 2 muestras hasta las 14 horas,

de lunes a jueves (excepto festivos).


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CULTIVO OCULAR
GENERALIDADES:
1. Muestra precoz, tomada en la forma más aséptica posible y antes de la

aplicación de antimicrobianos.
2. La actividad antimicrobiana de los anestésicos tópicos usados pueden
interferir con el cultivo.
MUESTRA:
 SECRECION OCULAR
 RASPADO CONJUNTIVAL
TOMA DE MUESTRA:
 Tomar la muestra para cultivo antes de la aplicación de anestésico típico.

 Tomar la muestra con extremo cuidado, con la ayuda de otra persona que
inmovilice la cabeza del paciente.
 Obtener la secreción con tórula estéril del fondo de saco inferior en el
ángulo interno del ojo del extremo interior del párpado, previo aseo ocular
con suero fisiológico.
 Rotar la tórula suavemente para que toda la superficie del algodón se
empape en la secreción.
TRANSPORTE:
 Introducir la tórula en el medio transporte Stuart y mantener a temperatura

ambiente.


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CULTIVO OTICO
 Fluido del oído medio obtenido por Timpanocéntesis ( no es un

procedimiento de rutina)
 Secreción del conducto auditivo externo.
TOMA DE MUESTRA:
1. TIMPANOCENTESIS: La muestra debe ser tomada por un

Otorrinolaringólogo.
2. SECRECION CONDUCTO AUDITIVO EXTERNO:
 Aseo cuidadoso de la piel con suero fisiológico para disminuir

posibilidades de arrastrar bacterias presentes normalmente en esta
zona.
 Tomar con una tórula fina llegando hasta las cercanías del tímpano.
 Dirigir la tórula en sentido oblicuo de atrás hacia adelante y de abajo
hacia arriba.
TRANSPORTE:
Cultivo aerobio: Transportar a temperatura ambiente en medio Stuart.
Cultivo anaerobio: Transportar en medio anaerobio comercial, a temperatura

ambiente.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 48 horas mínimo.


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ROTAVIRUS Y ADENOVIRUS (Por Enzimoinmunoensayo) en deposiciones.
Rotavirus es el virus que más frecuentemente produce diarrea en los niños

y se trasmite por contacto con alimentos, manos u objetos contaminados por
deposiciones de personas infectadas. Se presenta en forma más grave en
menores de 2 años y se cree que a los 3 años todos los niños ya han tenido
contacto con el virus.
Adenovirus, corresponden a un grupo de virus que causan diferentes tipos

de enfermedades en el hombre. La mayoría de ellos producen infecciones
respiratorias, y otros, menos frecuentemente, infecciones gastrointestinales.
Pueden afectar a personas de cualquier edad aunque es más frecuente en los
niños. Se presentan durante todo el año con un discreto ascenso a fines del
invierno, primavera y principios del verano.
TOMA DE MUESTRA:
1. Deposición por emisión espontánea

2. Deposición obtenida por sonda rectal.
3. Depositar en caja o frasco plástico limpio entregada por laboratorio.
4. La muestra para leucocitos fecales sirve además para pesquisa de rotavirus.,
si la cantidad es de aproximadamente de 2 ml. de deposición líquida o una
porción de 1 – 2 gramos de deposición sólida.
TRANSPORTE:
Llevar al Laboratorio, en caja o frasco plástico a temperatura ambiente.


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CULTIVO SENOS PARANASALES
MUESTRA:
 Aspirado obtenido por punción de los senos paranasales.
TOMA DE MUESTRA:
 La muestra debe ser obtenida por otorrinolaringólogo.

 Limpiar la mucosa nasal en el punto de la aspiración para eliminar
microorganismos contaminantes.
 Obtener el aspirado por punción aséptica con jeringa.
CULTIVO AEROBIO:
 Depositar la muestra en medio de transporte Stuart y enviar a temperatura

ambiente.,
ENTREGA DE RESULTADOS: 48 horas mínimo.
CULTIVO ANAEROBIO:
 Enviar en medio de transporte comercial para anaerobios, a temperatura

ambiente.,
Informe preliminar a las 48 – 96 Horas.


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CULTIVO TEJIDOS, BIOPSIAS y ABSCESOS.
El examen microbiológico de tejidos obtenidos por cirugía o muestras de

biopsias se consideran importantes, porque este tipo de muestras pueden
representar al proceso patológico entero.
Las muestras quirúrgicas van a depender del sitio anatómico, del tipo de
enfermedad, como también del cuidado del cuidado ejercitado durante el corte
quirúrgico y dela información médica, lo que ayudará a buscar el agente
etiológico.
TOMA DE MUESTRA:
 Debe ser realizada por profesional idóneo.

 Cuando la lesión es grande o numerosa deben tomarse varias muestras
desde diferentes sitios.
 En casos de escaras, deben ser removidas antes de realizarse la biopsia y
recolectar al menos 1 gr. de tejido.
1. TEJIDOS BLANDOS: Extraer la muestra con aguja y jeringa cuando la lesión

permita la incisión y drenaje, o un trozo de tejido obtenido con técnica
aséptica.
2. MUESTRAS DE TEJIDOS POSTMORTEM: limitado para órganos específicos

en el cual se sospecha la infección.
3. MUESTRAS DE AUTOPSIA: obtener una porción grande de tejido con al

menos, una superficie serosa o capsular intacta.
4. ABSCESOS: debe incluir una muestra del contenido líquido interno como
también una porción de las paredes. Extraer con aguja y jeringa.


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TRANSPORTE AEROBIO:
 Las muestras de biopsias y / o tejidos se colocan dentro de un frasco estéril

de boca ancha.
 Si la muestra es pequeña o escasa, colocar suero fisiológico.
 En casos de abscesos colocar en tubo estéril o en medio de transporte
Stuart sin la tórula.
. TRANSPORTE ANAEROBIO:
 Enviar en medio de transporte comercial para anaerobios, a temperatura

ambiente.
ENTREGA DE RESULTADOS: 48 hrs. mínimo


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MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL FEMENINO.
SITIO
MICROORGANISMOS MUESTRA RECOLECCION DE MUESTRA
ANATOMICO
TRANSPORTE
1.- irrigar con 0,5 ml. de suero
fisiológico y aspirar.
VULVA Haemophilus ducreyi. Aspirado ó tórula
2.-Tomar muestra desde la
lesión con tórula humedecida
con suero fisiológico.
Aspirar el absceso
con aguja y jeringa, previo aseo
genital.
Neisseria gonorrhoeae
GLANDULA
C. trachomatis. Aspirado de
DE CULTIVO AEROBIO:
Bacterias aerobias la glándula.
BARTHOLINO Enviar en medio de
y anaerobias.
transporte Stuart.
U.urealyticum.
CULTIVO ANAEROBIO:
En medio de transporte comercial.
1.-Realizar aseo genital segùn
normativa.
2.-Colocar espéculo sin lubricante.
3.-Introducir una sonda
a través de la vagina,
Trichomonas vaginalis.
conectada a una jeringa
Candida albicans.
VAGINA Secreción vaginal. que contenga 2 ml. de
Gardnerella vaginalis.
suero fisiológico.
Streptococcus Grupo B.
4.-Hacer lavado vaginal
con el suero fisiológico.
5.-Colocar el producto
del lavado en tubo estéril.


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1.-Realizar aseo genital según

VAGINA normativa
2.-Tomar la muestra con tórula de

Listeria monocytogenes. Tórula vaginal
la mucosa vaginal.
3.-Enviar en medio de transporte

Stuart.
1.Realizar aseo genital según

normativa.
2.Limpiar cérvix de secreción
Tórula en medio de vaginal y mucus.
CERVIX Neisseria gonorrhoeae
transporte Stuart. 3.Usar espéculo sin lubricante.
4.Tomar muestra de exudado
endocervical haciendo rodar la
tórula.
Aspirado transcervical a través

Bacterias aerobias y de cateter.
ENDOMETRIO Aspirado tórula
anaerobias. Tórula en cirugía en medio
C.trachomatis. de transporte Stuart.
Neisseria gonorrhoeae.
TROMPAS DE
C. trachomatis. Aspirado tórula La toma de muestra se hace
FALOPIO
bacterias aerobias y en la cirugía.
anaerobias.
Amniocéntesis.
LIQUIDO Bacterias aerobias y Catéter intrauterino.
Líquido amniótico
AMNIOTICO anaerobias. Tórula desde cesárea
en medio de transporte Stuart.
NOTA: Los aspirados para cultivo aerobio se pueden transportar en medio Stuart sin la
tórula. Para cultivo anaerobio utilizar medio comercial anaerobio.


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MUESTRAS DEL TRACTO GENITAL MASCULINO
SITIO RECOLECCION DE
MICROORGANISMO MUESTRA
ANATOMICO MUESTRA
Y TRANSPORTE
Neisseria
gonorrhoeae. Post masaje
Masajear próstata a
Escherichia coli. prostático
través del recto.
Enterobacter spp. de secreción
Colocar líquido en tubo
Klebsiella spp. uretral
estéril o con tórula en medio
PROSTATA: Proteus spp. tomada por
de transporte Stuart.
Serratia spp. urólogo.
Colocar en tubo estéril
Pseudomonas spp.
Enrerococcus. Cultivo de
Staphylococcus semen
Saprophyticus.
Post masaje
prostàtico
ABSCESO Staphylococcus Secreciòn
Idem al anterior
PROSTATICO aureus uretral
tomada por
urólogo.
Neisseria
Secreción
gonorrhoeae.
uretral
Chlamydia
Orina de
trachomatis. Tórula en medio de
EPIDIDIMO primera
Enterobacterias transporte Stuart.
micción.
Pseudomonas spp. Tubo estéril.
Cultivo de
Cocaceas gram
semen
positivas.
Secreción
Enterobacterias.
TESTICULAR tomada con En medio de transporte
Staphylococcus spp.
(ORQUITIS) tórula en la Stuart.
Streptococcus spp.
cirugía.


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Realizar aseo genital.

Chlamydia Exteriorizar la secreción
trachomatis. por presión de uretra hacia
Secreción
Neisseria Introducir tórula de
uretral.
URETRAL: gonorrhoeae. DRALON 2 cms.
Haemophilus spp. Rotar tórula.
Ureaplasma Colocar en medio
urealyticum. de transporte.


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UROCULTIVO.
INDICACIONES:
1. Sospecha ITU: Disuria, hematuria, orinas turbias, mal olor.

2. Síndrome febril en estudio.
3. Examen pre-operatorio.
4. Previo procedimiento invasivo urológico.
TOMA DE MUESTRA:
 Tomar la primera micción de la mañana. Si no es posible, dejar

permanecer la orina en la vejiga el mayor tiempo posible para aumentar el
número de microorganismo para volumen.(> 4 horas)
 La orina es un líquido estéril, pero bajo ciertas condiciones puede
contaminarse con flora de la uretra, próstata o periné.
ORINA DE 2° CHORRO:
 Este método depende de la edad, sexo y habilidad del paciente para

cooperar. Debe instruirse al paciente en forma verbal y escrita (pacientes
que se les da hora) para tomar la muestra.
 Debe ser tomada por personal adiestrado.
TOMA DE MUESTRA PARA PACIENTES FEMENINAS:
 Lavarse las manos con agua y jabón, enjuagarse y secar con toalla nova.
 Realizar aseo genital: con una tórula de algodón con jabón, limpie los labios
mayores por separado, con un solo movimiento de arrastre de arriba hacia
abajo. Separe los labios mayores con el dedo índice y pulgar y limpie en la
misma forma los labios menores y vestíbulo.
 Enjuagar con agua tibia usando el resto de las rótulas de algodón.
 Colocar un tapón de gasa estéril en la vagina.
 Orinar una cantidad pequeña en el baño y después recolectar la orina
restante en un tubo estéril o frasco. Cerrar evitando el contacto con dedos,
genitales externos o ropa.
 Sacar tapón vaginal y eliminar.
 Enviar antes de una hora al laboratorio.


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TOMA DE MUESTRA PARA PACIENTES MASCULINOS:
 Lavarse las manos con agua y jabón, enjuagar y secar con toalla nova.
 Lavado: retrae el prepucio, limpiar con tórula de algodón y jabón
prolijamente con movimiento de arrastre.
 Enjuagar con agua tibia y secar con tórula de algodón.
 Orinar: el primer chorro se elimina: recolectar la muestra de orina restante
directo al tubo estéril.
 Cerrar el tubo.
CATETER DE PERMANENCIA PROLONGADA (PUNCION):
 Desinfectar sonda con una tórula de algodón con alcohol 70 °.dejando

que se evapore.
 Puncionar directamente el catéter con aguja en extremo distal de la sonda.
 Colocar la orina aspirada en un frasco o tubo estéril
CATETERIZACION:
 Obtener orina por método de cateterización de la vejiga con técnica

aséptica.
 No se recomienda rutinariamente por el riesgo de introducir bacterias a la
vejiga.
 Indicar en la orden de laboratorio muestra tomada por catéter.
PUNCION VESICAL:
 Obtenida por técnica aséptica por médico.

 Indicar en la orden: “muestra por punción”.


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TRANSPORTE:
 En el mismo tubo o recolector con orina, enviar antes de 1 hora al
laboratorio.
 Transportar a temperatura ambiente, dentro de una unidad de transporte
térmico.
ENTREGA DE RESULTADOS: A las 24 – 48 horas.


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VIRUS RESPIRATORIOS POR IFI.
 Virus respiratorio Sincicial

 Adenovirus
 Parainfluenza 1- 2- 3
 Influenza A
 Influenza B
La actividad más importante desarrollada por la sección de

inmunofluorescencia es la determinación de infecciones por virus respiratorios, los
cuales están asociados a infecciones respiratorias agudas del tracto respiratorio
bajo y representan una de las principales causas de hospitalización en menores
de dos años.
Las infecciones respiratorias agudas bajas ocupan el primer lugar en la tasa

de mortalidad entre el mes y los doce meses y el segundo lugar desde el año a los
cuatro años de vida. La mortalidad se incrementa ante la presencia de factores de
riesgo como displasia broncopulmonar en prematuros, cardiopatías congénitas,
inmunosupresiones, etc.
Los agentes etiológicos asociados con mayor frecuencia a infecciones

respiratorias agudas bajas son los virus respiratorios, principalmente el virus
sincicial respiratorio, adenovirus y parainfluenza. El adenovirus es el agente
etiológico de mayor gravedad con una mortalidad de hasta 10% con secuelas
como bronquiectasias, bronquiolitis obliterante o fibrosis pulmonar.
TOMA DE MUESTRA: ASPIRADO NASOFARINGEO
 Muestra tomada por profesional idóneo.

 Muestra óptima es el aspirado nasofaríngeo.


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MATERIALES. UNA BANDEJA CON:
1. Tubo estéril, provisto de doble entrada.

2.- Una sonda estéril para aspiración (nelatón N° 8)
3.- Gradilla para tubos en cubeta con baño de hielo.
4.- Bomba de vacío.
5.- Un par de guantes estériles.
PROCEDIMIENTO:
- Lavarse las manos

- Colocarse guantes
- Conectar el tubo a la sonda de aspiración y al sistema de aspiración.
- Introducir la sonda sin aspirar, por una fosa nasal hasta la nasofaringe y
retirar la sonda aspirando.
- Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal.
- Aspirar un volumen aproximado de 6 – 8 ml. de solución buffer pH 7.2. frío,
a través del tubo
- Cambiar la tapa del tubo colectar.
- Enviar al laboratorio con la orden de examen. La muestra debe permanecer
todo el tiempo hasta la llegada al laboratorio, en baño de hielo.
- Se deben enviar inmediatamente.
TRANSPORTE:
 La muestra debe ser transportada al laboratorio en tubo plástico, estéril,

con tapa rosca, con 6-8 ml. de solución buffer pH 7.2, con unidad
refrigerante, dentro de una unidad de transporte térmico.
 Enviar de inmediato.
HORARIO DE RECEPCION : hasta las 8:30 horas.


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BORDETELLA POR IFD.
Una de las actividades de la sección de inmunofluorescencia es la

determinación de infecciones por Bordetella pertussis, patógeno exclusivamente
humano, agente etiológico de la coqueluche o tos convulsiva, enfermedad
endémica con ciclos epidémicos cada tres o cuatro años. Produce una infección
respiratoria aguda, grave, altamente contagiosa, de declaración obligatoria cuyas
manifestaciones clínicas dependen de la edad del paciente, el estado
inmunológico, nutricional y que afecta mayoritariamente a los niños menores de un
año de edad.
La transmisión de la enfermedad ocurre de persona a persona a través de

aerosoles o gotas de secreción de un individuo infectado. Luego de un período de
incubación en general de siete días comienza la fase catarral que dura de una a
dos semanas y cuya sintomatología puede confundirse con otras infecciones
respiratorias. Esta es la etapa más contagiosa de la enfermedad. La siguiente fase
es la paroxística que dura entre tres y seis semanas, presentándose con accesos
de tos, estridor inspiratorio y vómitos después de la tos. En niños pequeños
pueden no desarrollarse paroxismos ni estridor pero pueden presentar cianosis,
apnea y muerte súbita. El último período es el de convalecencia que puede llegar
a durar varios meses.
TOMA DE MUESTRA: ASPIRADO NASOFARINGEO
 Muestra tomada por profesional idóneo.

 Muestra óptima es el aspirado nasofaríngeo.


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MATERIALES. UNA BANDEJA CON:
1. Tubo estéril, provisto de doble entrada.

2.- Una sonda estéril para aspiración (nelatón N° 8)
3.- Gradilla para tubos en cubeta con baño de hielo.
4.- Bomba de vacío.
5.- Un par de guantes estériles.
PROCEDIMIENTO:
- Lavarse las manos

- Colocarse guantes
- Conectar el tubo a la sonda de aspiración y al sistema de aspiración.
- Introducir la sonda sin aspirar, por una fosa nasal hasta la nasofaringe y
retirar la sonda aspirando.
- Repetir el procedimiento en la otra fosa nasal.
- Aspirar un volumen aproximado de 6 – 8 ml. de suero fisiológico, a través
del tubo colector para arrastrar toda la secreción.
- Cambiar la tapa del tubo colectar.
- Enviar al laboratorio con la orden de examen. La muestra debe permanecer
todo el tiempo hasta la llegada al laboratorio, en baño de hielo.
- Se deben enviar inmediatamente.
TRANSPORTE:
 La muestra debe ser transportada al laboratorio en tubo plástico, estéril,

con tapa rosca, con 6-8 ml. suero fisiológico, con unidad refrigerante,
dentro de una unidad de transporte térmico.
 Enviar de inmediato.


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La recepción de las muestras se realizara en jornada normal entre las

8:00am a las 8:30pm de lunes a viernes; durante campañas de invierno se
recepcionarán las muestras en el mismo horario de jornada normal de lunes a
domingos.
Cada muestra para ser recepcionada debe venir con su respectiva orden y
rotulada en forma legible, bien sellada y como punto crítico que traiga una buena
muestra de secreción nasofaríngea; muestras que no traigan una buena muestra,
mal rotuladas o mal selladas deben ser devueltas al servicio de origen.


Página 58 de 59
BIBLIOGRAFIA.
 Ulloa, Valenzuela, Pefaur, Martínez. Manual de Procedimientos de

Muestras Clínicas para diagnóstico bacteriológico. 1995 Santiago.
 Lennette, Balows, Hauster y Shadomy. Manual de Microbiología Clínica.

4ta. Edición 1991, Washington D.C.
 Procedimientos técnicos de Laboratorio Clínico. Vol. 1 Instituto Salud

Pública, 1994.
 Murray, Baron, Jorgensen, Landry, Pfaller. Manual de Microbiología Clínica.

9ª Edición 2007.
 Koneman E, Allen S, Dowell V, Sommers H. Diagnóstico microbiológico.

Editorial Médica Panamericana. 3a ed. 1992, Buenos Aires.
 Lauderdale T, Chapin K, Murray P. Reagents. En: Murray PR, Baron EJ,

Pfaller MA, Tenover FC. Yolken RH. Manual of Clinical Microbiology. 7a ed.
Washington DC: American Society for Microbiology; 1999.
 Mc Clatchey KD. Clinical Laboratory Medicine. Baltimore: Williams and

Wilkins, Baltimore, MD, 1994.
 Koneman EW, Allen SD, Janda WM ,Schreckenberger PC, Winn WC. The
Role of the Microbiology Laboratory in the Diagnosis of Infectious Diseases:
Guideline to Practice and Management. En: Diagnostic Microbiology. 5th ed.
Philadelphia: JB Lipincott Company, 1997.
 Murray PR, Baron EJ, Pfaller MA, Tenover FC, Yolken RH. Manual of
Clinical Microbiology 7th ed. American Society for Microbiology, Washington
DC 1999.
 Murray PR. Specimen Collection and Transport. ASM Pocket Guide to

Clinical Microbiology. Washington, 1996; 3: 40-705.


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 Miller JM. A Guide to Specimen Management in Clinical Microbiology. 1996.

American Society for Microbiology, Press Wasington DC1996; 3: 37-115
 Henry JB. Diagnóstico y Tratamiento Clínicos por el Laboratorio. 9ª Ed.

Masson-Salvat, Ediciones Científicas y Técnicas, SA. Mexico, 1997.
 Gilberto AM, Mauricio AR. Interpretación Clínica del Laboratorio. 6ª ed. Ed.
Médica Panamericana. LDA, Colombia, 2000.

Manual Toma de Muestras Microbiologia. Hospital de Rancagua. 2011 PDF

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Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

TM. Antonio Sanaguas

Fecha: 01/08/2011 Fecha: 21/09/2011 Fecha: 21/09/2011

Manual Toma de Muestras Microbiología

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

Manual Toma de Muestras Microbiología

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

LIQUIDO ARTICULAR O SINOVIAL 32

Manual Toma de Muestras Microbiología

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

El diagnostico de las enfermedades infecciosas, se basa en el estudio de

Requisitos para una buena toma de muestra.

1. Personal idóneo en la toma de muestra.

2. Indicaciones claras al paciente respecto del examen se le va a realizar.

3. Preparación adecuada del paciente, como aseo previo, uso de antisépticos,

4. Muestra representativa del proceso infeccioso.

5. Muestra tomada antes del tratamiento antimicrobiano. De lo contrario

6. Muestra tomada con la cantidad adecuada.

7. Uso correcto de los medios de transporte.

Manual Toma de Muestras Microbiología

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

MUESTRA MEDIO DE TRANSPORTE

Aspirado nasofaríngeo para virus respiratorios. Buffer pH 7.2.

Aspirado nasofaríngeo para Bordetella. Suero fisiológico.

Coprocultivo. Cary Blair.

Secreciones en tórula. Stuart.

8. Número de muestras adecuada.

9. Las muestras recolectadas en tubos estériles sin medio de transporte, deben

10. Como bioseguridad, las muestras deben transportarse al laboratorio, dentro de

11. Especificar examen solicitado, bacteria o grupo de microorganismo que se

12. Frente a cualquier duda o consulta referente a determinada muestra, resultado

13. Es importante que la solicitud de examen, especifique la edad del paciente, ya

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Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

Uso correcto de las órdenes de exámenes.

PARALISIS FLACCIDA: Formulario especial del ISP

SARAMPION: Formulario especial del ISP

HANTA VIRUS: Formulario especial del ISP

Manual Toma de Muestras Microbiología

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

NORMA DE TOMA DE CULTIVOS.

En relación a la solicitud de cultivos microbiológicos, se recomienda lo

 La solicitud de toma de cultivo debe corresponder a una hipótesis

 No está indicado realizar cultivos rutinarios de vigilancia, como escaras y

 Se debe consignar la toma de muestras en la ficha clínica y hoja de

 En el caso de múltiples heridas o escaras con signo de infección, se

 Se debe considerar además, que al solicitar un cultivo se debe esperar su

 No está indicado tomar muestras de loquios, objetos inanimados, manos y

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Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

COMITE DE INFECCIONES ASOCIADAS A LA ATENCION DE SALUD IAAS.

Criterios de Rechazo de Solicitudes y/o Muestras

Si las solicitudes y/o las muestras no cumplen los requisitos mínimos

A. Discrepancia entre la identificación del paciente que figura en la solicitud del

Manual Toma de Muestras Microbiología

Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

TOMA DE MUESTRA: Debe ser realizada por profesional idóneo

SITIO ANATOMICO MUESTRA METODO

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Manual Toma de Muestras Fecha: 21 sept. 2011

Abrir y hacer aspiración

Cantidad de muestra: En lo posible 1-5 ml