Metodos de extracción.

Los dientes de ajo se desligan de la cabeza de ajo, y les retira la serie de capas envolventes.
Después de esto se procede al pesaje de 25 g, los cuales deben ser desinfectados, macerados y
trasladados cuantitativamente al proceso de extracción. Las extracciones se realizan bajo tres
variables:

-Variedad de ajo: blanco y morado. –

Tipo de solvente: etanol 75%, hexano, mezcla hexano:etanol (1:1). Los solventes son elegidos con
el fin de probar el nivel de extracción de componentes del ajo a diferentes polaridades, siendo el
menos polar el hexano, y con polaridad mayor el etanol al 75%. –

Sistema de extracción: soxhlet y en frío con agitación.

Extracción soxhlet.

La muestra es envuelta en papel filtro (110mm de diámetro de poro), y dispuesta dentro del
extractor de 100 mL de capacidad. Se utiliza una manta eléctrica de calentamiento y agua
corriente para el condensador. 2.2.2

Extracción en frío: la muestra preparada y el solvente son dispuestos dentro de un erlenmeyer de

250 mL. La boca de los erlenmeyers es cubierta con papel aluminio y se implementa agitación
magnética a temperatura ambiente (aprox. 25º C). Se realizan todos los procesos de extracción
por triplicado con un tiempo de dos horas cada uno, conjugando las dos variedades de ajo, los tres
tipos de solventes y los dos montajes de extracción.

Los solventes de extracción son separados de los extractos.

Ensayos de Identificación.

https://tesis.ipn.mx/jspui/bitstream/123456789/9243/1/81.pdf

http://cenam.gob.mx/simposio2008/sm_2008/memorias/S2/SM2008-S2A2-1066.pdf

http://www.bioline.org.br/pdf?cg13015

8.3 Análisis cualitativo para identificación de alicina en el extracto acuoso de ajo.

La metodología para la identificación de alicina en el extracto acuoso de ajo se realizo de acuerdo

a (CAMAG, 2004) y se describe a continuación.

Fase estacionaria Las placas de sílica gel 60 F254 (Merck), 20 X 20 cm, fueron prelavadas con
metano! y secadas en una estufa a 100 ° C por 1 hr con el fin de activarla, se deja enfriar en la
cámara al vació.

Fase móvil La solución tolueno: acetato de etilo en una proporción (10:3) fue añadida a la cámara
de desarrollo de tal manera que el volumen alcanzara una altura de 5 mm por arriba del borde
inferior.
EXTRACCION

Extracción: Se pesó con exactitud de 0.001 g, aproximadamente de 1 a 5 g de ajo y se transfirió a

un matraz Erlenmeyer de 250 mL seguido de la adición de aproximadamente 30 g de la disolución
del estándar interno. La mezcla de ajo y disolución de etilparabeno se homogenizó durante
aproximadamente 2.5 min, y al finalizar se mantuvo en reposo a temperatura ambiente por 30
min. Posteriormente se centrifugó a 3 500 rpm durante 10 min. Del sobrenadante se tomaron 2
mL y se aforaron a 10 mL con la disolución de ácido cítrico. Finalmente la disolución final se filtró a
través de una membrana Millipore para su análisis por HPLC.

PURIFICACION
Material y solventes
o Cromatógrafo de líquidos de alta presión: Gilson 305
o Detector UV/VIS: Gilson 115
o Columna. C18 20 cm (Macherey Nagel
o Cartucho Sep Pak C18 (360 mg) (Waters)
o Los solventes calidad HPLC metanol, acetonitrilo eran de Panreac
Procedimiento
Un cartucho Sep Pak (Waters) C18 (360 mg) fue acondicionado pasando 5 mL
de metanol seguido de 10 mL de agua. Posteriormente, 400 µL de alicina
sintética disuelta en 3,6 mL de agua se pasó a través del cartucho. La alicina fue
eluida con volúmenes sucesivos de 30% metanol/agua. Se recogieron fracciones
de entre 1 a 2 mL (un total de 8) que fueron analizadas por HPLC con la columna
de C18 y con detección UV a 254 nm. El eluyente fue una mezcla de
acetonitrilo/metanol/agua (50/10/40) a un flujo de 1 mL/min