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SEDE DAVID.
“BIOQUIMICA”. 2018
Teléfono: 6949-8202.
Correo: rosamguerra1507@gmail.com.
La Bioquímica es el estudio de los procesos químicos en los seres vivos. Como tal, esta disciplina está
estrechamente relacionada con la química del carbono, es decir con la química orgánica. Es la ciencia
que estudia la mismísima base de la vida: las moléculas que componen las células y los tejidos, que
catalizan las reacciones químicas de la digestión, la fotosíntesis y la inmunidad, entre otras. Es una
materia fundamental dentro de las ciencias básicas pues ayuda a comprender los principios fisiológicos
del funcionamiento de los seres vivos y en muchos casos explica el origen de múltiples enfermedades
como las genéticas y metabólicas, entre otras, información que puede usarse para diseñar un
tratamiento adecuado. Al permitir desentrañar el funcionamiento básico de los agentes patógenos, la
bioquímica se constituye en una herramienta valiosísima para el diseño de estrategias, como la
farmacológica, que permitan combatirlos en aras de la preservación de la salud. La bioquímica ha
trascendido los laboratorios de investigación y cada día juega un papel más importante a nivel industrial
optimizando procesos químicos, ayudando en los procesos de bioremediación y en la obtención de
bioetanol a partir de la biomasa entre muchos más ejemplos. También se ha transformado en una
ciencia mucho más cercana al público general, al constituirse como fundamento de múltiples pruebas
clínicas y diagnósticas, no solo de enfermedades, sino también en el ámbito criminalístico y forense. Es
también la bioquímica el catalizador de la era biotecnológica, gracias a la cual esperamos en un futuro no
muy lejano aumentar considerablemente nuestra calidad y esperanza de vida. Miremos donde miremos
estamos rodeados de fenómenos bioquímicos, desde los procesos metabólicos que suministran la
energía, hasta los fenómenos que se esconden en la química cerebral y que nos hacen ser conscientes de
lo complejos que somos. La bioquímica es una materia tan compleja como bella, tan abrumadora como
estimulante. Déjate enamorar por la ciencia que da respuesta a muchas de las preguntas fundamentales
que alguna vez te hiciste.
Objetivos
General:
Comprender los procesos químicos básicos sobre los que se fundamenta la vida.
Entender la relación entre la estructura y la función de biomoléculas como las proteínas, lípidos
y carbohidratos.
El estudiante conocerá a nivel molecular las principales rutas metabólicas tanto anabólicas como
catabólicas, como se regulan e integran y las patologías que se acompañan por alteraciones en las
mismas. Este curso permitirá a los estudiantes conocer los abordajes moleculares en el diagnóstico,
prevención y tratamiento de las enfermedades humanas. Así mismo el estudiante conocerá en detalle
los procesos de transducción de energía, tanto en las células eucariotas como procariotas.
Este curso dota al estudiante de las herramientas básicas para el estudio de la fisiología animal y vegetal
y se constituye junto con la microbiología, en el fundamento de la biología molecular y la biotecnología.
1. INTRODUCCIÓN
Uno de los cursos fundamentales es la Bioquímica la cual permite comprender los mecanismos
de formación y transformación de los nutrientes que componen un determinado alimento.
La presente guía de prácticas de laboratorio contiene una serie de experimentos básicos que
complementan los conceptos fundamentales.
El trabajo de laboratorio utiliza como materiales de experimentación, materias primas de uso
común como harinas de cereales y leguminosas, féculas, frutas y verduras, tejidos de origen
animal, que ayudan al estudiante a asimilar las técnicas de uso común en la investigación
bioquímica con fuentes alimenticias o potencialmente alimenticias.
La investigación no es completa sino se divulgan los resultados obtenidos en la experiencia. Es
importante que el estudiante aprenda la forma de reportar sus datos y a saber interpretar las
conclusiones obtenidas por otros investigadores, con el fin de evaluar su propia investigación.
Esto hace necesario que elabore un informe donde presente sus datos, resultados y conclusiones
obtenidos durante el trabajo experimental.
Antes de realizar las prácticas, cada estudiante debe adelantar el informe de laboratorio hasta el
punto 7, incluyendo la bibliografía. Los demás puntos se completan después de realizar la práctica.
1. Título de la práctica.
2. Objetivo general.
3. Objetivos específicos.
4. Marco teórico.
5. Reacciones químicas que ocurren en la práctica.
6. Lista de materiales y reactivos.
7. Diagrama de flujo del procedimiento.
8. Tabla de datos, resultados y observaciones.
9. Cálculos.
10. Gráficas, si se necesitan.
11. Análisis de resultados y de gráficas.
12. Conclusiones.
EVALUACIÓN:
15 % Distribuidos de la siguiente forma:
PRACTICA No.2
10-15/12/2018 Osmosis
El trabajo en el laboratorio requiere la observación de una serie de normas de seguridad que eviten
posibles accidentes debido a desconocimiento de lo que se está haciendo.
1 NORMAS PERSONALES
• Cada grupo de prácticas se responsabilizará de su zona de trabajo y de su material.
• Es OBLIGATORIO la utilización de bata, ya que evita que posibles proyecciones de sustancias químicas
lleguen a la piel. Por supuesto además, evitarás posibles deterioros en sus prendas de vestir.
• Use gafas de seguridad.
• Si tienes el pelo largo, llevarlo recogido.
ESTRICTAMENTE PROHIBIDO EL USO DEL CELULAR DURANTE LAS CLASES.
• En el laboratorio está terminantemente prohibido fumar, ni tomar bebidas ni comidas.
• Antes de utilizar un compuesto, asegurarse bien de que es el que se necesita, fijarse bien el rótulo.
• No devolver nunca a los frascos de origen los sobrantes de los productos utilizados sin consultar con el
profesor.
• Verifica el voltaje de trabajo del instrumento antes de enchufarlo. Cuando los instrumentos no estén
siendo usados deben permanecer desenchufados.
• Usa siempre guantes de asbesto, para el aislamiento térmico, al manipular material caliente.
• Es muy importante que cuando los productos químicos de desecho se viertan en la pila de desagüe,
aunque estén debidamente neutralizados, debe dejarse que circule por la misma, abundante agua.
• No tocar con las manos y menos con la boca, los productos químicos.
• No pipetear con la boca, se debe utilizar una pera manual o dispositivo que se disponga para tal fin.
• Los ácidos requieren un cuidado especial. Nunca se debe adicionar agua sobre ellos, cuando se quiera
diluirlos; siempre al contrario, es decir, ácido sobre agua. Tenga en cuenta que normalmente hay
desprendimiento de calor.
• Los productos inflamables (gases, alcohol, éter, etc.) no deben estar cerca de fuentes de calor. Si hay que
calentar tubos con estos productos, se hará al baño María, nunca directamente a la llama.
• Si se vierte sobre ti cualquier ácido o producto corrosivo, lávate inmediatamente con mucha agua y avisa
al profesor.
• Al preparar cualquier disolución se colocará en un frasco limpio y rotulado convenientemente.
• Cuidado con los bordes y puntas cortantes de los tubos u objetos de vidrio.
El vidrio caliente no se diferencia a simple vista del vidrio frío. Para evitar quemaduras, dejarlo enfriar
antes de tocarlo.
• Las manos se protegerán con guantes o trapos cuando se introduzca un tapón en un tubo de vidrio.
• Si tienes que calentar a la llama el contenido de un tubo de ensayo, observa cuidadosamente estas dos
normas: Ten sumo cuidado y ten en cuenta que la boca del tubo de ensayo no apunte a ningún
compañero. Puede hervir el líquido y salir disparado, por lo que podrías ocasionar un accidente. Calienta
por el lateral del tubo de ensayo, nunca por el fondo; agita suavemente.
• Cuando se determinan masas de productos químicos con balanza, se colocará papel de filtro sobre los
platos de la misma y si es necesario, porque el producto a pesar fuera corrosivo, se utilizará un vidrio de
reloj.
• Se debe evitar cualquier perturbación que conduzca a un error, como vibraciones debidas a golpes,
aparatos en funcionamiento, soplar sobre los platos de la balanza, etc.
La alta calidad en un análisis químico requiere reactivos y soluciones de excelente pureza. Las siguientes
normas deben observarse para prevenir la contaminación accidental de los reactivos y de las soluciones:
• Seleccionar el reactivo químico de mejor calidad que se encuentre disponible. Elegir la botella de menor
volumen para obtener la cantidad deseada.
• Tapar la botella inmediatamente después de haber tomado la cantidad deseada. Por ningún motivo
delegue a otro esta acción.
• Mantener los tapones de las botellas de los reactivos entre los dedos, nunca debe colocarse un tapón
sobre la mesa.
• A menos que se diga otra cosa, nunca se debe devolver el reactivo a una botella. El dinero ahorrado por
retornar el exceso de reactivo rara vez supera el riesgo de contaminar toda la botella.
• A menos que se diga otra cosa, nunca se deben insertar espátulas, cucharas, o cuchillos en una botella
que contenga un reactivo sólido.
4 CAMPANA DE EXTRACCIÓN
Las reacciones que liberan gases tóxicos o corrosivos deben realizarse dentro de una vitrina o campana de
extracción. Este dispositivo es una cabina provista de un ventilador que succiona el aire del laboratorio
llevando los gases fuera de él.
5 SÍMBOLOS DE RIESGO
Para manejar con seguridad las sustancias químicas se han ideado diversos códigos dependiendo de la
casa fabricante, pero en general los sistemas clasifican las sustancias en las siguientes categorías:
• Líquidos inflamables
En términos muy sencillos, los líquidos inflamables son aquellos que fácilmente pueden arder. El que un
líquido arda con más o menos facilidad depende de su punto de llama. Entre más bajo sea este punto más
fácilmente arde el reactivo y por lo tanto mayor cuidado se ha de tener en su manejo, almacenamiento y
transporte. Con estos líquidos se ha realizado una clasificación teniendo en cuenta lo anteriormente
expuesto y su solubilidad en el agua:
Peligro Clase A
Esta clasificación se le asigna a líquidos que tienen un punto de llama por debajo de 100 ºC y que no se
disuelven en el agua a 15 ºC.
AI Líquidos con punto de llama por debajo de 21 ºC.
• Sustancias tóxicas
Peligro: Tras una inhalación, ingestión o absorción a través de la piel pueden presentarse, en general,
trastornos orgánicos de carácter grave o incluso la muerte. Ejemplo: trióxido de arsénico, cloruro de
mercurio (II).
Precaución: Evitar cualquier contacto con el cuerpo y en caso de malestar acudir inmediatamente al
médico.
Sustancias nocivas
Peligro: La incorporación de estas sustancias por el organismo produce efectos nocivos de poca
trascendencia. Ejemplo: tricloroetileno. Precaución: Evitar el contacto con el cuerpo humano así como la
inhalación de vapores.
En caso de malestar acudir al médico.
• Sustancias corrosivas
Peligro: Por contacto con estas sustancias se destruye el tejido vivo y también otros materiales. Ejemplo:
bromo, ácido sulfúrico. Precaución. No inhalar los vapores y evitar el contacto con la piel, los ojos y la
ropa.
• Sustancias irritantes
Peligro: Este símbolo destaca en aquellas sustancias que pueden producir acción irritante sobre la piel, los
ojos y sobre los órganos respiratorios.
Ejemplo: amoníaco, cloruro de bencilo. Precaución. No inhalar los vapores y evitar el contacto con la piel y
los ojos.
PRACTICA No. 2
“Osmosis.”
Marco Teórico.
Las células dentro del organismo están sometidas a cambios en la osmolaridad plasmática cediendo o
tomando agua del líquido intersticial para mantener su homeostasis. Si las células como los eritrocitos se
colocan en una solución hipotónica, el agua se mueve hacia el interior de la célula haciendo que se hinche
y se hemolize, por el contrario se coloca en una solución hipertónica, la célula pierde agua y se crena.
Material
Reactivos:
Agua destilada
Solución salina de NaCl al 1.2 %
Solución salina de NaCl al 0.9 %
Solución salina de NaCl al 0.33%
EDTA 5 %
Torundas con alcohol
Agua destilada
Portaobjetos y capilares
Equipo.
Microscopio.
Centrífuga.
Técnica
Cuestionario.
INTRODUCCIÓN:
En la naturaleza existen sustancias capaces de disminuir la tensión superficial de los líquidos. Ellas se
denominan sustancias tensoactivas.
Tales sustancias presentan moléculas con carácter dipolar, es decir, una parte de la molécula es hidrófila y
la otra hidrófoba. Estas moléculas entran en interacción molecular con el disolvente por su extremo
hidrófilo, mientras que el otro extremo tiende a alejarse del líquido.
Como resultado, las sustancias tensoactivas se acumulan en la capa superficial de la disolución.
Su extremo hidrófobo estará dirigido hacia afuera de la fase. Todo esto conduce a la disminución de la
tensión superficial de la solución.
Las sustancias tensoactivas juegan un papel de gran importancia en la naturaleza, ayudando a mezclar
mejor los líquidos que generalmente no se mezclan. Por ejemplo agua y grasa. Son sustancias tensoactivas
los jabones, los ácidos grasos, aminoácidos, sales biliares, etc.
OBJETIVO:
MATERIAL:
• 1 vaso de precipitado
• 2 tubos de ensaye
• 2 varillas de vidrio
REACTIVOS:
• Alcanfor
• Bilis
• Flor de azufre
• Agua destilada
DESARROLLO:
a).- En un vaso de precipitado se vierten 200 ó 250ml de agua, cuidadosamente se ponen en ella varios
pedacitos de alcanfor. Los pedacitos de alcanfor se mueven rápidamente en la superficie del agua. Esto se
explica por el hecho de que los diferentes lados del pedacito de alcanfor se disuelven en el agua con
diferente velocidad y por lo tanto al rededor del pedacito se crea una tensión superficial desigual, de
manera que el pedacito se traslada hacia donde la tensión superficial es más alta.
b).- Introduzca la varilla en la bilis y después en el vaso donde está el alcanfor. El movimiento de los
pedacitos de alcanfor cesa ya que bilis disminuye la tensión superficial.
a).- Coloque en dos tubos de ensaye 3 ó 4ml de agua destilada, a uno de los tubos agregue de 6 a 8 gotas
de bilis.
b).- Sobre la superficie de ambos tubos coloque una pequeña cantidad de flor de azufre.
Observe la distribución del azufre en ambos tubos. ¿Cómo explica la diferencia entre ambos tubos?
CUESTIONARIO:
Reactivos
1. Glucosa
2. Fructosa
3. Sacarosa
4. Almidón
5. Trozo de pan
6. Una papa
9. Alcohol etílico
Materiales
1. Gradilla
4. Pipeta de 10 ml.
6. Malla de asbesto
7. Termómetro
Procedimiento
Parte A: solubilidad
1. Se toma 0.5 g de un azúcar en cada uno de los tubos de ensayo, debidamente rotulados. Organice los tubos de
ensayo en la gradilla.
2. Añada 2.0 ml. de agua a cada tubo de ensayo. Agite cada tubo de ensayo fuertemente durante un minuto y deje
en reposo durante 30 segundos. Anote sus observaciones.
3. Repita los dos pasos anteriores utilizando otros tubos de ensayo, pero en vez de agua utilice 2.0 mL de alcohol
etílico. Anote sus observaciones.
4. Construya un cuadro en donde cualifique cualitativamente el grado de solubilidad de las diferentes muestras.
2. Prepare soluciones de cada azúcar al 10%. Tome 1.0 mL de cada solución y llévela a diferentes tubos de ensayo,
previamente rotulados. Organice los tubos de ensayo en la gradilla.
3. Adicione utilice 0.5 mL del reactivo A de Fehling y 0.5 ml. del reactivo B de Fehling.
4. Verifique que la temperatura en el baño María se sostenga a 60 ºC. Coloque dentro un vaso de precipitado los
diferentes tubos de ensayo y lleve este conjunto al baño María por 5 minutos. Anote sus observaciones.
5. Ahora, tome 2.0 mL de solución de sacarosa y agregue tres o cuatro gotas de solución diluida de HCL Agite y
caliente suavemente por un minuto. Permita que se enfríe y luego agregue 0.5 mL de reactivo A de Fehling y 0.5
mL de reactivo B de Fehling. Caliente en el baño de María por tres minutos. Anote sus observaciones.
Parte C: polisacáridos
1. Prepare una solución concentrada de almidón en agua. Caliente suavemente hasta que se forme engrudo.
Déjela en reposo hasta que enfríe. Luego añada dos gotas de solución de yodo o de reactivo de lugol. Anote sus
observaciones.
2. Repita esta prueba utilizando reactivo de lugol en una rebanada de papa o de pan. Anote sus observaciones.
Análisis
Reactivos
1. Reactivo de lugol
2. Reactivo de Fehling
3. Almidón
4. Solución de glucosa al 2%
5. Agua destilada
6. Un trozo de pan
7. Una papa
8. Un plátano
9. Una manzana
Materiales
1. Pipeta
2. Espátula
3. Gradilla
4. Tubos de ensayo
5. Mortero y pistilo
7. Gotero
8. Mechero
9. Trípode
Procedimiento
1. Prepare una solución disolviendo 0.5 g de almidón en 10.0 mL de agua; para esto utilice un vaso de precipitado
de 50 mL. Tome 5.0 mL de la solución por medio de una pipeta y añade tres gotas de lugol, por medio de un
gotero. Observe el cambio de coloración de la solución. Este tubo de ensayo debe ser colocado en la gradilla y se
debe utilizar como muestra patrón de referencia.
2. Haga un puré con la papa, el plátano o el pan, partiendo o cortando pequeños trozos y luego triturando; se
puede utilizar un mortero para esto.
3. Para cada muestra utilice un tubo de ensayo diferente, añada 2.0 mL de agua destilada y agite. Luego adicione
tres gotas de lugol y agite. Compare la coloración obtenida para cada alimento con la muestra patrón. Registre los
resultados.
4. Aliste un baño María y ajuste la temperatura a 50ºC. Adicione 2.0 mL de la solución de glucosa y adicione 2.0 mL
de reactivo de Fehling (1.0 mL de reactivo de Fehling A y 1.0 mL de B). Caliente durante tres minutos. Observe los
cambios que se producen y guarde esta muestra como patrón.
5. Nuevamente, para cada muestra utilice un tubo de ensayo diferente, añada 2.0 mL de agua destilada y agite. A
cada tubo de ensayo adicione 2.0 mL de reactivo de Fehling (1.0 mL de A y 1.0 mL de B). Caliente en el baño María
durante cinco minutos. Registre los cambios y compare con la muestra patrón.
Análisis
1. Indique los alimentos que contienen almidón y los que contienen glucosa.
Reactivos
1. Saliva
2. Solución de almidón al 5%
3. Lugol
4. Solución de HCl al 5%
5. Solución de NaOH al 5%
Materiales
1. Gradilla
3. Termómetro
5. Gotero
6. Vaso de precipitado
7. Mechero
8. Trípode
9. Malla de asbesto
1. Coloque 3.0 mL de solución de almidón y 2 gotas de saliva en tres tubos de ensayo previamente marcados A, B y
C.
2. Determine el pH en cada tubo, utilizando un pHmetro o papel indicador universal. Registre los resultados.
3. Agregue al tubo A 1.0 mL de ácido clorhídrico al 5%; al tubo B 1.0 mL de NaOH al 5%; y al tubo C 1.0 mL de agua.
4. Prepara un baño María con una temperatura de 37 ºC y coloque los tres tubos de ensayo durante 10 minutos.
5. Retire los tubos de ensayo del baño Maria y añada cinco gotas de lugol a cada uno. Registre los cambios de color,
olor, temperatura, etc.
6. En otros tres tubos de ensayo, previamente marcados como D, E y F, adicione tres mL de almidón y dos gotas de
saliva, a cada uno.
7. Durante diez minutos coloque el tubo D en hielo, el tubo E en el baño María a 37 º C y el tubo F en agua
hirviendo.
8. Retire los tubos de ensayo D, E y F de las anteriores condiciones y agregue cinco gotas de lugol a cada uno.
Registre todos los cambios que observe.
Análisis
Reactivos
1. Almidón
2. Reactivo de lugol
4. Tabletas de vitamina C
Materiales
1. Gradilla
2. Tubos de ensayo
3. Pipeta
4. Tapones de caucho
Procedimiento
2. En un tubo de ensayo adicione 2.0 mL de la solución de almidón y 1.0 Ml de lugol. Adicione media tableta de
vitamina C. Registre sus observaciones. La decoloración de la mezcla es una indicación de la presencia de vitamina
C; tenga en cuenta este resultado como patrón de referencia.
3. Identifica cinco tubos de ensayo como A, B, C, D y E y coloca en cada uno de ellos 1.0 mL de la solución de
almidón y 1.0 mL de lugol. Añada unas gotas de jugo de naranja al tubo A; unas gotas de jugo de limón al tubo B;
1.0 mL de jugo de tomate al tubo C; 1.0 mL de jugo de zanahoria al tubo D; y 1.0 mL de jugo de durazno al tubo E.
Tape cada tubo con un tapón de caucho y agítelos. Registre sus observaciones para cada tubo.
Análisis
LECITINAS
INTRODUCCIÓN:
Los fosfolípidos forman parte de los lípidos compuestos, están ampliamente distribuidos en los tejidos de los
organismos animales; entre los fosfolípidos encontramos a las fosfatidilcolinas (lecitinas) y las
fosfatodietanolaminas (cefalinas). Estos junto con las proteínas son los principales componentes de las membranas
de las células y de sus organelos. También intervienen en el metabolismo.
OBJETIVOS:
MATERIAL REACTIVOS:
• 3 Pipetas 5 ml.
• Baño maría
En un vaso de precipitado se pone la mitad de una yema de huevo, se le añaden 20ml de alcohol caliente y se
mezcla con una varilla de vidrio. La mezcla se enfría y se filtra en un tubo de ensaye seco.
En un tubo de ensaye seco vierta 5ml de acetona y se le añade gota agota 1ml del filtrado obtenido en el método
1.
Espere 20 minutos. Se forma un precipitado blanco en forma de copos de un compuesto de cadmio con lecitina.
En un tubo de ensaye seco vierta 5ml de disolución de lecitina en alcohol (filtrado obtenido en el método uno).
Añada 3ml de NaOH 10% y ponga a hervir la mezcla durante 5 minutos en baño María NO AGITE. La colina que se
desprende como resultado de la hidrólisis se descompone con formación de trimetilamina. Esta última posee un
olor característico de salmuera de arenques y se reconoce fácilmente por este indicio.
Diluya el hidrolizado alcalino obtenido con 2ml de agua, añada 2 gotas de fenolftaleína y agregue gota a gota HCl
50% hasta que vire el indicador, separe los ácidos grasos que suben a la superficie por filtración.
REPORTE:
CUESTIONARIO:
El gas etileno es una hormona gaseosa natural de las plantas que ayuda a acelerar el proceso de maduración: se
utiliza en una variedad de otros procesos asociados con la vida de las plantas. El etileno también es responsable de
la abscisión de las hojas, el envejecimiento y puede actuar como un inhibidor del crecimiento. Es la única hormona
gaseosa de planta y por ende cumple un rol importante en su ciclo de vida. Hacer este gas es bastante simple,
puedes documentar el proceso comparando el índice de producción entre los distintos tipos de frutas y vegetales.
Los plátanos liberan gas etileno, que ayuda a madurarlos, por lo tanto el truco es concentrar la cantidad de etileno
cerca de los plátanos. Dependiendo de cuán rápido quieras la fruta madura, puedes acelerar el proceso de
maduración a temperatura ambiente o usar tu horno para un proceso extra rápido en solo unos minutos.
Materiales:
2. 2 bolsas de plástico
3. 6 Plátanos verdes
4. 3 manzanas maduras
5. Papel de cocina
Instrucciones
• 1 Coloca los plátanos que quieres madurar en una bolsa de papel marrón de la siguiente manera:
Controla las bolsas de frutas cada 12 o 14 horas. Buscando signos de maduración o descomposición, puedes
comenzar a ver el índice de producción de etileno con las frutas. Fotografía las bolsas cada 12 horas y con cada
fotografía marca fecha y hora de caga progreso. Al final del experimento tendrás evidencia concreta de la creación
de gas etileno y también podrás notar que frutas lo hicieron más rápidamente en comparación con las otras.
Qué efectos tuvieron los diferentes envases (bolsa plástica y de papel) sobre los efectos del etileno?
Monitorea la fruta hasta que maduren y luego sobre maduren. Registra la fecha y hora en que los cambios ocurren
en cada caso para decidir qué contenedor contrarresta mejor los efectos del gas etileno.
Supervisa la fruta a medida que madura y luego se eche a perder. Asegúrate de anotar la fecha y hora en que estos
eventos tienen lugar. ¿Por qué una manzana madura más rápido cuando está junto a una banana?
Objetivo.
• Identificar la presencia de proteínas en diversos alimentos por medio de la reacción de Biuret, observando
la desnaturalización de una proteína.
Material:
• 10 tubos de ensaye.
• 2 goteros.
• 1 mechero.
• 6 ml de reactivo de Biuret.
• Agua destilada.
• 3 ml de vinagre.
• 3 ml de jugo de limón.
• 1 huevo crudo.
• 5 gr de jamón.
4. Ahora coloca 3 ml de cada muestra de las sustancias en las que vas a determinar la presencia de proteínas: clara
de huevo, caldo de pollo natural, caldo de pollo industrializado, papilla de jamón diluida, jugo de limón, papilla de
salchicha diluida y agua.
5. Si así lo deseas, puedes incluir otros alimentos que pongas diluidos de forma líquida en un tubo.
6. Anota en la TABLA tus resultados, marcando un signo (+) si se detectó la presencia de proteína y (-) si no la hay.
RESULTADOS
ALIMENTO PROTEÍNA
GRENETINA
CLARA DE HUEVO
CALDO NATURAL DE POLLO O RES
CALDO INDUSTRIALIZADO DE POLLO O RES
JAMÓN
JUGO DE LIMÓN
SALCHICHA
AGUA
EXPERIMENTO B.
8. Si las muestras están muy frías, prepara un baño María en el vaso de precipitados y sumerge los tubos por un
minuto para verificar la reacción.
RESULTADOS.
CUESTIONARIO.
1. ¿Qué tipo de alimento tiene mayor contenido en proteínas, según lo que observaste?
PROTEINAS
Las proteínas son componentes esenciales de los seres vivos. Existen miles de proteínas distintas, con estructuras
muy variadas, desde las proteínas fibrosas, como las que forman el pelo, los músculos, etc., hasta las proteínas
globulares que están en la clara de huevo, en la caseína de la leche, en la hemoglobina de la sangre, etc.
Pero muchas veces es necesario romper esas cadenas de proteína y en esos casos el organismo recurre a unas
moléculas especializadas que se llaman proteasas, que están presentes en todas las células, sean animales o
vegetales. Podemos comprobar fácilmente la existencia de esas proteasas en frutos como el ananá o piña o en la
papaya, mediante el siguiente experimento:
• Preparar medio vaso de gelatina sin sabor (aunque también servirá la gelatina coloreada y saborizada que
se come como postre).
• Una vez que la gelatina esté bien firme (quizás deberá ponerse en el refrigerador), hacer caer jugo de piña
recién cortado sobre la mitad de su superficie. Se puede hundir la hoja de un cuchillo una o dos veces a través del
jugo para que este penetre en la masa.
¿Qué ocurrió? La gelatina es una proteína soluble en agua. Cuando la preparamos, una infinidad de cadenas de
moléculas forman una masa semi- sólida (un gel). Pero cuando la ponemos en contacto con el jugo de ananá, las
proteasas que contiene el jugo atacan a esas cadenas cortándolas y haciendo que la proteína vuelva al estado
líquido.
Tengamos en cuenta que el experimento no puede hacerse con piñas enlatada, porque en ese caso la fruta ha sido
calentada a altas temperaturas, lo que destruye a las proteasas.
Los tejidos animales también contienen proteasas. Una de estas sustancias es la pepsina, que suele usarse para
ablandar la carne porque ataca y divide a sus proteínas. Y por esa misma razón se encuentra presente en el jugo
gástrico del estómago.
Desnaturalización de proteínas.
La clara de huevo está formada en gran parte por proteínas globulares, llamadas así porque son largas cadenas
enrolladas como ovillos. Cuando se fríe o se cocina un huevo, esas cadenas se extienden y se enlazan entre sí. La
consecuencia es que la clara de huevo cambia de consistencia y toma un color blanquecino. Como la naturaleza
original de la proteína se ha perdido, decimos que se ha desnaturalizado. Ese proceso se produce también al batir
las claras "a nieve" (entra aire entre las cadenas de proteínas y se forma una espuma) o al tratarlas con alcohol,
acetona u otras sustancias químicas.
• Colocamos en un vaso una o dos cucharadas de clara de huevo, le agregamos la misma cantidad de alcohol
puro y agitamos ¿no da la impresión de que la clara se hubiera cocinado? (¡después de hacer el experimento, tirar
todo por el desagüe de la cocina!).
Leche "cortada".
La leche contiene una proteína denominada caseína, que puede separarse por acidificación.
• Agregamos una cucharada de vinagre o de jugo de limón a medio vaso de leche. Agitamos y dejamos
reposar: veremos que se separa un sólido blanco formado por la caseína (leche "cortada"). Si calentamos un poco,
el proceso se verá más claramente.
Aquí, otra vez, la acción del ácido que agregamos desnaturaliza a la proteína de la leche. Recordar que el vinagre
tiene ácido acético y que el jugo de limón tiene ácido cítrico.
“ENZIMAS”
ESTUDIOS ENZIMÁTICOS
OBJETIVOS
MATERIALES
PROCEDIMIENTO
1.- Hidrólisis enzimática del almidón por la saliva: Acción digestiva de la amilasa salivar.
Primero se hace un tubo patrón con 2 ml. de una disolución de almidón al 2 % y unas gotas de disolución de yodo
(isodine). Observar el resultado. Después se calienta suavemente el tubo hasta que la mezcla pierda el color. Dejar
enfriar el tubo bajo el agua del grifo y esperar unos minutos. Anotar lo sucedido.
Colocar en un segundo tubo 2 ml. de la disolución de almidón y una cierta cantidad de saliva, mezclar bien la saliva
con la disolución y calentar muy suavemente durante unos segundos. Añadir unas gotas de lugol. Anotar los
resultados y dar una explicación a lo ocurrido.
La catalasa se encuentra tanto en tejidos vegetales (patata, zanahoria, lechuga, etc.) como en tejidos animales
(carne, pescado, etc.) produciendo la siguiente reacción química:
La enzima descompone el peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno gaseoso, que se desprenderá en forma de
burbujas en un medio acuoso.
Poner en varios tubos de ensayo previamente numerados distintos tejidos (más o menos el mismo peso de cada
tejido). Añadir 5 ml. de agua oxigenada a cada tubo y anotar lo que sucede. Explicar lo ocurrido y ordenar los
tejidos según su actividad.
Repetir el proceso anterior, pero hervir antes los tejidos durante diez minutos. Explicar los resultados obtenidos.
En un tubo de ensayo se coloca un trozo de hígado (o 1 ml. de extracto de hígado) y 10 ml. de agua oxigenada. Se
cierra el tubo con un tapón, que se deja algo flojo para el escape de los gases producidos en la reacción, en cuyo
4. DESNATURALIZACIÓN DE LA CATALASA.
Mediante esta experiencia, vamos a ver una propiedad fundamental de proteínas, que es la desnaturalización.
Colocar en un tubo de ensayo varios trocitos de hígado.
4) Observar el resultado.
Cuestionario
4. Indica las reacciones llevadas a cabo por la amilasa y la catalasa en los sustratos utilizados en la
experiencia.
5. ¿En qué consiste la desnaturalización de las enzimas? Qué factores intervienen en dicha desnaturalización?
7. Nombra los tipos de enzimas que intervienen en el metabolismo de carbohidratos, lípidos, proteínas en el
organismo y el lugar donde se hallan presentes.
• Coenzima,
• apoenzima,
• haloenzima,
• coofactor,
10. ¿Qué sucede si se le agrega agua oxigenada a una herida?, Sucedería lo mismo si se agrega agua oxigenada
sobre la piel sin heridas. A qué se debe dicho fenómeno?
Mediante esta experiencia se propone comprobar la acción de sustancias biológicas introducidas en los
detergentes sobre los sustratos específicos.
MATERIALES
• Marcadores
• Detergentes para lavarropas (que contenga enzimas biodegradables y que no contenga dichas enzimas)
• Agua
PRECAUCIÓN!
Los detergentes para lavar ropa son extremadamente básicos. No aspirarlos porque pueden causar daños en las
vías respiratorias.
1) ¿Qué se supone que sucederá cuando la solución enzimática entre en contacto con la solución de gelatina
(constituido mayormente por proteínas).
PROCEDIMIENTO:
2) Llenar dos tubos o vasos de precipitado graduado con 10 ml de la solución de gelatina cada uno (tubo 1 y tubo
2) y colocarlos en refrigerador hasta que solidifique.
4) Marcar sobre el vidrio de cada tubo con el marcador la altura de la gelatina sólida.
5) Preparar una jarra con la solución de detergente (10ml de detergente en 90ml agua = 10%).
8) Dejar reposar durante la noche y chequear ambos tubos a las 24 horas. Marcar la posición de la gelatina sólida.
4) Se sabe que la materia no desaparece sino que se transforma. ¿Cómo se explica la variación en la altura de la
gelatina?
7) ¿Cuál debería ser el sustrato si se buscara comprobar la acción de la enzima lipasa, o de la enzima amilasa?
PRACTICA No. 11
OBJETIVO:
INTRODUCCIÓN:
El sistema digestivo humano se divide en tubo digestivo y glándulas anexas. El tubo digestivo se integra por la boca,
la faringe, el esófago, el estómago, el intestino delgado, el intestino grueso y el recto. Las glándulas anexas del
sistema digestivo son el páncreas, el hígado y la vesícula biliar.
MATERIAL
• 3 tubos de ensayo
• 1 gradilla
• 1 pipeta de 5 ml.
• 1 gotero
• 1 pinzas
• 1 vidrio de reloj
• 1 tijeras
• 3 etiquetas pequeñas
REACTIVOS
PROCEDIMIENTO:
1) Etiqueta con los números 1 al 3 los tubos de ensayo y acomódalos en la gradilla. Vierte 5 ml. de agua en el tubo
1.
3) Acomoda en el vidrio de reloj la vesícula biliar, observa su coloración y consistencia. Sujeta con las pinzas la
vesícula con cuidado y realiza un corte longitudinal.
5) Agrega 2 gotas de aceite a cada tubo; agita suavemente y observa lo que sucede. Registra tus resultados en el
espacio correspondiente.
OBSERVACIONES:
Completa el cuadro.
Cuestionario.
En un tubo de ensayo se pone aceite y ácido nítrico concentrado a partes iguales. Se tapa el tubo con un tapón de
goma y se agita fuertemente durante un minuto. Después se espera unos quince minutos y se observa la
coloración:
El código alimentario indica que las margarinas comerciales han de salir de fábrica marcadas con sustancias
reveladoras, con el fin de que los posibles fraudes por adición de margarina a la mantequilla se detecten
fácilmente. Las margarinas fabricadas con grasas vegetales contienen almidón (0,2 por 100) como revelador.
Se disponen de dos tubos de ensayo con cantidades semejantes de margarinas de diferente marca,
respectivamente. En ambos tubos se añade agua destilada, y se ponen a hervir para que el almidón pase a la fase
acuosa.
Se enfrían los tubos en el grifo y a continuación se filtra su contenido sobre un papel de filtro previamente
humedecido.
Así, la grasa queda retenida en el filtro y el almidón estará en el líquido filtrado. A este líquido, cuando está frío, se
le añaden unas gotas de lugol y si aparece coloración violácea, indica la presencia de almidón.
IMPORTANTE:
Si al realizar estas dos pruebas analíticas con mantequilla, alguna de ellas diese positiva, indicaría un fraude
alimentario.
RESUELVE:
3) ¿En qué consiste la saponificación? Explica mediante la reacción química, indica el producto que se obtiene de
ese proceso
5) ¿Por qué las grasas se pueden disolver en solventes orgánicos pero no en agua?
7) Escribe las fórmulas moleculares y/o estructurales de los reactivos utilizados en la práctica y determina el tipo
de sustancia química que los constituyen.
8) Diferencia una grasa saturada de una insaturada desde el punto de vista química y establece ejemplos.
10) ¿Qué son los jabones desde el punto de vista químico, que diferencias existen entre jabón de baño o tocador y
uno de lavar la ropa?
CUESTIONARIO TALLER.
2) Los lípidos tienen la característica de ser compuestos hidrofóbicas. En qué consiste este término?
4) ¿Por qué si los lípidos son tan heterogéneos química y funcionalmente se reúnen en este grupo?
5) La mayoría de los lípidos tiene algún tipo de carácter polar, además de poseer una gran parte apolar o
hidrofóbico, por lo tanto tienen carácter anfipático. Explica cada uno de los términos de la frase.
7) Si tratamos de colorear un lípido con tinta no lo conseguimos, pero si le añadimos Sudan III sí,
a) ¿Qué ocurre con la emulsión de agua en aceite transcurridos unos minutos de reposo?
11) Define índice de saponificación de grasas y aceites. Índice de yodo de grasas y aceites.
a) El hígado
b) El páncreas
c) El estómago
d) La vesícula biliar
a) Enzimática
d) Estabilizarlos
c) No hay acción
Laboratorio No.12.
Teoría.
La saponificación es una reacción química entre un ácido graso (o un lípido saponificable, portador de residuos de
ácidos grasos) y una base o álcali, en la que se obtiene como principal producto la sal de dicho ácido y de dicha
base. Estos compuestos tienen la particularidad de ser anfipáticos, es decir tienen una parte polar y otra apolar (o
no polar), con lo cual pueden interactuar con sustancias de propiedades dispares. Por ejemplo, los jabones son
sales de ácidos grasos y metales alcalinos que se obtienen mediante este proceso.
El método de saponificación en el aspecto industrial consiste en hervir la grasa en grandes calderas, añadiendo
lentamente sosa cáustica (NaOH), agitándose continuamente la mezcla hasta que comienza está a ponerse
pastosa.
La reacción que tiene lugar es la saponificación y los productos son el jabón y la glicerina:
Objetivo.
-Obtener un jabón a partir de un aceite vegetal común o de cualquier grasa adecuada, observar su
comportamiento y justificar.
Reactivos.
-Aceite vegetal.
-Solución alcohólica.
Materiales.
-Papel de filtro.
-Gradilla.
-Agitador de vidrio.
- 5 tubos de ensayo.
-Pipeta espátula
-Mechero.
-Trípode.
-Procedimiento.
1-En un beaker de 250ml, pese 5g de aceite vegetal. Caliente en baño maría y agrege poco a poco 20ml, de una
solución etonoica de NaOH al 30%; agite constante sin parar.
2-Saque una pequeña cantidad de la mezcla con la varilla de vidrio e introdúzcala en un tubo de ensayo y agregue
5ml de agua. Si la mezcla se disuelve completamente después de agitar, ha terminado la reacción.
3-Cuando se compruebe que ha terminado la reacción, agréguele a la mezcla 30ml de una solución saturada de
NaCl (sal en agua) y sigua calentando durante 5 minutos, sin dejar de agitar.
4-En un tubo de filtración de vidrio, coloque un papel filtro, ponga en embudo en un beaker de 250ml para recoger
el filtrado, y luego filtre la solución saturada completamente.
5-Lave con agua fría el jabón filtrado, en el mismo embudo usando pequeñas cantidades de agua.
1- Al tubo de ensayo A, agréguele 5ml de agua, tápelo con el dedo pulgar y agite fuertemente, anote sus
observaciones.
2- Al tubo B, agréguele 5ml de una solución al 10% de cloruro de calcio en agua. Tápelo y agite compare con
el paso anterior. Anote.
Nutrientes son algunas de los componentes que tienen los alimentos y que activamente colaboran en las
reacciones metabólicas para que se lleven a cabo las funciones del organismo; los nutrimentos pueden ser
orgánicos e inorgánico; se clasifican en los siguientes tipos de sustancias: proteínas, glúcidos (carbohidratos),
lípidos (grasas), vitaminas y sales minerales.
MATERIALES Y REACTIVOS
Mortero.
Colador.
2 Tubos de ensayo.
Gotero.
Mechero.
Tintura de Yodo.
Ácido nítrico.
Alcohol.
Carne.
Gotero.
Agua.
Galletas.
Aceite.
Huevo cocido.
Pescado.
PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTO.
1. Colocar en un tubo de ensayo pequeños fragmentos de clara de huevo cocida y de carne de pollo.
Respondan:
Con el gotero echar una gota de aceite sobre el papel blanco. Observar y responder:
EVALUACIÓN
3.- ¿Qué daños ocasiona al organismo comer alimentos ricos en grasas en gran cantidad?
Carbohidratos
Proteínas
Grasas
Laboratorio No.14
Todas las moléculas orgánicas presentes en nuestro cuerpo se derivan directamente o indirectamente de los
alimentos que ingerimos. Las cantidades y proporciones de estas moléculas orgánicas varían de un alimento a
otro. Los granos y las papas, por ejemplo, son ricos en almidón, mientras que las carnes son ricas en proteínas y
grasas. Para determinar el valor nutricional de los alimentos hay que identificar las moléculas orgánicas que
contienen.
MATERIALES
PROCEDIMIENTO
1. El instructor le entregará a cada grupo de dos a cuatro muestras desconocidas, a las cuales se les realizarán
pruebas para detectar los compuestos presentes.
5. ¿Cuáles fueron los controles positivos y negativos en el experimento. ¿Por qué son útiles estos controles?
6. Prepare un informe sencillo que presente y discuta los resultados de este experimento.