UFPS, Sanidad Vegetal, 2018

LABORATORIO N°3
HONGOS FITOPATÓGENOS
IDENTIFICACION Y AISLAMIENTO DE HONGOS FITOPATÓGENOS
Wanderley Vanegas 1611282, Mercedes García 16112, Duvan Valencia 1611081
Universidad Francisco de Paula Santander
Facultad de Ciencias Agrarias y del Medio Ambiente, Ingeniería Biotecnológica
03 de diciembre de 2018

RESUMEN
Las enfermedades causadas por hongos producen en sus hospederos una amplia variedad de
tipos diferentes de síntomas. Para la identificación de hongos fitopatógenos es necesario la
observación de sus estructuras somáticas y reproductivas, mediante técnicas de aislamiento;
es posible inducir la aparición de estas estructuras. El primer paso para el manejo correcto
de una enfermedad es conocer su verdadera etimología. El objeto del laboratorio es el
adiestramiento en las principales técnicas de colecta, cultivo, identificación e inoculación
de los organismos causales de las enfermedades presentes en material vegetal. Los
objetivos del presente estudio fueron aislar y determinar la presencia de hongos
fitopatógenos del material vegetal en el que se encontraron especies como fusarium sp,
penicillium sp, Botritys cinérea, y otros posibles patógenos del cual se tomó como
referencia el Colletotrychum gloeosporioides presente en el tomate de árbol (Solanum
betaceum), se realizaron mediante siembra directa en placa, en medios selectivos sólidos en
agar sabouraud. Se utilizó la técnica de recuento en placa para el aislamiento de hongos
fitopatogenos. No se aisló el hongo Colletotrychum gloeosporioides, pero si otros hongos
fitopatógenos del género Oidium sp. El cual fue contaminado por el mal manejo en el
trabajo de laboratorio.

PALABRAS CLAVE: Especie, fitopatogeno, pudriciones, etimología, adiestramiento.

ABSTRACT
The diseases caused by fungi produce in their hosts a wide variety of different types of
symptoms. For the identification of phytopathogenic fungi, it is necessary to observe their
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somatic and reproductive structures, by means of isolation techniques; it is possible to

induce the appearance of these structures. The first step to the correct handling of a disease
is to know its true etymology. The object of the laboratory is the training in the main
techniques of collection, cultivation, identification and inoculation of the causal organisms
of the diseases present in plant material. The objectives of the present study were to isolate
and determine the presence of phytopathogenic fungi of plant material in which were found
species such as fusarium sp, penicillium sp, Botritys cinerea, and other possible pathogens
from which the Colletotrichum gloeosporioides present in the tomato was taken as
reference of tree (Solanum betaceum), were carried out by direct seeding in a plate, in
selective solid media in Sabouraud agar. The plate count technique was used for the
isolation of phytopathogenic fungi. The fungus Colletotrichum gloeosporioides was not
isolated, but other phytopathogenic fungi of the genus Oidium sp. Which was contaminated
by mishandling in laboratory work.

KEY WORDS: Species, phytopathogen, decay, etymology, training.

INTRODUCCIÓN bacterias y los nemátodos también son

Los agentes que causan enfermedades en
las plantas se caracterizan por ser
infecciosos (bióticos o vivos) y no
infecciosos (abióticos o no vivos). Los
agentes infecciosos incluyen las bacterias,
hongos, micoplasmas, nemátodos y virus.
Los agentes no infecciosos incluyen,
desbalances nutricionales, estrés
ambiental y toxicidad química (causada
por plaguicidas y contaminantes del aire.
Para propósito de esta publicación vamos
a hablar de los agentes infecciosos. Los
agentes patógenos más comunes en las
plantas son los hongos, aunque las
importantes. Las enfermedades causadas
por micoplasmas y virus no se registran a
menudo, mayormente porque son muy
difíciles de detectar. Hongos - Los hongos
son organismos filamentosos simples. No
tienen clorofila y dependen de una planta
hospedera para obtener su alimento. Son
más grandes que las bacterias y se
identifican más fácilmente. Algunas de
las estructuras que producen se pueden
ver a simple vista y sirven en su
identificación. Los hongos atacan las
plantas hospederas susceptibles a través
del movimiento de sus estructuras
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reproductivas, como lo son los procedimientos específicos para obtener

esclerocios y las esporas. En adición, los el resultado preciso.
hongos se transfieren fácilmente en
tiestos con suelo contaminado y en
plantas o partes de estas que tienen el OBJETIVOS ESPECIFICOS
patógeno.  Conocer y describir los
Para controlar una enfermedad es principales síntomas y signos de
indispensable conocer su agente causal. enfermedades que ocasionan los
De lo contrario cualquier estrategia de hongos.
control podría ser infructuosa o  Reconocer las estructuras
eventualmente agravar el estado sanitario reproductivas y vegetativas de los
del cultivo. Si no se conoce el hongos fitopatógenos.
fitopatógeno (causante de la enfermedad  Identificar los principales hongos
en la planta) podría estarse utilizando un fitopatógenos presentes en
mecanismo inapropiado contra algo material vegetal.
desconocido. Un correcto diagnostico
provee una cantidad considerable de EQUIPOS, MATERIALES Y OTROS
información básica para seleccionar REACTIVOS.
métodos acordes al organismo o Estudiantes:
condición que está causando el problema. Muestras de material vegetal de frutas u
En el laboratorio la muestra es sometida a hortalizas (fresa, naranja, papaya, lulo,
diferentes análisis en busca de evidencias, curuba, repollo, brócoli, coliflor, apio,
pistas o la identificación definitiva del tomate, papa, tomate de árbol, pimentón)
agente causal. En el procedimiento se con pudrición en el cuello del tallo y
incluyen exámenes macroscópicos, presencia de moho, con lesiones,
microscópicos, cultivo, pruebas deformaciones de tejido, decoloraciones,
bioquímicas, serológicas, o patológicas. pudriciones.
En muchos casos los simples exámenes Laboratorio:
preliminares responden a la incógnita, Bisturí estéril (hojilla), cinta transparente,
pero a veces se requiere realizar portaobjetos y cubreobjetos, alcohol de
90°, cajas de agar PDA, hipoclorito de
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sodio y alcohol, agua destilada, azul de
lactofenol, incubadora, microscopio y
estereoscopio, mechero.
METODOLOGÍA
Tomar las muestras de diferentes tejidos y
seleccionar los que presentes signos más
relevantes para la observación.
OBSERVACIÓN DIRECTA POR
PRESENCIA DE SIGNOS EN EL
TEJIDO:
Utilizando tinción simple con azul de
lactofenol, observaremos las estructuras
al microscopio describiendo el género al
cual pertenece el agente causal de la
enfermedad.
AISLAMIENTO DEL AGENTE
CAUSAL A PARTIR DE TEJIDO
ENFERMO:
Realizar pequeños cortes de la zona de
avance de la infección, donde el patógeno
está en activo desarrollo. Los trozos son
desinfectados superficialmente con
alcohol de 70º y luego con una solución
de hipoclorito a 1% durante 2 minutos,
enjuagados 2 veces con agua destilada
estéril y sembrados en cajas de Petri con
medio de cultivo en agar saboraud para
hongos PDA. Se incuban a 28ºC por 4 a 8
días.
IDENTIFICACIÓN MICROSCÓPICA
DE LOS AISLAMIENTOS:
Realice montajes con tinción azul de
lactofenol y observe al microscopio para
describir las estructuras que permitan
identificar el género del hongo causante
de la enfermedad.
PROCEDIMIENTO
Tomamos los frutos y cortamos con
el bisturí las partes infectadas de
tomate de árbol, naranja, fresa,
maduro.
Realizamos la observación directa
por presencia de signos en el tejido,
para ello identificamos diferentes
estructuras en el microscopio.
Finalmente realizamos el aislamiento
del agente causal a partir de tejido
enfermo, realizando la siembra en
cajas de Petri con el medio de cultivo
agar saboraud PDA, el utilizado para
el aislamiento de hongos.
RESULTADOS
OBSERVACIÓN DIRECTAPOR
PRESENCIA DE SIGNOS EN EL
TEJIDO
Observación microscópica
Los hongos fitopatogenos presentas
estructuras de las cuales se conoce el
plasmodio, micelio, hifas, etc.
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Plasmodio: Se refiere al cuerpo o soma

vegetativo de algunos hongos inferiores,
el cual está constituido por una masa
multinucleada, sin pared celular.
Son escasos los hongos fitopatógenos que
poseen soma vegetativo de tipo
plasmodio.
Micelio: La mayoría de los hongos
poseen cuerpo filamentoso provisto de
pared celular. . A los filamentos que
constituyen el cuerpo o soma vegetativo Figura 1. Material vegetal enfermo con
se les denomina hifas. Al conjunto de presencia de hongos fitopatogenos.
hifas se le denomina micelio.
Cuando las hifas no presentan septas, el
micelio es denominado cenocítico o no
tabicado y cuando las presenta el micelio
se dice que es tabicado.
Esclerotos: Los esclerotos son
estructuras de resistencia formados por
compactación de hifas. Estos esclerotos
pueden tener diferentes formas y
tamaños.
Hifa: Es la unidad vegetativa en la
estructura de los hongos. Su forma es
filamentosa y de tipo tubular con paredes
celulares, pudiendo presentar tabiques
(hifas septadas) o no (hifas aseptadas) y
que contienen en su interior citoplasma
que viene a ser una sustancia similar a la
clara de huevo junto con pequeñas
Figura 2. Hongo alternaría presente en
estructuras con morfologías y funciones
hoja de col.
determinadas denominadas organoides.
Género perteneciente a la familia-forma
A continuación se presentan los diferentes
Demaciáceas (orden-forma Moniliales,
tipos de hongos encontrados en el tejido
subdivisión Deuteromicotinas) que
vegetal de las diferentes frutas y verduras
engloba unas 50 especies de distribución
analizadas.
cosmopolita, fitoparásitas o saprofitas
sobre vegetación, capaces de colonizar y
degradar numerosos substratos como
papel, cuero, tapicerías, pinturas, etc, o
alimentos que pueden contaminar con
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micotoxinas. Es un hongo patógeno

oportunista que puede causar manchas en
las hojas así como pudriciones y
decoloraciones en muchas partes de las
plantas. También puede causar en
humanos infecciones en el tracto
respiratorio superior y asma en personas
debilitadas.
Figura 3. Hongo penicillium sp presente
en la naranja.
El género Penicillium (excepto P.
marneffei) son hongos filamentosos, que
se encuentran en suelo, vegetación y en
aire. La mayoría de especies son
consideradas contaminantes, pero se han
encontrado como agentes causales de
infección en pacientes
inmunocomprometidos (Ver micosis
oportunistas). Contiene varias especies,
dentro de las más comunes encontramos
P. chrysogenum, P. citrinum, P.
marneffei, P. purpurogenum, entre otras.
Las colonias de este género son planas,
aterciopeladas, pulverulentas, lanosas, o
algodonosas. De crecimiento rápido.
Inicialmente tienen un aspecto blanco que
se torna verde azul, verde gris, verde
oliva o amarillo.
Figura 4. Hongo Fusarium presente en
el limon.
El género Fusarium es un patógeno
distribuido ampliamente a nivel mundial
(en más 32 países) y afecta a más de 80
cultivos de importancia comercial, como
el tomate y la cebolla. Existen diversas
especies del género Fusarium, sin
embargo las más relevantes para los
cultivos de hortalizas son Fusarium
oxysporum y Fusarium solani.
Figura 5. Hongo Botritys cinérea
presente en la fresa
Botrytis cinerea es un hongo necrótrofo,
lo cual implica que produce la muerte a
su anfitrión para obtener todos los
nutrientes que necesita. El tejido donde se
desarrolla se oscurece y, en ocasiones,
también se ablanda debido a la muerte de
las células del anfitrión. Transcurrido un
tiempo aparecerá una capa de moho gris
en las zonas oscurecidas, y el hongo
continuará alimentándose de las células
debilitadas o muertas, aunque también
pueda llegar a afectar a las vivas -una
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infección de Botrytis no se hará visible,

por norma general, hasta pasadas dos o
tres semanas desde que comenzó. Si la
infección puede observarse a simple vista,
significa que el moho ya habrá penetrado
la planta y no tendrá sentido utilizar un
fungicida.

Figura 7. Crecimiento de cultivo de el

frijol en caja de petri
macroscópicamente.
Figura 6. Hongo Colletotrychum
gloeosporioides presente en el frijol • Hongo gris claro de textura algodonosa.

El hongo colletotrychum gloeosporioides •Elevación.

es un importante patógeno vegetal que
causa considerables pérdidas económicas
en el cultivo de una gran variedad de
frutos como la papaya, variedades de
cítricos, aguacate, café, mango, uva,
guanábana, tomate, fresa. Puede atacar
raíz, tallo, hojas, flores y fruto; causando
la enfermedad llamada «infección
quiescente» (o infección latente),
Antracnosis. Esta infección se presenta en
estadios tempranos del desarrollo del
fruto, pero la enfermedad aparece luego
en etapas cercanas a la maduración.
Figura 8. Crecimiento de cultivo de
AISLAMIENTO DEL AGENTE tomate de árbol microscópicamente.
CAUSAL A PARTIR DE TEJIDO
ENFERMO: NOMBRE DEL HONGO:

Características: Hongo blanco  Oídium sp.

algodonoso, presencia de un hongo negro,
también de aspecto algodonoso.
Tomate de árbol (Solanum betaceum)
Características: Conidióforo, produce
una verdadera cadena de conidios, color
negro o verde pardo.
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IDENTIFICACIÓN MICROSCÓPICA
DE LOS AISLAMIENTOS:
Características: Se observan colonias de
distintos tipos de hongos, se observa que
se presenta contaminación de las cepas
sembradas con presencia del hongo
fusarium sp en pequeñas cantidades y
otros posibles patógenos
DISCUSIÓN
En los resultados obtenidos en el
laboratorio se observó que en las cajas
sembradas con agar saboraud PDA las
cuales tenían tejidos enfermos de tomate
de árbol; se presentó crecimiento de un
hongo fusarium sp el cual después de
sacar las cajas de Petri con los tejidos
enfermos se observó que no era el hongo
que se había sembrado al comienzo, hubo
presencia de contaminantes y presencia
de otros posibles patógenos, el cual no se
pudo realizar aislamiento, ya que las
cepas no estaban totalmente puras y no
era el hongo indicado para realizar dicho
procedimiento.
Por argumento de lo aprendido se puede
decir que la práctica no fue exitosa ya que
se presentó contaminación por el mal
manejo en el laboratorio o mala siembra
por parte de los estudiantes, gracias a que
no se consiguieron las muestras
adecuadas con hongos, se realizó el
debido procedimiento, se hizo la tinción a
cada muestra para llegar a observarla
hicimos el montaje en el microscopio y se
pudo identificar y observar como es la
morfología, estructura de un hongo y la
mayor parte de sus características y donde
pueden llegar a habitar cada uno de ellos.
CONCLUSIONES
 Se puede deducir que hay gran
variedad de hongos porque existen
diferentes tipos de bacterias.
 Los hongos están formados por
organismos mayoritariamente
pluricelulares (pero sin tejido) y
heterotróficos, segregan
enzimas digestivos al exterior que
hidrolizan los alimentos.
 Los hongos se desarrollan en sitios
húmedos y oscuros.
 Esta práctica nos pareció bastante
interesante, puesto que no es algo
anormal ni raro encontrarse en la vida con
distintos hongos procedentes de cualquier
sitio, tanto de los diferentes alimentos,
como del suelo o de nuestro propio
cuerpo. Vemos muy útil el estudio de los
seres diferentes a nosotros con otras
características y otras formas de vida
diversas a las de cualquier otro ser.
 Podemos concluir que el estudio
de los hongos radica en que muchas
especies dañan al ser humano de distintas
formas, como puede ser en los alimentos,
las cosechas, en objetos como libros, en
especial en el cuerpo humano; por eso
mismo es de relevancia estudiar y
reconocer las estructuras de los hongos
para conocer a que género y especie
pertenecen y dar tratamiento adecuado y
eficaz contra ese tipo de microorganismo.
Aunque también existen hongos que por
sus propiedades farmacológicas o alguno
de sus productos o micotoxinas se han
vuelto de importancia industrial y medica;
de los cuales anualmente se extraen
toneladas de productos de interés ya sea
de macromicetes o micromicetes, de igual
manera el conocimiento de su estructura
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nos permite elegir con cuidado que hongo  Mendoza, J. 2003. Control
o levadura deseamos cultivar para el biológico del salivazo de la caña de
beneficio de la humanidad. azúcar (Mahanarva andigena). Memorias
del Primer Seminario de Control
Cada día es mayor la intervención
Biológico. Universidad de Cuenca.
humana en el medio natural, modificando
Ecuador.106 p.
los hábitats a su antojo. Los hongos, al
 Ramirez, J., Delgado E. y Tosi S.
igual que los demás grupos bióticos, están
2006 Actividad antagónica de hongos
sufriendo las consecuencias de esta
endófitos de plantas medicinales del
actividad humana, tanto de forma directa
Ecuador sobre bacterias patógenas.
por la recolección indebida de los
Boletín micológico Universidad de
carpóforos y destrucción de sus hábitats,
Valparaíso – Chile.
como indirecta por la contaminación. Las
diferentes especies de hongos realizan un
gran número de funciones ecológicas que
mejoran la capacidad de recuperación de
los ecosistemas. Son por lo tanto unos
excelentes indicadores del estado de
conservación de nuestros bosques y es
imprescindible mantener una alta
diversidad de hábitats para favorecer el
crecimiento y reproducción de sus
especies, no sólo con el fin de poder
disfrutar con su recolección, sino también
para asegurar el futuro de nuestros
espacios verdes.

BIBLIOGRAFIA
 He, G., H. Matsuura, T. Takushi,
S. Kawano, T. Yoshihara, 2004. A new
metabolite from Penicillium sp. Journal
of Natural Products 67:1084–1087.
 Moreno, Gabriel y otros. La guía
de Incafo de los hongos de la península
Ibérica. 2 vols. Madrid: Editorial Incafo,
1986. Guía descriptiva; cogn sección
introductoria y fotografías en color.
 Agrios, G .N, 2005, fitopatología,
2da edición. México, Limusa, 952 p.
 Pacioni, Giovanni. Guía de
hongos. Barcelona: Ediciones Grijalbo,
1982.