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Materia: bioquímica.
Nombre de la práctica:
Determinación de la actividad de la enzima succinato deshidrogenasa.
Modulo:
Cuarto semestre único
Practica: 5
Fecha:
30 de Marzo de 2016
Universidad Autónoma de Chiapas
INTRODUCCION.
Las enzimas son proteínas que tienen como función disminuir la energía de
activación en una reacción; para cada reacción tiene una enzima específica, las
enzimas suelen clasificarse en seis clases: oxidorreductasas, transferansas,
hidrolasas, liasas, isomerasas y ligasas.
Esta enzima participa en la reacción número seis del ciclo de Krebs produciendo
fumarato y de igual manera participa en la cadena de transportes de electrones en
el complejo II. En Bioquímica (2007) se afirmó que la enzima succinato
deshidrogenasa es la única enzima del ciclo de Krebs que no se encuentra en la
matriz mitocondrial, sino que en la membrana mitocondrial interna, con el sitio de
unión del sustrato accesible desde la matriz. Es además la única en el ciclo
asociada a un grupo prostético flavínico (FAD) mediante el cual los equivalentes
de reducción del succinato son transferidos a la ubiquinona, componente de la
cadena de transporte de electrones. En general la función bioquímica del FAD es
oxidar alcanos a alquenos, mientras que el NAD + oxida alcoholes a aldehídos o
cetonas. El malonato es un fuerte inhibidor competitivo de la enzima.
OBJETIVO:
Que el alumno aprecie la actividad de le enzima Succinato Deshidrogenasa
mediante una reacción colorimétrica.
MATERIALES Y METODOS.
Se trabajó de acuerdo a Alvarado, Dávila, Ramos, García & Flores (2008) con las
siguientes modificaciones:
RESULTADOS.
A continuación se presentan los cálculos realizados en la práctica:
Figura 1.3 Tubo número 1 (con una coloración azul) y tubo 2 (coloración naranja).
DISCUSION DE RESULTADOS.
Al realizar la práctica identificamos el cambio de coloración en los tubos al
agregarle azul de metileno, lo cual este cambio se identificó más en el tubo 1, ya
que tenía como reactivo el fenol y el azul de metileno, lo cual ocurrió una oxidación
y presento un color azul brillante. En el tubo 2 la muestra no cambio de color
debido a que sufrió una reducción.
Gunawardena & Fernando (2008) dijeron que el colorante azul de metileno puede
funcionar como aceptor de electrones artificial (agente oxidante), reemplazando al
NAD+ en la reacciones enzimáticas en sistemas vivientes. Cuando el azul de
metileno sustituye al NAD+, se torna incoloro a medida que se reduce, mientras
los compuestos orgánicos involucrados en este metabolismo se van oxidando.
CONCLUSION.
Llegamos a la conclusión que el azul de metileno es un aceptor de electrones
artificial, ya que remplazo al NAD+ en la reacción. Cuando ocurre una oxidación,
la muestra torna un color azul brillante y cuando se reduce es incoloro. En el caso
del fenol inhibe la enzima de tal manera que desnaturaliza las proteínas.
Universidad Autónoma de Chiapas
ANEXOS.
Cuestionario.
1. ¿Cuáles son los colores del azul de metileno en sus estados oxidado y
reducido? Cuando esta oxidado se encuentra en color azul y cuando esta
reducido se vuelve incoloro.
2. ¿Cuál es la función del fenol en la reacción? Inhibe la actividad de las
enzimas ya que desnaturaliza las proteínas.
Diagrama de flujo.
Practica 5. Determinación de la actividad de la enzima succinato
deshidrogenasa.
Transferir en partes
iguales a 2 tubos
Referencias
Bioquimica. (2007). Obtenido de
http://www.bioquimicaqui11601.ucv.cl/unidades/krebs/metcdek3fid.html
Gunawardena, A., & Fernando, S. (2008). La respiracion celular como sistema redox. obtenido de
http://congresosadbia.com/ocs/index.php/tucuman2010/tucu2010/paper/viewFile/526/3
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