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Práctica 10: Síntesis Del Luminol

Abstract: El luminol es un compuesto que ha sido ampliamente contrario al utilizar más grandes de 25 nm se minimiza el efecto
utilizado en la área de criminalística para la identificación de restos catalítico.2
sanguíneos que no han sido detectados a simple vista, esto gracias
a que posee quimioluminiscencia, es decir posee la capacidad de
emitir luz, debido a esto la se han desarrollado métodos
complementarios en la síntesis de estos compuestos con el fin de
obtener productos con altos rendimientos, más puros y que la luz que
generen presente una mayor intensidad.

En este trabajo se ha realizado la síntesis del luminol o la 5-amino-

2,3-dihidroftalazina-1,4-diona utilizando hidracina hidratada y acido 3-
nitroftálico llevándose a cabo una reacción de sustitución nucleofilica
del grupo acilo y terminando con una reducción del nitro-derivado
formado usando el meta-bisulfito de sodio, obteniéndose un
rendimiento teórico de 0.8858 gr y un % de rendimiento del 89.43 %.

Figura 1. En una solución básica (alcalina), el luminol está en equilibrio con

Introducción
La quimioluminiscencia se ha detallado como un efecto óptico o
fenómeno donde una reacción química genera o produce luz.
Existen diferentes compuestos que presentan dicha
particularidad, dentro de los cuales se encuentra el luminol.
El Luminol es un compuesto heterocíclico que como ya se ha
mencionado se caracteriza por presentar quimioluminiscencia
identificada por la emisión de un brillo de coloración azulada.
Gracias a esta característica especial que posee este compuesto
se ha estado utilizando para diferentes aplicaciones especiales
tales como: la determinación de peróxido de hidrogeno en el
tratamiento de aguas residuales, en la determinación de tiroxina,
en ensayos inmunosquímicos e inmunoenzimáticos, sin embargo
una de sus aplicaciones más destacables es en el área de
criminalística donde se utiliza junto a un agente oxidante en
medio alcalino para la detección de sangre como evidencia en
sucesos criminales. Varios estudios que se han realizado indican
que la quimioluminiscencia se da como resultado de reacciones
oxido-reducción catalizadas. Se ha reportado que dicho
fenómeno ocurre cuando el luminol entra en contacto con el
grupo hemo presente en la sangre este cataliza la
descomposición del agente oxidante donde los productos
generados excitan al luminol y la energía como ya se ha
mencionado se emite en forma de luz. La reacción general de
quimioluminiscencia se detalla en la figura 1.1
Recientemente se ha demostrado que la intensidad de la luz
producida por el luminol puede ser mejorada mediante la
aplicación de nanopartículas metálicas, por ejemplo se ha
observado que la intensidad de la quimioluminiscencia del
luminol ha sido mejorada por la reacción con un oxidante débil,
como lo es el nitrato de plata catalizado por nanopartículas de oro
provocando así un aumento en la velocidad de la reacción y en
la intensidad de la luz producida. Además ha sido comprobado
que la intensidad es aún mayor cuando se utilizan nanopartículas
pequeñas de aproximadamente 11 nm diámetro y en caso
su anión. El oxígeno molecular se combina con la forma enol del anión del
luminol, oxidándolo en un peróxido cíclico. El peróxido cíclico se descompone
para dar 3-aminoftalato en estado excitado, junto con una molécula de
nitrógeno, luego el 3-aminoftalato excitado cae hasta el estado fundamental y
así es liberado un fotón de luz azul.
Debido a las importantes aplicaciones que posee el luminol este
ha gozado de una amplia perspectiva de demanda, por lo tanto
se han desarrollado distintos métodos de síntesis. Dentro de los
métodos más actuales se encuentra: mediante una reacción de
ciclación entre el ácido 3-nitroftálico y el hidrato de hidracina
(hidracina hidratada) con una posterior reacción del grupo nitro
utilizando hidrosulfito de sodio. Se ha usado este método con
frecuencia debido a su simplicidad, sin embargo la desventaja
radica en que son necesarias altas temperaturas de entre 150
hasta 220 °C, además por dichas condiciones se utiliza el
trietilenglicol el cual es difícil de eliminar y posee un alto punto de
ebullición de 285 °C.
Se ha descrito otro método de síntesis que se basa en el uso del
ácido sulfúrico e hidróxido de sodio con hidracina junto al
hidrosulfito de sodio. Este método provee de algunas mejoras
brindando mejores rendimientos y reduciendo la temperatura
necesaria para llevar a cabo la reacción de entre 140-170 °C,
pero aun con las mejoras que se han implementado este método
cuenta como principal desventaja es el uso del sulfato de
hidracina generado el cual es altamente tóxico (figura 2).3
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Figura 2. Se muestran dos métodos de síntesis ambos proporcionan el
derivado nitrado (5-nitro-2,3-dihidroftalazina-1,4-diona) y por reducción el
luminol, aunque las condiciones de reacción como se muestran son diferentes
a excepción de la hidracina.
Resultados y Discusión
Se ha logrado realizar la síntesis del luminol a través de una
reacción de ciclación entre la hidracina hidratada o hidrato de
hidracina y el ácido 3-nitroftálico, y como disolvente el
trietilenglicol, usando para el proceso de reducción al meta-
bisulfito de sodio.
Previamente a la realización de la práctica se han realizado los
cálculos necesarios para la obtención de las cantidades en masa
y volumen a utilizar a partir de las cantidades en milimoles
proporcionados, mediante los cuales se ha determinado que el
ácido 3-nitroftalico es el reactivo limitante en esta reacción.
En la primera etapa se ha obtenido la formación de una solución
amarillenta que después con el aumento de temperatura y
posterior enfriamiento se obtuvo un precipitado de coloración
anaranjado, después en la segunda etapa se obtuvo otro
precipitado de coloración amarillenta ligeramente anaranjada,
este solido obtenido se ha dejado secando por aproximadamente
un día junto al papel filtro que lo sostenía para la correcta
determinación de su rendimiento experimental. Una vez ha
terminado el tiempo de secado, se pesó el producto obtenido
resultando con una masa de 0.7922 gr (despreciando la masa del
papel filtro) y de acuerdo al rendimiento teórico que se ha
obtenido con una cantidad de masa de 0.8858 gr con lo cual se
determinado el % en rendimiento con un valor del 89.43 %, sin
embargo en esta ocasión no se ha determinado punto de fusión.
última en recolectarse, por lo tanto se puede confirmar
que no reaccionó por completo dicha porción
presumiblemente durante la reducción con el meta-
bisulfito de sodio.
 Esta reacción incompleta sugiere que se tiene poca
cantidad de 5-nitro-2,3-dihidroftalazina-1,4-diona, la
cual presentaba una coloración rojiza al obtenerla en la
primera etapa de la reacción, la cual se obtiene en
mezcla con el luminol identificándose con una
coloración anaranjada debido a que poca cantidad del
producto final no se encuentra reducido y posiblemente
debido a esto se obtiene esa coloración.
 Debido a lo detallado anteriormente se puede deducir
que no se adiciono suficiente meta-bisulfito de sodio
aunque al momento de pesar se obtuvo
aproximadamente 3.0004 gr posiblemente la balanza
analítica se encontraba descalibrada en ese momento
o bien ya que se demoró mucho tiempo en añadirlo a la
segunda mezcla de reacción (5-nitro-2,3-
dihidroftalazina-1,4-diona) pudieron haber perdidas de
este compuesto debido a la humedad del aire.
 Tambien la reducción puede no completarse debido a
la falta de calentamiento.
 La razón por la cual no se termina punto de fusión es
porque el luminol se evapora en el proceso.

Discusión

Utilizando hidracina y ácido 3-nitroftálico por calentamiento

directo en parrilla se obtiene el luminol también conocido como la
5-amino-2,3-dihidroftalazina-1,4-diona a través de una
sustitución nucleofilica del grupo acilo obteniendo un porcentaje
de rendimiento del 89.43 %.
Se tiene un rendimiento alto, pero sin embargo debido a las
discrepancias sobre el rendimiento experimental ya que en una
pequeña porción del sólido se puede apreciar una coloración
Esquema 1. Mecanismo de reacción propuesto donde se muestra la reacción
anaranjada por lo que en ausencia de la determinación del punto de sustitución nucleofilica de grupo acilo que lleva a una posterior reacción de
de fusión se puede intuir que: condensación intramolecular cerrando el anillo, después se lleva a cabo la
 Puede haber presencia de impurezas en el producto reducción del grupo nitro presente utilizando meta-bisulfito de sodio.
que pudieran modificar el rendimiento las cuales
pueden ser subproductos obtenidos durante la síntesis
ya sea antes o después del proceso de reducción, Como se puede apreciar en el mecanismo propuesto la reacción
de reducción puede no haberse llevado a cabo por completo pues
dichas etapas se muestran en el mecanismo de
como ya se ha mencionado la coloración naranja de una pequeña
reacción propuesto (esquema 1). cantidad de producto obtenido indica que se tiene un poco del
 Además en el producto predomina una coloración derivado nitrado que se caracteriza por una coloración rojiza en
amarilla en comparación a la anaranjada ya comparación al luminol con una coloración amarillenta. Según el
mecanismo además puede ser posible que la falta de
mencionada siendo esta que durante la filtración fue la
calentamiento impidiera que la reacción de reducción se
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favoreciera, debido a que es necesario tener un donador de caliente esperando más formación de sólido el cual se llevó a
protones para reducir satisfactoriamente el compuesto y sin la filtración por vacío.
temperatura necesaria dicha la reacción es más lenta.
 Al nuevo sólido obtenido se le adicionó 5 ml de hidróxido de
sodio al 10% y posteriormente se adicionó meta-bisulfito de
Tabla 1. Aquí se detallan la carga en gr y/o ml de cada reactivo a base de su sodio hidratado.
cantidad de moles.

 Una vez obtenida la nueva mezcla de reacción se llevó a

Reactivo PM Densidad Mol Carga
calentamiento a ebullición por minutos.
Acido 3- 211.13 1.01 g/ml 0.005 1.0556 gr
nitroftálico g/mol  Después se enfrió dicha mezcla en baño de hielo y se le añadió
2 ml de ácido acético glacial agitando hasta obtener un
Hidracina 50.06 g/mol 1.03 g/ml 0.02 1.0012 ml precipitado.
Hidratada
 Por último se ha llevado a filtración por vacío obteniéndose el
Trietilenglicol 150.175 1.12 g/ml 0.037 5 ml
producto final al cual se le ha determinado su masa y su punto
g/mol
de fusión experimental así como el porcentaje en rendimiento.
Hidróxido de 40.01 g/mol 2.13 g/ml 0.266 5 ml
sodio Keywords: Luminol• Quimioluminiscencia • Reducción •
Oxidación • Enol
Metanisulfito 190.107 1.48 g/ml 0.0157 3 gr
de sodio g/mol
(1) Polacco, S.; Wilson, P.; Illes, M.; Stotesbury, T. Quantifying
Ácido acético 60.05 g/mol 1.05 g/ml 0.035 2 ml Chemiluminescence of the Forensic Luminol Test for Ovine Blood in
a Dilution and Time Series. Forensic Science International 2018,
290, 36–41.
(2) Karabchevsky, A.; Mosayyebi, A.; Kavokin, A. V. Tuning the
Conclusiones
Chemiluminescence of a Luminol Flow Using Plasmonic
Nanoparticles. Light: Science & Applications 2016, 5 (11), e16164.
En conclusión se ha logrado llevar a cabo la síntesis del luminol
a través de una serie de reacciones caracterizándose (3) Wang Zhongxi Wang Anqi Xiong Fei Liu Jie. Luminol or Isoluminol

principalmente por una reacción de sustitución nucleofilica de Synthesizing Method by One-Pot Process. Chemical Engineering
grupo acilo entre el ácido 3-nitroftálico y la hidracina hidratada, and Processing: Process Intensification 2017, 1 (6), 1–6.
logrando obtener un % de rendimiento del 89.43 % con posibles
impurezas, por lo que se ha identificado en que etapa de la
síntesis se pudo haber cometido el error que llevo a dichos
resultados.
También se ha logrado reconocer la importancia de este
compuesto debido a las distintas aplicaciones que presenta el
luminol especialmente en el área de criminalística debido a sus
propiedades quimioluminiscentes, además de conocer algunas
mejoras que se han hecho en sus distintos métodos de síntesis a
partir de metales de transición como catalizadores.

Sección Experimental

 A un vaso de precipitados de 50 ml se ha agregado 1.0556 gr

de ácido 3-nitroftálico, 1 ml de hidracina hidratada y como
disolvente 5 ml de trietilenglicol.

 Posteriormente se calentó la mezcla de reacción por

calentamiento directo en parrilla realizándose siempre en la
campana de extracción.

 Se calentó la mezcla de reacción hasta una temperatura de

170°C por 10 minutos.

 Concluido dicho tiempo se enfrió la mezcla de reacción hasta

una temperatura de 80 °C esperando la formación de
precipitado, luego se añadió aproximadamente 15 ml de agua
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