1.

PRUEBA DE COOMBS
La prueba de Coombs (también conocida como prueba de antiglobulina) es un examen
de sangre que se usa en inmunología y hematología
Fue descrita por primera vez por los científicos: Rob Race, Arthur Morant, y Robin
Coombs (él por el cual la prueba era llamada) en 1945
Este análisis puede detectar la presencia de anticuerpos en sueros que reaccionan con
antígenos en la superficie de los glóbulos rojos (1) . Estos anticuerpos pueden fijarse a
los glóbulos rojos y causar su destrucción prematura. (2) La adición del reactivo
antiglobulina a los mismos ocasionará su aglutinación. (3)
Hay dos tipos distintos de la prueba de Coombs: el directo y el indirecto. La prueba de
Coombs directa detecta anticuerpos ya unidos a la superficie de los glóbulos rojos, y
la prueba de Coombs indirecta detecta anticuerpos libres que pueden reaccionar in
vitro con glóbulos rojos que tienen antígenos específicos.

Ambas pruebas de Coombs emplean un antisuero llamado reactivo (suero) de Coombs,

que contiene anticuerpos de animales inmunizados dirigidos contra IgG, IgM,
y/o complemento humano. Estos anticuerpos se unen a los anticuerpos de los antígenos
que están en la superficie de los glóbulos rojos, causando aglutinación de las
células. Esta aglutinación observada corresponde a un resultado positivo, y la ausencia
de aglutinación es un resultado negativo.
 Equipamiento, locales, materiales y reactivos
 Centrífuga para tubos de mesa
 Neveras de conservación de sangre 4-6ºC
 Aglutinoscopio.
 Tubos de ensayo de13x100
 Gradillas para tubos de ensayo
 Jeringuillas de 10 o 20 mL
 Agujas 20 o 21
 Torundas
 Ligaduras
 Aplicadores de madera.
 Anticoagulante EDTA o heparina
 Alcohol al 70% o hibitane alcohólico
 Suero de Coombs poliespecífico
 Suero de Coombs monoespecífico anti IgG y anti C3d.
 Solución salina

1.1.COMMBS DIRECTO
Detecta los anticuerpos o componentes del complemento fijados in vivo en los
hematíes de un paciente. (4) Muchas enfermedades y fármacos (quinidina,
metildopa y procainamida) pueden llevar a la producción de estos anticuerpos.
Estos anticuerpos algunas veces destruyen los glóbulos rojos y causan anemia. Esta
prueba algunas veces se lleva a cabo para diagnosticar la causa
de anemia o ictericia. (5) Por ello, podemos aplicar dicha prueba al estudio de la
enfermedad hemolítica del recién nacido y de las anemias hemolíticas, ya sean
autoinmunes o inducidas por fármacos y de las reacciones transfusionales (3)
Determina la existencia de glóbulos rojos recubiertos con inmunoglobulinas y/o
complemento in vivo, en particular IgG y C3d (4)
 APLICACIONES
o Enfermedad hemolítica del recién nacido
o Anemia hemolítica autoinmune
o Reacción hemolítica post-transfusional

 PROCEDIMIENTO: Combbs Directo

1° Lave tres veces los hematíes del paciente con solución salina fisiológica.
2° Haga una suspensión de hematíes lavados al 2-5 %.
3° Añada en un tubo debidamente rotulado dos gotas de la suspensión.
4° Añada dos gotas de Suero de Coombs poliespecífico.
5° Centrifugue un minuto a 1000 rpm.
6° Lea desprendiendo suavemente el botón sobre la lámpara aglutinoscopio.
1.2.COOMBS INDIRECTO
Esta prueba consiste en buscar anticuerpos circulantes libres contra una serie de
glóbulos rojos estandarizados. Esta prueba indirecta sólo se usa rara vez para
diagnosticar una afección médica y, con más frecuencia, se utiliza para determinar
si una persona podría tener o no una reacción a una transfusión de sangre. (5)
Determina la presencia de anticuerpos irregulares en el suero del receptor
 APLICACIONES
o Detección de anticuerpos irregulares
o Pruebas de compatibilidad
o Determinación de fenotipos
o Identificación y titulación de anticuerpos

1.3.COOMBS CRUZADO
El Coombs cruzado es una variante del Coombs indirecto y se realiza a pacientes
politransfundidos, pacientes con antecedentes de reacción post transfusional
hemolítica y a multíparas para escoger sangre compatible.
 PROCEDIMIENTO: Coombs indirecto y cruzado
1° Centrifugue la muestra de sangre 10 min a 3 000 rpm para obtener el suero
y decántelo en un tubo debidamente identificado.
2° Prepare una suspensión al 2-5 % con la mezcla de hematíes O y en el caso
del Coombs cruzado utilice una muestra de la sangre a transfundir para
preparar la suspensión.
3° En un tubo debidamente rotulado añada dos gotas del suero y dos gotas de
la suspensión y mezcle bien.
4° Prepare un tubo control rotulado C+ (control positivo) y añada en él dos
gotas de la suspensión de hematíes O y dos de suero hemoclasificador anti-D
y mezcle bien
5° Incube ambos tubos en un Baño de María a 37ºC por 30 minutos
6° Lave tres veces con solución salina escurriendo totalmente el sobrenadante
del último lavado.
7° Añada dos gotas de suero de Coombs poliespecífico a cada tubo.
8°Centrifugue 1minuto a 1000 rpm. ¾ Lea desprendiendo suavemente el
botón en la lámpara aglutinoscopio.

1.4.INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

 Si en la prueba de Coombs directo observa aglutinación esto indica presencia de

anticuerpos y /o complemento unidos a los hematíes in vivo, que actúan contra
sus glóbulos rojos, lo cual puede deberse a:

 Anemia hemolítica autoinmunitaria sin otra causa

  Leucemia linfocítica crónica u otro trastorno linfoproliferativo
 Anemia hemolítica inducida por fármacos (muchos fármacos han sido
asociados con esta complicación)
 Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica del recién nacido)
 Mononucleosis infecciosa
 Infección por micoplasma
 Sífilis
 Lupus eritematoso sistémico u otra afección reumatológica
 Reacción a transfusión como la ocasionada por unidades de sangre
cotejadas de manera impropia

Esta prueba también es anormal en algunas personas sin una causa clara,
especialmente entre los ancianos. Hasta el 3% de las personas que están
hospitalizadas sin un trastorno sanguíneo conocido tendrán un resultado
anormal en la prueba de Coombs directa.

 Si en la prueba de Coombs indirecto se observa aglutinación significa que

estamos en presencia de anticuerpos irregulares en el suero del receptor por lo
que debe proceder al estudio e identificación de él o los anticuerpos adquiridos.

Estos anticuerpos actuarán contra los glóbulos rojos que el cuerpo asume como
extraños. Esto puede sugerir la presencia de:

 Anemia hemolítica autoinmunitaria o inducida por fármacos

 Eritroblastosis fetal (enfermedad hemolítica)
 Incompatibilidad sanguínea (cuando se utiliza en bancos de sangre)

 Si en la prueba de Coombs cruzado se observa aglutinación indica que estamos

en presencia de anticuerpos irregulares en el suero del receptor por lo que las
unidades de sangre estudiadas que presenten este resultado no deben ser
transfundidas al paciente.

Referencias
1. PRUEBA DE COMMBS. [Online]. [cited 2016 05 29. Available from:
http://www.ecured.cu/Prueba_de_Coombs.

2. University of Marylan Medical Center. [Online].; 2014 [cited 2016 05 29. Available from:
http://umm.edu/health/medical/spanishency/articles/prueba-de-coombs.

3. LINEAR CHEMICALS. [Online]. [cited 2016 05 29. Available from:

http://www.linear.es/ficheros/archivos/804_34100-C.pdf.

4. Santovenia AB, Campa JDdl, Pérez MP. Manual de Prácticas Médicas - Hospital Hermanos
Ameijeiras. [Online]. [cited 2016 05 29. Available from:
http://www.sld.cu/galerias/pdf/sitios/hematologia/prueba_de_coombs.pdf.pdf.
5. CLINICA ADAM. [Online]. [cited 2016 05 29. Available from:
https://www.clinicadam.com/salud/5/003344.html.

6. Julia M, Guerra RES. REACTIVO ANTIGLOBULINA HUMANA. [Online]. [cited 2016 05 29.
Available from: http://www.drrondonpediatra.com/reactivo_antiglobulina_humana.htm.