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PRACTICA N 06 Tiempo de Sangria, Tiempo de Coagulacion y Tiempo de Protrombina
I. OBJETIVOS: Aprender cmo se realiza el tiempo de sangra, tiempo de coagulacin y el tiempo de protrombina. Interpretar los resultados de acuerdo a los valores normales.
II. FUNDAMENTO TEORICO: a) Tiempo de sangra El tiempo de sangrado depende la elasticidad de las paredes de los vasos y la capacidad funcional de las plaquetas. Finalidad: estimar la respuesta en general de las plaquetas a una injuria de los tejidos, la capacidad de vasoconstriccin, defectos adquiridos y congnitos de desrdenes sanguneos.
Preparacin previa: abstencin de alcohol durante 24 horas previas a la prueba.
Descripcin de la prueba: Mtodo de Duke: pequea incisin efectuada en el lbulo de la oreja con una aguja descartable. El operador seca el sitio de la incisin cada 30 segundos hasta que la hemorragia cesa. Valores normales: Mtodo de Duke 1 a 3 minutos. Mtodo de Ivi 1 a 7 minutos. Tiempos anormales prolongados son compatibles con: prpura; enfermedades del hgado; deficiencias de factores de la coagulacin; coagulacin intravascular diseminada; anemia hemoltica del recin nacido; linfoma; Leucemia aguda.
Tiempo necesario para obtener resultados: disponible dentro de los 30 minutos. Drogas que pueden alterar los resultados: - Acido acetilsaliclico - Aspirina - Analgsicos - AINE - Anticoagulantes b) Coagulacin ANALISIS CLINICO I FACM - ESFB
Tiempo de Sangria, Tiempo de Coagulacion y Tiempo de Protrombina Pgina 2 La sangre cuando sale de los vasos se vuelve viscosa y toma luego una consistencia slida, esto se debe a que el fibringeno plstico, que est en solucin coloide se transforma en un slido, la fibrina. Los lquidos del organismo que coagulan son los que contienen fibringeno. Luego de la coagulacin de la sangre o el plasma se observa la retraccin del cogulo, y trazada entonces un lquido amarillo, el suero sanguneo. Al microscopio se observa que el cogulo est formado por una red de finos filamentos de fibrina, que aprisiona a los glbulos rojos y blancos, y por suero sanguneo; al formarse esta red se adhieren tambin las plaquetas.
Papel de la coagulacin Interviene en la detencin de hemorragias pues ocluye los vasos abiertos y evita as que el organismo se desangre. La coagulacin es un mecanismo que protege al organismo e interviene en la hemostasis impidiendo la prdida de sangre. La coagulacin normal protege al organismo pero si se produce una coagulacin patolgica por ejemplo dentro de los vasos (trombosis) puede ocluirlos y producir la falta de irrigacin y muerte de los tejidos, o si un cogulo migra a distancia (embolia) puede tapar vasos y provocar peligrosos accidentes que pueden ser mortales.
Sustancias que intervienen en la coagulacin Fibringeno (Factor I) Esta sustancia coagula por accin de la trombina, transformndose en fibrina. El fibringeno se origina en el hgado, quizs slo en l. En condiciones normales hay de 200 a 350 mg de fibringeno por cada 100 ml de plasma. En condiciones patolgicas la cantidad de fibringeno puede disminuir e incluso desaparecer lo cual provoca que las personas que padecen de esta anomala se ven expuestos a hemorragias importantes si se lesionan vasos grandes o medianos. Trombina La trombina coagula las soluciones de fibringeno y durante la coagulacin se forma a expensas de la protrombina. La trombina aumenta la velocidad de coagulacin. La trombina acta sobre el fibringeno desdoblando sus molculas y permitiendo la formacin de fibrina.
Protrombina ANALISIS CLINICO I FACM - ESFB
Tiempo de Sangria, Tiempo de Coagulacion y Tiempo de Protrombina Pgina 3 La protrombina pura no coagula al fibringeno necesita la presencia del ion calcio y sustancias que hay en las plaquetas y en el plasma que la transforman en trombina. Se forma en el hgado y este necesita la presencia fundamental de la vitamina K. Existe tendencia a las hemorragias cuando la protrombina del plasma se reduce a un 20 % del valor normal. Tromboplastina de los tejidos La existencia de este conjunto de sustancias en los tejidos hacen que cuando hay una herida coagule rpidamente, en cambio si la sangre sale de un vaso y no hay contacto con los tejidos, la coagulacin es ms lenta. Papel de las plaquetas Estas intervienen en la retraccin del coagulo y en la hemostasis. Hay una cantidad de sustancias llamadas FACTORES (V, VII, VIII, IX, X, XI, etc.) que tienen un papel fundamental en la coagulacin y que la ausencia, disminucin o aumento de cualquiera de ellos provoca patologas en la coagulacin. En el organismo existen sustancias anticoagulantes como por ejemplo la heparina producida por el hgado que acta bloqueando la transformacin de protrombina en trombina. En la sangre circulante no hay trombina lo que provoca que esta sea fluida y pueda circular, si existiera una pequea cantidad en sangre inmediatamente sera neutralizada. Trastornos de la coagulacin en el hombre Hay diversas condiciones patolgicas que retardan o impiden la coagulacin de la sangre. Algunas se acompaan de ciertas tendencias a las hemorragias espontneas o a la produccin de hemorragias prolongadas. 1. Hemofilia Es una enfermedad constitucional hereditaria trasmitida por las mujeres, pero que solo padecen los hombres. Se caracteriza por presentar tendencia a las hemorragias prolongadas durante todo el curso de la vida y porque adems la sangre extrada de los vasos suele coagular muy lentamente. 2. Trombocitopenia Esta enfermedad se produce cuando hay una disminucin de plaquetas lo que produce tendencia a sangrar. 3. Insuficiencia Heptica Cuando esto ocurre se observa una disminucin en la cantidad de protrombina. 4. Trombosis Se llama a s a la coagulacin intravascular de la sangre, se conoce como embolia al proceso por el cual un cogulo (trombo) es arrastrado por el torrente circulatorio y ANALISIS CLINICO I FACM - ESFB
Tiempo de Sangria, Tiempo de Coagulacion y Tiempo de Protrombina Pgina 4 ocluye un vaso. La trombosis se observa despus de algunas intervenciones quirrgicas, partos, etc. Los trombos al desprenderse por ejemplo los de las venas, pueden llegar al pulmn y causar embolias pequeas o masivas (mortales). Las trombosis en las cercanas de las arterias coronarias pueden provocar un infarto cardaco, etc. Tiempo de Coagulacin La coagulacin total se produce entre 5 y 15 minutos. Esto se obtiene extrayendo sangre venosa de un sujeto, colocarla en un tubo de vidrio 1 ml aproximadamente y mantenerla en bao de agua a 37.5 C. Esto se realiza con tres muestras en tres diferentes tubos de ensayo, se inclinan 1 o 2 tubos cada medio minuto hasta que se forme el coagulo y se adhiere a la pared, al final podemos examinar el tercer tubo.
c) Tiempo de protrombina La protrombina (factor II de coagulacin) es una protena plasmtica producida por el hgado y forma parte de la cascada de la coagulacin. El hgado produce 11 de los factores de la coagulacin, por lo que frecuentemente su disfuncin se asocia a trastornos de la coagulacin. Los factores de coagulacin se miden habitualmente en forma indirecta mediante la determinacin del tiempo de protrombina, que mide un conjunto de factores de coagulacin del plasma. Por lo anterior, una alteracin del tiempo de protrombina puede deberse a diversas causas, no siempre a una disfuncin heptica. 1. Formas de medicin El tiempo de protrombina evala la funcin de la va extrnseca y comn de la coagulacin, dada por los factores VII, V, X, II, I y XIII, mediante la adicin de tromboplastina (factor tisular) al plasma. Se evala el tiempo de formacin del cogulo expresado en segundos sobre el tiempo que toma el plasma normal. Este tiempo se puede expresar tambin en porcentaje respecto del control. Debido a las diferencias de actividad de los diferentes factores tisulares, el tiempo de protrombina medido con diferentes reactivos vara. Por esta razn se ha estandarizado la medicin en relacin al uso de tromboplastina recombinante mediante el uso del INR (international normalized ratio). Valores sobre 1 expresan disminucin de los factores de coagulacin. Algunos estudios han cuestionado la reproducibilidad del INR en personas con enfermedades hepticas.
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Tiempo de Sangria, Tiempo de Coagulacion y Tiempo de Protrombina Pgina 5 2. Causas de aumento del tiempo de protrombina Las siguientes causas deben considerarse frente a un aumento del tiempo de protrombina (o aumento del INR): Enfermedades hepticas La cirrosis heptica y la insuficiencia heptica aguda producen aumento del tiempo de protrombina por produccin insuficiente de las protenas de la coagulacin. En estos casos no hay mejora luego del uso de vitamina K. Dficit de vitamina K La vitamina K es un cofactor indispensable para la activacin de las protenas de la coagulacin, por lo que su deficiencia prolonga el tiempo de protrombina. Las causas de dficit de vitamina K son mltiples: Uso de antibiticos, obstruccin de la va biliar, ingesta inadecuada o malabsorcin. El uso de vitamina K es especialmente til en pacientes con ictericia, ya que una correccin indica que hay adecuada produccin de protenas de la coagulacin por el hgado.
III. MUESTRA, MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS:
- Muestra: sangre venosa
- Materiales: Aguja nmero 25 Papel filtro Jeringa Tubos de ensayo
- Equipos: Bao mara
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IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
1. TIEMPO DE SANGRA
a) Mtodo de Duke
Haremos una incisin con una lanceta en el lbulo anterior de la oreja. Medir con un cronometro. Poner en marcha el cronometro y cada 30 seg. Absorber la sangre del lbulo de la oreja, con un papel absorbente, secar la gota de sangre. El tiempo final ser cuando coloque el papel absorbente y no habr rasgos de sangre.
2. TIEMPO DE COAGULACIN
a) Mtodo de White
Este mtodo consiste en trabajar a una temperatura corporal de 37C. (En bao mara) Desde el momento que se extrae la sangre de la vena, empiezo a medir el tiempo con un cronmetro, extraer aproximadamente 4.5 ml de sangre venosa. Dividir la sangre en 3 tubos, en cantidades iguales, llevar a bao mara. Retiro el primer tubo despus de 5 minutos, y si aun fluye, coloco nuevamente en bao mara hasta que se coagule por completo. Si en el primer tubo se observa que ya no fluye, paso al segundo tubo y observar si la sangre se coagulo. Observar a que tiempo coagulo el tercer tubo.
V. RESULTADOS:
1. TIEMPO DE SANGRA: Mtodo de Duke
Previa desinfeccin de la zona. Realizar una incisin, en el lbulo de la oreja. Primeramente presionar fuertemente, para evitar que el paciente no sienta dolor.
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2. TIEMPO DE COAGULACION
La sangre que va saliendo secar con un pale filtro cada 15 segundos, controlados con un cronometro.
Seguir limpiando con el papel filtro, hasta que ya no manche el papel, lo que se toma como tiempo final, es el tiempo de sangra.
Repartir la sangre extrada en 3 tubos, aproximadamente 1.5 m, en cada uno. .
Extraer sangre como 4.5 ml aproximadamente. Desde el momento que se empez a extraer sangre, se toma el tiempo con un cronmetro.
Seguidamente llevar los 3 tubos a bao mara a 37C. Aun se sigue tomando el tiempo con el cronmetro.
Despus de 5 minutos, se sac el primer tubo, y se observo si la sangre coagulo y aun fluye por las paredes del tubo.
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VI. ANALISIS DE RESULTADOS:
a) TIEMPO DE SANGRIA
Resultados Paciente de sexo masculino: Tiempo de sangra: 1 min y 15 segundos.
La finalidad de realizar esta prueba es que se estima la respuesta en general de las plaquetas a una injuria de los tejidos, la capacidad de vasoconstriccin, defectos adquiridos y congnitos de desrdenes sanguneos. Descripcin de la prueba: Mtodo de Duke: pequea incisin efectuada en el lbulo de la oreja con una aguja descartable. El operador seca el sitio de la incisin cada 30 segundos hasta que la hemorragia cesa. Valores normales: Mtodo de Duke 1 a 3 minutos. Tiempos anormales prolongados son compatibles con: Prpura; enfermedades del hgado; deficiencias de factores de la coagulacin; coagulacin intravascular diseminada; anemia hemoltica del recin nacido; linfoma; Leucemia aguda. Tiempo necesario para obtener resultados: disponible dentro de los 30 minutos.
Cada 30 segundos observar si la sangre coagulo, si coagulo el primer tubo, pasar al segundo, hasta que este coagule.
Si se llego al tercer tubo, y se observo que coagulo, el tiempo que demoro este en coagular se le tomara como el tiempo de coagulacin. A los dos primeros no se les considera, porque en ellos hubo alteracin de la coagulacin, con los movimientos que se les fue realizando.
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Tiempo de Sangria, Tiempo de Coagulacion y Tiempo de Protrombina Pgina 9 b) TIEMPO DE COAGULACION Resultados Tiempo de coagulacion: 1 1 minutos
La finalidad de este anlisis es saber el funcionamiento de las plaquetas, estas intervienen en la retraccin del coagulo y en la hemostasis. Trastornos de la coagulacin en el hombre Hay diversas condiciones patolgicas que retardan o impiden la coagulacin de la sangre. Algunas se acompaan de ciertas tendencias a las hemorragias espontneas o a la produccin de hemorragias prolongadas. Hemofilia Es una enfermedad constitucional hereditaria trasmitida por las mujeres, pero que solo padecen los hombres. Se caracteriza por presentar tendencia a las hemorragias prolongadas durante todo el curso de la vida y porque adems la sangre extrada de los vasos suele coagular muy lentamente. Trombocitopenia Esta enfermedad se produce cuando hay una disminucin de plaquetas lo que produce tendencia a sangrar. Insuficiencia Heptica Cuando esto ocurre se observa una disminucin en la cantidad de protrombina. Trombosis Se llama as a la coagulacin intravascular de la sangre, se conoce como embolia al proceso por el cual un cogulo (trombo) es arrastrado por el torrente circulatorio y ocluye un vaso. La trombosis se observa despus de algunas intervenciones quirrgicas, partos, etc. Los trombos al desprenderse por ejemplo los de las venas, pueden llegar al pulmn y causar embolias pequeas o masivas (mortales). Las trombosis en las cercanas de las arterias coronarias pueden provocar un infarto cardaco, etc.
VII. CONCLUSIONES:
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Tiempo de Sangria, Tiempo de Coagulacion y Tiempo de Protrombina Pgina 10 Tiempo de sangra es el tiempo de sangrado depende la elasticidad de las paredes de los vasos y la capacidad funcional de las plaquetas y se realiza mediante el mtodo de Duke. La Finalidad del tiempo de sangra es estimar la respuesta en general de las plaquetas a una injuria de los tejidos, la capacidad de vasoconstriccin, defectos adquiridos y congnitos de desrdenes sanguneos. Los valores normales del mtodo de Duke es de 1 a 3 minutos. La coagulacin total se produce entre 5 y 15 minutos. Esto se obtiene extrayendo sangre venosa de un sujeto, colocarla en un tubo de vidrio 1 ml aproximadamente y mantenerla en bao de agua a 37.5 C. Esto se realiza con tres muestras en tres diferentes tubos de ensayo, se inclinan 1 o 2 tubos cada medio minuto hasta que se forme el coagulo y se adhiere a la pared, al final podemos examinar el tercer tubo.
VIII. BIBLIOGRAFIA:
- MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE LABORATORIO EN TECNICAS BASICAS DE HEMATOLOGIA Instituto Nacional de Salud Lima Per 2005 - Pginas 33 35. Recuento de GR: procedimiento. - LABORATORIO CLINICO - Jorge Suardaz Celso Cruz Ariel Colina La Habana 2004 Pginas 217 265. Estudio de las anemias. - MANUAL AMIR HEMATOLOGIA 3era edicin 2006 - Pginas: 11 23. Todo tipo de anemias - HEMATOLOGIA fisiopatologa y diagnostico CASOS CLINICOS Chile 2005. - Alfonso BALCELLS La clnica y el Laboratorio - INTERPRETACION CLINICA DE LA BIOMETRIA HEMATICA Carlos Almaguer Gaona - 2003