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Analisis de Carbohidratos PDF
Analisis de Carbohidratos PDF
Celulosa n
C (H2O)n
Introducción
¿Que es un carbohidrato?
Se producen en la fotosíntesis.
Las plantas verdes contienen clorofila que
capta de la luz solar la energía necesaria para
realizar el proceso:
6 CO2 + H2O
C6(H2O)6 + 6 O2
Introducción
¿Como se clasifican?
Aldosas
C Monosacáridos
a
r Azúcares Cetosas
b
o
-2 Di
h Oligosacáridos
i -3 Tri
d
r -4 tetr
a
-5 pent
t Polisacáridos
o -6 Hex
s
- 7 Hept
Monosacáridos Estructura
Estructura cíclica
OH
H O
C + R OH H C OR
R´ R´
Aldehido + Alcohol Hemiacetal
OH
R´ O
C + R OH R´ C OR
R´ R´
Cetona + Alcohol Hemicetal
Monosacáridos Estructura
Estructura cíclica
H O
HO C H H C OH
C
H C OH H C OH
H C OH O
O HO C H
HO C H
HO C H
H C OH H C OH
H C OH
H C H C
H C OH
CH2OH CH 2OH
CH 2OH
piranosas O
Monosacáridos Estructura
Estructura cíclica
HOCH2 O
HO C CH2OH HOCH2 C OH
C
HO C H O HO C H O
HO C H
H C OH H C OH
H C OH
H C
H C
H C OH CH2OH
CH2OH
CH2OH
furanosas O
Monosacáridos Estructura
Estructura cíclica
CH2OH
HO C H O
H C OH H H OH
O
HO C H OH H H
HO
H C OH
H C H OH
CH2OH
Estructura en proyección de Estructura en proyección de
Fischer Haworth
Monosacáridos Estructura
Estructura cíclica
CH2OH
HO C H O
H C OH H H OH
O
HO C H OH H H
HO
H C OH
HOCH2 C H OH
H
Estructura en proyección de Estructura en proyección de
Fischer Haworth
Una permutación
Inversión en C5
Monosacáridos Estructura
Estructura cíclica
CH2OH
HO C H O
H C OH H H OH
HO C H O OH H H
HO
H C OH
HOCH2 C H H OH
Dos permutaciones
Igual configuración
Monosacáridos Estructura
Estructura cíclica
CH2OH
HO C H O
H C OH H H OH
HO C H O OH H H
HO
H C OH
HOCH2 C H H OH
Estructura en proyección de
Haworth Conformación silla
Maltosa 6
6
CH2OH CH2OH
O 5
O
5
4 1
4 1 OH
OH + OH
2
2 OH OH
OH 3
3
OH OH
α−D-glucosa α ο β −D-glucosa
CH2OH CH2OH
OH
OH OH
O
OH
α ο β -maltosa
OH OH
• Maltosa.- Es el azúcar de malta. Grano germinado de
cebada que se utiliza en la elaboración de la cerveza.
Se obtiene por hidrólisis de almidón y glucógeno.
Posee dos moléculas de glucosa unidas por enlace
tipo α (1-4).
Lactosa
CH2OH glucosa
CH2OH
OH
OH
OH O
O
OH OH
O
5
5
O
4 1
4 1
OH
OH
2 OH
OH 2
3 OH 3
O
α−D-glucosa OH -H2O 6
OH
CH2OH
O
6 + OH 2
5
CH2OH OH
O
4 3
5 OH 2 CH2OH
1
OH
4 3
CH2OH
1
OH β−D-fructosa
• Se conoce como azúcar de remolacha, azúcar de caña, azúcar
de mesa o simplemente azúcar. Es el compuesto orgánico puro
de mayor venta en el mundo.
• El cuerpo humano es incapaz de utilizar la sacarosa o
cualquier otro disacárido en forma directa, debido a que estas
moléculas resultan muy grandes para pasar a través de las
membranas celulares. Por lo que, el disacárido debe
fragmentarse, por hidrólisis, en sus dos unidades de
monosacáridos.
DISACÁRIDOS REDUCTORES
los disacáridos están formados por la unión de dos monosacáridos, que se realiza de dos formas:
Mediante enlace monocarbonílico, entre el C1 anomérico de un monosacárido y un C no anomérico de
otro monosacárido, como se ve en las fórmulas de la lactosa y maltosa. Estos disacáridos conservan el
carácter reductor .
Mediante enlace dicarbonílico, si se establece entre los dos carbonos anoméricos de los dos
monosacáridos, con lo que el disacárido pierde su poder reductor, por ejemplo como ocurre en la
sacarosa
Polisacáridos
CH2OH CH2OH CH2OH CH2OH
O O O O
H H H H H H H H
H H H H
HO OH H O OH H O OH H O OH H OH
H OH H OH H OH H OH
Amilosa
Soluble en agua
20% del almidón
Amilopectina
Insoluble en agua
80% del almidón
El almidón
• El almidón es un polisacárido de reserva
alimenticia predominante en las plantas, y
proporciona el 70-80% de las calorías
consumidas por los humanos de todo el
mundo. Tanto el almidón como los productos
de la hidrólisis del almidón (amilosa y
amilopectina) constituyen la mayor parte de
los carbohidratos digestibles de la dieta
habitual.
Diferencia entre amilosa y amilopectina
• MÉTODOS QUÍMICOS
• MÉTODO FLUORIMÉTRICO
• MÉTODOS ENZIMÁTICOS
• CROMATOGRAFÍA DE GASES
• CROMATOGRAFÍA LÍQUIDA
• MÉTODOS FÍSICOS
MÉTODOS QUÍMICOS
• REACCIONES DEL H2SO4 Y CARBOHIDRATOS
• FUNDAMENTO.-
FUNDAMENTO.- PROVIENE DE LOS
PRODUCTOS DE REACCIÓN Y DEGRADACIÓN
DEL ÁCIDO Y EL AZÚCAR.
ÁCIDO FENOL SULFÚRICO
– EL AZÚCAR SE TORNA PRINCIPALMENTE
HIDROXIMETILFURFURAL (HMF) O FURFURAL (F)
LOS CUALES SON REALMENTE DETERMINADOS
LEYENDO LA ABSORBANCIA A 490nm
H2SO4
CONC.
FENOL + CARBOHIDRATO → AMARILLO – NARANJA
CALOR
ÁCIDO FENOL SULFÚRICO
H+ H+
• POLISACÁRIDOS → MONOSACÁRIDOS → F + HMF
∆ ∆
VENTAJAS DEL MÉTODO
• ES SENCILLO
• ES RÁPIDO
• SENSIBLE A MUY BAJOS NIVELES DE AZÚCAR
(E.G. 5μg)
• ESPECÍFICO PARA CARBOHIDRATOS.
• NO EXISTE INTERFERENCIA CON PROTEÍNAS
VENTAJAS DEL MÉTODO
• A MENUDO NO ES NECESARIA LA
CLARIFICACIÓN DE LA MUESTRA
• LOS REACTIVOS SON BARATOS Y ESTABLES
• COLOR ESTABLE
• RESULTADOS REPRODUCIBLES
• RESULTADOS CONFIABLES
DESVENTAJAS DEL MÉTODO
• FUNDAMENTO
EL MÉTODO ES BÁSICAMENTE IGUAL AL DEL
FENOL PERO EL COLOR QUE SE OBTIENE ES
AZÚL – VERDE Y SE LEE A UNA ABSORBANCIA
DE 620nm.
DOS SOLUCIONES :
• SOLUCIÓN A: SULFATO DE COBRE CRISTALINO
• FUNDAMENTO
HNO3
Cu2O → Cu(NO3)2
∆
TITULACIÓN DEL TIOSULFATO DE SODIO
S2O3-2
I2 + I- → I3- → S4O6-2 + 3 I-
(TRIIODURO)
Calor
• Reactivo de Somogy i
– NaCO3 - Carbonato de sodio
– NaHCO3 – Bicarbonato de Sodio
– KaNaC4H4O6 – Tartrato de Sodio Potasio
– CuSO4·5H2O –Sulfato de Cobre
• Reactivo de Nelson
– (NH4)6Mo7O24 - Molibdato de amonio
– Na2HAsO7·H2O – Arsenato de Sodio
– H2SO4 – Ácido Sulfúrico
MÉTODO FLUORIMÉTRICO
• FUNDAMENTO
GLUCOSA
OXIDASA
H2O + O2 + GLUCOSA → LACTONA DE ÁCIDO D-
GLUCÓNICO + H2O
CATALASA
H2O2 → H2O + ½ O2
• LA CONCENTRACIÓN DE GLUCOSA ES
DETERMINADA ANTES Y DESPUÉS DE LA
HIDRÓLISIS ENZIMÁTICA
DETERMINACIÓN DE LA GLUCOSA ANTES DE
LA INVERSIÓN
ß-FRUCTOSIDASA
SACAROSA + H2O → GLUCOSA + FRUCTOSA
• FUNDAMENTO
• EL INSTRUMENTO DE MEDICIÓN ES UN
HIGRÓMETRO (TAMBIÉN UTILIZADO PARA MEDIR
SÓLIDOS SOLUBLES TOTALES).
DEPENDIENTE DE: