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4-. Estudio Cinético de Una Fermentación Alcohólica Utilizando Miel de Abejas Como Sustrato PDF
4-. Estudio Cinético de Una Fermentación Alcohólica Utilizando Miel de Abejas Como Sustrato PDF
FERMENTACION ALCOHOLICA
UTILIZANDO MIEL
DE ABEJAS COMO
SUSTRATO
Jose Angel Gomez'", Hader 11'0/1 Castaiio y Mario Arias'!'.
INTRODUCCION.
RESUMEN. Con la elaboraci6n del presente trabajo se
pretende contribuir al fortalecimiento del area de
El articulo describe un estudio cinetico de la biotecnologfa, como uno de los campos de
una fermentacion alcoholica utilitando miel de acci6n de la Ingenierfa Qufmica. Dados los
abejas como sustrato; para este efecto se antecedentes en biotecnologia de los procesos
realiraron nueve fermeruaciones en proceso fermentativos en la producci6n de bebidas
discontinuo con un volumen, de J 0 L, siguiendo alcoh6licas en nuestro pats, se propuso adelantar
el comportamiento de las concentraciones de un estudio cinetico fermentativo para la
sustrato, biomasa y producto en el tiempo. Se producci6n de una bebida alcoh6lica, con miras a
evaluo 10 conveniencia de factores como la analizar los mecanismos intrinsecos que
agitacion y la adicion de nutrientes, adernds, se gobiernan tales procesos; adernas, de realizar el
observe el efecto de las conceniraciones respectivo modelamiento y simulaci6n del
iniciales de sustrato e inocula y el tipo de miel proceso.
(1) Profesor Universidad Nacional de Colombia. A quien se puede enviar correspondencia. Decanatura de Ciencias,
Universidad Nacional de Colombia Sede - Medellin. A.A. 3840. Fax 260 44 89. Medellin Col. Esmaitv-:
mearias@perseus.lIlwlmed.edll.co
(2) Corporacion Biotec - Universidad del Valle, E-mail: jocastri@maJalda.llnivalle.dell.co\fs24 .
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. INGENIERiA E INVESTIGACION _
Tanto la miel como sus productos microminerales indispensables para el desarrollo
fermentados han sido utilizados par el hombre de la levadura. Por 10 tanto, se recomienda,
desde la antigtiedad. Se dispone de documentos adernas de la salnitrogenada, la adi ion de ouas
escritos de comienzos del siglo XV en los que se sales que aporten minerales esenciales (6).
reconoce que la miel de abejas, cuando se diluye
con agua y se Ie adicionan ciertas sales, sufre Como el pH es un factor determinante en la
ferrnentacion alcoholica y posteriormente acetica velocidad de ferrnentacion, e ha podido
(2). La calidad de los productos dela establecer que valores entre 3,7 y 4,6 son ideales
fermentacion de la miel, en el pasado, fue para este proceso. La utilizacion de sistemas
cuestionada pues en el proceso, a pesar del sabor reguladores como el acido cftrico- citrate d sodio
dulce, se presentaban sabores desagradables pueden regular el pH en esre intervale (2).
debido al tiempo prolongado de fermentacion (6).
EI control de los factores que influyen en la EI origen botanico de la miel de abeja
cali dad del producto final ha sido el principal influye apreciablernente en la ferrnentacion que
objetivo de los ultimos estudios. Trabajos esta pueda sufrir. Ciertas mieles, especial mente
realizados por diferentes investigadores han las procedentes de Trifoli um (nombre cientffico
permitido establecer que la levadura cormin
Saccharomyces cerevisiae se comporta muy bien
en la fermentacion alcoholica de soluciones
diluidas de miel de abeja (2). La miel es diluida Tanto la miel como sus productos
con agua de manera que la concentracion inicial
de azucares reductores sea adecuada para el
fermentados han sido utilizados por el
desarrollo de los microorganismos. Como la miel hombre desde la antigiiedad. Se dispone
general mente contiene un 65% en peso de
azucares reductores 0 mas, la dilucion debe
de documentos escritos de comienzos del
efectuarse hasta alcanzar 12 a 30% de estos siglo XV en los que se reconoce que la
carbohidratos. A partir de estas soluciones se ha
logrado obtener bebidas alcoholicas con un miel de abejas, cuando se diluye con
contenido de 10 a 16% de etanol (6). Una agua y se Ie adicionan ciertas sales, sufre
concentracion inicial de inoculo de I % en
volumen produce una fermentacion inicial mas fermentacion alcoholica y
rapida que una del 0,4%; sin embargo, la
posteriormente acetica.
ferrnentacion con un inoculo mas pequeiio
generalmente ha coincidido con la de un inoculo
mas grande al cabo de diez 0 doce dfas. A baja
temperatura del orden de 13Q C, produce una del Trebol) han rnostrado mucha dificultad lara
fermentacion mas rapida que con el 1%(6). fermentar y requieren por 10 tanto la adicion,
adem as de rninerales, de ciertas vitaminas
Varios investigadores, entre ellos Arias y (tiamina, piridoxina y biotina) (2).
Quicazan (2), han coincidido en afirmar que es
esencialla adicion de una Fuente nitrogenada a la La temperatura y la agita ion en el proceso
miel diluida para estimular la ferrnentacion. Se ha son factores que influyen apreciablemente en la
recomendado la adicion de fosfato diarnonico a un velocidad de ferrnentacion y en las caracterfsricas
nivel de 250 rng/l; esta sal mejora la velocidad de del producto final (2). En general, e recomienda
ferrnentacion de la rniel, permaneciendo las la agitacion pues esta rnantiene las celulas en
caracrerfsticas organolepticas originales de la miel suspension y faci Iita el contacto con los azucares
(2). Tambien se ha podido comprobar que las reductores. Se ha concluido que ernpleando
mieles con un contenido superior de minerales levaduras seleccionadas, adicion de nutriente ,
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_ ·~INGENIERIA E INVESTlGACION _
AgitadorCole- Parmer 4370-00 de 1/25 hp,
DISENO EXPERIMENTAL
ver catalogo Cole-Parmer 1995 - 1996 Pag.
717
Con el fin de evaluar los efecios de los
para metros del proceso fermentative propucsto
Refractornetro Abbe
(concentracion de sustraro e inoculo (grarnos d
peso seen por litro), agitacion y adicion de
Para el desarrollo de la ultima fermentacion
nutrientes) sc Ilevaron a cabo nueve
se utilize como sustrato miel de abejas clara, la
ferrnentaciones con un volurnen de sistema de 10
caracterizacion de esta miel se presenta en la tabla
litros y en operacion discontinua; las cuairo
2. La concentracion de sustrato se cuantifico
pri meras se disefiaron para establecer la
como azucar reductor total, determinado por el
eonveniencia de la agiracion y la adicion de
rnetodo de Lane y Eynon (5). La biomasa se
nutrientes sobre la cinetica Ierrnentativa. Basados
determine utiJizando el rnetodo de peso seco
en los resultados cineticos de esta etapa se paso
recomendado por Pirt (12) Y la concentracion de
a evaluar el efecro de la conccntracion de inoculo
etanol en el medio fermentativo se determine
utilizando el metodo refractometrico recomendado
por la A.O.A.C (\fsI8 Association of Official
Analytical Chemists) (16),
2 7,980 215,05 sl sl a
3 9,200 243,10 no no a
4 9,460 215,05 no SI a
B 5 20,857 235,02 no SI a
6 4,590 235,29 no sl a
C 7 22,190 344,83 no sl a
8 19,952 113,00 no sl a
----------------=-~------:-::-:-------------
fNGENIERIA E fNVESTIGACI0N
II
TABLA 4. Evaluacion del comportamiento del proceso [ermentativo
1 2 3 4 5 6 7 8 9
YP/s 0,3929 0,3788 0,4094 0,3948 0,3980 0,3584 0,3710 0,4857 0,39
Yx/s 0,05 0,057 0,044 0,0912 0,0474 0,0216 0,0345 0,1055 0,0462
%S 8,9 6,6 8,3 9,2 6,1 10 36 16,1 9,3
DID 76,89 74,13 80,12 77,27 72,09 61,15 72,59 95,04 76,33
P 1,252 1,585 1,534 2,338 2,665 1,425 2,906 9,206 4,211
A SI si no no no no no no no
N no SI no SI SI si SI si sl
T a a a a a a a a b
Xo (giL) 6,98 7,98 9,2 9,46 20,857 4,59 22,19 19,952 19,929
So (giL) 227,27 215,05 243,10 215,05 235,29 235,29 344,83 113 238,1
Pf 11,13 10,35 12,62 10,33 10,84 10,18 10,84 5,9 11,16
Tiemp 65 48 59,5 33 30,5 52,5 28 5 20
(horas)
%: porcentaje de rendimiento de etanol con respecto al valor te6rico, P: productividad de etanol en g/lh, A: agitaci6n,
N: nutrientes, T: tipo de miel, Pf: concentraci6n de etanol final en % vlv, a: miel oscura, b: miel clara,
% S: porcentaje de sustrato no fermentado.
mediante dos ferrnentaciones. Los siguientes dos abejas, se tomo como base para la cornposicion
ensayos se realizaron con el fin de evaluar la del medio de cultivo la recomendada por Morse y
concentracion de sustrato sobre la cinetica del Steinkrauss citados por Arias y Quicazan (2).
proceso. Estas ocho primeras fermentaciones se
reaJizaron utilizando como sustrato miel oscura.
RESULTADOS Y DISCUSION
POl'ultimo, se efectuo una ferrnentacion con rniel
clara como sustrato con las condiciones cineticas
Los resultados experimentales de
mas favorables establecidas en fermentaciones
concentracion de sustrato, producto y biomasa
anteriores, con el objetivo de evaluar la influencia
para la mejor ferrnentacion en cada etapa del
de la miel en el proceso de fermentacion alcoholica
en 10que respecta a Ia Fuente floral. En la tabla 3 disefio experimental, se rnuestran en los graficos
se muestra el disefio experimental (4). 1 a4.
1I__ IN_G_E_N_TE_Rl_'A_E_I_N_V_E_S_T_IG_A_C_I_O_N _
Algo importante que
se observe de la
cinetica
fermentativa,
Al evaluar la disminuyendo el tiernpo d·
influencia de la
fueron los altos Ierrnentacion en 10,5 h ras,
concentracion inicial de porcentajes de resultado este que incide . n
biomasa a inocula se nota duplicar la productividad
que un aumento en la azucares no can respecto a la quinta
concentracion de esta fermentados (este fermentacion. Los
favorece el proceso rendirniento de etanol y
notandose un aumento de la fenomeno se biomasa son muy imilares.
productividad, disrninucion
del tiempo de ferrnentacion
experimento al no De los valores de
y mejora de los parametres vercambios concentracion final de
cineticos, etanol, e nato qu estan
representativos de dentro del intervalo de 10,33
- 12,62 % vlv. Un
En cuanto al aumento consumo de sustrato cornportarniento diferente al
en la concentracion de
sustrato para la septirna en el tiempo de anterior se observe en la
octava ferrnentacion, como
ferrnentacion, se observa en desarrollo de la se expl ico anteriormente,
la tabla 4 que dio lugar a un
mayor valor de fermentacion) Estos valore de
concentracion de etanol
productividad que la quinta
estan dentro del intervale
deb ida a su menor tiempo
normal obtenido en una
de fermentacion (2.5 horas
fabrica de bebidas alcoholica .
menos). Al evaluar una disrninucion en la
concentracion inicial de sustrato se observe como
Alga irnportante que se observe de la
la acta va ferrnentacion presento una mejor
cinetica ferrnentativa, fueron 10. altos porcentajes
productividad fundamentada en el alto valor de
de azucares no ferrnentados (este fenorneno e
rendirniento (95% del valor teorico), explicado can
experirnento alno vel' cambios repre: entativ . de
base en la baja concentracion de sustrato inicial
con urno de sustrato en el tiernpo de desarrollo de
que garantiza la no presencia de inhibicion por
la fermentacion), debido tal vez a la perdida de
sustrato y producto. Adernas, el tiempo de
capacidad rnetabolica de la levadura al estar
ferrnentacion fue muy bajo (5 horas) para efectos presente en un rnedio con una alta concentracion
de produccion de una bebida alcoholica, el de etanol que afecta el metaboli mo del sustrato,
proceso fermentativo octavo no se torno como el ya que se descarta la hipotesi de que estos
mas adecuado; no obstante presentar la mayor aziicares ean no fermentables, pue en la
productividad global de las fermentaciones antes caracterizacion del sustrato no se detecto la
analizadas ya que no se debe perder de vista que presencia de tales azucares. De la Tabla 4 se
nuestro objetivo era obtener una bebida observa como el valor del porcentaje de azucares
aJcoholica de aceptacion general, y deb ida a que no fermentado e muy similar para todas las
presento una concentracion tan baja de etanol, no fermenla iones, excepto para las Seplima y
cumpliarfa can las exjgencias del consumjdor. De octava. Laju tificacion de lal efecto para la
10 anterior se concluye que las condiciones de septima fermentacion radica en la alta
operacion de la quinta fermentacion son las mas concentracion de sustrato, que dada la cinetica de
adecuadas can miras a satisfacer los objetivos la fermentacion aJcoholica, e imposible que se
planteados. metabolice totalmente, debido a que el proceso
termina aJ aIcanzarse una concentracion de elanol
Ya en la etapa final, se evaluo el efecto de la que inhjbe totalmente el metabolismo, aun en
miel clara sabre el desarrollo cinetico fermentativo presencia de sustrato di ponible en el medio. EI
en contraposicion can la quinta fermentacion. Se componamiento de la septima fermentacion puede
observo como la cinetica del proceso de ser utilizado bajo la perspectiva de elaboracion de
fermentacion can rillel clara se via favorecida una bebida alcoholica dulce.
11-:
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INGENIERIA E INVESTIGACION _
Contrario a 10 expresado por Crane Eva, La adicion de nutrientes mejoro I d sarrollo
citada por Arias y Quicazan (2), en 10 que respecta cinetico del proceso en forma ostensible, pucs
ala mejor calidad de la miel oscura como sustrato disrninuyo el tiernpo del proceso.
en la ferrnentacion de mieles, aumentando la
velocidad fermentativa del proceso, los resultados Un incremento en la concentraci6n ini ial de
obtenidos al comparar el seguimiento del proceso levadura se tradujo en un increm nto de
fermentativo quinto con el noveno, cuya productividad del proceso y pOI' ende en iicmpos
diferencia en las condiciones de proceso es el tipo ferrnentati VQS mas COllOS.
de miel utilizada (oscura y clara, respectivarnente),
muestra como el proceso se ve favorecido al Las cineticas fermentativas preseruaron
utilizar como sustrato miel clara. Esto puede inhibici6n por sustraro, excepto la octava
explicarse par el hecho de que la cornposicion de fennentaei6n, manifestandose este hecho en
minerales en la miel oscura utilizada pueda tiempos de fennentaei6n largos.
encontrarse en algun valor superior al minimo en
el cual se presenta un efecto retardante sobre la Para el intervale de cone ntraciones de
cinetica del proceso. sustrato inhibitorias, tal efecto no se incremento
sustancialmente al aumentar la concentraci6n
Los rendimientos de etanol en las diferentes inicial de sustrato,
fermentaciones oscilan entre 69,15 y 80, 12% del
valor teorico (0,511) predicho por la ecuacion de
Las concentraciones finales de etanol en
Gay Lussac para la forrnacion de etanol a partir de
todas las fermentaciones se encontraron en el
glucosa. Se observe como el desarrollo de tal
intervalo de coneentraci6n obtenido en las
fermentaciones esta acorde con losvalores de
fabricas de bebidas alcoh6licas.
rendimiento experimentales reportados en la
literatura, donde estes oscilan entre 80 y 90% del
Las fermentaciones presernaron una
valor teorico (7), con el precedente, que la cepa
concentraci6n rernanente de sustrato debido a la
utilizada en este trabajo no es la mas especializada
perdida de viabilidad celular, relacionada con el
para la produccion de etanol. La leve diferencia
efecto inhibitorio par etanol cuando este alcanza
entre los val ores encontrados con respecto a los
altas concentracioncs. Los rendimientos de
citados en la bibliograffa, puede ser deb ida a la
sustrato para biornasa fueron bajos, tfpicos del
formacion de productos secundarios y a posibles
proceso fermentative de produccion de alcohol.
perdidas de etanol por evaporacion. En la
La rniel clara present6 mejores caracterfsticas
fermentacion octava se obtuvo un rendimiento de
fermentativas que la miel oscura.
etanol que casi concuerda con el valor teorico,
expJicado este hecho por la no presencia de
La novena ferrnentacion presento las
efectos inhibitorios tanto de etanol como de
rnejores condiciones de operaci6n para la
sustrato y, por ende, haciendo tender a cero la
obtencion de la bebida alcoh61 ica, se produjo una
energfa de mantenirniento que utiliza la levadura
adecuada concentracion final de etan I y una alta
en condiciones de stress, posibilitando que esta
productividad de este. Como caracterfstica
energfa extra se utilice en la formacion de
organoleptica relacionada al color presento un
producto.
color oro agradabJe a la vista, debid6 a la
naturaleza de la miel utilizada (mjel clara).
CONCLUSIONES
Si deseamo obtener una bebida que
La agitacion presento un efecto adverso
presente un color oro mas acentuado, e debe
sobre la cinetica del proceso fermentati vo, al
utilizar como sustrato miel oscura; para tales
menos para el grade de agitacion utilizado (210
efectos se sejeccionaran las condiciones de
r.p.m), bajo las condiciones de operacion,
operacion de la quinta fermentaci6n, pues son las
particularmente el volumen pequeno de medio
ma adecuadas.
fermentativo.
INGENIERIA E INVESTIGACION
Las dos conclusiones anteriores son Al evaluar los parametres de proceso y
recomendadas para bebidas secas; por el observando las mejores condiciones de operacion,
contrario, si desearnos una bebida alcoholica el desarrollo de este proceso puede ser de facil
dulce sin necesidad de adicionar edulcorantes implementacion por los apicultores con miras a
diferentes al sustrato rnismo, se recomienda diversificar la utilizacion de la miel, pues no se
realizar el proceso con las condiciones de requieren sistemas de agitacion, sino la obtencion
operacion de la septima fermentacion. de levaduras para panificacion, la utilizacion de
nutrientes disponibles en el mercado, adem as del
corto tiempo de ferrnentacion.
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z 200
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.... _Biomasa (giL)
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TIEMPO(h)
INGENlERiA E INVESTIGAC~
BIBLIOGRAFfA
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II'------~
~NTERiA E INVESTIGACION __ --