TINCIÓN AURAMINA RODAMINA

Es una técnica utilizada para ver microorganismos acidorresistentes utilizando microscopía

de fluorescencia. Cuando los compuestos específicos son iluminados con luz de alta energía,
tienden a emitir una luz diferente, una frecuencia más baja como resultado de la exposición.
Esto se denomina fluorescencia. Los microorganismos acidorresistentes emiten una
fluorescencia de color amarillo rojizo con este método. La tinción auramina-rodamina podría
no ser tan específica de microorganismos ácido-resistentes como la tinción de Ziehl-Neelsen
o la tinción de Kinyoun, pero es más asequible y se utiliza a menudo como una herramienta
de detección.
Los ácidos micólicos de las paredes celulares de las micobacterias poseen afinidad para los
fluorocromos auramina y rodamina. Estos colorantes se fijan a las bacterias, que aparecen
de color amarillo o naranja brillante contra un fondo verdoso.
Las muestras que pueden ser funcionales para esta tinción son:
 Esputo
 Lavados bronquiales
 Jugo gástrico
 Orina
 Líquidos estériles

NARANJA DE ACRIDINA

Es un colorante catiónico selectivo para los ácidos nucleicos y útil para realizar
determinaciones sobre el ciclo celular. Interacciona con el ADN y el ARN por intercalación
dentro de la molécula o por atracción electrostática, respectivamente.
El uso de naranja de acridina sirve para detectar la presencia de bacterias en los hemocultivos
ha sido ampliamente aceptado. De hecho, una gran cantidad de estudios han demostrado
que la tinción de hemocultivos con naranja de acridina es tan sensible como el subcultivo
ciego para la detección inicial de hemocultivos positivos.
El fluorocromo naranja de acridina se une al ácido nucleico ya sea en su forma nativa o
desnaturalizada. En algunas preparaciones de naranja de acridina, el color de la fluorescencia
puede variar, dependiendo del pH y de la concentración. El naranja de acridina ha sido
empleado como colorante vital, que da una fluorescencia verde si el microorganismo está
vivo y roja si está muerto.
También se lo utiliza conjuntamente con el bromuro de etidio para diferenciar
entre células vivas y apoptóticas. El naranja de acridina es además un mutágeno que tiende
a producir mutaciones de desplazamiento del marco de lectura.
FUNDAMENTO:
El pigmento se intercala con el àcido nucleico (nativo y desnaturalizado). Con pH neutro las
bacterias, hongos y material celular se tiñen de naranja rojizo. Con pH ácido las bacterias se
mantienen de color naranja rojizo, pero el material de fondo se tiñe de amarillo verdoso.