I.

INTRODUCCIÓN

Las enterobacterias son abundantes en la naturaleza, en particular en medios

húmedos y, por ser expulsadas por las heces, funcionan como medidores
epidemiológicos de salubridad e higiene poblacional.
La mayoría de las especies pueden aislarse del intestino del hombre, y de otros
animales, de allí su nombre "enterobacteria" (del griego entéron, intestino). Están
muy diseminadas en la naturaleza, las encontramos en el agua, en la tierra, en los
animales, etc.
En el hombre se localizan en las vías aéreas superiores (en pequeña proporción), en la
piel (sobre todo en la región perianal), en la uretra anterior y sobre todo en el
intestino. Desde el estómago al intestino grueso, la concentración va aumentando a lo
largo del tubo digestivo.
En el intestino, representan una fracción importante de la flora aeróbica, componen
cerca del 80% de la flora intestinal, se encuentran en grandes números en el colon
(desde el ciego hasta el recto), donde contribuyen a la degradación de residuos
alimenticios y a la producción de gas intestinal como parte de la fermentación.
II. ENTEROBACTERIAS
Las enterobacterias son el conjunto más grande y heterogéneo de los bacilos gram
negativos de importancia médica. En el hombre es muy común que se encuentren en
los intestinos formando parte de la flora intestinal como bacterias saprofitas, pero en
ciertas oportunidades, los comensales del intestino pueden resultar patogénicos como
oportunistas en infecciones urinarias, pulmonía, septicemia o sobreinfecciones, en
especial en inmunosuprimidos, en el uso de ciertos antibióticos, desnutrición, etc.
Sucumben con relativa facilidad a desinfectantes comunes, incluido el cloro. Dentro de
esta familia se reconocen más de 30 géneros diferentes. Actualmente, varios de ellos
están siendo sometidos a revisión mediante técnicas de Biología Molecular,
estudiando la homología de sus ADN y frecuentemente se crean nuevos géneros con
especies de géneros ya existentes.
A continuación se presentan algunos de los géneros, y dentro de ellos algunas
especies, que con mayor frecuencia se aíslan a partir de muestras clínicas humanas.

Géneros Especies

Shigella S. flexneri, S. sonnei, S. boydii, S. dysenteriae

Salmonella S. enterica, S. bongori
Proteus P. vulgaris, P. mirabilis
III. CARACTERÍSTICAS
Las diferencias entre los nombres de los diversos géneros provienen de propiedades
bioquímicas como la fermentación de los diferentes azúcares, la producción o no de
azufre, la presencia de enzimas metabólicas (β-galactosidasa, desaminasas,
descarboxilasas), etc; estructura antigénica (serotipificación); hibridación y secuencia
del ADN.

 Son bacterias gram negativas, la mayoría bacilos.

 Su tamaño es intermedio va entre 0,4 a 0,6 um x 1-3 um
 Muchos géneros tienen una movilidad perítrica, aunque algunos géneros no
son móviles.
 Las enterobacterias no forman esporas.
 No son exigentes, son de fácil cultivo.
 Crecen en medios simples.

 Todas las especies forman ácido o ácido y gas a partir de glucosa

 Se clasifican en prueba de catalasa como catalasa positivo.

 Se clasifican en prueba como oxidasa negativo (excepto Plesiomonas, que

es oxidasa positivo), es decir, carecen de la enzima citocromo oxidasa.
 Son anaeróbicos facultativos (crecen en aerobiosis y en anaerobiosis).
 Son fermentadores de carbohidratos en condiciones anaeróbicas con o sin la
producción de gas (en especial glucosa y lactosa), y oxidadores de una amplia
gama de substratos en condiciones aeróbicas.
 Son capaces de reducir nitrato en nitrito.
 Algunas producen toxinas y pueden ser encapsuladas.
 Son quimioheterótrofos, y necesitan para su crecimiento compuestos simples
de carbono y nitrógeno, generalmente sólo con D-glucosa, aunque algunas
requieren aminoácidos y vitaminas.
 La temperatura óptima de crecimiento es de entre 22 °C y 37 °C.
 Presentan una estructura antigénica completa.
IV. ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
Las enterobacterias poseen una estructura antigénica muy compleja. Mencionaremos
los más importantes:
ANTÍGENO O U SOMÁTICO (TERMOESTABLES)
Se encuentran en la pared de la bacteria. Éstos son en su mayoría polisacáridos o bien
proteínas. En cada célula bacteriana existen varios determinantes antigénicos que
hacen que su pared sea un verdadero mozaico.
ANTÍGENO K O CAPSULAR (TERMOLÁBILES)
Que está presente sólo en algunas bacterias capsuladas como Klebsiella pneumoniae y
Escherichia coli. Generalmente formados por polisacáridos
ANTÍGENO Vi
Es un polisacárido que rodea a la bacteria sin llegar a ser una cápsula y es característico
de algunas especies de Salmonella Typhi.
ANTÍGENO H (FLAGELAR)
Se encuentran en los flagelos de las bacterias que poseen estos organelos. Son de
naturaleza proteica.
ANTÍGENO F
Fimbrial: presente en las fimbrias. Son de naturaleza proteica
 V. PATOGENICIDAD
La presencia de enterobacterias dentro del organismo es normal, pero puede
determinar la aparición de infecciones, cuya gravedad depende principalmente de la
capacidad patológica o de la virulencia de la especie en cuestión y de las características
del hospedador. Introducidas por los alimentos, provocan problemas intestinales al
adherirse y atravesar la barrera de la mucosa gastrointestinal, manifestada por
diarreas y deshidratación.
Factores determinantes de Patogenicidad:
La cápsula es antifagocítica y le da una sobrevida a la bacteria.
Las fimbrias permiten la adherencia a la célula huésped e impiden el barrido
por las barreras mecánicas de defensa del organismo
Endotoxina: Como el lípido A, que son macromoléculas complejas que
contienen fosfolípidos y lipopolisacáridpos (LPS). Son constituyentes de la
pared bacteriana y sólo se liberan cuando la célula muere y se lisa. Su
toxicidad reside en la fracción del lípido A del LPS y su especificidad
antigénica se localiza en la fracción polisacárida. En la enterobacterias el
lípido A siempre es el mismo y el polisacárido es el variable, y da lugar a
centenares de antígenos O que aparecen en las distintas cepas. Los efectos
farmacológicos de las endotoxinas incluyen: fiebre, leucopenia seguida de
leucocitosis, activación del complemento, trombocitopenia, coagulación
intravascular diseminada, disminución de la circulación periférica y la
perfusión de órganos importantes, choque endotóxico y muerte.
Bacteriocinas: sustancias bactericidas contra cepas de la misma especie,
pero no contra sí mismas; las principales son colicina y Marcelina.
Localización celular: protege a la bacteria de los antibióticos y del sistema
inmuneal estar localizada dentro de una célula huésped, bacterias
enteroinvasivas.
Ciertas especies provocan patologías específicas
La especie Salmonella typhi es responsable de la fiebre tifoidea.
La especie Shigella dysenteriae es el agente responsable de la disentería
bacilar.
TIPOS DE PATOGENICIDAD POR TRANSMISION ALIMENTARIA:

INFECCIÓN ALIMENTARIA INTOXICACIÓN ALIMENTARIA

Es la enfermedad ocasionada por la ingestión
de alimentos o agua contaminados por
microorganismos vivos (llámalos microbios,
gérmenes… bichos vivos en definitiva). El
microbio o agente infeccioso puede ser una
bacteria como la Salmonella, un virus como el
rotavirus o un parásito como el Anisakis.
Se produce al ingerir un aliento que contiene
un compuesto tóxico. Esta sustancia tóxica
puede proceder de productos de limpieza,
fitosanitarios, medicamentos veterinarios,
contaminaciones ambientales, o
ser sintetizado en el alimento por una
bacteria o un hongo (toxinas bacterianas y
micotoxinas).

INFECCION
Las Enterobacterias (EB) tienen gran importancia en el ámbito hospitalario donde
pueden causar infecciones respiratorias, urinarias, de heridas y del SNC. Los individuos
hospitalizados (a los que se considera como “inmunodeprimidos”) pueden colonizar su
orofaringe con EB (a diferencia de los individuos “inmunocompetentes”).
Recordar que las EB pueden estar presentes en forma temporaria en la piel por lo que
no sólo el enfermo, sino que el personal de salud puede ser fuente y reservorio de EB.
Un agravante es que las bacterias (EB y otras) del ámbito hospitalario son, con mucha
frecuencia, resistentes y multiresistentes a los antibióticos.
Las infecciones causadas por las enterobacterias pueden ocurrir a partir de un
reservorip animal, un portador humano, o por la diseminación endógena de los
microorganismos en un paciente susceptible.
En los últimos años un porcentaje cada vez mayor de estas bacterias, especialmente
Klebsiellaspp. y Enterobacterspp. se han hecho resistentes incluso a las cefalosporinas
de tercera generación debido al desarrollo de Betalactamasas de Espectro Ampliado
además del desarrollo de resistencia a quinolonas es cada vez más preocupante y está
relacionado con el consumo indiscriminado de estos antibióticos en el ámbito
extrahospitalario.
El tratamiento empírico de la bacteriemia por bacilos gram negativos dependerá de
múltiples factores. En sentido general, las cefalosporinas son antibióticos bactericidas
frente a las Enterobacterias. Los carbapenemicos son las drogas preferidas para el
tratamiento de este tipo de infecciones, al igual que los losmonobactámicos son muy
activos frente a las enterobacterias y se utilizan en general para el tratamiento de
infecciones hospitalarias graves.
Torrente sanguíneo:
La infección de las heridas quirúrgicas con EB se asocian a falta de asepsia durante
(más rara) o luego de la intervención.
Sepcis: gram negativa, Salmonella typhi
Una infección bacteriana en cualquier lugar del cuerpo.
Tracto digestivo:
Gastroenteritis: Escherichia coli, Salmonela, Estafilococo.
Puede ocurrir mediante el consumo de alimentos preparados inadecuadamente o de
agua contaminada.
Tracto urinario:
Las infecciones urinarias intrahospitalarias se asocian con el uso de sondas vesicales.
Éstas sirven como vía de entrada de las EB (y otros patógenos) que colonizan la zona
perineal y perianal.
Cistitis: Escherichia coli
Las infecciones de las vías urinarias más habituales son las producidas por bacterias,
aunque también pueden presentarse a causa de virus, hongos o parasitos.
INTOXICACIÓN
La mayor parte de las bacterias gramnegativas poseen lipopolisacáridos complejos en
sus paredes celulares. Tales sustancias, endotoxinas de la envoltura de la célula
(membrana citoplásmica, peptidoglucano, membrana externa) tienen diversos efectos
fIsiopatológicos. Muchas bacterias entéricas gramnegativas también producen
exotoxinas de importancia clínica.
VI. PREVENCIÓN
En el hogar Debido a que muchas de las infecciones causadas por Salmonella, ocurre en el
hogar por consumo de huevos y carne cruda o poco cocinado, es necesario seguir unas buenas
prácticas de higiene y manipulación en la preparación y cocinado de los alimentos para
prevenir su contaminación por Salmonella:

• Limpieza de las manos antes de manipular cualquier alimento.

• Desinfección de los utensilios, tablas, superficies.

• Cocinar bien los huevos y las carnes (por encima de 70ºC), y los productos elaborados con
ellos.

• No lavar los huevos antes de meterlos en el frigorífico.

• Mantener los alimentos elaborados con huevo crudo como la mayonesa, salsas, helados,
cremas, masas de pastelería a temperaturas seguras (calientes por encima de 60ºC o
refrigerados en la nevera) hasta su consumo. Tras su consumo, refrigerar los excedentes
inmediatamente y consumirlos antes de 24 horas.

• Mantener la cadena de frío durante el transporte de los alimentos crudos susceptibles de ser
contaminados con Salmonella.

• No descongelar los alimentos a temperatura ambiente, sino en la parte baja del frigorífico.

• Evitar la contaminación cruzada de alimentos crudos con cocinados.

• Lavar bien las frutas y hortalizas con agua corriente cuando vayan a ser consumidos en crudo
VII. ALIMENTOS IMPLICADOS
Salmonella:
El producto más implicado en este problema es la salsa tipo mayonesa elaborada con
huevo fresco. El huevo puede llevar Salmonella en su cáscara, ya que las gallinas, al
igual que otros animales o incluso las personas, son portadoras. Si la cáscara está
contaminada, la bacteria puede pasar al producto tras cascar el huevo y contaminar los
productos que se elaboren con él.

Shigella:
Además del agua, se la relaciona con alimentos con elevada tasa de humedad, como la
leche, las verduras como judías verdes o papas, aunque se han visto también
implicados en sus brotes atún, gambas, pavo y salsas preparadas.

Proteus:
Se encuentran en agua y leche.

VIII. DIGNÓSTICO EN LABORATORIO

Dentro de las pruebas más utilizadas para la identificación de estas bacterias están:
Realización de pruebas bioquímicas, que mediante un sustrato presente en el medio y
una enzima de la bacteria nos presentan una reacción visible. Dentro de estas son la
producción de indol, descarboxilación de lisina y ornitina, etc.
La identificación serológica es útil para subtipificar cepas de E. coli, Salmonella y
Shigella, en algunos casos para determinar la especie y el serotipo y en otros para
estudios epidemiológicos. Las muestras que se pueden usar pueden ser: heces, orina,
esputo, sangre, pus.

MEDIOS DE CULTIVO
MEDIOS DIFERENCIADORES
Son aquellos que permiten el crecimiento de enteropatógenos y saprobios, pero las
colonias de unos y de otros se distinguen por la diferente coloración que producen.
Estos medios de cultivo se preparan con lactosa, sales biliares, y un indicador que haga
manifiesto la hidrólisis de este azúcar. Los indicadores que más se utilizan son: la
eosina, el azul de metileno, el rojo neutro, el verde brillante, el rojo fenol, cristal
violeta o púrpura de bromocresol. Además de esos ingredientes los medios contienen
nutrientes para el crecimiento bacteriano. Se sabe que en general los enteropatógenos
no fermentan la lactosa, y por lo tanto, no habrá viraje de color del medio. En tanto los
enterosaprobios si fermentan la lactosa, producen ácido y se observa viraje de color
con un tinte más oscuro, De esta manera se seleccionan las colonias más claras para
investigar los enteropatógenos.
El que las enteropatógenas no fermentan la lactosa no quiere decir que todas las
bacterias que no fermenten la lactosa serán patógenas, es solo una coincidencia que
no se debe generalizar a tosdas las demás bacterias. Además existen enteropatógena
que si fermentan la lactosa y enterosaprobias que no.
Como ejemplos de estos medios tenemos: Medio de agar eosina y azul de
metileno(EMB), medio agar MacConkey y medio de agar desoxicolato; también se
encuentran el medio TSI, medio LIA, medio MIO, para diferenciar dos o más pruebas
en un mismo tubo.
MEDIOS SELECTIVOS
Son los que inhiben el crecimiento de los enterosabrobios y favorece el desarrollo de
los enteropatógenas debido al alto contenido de sales biliares. Sin embargo, en
ocasiones encontraremos enterosaprobios resistentes a las altas concentraciones de
sales biliares.
Como ejemplos tenemos: agar Salmonella- Shigella, agar citrato de SIMMONS, agar
xilosa – lisinia – desoxicolato(XLD).
MEDIOS ENRIQUECIDOS
Como su nombre lo indica, son aquellos que contienen mayor variedad de nutrientes
para favorecer el desarrollo de cepas difíciles. Estas cepas generlamente se han
adaptado a vivir sobre organismos superiores, como parásitas, y se les dificulta su
crecimiento en medios in vitro.
Como ejemplos de los medios tenemos: agar tetrationato de Muller, agar verde
brillante y rojo fenol, agar selenita.

Funciones de los componentes básicos de los medios de cultivos:

·Sustrato: Reacciona con la enzima específica y da origen a productos terminales que
pueden ser ácidos o alcalinos.
·Indicador de PH: Detecta productos terminales de la utilización del sustrato. Son
colorantes añadidos para indicar los cambios que hay en el medio durante el
crecimiento de los microorganismos. Estos indicadores son sensibles a los cambios de
PH, por lo tanto, los virajes de color de los mismos indican de manera indirecta la
presencia de productos terminales del empleo e sustrato.
·Nutrientes: La mayoría de las bacterias no crecerán solo con la presencia del sustrato
básico, por lo que se requiere agregar diversos nutrientes que varían, dependiendo de
los requerimientos de cada bacteria.
·Inhibidores: Son utilizados más en medios selectivos iniciales, pero hay que tener en
cuenta que no todos los microorganismos deseados serán inhibidos y no todos los
deseados crecerán.
PRUEBAS BIOQUÍMICAS
METABOLISMO FERMENTATIVO
as pruebas más utilizadas para identificación de enterobacterias son: la producción de
indol, utilización del citrato de sodio como única fuente de carbono, lisina
descarboxilasa, ornitina descarboxilasa; además, la prueba de movilidad, hidrólisis de
la gelatina y fermentación de los siguientes azúcares: glucosa, lactosa, sacarosa,
manitol, dulcitol, adonitol, sorbitol, arabinosa, rafinosa, ramosa, xilosa y melobiosa.
En general estas pruebas se incuban por 24 hrs. pero es preferible dejarlas por 48 hrs.
ya que algunos, metabolitos no se producen en suficiente concentración para
detectarlos en un día.
Deberemos ubicar los antígenos de la superficie con antisueros específicos – ésta es la
prueba de certeza en la identificación de la especie.
Mide la capacidad del microorganismo para utilizar los hidratos de carbono, actúa
sobre los carbohidratos y acidifica el medio, el indicador presente vira.
PRUEBA DE FERMENTACIÓN DE AZÚCARES EN MEDIO TSI
Contiene lactosa 10g, galactosa 10 g y glucosa 1 g.
Superficie inclinada/fondo
 Ácida/ácida: bacterias fermentadoras
de lactosa: E. Coli
 Alcalina/ácida: bacterias no
fermentadoras de lactosa: Salmonella
(H2S+), Shigella (H2S-)
CITRATO DE SIMMONS
Mide la capacidad de un organismo para utilizar el
citrato como única fuente de carbono, el citrato es
un compuesto que constituye uno de los
metabolitos del ciclo de Krebs, las bacterias al usar
citrato extraen el nitrógeno de la sal de amonio
con producción de amoniaco que hace vire el
indicador.
Se usa el agar Citrato Simmons que contiene
citrato de sodio y azul de timol como indicador. La
fuente de carbono en este medio es el citrato, si la
reacción es positiva el indicador vira, si fuera una reacción negativa los
microorganismos no crecen y el medio conserva su color verde.
El medio también contiene sales de amonio que la bacteria usa como fuente de
nitrógeno (fosfato de amonio  amoniaco, alcalinización del medo)
DESCARBOXILASAS DE AMINOÁCIDOS
Los medios contienen: peptona, extracto de
carne, glucosa, aminoácido, púrpura de
bromocresol.
Medio de LIA
Los aminoácidos al perder el grupo carboxilo se
convierten en aminas lo que incrementa el pH
del medio y el indicador (púrpura bromocresol)
vira a violet. Lisina a través de la lisina
descarboxilasa se convierte en cadaverina.
Medio de MIO
Busca investigar la motilidad, la producción de indol y la
descarboxilaciónde ornitina.
El indol es uno de los productos de degradación metabólica
de aminoácido triptófano, las bacterias que poseen
triptófanasa, la prueba de indol está basada cuando el indol
reacciona con el grupo aldehído del p-
dimetilaminonbenzaldehído y se genera un anillo en la superficie de color rojo
anaranjado. La Proteus reacciona + y la salmonella reacciona -.
El Triptófano a través de la triptofanasa genera el indol más ácido pirúvico mas
amoníaco. El indol generado reacciona con el aldehído de la p-
dimetilaminiobenzaldehido.

COMPOSICIÓN DE ALGUNOS MEDIOS

CITRATO DE SIMMONS:

 Fosfato de amonio  Sulfato de magnesio 0 ,20 g

dihidrogenado 1 g  Agar 15 g
 Fosfato dipotasico 1 g  Azul de bromotimol 0 ,08 g
 Cloruro de sodio 5 g  Agua destilada 1 L
 Citrato de sodio 2 g  pH final = 6,9
AGAR TSI

 Extracto de carne 3,0 g  Sulfato de hierro y amonio 0.2g

 Pluripectona 20.0  Tiosulfatode amonio 0.2g
 Cloruro de sodio 5.0 g  Rojo de fenol 0.025g
 Lactosa 10.0 g  Agar 13.0g
 Sacarosa 10.0g Glucosa 1.0g  pH final 7.3
AGAR MACCONKEY

 Digerido pancreático de  Cloruro de sodio 5,0 g/L

gelatina 17,0 g/L  Agar 13,5 g/L
 Digerido pancreático de  Rojo neutro 30,0 mg/L
caseína 1,5 g/L  Mezcla de sales biliares 1,5
 Digerido péptico de tejido g/L
animal 1,5 g/L  Cristal violeta 1,0 mg/L
 Lactosa 10,0 g/L  pH final 7,1 ± 0,2

IX. GÉNEROS
ENTEROBACTERIAS LACTOSA NEGATIVAS
ENTEROBACTERIAS PATÓGENAS OPORTUNISTAS
Dentro de este grupo encontramos especies que forman parte de la flora normal del
hombre y los animales, están presentes en el suelo, el agua y las plantas. Producen
infección cuando salen de su hábitat o hay alteraciones de las defensas locales. Los
géneros oportunistas que con mayor frecuencia se aíslan de muestras clínicas son
Escherichia, Klebsiella, Serratia, Enterobacter, Citrobacter, Proteus, Morganella,
Providencia, etc.
Estas bacterias producen infecciones extraintestinales como infecciones urinarias,
sepsis, meningitis, abscesos, neumonías, otitis, sinusitis, etc.
PROTEUS
Se caracterizan por ser bacilos gram (—), extraordinariamente móviles (lo que se
demuestra cómo un crecimiento invasor en la superficie de los medios de cultivo
sólidos), son productoras de abundante ácido sulfúrico, transforman el Triptofano en
ácido Indol-Piruvico, poseen una activa ureasa y no poseen B Galactosidasa (por lo cual
no fermentan la lactosa anaerobicamente), se desarrollan en un medio con KCN y en
su estructura antigénica destacan numerosos antígenos O y H. Su hábitat natural es el
intestino del hombre y analizando su patogenicidad se observa que habitualmente son
poco patogenos, pero que pueden originar infecclones en diversas regiones y sistemas
del organismo:
1.—Sistema Urinario: 3.—Sistema nervioso central:
Meningitis
a) Infection Urinaria;
4.— Piel: Contaminación de heridas.
b) Abscesos nefriticos.
5.—Sistema osteo-tendineo:
2.— Sistema Digestive:
Osteomielitis.
a) Enteritis (especialmente en ninos);
6.— Sistema respiratorio: Otitis media.
b) Abscesos hapaiicos. Abscesos peri-amigdalianos. Sinusitis
Las bacterias del género Proteus producen infecciones en el ser humano sólo cuando
las bacterias salen del tubo digestivo. Se encuentran presentes en las infecciones
urinarias y producen bacteriemia, neumonía y lesiones focales en pacientes débiles o
en los que reciben infusiones intravenosas. P. mirabilis produce infecciones de las vías
urinarias y en ocasiones otras infecciones. Proteus vulgaris y Morganella morganii son
microorganismos patógenos de infecciones hospitalarias.
Las bacterias del género Proteus producen ureasa, que resulta en una hidrólisis rápida
de la urea con liberación de amoniaco. Por consiguiente, en las infecciones de las vías
urinarias con Proteus, la orina se vuelve alcalina y favorece la formación de cálculos
imposibilitando prácticamente la acidificación. La motilidad rápida de Proteus puede
contribuir a la invasión del sistema urinario.

CULTIVO Y CARACTERÍSTICAS DEL CRECIMIENT0

Los organismos del grupo Proteus crecen en medios del cultivo simple, donde sus
colonias tienden a extenderse o diseminarse por la superficie (spread). Hidrolizan
rápidamente a la urea.
Las muestras se pueden sembrar en medios de agar nutriente simple o en agar donde
sus colonias tienden a formar spread. En el medio diferencial de McConkey produce
colonias blandas o incoloras, ya que no ataca a la lactosa. En medios semisólidos
muestra movilidad.
1. Proteus mirabilis: bacteria gramnegativa, facultativamente anaeróbico. Muestra
aglutinación, motilidad, y actividad ureasa, no produce indol, pero si sulfhídrico.
2. Proteus vulgaris: bacteria gramnegativa, facultativamente anaeróbico en forma de
bacilo que habita en el tracto intestinal del hombre y varios animales, produce indol y
sulfhídrico.
3. Proteus morgagni: produce indol, pero no sulfhídrico, y no crece en citrato.
4. Proteus rettgeri: produce indol, pero no sulfhídrico, y crece en citrato.

FACTORES DE VIRULENCIA
• Flagelos
• Fimbrias
• Proteínas de membrana
• Ureasa
• Hemolisinas
• No producen toxinas solubles.
ENTEROBACTERIAS PATÓGENAS OBLIGADAS

No forman parte de la flora normal y su presencia en la muestra es indicativa de

infección. En esta categoría se incluyen los géneros Escherichia, Shigella, Salmonella,
Yersinia. Se transmiten de hombre a hombre por la vía ano-mano-boca o se adquieren
a partir de aguas y alimentos contamina-dos. Producen infecciones intestinales
excepto Salmonella que puede producir sepsis, neumonías, etc.

SHIGELLA
Incluye 4 especies pertenecientes a 4 grupos serológicos O:
Grupo A: S. dysenteriae Grupo C: S. boydii
Grupo B: S. flexneri Grupo D: S. sonnei
Shigella es un género bacteriano perteneciente a la familia Enterobacteriaceae,
integrado por bacterias de forma bacilar, no esporuladas, inmóviles, pero animados de
movimiento pendular (oscilación) Son gram negativos, aerobios-anaerobios
facultativos.
Citocromo-oxidasa negativos. Fermentan la glucosa sin producción de gas. No
descarboxilan la lisina. No fermentan la lactosa. No utilizan el citrato como única
fuente de carbono. Su actividad bioquímica es muy reducida.
Los alimentos más afectados a la contaminación por Shigella son las frutas y vegetales
consumidos crudos en ensaladas, sándwiches, etc (lechuga, zanahorias, patatas,
maíz,…). En menor medida, alimentos como leche cruda y sus derivados (quesos) y
pollo se han visto implicados en casos de shigelosis.
La Shigella es una bacteria que causa una enfermedad infecciosa intestinal
denominada shigelosis o disentería. Esta enfermedad puede tratarse; la mayoría de los
pacientes mejora rápidamente. La diarrea intensa puede provocar deshidratación, lo
cual es sumamente peligroso para los pacientes de corta edad, de edad avanzada, o
aquellos que padecen enfermedades crónicas. En casos raros, la bacteria puede
ocasionar trastornos en otras regiones del organismo.
Los síntomas más frecuentes son diarrea, fiebre, náuseas, vómitos, cólicos y esfuerzo
para defecar. La materia fecal (heces) puede contener sangre, moco o pus.
Ocasionalmente, los niños pequeños con la enfermedad pueden padecer convulsiones.
La aparición de los síntomas puede demorarse hasta una semana aunque, por lo
general, tiene lugar dos a cuatro días después de haber ingerido la bacteria. Los
síntomas suelen prolongarse durante unos días, e incluso pueden durar semanas.
MEDIOS DE CULTIVO
Las shigelas son anaerobios facultativos pero se multiplican mejor en condiciones
aeróbicas. Las colonias convexas, circulares, transparentes con bordes intactos
alcanzan un diámetro de casi 2 mm en 24 h.
Todas las shigelas fermentan glucosa. Con excepción de Shigella sonnei ellas no
fermentan lactosa. La imposibilidad para fermentar lactosa distingue a las shigelas en
los medios diferenciadores. Las shigelas forman ácido a partir de hidratos de carbono
pero pocas veces producen gas. También se dividen en las que fermentan manitol y en
las que no lo fermentan.
Los materiales se aplican en estrías de medios diferenciadores (p. ej., agar de
MacConkey o EMB) y en medios selectivos (agar entérico de Hektoen o agar
Salmonella-Shigella), que suprimen otras Enterobacteriaceae y microorganismos
grampositivos. Las colonias incoloras (lactosa-negativas) se inoculan en agar hierro y
glúcidos triples.
ESTRUCTURA ANTIGÉNICA
Tiene un patrón antigénico complejo. Los antígenos O somáticos de las shigelas son
lipopolisacáridos. Existen más de 40 serotipos. La clasificación de las shigelas se basa
en las características bioquímicas y antigénicas.
CÓMO SE PUEDE PREVENIR LA SHIGELOSIS
Los dos puntos más importantes a recordar son que la Shigella puede provocar la
enfermedad sólo si se la ingiere, y que el jabón la mata. Siga estos consejos, y si hace
de ellos un hábito, evitará la shigelosis, además de otras enfermedades.
• Siempre lávese bien las manos con agua y jabón antes de comer o tocar alimentos, y
después de usar el baño o cambiar pañales.
• Si está cuidando a una persona con diarrea, frótese las manos con bastante agua y
jabón luego de limpiar el baño, de ayudar a la persona en el baño, o luego de cambiar
pañales, ropa o sábanas sucias con materia fecal.
• No comparta alimentos, bebidas, cucharas ni bombillas.
• Si su hijo concurre a una guardería y tiene diarrea, avise al personal a cargo para
asegurarse de que otros niños no se contagien.
• No permita que una persona con diarrea use la piscina o nade en estanques mientras
siga enferma. Tome recaudos especiales con los niños pequeños, incluso si usan
pañales.
• Si usted o su hijo tienen diarrea persistente (con fiebre o sin ella), o si la diarrea es
muy abundante, consulte a su médico o concurra a un centro de salud.
SALMONELLA
Estas bacterias son GRAM -, con un tamaño de 0.7 – 1.55 x 2.0 – 5 um. no fermentan la
lactosa, producen sulfuro de hidrógeno a partir de aminoácidos azufrados, la mayoría
de los serotipos son móviles y producen diarrea relaciona con ingestión de alimentos
contaminados con materia fecal, pudiendo dar complicaciones como sepsis,
neumonías, abscesos.
En este género se describen 2 especies: S. bongori y S. entérica. Dentro de la especie S.
entérica están incluidas en 6 subespecies: S. entérica, S. salamae, S. arizonae, S.
houtanae, S. diarizonae, S. indica.
Salmonella entérica subespecie entérica es la única descripta como patógena humana.
Dentro de este género se encuentran más de 2000 serotipos teniendo en cuenta sus
antígenos O, H y Vi.
La serotipificación sirve para identificar las distintas especies. Las más importantes son
S.Typhi, S.Paratyphi y S.Enteritidis, la cual es causante de fiebre Tifoidea, fiebre
Paratifoidea, y Salmonellosis.
Medio de cultivo
Salmonella crece con facilidad en agar sangre formando colonias de 2 a 3 milímetros. En
laboratorios de microbiología clínica se aísla con medios selectivos —Selenito, Hektoen, SS o
XLD— para inhibir el crecimiento de otras bacterias patógenas y de la flora intestinal saprofita.

CONDICIONES MÍNIMO ÓPTIMO MÁXIMO

TEMPERATURA (°C) 5,2 °C 35 – 43 °C 46.62°C
pH 3.8 7 – 7.75 9.75
aw 0.94 0.99 0.99

Sus factores de patogenicidad son:

 Invasividad: Es una bacteria inminentemente enteroinvasora. La Salmonella

atraviesa el epitelio del intestino delgado pasando los tejidos subepiteliales de
la mucosa y submucosa.
 Endotoxina: Fracción tres del lipopolisacárido de la pared celular. Se ha visto
que actúa tanto en la fiebre tifoidea como en los casos de septicemias.
 Enterotoxina: No es constante y sólo se la ve en algunos serotipos.
Tienen los siguientes antígenos:
 Somático O, del lipopolisacárido en la pared celular, termoestable y es la base de la
clasificación en subgrupos.
 Flagelar H, de la proteína flagelina, termolábil, es la base de la clasificación de
especies.
 Envoltura Vi, termolábil, responsable de la virulencia de varias especies patogénicas.
La acción patógena de Salmonella puede dividirse en tres tipos de cuadros clínicos:
Septicemia: principalmente en pacientes hospitalizados o inmunosuprimidos se
producen septicemias graves cuyas lesiones metastásicas son los abscesos,
osteomelitis, meningitis, endocarditis, etc.
Gastroenteritis: Las Salmonellas son invasivas. Se adhieren al eritrocito, inducen la
endocitosis, se multiplican en el interior de la vesícula endocítica y a partir de allí se
diseminan hacia células vecinas. Como consecuencia de su acción se destruye el
epitelio y llegan gran cantidad de polimorfonucleares dando como resultado heces con
moco y pus.
Por ejemplo las serovariedades Typhimurium y Enteritidis causan infección intestinal
en el hombre. Al invadir el epitelio generan una fuerte respuesta inflamatoria en la
submucosa, desestabilizando el epitelio intestinal y causando diarrea, que en
ocasiones puede ser sanguinolenta.
Fiebres entéricas: Salmonella Tiphy, Salmonella Paratiphy A y Salmonella Paratiphy B
producen fiebre entérica. Las Salmonellas se ingieren con el agua y alimentos
contaminados. Desde la boca llegan al intestino delgado, atraviesan la mucosa
intestinal y se alojan en las placas de Peyer y ganglios mesentéricos, multiplicándose
activamente durante unos doce días (que es el período de incubación). De los ganglios
pasan al conducto torácico a través del cual llegan a la sangre. De la sangre pasan al
bazo, médula ósea, hígado y vesícula biliar, desde donde llegan al intestino delgado.
Por ejemplo, la serovariedad Typhi, causa una infección sistémica llamada fiebre
tifoidea. Salmonella invade el epitelio intestinal utilizando el SSTT, para inyectar
proteínas efectoras en el enterocito que entre otros efectos, produce el rearreglo de
los filamentos de actina y genera la endocitosis de la bacteria. Genera muy leve
reacción inflamatoria intestinal y una vez atravesada la barrera del epitelio intestinal
disemina hacia el torrente sanguíneo dentro de fagocitos, causando una infección
sistémica e infectando diferentes órganos (bazo, hígado, hueso, etc).
¿Por qué Salmonella serovariedad Typhi genera escasa reacción inflamatoria?
Salmonella enterica serov. Typhi, a diferencia de las serov Typhimurium o Enteritidis,
produce una cápsula polisacarídica, conocida como antígeno Vi (antígeno de
virulencia) que enmascara el LPS de modo tal que no puede ser reconocido por el
TLR4. De esta forma, en el intestino, Typhi no genera una respuesta inflamatoria (que
permitiría limitar la infección a la submucosa) y escapa a circulación dentro de
fagocitos causando infección sistémica.
 X. GLOSARIO
ANAEROBIOS FACULTATIVOS: Bacterias que pueden desarrollarse tanto en presencia como en
ausencia de oxígeno.

SEROLOGÍA: Prueba realizada en la sangre para comprobar la presencia de microorganismos

patógenos, la existencia de alguna enfermedad infecciosa, realizada fundamentalmente antes
de realizar transfusiones de sangre.

SEROTIPO: Un serotipo o serovar es un tipo de microorganismo infeccioso clasificado según los

antígenos que presentan en su superficie celular.

SEROGRUPO: Un serogrupo es un grupo serológicamente identificado por medio de un

antisuero específico, de microorganismos de la misma especie o por los menos del mismo
género, que tengan un patrón antigénico común específico del grupo.

ANTISUERO: Antisuero o antiofídico es un producto biológico utilizado en el tratamiento de

picaduras o mordeduras venenosas.

QUIMIOHETERÓTROFO: aquel individuo que tiene como fuente de energía las reacciones y
como fuente de C, la materia orgánica.

VIRULENCIA: Es una medida o el grado de la capacidad patógena de un organismo. La

virulencia de un microorganismo depende fundamentalmente de tres factores de su
toxigenicidad, de su capacidad invasora y de colonizar.

PATOGENICIDAD: Capacidad que posee un agente infeccioso para generar enfermedad en un

hospedador susceptible.

COLONIZAR: La capacidad que tenga el microorganismo para invadir, proliferar y extenderse

por los tejidos de su hospedador.

TOXIGENICIDAD: Capacidad de producir compuestos que ocasionan daños en el hospedador y

que reciben el nombre de toxinas.

INFECCIÓN: La acción de invasión y multiplicación de agentes patógenos en los tejidos de un

organismo y enfermedad causada por esta invasión de agentes patógenos.

CITOCROMO OXIDASA: Se trata de la última enzima de la cadena de transporte de electrones,

recibiendo un electrón de cada uno de las cuatro moléculas de citocromo c; después, los
transfiere a una molécula de oxígeno, reduciéndola a dos moléculas de agua.

SEPTICEMIA: Invasión aguda del torrente circulatorio por gérmenes o por sus productos
tóxicos, originada a partir de un foco en el que los gérmenes se encuentran acantonados, y
que se manifiesta por fiebre, escalofríos, estupor, y, a veces, aparición de signos inflamatorios.
Es un proceso grave.

ANTÍGENO: Molécula ajena o tóxica para el organismo.

LAS INFECCIONES OPORTUNISTAS (IO): Son infecciones que ocurren con más frecuencia o son
más graves en personas con debilidad del sistema inmunitario en comparación con quienes
tienen un sistema inmunitario sano. El primer grupo de personas incluye a las que tienen el
VIH o reciben quimioterapia.
QUIMIOSÍNTESIS. Producción de alimento utilizando la energía contenida en moléculas
inorgánicas.

GALACTOCIDASA.- es una enzima que hidroliza la lactosa en sus monomeros glucosa y

galactosa, al escindir el enlace b 1-4 del azucar. Se conoce que la leche, por su alto contenido
en lactosa, no puede ser asimilada por cierto grupo de personas, pues les ocasiona trastornos
digestivos a causa de que no sintetizan beta-galactosidasa.

PLEOMÓRFICO: Que tiene la capacidad de adquirir distintas formas.

INFECCIÓN NOSOCOMIAL: También llamadas “infecciones hospitalarias” Estas infecciones

hospitalarias son normales y frecuentes en hospitales de todo el mundo debido al
propio ambiente hospitalario en donde todo tipo de microorganismos se
introducen, no solo con los pacientes, también con las visitas, y encuentran un
medio favorable para su desarrollo.

SÍNDROME URÉMICO HEMOLÍTICO: Es una enfermedad que se caracteriza por insuficiencia

renal, anemia hemolítica, trombocitopenia y defectos de la coagulación. Es la consecuencia de
toxinas bacterianas que producen lesiones en los pequeños vasos sanguíneos que afecta
fundamentalmente al riñón, pero también puede afectar al sistema nervioso central y al
aparato gastrointestinal.

XI. BIBLIOGRAFÍA
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http://apuntesytrabajosdemicrobiologia.blogspot.pe/2014/08/caracteristicas-
generales-de-las.html
FACTORES DE VIRULENCIA
Medios de cultivo orientados a enterobacterias:
MEDIO XLD

es un medio moderadamente selectivo y de diferenciación para el aislamiento y la

diferenciación de patógenos entéricos gram negativos (Salmonella y Shigella) a partir de
muestras clínicas. Es adecuado en especial para el aislamiento de la especie Shigella.

XLD Agar es un medio selectivo y de diferenciación. Contiene extracto de levadura como

fuente de nutrientes y vitaminas. Utiliza el desoxicolato de sodio como agente selectivo y, por
consiguiente, inhibe los microorganismos gram positivos. La xilosa se incorpora en el medio
dado que la fermentan prácticamente todos los entéricos, excepto Shigella, y esta propiedad
hace posible la diferenciación de dicha especie.

La lisina se incluye para permitir la diferenciación del grupo Salmonella de los organismos no
patógenos, dado que, sin lisina, Salmonella fermentaría rápidamente la xilosa y no se
distinguiría de las especies no patógenas. Cuando la Salmonella agota el suministro de xilosa,
la lisina es atacada por la enzima lisina descarboxilasa, lo que genera un cambio a un pH
alcalino que imita la reacción de Shigella. Para evitar el cambio similar en los organismos
coliformes positivos a la lisina, se añaden lactosa y sacarosa para producir ácido en exceso.
Para aumentar la capacidad de diferenciación de la fórmula, se incluye un sistema indicador
de H2S, formado por tiosulfato sódico y citrato férrico amónico, para la visualización del ácido
sulfhídrico producido, lo que origina la formación de colonias con centros de color negro. Los
organismos no patógenos no productores de H2S no descarboxilan la lisina; por tanto, la
reacción ácida producida por dichos organismos evita el oscurecimiento de las colonias, lo que
sucede sólo con pH alcalino o neutro.
AGAR SULFITO DE BISMUTO

Modo de acción
El Verde brillante y el bismuto-sulfito inhiben considerablemente los gérmenes de acompañamiento.
El sulfato de hierro (III) es un indicador del sulfuro de hidrógeno que producen las colonias de
Salmonella H2S-positivas. Habitualmente, esta reacción produce una precipitación marrón o negra
en el medio de cultivo así como colonias de color negro o verde con brillo metálico.

MEDIO EMB
Este medio combina las fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor
rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram
negativos. La diferenciación entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos
que son incapaces de hacerlo, está dada por los indicadores eosina y azul de metileno; éstos
ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de Escherichia
coli y Citrobacter spp. presentan un característico brillo metálico. Las cepas que utilizan la lactosa
poseen centro oscuro con periferia azulada o rosada, mientras que las que no lo hacen son
incoloras. Este medio permite el crecimiento de Candida spp. como colonias rosadas y puntiformes;
la siembra en profundidad permite el desarrollo de clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp.
crece en este medio como colonias puntiformes y transparentes, mientras que Acinetobacter spp. y
otras bacterias oxidativas pueden dar colonias de color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las
cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa al 0.5% y ello se debe a la incorporación de
azul de metileno a sus membranas. En este medio se obtiene además, un buen desarrollo de
especies de Salmonella y Shigella.
https://efecs.files.wordpress.com/2009/12/flia_enterobacteriaceae.pdf