INFORME DE PRCTICAS

PRACTICA DE LABORATORIO NRO. 2

- DETERMINACIN DE GLUCOSA

1. INTRODUCCIN
1
La glucosa es la principal fuente de energa para el metabolismo celular. Se obtiene
fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el
hgado, el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de
glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el
almacenamiento en el hgado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina,
sustancia producida por el pncreas.

La glucosa es un azcar que es utilizado por los tejidos como forma de energa al
combinarlo con el oxgeno de la respiracin. Cuando comemos el azcar en la sangre
se eleva, lo que se consume desaparece de la sangre, para ello hay una hormona
reguladora que es la insulina producida por el pncreas (islotes pancreticos). Esta
hormona hace que la glucosa de la sangre entre en los tejidos y sea utilizada en forma
de glucgeno, aminocidos, y cidos grasos. Cuando la glucosa en sangre est muy
baja, en condiciones normales por el ayuno, se secreta otra hormona llamada
glucagn que hace lo contrario y mantiene los niveles de glucosa en sangre. Cuando
la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situacin se
mantiene, da lugarar una serie de complicaciones en distintos rganos. Esta es la
razn principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras
enfermedades y alteraciones que tambin la provocan.

El tejido ms sensible a los cambios de la glucemia es el cerebro, en concentraciones

muy bajas o muy altas aparecen sntomas de confusin mental e inconsciencia.

El mantenimiento de la glucemia, o concentracin plasmtica de glucosa, en los

organismos superiores el fundamental para el funcionamiento de todos los rganos,
al ser la glucosa un metabolito energtico principal.

La coordinacin de los procesos metablicos implicados en este cometido se lleva a

cabo por la relacin insulina/glucagn. La ingestin de glucosa o sustancias que la

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produzcan (almidn, fructosa, galactosa, protenas, pero no grasas) va seguida, en

las personas sanas, por un aumento de la glucosa en sangre. Este aumento origina la
puesta en marcha del mecanismo regulador: aumento de la utilizacin de glucosa
(por gluclisis, entre otras), aceleracin de la glucogenognesis y disminucin de la
glucogenlisis; todo ello ocurre principalmente mediante la secrecin de insulina, una
hormona pancretica de tipo polipeptdico. En el caso de que la produccin de
insulina est disminuida, la glucosa no puede ser utilizada por las clulas, lo cual
ocasiona niveles elevados de glucosa en sangre (hiperglucemia); as ocurre en las
personas que sufren diabetes del tipo denominado "dependiente de insulina" o "tipo 2
1".

El diagnstico de la diabetes dependiente de insulina es sencillo y se basa en

antecedentes, sntomas clnicos y comprobacin de una hiperglucemia significativa.
Las determinaciones de glucemia basal permiten el diagnstico de la diabetes, pero
constituyen valores puntuales y aislados en el tiempo que no reflejan los niveles
medios de glucemia ni la duracin de la misma. Por lo tanto, es necesario disponer
de pruebas que indiquen el grado del control metablico de la enfermedad a corto y
medio plazo. Estas pruebas estn basadas en el fenmeno de unin de la glucosa a
diversas protenas. Esta glucosilacin tiene lugar por una reaccin no enzimtica y
afecta tanto a protenas de vida media corta (albmina, hemoglobina, etc.) como de
vida media larga (colgeno, mielina, etc.). La intensidad de la glucosilacin depende
de varios factores, siendo los ms importantes los niveles medios de glucemia, la
duracin de la hiperglucemia, la vida media de las protenas y la concentracin de
stas. Como consecuencia, la medida de la glucosilacin proteica constituye un buen
marcador bioqumico del grado de compensacin del enfermo diabtico.

2. OBJETIVO:
Capacitar al alumno para que conozca, maneje y determine el valor de la glucosa en
sangre, utilizando el anlisis objetivo para la deduccin de un resultado real.

3. PARTE TERICA:

3.1. La glucosa
Es un glcido o carbohidrato, ms precisamente un monosacrido, la estructura
ms sencilla dentro de los azcares simples, presente en forma libre en las frutas y

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la miel. Entre los carbohidratos de absorcin rpida, la glucosa es la que se absorbe

ms rpidamente.
La glucosa es una fuente importante de energa para la mayora de las clulas del
cuerpo, incluidas las del cerebro. Los carbohidratos que se encuentran en las frutas,
los cereales, el pan, la pasta y el arroz se transforman rpidamente en glucosa en el
cuerpo, lo que eleva el nivel de dicho azcar en la sangre.
Las hormonas producidas en el cuerpo llamadas insulina y glucagn ayudan a
controlar los niveles de azcar en la sangre.
Es un examen que mide la cantidad de un azcar llamado glucosa en una muestra de 3
sangre.

3.2. Caractersticas

La glucosa, libre o combinada, es el compuesto orgnico ms abundante de la

naturaleza. Es la fuente primaria de sntesis de energa de las clulas, mediante su
oxidacin catablica, y es el componente principal de polmeros de importancia
estructural como la celulosa y de polmeros de almacenamiento energtico como el
almidn y el glucgeno.
A partir de su estructura lineal, la D-glucosa sufre una ciclacin hacia su forma
hemiacetlica para dar sus formas furano y pirano (D-glucofuranosa y F-
glucopiranosa) que a su vez presentan anmeros alfa y beta. Estos anmeros no
presentan diferencias de composicin estructural, pero si diferentes caractersticas
fsicas y qumicas.
La glucosa es uno de los tres monosacridos dietticos, junto con fructosa y
galactosa, que se absorben directamente al torrente sanguneo durante la digestin.
Las clulas lo utilizan como fuente primaria de energa y es un intermediario
metablico. La glucosa es uno de los principales productos de la fotosntesis y
combustible para la respiracin celular.

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Todas las frutas naturales tienen cierta cantidad de glucosa (a menudo con
fructosa), que puede extraerse y concentrarse para preparar un azcar alternativo.
Sin embargo, a escala industrial tanto el jarabe de glucosa (disolucin de glucosa)
como la dextrosa (glucosa en polvo) se obtienen a partir de la hidrlisis enzimtica
de almidn de cereales (generalmente trigo o maz).

3.3. Biosntesis
Los organismos fotoauttrofos, como las plantas, sintetizan la glucosa en la
fotosntesis a partir de compuestos inorgnicos como agua y dixido de carbono,
4
segn la reaccin:

Los seres hetertrofos, como los animales, son incapaces de realizar este proceso
y toman la glucosa de otros seres vivos o la sintetizan a partir de otros compuestos
orgnicos. Puede obtenerse glucosa a partir de otros azcares, como fructosa o
galactosa. Otra posibilidad es la sntesis de glucosa a partir de molculas no
glucdicas, proceso conocido como gluconeognesis. Hay diversas molculas
precursoras, como el lactato, el oxalacetato y el glicerol.
Tambin existen ciertas bacterias anaerobias que utilizan la glucosa para generar
dixido de carbono y metano segn esta reaccin:

3.4. Forma en que se realiza el examen:

Se necesita una muestra de sangre. Esto se realizar antes del procedimiento de
la glucosa a travs de la venopuncin o flebotoma.

3.5. Preparacin para el examen:

Despus de no haber comida nada (en ayunas) durante 7-8 horas.

3.6. Lo que se siente durante el examen:

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Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un

dolor moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin de
picadura. Posteriormente, puede haber algo de sensacin pulstil.

3.7. Razones por las que se realiza el examen:

El mdico puede solicitar este examen si uno tiene signos de diabetes. Sin embargo,
otros exmenes (prueba de tolerancia a la glucosa y examen de glucemia en ayunas)
son mejores para diagnosticar la diabetes.
5
El examen de glucemia tambin se utiliza para monitorear a pacientes que padezcan
diabetes. Tambin se puede hacer si usted presenta:

Un cambio en el comportamiento
Episodios de desmayo
Convulsiones por primera vez

Por qu se hace esta prueba?

Por lo general, la prueba de glucosa en la sangre se hace para detectar la diabetes

mellitus.

Recomendaciones para el anlisis de glucosa?

La forma ms fcil de detectar la diabetes es medir la cantidad de azcar en la sangre

(glucosa) antes de que el paciente coma o beba algo por la maana. En la mayora de
los casos, el paciente deber ayunar durante la noche anterior, no comer ni beber
nada ms que agua despus de la cena y por la maana antes de la extraccin de
sangre.

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4. PARTE PRCTICA

4.2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Cul es el mtodo, tcnica ms adecuado para

determinar la glucosa en sangre y por qu no se

puede trabajar con sangre total; (mtodo

trinder) punto final?

6

4.3. PLANTEAMIENTO DE LA HIPTESIS

Todos los mtodos y tcnicas son vlidos por lo tanto
cada prueba se realiza con su respectivo mtodo. se determina sea con suero,
plasma y sangre total.

4.3.1. Mtodos:
Enzimtico: 10 ul + 1 ml de reactivo (glucosa-biosistem), se deja en bao mara
5 minutos a 37C y se lee en espectrofotmetro a 500 nm contra blanco de
reactivo.
Glucometria: se toma una muestra de sangre capilar y se lee con un glucmetro
Glicemia preprandia: prueba donde se toma una muestra de sangre perifrica
con un ayuno mnimo de 8 horas
Glicemia Postprandial: prueba donde se toma muestra de sangre perifrica en
cualquier momento del da
Curva de tolerancia oral a la glucosa: se da una carga de glucosa al paciente y se
toma a la hora, dos horas, 3 horas para ver la respuesta del organismo a esa
carga.
Test O`sullivan: a una mujer entre la semana 24 y 28 de embarazo se le dan 50
gr de glucosa y se toma la prueba 2 horas despus.
Hemoglobina Glicosilada: sirve para ver el nivel de glicemia que manejo un
paciente en los ltimos 3 meses

4.4. PROCEDIMIENTOS DE EXPLORACIN

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Organizados en grupos de trabajo dispongan en la mesa de trabajo los siguientes

materiales y reactivos

MATERIALES Y EQUIPOS REACTIVOS

Micropipetas de 10ul y 1.0ml Reactivo glucosa enzimtica
6 tips descartables para Alcohol.
micropipetas
Cronometro
2 tubos vacutainer
7
2 agujas vacutainer
Capuchn
Gradillas para tubo de ensayo
Ligadura
Algodn
Esparadrapo
Centrifuga
3 tubos de ensayo de 6 ml
Cubetas para
espectrofotmetro
Bao mara a 37C
Espectrofotmetro

MTODO TRINDER PUNTO FINAL

4.4.1. PRINCIPIO:
La glucosa oxidasa (GOD) oxida a la glucosa en cido glucnico y forma el
perxido hidrgeno. En presencia de peroxidasa (POD) el peroxido hidrgeno
reacciona con el fenol y 4-aminofenazona y produce un complejo coloreado, cuya
intensidad de color es directamente proporcional a la concentracin de glucosa
en la muestra.

4.4.2. MUESTRA: (Suero/Plasma)

Evitar muestras hemolizadas.

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Separar tan pronto sea posible las clulas de la sangre puesto que la gliclisis
consume la glucosa (aproximadamente 5% por hora) y proporciona falsamente
valores disminuidos.
La glucosa en suero es estable hasta 3 das de 2-8 C.

4.4.3. ESTABILIDAD:

Los reactivos estn listos para su uso.

Almacenar de 2- 8C y protegerlo de la luz los reactivos son estables hasta la 8
fecha de expiracin indicada en el rtulo.
No congelar.
Una vez abiertos los reactivos son estables por 2 meses de 2- 8C si se evita la
contaminacin.
Mantener los frascos cerrados cuando no estn en uso. No usar los reactivos en
caso de turbidez.

4.4.4. PROCEDIMIENTO:
calibracin y absorbancia del espectrmetro

Mtodo:. punto final en Incremento

Longitud de onda:.510 nm (500-520 )
Cubeta:.1 cm de va ptica
Temperatura:37C
Tiempo de reaccin:5 - 10 minutos
Lectura:...Contra reactivo blanco
Reactivo/Muestra:....1/100

Toma de muestra travs de la venopuncin o flebotoma se utilizan las venas

situadas en la flexura del codo. La estudiante encargada de tomar la muestra
utilizar guantes, una aguja (con una jeringa o tubo de extraccin).
le pondr un tortor (cinta de goma-ltex) en el brazo para que las venas
retengan ms sangre ya parezcan ms visibles y accesibles.
limpiar la zona del pinchazo con un antisptico y mediante una palpacin
localizar la vena apropiada y acceder a ella con la aguja. Le soltarn el tortor.

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Cuando la sangre fluya por la aguja el sanitario realizar una aspiracin

(mediante la jeringa o mediante la aplicacin de un tubo con vaco).
al terminar la toma, se extrae la aguja y se presiona la zona con una torunda de
algodn o similar para favorecer la coagulacin y se le indicar que flexione el
brazo y mantenga la zona presionada con un esparadrapo durante unas horas
Colocar en bao mara de 5-10 min para que se coagule la muestra
Centrifugacin de la muestra 3000 rpm 3-5 min
Rotular los 3 tubos de ensayo R. Blanco, Estndar y muestra.

9
4.4.5. PREPARACION DE SOLUCIONES:

Mezclar e incubar de 5-10 minutos a 37C en bao mara.

luego leer la absorbancia del estndar (abstd) y la muestra (absm) contra el
blanco de reactivo en el espectrofotmetro.
Los volmenes de reaccin pueden ser variados proporcionalmente sin ninguna
modificacin en el clculo.

4.4.6. RESULTADOS DE CLCULOS:

CALCULAR LA CONCENTRACIN DE GLUCOSA EN LA MUESTRA USANDO LA
SIGUIENTE FRMULA:

Abs muestra
x100
Abs estndar

4.4.7. VALORES:

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VALORES DE REFERENCIALES:

PREMATUROS: 30mg/dl(1.6 mmol/L)

RECIN NACIDOS: 40-60mg/dl(2.2 3.3 mmol/L)
NIOS: 60 - 100 mg/dl (3.8 6.10 mmol/L)
ADULTOS: 70 - 110 mg/dl (3.8 6.10 mmol/L)

VALORES NORMALES:
10
Si le hicieron un examen de glucemia en ayunas, un nivel entre 70 y 100 miligramos
se considera normal.
Si le hicieron un examen de glucemia aleatorio, los resultados normales dependen
de cundo fue la ltima vez que comi. La mayora de las veces, los niveles de
glucemia estarn por debajo de 125 mg/dL.
Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre laboratorios.
Hable con el mdico acerca del significado de los resultados especficos de su
examen.
Los ejemplos anteriores muestran las mediciones comunes para los resultados de
estas pruebas. Algunos laboratorios usan diferentes medidas o pueden evaluar
distintas muestras.

4.4.8. SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES

SI LE HICIERON UN EXAMEN DE GLUCEMIA EN AYUNAS:

Un nivel de 100 a 125 mg/dL significa que usted tiene una alteracin de la
glucosa en ayunas, un tipo de prediabetes. Esto incrementa el riesgo para la
diabetes tipo 2.
Un nivel de 126 mg/dL o mayor casi siempre significa que usted tiene diabetes.
Los niveles aleatorios de glucosa en la sangre superiores a los normales pueden
ser un signo de diabetes. En alguien que tenga diabetes, puede significar que la
enfermedad no est bien controlada. El mdico probablemente ordenar una
glucemia en ayunas o un examen de tolerancia a la glucosa, dependiendo del
resultado del examen aleatorio.

OTROS PROBLEMAS MDICOS TAMBIN PUEDEN PROVOCAR NIVELES DE GLUCOSA EN

LA SANGRE SUPERIORES A LO NORMAL, COMO:

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Hipertiroidismo
Cncer pancretico
Pancreatitis
Tumores raros, entre ellos feocromocitoma, acromegalia, sndrome de Cushing
o glucagonoma

LOS NIVELES DE GLUCOSA EN LA SANGRE INFERIORES A LO NORMAL

(HIPOGLUCEMIA) PUEDEN DEBERSE A:
11
Hipopituitarismo (un trastorno de la hipfisis)
Hipotiroidismo
Insulinoma (muy poco comn)
Muy poco alimento
Demasiada insulina u otros medicamentos para la diabetes

4.4.9. RIESGOS:
Las venas y las arterias varan de tamao de un paciente otro y de un lado del cuerpo
a otro, razn por la cual obtener una muestra de sangre de algunas personas puede
resultar ms difcil que de otras.

OTROS RIESGOS ASOCIADOS CON LA EXTRACCIN DE SANGRE SON LEVES,

PERO PUEDEN SER:

Sangrado excesivo
Desmayo o sensacin de mareo
Hematoma (acumulacin de sangre debajo de la piel)
Infeccin (un riesgo leve cada vez que se presenta ruptura de la piel)

4.5.0. CONSIDERACIONES:
Muchas formas de estrs intenso (por ejemplo, traumatismo, accidente
cerebrovascular, ataque cardaco y ciruga) pueden aumentar temporalmente los
niveles de glucosa en la sangre.

ENTRE LOS FRMACOS QUE PUEDEN AUMENTAR LAS MEDICIONES DE LA GLUCOSA

ESTN LOS SIGUIENTES:

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Ciertos medicamentos para tratar la esquizofrenia y la psicosis

Betabloqueadores (como propanolol)
Corticosteroides (como prednisona)
Estrgenos
Glucagn
Isoniazida
Litio
Anticonceptivos orales (pldoras anticonceptivas)
Fenotiazinas 12
Fenitona
Salicilatos (ver sobredosis de cido acetilsaliclico (aspirin))
Diurticos tiazdicos (como hidroclorotiazida)
Triamtereno
Antidepresivos tricclicos

ENTRE LOS FRMACOS QUE PUEDEN DISMINUIR LAS MEDICIONES DE GLUCOSA

ESTN LOS SIGUIENTES:

Paracetamol
Alcohol
Esteroides anablicos
Clofibrato
Disopiramida
Gemfibrozilo
Inhibidores de la monoaminoxidasa (IMAO)
Pentamidina

5. REFLEXIN:
Qu es la prueba de glucosa en la sangre?
Esta prueba mide la cantidad de glucosa (azcar) que hay en la sangre. El azcar es una
fuente importante de energa, especialmente para el cerebro. El sistema endcrino
(glandular) controla con exactitud la cantidad de glucosa en la sangre. Este sistema hace
que el azcar se almacene o se utilice para energa, segn las necesidades de su cuerpo.

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Usted puede obtener la glucosa directamente de algunos alimentos, como el azcar de

mesa. El cuerpo tambin puede producir glucosa cuando se digieren otros alimentos, como
el pan y los cereales.
Por qu se hace esta prueba?
Por lo general, la prueba de glucosa en la sangre se hace para detectar la diabetes mellitus.

Cmo preparar a los nios para esta prueba?

La forma ms fcil de detectar la diabetes es medir la cantidad de azcar en la sangre
(glucosa) antes de que el nio coma o beba algo por la maana. En la mayora de los casos, 13
su nio deber ayunar durante la noche anterior, no comer ni beber nada ms que agua
despus de la cena y por la maana antes de la extraccin de sangre.
Es posible que el nio deba evitar tomar ciertos medicamentos antes de la prueba, ya que
podran afectar los resultados. Asegrese de que su profesional mdico est al tanto de
cualquier medicamento, hierbas medicinales o suplemento que tome su hijo. Su hijo no
debe dejar de tomar ninguno de sus medicamentos habituales sin consultar antes con su
profesional mdico.
Si tiene preguntas, hable con el profesional mdico de su hijo.

Cmo se hace esta prueba?

El profesional mdico de su hijo le pinchar el dedo con una lanceta y llenar un pequeo
tubo con la sangre. A veces, se extrae sangre del brazo de su hijo con una aguja. Esta
prueba solamente tardar unos pocos minutos.

Cmo conocer el resultado de la prueba?

Pregunte a su profesional mdico cmo le entregarn los resultados de la prueba de su
hijo.

Qu significa el resultado de la prueba?

El intervalo normal de glucosa en la sangre en ayunas para nios en la mayora de los
laboratorios es de 70 a 99 miligramos por decilitro (3.9 a 5.5 milimoles por litro). El
intervalo de valores normales puede variar ligeramente de laboratorio a laboratorio. Los
intervalos de valores normales generalmente se muestran junto a los resultados en el
informe del laboratorio.

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Un nivel de azcar en la sangre en ayunas de 100 a 125 mg/dl (5.5 a 6.9 mmol/l) se
denomina alteracin de la glucosa en ayunas o prediabetes. Un nivel de 126 mg/dl (7.0
mmol/l) o ms puede indicar que su hijo tiene diabetes.
El nivel de glucosa en la sangre puede ser superior a lo normal (se llama hiperglucemia)
si:
o Su hijo tiene prediabetes, una afeccin que puede convertirse en diabetes.
o Su hijo tiene diabetes.
o A su hijo se le diagnostic anteriormente diabetes y:
No ha estado tomando insulina o medicamentos para controlar la diabetes, o los 14
medicamentos para la diabetes no estn controlando la afeccin correctamente
Su hijo no ha estado siguiendo una dieta para diabticos.
o Su hijo tiene enfermedad del hgado o de los riones.
o El pncreas de su hijo est inflamado.
o El cuerpo de su hijo se ve gravemente afectado por una lesin o infeccin
importante.
El nivel de glucosa en la sangre de su hijo puede ser inferior a lo normal (se llama
hipoglucemia) si:
o Su hijo es diabtico y:
La dosis de insulina u otro medicamento utilizado para controlar la diabetes es muy
alta
Su hijo tom medicamentos para la diabetes y luego no comi.
o La glndula tiroides, pituitaria o adrenal no est funcionando correctamente.
o Su hijo tiene enfermedad del hgado.
o Su hijo tiene problemas para absorber los alimentos.
o Su hijo no recibe los nutrientes necesarios de su dieta.

6. APLICACIN:
1. Averiguar cuantos tcnicas y mtodos existe para determinar la glucosa
2. Qu otras pruebas complementarias sern necesarias para complementar la
prueba de tolerancia a la glucosa?
3. Cmo es la glucosa a falta de insulina?

7. BIBLIOGRAFA:
-http://colombiamedica.univalle.edu.co/Vol38No1/html/v38n1a10.pdf
-http://www.netdoctor.es/XML/verArticuloMenu.jsp?XML=000437

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-http://www.ferato.com/wiki/index.php/Glucosa
-http://www.medicinapreventiva.com.ve/laboratorio/glicemia.htm
-http://external.doyma.es/pdf/277/277v27n106a13105169pdf001.pdf
-http://www.uned.es/pea-nutricion-y-dietetica-
I/guia/diabetes/prodinsu.htm
-http://jama.ama-assn.org/cgi/data/297/2/230/DC1/1

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