U.C.

S
FACULTAD DE BIOANALISIS
REGION XALAPA
LABORATORIO DE INMUNOHEMATOLOGIA
WILLIANS SANCHEZ RODRIGUEZ

PRACTICA
CONTROL DE CALIDAD EN SUEROS HEMOCLASIFICADORES

OBJETIVO
E l alumno identificar cual es el propsito de realizar a cabo un buen control
de calidad de los reactivos antisueros hemoclasificadores en el banco de sangre.
Fundamento:

Avidez. Es la intensidad global de la interaccin entre 2 molculas, como el antgeno

anticuerpo, la avidez depende de la afinidad y la valencia de las interacciones, por
consiguiente la avidez de la IgM por un antgeno multivalente puede ser muy superior a la
avidez de una molcula de IgG dimrica por ese mismo antigeno.

La especifidad se atribuye a los receptores para el antgeno de los linfocitos, que pueden
unirse a una molcula, pero no a otra que presente tan slo mnimnas diferencias
estructurales respecto ala primera.( 1)

GENERALIDADES:

La calidad puede definirse como trmino subjetivo que se utiliza para sealar si una
persona , objeto o servicio es bueno o malo, el trmino calidad se hace objetivo, si se fijan
las especificaciones que deben llevar un producto o servicio, para decir si tiene calidad. A
su vez el control de calidad se divide en:

1. Control de calidad interno: procedimiento que utiliza los resultados de un solo

laboratorio con el propsito de controlar la calidad.

2. Control de calidad externo: procedimiento que utiliza los resultados de varios

laboratorios que analizan la misma muestra, con el propsito de controlar la calidad.
(2)
CONTROL DE CALIDAD DE ANTISUEROS Y CLULAS DE FENOTIPO
CONOCIDO:
Dependiendo de la complejidad de las actividades que se realicen en los laboratorios de
cada banco de sangre, as sern los antisueros y clulas de fenotipo conocido que se
emplearn en cada jornada de trabajo, siendo las bsicas: los antisueros y clulas de
fenotipo conocido.

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Los reactivos son los elementos ms importantes para llevar a cabo las pruebas que se
realizan en inmunohgematologia y stas sern tan exactas como lo sean los reactivos. El
control de calidad para los sistemas ABO, Rho/Hr y para suero de coombs deben realizarse
todos los das en cada jornada.

Para estudios que no se realicen diariamente, se debe realizar los controles cada vez que
esa prueba se lleve a cabo.

As mismo los medios de reaccin en donde se empleen estos materiales, deben ser
vigilados continuamente para asegurar la consistencia, sensibilidad y exactitud, lo que se
logra con una vigilancia en control de calidad de los reactivos.

NORMAS GENERALES:
1. Recepcin de reactivos:
2. Verificar la apariencia fsica del empaque, en el sello de garanta y la caducidad:
presenta alteraciones durante el traslado y/o almacenamiento?
3. Verificar caractersticas fsicas del reactivo: color, transparencia, presencia de
hemlisis y volumen.
4. El almacenamiento debe ser de acorde con las indicaciones del productor.
5. Leer y almacenar los instructivos hasta terminar el lote.
6. Control de calidad de los diferentes sueros y clulas reactivo

AVIDEZ:

Es una medida de la capacidad de unin y la velocidad con el cual el anticuerpo

se combina con su correspondiente antgeno.

Las pruebas de avidez se realizarn de rutina a los antisueros en uso diariamente

antes de trabajar y a una muestra de antisuero de cada nuevo lote.

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 TIEMPO PROMEDIO DE AVIDEZ PARA LOS DIFERENTES SUEROS Y
CELULAS REACTIVO

ANTISUERO clulas Tiempo

promedio
de reaccin
Anti A A1 15 seg
A2 20 seg
A1B 15 seg
A2B 30 seg
Anti H A2 60 seg
lectina
Coombs Clulas 60 seg
sensibilizadas
Anti A1 A1 30 seg
lectina
Anti B B 15 seg
A1B 15 seg
A2B 15 seg
Anti AB A1 15 seg
A2 20 seg
B 15 seg
A1B 30 seg
A2B 45 seg
Anti D 30 seg

ESPECIFICIDAD:
Es la reactividad selectiva de un anticuerpo con su correspondiente antgeno, evitando
el que llegara a reaccionar con otras, por lo que cada antisuero se hace reaccionar con
los diferentes clulas y se observara si hubo aglutinacin inespecfica.

El grado de reaccin se califica como fuerte, dbil o negativo. Esta tcnica puede
realizarse en placa o tubo empleando eritrocitos al 2-5% para determinar la
especificidad del sistema ABO y Rho.
Esta prueba se realizar diariamente a los antisueros de rutinas, antes de empezar a
trabajar y a una muestra de cada nuevo lote que llegue.

ESPECIFICIDAD PARA LOS DIFERENTES SUEROS Y CLULAS

REACTIVO

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REACTIVO CEL A1 CEL.A2 CEL.B CEL O R1r
ANTI A + + - -
ANTI A1 + - - -
LECTINA
ANTI B - - + -
ANTI AB + + + -
ANTI H - + - -
ANTI D +
CONTROL -
Rho

TITULACION:

Esta prueba mide la mxima dilucin del antisuero a la cual es capaz de reaccionar con
sus respectivas clulas. El resultado se expresa como el recproco de la mxima dilucin
que de una aglutinacin de 1+ ante un volumen constante de eritrocitos al 2% de clulas
. A1, A2, B , R1r clulas sensibilizadas y no sensibilizadas
Se recomienda correr la prueba conjuntamente con antisueros de referencia. Se anota la
lectura por grado de aglutinacin de 1+ a 4+( 2)

VALORES REFERENCIA DE TITULACIN:

ANTISUERO GRUPO TITULO

MINIMO
AntiA A1 1:256
Anti A1 lectina A2 1:128
A1B 1:128
A2B 1:64
ANTI B B 1:256
A1B 1:256
A2B 1:256

ANTI AB 1:256
A1 1:256
B 1:128

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 A2 1:256
A1B 1:64
A2B
ANTI H A2 1:8
LECTINA
Coombs CEL 1:32
SENSIBILIZADAS
ANTIRhO R1R2 1:64

Material:

10 tubos de ensaye de 13x 100

30 tubos de ensaye 12 x 75
5 Pipetas pasteur
Antisueros anti A,Anti-B, Anti-Rh
Muestra biolgico:
Eritrocitos A y B.

Tcnica
AVIDEZ
1. Marcar una placa de vidrio con la letra A, B, AB, Rh
2. Colocar una gota de eritrocitos al 10% en solucin salina isotnica del grupo A, B,
AB que le corresponde y una gota de eritrocitos al 40% en albmina bovina al 22%
para Rh.
3. Colocar una gota de antisuero con los eritrocitos con un aplicador de madera, al
mismo tiempo accionar el cronometro.
4. Enseguida, dar una placa un movimiento rotatorio con las manos y estar atento en
que aparece la aglutinacin, en ese momento detener el cronometro.
5. Anotar el tiempo de avidez de cada antisuero visualizando los inicios de
aglutinacin.

TITULO
Anti sueros ABO
1. hacer una suspensin al 2% en solucin salina isotnica de clulas A, B, AB.
2. Colocar en una gradilla una serie de 11 tubos de ensaye por cada reactivo a probar
3. marcar los tubos como p, 2, 4, 8, 16, 32, 64, 128, 256, 512, 1024
4. agregar acada uno de ellos, excepto el primero, 0.1 ml de diluyente de suero
5. agregar 0.1 ml del antisuero a probar al tubo y al P unicamente.

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 6. mezclar perfectamente el contenido del tubo 2 y transferir 0.1 ml de esa solucin al
tubo siguiente, repetir este procedimiento hasta el ultimo tubo.
7. desechar 0.1 ml del ultimo tubo
8. agregar 0.1 ml de clulas conocidas a todos los tubos
9. mezclar y centrifugar 25 segundos a 3500 rpm
10. leer y anotar los resultados

Antisuero D
1. Preparar una suspensin de eritrocitos Rh + al 2% con albmina bovina
2. Preparar una serie de 8 tubos de 12x75 marcados como p, 2, 4, 8, 16, 32, 64 y 128
respectivamente
3. Agregar acada uno de ellos, excepto al tubo p, 0.1 ml de albumina bovina
4. Proceder como se indica desde el paso 5 de la tcnica para ABO
5. Centrifugar 60 segundos a 3500 rpm
6. Leer y anotar resultados.
OBSERVACIONES Y RESULTADOS
AVIDEZ

ERITOCITOS A 10% B 10% A Rh+ (40%) B Rh+ 40%

6 segundos 5 segundos 7 segundos 12
TIEMPO segundos

TITULO

Antisueros ABO

Caractersticas del reactivo A

Nombre de la casa comercial: bio-rad

Fecha de caducidad. 28-febrero-2002
Lote
A

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 B

Caractersticas del reactivo B

Nombre de la casa comercial:biorad Lote:
Fecha de caducidad: 28-febrero-2003

Antisuero D
Rh Lote
Nombre de la casa comercial: fecha de caducidad: 30-julio-2002

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CONCLUSIONES:

En esta practica verificamos el control de los sueros hemoclasisficadores como nos dimos
cuenta algunos de los reactivos cuentan con un buen tipo de avidez y titulacin excepto el
a que presenta una fecha de caudicidad muy diferente al del antisuero anti- rh que conto con
un tipo de titulacin hasta, 1024 , tomando en cuenta que su titulo mnimo es 1: 64.
El reactivo de suero anti- A presento un titulo hasta 1024, tomando en cuenta que su titulo
mnimo es hasta 1: 256 .
El caso de estos antisueros que pasan sus ttulos mnimos, nos podran causar falsos + en
algn caso de urgencia a la hora de realizar un grupo sanguneo, por eso es importante
revisar el etiquetado del reactivo , observando si no presente alguna alteracin , mantiene
su estado de almacenamiento y conservacin recomendado.

REFERENCIAS:

1. Abbbas,, K. A, Inmunologa celular y molecular, cuarta edicin, 2002, Editorial Mc Graw Hill,
paginas: 490,497.
2. Castaeda , L , La calidad la hacemos todos, quinta reimpresin , 1978, ediciones poder,
paginas: 8
3. Radillo, G.A, Medicina Transfusional, Editorial prado,1999, Mxico, pagina

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