Reactivos de

Prueba Composicin Indicadores Fundamento Interpretacin

lectura
La membrana de las bacterias contiene
pptidoglicano. Cuando se adiciona el cristal violeta y
lugol forman un complejo cristal violeta-yodo. La
diferencia que se observa en la resistencia a la
decoloracin, se debe a que la membrana externa de
las Gram negativas es soluble en solventes orgnicos,
como por ejemplo la mezcla de alcohol/acetona. La
Agua esteril capa de peptidoglicano que posee es demasiado Gram positivas:
Cristal violeta delgada como para poder retener el complejo de Moradas a azules
Tincin de
Lugol cristal violeta-yodo que se form previamente, y por
Gram ----------------------- -----------------
Alcohol-acetona lo tanto este complejo se escapa, perdindose la Gram negativas:
- --------
Safranina coloracin azul-violcea. Pero por el contrario, las Rojas a rosas
Gram positivas, al poseer una pared celular ms
resistente y con mayor proporcin de
peptidoglicanos, no son susceptibles a la accin del
solvente orgnico, sino que este acta deshidratando
los poros cerrndolos, lo que impide que pueda
escaparse el complejo cristal violeta/yodo, y
manteniendo la coloracin azul-violcea.
Se basa en la produccin bacteriana de una enzima
oxidasa intracelular, esta reaccin de oxidasa se debe
a un sistema de citocromo oxidasa que activa la
oxidacin del citocromo reducido por el oxigeno
molecular que a su vez, acta como un receptor de
electrones en la parte terminal del sistema de
transferencia de electrones.
Discos con Positivo: coloracin azul marino
----------------- Reaccin qumica: Los colorantes de p-fenilendiamina
Oxidasa N,N,N,N-tetrametil -----------------------
------ son aminas aromticas primarias derivados, diamino
-p-fenilendiamina Negativo: sin cambio de coloracin
del benceno, el citocromo oxidasa no reacciona
directamente con el reactivo fenilendiamina pero
oxida al citocromo C que a su vez oxida al reactivo, la
fenilendiamina es metilada y cuantos mas grupos
metilados se introducen en el radical amino el color es
mas azul. Si se introducen tres grupos fenilos en lugar
del metilo el color es aun ms oscuro.
La catalasa actua como una enzima esencial de
Perxido de ----------------- Positivo: efervescencia burbujeo
Catalasa ----------------------- defensa biolgica contra la toxisidad del oxigeno. La
hidrogeno 30% ------- Negativo: sin cambios
catalasa es una enzima que descompone al perxido
 de hidrgeno en oxgeno y agua
Se basa en la determinacin del metabolismo
Medio bsico de
oxidativo o fermentativo de un hidrato de carbono.
Hugh Leifson O / F
Azul de Son necesarios dos tubos del medio para la prueba. El
Peptona Amarillo/amarillo: fermentativo
bromotimol medio du un tipo se expone al aire y el otro se cubre
O/F NaCl facultativo
Ph: ----------------- con aceite mineral o parafina lquido. Las bacterias
(oxidacion/fer Fosfato de potasio Amarillo/verde: oxidativo
verde a 7,0 ------ oxidativas producen acido solo en el tubo abierto
mentacion) Hidratos de Verde/amarillo: fermentador extricto
amarillo a 6,0 expuesto al oxigeno atmosfrico; los microorganismos
carbono Azul/azul: no fermentador (usa
azul a 7,6 fermentadores producen cidos en ambos tubos; as
Agar peptonas)
bacterias no sacaroliticas son inertes en este medio y
Agua destilada
permanecen con un pH alcalino.
Algunas bacterias son mviles por presentar flagelo, Positivo: Movimiento de un lado a otro
los flagelos son encontrados principalmente en las del campo
Gota -----------------
Agua esteril ----------------------- formas bacilares y pueden presentarse en nmero y
suspendida ----------
posiciones variadas. La base de esta prueba es Negativo: sin movimiento o movimiento
determinar si la bacteria es mvil o inmvil. gausuano
Gas:
Positivo: cuarteado o botado el agar
Extracto de carne En este medio se observa si la bacteria es capaz de
Negativo: sin cambios
Peptona fermentar glucosa y lactosa, si es as los carbohidratos
Glucosa forman cidos que hacen que vire el indicador del
H2S:
medio, adems si tiene produccin de acido sulfrico;
KiA Citrato frrico Rojo de fenol Positivo: coloracin negra
el tiosulfato es un intermediario que reduce el sulfuro
(agar de amnico Ph: ----------------- Negativo: sin cambio
a H2S en el metabolismo de la bacteria, el tiosulfato
hierro de Lactosa 6,8 amarillo ------
remplaza al sulfato como fuente de azufre. El H 2S
Kinger) Cloruro sdico 8,4 rojo Fermentacin de la sacarosa:
reacciona con el citrato de amonio ferrico,
Tiosulfato sdico Pico /flauta:
produciendo un precipitado insoluble negro.
Extracto de Tambin sirve para ver la produccin de gas, cualquier
levadura Acido/acido fermentador
gas que produzca la bacteria.
Acido/alcalino no fermentador
Alcalino/alcalino no sacarolitico
Estracto de carne Medio empleado para la diferenciacin de la Positivo para fermentacin: rojo
Polipeptona fermentacin de glucosa, lactosa, sacarosa y la Negativo: amarillo
Cloruro de sodio produccin de cido sulfhdrico. El tiosulfato de sodio Gas:
lactosa Rojo de fenol es el sustrato necesario para la produccin de cido Positivo: cuarteado o botado el agar
TSI
Glucosa Ph: ----------------- sulfhdrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente Negativo: sin cambios
(hierro triple
Sacarosa 6,8 amarillo ------ de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el cido
azucar)
Sulfato de hierro 8,4 rojo sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de color H2S:
Amonio negro. Rojo de fenol es el indicador de pH, el cloruro Positivo: coloracin negra
Tiosulfato de sodio de sodio mantiene el balance osmtico. Por Negativo: sin cambio
Agar fermentacin de azcares, se producen cidos, que se
 detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual
vira al color amarillo en medio cido. El tiosulfato de
sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno el que
reacciona luego con una sal de hierro proporcionando
el tpico sulfuro de hierro de color negro
Determina la capacidad de un organismo de
Fosfato
desdoblar la urea formando dos molculas de
monopotasico
Rojo de fenol amoniaco por la accin de la enzima ureasa Positivo: rojo rosado intenso en el pico
Fosfato disodico
Ph: ----------------- produciendo un cambio de color rojo en el medio. La de flauta
Urea (Stuart) Extracto de
6,8 amarillo ------ hidrolisis de la urea es catalizada por la ureasa para
levadura
8,4 rojo dar dos molculas de amoniaco. La ureasa es una Negativo: amarillo
Urea
enzima microbiana vinculada con la descomposicin
Agua desionizada
de los compuestos orgnicos.
Peptona Determina la capacidad de un organismo de
NaCl desdoblar la urea formando dos molculas de
Fosfato Rojo de fenol amoniaco por la accin de la enzima ureasa Positivo: rojo rosado intenso en el pico
Urea monopotasico Ph: ----------------- produciendo un cambio de color rojo en el medio. La de flauta
(Cristensen) Glucosa 6,8 amarillo ------ hidrolisis de la urea es catalizada por la ureasa para
Urea 8,4 rojo dar dos molculas de amoniaco. La ureasa es una Negativo: amarillo
Agar importante enzima microbiana vinculada con la
agua destilada descomposicin de los compuestos orgnicos.
Sulfato de
magnesio
Azul de
Fosfato Medio sin inocular: color verde
bromotimol Se usa para determinar si el organismo es capaz de
monobsico
Ph: ----------------- utilizar el citrato como nica fuente de carbono y
Citratos Fosfato dipotasico Positivo: azul de Prusia oscuro
verde a 7,0 ------ compuesto amoniacales como nica fuente de
Citrato de sodio
amarillo a 6,0 nitrgeno
NaCl Negativo: sin cambios
azul a 7,6
Agar
Agua desionizada

Estearato de El malonato es un inhibidor enzimtico. El cido

levadura Azul de malnico se une a la enzima, ya que el cido
Sulfato de amonio bromotimol malnico y el cido succnico son estructuralmente Medio sin inocular: color verde
Fosfato di potsico muy parecidos y ocupa los sitios activos; as, la enzima
-----------------
Malonatos Fosfato Ph: no puede combinarse con su sustrato, y bloquea la Positivo: azul de Prusia oscuro
------
monopotasico verde a 7,0 accin del acido succnico es necesario la activacin
NaDl amarillo a 6,0 de la enzima-sustrato para la activacin del sustrato, Negativo: sin cambios
Malonato de sodio azul a 7,6 para formar el cido fumrico. El cido succnico es el
Glucosa causante de la inhibicin de la succnico
 deshidrogenasa que interrumpe el ciclo de Krebs a
Agua desionizada
menos que el microorganismo pueda utilizar al
malonato como nica fuente de carbono.

cultivo semislido, altamente nutritivo debido a la

presencia de extracto de levadura, peptona y
triptena. Adems, la triptena aporta grandes
cantidades de triptofano, sustrato de la enzima
triptofanasa, para la realizacin de la prueba del indol.
La dextrosa es el hidrato de carbono fermentable, la
ornitina es el sustrato para la deteccin de la enzima
ornitina decarboxilasa, el prpura de bromocresol es
el indicador de pH, que en medio alcalino es de color
prpura y en medio cido es amarillo.
Por su composicin, es posible detectar 3 reacciones
en un mismo tubo: movilidad, presencia de ornitina
Dextrosa decarboxilasa e indol
Estracto de La movilidad se demuestra por un enturbiamiento del
levadura purpura de medio o por crecimiento que difunde mas all de la
Peptona bromocresol lnea de inoculacin. La reaccin positiva a la ornitina
MIO reactivo de
Tripteina Ph: est dada por un color prpura del medio. Debido a la
(motilidad Kovacs o de
Clorhidrato de 6,3 purpura fermentacin de la glucosa se reduce el pH
indol ortinina) Erlich
L-ornitina 5,2 amarillo produciendo una condicin cida y originando que el
Agar 6,8 purpura indicador de pH prpura de bromocresol vire al
Aceite mineral amarillo.
La presencia de acidez, otorga condiciones ptimas
para la actividad de la enzima ornitina decarboxilasa,
la cual decarboxila la ornitina presente. Por
decarboxilacin, se alcaliniza el medio, con el
consecuente viraje del indicador hacia el color
prpura. El indol, es producido a partir del triptofano
por los microorganismos que contienen la enzima
triptofanasa. El desarrollo de un color rojo luego de
agregar unas gotas de reactivo de Kovacs o de Erlich,
indica un resultado positivo
Movilidad:
-Resultado positivo: presencia de
turbidez o crecimiento mas all de la
lnea de siembra. Resultado negativo:
crecimiento solamente en la lnea de
siembra.
2-Ornitina decarboxilasa: -Resultado
positivo: color prpura.
Resultado negativo: color amarillo. A
veces se puede desarrollar un color
violceo en la superficie del medio.
3-Prueba del indol:
La prueba de indol se realiza una vez
que se ha determinado la movilidad y la
prueba de ornitina. Resultado positivo:
color rojo al agregar el reactivo
revelador.
Resultado negativo: el color del reactivo
revelador permanece incoloro-
amarillento

Peptona purpura de La L-arginina sufre una descarboxilaciin para

Positivo: color purpura turbio-amarillo-
Extracto de carne bromocresol ----------------- producir agmatina. La agmantina se degrada por dos
Arginina (Ar) purpura apagado
Fosfato de piridoxal Ph: ------ vas, la accin de la enzima agmantasa rompe la
Negativo: sin cambios
Glucosa 6,3 purpura molcula en dos compuestos: putresina y urea. Si la
 Agua desionizada 5,2 amarillo enzima ureasa esta presente, la urea es catabolizada
Acaeite mineral 6,8 purpura formando dos molculas de amoniaco y CO 2.
En el medio de cultivo, la peptona y el extracto de
levadura aportan los nutrientes para el desarrollo
bacteriano. La glucosa es el hidrato de carbono
fermentable, y la lisina es el sustrato utilizado para
detectar la presencia de las enzimas decarboxilasa y
deaminasa. El citrato de hierro y amonio, y el
tiosulfato de sodio, son los indicadores de la
produccin de cido sulfhdrico. El purpura de
bromocresol, es el indicador de pH, el cual es de color
amarillo a pH igual o menor a 5.2, y de color violeta a
pH igual o mayor a 6.8.
Peptona de gelatina Por decarboxilacin de la lisina, se produce la amina Descarboxilacion de la lisina
Extracto de cadaverina, que alcaliniza el medio y esto produce el Positivo: color purpura turbio-amarillo-
Glucosa Purpura de
viraje del indicador al color violeta. La decarboxilacin purpura apagado
Levadura bromocresol
de la lisina, tiene lugar en medio cido, por lo que es Negativo: sin cambios
LIA Ph: -----------------
Citrato de hierro y necesario que la glucosa sea previamente
(agar lisina) 6,3 purpura ------
Amonio fermentada. H2S:
5,2 amarillo
Tiosulfato de Los microorganismos que no producen lisina Positivo: coloracin negra
6,8 purpura
sodio decarboxilasa, pero que son fermentadores de la Negativo: sin cambio
Agar glucosa, producen un viraje de la totalidad del medio
de cultivo al amarillo, pero a las 24 hs de incubacin
se observa el pico de color violeta debido al consumo
de las peptonas, y el fondo amarillo.
La produccin de sulfuro de hidrgeno, se visualiza
por el ennegrecimiento del medio debido a la
formacin de sulfuro de hierro.
Las cepas de los gneros Proteus, Providencia y
algunas cepas de Morganella, desaminan la lisina,
esto produce un cido alfa-ceto-carbnico, el cual,
con la sal de hierro y bajo la influencia del oxgeno
forma un color rojizo en la superficie del medio.
Tripteina El triptfano es un aminocido constituyente de H2S:
SIM Peptona muchas peptonas, y particularmente de la triptena, Positivo: coloracin negra
(acido Sulfato de amonio y reactivo de que puede ser oxidado por algunas bacterias para Negativo: sin cambio
sulfhidrico, hierro ----------------------- Kovacs o de formar indol.
indol, Tiosulfato de sodio Erlich En el proceso interviene un conjunto de enzimas Movilidad:
motilidad) Agar llamadas triptofanasa. El indol producido se combina -Resultado positivo: presencia de
con el aldehido del reactivo de Kovac s o de Erlich, turbidez o crecimiento mas all de la
 para originar un compuesto de color rojo. Las cepas lnea de siembra. Resultado negativo:
mviles pueden apreciarse en este medio, por la crecimiento solamente en la lnea de
turbidez que producen alrededor de la puncin de siembra.
siembra, mientras que aquellas cepas productoras de Indol
sulfhdrico se distinguen por la formacin de un Positivo; anillo color rojo en la
precipitado negro de sulfuro de hierro a partir del superficie
tiosulfato siempre que el medio se mantenga a un pH Negativo: sin cambio
mayor a 7.2
La mayora de los polmeros son demasiado grandes
para ser transportados dentro de las clulas. Las
bacterias excretan enzimas extracelulares que
hidrolizan esos polmeros transportando al interior de
Gelatina nutriente
----------------- la clula en monmeros que les sirven para crecer. Positivo hay licuefaccin
Gelatina Carbono activado -----------------------
------ Negativo medio solido
Agua corriente
La produccin de proteasas es evaluada por
incorporacin de una protena (gelatina o casena) en
un medio slido en placa. La placa se inunda con cido
que precipita la proteina no hidrolizada.
Algunas bacteris pueden usar nitratos como aceptor
final de e- en la respiracin. el nitrato puede ser
reducido a nitrito o en un paso ms a gases (xidos de
nitrgeno). Positivo al agregar alfanalfilamina y
cido sulfanlico
Peptona alfanalfilami
Nitratos Las bacterias se inoculan en medios conteniendo Positivo Rojo
extracto de carne na y cido
(reduccin de ----------------------- nitrato potsico. El nitrito procedente de la reduccin Negativo: sin cambio
nitrato de potasio sulfanlico
nitritos) de clulas puede detectarse aadiendo Al agregar zinc
agua destilada zinc
alfanalfilamina y cido sulfanlico produciendose un Positivo: sin cambio
color rojo. Se puede saber si el nitrato puede haberse Negativo: color rojo
reducido a ms que a nitritos produciendose gas. Si al
aadir zinc en polvo no hay color rojo es que no hay
nitrato porque se ha reducido a gas (desnitrificacin)
En el medio de prueba se usa una sal de hipurato que
Infusin de carne
forma benzoato de sodio y lisinato de sodio por
de corazn
hidrolisis. Los productos finales del cido hipurico,
Casena Positiva: Precipitado que perdure por
Ninhidrina cido benzoico y lisina son insolubles en agua; sus
Hidrlisis Peptona de ms de 10 minutos
----------------------- Cloruro sales son solubles. La hipuricasa produce hidrolisis en
del hipurato levadura Negativo sin cambios o que el
frrico la unin peptidica del acido hiprico. La hidrlisis del
NaCl precipitado desaparezca
hipurato es detectada detectando cualquier producto
Hipurato de sodio
final, el acido benzoico en el medio agregando una
Agua destilada
solucin de cloruro frrico acidificada ya que es
 sensible al mtodo y la lisina es detectada por el
mtodo de ninhidrina

La glucosa puede ser metabolizada por los

microorganismos, a travs de distintas vas
metablicas. Segn la va utilizada, se originarn
productos finales cidos (cido lctico, cido actico,
cido frmico), o productos finales neutros (acetil
metil carbinol, acatoina).
MR: ES una prueba cualitativa basada en el uso de
indicador rojo de metilo que nos indica por que va
metablica se fermento la glucosa. La coloracin roja
nos indica que la glucosa es metabolizada va cidos
mixtos.
MR:
VP: Se basa en la deteccin de acetoina un producto
Polipeptona Positivo:
MR-VP: final neutro derivado de la glucosa. En la prueba el
Digerido MR: Rojo de Negativo: sin cambios
primer reactivo de lectura agregado es el catalizador
pancretico de fenol
(Rojo de .naftol que acta como un intensificador de color, lo
casena ----------------------- VP:
metilo y que aumenta la especificidad de la reaccin, el
Dextrosa VP: KOH Positivo: anillo rojo en la superficie que
Voges- .naftol se combina con el producto de la reaccin del
Fosfato de potasio alfa-naftol aparesca y persista en 10 minutos
Proskauer) diacetilo y con el compuesto de tipo guanidina
Agua destilada Negativo: sin cambios o desaparece el
presente en la peptona, el KOH el 40% ayuda a los
anillo en el transcurso de 10 minutos
absorcin de CO2, estos dos reactivos ayuda a la
reaccin para que produzca el diacetilo que es una
sustancia reactante activa. La prueba de VP esta
basada en la reaccin de diacetilo y el ncleo de
guanidina aqu presente en la argunina.
Es necesario un grupo amino libre disponibleen la
molcula de guanidina proveniente de la arginina en
la peptona para el desarrollo de color. Cundo se
mezclan en proporciones correctas diacetilo peptona
y .naftol, se desarrolla de manera casi instantnea
una coloracin roja en la superficie del medio.

Fermentacin Caldo bsico Rojo de fenol La fermentacin es un proceso metablico, las Medio sin inocular: naranja rojizo
de Peptona..10g Ph: ----------------- bacterias que fermentan hidratos de carbono son por
carbohidratos carbohidrato al 1% 6,8 amarillo ------ lo general anaerobios facultativos. Por medio del Positivo: amarillo
generalmente Extracto de carne1g 8,4 rojo proceso de fermentacin de un hifrato de carbono es
 degradada y descompuesto en dos molculas de
son:
carbono triosas que son nuevamente degradadas. Los
salicina NaCl....5g
productos finales varan con cada especie bacteriana, Negativo: sin cambios o rojo
manitol Agua destilada..1L
del carbohidrato y del sistema enzimtico de la
maltosa.
especie.
Los acetales se hidrolizan con facilidad por la accin
Peptona de casena de los cidos la base de la prueba de la esculina es la
Peptona de carne hidrlisis en la ligadura de la esculina a esculetina,
Extracto de por una -glucosidasa constitutiva la cual libera una
levadura molcula de glucosa
Esculina La esculetina reacciona con una sal de hierro 3 para
Oxgall (bilis) formar un complejo fenolico de color castao oscuro Positivo: Presipitado negro
Hidrlisis de ----------------- o negro. El citrato frrico y de amonio es incorporado
NaCl -----------------------
Bilis Esculina ------ al medio de bilis y esculina de 0.05% como indicador
Citrato de hierro y Negativa: sin cambios
amonio de hidrlisis de la esculina y produce la formacin de
Citrato de sodio esculetina, la hidrlisis se produce en 2 pasos:
Azida sdica a) Crecer en presencia de una concentracin
Agar particular de bilis.
Agua deshionizada b) Producir esculinasa para hidrolizar la
esculina.
Factor CAMP Una protena denominada factor K que interactua
(son las siglas con la -hemolisina, producida secretada por
Positiva: punta de flecha
de los Agar sangre: ----------------- Staphylococos aerus, produce aumento sinergico de la
-----------------------
descubridores ------ hemolisis, y se ve una zona en forma de punta de
Negativo: no hay sinergismo
de dicho fleha , donde se observa una mayor hemolisis cerca
factor) de la unin de las dos estrias de desarrollo.

Discos con:
Bacitracina Sensible: halo de inhibicin de acuerdo
Vancomisina Observar la resistencia a los antibiticos de la cepas, con el antibitico.
Medio de cultivo: -----------------
Antibiograma Optoquina observando si hay o no crecimiento bacteriano al
Muller Hinton ------
Penicilina rededor de los discos. Resistente: sin halo o halo menor de
Amikasina acuerdo al antibiotico.
Clorafenicol

Detectan ambas coagulasas la libre y la ligada siendo

la nica distincin entre ambas la antignica. La
Positivo: formacin de un coagulo
Plasma de humano ----------------- coagulasa libre extra celular reacciona con una
Coagulasa -----------------------
o de conejo ------ sustancia libre en el plasma (factor del suero),
Negativo: sin cambios
denominado tambin factor de reaccin de la
coagulasa (CRF), una sustancia termoestable similar a
 la trombina. El CFR es en activador, una molcula
derivada o modificada de la trombina. La coagulasa
libre extracelular reacciona con el CRF formando un
complejo. Este complejo acta de manera indirecta
para convertir el fibringeno en fibrina, durante la
coagulacin se liberan pptidos similares a partir del
fibringeno y del complejo coagulasa-CRF, la
diferencia principal es que el CRF que reacciona con
la coagulasa no requiere iones de calcio para formar el
coagulo y es inestable a la heparina.
El Agar TCBS, por las iniciales de Tiosulfato-Citrato-
Bilis-Sacarosa, es preparado de acuerdo con la
frmula de Kobayashi y col. siendo una modificacin
del medio de Nakanishi. En el Agar TCBS crecen todas
las especies de Vibrio patgenas para el humano
excepto V. hollisae. Las muestras pueden ser de
materiales tanto clnicos como no clnicos. El Agar
TCBS es altamente selectivo para las especies de
Extracto de Vibrio debido a sus componentes nutricionales y a la
Levadura alta concentracin de sales y es ampliamente utilizado
Sacarosa en placa para el primoaislamiento. Este medio junto
Peptona de Casena Azul de Timol. en el Agua Peptonada Alcalina es utilizado para el Despus de 18 a 24 horas de incubacin,
Agar TCBS Cloruro de Sodio aislamiento de V.cholerae y otras especies a partir de la sacarosa es fermentada por los vibrios
Peptona de Carne Azul de que dan colonias de tamao mediano,
(tiosulfato ----------------- muestras fecales.
Tiosulfato de Sodio Bromotimol. (Ph. lisas, opacas, de color amarillo.
citrato bilis Citrato de Sodio 7,0 verde., 6,0 ------ En este mediio el extracto de levadura y las peptonas V.vulnifucus no fermenta la sacarosa
sacarosa) Bilis disecada amarillo., 7,6 azul) proporcionan la fuente de nitrgeno, vitaminas y presentando una coloracin verde.
Colato de Sodio aminocidos. El citrato de sodio, el tiosulfato de sodio
Citrato de Hierro y la bilis actan como agentes inhibidores de
Agar Bacteriolgico microorganismos Gram positivos y coliformes dando
alcalinidad al medio. La sacarosa es el carbohidrato
fermentable. El cloruro de sodio promueve el
crecimiento. El tiosulfato de sodio es la fuente de
sulfuro y el citrato de hierro es un indicador para
detectar la produccin de H2S. El azul de timol y de
bromotimol acta como indicadores de pH. El agar
bacteriolgico es agregado como agente
solidificante.

Agar MC Peptona ----------------- En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los MicroorganismosColonias
Rojo neutro
(Mac Conkey) Pluripeptona ------ nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano, la Escherichia coli Rojas con halo turbio
 lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la
Lactosa mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los
Mezcla de sales agentes selectivos que inhiben el desarrollo de gran Klebsiella pneumoniae Rosadas mucosas

biliares parte de la flora Gram positiva. Salmonella typhimurium Incoloras, transparentes

Cloruro de sodio Por fermentacin de la lactosa, disminuye el pH Shigella flexneri Incoloras, transparentes

Agar alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del Proteus mirabilis Incoloras, transparentes

Rojo neutro color del indicador de pH (rojo neutro), la absorcin Enterococcus faecalis Diminutas, incoloras, opacas

Cristal violeta en las colonias, y la precipitacin de las sales biliares.

Los microorganismos no fermentadores de lactosa
producen colonias incoloras.
Caractersticas de
Microorganismos
las colonias
Amarillo-verdosas
Escherichia coli ATCC
Plurepetona 25922
sobre fondo
En el medio de cultivo, la pluripeptona y el extracto de amarillento
Extracto de
levadura, constituyen la fuente de nitrgeno, Salmonella Rosas, blancas o
levadura enteritidis ATCC transparentes
vitaminas y minerales. La lactosa y la sacarosa son los
Cloruro de sodio 13076 sobre fondo rojo
Agar VB hidratos de carbono fermentables, el rojo fenol es el
Lactosa ----------------- Salmonella typhi
Crecimiento
(Verde Rojo de fenol indicador de pH, que vira al amarillo cuando hay inhibido
Sacarosa ------
brillante) produccin de cido a partir de la fermentacin de Salmonella Rosas, blancas o
Rojo de fenol
azcares, el cloruro de sodio mantiene el balance typhimurium ATCC transparentes
Verde brillante 14028 sobre fondo rojo
osmtico, y el verde brillante acta como agente
agar Shigella flexneri. Crecimiento
selectivo ATCC 12022 inhibido
Staphylococcus Crecimiento
aureus ATCC 25923 inhibido

Es un medio de cultivo selectivo y diferencial. Microorganismo Caractersticas

La selectividad, esta dada por la sales biliares y el s de las colonias
verde brillante, que inhiben el desarrollo de bacterias Salmonella Transparente
Pluripeptona
Gram positivas, de la mayora de los coliformes y el typhimurium s, centro
extracto de carne
desarrollo invasor del Proteus spp. ATCC 14028 negro
lactosa
Es diferencial debido a la fermentacin de la lactosa, y
mezcla de sales Shigella
Agar SS a la formacin de cido sulfhdrico a partir del Incoloras
biliares ----------------- flexneri
(Sanmonela- Rojo neutro tiosulfato de sodio.
citrato de sodio ------ Shigella sonnei Incoloras
Shigella) Los pocos microorganismos fermentadores de lactosa
agar
verde brillante
capaces de desarrollar, acidifican el medio haciendo Proteus Transparente
virar al rojo el indicador de pH, obtenindose colonias mirabilis ATCC s, centro
rojo neutro
rosadas o rojas sobre un fondo rojizo. 43071 negro
Salmonella, Shigella y otros microorganismos no
Escherichia coli Rosadas a
fermentadores de lactosa, crecen bien en el medio de
cultivo, y producen colonias transparentes.
ATCC 25922 rojas
 Klebsiella Rosadas
La produccin de cido sulfhdrico se evidencia como
pneumoniae cremosas y
colonias con centro negro debido a la formacin de
sulfuro de hierro ATCC 700603 mucosas

XLD Agar es un medio selectivo y de diferenciacin.

Contiene extracto de levadura como fuente de Cepas Resultados del
nutrientes y vitaminas. Utiliza el desoxicolato de sodio crecimiento
como agente selectivo y, por consiguiente, inhibe los Salmonella Crecimiento de
Typhimurium bueno a
microorganismos gram positivos. La xilosa se excelente;
incorpora en el medio dado que la fermentan colonias rojas con
centros de color
prcticamente todos los entricos, excepto Shigella, y negro
esta propiedad hace posible la diferenciacin de dicha Salmonella Crecimiento de
especie. La lisina se incluye para permitir la Abony bueno a
Xilosa excelente;
diferenciacin del grupo Salmonella de los organismos colonias rojas con
L-lisina
no patgenos, dado que, sin lisina, Salmonella centros de color
Lactosa negro
fermentara rpidamente la xilosa y no se distinguira
Sacarosa Shigella Crecimiento de
de las especies no patgenas. Cuando la Salmonella flexneri bueno a
NaCl excelente;
Agar XLD agota el suministro de xilosa, la lisina es atacada por la
Extracto de ----------------- colonias rojas
(Xilosa, lisina, Rojo de fenol enzima lisina descarboxilasa, lo que genera un cambio Shigella Crecimiento de
lavadura ------
desoxicolato) a un pH alcalino que imita la reaccin de Shigella. Para sonnei bueno a
Desoxicolato de excelente;
evitar el cambio similar en los organismos coliformes colonias rojas
sodio
positivos a la lisina, se aaden lactosa y sacarosa para Enterococcus Inhibicin de
Tiosulfato de sodio faecalis parcial a completa
producir cido en exceso1.
Citrato frrico Escherichia Inhibicin de
Para aumentar la capacidad de diferenciacin de la coli parcial a
amonio
frmula, se incluye un sistema indicador de H2S, completa; colonias
de amarillas a rojo
formado por tiosulfato sdico y citrato frrico amarillentas
amnico, para la visualizacin del cido sulfhdrico Proteus Crecimiento;
producido, lo que origina la formacin de colonias con mirabilis colonias de color
rojo carmes con
centros de color negro. Los organismos no patgenos centros negros,
no productores de H2S no descarboxilan la lisina; por proliferacin
inhibida
tanto, la reaccin cida producida por dichos
organismos evita el oscurecimiento de las colonias, lo
que sucede slo con pH alcalino o neutro

Microorganismos Tipo de Colonia

Verdosas con brillo
Escherichia coli metlico y centro
Agar EMB Peptona ----------------- La diferenciacin entre organismos capaces de utilizar negro azulado
Azulde metileno Klebsiella Mucosas, rosa
(Eosina asul Lactosa ------ la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces pneumoniae prpura, confluentes
 de hacerlo, est dada por los indicadores eosina y azul
de metileno; stos ejercen un efecto inhibitorio sobre
muchas bacterias Gram positivas. Muchas cepas de
Escherichia coli y Citrobacter spp. presentan un
caracterstico brillo metlico. Las cepas que utilizan la
lactosa poseen centro oscuro con periferia azulada o
rosada, mientras que las que no lo hacen son
incoloras. Este medio permite el crecimiento de Proteus mirabilis Incoloras
Sacarosa Candida spp. como colonias rosadas y puntiformes; la Enterococcus Incoloras, pequeas,
faecalis puntiformes
Fosfato dipotasico siembra en profundidad permite el desarrollo de
de metileno) Shigella flexneri Incoloras
Agar clamidosporas en C. albicans. Enterococcus spp. crece Salmonella
Incoloras
eosina en este medio como colonias puntiformes y typhimurium

transparentes, mientras que Acinetobacter spp. y

otras bacterias oxidativas pueden dar colonias de
color azul lavanda; esto puede ocurrir aunque las
cepas no sean capaces de acidificar a partir de lactosa
al 0.5% y ello se debe a la incorporacin de azul de
metileno a sus membranas. En este medio se obtiene
adems, un buen desarrollo de especies de
Salmonella y Shigella.
Peptona de Casena En este medio las peptonas proveen la fuente de
Agar AST Peptona de Soya nitrgeno y minirales. El azcar de la Peptona de Soya
-----------------
(agar soya Cloruro de Sodio ----------------------- provee la fuente de carbohidratos. El Cloruro de Sodio crecimiento
Agar Bacteriolgico ------
trpticaseina) tiene su funcin en el balance osmtico y el Agar es
incorporado como agente solidificante.

La infusin de msculo de corazn y la peptona,

otorgan al medio un alto valor nutritivo, que permite
Infusin de musculo el crecimiento de una gran variedad de
de corazn microorganismos, an de aquellos nutricionalmente
Hemolisis
Agar AS Peptona ----------------- exigentes. El cloruro de sodio mantiene el balance
----------------------- Hemolisis
(agar sangre) Nacl ------ osmtico.
Hemolisis
Agar El agregado de sangre al medio de cultivo, en
Sangre de carnero concentracin final de 5-10 %, aporta nutrientes para
el crecimiento bacteriano, y permite detectar
hemlisis.

Peptona de gelatina La frmula de este medio est desarrollada para Microorganismos Crecimiento
Agar Cloruro de ----------------- favorecer la seleccin de P. aeruginosa y estimular la Pseudomonas
----------------------- aeruginosa
Bueno - excelente
cetrimida magnesio ------ formacin de pigmentos. Es ste un medio muy
Sulfato de potasio semejante al King A, en el cual el cloruro de magnesio Escherichia coli Inhibido
 y el sulfato de potasio promueven la formacin de
piocianina, pioverdina y piomelanina de P. aeruginosa.
La cetrimida es un detergente catinico que acta Staphylococcus
Agar aureus
Inhibido
como agente inhibidor, libera el nitrgeno y el fsforo
cetrimida
de las clulas de casi toda la flora acompaante,
aunque inhibe tambin algunas especies de
Pseudomonas.

Bibliografa:
Mac FADDIN; 2003; Pruebas bioqumicas para la identificacin de bacterias de inters biolgico ; tercera edicin; editorial MEDICA
PANAMERICANA: Montevideo, Uruguay; p 850.
KONEMAN; 2003; diagnostico microbiolgico quinta edicin, editorial MEDICA PANAMERICANA, Madrid, Espaa, p 1691

NOTA: LAS PRUEBAS BIOQUIMICAS TIENEN MUCHAS VARIANTES E INTERPRETACIONES ESPECIALES EN ALGUNOS CASOS, AQUI SOLO SE
MENCIONAN DE MANERA GENERAL LAS MA COMUNES.