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BIOQUIMICA
UNIVERSIDAD
PRIVADA TELESUP
GUA DE PRCTICAS
DE LABORATORIO DE BIOQUMICA
RESOLUCIN N 287(14)-2014-UPTELESUP-CU
INTRODUCCIN
SEMANA 1:
PRACTICA N1
OBJETIVOS:
MARCO TERICO:
FUNDAMENTO TERICO:
MATERIAL DE LABORATORIO:
20 tubos de ensayo13x100
Pipetas (5-10 mL)
Varillas de agitacin
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EQUIPOS:
pHmtro
REACTIVOS:
PROCEDIMIENTO:
Escala estndar:
Experimentacin:
Continuar adicionando gota a gota HCl 0.1M al tubo 4 hasta obtener el mismo
color del tubo 3. Determinar el nmero de gotas. Qu pueden concluir?
CUESTIONARIO:
EVALUACIN:
BIBLIOGRAFIA:
SEMANA 2:
PRACTICA N 2
OBJETIVOS:
MARCO TERICO:
La enzima como unidad fundamental de vida. Cada clula y cada tejido tienen
su actividad propia, lo que comporta continuos cambios en su estado
bioqumico en la base de la cual estn las enzimas que tienen el poder de
catalizar, facilitar y agilizar determinados procesos sintticos y analticos. Los
propios genes son reguladores de la produccin de las enzimas; por tanto,
genes y enzimas pueden ser considerados como las unidades fundamentales
de la vida
MATERIAL DE LABORATORIO:
Cocina elctrica
2 gradillas
10 pipetas 0.5mL y 10 mL
2 vasos de precipitacin de 100 y 400 mL
2 morteros
10 tubos de ensayo
1 hoja de bistur
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REACTIVOS:
INSUMOS:
250 g. de hgado
Papas
Apio
PROCEDIMIENTO:
CONCLUSIN:
CUESTIONARIO:
EVALUACIN:
BIBLIOGRAFIA:
SEMANA 3:
PRACTICA N 3
INTRODUCCIN:
OBJETIVO:
MATERIAL DE LABORATORIO:
Pipeta
Alcohol 96 grados
Mortero o batidor
Varilla de vidrio
Solucin de NaCl - 2M
Embudo
Probeta
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Vaso de precipitado
INSUMOS:
PROCEDIMIENTO:
PIPETA
TUBO DE ENSAYO
INTERFASE
HOMOGENIZADO
MUESTRA
VEGETAL
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Para realizar una extraccin pura ocurrir que el detergente contiene lauril
sulfato de sodio, el cual limpia los trastes removiendo grasas y protenas. ste
acta de la misma manera en el protocolo de extraccin de ADN, separando
las grasas (lpidos) y las protenas que constituyen las membranas que rodean
la clula y el ncleo. Una vez que estas membranas se han roto, el ADN es
liberado de la clula.
BIBLIOGRAFIA:
SEMANA 4:
PRACTICA N 4
ESPECTROFOTOMETRA: CUANTIFICACIN
INTRODUCCIN:
A NAD+
NADH
OBJETIVO:
MARCO TERICO:
la = radiacin absorbida y
lo = la + t
A= Log 1/T
A= - Log T
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Ley de Lambert-Beer
A = a l c Ecuacin 1.1
Anlisis espectrofotomtrico:
Curva de Calibrado:
A = al c + Ao Ecuacin 1.3
A = l c + Ao Ecuacin 1.4
A X Ao
c Ecuacin 1.5
x
l
vi * ci vf * cf Ecuacin 1.6
A c vi AMP CS vi Ecuacin 1.7
S mp
vf mp vf s
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Unidades:
Longitud (l): cm
Concentracin (c):
Molar ()
M-1 cm-1
L moles-1 cm-1
mL milimoles-1 cm-1
Milimolar ()
mM -1 cm-1
L mmoles-1 cm-1
mL moles-1 cm-1
Especfico (E1%)
dL g-1 cm -1
(g/100mL) 1 cm-1
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Mtodo Biuret
Mtodo de Lowry
MATERIAL DE LABORATORIO:
16 tubos de ensayo
2 gradillas
2 pipetas graduadas de 5 mL
2 pipetas graduadas de 1 mL
1 pisceta.
EQUIPOS:
Espectrofotmetro (visible)
1 bao termostatizado
1 termmetro.
REACTIVOS:
Reactivo de Biuret:
MUESTRAS EN ESTUDIO:
PROCEDIMIENTO:
Mtodo de Biuret:
Agregue 4,0 mL del reactivo de Biuret con una pipeta graduada de 5 mL.
TABLA 1.1
Ovoalbmina R.
Biuret Absorbancia Concentracin
Tubo (mL) H2O
5% MP (mL) (mL) %
Mtodo de Lowry:
Agregue 1,0 mL del reactivo alcalino (RCA) con una pipeta de 1 mL. Espere
10 minutos exactos
Despus de los 10 minutos, agregue 4,0 mL del reactivo de Folin con una
pipeta de 5 mL y mezcle.
TABLA 1.2
BIBLIOGRAFA:
SEMANA 5:
PRACTICA N 5
DETERMINACION DE LA GLICOSURIA
INTRODUCCION:
OBJETIVOS:
MARCO TERICO:
MATERIAL DE LABORATORIO:
EQUIPOS:
Bao Mara
REACTIVOS:
Reactivo Benedict
Agua destilada
Tiras reactivas para determinacin de glucosa en orina
MUESTRAS EN ESTUDIO:
Muestra de orina
PROCEDIMIENTO:
PROCEDIMIENTO-1:
1. Pipetear en un tubo 2 cc de Reactivo de Benedict y 500 ul de orina
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PROCEDIMIENTO 2:
1. Insertar la tira en el recipiente con orina
2. Comparar los colores patrones de la caja de la tirilla con el color que se
torn. Observar la Glucosa y la Densidad.
VALORES DE REFERENCIA:
La densidad normal de la orina es de 1.010 a 1.030; en orina de diabticos es
hasta 1.050 de concentracin.
BIBLIOGRAFA:
Davida Caadas Bustos (s.f). Glucosuria Renal. Recuperado
de: http://www.mapfre.com/salud/es/cinformativo/glucosaria-renal.shtml
SEMANA 6:
PRCTICA 6
INTRODUCCION:
OBJETIVOS:
MARCO TEORICO:
Existen factores que dan lugar a la diabetes, estos puede ser: genticos,
sedentarismo, estrs, sobrepeso, frmacos por uso excesivo de corticoides.
Dao pancretico, Etc.
FUNDAMENTO:
GOD
Glucosa + O2 + H2O. cido Glucnico + H2O2
POD
2 H2 O2 + 4-AF + fenol...Quinonaimina coloreada + 4 H2 O
MATERIAL DE LABORATORIO:
Algodn
Alcohol de 70
Gradilla
EQUIPOS:
Bao Mara
Centrifuga
Espectrofotmetro
REACTIVOS:
MUESTRAS EN ESTUDIO:
Muestra de sangre
PROCEDIMIENTO:
PROCEDIMIENTO
(Desconocido) colocar:
B S D
Standard - 20 ul -
Muestra - - 20 ul
Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml 2 ml
El color de reaccin final es estable 1 hora, por lo que la absorbancia debe ser
leda dentro de este lapso.
f = 100 mg/dl
Glucosa mg/dl = D x f donde: S
Linelidad de la prueba..?
CUESTIONARIO:
SEMANA 7:
PRACTICA N 7
GLUCOSA POSTPRANDIAL
INTRODUCCION:
OBJETIVOS:
MARCO TEORICO:
Glucosa en sangre de una muestra basal >110 mg/dl pero <125 mg/dl
evaluados en ayunas considerados como prediabetes.
los niveles plasmticos sean superiores a 140 mg/dl. Con la edad se presenta
un incremento gradual tanto de los niveles de glucosa en ayuno (1 a 2 mg/dl
por cada dcada despus de los 50) como de los valores postprandiales(a
las 2 horas aumenta de 5 a 10 mg/dl por cada dcada despus de los 50).
FUNDAMENTO:
MATERIAL DE LABORATORIO:
EQUIPOS:
Bao Mara
Centrifuga
Espectrofotmetro
REACTIVOS:
MUESTRAS EN ESTUDIO:
Muestra de sangre
PROCEDIMIENTO:
1. Tomar una muestra basal, con el ayuno adecuado para la prueba, luego
fraccionar la muestra y determinar la concentracin de glucosa basal
usando la tcnica para determinacin de la glucosa por el mtodo
enzimtico.
CUESTIONARIO:
SEMANA 8:
PRACTICA N 8
INTRODUCCIN:
OBJETIVOS:
5. Reconocer que forma parte del perfil lipdico en la cual puede ser
aplicado la Ley de friedewald para su determinacin.
MARCO TERICO:
Las HDL y las LDL han sido las ms estudiadas por su importante actividad
biolgica:
- las LDL, producto del metabolismo de las VLDL en plasma, son las
encargadas del transporte del colesterol exgeno (y en mucho menos
proporcin, endgeno) hacia el interior de las clulas.
- las HDL, sintetizadas en el hgado, remueven el colesterol no utilizado por las
clulas (dentro de ciertos lmites de concentracin), transportndolo hacia el
hgado para su degradacin.
MATERIALES:
Tubo de tapa amarilla
Reactivos
Cubetas
Micropipetas
Centrfuga
Espectrofotmetro
Gradilla
Tubos vacutainer con gel separador
Agujas vacutainer
Algodn
Alcohol
EQUIPOS:
Bao Mara
Centrifuga
Espectrofotmetro
MUESTRAS EN ESTUDIO:
Muestra de sangre
REACTIVOS:
FUNDAMENTO:
CHE
Esteres de colesterol + H2O Colesterol + Ac. Grasos
CHOD
Colesterol + O2 + H2O Colestenona + H2O2
POD
H2O2 + Fenol + 4-AP Quinona + H2O
1. Una colesterol estearasa (CHE) hidroliza los steres de colesterol a
colesterol mas cidos grasos libre.
2. A continuacin una colesterol oxidasa (CHOD) oxida todo el colesterol a
colestenona y perxido de hidrgeno.
3. El perxido de hidrgeno es sustrato de una peroxidasa (POD) que junto
con 4- amino fenazona (4-AP) da lugar a la formacin de una quinona roja.
4. La quinona formada es proporcional a la concentracin de colesterol en la
muestra.
PROCEDIMIENTO:
RESULTADO
F = 200 / 0.013
F = 15384
15384 * 0.010
= 153, 84
Resultado es del Colesterol Total es 153, 84%
CONCLUSIONES:
BIBLIOGRAFIA:
http://www.cunoc.edu.gt/medicina/practicano8bioqui.pdf
www.galiciaclinica.info/PDF/13/247.pdf
www.odon.uba.ar/uacad/bioquimica/docs/clase17catabolismodeacgraso
s2012.pdf capitulo ii marco terico - UNMSM
Gomez J. Bioqumica preguntas y respuestas. Vol 1. 1 edicin. Lima.
Heta grfica y servicios; 2014.
VILLACENCIO. M. Bioqumica, tomos I y II. Ed. Concytec. Lima-Per.
2000
LOZANO, J.GALINDO, D, Bioqumica para ciencias de la salud, Ed
interamericana, McGraw-Hill. 1996
Devlin M, Bioqumica Edit. Reverte Espaa 2000
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SEMANA 9:
PRACTICA N9
DETERMINACIN DE TRIGLICERIDOS
INTRODUCCIN:
MARCO TERICO:
Donde R, R', y R" son cidos grasos. Los tres cidos grasos pueden ser
diferentes, todos iguales (R=R"=R), o slo dos iguales (R=R" o R"=R o R=R)
y el otro distinto. La longitud de las cadenas de los triglicridos oscila entre 16 y
22 tomos de carbono.
FUNDAMENTO:
glicerol kinasa
glicerol + ATP ..glicerol-1-P + ADP
GPO
glicerol-1-fosfato + O2 H2O2 + dihidroxiacetonafosfato
POD
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol .quinonimina roja
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MATERIALES:
Tubo de tapa amarilla
Reactivos
Cubetas
Micropipetas
Centrfuga
Espectrofotmetro
Reloj
Gradilla
Tubos vacutainer con gel separador
Agujas vacutainer
Algodn
Alcohol
EQUIPOS:
Bao Mara
Centrifuga
Espectrofotmetro
MUESTRAS EN ESTUDIO:
Muestra de sangre
REACTIVOS:
Reactivo de Triglicridos
Pisceta ms agua destilada
PROCEDIMIENTO:
Homogeneizar la muestra antes de usar, especialmente frente a sueros
lechosos.
En tres cubetas espectrofotomtricas marcadas B (Blanco),
S (Standard) y D (Desconocido) colocar:
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B S D
Muestra - - 10 ul
Standard - 10 ul -
Reactivo A 1 ml 1 ml 1 ml
CONCLUSIONES:
BIBLIOGRAFIA:
http://www.cunoc.edu.gt/medicina/practicano8bioqui.pdf
http://www.wiener-lab.com.ar/VademecumDocumentos
https://es.slideshare.net/.../determinacion-de-lipoprotenas-de-alta-densidad-
hdl-en-suer
www.odon.uba.ar/uacad/bioquimica/docs/clase17catabolismodeacgrasos20
12.pdf
www.scientificpsychic.com/fitness/aceites-grasas1.html
Gomez J. Bioqumica preguntas y respuestas. Vol 1. 1 edicin. Lima. Heta
grfica y servicios; 2014.
VILLACENCIO. M. Bioqumica, tomos I y II. Ed. Concytec. Lima-Per. 2000
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SEMANA 10:
PRACTICA 10
INTRODUCCIN:
Los hombres suelen tener un nivel notablemente inferior de HDL que las
mujeres.
Vulgarmente se conoce a las HDL como colesterol "bueno", dando una falsa
idea de que sus valores altos pueden prevenir por s solo ciertas enfermedades
(ver seccin "Colesterol bueno vs. colesterol malo" ms abajo).
Rango recomendado
La American Heart Association proporciona una serie de guas para subir los
niveles de HDL y bajar el riesgo de cardiopata isqumica
OBJETIVOS:
1. Que el alumno vea la importancia y el papel que tiene el HDL como factor
protector en el organismo.
2. Reconocer que forma parte del perfil lipdico en la cual puede ser aplicado la
Ley de friedewald para su determinacin.
MARCO TERICO:
MATERIALES:
Reactivos
Cubetas
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Micropipetas
Centrfuga
Espectrofotmetro
Reloj
Gradilla
Agujas vacutainer
Algodn
Alcohol
EQUIPOS:
Bao Mara
Centrifuga
Espectrofotmetro
MUESTRAS EN ESTUDIO:
Muestra de sangre
REACTIVOS:
Reactivo de HDL-Colesterol
FUNDAMENTO:
El presente, es un mtodo homogneo que emplea dos reactivos. En la primera
etapa de la reaccin, se solubiliza y consume el colesterol libre o unido a
protenas distintas de la HDL en una reaccin que involucra a colesterol
oxidasa (CHO), peroxidasa (POD) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sul-fopropil)- 3-
toluidina disdica (TOOS) dando lugar a un producto no coloreado. En una
segunda etapa, un detergente solubiliza especficamente las HDL. El HDL-
colesterol es liberado para reaccionar con colesterol esterasa (CHE), colesterol
oxidasa y TOOS, dando un producto coloreado:
PROCEDIMIENTO:
En un tubo de Kahn medir 0,5 ml (500 ul) de muestra, y agregar 50 ul de
Reactivo Precipitante. Homogeneizar agitando (sin invertir) durante 20
segundos y dejar 30- 40 minutos en refrigerador (2-10 C) o 15 minutos en
bao de agua a la misma temperatura. No colocar en congelador. Centrifugar
15 minutos a 3000 r.p.m. Usar el sobrenadante lmpido como muestra.
En 3 tubos marcados B, S y D colocar:
B S D
Sobrenadante - - 100 ul
Standard - 20 ul -
Reactivo de Trabajo 2 ml 2 ml 2 ml
CONCLUSIONES:
VALORES DE REFERENCIA:
0,40 - 0,60 g/l Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia. No obstante, valores mayores de 0,40 g/l se consideran
recomendables y los que se encuentren por encima de 0,60 g/l se han
considerado como protectivos. Por el contrario, valores de HDL colesterol por
debajo de 0,40 g/l se consideran como ndice significativo de riesgo de
enfermedad cardaca coronaria.
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BIBLIOGRAFIA:
1. http://www.cunoc.edu.gt/medicina/practicano8bioqui.pdf
2. www.wiener-lab.com.ar/.../hdl_colesterol_monofase_aa_plus_sp.pdf
3. https://es.slideshare.net/.../determinacion-de-lipoprotenas-de-alta-
densidad-hdl-en-suer
4. www.odon.uba.ar/uacad/bioquimica/docs/clase17catabolismodeacgrasos20
12.pdf
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SEMANA: 11
PRACTICA N11
INTRODUCCIN:
MARCO TERICO:
las clulas por encima de una cierta concentracin y, por tanto, debe ser o bien
utilizado (para sntesis de membranas o de hormonas esteroideas, por
ejemplo), o bien convertido por enzimas del tipo acil:colesterol aciltransferasa
(ACAT) en steres de colesterol, forma en que pueden ser guardados como
reservorio celular de colesterol. El receptor de LDL, una vez completado su
ciclo celular, puede ser degradad. Los niveles de colesterol no esterificado
intracelular regulan de forma coordinada los 2 sistemas de sntesis de
colesterol, asegurando as su coordinacin y evitando un exceso de colesterol
intracelular. La expresin y la funcionalidad adecuadas de los receptores de
LDL son un determinante importante de la concentracin de LDL srico. Como
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MATERIALES:
Muestra de sangre
Tubo de tapa amarilla
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Reactivos
Cubetas
Micropipetas
Centrfuga
Espectrofotmetro
Reloj
EQUIPOS:
Bao Mara
Centrifuga
Espectrofotmetro
MUESTRAS EN ESTUDIO:
Muestra de sangre
REACTIVOS:
Reactivo de LDL-Colesterol
FUNDAMENTO:
Las lipoprotenas de baja densidad (LDL o -lipoprotenas) se separan del
suero precipitndolas selectivamente mediante el agregado de polmeros de
alto peso molecular. Luego de centrifugar, en el sobrenadante quedan las
dems lipoprote nas (HDL y VLDL); el colesterol ligado a las mismas se
determina empleando el sistema enzimtico Colesterol oxidasa/ Peroxidasa
con colorimetra segn Trinder (Fenol/4-AF). Por diferencia entre el colesterol
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CONCLUSIONES:
VALORES DE REFERENCIA :
0,40 - 0,60 g/l Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia. No obstante, valores mayores de 0,40 g/l se consideran
recomendables y los que se encuentren por encima de 0,60 g/l se han
considerado como protectivos. Por el contrario, valores de HDL colesterol por
debajo de 0,40 g/l se consideran como ndice significativo de riesgo de
enfermedad cardaca coronaria.
BIBLIOGRAFIA:
http://www.cunoc.edu.gt/medicina/practicano8bioqui.pdf
www.wiener-
lab.com.ar/.../hdl_colesterol_monofase_aa_plus_sp.pdf
https://es.slideshare.net/.../determinacion-de-lipoprotenas-
de-alta-densidad-hdl-en-suer
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SEMANA 12
PRACTICA N12
INTRODUCCIN:
Las protenas son los pilares fundamentales de la vida. Cada clula del cuerpo
humano las contiene. La estructura bsica de la protena es una cadena de
aminocidos.
OBJETIVOS:
MARCO TERICO:
A. HOLOPROTEINAS
1. Escleroprotenas Ejemplos: Colgenos, queratina, etc.
2. Esferoprotenas Ejemplos: Albuminas, Globulinas, Glutelinas,
Prolaminas e Histonas.
B. CONJUGADAS (HETEROPROTEINAS):
1. Glucoprotenas Ejemplos: Ribonucleasa, mucoproteinas, anticuerpos,
etc.
2. Lipoprotenas Ejemplos: LDL, HDL y VLDL.
3. Cromoprotenas Ejemplos:Hemoglobina, Mioglobina, Hemocianina.
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Protenas Totales:
Funciones de la Albmina:
Tipos de Albmina:
Seroalbmina: Es la protena del suero sanguneo.
Ovoalbmina: Es la albmina de la clara del huevo.
Lactoalbmina: Es la albmina de la leche.
Globulinas alfa 1:
Globulinas alfa 2:
El grupo de las globulinas alfa 2 est compuesto por las siguientes:
Globulinas beta:
Globulinas gamma:
Corresponden a las inmunoglobulinas sricas o anticuerpos (IgA, E, G,
M).
MATERIALES:
Suero para las determinaciones qumicas
Reactivos:
o Biuret para la determinacin de protenas totales
o Verde de bromocresol (BCG) para la determinacin de albmina
Soluciones estndar de:
o Protenas totales
o Albmina
Tubos de ensayo con gel para obtencin de suero (tapn amarillo)
Cubetas
Micropipetas
Puntas para micropipetas
Fotmetro
Reloj
PROCEDIMIENTOS:
a) Protenas totales
a. Marcar tres tubos de ensayo como B (Blanco), S (Standard) y M
(Muestra escribir el nmero de muestra)
b. Proseguir de acuerdo al siguiente esquema:
B St M
Agua 14.3 l
Solucin 14.3 l
Suero 14.3 l
estndar
Reactivo de 1000 1000 1000
Biuret l l l
c. Incubar por 30 minutos a temperatura ambiente (TA) o 15 minutos a
37C.
d. Leer las absorbancias del estndar (AS) y la muestra (AM), poniendo
el aparato en cero con el blanco de reactivo (B), a una longitud de
onda de 540 nm.
e. Determinar la concentracin de protenas totales utilizando la ecuacin
de Beer-Lambert
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b) Albmina
a. Marcar tres tubos de ensayo como B (Blanco), S (Standard) y M
(Muestra escribir el nmero de muestra)
b. Proseguir de acuerdo al siguiente esquema:
B St M
Solucin 5 l
Suero 5 l
estndar
Reactivo de BCG 1000 1000 l 1000 l
l
c. Incubar por 10 minutos a temperatura ambiente (TA) o 5 minutos a
37C.
d. Leer las absorbancias del estndar (AS) y la muestra (AM), poniendo
el aparato en cero con el blanco de reactivos (B), a una longitud de
625 nm
e. Determinar la concentracin de protenas totales utilizando la ecuacin
de Beer-Lambert
CONCLUSIONES:
BIBLIOGRAFIA:
http://www.cunoc.edu.gt/medicina/practicano8bioqui.pdf
https://es.scribd.com/doc/44104775/Determinacion-de-Proteinas-y-de-
Albumina-3
https://es.slideshare.net/johnnyalexanderaguilarmontalvan/proteinas-
totales-y-albumina-42818080
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SEMANA 13:
PRACTICA N13
DETERMINACION DE CREATINA
INTRODUCCIN:
OBJETIVOS:
MARCO TEORICO:
renal, incluso antes de que se presenten sntomas. Por eso la creatinina suele
figurar en los anlisis de sangre que serealizancomnmente. Los valores
normales de creatinina en la sangre son aproximadamente 0,6 a 1,2 miligramos
(mg) por decilitro (dL) en los varones adultos y 0,5 a 1,1 miligramos por decilitro
en las mujeres adultas. Los adultos con mucha masa muscular pueden tener
ms creatinina en la sangre que la poblacin normal. Las personas ancianas,
por otro lado, pueden tener menos creatinina en la sangre de lo normal.
Algunos frmacos pueden producir una elevacin anormal de las
concentraciones de creatinina en sangre. Una concentracin muy elevada de
creatinina en la sangre puede indicar la necesidad de someterse a dilisis para
eliminar las sustancias de desecho de la sangre. VALORES NORMALES EN
LA SANGRE Los valores normales en los hombres adultos son entre 0,7 y 1,3
mg por decilitro. En las mujeres adultas entre 0,5 y 1,2 mg por decilitro En los
nios pequeos se aceptan valores de 0,2 y 1 mg/dl. Los valores ms altos de
4 mg/dl se deben a un fallo renal importante. USO EN DIAGNSTICO Medir la
creatinina del suero es una prueba simple y es el indicador ms comn de la
funcin renal. Una subida en los niveles de creatinina de la sangre solamente
es observada cuando hay un marcado dao en los nefrones(RC). Por lo tanto
esta prueba no es conveniente para detectar estados tempranos de
enfermedades del rion Una mejor valoracin de la funcin del rin es dada
por la prueba de aclaramiento de creatinina.
Determinacin de Creatinina:
MATERIALES:
Pipeta automtica, de ul
Pipeta de 1ml
Muestra (sangre)
Espectrofotmetro
Tubos de ensayo
Cubetas de 1cc
REACTIVOS:
PROCEDIMIENTO:
B S D
Estndar - 100 ul -
Muestra - - 100 ul
7. Calcular el resultado.
NORMALIDAD
CONCLUSIONES:
Se realiz la determinacin de Creatina, y se concluy que la creatinina es la
molcula producto de deshecho del metabolismo proteico.
SEMANA 14:
PRACTICA N14
DETERMINACIN DE UREA.
INTRODUCCIN:
OBJETIVOS:
MARCO TEORICO:
DETERMINACION DE UREA:
NADH a NAD+.
La disminucin de la absorbancia frente al tiempo es proporcional a la
concentracin de urea.
Ureasa
GL
DH
MATERIALES
Pipeta automtica, de ul
Pipeta de 1ml
Muestra (sangre)
Espectrofotmetro
Tubos de ensayo
Cubetas
Reactivo de trabajo
Standar
Tubo tapa lila
PROCEDIMIENTO:
1. Preparar el diluyente para enzimas en un litro de agua destilada.
2. Centrifugar la muestra de sangre a 3000 rpm por 5 minutos.
3. En 3 tubos marcados B (Blanco), S (Estndar), D (Desconocido), colocar:
B S D
R. Trabajo 0.5 ml 0.5 ml 0.5 ml
Estndar - 5 ul -
Muestra - - 5 ul
Incubar 10 minutos a temperatura ambiente
Normalidad
20 a 50 mg%
UNIVERSIDAD TELESUP - GUA PRCTICA DE BIOQUMICA
CONCLUSIONES:
BIBLIOGRAFIA:
1. http://trabajosmedicos.blogspot.pe/2012/08/determinacion-de-urea-informe-
de.html
2. http://trabajosmedicos.blogspot.pe/2012/08/determinacion-de-creatinina-
informe-de.html
3. https://es.slideshare.net/guillermoreynaldomejiagutierrez/labo-de-urea
4. https://es.slideshare.net/karenstefysuarez/proyecto-de-urea-en-la-sangre
5. .http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/MANUALBIOQUIMICACLINICA
_10817.pdf
UNIVERSIDAD TELESUP - GUA PRCTICA DE BIOQUMICA
SEMANA 15:
PRACTICA N15
ESTADO NUTRICIONAL
INTRODUCCION:
MARCO TEORICO:
MATERIALES:
Balanza
Tallimetro
Cinta mtrica
Lipocalibrador
Calculadora
PROCEDIMIENTO:
a) Peso y Talla
El peso se debe realizar con el individuo sin ropa, en una bscula estndar
ajustada para la medicin cada 100 mg; la talla debe realizarse con el individuo
erguido, ajustando al milmetro, estando el sujeto sin zapatos.
Peso
2
ndice de Masa Corporal (IMC) = (en Kg/m )
2
Altura
Es el ndice que mejor se correlaciona con la proporcin de grasa del individuo adulto. Se
han establecido tablas de valores normales para mujeres y varones segn su edad.
IMC (kg/m2)
Grupos de edad (aos)
Mujeres Hombres
El peso actual de un individuo debe ser comparado con valores estndares como el peso
ideal. En Espaa existen unas tablas de peso ideal para una determinada talla, en
individuos entre 16 y 70 aos. El porcentaje de peso ideal se calcula dividiendo el peso
actual entre el peso ideal y multiplicndolo por 100 (expresado en %).
Peso
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actual
Se calcula mediante la frmula: Peso habitual menos peso actual, dividido entre el peso
actual y multiplicado por 100 (en %).
Peso habitual
Se sugiere que una prdida del 10% del peso habitual durante un periodo de 6 meses
indica un grado de desnutricin importante.
Relaciona el peso y la talla del individuo con el peso y talla medios para su edad y sexo.
Se calcula con la frmula:
= (m) %)
Peso
(en
ndice de Forma Corporal (IFC) =
Kg/m3)
Altura3
El resultado obtenido del clculo del IFC se correspondera de forma completa con el
porcentaje de masa grasa corporal, no vendra afectado por la altura como ocurre en el
caso del IMC, por lo que sera ms adecuado para el estudio individual, sobre todo en
adolescentes y nios. Sin embargo, el clculo del IFC, hasta el momento, no ha cobrado
la vigencia e importancia del IMC, y en la prctica clnica diaria no es demasiado
utilizada.
Se puede realizar una sola medicin o una combinacin de varias zonas, con lo que se
reduce el error y se corrigen las posibles diferencias en la distribucin de grasa dentro de
un mismo individuo.
Existen varias ecuaciones que, utilizando las mediciones de los pliegues subcutneos del
individuo, son capaces de obtener una prediccin precisa del porcentaje de grasa
corporal total. Tambin se puede utilizar el valor de uno o varios de los pliegues para ser
comparados con tablas de referencia segn la edad y el sexo del individuo; se
considerara obesidad cuando la medicin es superior al percentil 90, y por debajo del
percentil 5 como desnutrido.
Percentiles (mm)
Edad (aos)
5 10 25 50 75 90 95
11-12 6 6 8 10 14 18 21
12-13 6 6 8 11 16 20 24
13-14 6 6 8 11 14 22 28
14-15 5 5 7 10 14 22 26
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15-16 4 5 7 9 14 21 24
16-17 4 5 6 8 11 18 24
17-18 4 5 6 8 12 16 22
18-19 5 5 6 8 12 16 19
19-25 4 5 6 9 13 20 24
25-35 4 5 7 10 15 20 22
35-45 5 6 8 12 16 20 24
45-55 5 6 8 12 16 20 23
55-65 6 6 8 12 15 20 25
65-75 5 6 8 11 14 19 22
75-80 4 6 8 11 15 19 22
Percentiles (mm)
Edad (aos)
5 10 25 50 75 90 95
11-12 7 8 10 13 18 24 28
12-13 8 9 11 14 18 23 27
13-14 8 8 12 15 21 26 30
14-15 9 10 13 16 21 26 28
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15-16 8 10 12 17 21 25 32
16-17 10 12 15 18 22 26 31
17-18 10 12 13 19 24 30 37
18-19 10 12 15 18 22 26 30
19-25 10 11 14 18 24 30 34
25-35 10 12 16 21 27 34 37
35-45 12 14 18 23 29 35 38
45-55 12 16 20 25 30 36 40
55-65 12 16 20 25 31 36 38
65-75 12 14 18 24 29 34 36
Consiste en la medicin del permetro del brazo a la misma altura que en la medicin de
los pliegues tricipital y bicipital. El permetro mide el compartimiento graso y muscular del
brazo, de manera que es posible calcular el permetro muscular (PMB) restando al
permetro total (PTB) el valor del pliegue tricipital:
Permetro muscular del brazo = permetro total del brazo - pliegue tricipital.
Sin embargo no es del todo exacto, ya que no tiene en cuenta el grosor del hmero.
Permetro cintura
(cm)
ndice Cintura / Cadera (ICC)
=
Permetro cadera
(cm)
Cada vez hay ms evidencias que demuestran que la determinacin aislada del
permetro de la cintura (en cm) tiene un valor similar al ICC. sta medicin es ms
sencilla y se correlaciona muy bien con los ndices antes mencionados y la grasa
corporal total. Los valores de referencia varan segn la raza y poblacin.
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CONCLUSIONES:
Luego de realizar la prctica se llegar a la conclusin, que es muy importante la
actividad fsica, la alimentacin saludable (buenos hbitos alimenticios), para prevenir el
sobrepeso que se asocia significativamente con: diabetes, hipertensin arterial,
hipercolesterinemia, hipretrigliciremia, infartos de miocardio, evento cerebro vasculares,
insifiencia renal, entre otros.
BIBLIOGRAFIA:
1. https://es.slideshare.net/andribetha3/indice-de-masa
2. https://www.infonutricion.com/estado-nutricional-exploracion-fisica-medidas-
antropometricas.html
3. http://umh1544.edu.umh.es/wp-content/uploads/sites/63/2013/02/Medidas-
antropom%C3%A9tricas.pdf
4. http://scielo.isciii.es/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0212-
16112008000300010