a)

b)
c)
d)
e)

El proceso de separacin en GC
Inyeccin de las muestras
Detectores
Preparacin de muestra
Puesta a punto de un mtodo en GC

En GC se hace pasar el analito en forma

gaseosa a travs de la columna, arrastrado
por una fase mvil (gas portador)

La columna debe estar lo

suficientemente caliente para
que los analitos alcancen una
presin de vapor adecuada y
eluyan en un tiempo razonable.

El detector se mantiene a una T

ms elevada que la columna, de
forma que los analitos se
encuentren en forma gaseosa.

La cromatografa de gases es una tcnica

cromatogrfica en la que la muestra se
volatiliza y se inyecta en la cabeza de una
columna cromatogrfica.

La elucin se produce por el flujo de una fase

mvil de gas inerte. A diferencia de los otros
tipos de cromatografa, la fase mvil no
interacciona con las molculas del analito; su
nica funcin es la de transportar el analito a
travs de la columna.

Gas de acarreo

Controladores de flujo

Inyectores

Columnas

Detectores

Sistema de datos

El gas portador o fase mvil, es el que transporta

a los compuestos a travs de la columna

Debe ser qumicamente inerte, puro (>99%),

seco y se aconseja colocar un filtro de carbn
activo y una trampa para humedad antes de la
entrada del gas al instrumento

El tipo de gas acarreador depende de la

velocidad requerida para el anlisis y el tipo de
detector a emplear. Los ms utilizados son helio,
nitrgeno, hidrgeno o una mezcla argn con 5
% de metano

Con ciertos tipos de columnas y detectores, se

requiere el uso de un gas de complemento en el
detector (make-up).

El make-up, es un gas de arrastre adicionado

al efluente de la columna antes de que pase al
detector.

El sistema del gas portador, por lo general

contiene uno o varios tamices con el objeto de
eliminar humedad, hidrocarburos y oxgeno.

Los caudales utilizados en las columnas

empacadas oscila entre 25 y 90 ml/min y de 1 a
2 ml/min en las capilares.

Split

Splitless

Modo con divisin para analitos en concentraciones

altas
Modo sin divisin para analitos en concentraciones
traza
Instalacin de una columna capilar en el inyector

Inyeccin sobre la columna

On-column

Vaporizacin de T programada (PTV)

 Eficacia de la columna requiere que la

muestra sea de un tamao apropiado

Es necesario que la muestra sea como un

tapn de vapor

La inyeccin lenta de muestras demasiado

grandes provoca un ensanchamiento de las

bandas y una mala resolucin

En general, se inyecta la muestra con una

micro jeringa a travs de un septum.

El septum, esta situado en una cmara de

vaporizacin instantnea en la cabeza de la
columna.

La cmara debe estar a 50 C por encima

del punto de ebullicin del compuesto ms
voltil.

Split: Mtodo de rutina

0.1-1% de la muestra va a la columna
Resto a desperdicios
Splitless: Toda la muestra va a la columna
Ideal para anlisis cuantitativo
Solo para anlisis de trazas o muestras de baja
concentracin
On-column: Para muestras que se descomponen por
encima de su punto de ebullicin- portal de inyeccin
no calentado
La columna debe encontrarse a una T baja
para condensar la muestra en una banda
estrecha
Al calentar la columna la cromatografa
comienza.

Es donde ocurre la separacin y es el corazn de un

cromatgrafo.

Columnas empacadas de: cobre, aluminio, acero

inoxidable, vidrio o tefln.
Columnas capilares de slice fundida recubiertas con
poliimida.
El empaque puede ser un slido, un lquido o un slido
recubierto por un lquido.

Empacadas o rellenas

Las
dimensiones
de
una
columna
empacada oscilan entre:
- 2 y 4.6 mm de dimetro interno (DI) y de
1/8
a 1/4 de pulgada de dimetro externo
(DO).
- Longitud entre 6 y 30 pies para las ms
comunes

Superficie especfica grande (1 a 20 m2/g),

un ejemplo de stas son la serie
Chromosorb (tierra de diatomeas) (G, P y
W).

 Soporte

slido
(diatomita),
de
partculas
porosas
y
uniformes
(10mm), libre de xidos catalticos
(causan descomposicin parcial de
la muestra).

Fase

estable trmica y qumicamente.

Tubo abierto capilar

W.C.O.T. (Wall Coated Open Tubular)

P.L.O.T. (Porous layer Open Tubular)

S.C.O.T. (Support Coated Open Tubular)

F.S.O.T. (Fused Silica Open Tubular)

Longitud de la Columna
Dimetro de la Columna (1/4", 1/8", 1/16" de
dimetro externo)
Tamao de las partculas del empaque
Naturaleza de las fases
Grosor de fase estacionaria
Temperatura de la columna
Velocidad del gas portador
Cantidad de muestra inyectada

SKOOG,Douglas y LEARY,James. Anlisis Instrumental. 4 Edicin. McGraw-Hill. Espaa.1994

Polidimetilsiloxano

Polietilenglicol

SKOOG,Douglas y LEARY,James. Anlisis Instrumental. 4 Edicin. McGraw-Hill. Espaa.1994

Detectores

Empleado frecuentemente para

compuestos halogenados

Empleado para hidrocarburos, poco

sensible a compuestos muy oxidados

Consiste de una llama de

hidrgeno-aire y una placa
colectora. El efluente de la
columna pasa a travs de la
llama,
que
ioniza
las
molculas orgnicas. Los
iones se recogen en un
electrodo de polarizacin
negativa y producen una
seal elctrica. El FID es
extremadamente sensible y
es
el
detector
ms
ampliamente utilizado, su
desventaja es que destruye
la muestra.

Detector de Conductividad trmica, TCD

Utilizado particularmente con columnas empacadas,

detecta H2O, CO, CO2 e H2. Mide la conductividad trmica
de un analito en un gas acarreador.
La velocidad de prdida de calor de un cuerpo caliente hacia
un cuerpo ms fro es proporcional a la conductividad trmica
del gas que separa estos cuerpos.

http://www.chem.vt.edu/chem-ed/ms/ms-intro.html

Estudia las masas de tomos, molculas o

fragmentos de molculas.

Las especies desorbidas de fases condensadas

se ionizan, los iones se aceleran en un campo
elctrico y se separan segn su relacin m/z.

Grfico que representa

detector frente m/z.

la

respuesta

del

Detecta bajas Co de analito

Da informacin cualitativa y cuantitativa de

los compuestos que eluyen en la columna

Se utiliza para estudiar la secuencia de los

aminocidos en protenas, de cidos
nucleicos en ADN y estructuras complejas de
hidratos de carbono

La operacin general del espectrmetro de masas es:

a) crea iones en fase gaseosa

b) separa los iones en base a su relacin (m/z).
c) mide la cantidad de iones de cada relacin (m/z).

http://www.chem.vt.edu/chem-ed/ms/ms-intro.html

Una vez ionizadas las molculas, estas pasan al

analizador de iones el cual los transporta hacia el
detector: Existen diferentes tipos de analizadores los
que son utilizados de acuerdo a las necesidades.
Dentro de los analizadores podemos citar, la trampa de
iones, el sector magntico, el tiempo de vuelo, el

cuadrupolo, etc.

http://www.chem.vt.edu/chem-ed/ms/ms-intro.html

Detector

Lmite de
deteccin g

Rango lineal

Comentarios

Tratamiento
soluto

TCD

10-5-10-6

103-104

Detector
universal

No
destructivo

FID

10-12

106-107

Detector
universal

Destructivo

ECD

10-14

102-103

Detector
selectivo

No
destructivo

FPD

10-13

102

Detector
Selectivo S,P

Destructivo

NPD

10-8-10-14

105-107

Detector
Selectivo N,P

Destructivo

MSD

10-12

Segn tipo
detector

Detector
universal

Destructivo

Mtodo
sencillo
de
extraccin de lquidos,
aire y lodos.

Componente clave es
una fibra de Si fundida
recubierta de una fina
pelcula de un lquido no
voltil.

Tcnica utilizada en Q. A.
compuestos
qumicos
para
identificacin.

para extraer
su
posterior

Desarrollada a principios de los 90 por el equipo

del Dr. Pawliszyn en la Universidad de Waterloo.

Es novedosa y relativamente econmica.

Se puede implementar tanto en el laboratorio

como en el campo.

La extraccin se realiza de manera rpida.

No requiere el uso de solventes.

Partes por trilln (ppt).

La SPME posee un gran potencial en

aplicaciones en el campo: el muestreo se
puede llevar a cabo en lugares remotos sin
necesidad de que el personal tenga un alto
nivel de experticia.

SPME: When placed into the

headspace gas or a liquid, the
compounds adsorb onto the fibre

SPME Operation
Es una fibra cubierta con una fase que sirve para la
extraccin. Puede estar constituida de un polmero
liquido o un absorbente slido. Esta capa puede
extraer diferentes tipos de molculas, voltiles o no
voltiles, de diferentes tipos de medios en fase
lquida o gaseosa.

El segundo paso es la desorpcin de los

compuestos extrados.
Luego de la extraccin, la fibra de SPME es
transferida al puerto de inyeccin del
instrumento de separacin (generalmente un
GC), donde la desorpcin de las molculas
toma lugar.
La GC permite cuantificar los compuestos
separados y en algunos casos identificarlos,
pero
si
el
anlisis
lo
requiere,
la
espectrometra de masas (EM) es ms
cualitativa.

JENNINGS, Walter. Analytical Gas Chromatography. Academic

Press. USA. 1987

McNAIR, Harold M. and BONELLI, Ernest J. Basic Gas

Chromatography. 5th Edition. Varian Aerograph. USA. 1969

SKOOG,Douglas y LEARY,James.
Edicin. McGraw-Hill. Espaa.1994

WILLARD, H. H.; MERRITT, L. L. and DEAN, J. A. Instrumental

Methods of Analysis. 5th Edition. D. Van Nostrand. USA. 1974.

Anlisis

Instrumental.

http://www.chem.vt.edu/chem-ed/ms/ms-intro.html