Protenas Plasmticas

Protenas Plasmticas
1. Protenas plasmticas. Funciones generales de las protenas del plasma.
Regulacin de la presin onctica.
2. El metabolismo de las protenas plasmticas. Sntesis, distribucin y
catabolismo.
3. Mtodos de anlisis cualitativo de protenas plasmticas: Electroforesis
4. Proteinograma normal. Protenas ms representativas.
5. Alteraciones tpicas del proteinograma
6. Anlisis cuantitativo de protenas plasmticas. Medida de la protena
total y protenas especficas.

Funciones generales de las protenas plasmticas

El plasma, fraccin de protenas solubles de la sangre
El suero, fraccin de protenas solubles que aparecen tras la retraccin
del cogulo sanguneo. Carece de fibringeno
Funciones:
9Transporte de compuestos endgenos/exgenos poco solubles
en agua.
9Regulacin de la presin onctica y el balance intra/extravasal
de agua.
9Respuesta inflamatoria y control de la infeccin.

El fenmeno de la presin osmtica por protenas

La difusin de molculas a travs de una
membrana, puede condicionar su paso

Membrana
semi-permeable

Regulacin de la presin onctica y el balance intra/extravasal de agua

Presin
osmtica
debida a
protenas
(onctica)

P1>P2

P1<P2

Balance proteico
Sntesis:
La sntesis de la mayor parte de las
protenas plasmticas tiene lugar en el
hgado
Los linfocitos B son los responsables de
la sntesis de las inmunoglobulinas
Degradacin/Prdidas.
El catabolismo tiene lugar en muchas
distintas clulas (endoteliales, fagocitos
mononucleares, fibroblastos cutneos)
Prdidas por filtracin glomerular
Prdidas a travs de la pared intestinal

Cundo y cmo son sintetizadas las protenas que son

secretadas por las clulas...?

Cmo son exportadas dichas protenas al exterior de las clulas

Las protenas destinadas al plasma son sintetizadas de manera singular

Los grupos funcionales cidos y bsicos presentes en las cadenas laterales de

los aminocidos, al disociarse en el agua, confieren a la protena cargas
positivas y negativas

+
+

R-COO- + H3O+
R-COOH+H2OR
R-NH2+H2OR
R-NH3+ + OHLa carga neta de una protena depende de la suma de cargas de ambos signos

La carga elctrica de la protena depende del grado de disociacin de sus

grupos funcionales cidos y bsicos,
bsicos lo que depende del pH.
pH cido

pH bsico
+
+

+
+

R-COOH+H
COOH 2O R-COO + H3O+
R-NH2+ H3O+ R-NH3+ + OH-

+
+

+
+

R-COOH+H2O R-COO- + H3O+

R-NH2+ H3O+ R-NH3+ + OH-

Sometidas a un campo elctrico, las protenas son

capaces de moverse en funcin de su carga y tamao
La movilidad electrofortica es proporcional al cociente: Carga/Masa
Aplicacin de la muestra

Proteinograma normal del suero

Albmina

1 2

Fraccin de albminas
Albmina srica
Banda mayoritaria (53-66%) del total del proteinograma
Valores normales:
Recin nacidos: 2.9-5.5 g/100ml
Nios: 3.8-5.5
Adultos (V): 3.3-6.1; (H): 2.7-5.6

PrePre-albmina (retinol binding protein)

protein)
Mayor movilidad electrofortica.
Rpido recambio (18-45 mg/100ml)
Indicador de estado nutricional

Fraccin 1 globulinas
Aumenta durante los procesos inflamatorios agudos, neoplasias,
infartos y necrosis (1.9-4.1% del total del proteinograma)
1 glicoprotena cida
1 antitripsina
1 antiquimiotripsina
1 fetoprotena (<2 mg/100 ml)

Fraccin 2 globulinas
Aumenta en el sndrome nefrtico, ictericia obstructiva, tuberculosis,
inflamacin crnica (7.7-12.3%)
2 macroglobulina (150-420 mg/100ml; Sndrome nefrtico)
Ceruloplasmina (20(20-40 mg/100ml;
mg/100ml; transporte Cu2+; enf.
enf. Wilson)
Haptoglobina (60(60-270 mg/100ml),
mg/100ml), transporte Hb;
Hb; aumenta en
inflamacin, neoplasias; disminuye hemlisis intravascular,
intravascular, anemia
perniciosa
Protena C reactiva (<0.6 mg/100 ml). Inflamaciones e infecciones

Fraccin globulinas
Aumento moderado en sndrome nefrtico, ictericia obstructiva, cirrosis,
tuberculosis, inflamacin crnica (7.6-13.0%)
Fibronectina (25-40 mg/100ml; aumenta en sndrome nefrtico,
colestasis, neoplasias. Disminuye en politraumatismos, quemaduras
extensas, sepsis)
Transferrina (200(200-400 mg/100ml;
mg/100ml; transporte Fe; aumenta en anemias)
Transcobalamina (900 pmol/L; transporte de B12).
Complemento (C3, C4) (85-190; 12-36 mg/100 ml). Aumentan en
procesos inflamatorios agudos. Disminuyen en reacciones autoinmunes.

Fraccin globulinas
La fraccin de las gammaglobulinas supone entre 10.3 y 20.8% del total
de protenas del suero. Se pueden detectar IgG (2- 4mg/dl), IgM
(150mg/dl), IgA (0,15 0,6mg/dl), e IgE (30g/dl)
IgM aparece aumentada tras procesos agudos virales
IgA aumenta en enfermedades intestinales autoinmunes (Crohn
(Crohn))
IgG aumenta en enfermedades autoinmunes (lupus eritematoso,
eritematoso, hepatitis
crnica activa, infecciones bacterianas crnicas)
IgE est aumentada en enfermedades con un componente alrgico
(eczema, asma, infeccin parasitaria)

Principales alteraciones del proteinograma

Hipoproteinemia:
Hipoproteinemia: hipoalbuminemia
Deficiencias: 1 antitripsina, inmunoglobulinas, complemento
Paraproteinemia:
Paraproteinemia: presencia de protenas anormales o en cantidad
excesiva (reaccin de fase aguda, mielomas, macroglobulinemia,
linfomas B, etc.).

Principales alteraciones del proteinograma (I)

1 2

Normal

Reaccin inflamatoria
(fase aguda)

Reaccin inflamatoria
(crnica)

La reaccin de fase aguda

Cambios en la sntesis heptica de protenas plasmticas, como consecuencia de la regulacin
de genes inducida por citoquinas inflamatorias (IL-6, IL-1, TNF-)

Aumento muy importante (>5x): CRP, SAA

Aumento moderado (1(1-5x): 1 antitripsina, 1 glicoprotena
cida, 1 antitripsina, ferritina, inmunoglobulina G, complemento
C3/C4, ceruloplasmina, 1 antiquimiotripsina
Pocos cambios (1(1-2x): Fibringeno, Haptoglobina
Disminucin: Albmina, Transferrina

10

Principales alteraciones del proteinograma (II)

1 2

Normal

Sndrome nefrtico

Cirrosis heptica

Alteraciones de la fraccin de globulinas

Las hipergamaglobulinemias policlonales se manifiestan en
inflamaciones crnicas (hepatitis crnica, cirrosis) e infecciosas
(brucelosis, lepra, endocarditis), y ciertas enfermedades autoinmunes
(lupus).
Las hipogamaglobulinemias se presentan en el sndrome nefrtico,
mieloma con proteinuria Bence-Jones, gran parte de las leucemias
crnicas, sndrome de Cushing. Existen tambin a-gamaglobulinemias
Gamapatas de clulas B (Plasmacitomas, mieloma mltiple)
- Macroglobulinemia de Waldestrm
Patolgico
Normal

11

Inmunodeficiencias asociadas a clulas B

1. Agamaglobulinemia infantil asociada al
cromosoma X (enfermedad de Bruton; 1/100.000)
2. Hipogamaglobulinemia transitoria del recin
nacido (clulas T-helper)
3. Deficiencias en la produccin del anticuerpo
* IgA : la ms comn
* IgM : rara
* IgG : muy infrecuente

Principales alteraciones del proteinograma (III):

(paraproteinemias)
1

IgA
IgG
IgG
Waldestrm (IgM)

12

Principales alteraciones del proteinograma:

(deficiencias)

Alb 1

Dficit 1
antitripsina

Normal

Principales alteraciones del proteinograma:

(albmina)
Alb

Albmina/ bilirrubina
Bisalbuminemia
Bisalbuminemia
Analbuminemia

13

Alteraciones del proteinograma: (albmina)

Causas de la hipoalbuminemia:
hipoalbuminemia:
Artefactual (por dilucin):
Error en la toma (miembro infundido)
Excesiva administracin parenteral de lquidos

Redistribucin:
Posicional (de pie, vs.decbito)
Aumento de la permeabilidad capilar (postoperatorio, shock)
Retencin de lquido (edema)

Balance negativo:
Menor sntesis (enfermedad crnica heptica, malnutricin, sndromes de
malabsorcin)
Mayor catabolismo (muchos procesos patolgicos con balance negativo de N2)
Prdidas (enfermedad renal, quemaduras extensas, epidermolisis, enteropatas)

Alteraciones del proteinograma: (albmina)

Consecuencias de la hipoalbuminemia:
hipoalbuminemia:
Edema:
Extravasacin de lquido, edema

Transporte:
Muchos compuestos endgenos van unidos a albmina (Ca2+, cidos grasos)
Muchos frmacos se unen a albmina. Puede aumentar la fraccin libre de
frmaco, y con ello un exceso de efecto farmacolgico.
Desplazamiento de un frmaco por otro, y aumento de la concentracin libre
plasmtica

14

Medida cuantitativa de protenas plasmticas

1. Reaccin de biuret. Valores normales de protena total
(6-8 g/100ml).
2. Medida de protenas especficas por mtodos
inmunolgicos (nefelometra, inmunodifusin radial)

La Respuesta de Fase Aguda

15

Citoquinas e
Inflamacin

Virus

Bacterias
LPS

Necrosis
?

ILIL-6
ILIL-1
TNF
TNF

IFN

Monocitos
Macrofagos

ILIL-1
ACTH

TNF
TNF

Fibroblastos (F)
Endoteliales (E)
Queratinocitos (K)

IL6
K

Glucocorticoides

HGF, LIF

Protenas de Fase Aguda

Biochem. J. 265, 621-636 (1990).

Aparicin secuencial de citoquinas durante la inflamacin

Patients
Controls

Infarto de
miocardio

IL-1

1
0
5

3000

2500

IL-6

2
1
0

c p m /m g p ro te in

2000
1500
1000
500

12

16

Time (hours)

20

24

IN F

CR
IN F -M

0
N -M C

TNF-

Relative changes of cytokines

Am. J. Physiol. 269, R229-R235 (1995).

16

Inhibition (%) - Fold increase

La Interleukina 6 es la seal inflamatoria ms

potente para los hepatocitos humanos
25
20

25

rhILrhIL-6

15
10

25

rhILrhIL-1

15
5

-5

-5

-5

-15

-15

-25

-25

rhTNF

15

-10
-15
-20

SAA CRP HTG ACH FBN

AAT AGP AMG FNT

TRF

ALB

-35

SAA CRP HTG ACH FBN

AAT AGP AMG FNT

TRF

ALB

-35

SAA CRP HTG ACH FBN

AAT AGP AMG FNT

TRF

ALB

Fundamento de la inmunodifusin radial

1. Preparacin de la placa
2. Adicin de agar con anticuerpo
3. Aplicacin de las muestras
4. Difusin

Patrn 4

Patrn 3
Problema
Patrn 2

Patrn 5
Patrn 1

17

18