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APURMAC
FACULTAD DE INGENIERA
ESCUELA ACADMICO PROFESIONAL DE INGENIERA
AGROINDUSTRIAL
ANTEPROYECTO
DE TESIS PARA OPTAR
AL TITULO DE INGENIERO AGROINDUSTRIAL
Co-asesor
EXTRACCIN Y
CARACTERIZACIN DE
PECTINA A PARTIR DE LA
CSCARA DE TUNA (Opuntia
ficus.)
NDICE
Seccin
Pgina
CAPTULO I
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
1.1. DEFINICIN Y FORMULACIN DEL PROBLEMA
1
1.1.1. Definicin del problema
1
1.1.1.2. Formulacin del problema 1
1.1.2.
JUSTIFICACIN E IMPORTANCIA DE LA INVESTIGACIN
1.1.1. Justificacin de la investigacin2
1.1.1. Importancia de la investigacin3
1.3. LIMITACIONES
CAPTULO II
OBJETIVOS
.1. OBJETIVO GENERAL
3
.2. OBJETIVOS ESPECFICOS
CAPTULO III
MARCO REFERENCIAL
.1. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIN
4
.2. MARCO TERICO 7
3.2.1.Tuna
7
3.2.1.1.
Origen de la tuna
8
3.2.1.2.
Clasificacin taxonmica
8
3.2.1.3.
Composicion qumica de la cascara de tuna 8
.2.2. Generalidades de la fibra diettica
9
3.2.2.1.
Clasificacin de la fibra diettica
9
3.2.2.1.1.
Fibras insolubles
9
3.2.2.1.2.
Fibras solubles 10
.2.2.2. Efectos fisiolgicos y beneficiosos de fibra diettica sobre la salud
.2.3. Generalidades de la pectina
10
.2.3.1. La pectina y sus orgenes 10
.2.3.2. Localizacin, composicin y estructura de la pectina
10
.2.3.3. Evolucin de la pectina en la madurez del fruto 12
.2.3.4. Clasificacin de las sustancias ppticas 14
.2.3.5. Propiedades de la pectina 15
3.2.3.5.1.
Enlaces de calcio
15
3.2.3.5.2.
La viscosidad 15
3.2.3.5.3.
Acidez 15
3.2.3.5.4.
Peso molecular 16
3.2.3.5.5.
Solubilidad en agua
16
3.2.3.5.6.
Hinchamiento 16
3.2.3.5.7.
Precipitacin 16
.2.3.6. Gelificacin de la pectina 16
.2.3.7. Grado de esterificacin
18
3.2.3.7.1.
Pectinas altamente metiladas( HM) 18
3.2.3.7.2.
Pectinas de baja metilacin(LM)
19
.2.3.8. Caracterizacin de la pectina
22
3.2.3.8.1.
Caracterizacin qumica de la pectina 22
3.2.3.8.2.
Caracterizacin fsica de la pectina
24
3.2.3.8.3.
Caracterizacin funcional de la pectina 26
3.2.3.8.4.
Espectroscopa infrarroja(IR) 27
10
30
33
CAPTULO IV
HIPTESIS Y VARIABLES
.1. FORMULACIN DE HIPTESIS 34
4.1.1. Hiptesis general
34
4.1.2. Hiptesis especificas
34
.2. VARIABLES Y DEFINICIN OPERACIONAL DE VARIABLES:
VARIABLE INDEPENDIENTE, DEPENDIENTE, INTERVINIENTE Y/O EXTRAA
34
4.2.1. Indicadores
35
4.2.1.1.
ndices
35
CAPTULO V
METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN
.1. TIPO Y NIVEL DE INVESTIGACIN
36
5.1.1. Tipo
36
5.1.1. Nivel
36
.2. MTODO Y DISEO DE INVESTIGACIN
36
5.2.1.Mtodo de investigacin 36
5.2.2.Diseo de investigacin 38
.3. POBLACIN
38
5.3.1. Caractersticas de la poblacin 38
5.3.2. Ubicacin espacio-temporal
38
.4. MUESTRA 38
5.4.1. Tcnicas de muestreo 38
5.4.2. Tamao y clculo del tamao 38
.5. DESCRIPCIN DE LA EXPERIMENTACIN
39
5.5.1. Caractersticas de los experimentos
39
.6. TCNICAS E INSTRUMENTOS DE RECOLECCIN DE DATOS
40
5.6.1. Etapas de la experimentacin 40
5.6.1.1.
Etapa I : Recoleccin y transporte de la materia prima
40
5.6.1.2.
Etapa II : Preparacin de la muestra
40
5.6.1.3.
Etapa III : Anlisis organolptico y proximal de la cascara de tuna 40
5.6.1.4.
Etapa IV : Extraccin de pectina a partir de la cascara de tuna
40
5.6.1.1.1.
Descripcin de las operaciones para la extraccin de pectina a
partir de cascara de tuna
44
.6.1.5. Etapa V : Caracterizacin de pectina 45
5.6.1.5.1.
Rendimiento 45
5.6.1.5.2.
Caracterizacion qumica de la pectina
45
5.6.1.1.1.1. Determinacin de Humedad
45
5.6.1.1.1.2. Determinacin de cenizas totales
45
5.6.1.1.1.3. Determinacin del peso equivalente
45
5.6.1.1.1.4. Determinacin del contenido de metoxilos
46
5.6.1.1.1.5. Determinacin del acido galacturonico 46
5.6.1.1.1.6. Determinacin del grado de esterificacin
46
5.6.1.1.1.5.3. Caracterizacin fsica de la pectina 47
5.6.1.1.1.1. Determinacin del grado de pectina
47
5.6.1.1.1.2. Determinacin del tiempo de gelificacin
48
5.6.1.1.1.3. Viscosidad
48
5.6.1.1.1.5.4. Caracterizacin funcional de la pectina
49
56
CAPTULO VI
ADMINISTRACIN DEL ANTEPROYECTO
.1. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
56
.2. RECURSOS INSTITUCIONALES, HUMANOS Y FINANCIEROS
BIBLIOGRAFA UTILIZADA 60
ANEXOS 62
Anexo 1. ndice tentativo para la tesis
62
Anexo 2. Bibliografa propuesta para la tesis
63
Anexo 3. Matriz de consistencia del proyecto de investigacin
65
Anexo 4. Determinacin de humedad
66
Anexo 5. Determinacin de cenizas totales 66
Anexo 6. Determinacin de protenas
67
Anexo 7. Determinacin de fibra cruda
68
Anexo 8. Determinacin de carbohidratos 69
Anexo 9. Determinacin de grasa total
69
Anexo 10. Preparacin de jalea de prueba 70
Anexo 11. Determinacin de acidez titulable
71
Anexo 12. Determinacin de azucares reductores 71
Anexo 13. Determinacin de azucares totales
72
Anexo 14. Determinacin de ndice de madurez
73
Anexo 15. Distintos hidrocoloides de uso alimentario
74
57
CAPTULO I
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
1.1. DEFINICIN Y FORMULACIN DEL PROBLEMA
1.1.1.DEFINICIN DEL PROBLEMA
El uso de la pectina est enfocado principalmente a la industria de alimentos para la produccin de
mermeladas, dulces bocadillos, postres, helados entre otros. Actualmente, la industria mundial de
extraccin de pectinas est basada en los desechos de ctricos de las empresas jugueras y las grandes
empresas productoras de pectinas estn ubicando sus plantas en pases productores de ctricos, dentro
de las cuales destacan Mxico y Brasil, por otro lado los precios de las pectinas estn en continuo
ascenso y las grandes empresas de hidrocoloides est incorporando pectina a su lista de productos. No
obstante la industria mundial de pectinas han explotado los ctricos y pomceos como nica materia
prima, siendo que nuevas fuentes de pectinas pueden ser atractivas desde el punto de vista econmico
El presente trabajo de investigacin busca plantear alternativas para el aprovechamiento integral de la
tuna usando procesos de extraccin de polisacridos viscocificantes y/o gelificantes de su cascara. En
particular, el inters de este estudio es desarrollar procesos de extraccin acuosa de pectinas de la
cascara de tuna de la variedad amarilla y evaluar las propiedades fisicoqumicas y funcionales de las
soluciones y/o geles.
El proceso de extraccin de pectina a partir de las cascaras de tuna amarilla usando hidrolisis acida
podra ofrecer un alto rendimiento, sin embargo, la clasificacin o el tipo de planta de la tuna y por
ende la cantidad de pectina, depende de las diferentes variables del cultivo como la composicin de la
tierra, la intensidad y tiempo de exposicin a la luz solar, y la familia gentica a la cual pertenece. Por
esto es necesario realizara una investigacin que determine la cantidad y calidad de pectina extrada a
partir de la cascara de la tuna cultivado en la regin Apurmac.
1.1.1.2.
FORMULACIN DEL PROBLEMA
a. Problema central
Cmo influyen los parmetros de extraccin de pectina a partir de la cascara de la tuna
(Opuntia ficus) por hidrlisis cida en el rendimiento y en sus caractersticas fisicoqumicas y
funcionales?
b. Problemas especficos
Cmo influye el pH de la solucin acida en el proceso de extraccin de pectina a partir de
cscara de tuna (Opuntia ficus) en el rendimiento y en sus caractersticas (fisicoqumicas y
funcionales)?
Cmo influye la temperatura de la solucin cida en el proceso de extraccin de pectina a
partir de cscara de tuna (Opuntia ficus) en el rendimiento y en sus caractersticas
(fisicoqumicas y funcionales)?
Cmo influye el tiempo de la solucin cida en el proceso de extraccin de pectina a partir de
cscara de tuna (Opuntia ficus) en el rendimiento y en sus caractersticas (fisicoqumicas y
funcionales)?
1.1.2.
1.2.1.
Las empresas procesadoras de frutales (Ministerio de produccin) y los mercados locales de Abancay
en pocas de produccin de tuna generan grandes cantidades de residuos (cascaras) que se convierten
en un problema que representa un problema ambiental y sanitario que propicia la proliferacin de
insectos, hongos, bacterias ,enfermedades y olores de descomposicin provocadas por el incremento
de residuos en descomposicin., pero esto a su vez son usados como alimentos para bovinos por su
alto contenido en fibras y energa. Esta premisa otorga una rea de investigacin, en la cual se estudia
otros usos para estos desechos que permitan aprovecharlos de manera optima para obtener distintas
sustancias qumicas, entre ellas la pectina, tiles para la fabricacin de distintos productos en la
industria alimenticia farmacutica y de plsticos.
Sabiendo de antemano la alta demanda de pectina que se requiere para los diversos productos
alimenticios y dems aplicaciones ,surge la necesidad de desarrollar un proceso experimental a escala
laboratorio, que vislumbre de manera clara el procesamiento de pectina a partir de cascaras de tuna,
par definir por caracterizacin del producto extrados, la pectina cumple con los parmetros estndar
requeridos a nivel internacional y as posibilitar el desarrollo e implementacin de industrias piloto o a
gran escala para este procesamiento.
Esta investigacin aportara informacin nueva fomenta e incentiva el desarrollo de investigaciones
multidisciplinarias entre los programas de ingeniera qumica e ingeniera de alimentos.
Mediante esta investigacin podemos dar una nueva alternativa de produccin que fomente el
progreso de las comunidades.
El Per es un pas que no produce pectina ni sus derivados, por lo que se importa para cubrir su
demanda .La pectina es utilizada en las industrias alimentarias y farmacuticas; Est situacin crea
una dependencia tecnolgica de los pases que producen este tipo de sustancias. Aunque, existe
inversin en el desarrollo de nuevas investigaciones a nivel nacional esta no es suficiente.
En la actualidad, la produccin de tuna constituye una alternativa viable para la economa de zonas
semiridas del pas con posibilidades de uso en la industria alimentaria. Sin embargo, es un producto
perecedero cuya produccin est limitada a un periodo de tiempo muy corto por tal motivo se buscan
nuevas alternativas de uso que aumenten el valor agregado que posee este cultivo y as incrementar su
aprovechamiento integral.
Dentro de la industria de alimentos en la Regin de Apurmac se observa el incremento de empresas
que utilizan pectina en su proceso productivo (mermelada, jaleas etc.) generalmente pectina ctrica, la
pectina generalmente es importada .En Apurmac existen frutos como la tuna con contenido de pectina
que no son utilizadas industrialmente por falta de investigacin y tecnologa de extraccin y tcnicas
de caracterizacin de pectinas de la tuna producida en Apurmac. Por tanto es necesario realizar una
investigacin en la extraccin de tuna para luego analizar y evaluar la calidad de la pectina para luego
sugerir su posible industrializacin.
1.1.1.2.2.
IMPORTANCIA DE LA INVESTIGACIN
3
Esta investigacin `propone aprovechar la cascara de tuna para la extraccin y caracterizacin
fisicoqumica y funcional de pectina .Los beneficiarios con la investigacin son las personas dedicadas
a la siembra y cosecha de la tuna y todas las pequeas y medianas empresas que requieren pectina
para el procesamiento de productos agroindustriales (helados, salsas, productos espumantes.
La pectina al ser una fibra soluble y tener propiedades funcionales permitir aprovechar con mayor
nfasis la cascara de tuna y viabilizar en la inclusin de alimentos procesados y deficitarios de estos
componentes ,debido a que recientes investigaciones afirman que las dietas carentes de fibras son
responsables de alta incidencia de enfermedades gastrointestinales y cardiovasculares ;por ello
contribuir en reducir la muerte de 20 millones de personas en el ao 2016,pronostico que realizo la
Organizacin Mundial de la Salud en base a 17,5 millones de personas que murieron en 2005 y que
representa el 30 % de las defunciones mundiales(OMS,2009b).
1.3.
LIMITACIONES
Una de las principales limitaciones que se tiene es la estacionalidad del fruto de tuna producindose
una sola vez al ao, puesto que entra en floracin en los meses de agosto-noviembre, dando sus
primeros frutos en los meses de diciembre hasta las primeras semanas de abril.
En referencia al anlisis espectrofotomtrico infrarrojo que sirve para poder determinar el tipo de
pectina, la UNAMBA no cuenta con este equipo, por lo cual se proceder hacer este anlisis en los
laboratorios de la UNSAAC-Cusco mediante el financiamiento propio del investigador.
Algunos reactivos y materiales para caracterizar la pectina extrada no se encuentran disponibles en los
laboratorios de la Escuela Acadmico Profesional de Ingeniera Agroindustrial de la Unamba, lo cual
se adquirirn mediante recursos personales.
CAPTULO II
OBJETIVOS
4
.1. ANTECEDENTES DE LA INVESTIGACIN
6
Cabarcas y Henao (2012) de la facultad de ingeniera qumica de la universidad de Cartagena
realizaron una investigacin de tesis sobre Extraccin y caracterizacin de pectina a partir de las
cascaras de pltano para desarrollar un diseo general del proceso de produccin. La extraccin se
realiz mediante hidrlisis cida con HCl en diferentes condiciones de pH (1,5 y 3,0) durante 60
minutos a 60 y 80C. La calidad de la pectina extrada se evalu midiendo el contenido de humedad,
cenizas, metoxilo, acidez libre, peso equivalente y el grado de esterificacin, aplicando un anlisis por
espectroscopia de infrarrojo. El resultado de la extraccin a pH 1,5 a 80C present una composicin
mxima en base seca (23,06% p/p), pero con mayor contenido de cenizas, humedad y de coloracin
muy oscura. (1.7% y 6.8%). La pectina obtenida a pH 3,0 y temperatura 60 C fue la de mejor calidad
segn los valores de humedad y contenido de cenizas pero con el ms bajo rendimiento. Las
condiciones optimas para un equilibrio entre rendimiento y calidad son pH 1.5 a 60C debido a que
posee caractersticas competitivas dentro de su tipo (cenizas 1.3%, humedad 1%, coloracin caf
claro) para ser destinada a industria de alimentos con un alto rendimiento 18.86%. El resultado de la
espectrometra de infrarrojo para la pectina con ptimas condiciones de equilibrio entre calidad y
rendimiento, confirm que es de gelificacin rpida. Las pectinas evaluadas son de bajo metoxilo, de
acuerdo a los resultados obtenidos en el contenido de metoxilo.
Espinoza y Mndez (2011) de la Universidad Tcnica del norte Facultad de ingeniera agroindustrial
Ecuador realizaron una investigacin por tesis acerca de Extraccin de pectina de nopal por medio
acido aplicando dos niveles de temperatura ,tiempo y estados de madurez en la que plantearon que La
extraccin de la pectina a partir del nopal, fue realizada con el mtodo hidrlisis con HCL a un
pH 2 3, aplicando tres factores con dos niveles. Madurez; tierno (6 meses) y maduro (12meses),
temperatura 80- 90 C, y tiempo de extraccin; 30 60 min. En la fase experimental para la
extraccin de pectina se uso un arreglo factorial AxBxC donde el factor A corresponde al estado de
madurez, factor B temperatura de extraccin y factor C tiempo de extraccin. Las variables
evaluadas fueron: rendimiento en porcentaje, grado de esterificacin, slidos solubles, acidez libre
expresado en cidos ctricos medidos en el producto en polvo y la viscosidad evaluada en la pectina
lquida despus del proceso de concentracin. Las caractersticas del experimento fueron tres
repeticiones ocho tratamientos y 24 de unidad experimental conformadas por 10 Kg de nopal en
fresco. Para el anlisis sensorial se emple la prueba de Friedman. Se evaluaron los resultados
obtenidos y se determin que el mejor rendimiento grado de esterificacin y buenas caractersticas se
obtiene del estado de maduro (12 meses) a temperaturas bajas y tiempos mnimos de extraccin.
Gamboa (2009) de la Universidad Ncleo Anzotegui realizo una investigacin sobre
Aprovechamiento de los residuos obtenidos del proceso del despulpado del mango ( Mangifera indica
L.)de las variedades Smith,Tommy y Atkins,Haden y Bocado Para ello, se determinaron las
caractersticas fisicoqumicas de las pectinas extradas por hidrlisis cida con cido ctrico y con
alcohol isoproplico al 70% v/v para la precipitacin , en la planta; se evaluaron tres rangos de pH
(2,0, 2,5 y 3,0) y tres tiempos de hidrlisis (40, 60 y 80 minutos); De acuerdo a los resultados
conseguidos en los anlisis mencionados, las pectinas que se obtuvieron presentaron un alto grado
de esterificacin (77,64 98,73%) y metoxilacin (9,81 26,35%), el contenido de cido
anhidrournico (AUA) vari entre 31, 71 75,87%, lo cual nos revela que las pectinas no
presentan un alto grado de pureza. El rendimiento obtenido de las pectinas secas fue bajo (1,40
7,43 %) en comparacin con lo reportado en las literaturas revisadas. Con la finalidad de establecer
en las pectinas extradas que presentaron mayor rendimiento su capacidad para formar geles se
preparo una formulacin (5 g de pectina; 15 g de azcar y 80 g de pulpa de mango) lo que
permiti la gelificacin de las tres pectinas extradas. La pectina extrada a pH 1,5 y tiempo de
extraccin 80 minutos en hidrlisis cida present el mayor rendimiento en % de pectina seca. Sin
embargo, las pectinas conseguidas de los ensayos a pH 2,0 y tiempos de hidrlisis de 40 y 80
7
minutos, resultaron las que presentaron mayores caractersticas favorables al compararlas con las
especificaciones del (FCC) para pectinas comerciales.
Ferreira y Peralta(1995) publicaron un artculo cientfico en la Revista colombiana de ciencias
Qumico- Farmacuticas sobre Obtencin y caracterizacin de pectina a partir de desechos
industriales de mango(cascara)en la cual a provecharon los desechos industriales del procedimiento
del mango comn (Manguifera indica)se extrajo la pectina a nivel de planta piloto a diferentes valores
de pH( 3,2;3,4;3,6) y tiempo de hidrlisis (45;60,75 min).Luego se determino su calidad por
determinaciones de cenizas, acidez libre ,peso equivalente, grado de esterificacin, viscosidad y
comportamiento reolgico, contenido de AUA, calcio, magnesio, hierro y grado de gelificacin .Las
mejores condiciones de acuerdo a la calidad fueron pH de 3,2 y 75 minutos de hidrlisis. Este trabajo
fue patrocinado econmicamente por la OEA y Colciencias.
Linares (2009) de la facultad de industrias alimentarias UNSCH-Ayacucho realizo una investigacin
por tesis acerca de la Obtencin y caracterizacin de pectina en frutas producidas en Ayacucho en la
cual la extraccin se realizo con HCL sobre la cascara de naranja (Citrus sinensis) variedad valencia,
nspero (Mespilus germnica) y manzana criolla (Pyrus malus).Segn los resultados se determina que
la mejor extraccin de pectina de la cascara de naranja, nspero y manzana se da a
pH:1,8;1,6;1,7;mientras a una relacin materia prima /agua acidulada fue 1/6 en todos los casos el
tiempo de extraccin de naranja, nspero y manzana fue de (45,60,50)min,
humedad(7.360%;9.095%;6.315%),ceniza(1.465;3.565;1.542)
el
peso
equivalente
fue
de(1731.3;1750.50;1647.20)g/eq respectivamente, l contenido de acido galacturonico fue de
(82.40%;79.23%;75.10%) el porcentaje de esterificacin fue de (64%;65%;68%),el contenido de
metoxilo fue(8.25;10.05;7.9),el grado de pectina(140;160;130), el tiempo de gelificacin fue de
(3.5;1.30;4)min, la espectrofotometra de IR confirmo que la pectina de la cascara de naranja, nspero
y manzana tiene alto contenido de metoxilo.
Rondan (2010) de la facultad de ingeniera agroindustrial UNAMBA-Apurmac realizo una
investigacin por tesis sobre Extraccin y caracterizacin de pectina a partir de la pulpa del nspero de
palo (Mespilus germnica L.).Se utilizo el mtodo hidrlisis acida las variables de extraccin fueron
pH (1.5;2.5;3.5),temperatura (65;75;86),tiempo(30;40,50)min se someti al anlisis proximal
donde se obtuvo 72.68 % de humedad, pH 3.50,acidez titulable 0.76 % de azucares reductores,4.2%
azucares totales, Brix 5.3.sobre la caracterizacin fisicoqumica se obtuvo como resultados:
contenido de metoxilos de 5.52%(pectinas de bajo metoxilo),porcentaje de acido
galacturonico(%AGA)de 74.24% 65SAG.Por otro lado la caracterizacin funcional de la pectina fue
capacidad de adsorcin de agua(CAA)de 3.89g de agua/g de pectina, capacidad de adsorcin de
aceite(CAG) de 1.72 g de aceite/g de pectina y capacidad de hinchamiento(CH) de 4.55 ml/g de
pectina. En esta investigacin los parmetros ptimos para el rendimiento propiedades fisicoqumicas
y funcionales de la pectina fueron (pH 2,5), temperatura de 65durante 50 min por hidrlisis acida.
8
Los nopales o tuna son plantas arbustivas que pueden alcanzar de 3 a 5 m de altura crece en suelos
arenosos, calcreos, pedregosos y en tierras marginales y poco frtiles, sin embargo los suelos
altamente arcillosos y hmedos no son convenientes para su cultivo. (Abrajan, 2008; Senz et al.,
2006)
Los tallos presentan gran capacidad para almacenar agua, ya que los extremos aplanados, cncavos o
poseen abundante parnquima; en este tejido se almacenan considerables cantidades de agua lo que
permite a las plantas soportar largos periodos de sequia Chessa y Nieddu, (1997) y Ochoa (2003),
citado por Senz et al. (2006), mencionan que el fruto es una falsa baya con ovario nfero simple y
carnoso. La forma y tamao de los frutos es variable, los hay ovoides redondos, elpticos y oblongos,
con los extremos aplanados, cncavos o convexos los colores son diversos: hay frutos rojos,
anaranjados, prpuras amarillos y verdes frutas de diversos colores, lo que constituye un atractivo
adicional para los consumidores. La epidermis de los frutos es similar a la del cladodio, adems que la
cascara de los frutos difiere en mucho en grosor, incluso con areolas y abundantes gloquidios y
espinas, que a diferencia del cladodio persisten aun despus de la sobre madurez del fruto (Senz et
al., 2006).
3.2.1.1
ORIGEN DE LA TUNA
Son originarias del continente americano y se encuentran desde el norte de Canad hasta el sur de
Chile. Actualmente se han introducido en ms de 30 pases, donde se aprovechan en la produccin de
tuna, forraje y como substrato en la cra de la cochinilla, transformndose en una planta cosmopolita
(Mndez y Garca ,2006).
3.2.1.2
CLASIFICACIN TAXONMICA
: Vegetal
Subreino
: Embryophita
Familia
: Cactaceae
Subfamilia
: Opuntioideae
Gnero
: Opuntia
Subgnero de opuntia : 5
Especies
: 300
Abrajn (2008),
3.2.1.3
La composicin de la tuna varia con la madurez .es necesario tener en cuenta que son frutos no
climatricos (no maduran una vez cosechados), por lo que es importante cosecharlos en el punto de
madurez optima de consumo, donde est mejor expresado su potencial nutricional y propiedades.
Segn Senz et al (2006), describe que la viscosidad que poseen las cascaras se ve influida por la
presencia de pectinas y mucilagos. Ambos compuestos estn considerados dentro del grupo de los
hidrocoloides por su gran capacidad para captar y retener agua; forman parte a su vez, de la fibra
diettica. Estos compuestos, pueden ser utilizados como espesantes en productos alimenticios
Hasta ahora la cascara y la semillas de la tuna son subproductos de desecho de la tuna y no se han
encontrado reportes en donde se aprovechen industrialmente para generar productos con valor
9
agregado. En el cuadro N01 se presentan los resultados de algunos anlisis qumicos de los
principales componentes de la tuna.
Cuadro N01 Anlisis qumico de los principales componentes de la tuna (opuntia ficus)
(CONAZA, 1996, citado por Meneses y Morales, 2000).
Anlisis qumico
proximal
Humedad
Cenizas
Protenas
Grasa
Fibra cruda
Azucares reductores
totales
Azucares reductores
directores
Acidez como acido
ctrico
pH
*b.h=base hmeda
Semilla %p/p
(b.h.*)
82-87
0.40-1.91
0.35-0.51
0.39
1.27
85-90
0.2-0.3
0.5-1.0
0-0.59
0.27
---1.8
10.3
5.2-11.5
46.4
4.15- 4.99
8.7-11
----
0.15
2-6
----
0.729
0.052
0.084
5.35
-----
En estos estudios recientes se ha reportado que la cascara de frutos de Opuntia constituye hasta cerca
del 50 % del peso hmedo total del fruto (Mercado, 2004)
La cascara ocupa una porcin importante en la constitucin de la tuna, algunos autores han realizado
estudios de microscopia electrnica de barrido en muestras de cascara deshidratada y sus
observaciones revelaron que las clulas de la piel del fruto estaban constituidas principalmente de
clulas de colnquima y parnquima(clulas que dan grosor y sostn),tejidos usualmente ricos en
polisacridos tipo pectina(Habibi et al,2004a).Estas observaciones y otros estudios realizados a finales
de los aos 90`s (Forni et al.,1994) han dado pauta a sugerir que la cascara de este fruto pudiera ser
fuente de pectinas con potencial uso en la industria alimentaria.
.2.2 GENERALIDADES DE LA FIBRA DIETTICA
Se define a la fibra diettica como la parte comestible de las plantas o carbohidratos anlogos que son
resistentes a la digestin y absorcin en el intestino delgado, con completa o parcial fermentacin en
el intestino grueso; tambin incluye polisacridos, oligosacridos, lignina y sustancias ppticas
asociadas de la planta
3.2.2.1.
La fibra alimenticia puede ser clasificada en fracciones de fibra insolubles y solubles, basadas en la
solubilidad en una solucin de enzima controlada por el pH (El representante de enzimas alimenticias
humanas) durante extraccin y aislamiento (Tungland y Meyer, 2002).Estas dos fracciones tienen
funciones fisiolgicas distintas y ventajas alimenticias (Rodrguez et al., 2006)
3.2.2.1.1.
Fibras insolubles
10
crecimiento de la microflora intestinal incluso especies probiticos (Rodrguez et al., 2006).Su
principal efecto en el organismo es disminuir el tiempo de transito de los alimentos a travs del tubo
digestivo. Cmo consecuencia este tipo de fibra al ingerirse diariamente previene el estreimiento
(Lunn y Buttriss, 2007).Conforman la celulosa, diversas hemicelulosas y la lignina, su caracterstica es
la escasa capacidad para formar soluciones viscosas (Vilcanqui, 2009; Rodrguez et al.,
2006).Adems, dentro de este grupo se consideran a dextrinas indigestibles, maltodextrinas,
polidextrosa, metilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, ceras, cutina, suberina, acido ftico y taninos
(Snchez, 2005).
3.2.2.1.1.2.
Fibras solubles
La fibra soluble puede ayudar a bajar el colesterol de sangre y regular niveles de glucosa de sangre
(Rodrguez et al.,2006).Al entrar en contacto con el agua forman un retculo donde se atrapa el agua,
gelificndose la mezcla; su consistencia viscosa de la mezcla depende de la fuente de fibra utilizada
.Dentro de este grupo se destacan algunas hemicelulosas, polifructosas, inulina, oligofructanos, galacto
oligosacridos, pectinas, gomas, mucilagos, fitatos b-glucanos, galactomananos y
saponinas(Sanchez,2005; Rodrguez et al.,2006).Su caracterstica principal es la elevada capacidad de
retencin de agua, forma soluciones viscosas y es fermentada en mayor proporcin en el colon o
intestino grueso por la flora intestinal (Lunn y Buttriss,2007).
.2.2.2. EFECTOS FISILOGICOS Y BENEFICIOSOS DE FIBRA DIETTICA SOBRE LA
SALUD
Se considera cinco consecuencias fisiolgicas principales que poseen las dietas naturalmente altas en
la fibra diettica: Mejoras en la salud gastrointestinal ,Mejoras en la tolerancia de la glucosa y la
respuesta de la insulina, reduccin de hiperlipidemia e hipercolesterolemia y otros factores de riesgo
de cardiopata isqumica, reduccin al riesgo de desarrollar algunos tipos de cncer ,digestin de
lpidos y un cierto grado de control de peso(Viuda-Martos et al.,2010);Lunn y Butrriss 2007;Buttriss y
Stokes,2008).
.2.3. GENERALIDADES DE LA PECTINA
.2.3.1. LA PECTINA Y SUS ORIGENES
La pectina fue descubierta en 1970 cuando Vauquelin encontr en una sustancia soluble en el zumo de
las frutas(Pagan,1995).En 1825 el cientfico francs Braconnot continuo las investigaciones realizadas
por Vauquelin y encontr una sustancia ampliamente disponible en los tejidos vegetales y ya
observada en el pasado la cual adquira propiedades gelificantes cuando se le aada acido a su
solucin .la llamo pectina acida, del griego pectos que significa solido denso coagulado
(Pagan,1995).Las pectinas constituyen mezclas complejas de polisacridos que pueden llegar a
constituir un tercio del peso seco de la pared celular de las dicotiledneas y algunas
monocotiledoneas(Jarvis y Col.,1988).
La pectina en la pared celular de las clulas vegetales se encuentra presente en la forma no soluble
como material de relleno interfibrilar, entre las fibras de celulosa. (Whitaker, 1984).
La fabricacin de pectina de calidad uniforme y consistencia estable no es simple, debido a que las
diversas variedades de frutas difieren en su contenido en dicha sustancia, cambiando tambin segn
los diferentes grados de madurez o debido a las diferentes condiciones de cultivo. (Rauch, 1987).
.2.3.2. LOCALIZACIN,COMPOSICIN Y ESTRUCTURA DE LA PECTINA
Las mayores concentraciones de pectina se han encontrado en la lmina media de la pared celular,
disminuyendo gradualmente su contenido hacia la membrana plasmtica (Darvill y col.,
11
1980).Constituyen una tercera parte de la pared celular de las plantas dicotiledneas y algunas
monocotiledoneas (Jarvis y Col., 1988).las pectinas cumplen una funcin lubricante y cementante en
la pared celular de las plantas superiores; estn implicadas en la textura y maduracin de los frutos y
en el crecimiento de los vegetales. Adems le otorgan a la pared celular la habilidad de absorber
grandes cantidades de agua, adems acta como una sustancia de enlace, soportando y estabilizando
funciones y controles debido a su gran capacidad de hincharse (Coultate, 1996; Desorie, 1981;
Kimball, 1999).
La naturaleza de las sustancias ppticas que constituyen la protopectina evoluciona con la edad del
tejido, y de una forma muy manifiesta cuando se trata de frutos. Hasta la maduracin son insolubles,
participando as en mantener la rigidez; pero alcanzada esta fase se va produciendo una degradacin
de la laminilla media (generalmente de tipo enzimtico), con aparicin de meatos intercelulares donde
se acumulan los compuestos ppticos, que poco a poco absorben agua y se solubilizan parcialmente.
Estas variaciones tienen gran importancia, sobre todo en el reblandecimiento de los frutos durante las
ltimas fases de su desarrollo y maduracin. (Pagani, 1998).
El componente ms abundante de las pectinas es el acido galacturnico, que forma el esqueleto
principal de la molcula consistente en una cadena de residuos de acido D. galacturonico unidos
mediante enlaces glucosdicos (14) para formar acido poligalacturnico como se ve en la figura
2.1.Estos residuos pueden estar parcialmente metilados, esterificados en el C-6 con alcohol metlico,
siendo el grado de metilacin variable segn el origen de la pectina. Tambin contiene frecuencia
residuos de ramnosa, arabinosa y galactosa .Generalmente la ramnosa forma parte de la cadena
principal, mientras que la arabinosa y galactosa se encuentran en las cadenas laterales unidas a la
cadena principal formando ramificaciones (Heredia et al, 1995).
12
Estado verde
Estado maduro
13
14
cidos pectnicos: Es usado para el acido poligalacturnico coloidales conteniendo una despreciable
porcin de grupos Ester metil. Fenema (1993) indica que estos cidos son derivados de la protopectina
por la accin de enzimas protopectinasas y pectin metilesterasa. Son galacturonanos con cantidades
variables de grupos de grupos metilos esterificados con los grupos carboxilos del C-6
Pectinatos: Sales cidos o neutras de cidos pectnicos que tienen la propiedad de formar geles con
azucares, con cidos y si el contenido de metilos es bajo con otros componentes de sales de calcio
Pectatos: Sales cidos o neutros de cidos ppticos
Pectina: Constituyen aquellas sustancias ppticas de composicin variables cuyo componente
principal son los cidos pectnicos solubles en agua caliente de vario contenido de metoxilo y grado de
neutralizacin variables .Poseen la capacidad de formar geles en azucares y cidos en condiciones
adecuadas. Generalmente presentan entre 60 a 70 % de sus grupos carboxilos esterificados con
metanol (Bravo, 1981;; Kashyap y col., 2001)
b. Segn las caractersticas de la solubilidad
Las caractersticas de solubilidad han permitido clasificar las sustancias ppticas en pectina soluble en
agua, pectina soluble en agentes quelantes
Pectinas solubles en agua: Son extrables del tejido vegetal con agua caliente o solucione salinas
diluidas. Estn conformadas bsicamente por homogalacturano.El acido galacturano esta esterificado
con alcohol metlico, siendo el grado de metilacin variable segn el origen de pectina
Pectina soluble en quelantes: Se extrae con soluciones de EDTA, hexametafoIsfato, limidazol, etc.
Su composicin es muy similar a las pectinas solubles en agua, sin embargo se diferenciar en que
pueden presentar un 2% de ramnosa, principalmente sustituyendo al acido galacturonico en la cadena
principal y del 10 al 20 % de otros azucares en forma de cadenas laterales.
.2.3.5. PROPIEDADES DE LA PECTINA
3.2.3.5.1.
Enlaces de calcio
El calcio tiene la habilidad de formar enlaces complejos insolubles con los carboxilos libres de las
cadenas de pectinas, formando as una red tridimensional (BeMiller, 1986), esta fuerte interaccin se
forma como consecuencia de la unin del calcio con los tomos de oxigeno de los grupos hidroxilos
de la pectina, los cuales han sido descritos por Ress y col. (1982) citado en .Soriano (2004)
.2.3.5.2. La viscosidad
La viscosidad de la pectina depende de la calidad de la misma y de la fruta o vegetal del cual se
obtiene, de acuerdo a esto, puede presentar valores de viscosidad altos o bajos. Las pectinas de ms
alta viscosidad suelen emplearse en la elaboracin tales como mermeladas. (Sierra 2007)
.2.3.5.3. Acidez
Las pectinas son neutras en su estado natural, en solucin tienen carcter acido el cual dependen del
medio y del grado de esterificacin (Cayon 2004)
.2.3.5.4. Peso molecular
El peso molecular de la pectina est muy relacionado con la longitud que tenga la cadena, y vara
dependiendo de la fuente de origen y de las condiciones de extraccin (Sharma y col., 2006; Pagn,
1995). ste constituye una caracterstica muy importante de la que dependen la viscosidad de sus
15
disoluciones y su comportamiento en el proceso de gelificacin. Sin embargo, la determinacin precisa
del peso molecular es muy difcil y costosa, debido a la heterogeneidad que tienden a presentar las
muestras y parcialmente debido a la tendencia que tienen las pectinas a agregarse, an bajo
condiciones no favorables para la gelacin; adems, una descripcin precisa de los pesos moleculares
necesita informacin sobre la distribucin estadstica de los tamaos moleculares (Pagan, 1995).
.2.3.5.5. Solubilidad en agua
Con respecto a la solubilidad, las pectinas son solubles en agua e insolubles en la mayora de
solventes orgnicos. Las pectinas con bajo nivel de esterificacin y los cidos ppticos son solamente
solubles en sales de sodio y potasio (Yates, 1999).
.2.3.5.6. Hinchamiento
La habilidad de los coloides hidroflicos para hincharse est fuertemente relacionada con la
solubilidad. El grado de hinchamiento depende de la estructura de la red, del peso molecular, del grado
de esterificacin, de la presencia de cadenas laterales, del pH y de la presencia de sales en el medio
circundante (Doesburg, 1965).
.2.3.5.7. Precipitacin
Las pectinas despus de haber sido sometidos, los vegetales a una ebullicin prolongada en agua pura
o ligeramente acidulada es fcilmente precipitada por adicin de alcohol o acetona, que actan como
agentes deshidratantes, en forma de una suspensin gelatinosa, que volver a ser soluble en agua. Est
precipitacin puede lograrse tambin mediante ciertas sales, como sulfato de aluminio e hidrxido
amnico, con lo que se forma hidrxido de aluminio, cuyas partculas coloidales arrastran una carga
elctrica de signo opuesto de la pectina. La pectina es un coloide de carga negativa. (Braverman, 1967)
Cuando la precipitacin se logra por adicin de alcohol o acetona en ms de un 60% la pectina
precipita en forma de hilos, fibras y masas esponjosas. (Braverman, 1967).
.2.3.6. GELIFICACIN DE LA PECTINA
Desde el punto de vista de la tecnologa alimentara la propiedad ms importante de las pectinas es su
aptitud para formar geles.
Los geles consisten en molculas polimricas con enlaces entrecruzados para formar una red
interconectada y tupida inmersa en un liquido (Flory, 1953).En geles de pectina y otros sistemas de
alimentos conteniendo pectina, este liquido es agua. Las propiedades del gel son el resultado neto de
las interacciones complejas entre el soluto y solvente. La influencia del agua como solvente, la
naturaleza y magnitud de las fuerzas intermoleculares que mantienen la integridad del gel permiten
tener una gran capacidad de retencin de agua.
En base al tiempo de gelificacin los geles de pectina se pueden denominar en Set rpido y set lento
son designaciones de la pectina referidas a la relacin en que una estructura incipiente de jalea
desarrolla una estructura a la temperatura de gelificacin. El ritmo de gelificacin influencia la textura
del producto. Las pectinas HM son tambin de set rpido o lento. El ritmo de gelificacin disminuye
cuando disminuye el grado de esterificacin.
En resumen, las cualidades de la pectina que influyen en los caracteres del gel son: la longitud de la
molcula pptica, su grado de metilacin y la proporcin entre los grupos hidrofbicos e hidroflicos.
- La longitud de la molcula condiciona la rigidez o firmeza del gel. A valores de longitud muy bajos
una pectina no da geles, cualquiera que sea la dosis empleada y las restantes condiciones del medio.
16
- El grado de metilacin contribuye por un lado a regular la velocidad de gelificacin y tambin es
responsable de algunas propiedades organolpticas de los geles pectina-azcar cido que forman las
pectinas de alto metoxilo.
- La proporcin entre grupos hidrofbicos e hidroflicos, en la molcula de pectina determina la
solubilidad de sta. El grupo ster es menos hidroflico que el grupo cido y en consecuencia una
pectina de alto metoxilo con un alto grado de esterificacin. Esta diferencia se refleja en la
clasificacin de las pectinas en pectinas de gelificacin rpida, normal o lenta. (Pagani, 1998).
De acuerdo a (Pagan, 1995) Los factores del medio ms importante que influyen en la formacin del
gel son:
La temperatura
El pH
Azcar y otros solutos
Los iones de calcio
- Temperatura: Cuando se enfra una solucin caliente que contiene pectina las energas trmicas de
las molculas decrecen y su tendencia a gelificar aumenta. Cualquier sistema que contenga pectina,
tiene un lmite superior de temperatura por encima de la cual la gelificacin nunca ocurrir. Por debajo
de est temperatura crtica, las pectinas de bajo metoxilo gelifican casi instantneamente mientras que
la gelificacin de las de alto metoxilo depende del tiempo. En contraste con las pectinas de bajo
metoxilo, las de alto no son termorreversible. (Rao et al., 1984).
- pH: La pectina es un cido con pK de aproximadamente 3.5.
Un porcentaje alto de grupos cidos disociado respecto a no disociados hace la pectina ms hidroflica.
Por lo tanto, la tendencia a gelificar aumenta considerablemente al bajar el pH.
Esto se hace especialmente evidente en pectinas de alto metoxilo las cuales requieren normalmente un
pH por debajo de 3.5 para gelificar. (Pagani, 1998)
- El azcar y otros solutos similares: Estos hidratos de carbono, tienden generalmente a deshidratar
las molculas de pectina en solucin. Cuantos ms slidos en solucin hay, menos agua disponible
para actuar como disolvente de la pectina y por lo tanto la tendencia a gelificar se favorece.
En valores de slidos solubles superiores al 85% el efecto deshidratante es tan fuerte que la
gelificacin de la pectina es muy difcil de controlar. Las pectinas de alto metoxilo gelifican a valores
de slidos solubles por encima del 55%. Para cada valor de slidos solubles superior al 55% hay un
valor de pH en el que en la prctica se puede gelificar.
Las pectinas de bajo metoxilo pueden gelificar a cualquier valor de slidos solubles. La temperatura de
gelificacin disminuye al disminuir el contenido en slidos solubles. (Pagani, 1998).
- Los iones de calcio. Al contrario que las pectinas de alto metoxilo, las pectinas de bajo metoxilo
desesterificadas requieren bastante calcio y un rango estrecho de dicho catin para una ptima
gelificacin. Las pectinas de bajo metoxilo amidadas muestran ms flexibilidad a este respecto. Para
ambos tipos de pectina, un incremento en la concentracin de calcio implica un aumento de la fuerza
del gel y tambin un aumento de la temperatura de gelificacin. (Pagani, 1998)
.2.3.7. GRADO DE ESTERIFICACIN
El grado de esterificacin depender del origen de la pectina y del mtodo utilizado para su extraccin.
17
Un factor importante que caracteriza las cadenas de pectina es el grado de esterificacin (Degree of
sterification, DE) de los grupos carboxilos de los residuos de acido uronico con alcohol metlico. Las
pectinas probablemente se forman inicialmente en forma altamente esterificada, pero experimentan
algo de desesterificacin despus de insertarse en la pared celular o lamina media (Van Burn, 1991).
El grado de esterificacin tiene un papel importante en la firmeza y cohesin de los tejidos
vegetales .La reduccin del grado de metilacin tiene como consecuencia un aumento de la cohesin,
que es particularmente evidente en tejidos calentados (Van Burn, 1991).
Segn estos criterios las pectinas han sido clasificada en 2 grupos :las que presentan ms de un 50 %
de metilacin ,pectinas altamente metiladas(High Methoxyl,HM);y las que contienen menos del 50 %
de metilacin, pectinas de baja metilacin (Low Methoxyl.LM).
Tanto las pectinas de HM y las de LM tiene la capacidad de formar geles, pero con mecanismo
totalmente diferentes
.2.3.7.1. Pectinas altamente metiladas (HM)
Tienen ms del 50 % de las unidades de acido poligalacturnico esterificadas, prcticamente no
reaccionan con los iones calcio. La fuerza del gel depende, entre otras cosas del contenido del acido,
concentracin y de los solidos solubles. La gelificacin usualmente tiene lugar a pH entre 1 y 3.5 con
contenidos de azcar entre el 55%como mnimo y el 85 % como mximo
-Aplicaciones de las pectinas de alto metoxilo en la industria alimentaria
El uso de pectina en mermeladas de alto contenido de azcar es una de las ms conocidas aplicaciones
a uno de los mercados ms grandes para la pectina
Las pectinas de alto metoxilo, en orden decreciente de su porcentaje de esterificacin y de su rapidez
en la formacin del gel, se clasifican comercialmente en los siguiente tipos (Navarro y Navarro, 1985)
La medida de la capacidad de gelificacin de los geles azucarados de pectina esta estandarizada y se
mide en grados SAG
a.
b.
c.
d.
URS 150
RS 150
MRS 150
SS 150
18
% de esterificacin
Formacin
de
gel(minutos)
pH
de
gelificacin
optimo
pH de disolucin al 1%
Perdida por secado (%)
Arsnico(ppm)
Plomo(ppm)
Cobre(ppm)
Grmenes patgenos
Grmenes totales por
gramo
74-77
71-74
66-70
58-65
1-3
4-8
15-25
30-120
3,1-3,4
3,0-3,3
2,8-3,1
2,6-2,9
2,9-3,5
2,9-3,5
Aprox 12
Menos de 3
Menos de 10
Menos de 60
Ausencia
2,8-3,5
2,8-3,5
Menos de 1000
Polvo fino de color
crema
Rechazo inferior al 1 %
en tamiz de abertura
Aspecto
Granulometra
Cuadro N3: Gelificacin de pectinas de alto y bajo grado de esterificacin (Rolin y de Vries
1990)
Condiciones generales
Otras
caractersticas
fenomenolgicas
Mecanismo
19
de la pectina
Conforme se incrementa el grado
de esterificacin, se incrementa la
velocidad y la temperatura de
gelificacin.
GE (%)
DA (%)
Solidos solubles
Concentracin
calcio
Ph
de
iones
Conforme disminuye el
grado de esterificacin, las
pectinas
requieren
de
menos calcio para gelificar
y la temperatura de
gelificacin es mayor.
Las pectinas de bajo grado
de esterificacin amidadas
requieren
de
menor
cantidad de calcio que
aquellas no amidadas,
adems
tienen
un
desempeo
mas
reproducible y un intervalo
ms amplio de uso con
calcio.
20
Tipos de productos
Ordinaria
Textura o apariencia
Baja en azcar
%tpico
solubles
de
solidos
pH
tpico
Tipo de
pectina
y dosis
tpica*(
%)
Mermelada
60-70
3.0-3.3
0.20.5,AE
30-55
3.1-3.5
0.50.8,BE
Ordinaria
Gel brillante
Baja en azcar
Jalea de fruta
60-70
3.0-3.3
30-55
3.1-3.5
0.40.8,AE
0.61.0,BE
Gel firme
No saborizada
Geles de confitera
78
3.5
78
4.2-4.8
1.5%g.l.
AE
2.0-2.5%
BE
Resistente al calor
Gel
Mermeladas o
para panificacin
65-75
jaleas
Resistente al calor
termorreversible
Gel
45-75
3.5
Gelificacin fra
Gel
64-65
3.3-3.6
Gel
61
4.0
3.3
0.61.0%gr.
AE
0.6-1.0%
n.a.BE
0.81.5%a.B
E
0.7%g.r.
AE
Bases frutadas
Jarabes
Semigel/tixotrpico
Tixotrpico
3.6-4.0
0.30.6%BE
3.0-4.0
0.30.6%BE
21
BE: pectina de bajo grado de esterificacin
g.l AE: pectina de alto grado de esterificacin gelificacin lenta
g.r.AE: pectina de alto grado de esterificacin de gelificacin rpida
a.BE: pectina de bajo-ester amidada
n.a.BE.pectina de bajo-ester no amidada
.2.3.8. CARACTERIZACIN DE LA PECTINA
.2.3.8.1. CARACTERIZACIN QUMICA DE LA PECTINA
-Cenizas Totales: Segn Food Chemicals Codex (1981), indicado por Genu (1981), no debe tener ms
de 10%, ya que el contenido alto de cenizas afecta la habilidad de la pectina de gelificarse (Miyamoto
y Chang, 1992:1439-1443).
-Humedad: Segn FAO, Food Chemical Codex, La humedad es un factor importante de calidad
puesto que las pectinas tienden a degradarse con el tiempo. Las pectinas con una humedad mxima de
10% son ms estables durante prolongados periodos de almacenamiento
-Peso equivalente: Depende del grado de esterificacin y puede ser definido como el nmero de
gramos de cido poligalacturnico puro por equivalente de grupos carboxil libres. (Doesburg,
1965.Ademas el peso equivalente indica la firmeza del gel a mayor peso equivalente mayor es la
fuerza del gel, proporcionado por el numero de residuos de acido galacturnico la molcula. segn
(Corona, 1994)
-Porcentaje de metoxilos: Los grupos carboxilos de una cadena de pectina se encuentran
parcialmente esterificados por radicales metilos (-O-CH3). Una pectina completamente metoxilada
alcanzara un 16.32% de grupos metoxilos, pero hasta hoy no se ha logrado aislar una de este tipo. La
importancia de la mediacin, radica en su relacin con la propiedad ms importantes de formar geles,
aunque existen discrepancias sobre cun realmente importante es su proporcin dentro de la estructura
de la pectina. (Doesburg, 1965)
Segn la USP la pectina la pectina debe tener al menos 6.7% de grupos metoxilos y 74 % de acido
galacturnico. El mximo porcentaje de grupos metoxilos es 14 %, la pectina HM se encuentra de 7%
a 14 %.Las que poseen menos de 6.7 % corresponden a las LM y son las de baja esterificacin
-Grado de esterificacin: Se refiere al porcentaje de grupos carboxil que son esterificados con
metanol; este porcentaje puede ser calculado por determinacin del contenido de metoxil.
Cuadro N5 Relacin de correspondencia entre el porcentaje de metoxilos y el de esterificacin.
Ver cuadro N 1.7:
Esterificacin (%)
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
22
-Contenido de cido galacturnico: Sirve para definir la pureza del precipitado y comprobar que el
producto es una pectina, puesto que este, es un polmero de cido galacturnico. Si el contenido de
cido galacturnico est por debajo de aproximadamente el 70% indica la presencia de cidos no
urnicos y si la pectina ctrica tiene ms de 74% de cido galacturnico es considerado de alta pureza.
(Genu, 1981)
Cuadro N06: Especificaciones internacionales de purezas para pectinas comerciales
REFERENCIAS
Caractersticas
FAO/WHO
JECFA
USP
FDA/FCC
UE
Humedad
Max 12 %
Max 10%
Max 12%
Max 12%
---
---
10 %
---
Metoxilo (%)
---
Min 6.7%
---
---
AGT (%)
Min 65 %
Min 74 %
Min 65 %
Grado de esterificacin
(%)
---
---
Arsnico
Plomo
Cadmio
Mercurio
--Max 5ppm
-----
Max 3ppm
Max 5ppm
-----
70%
50% pectinas de
bajo grado de
esterificacin
50% pectinas de
alto grado de
esterificacin
3 ppm
10ppm
-----
---
Max 3ppm
Max 5ppm
Max 1ppm
Max 1ppm
UE =Unin europea
FAO/WHO=Organizacin mundial de agricultura/organizacin mundial de la salud
FCC= Codex qumico alimenticio
FDA=Administracin federal de drogas y alimentos
USP= Farmacopea USA
JEFC =Comit Ad-hoc en aditivos alimenticios
Fuente: Genu (1981)
.2.3.8.2. CARACTERIZACIN FSICA DE LA PECTINA
Atendiendo a las propiedades y a los usos de la pectina, su calidad se determina principalmente por la
fuerza del gel producido bajo las mismas condiciones constantes; siendo el comnmente empleado el
mtodo SAG desarrollado por el US IFT en 1959, donde se mide la deformacin por gravedad de un
desmoldador de gel. Con otros mtodos se determina la fuerza de gel. (Genu, 1981).
Adems de las caractersticas ya mencionadas, en una pectina para su aplicacin industrial es muy
importante considerar 2 caractersticas ms, como son:
- Grado de gelificacin
Segn el grado de pectina se podr determinar las condiciones necesarias para la preparacin de geles;
El trmino grado slo puede aplicarse a las pectinas disponibles para hacer jaleas con azcar-cido, y
que incluye a aquellas que tienen un grado de metilacin de cerca al 45% o mayor. (Cheftel, 1986).
23
Se entiende por "grado o grado de gelificacin al valor que significa las unidades de peso de azcar
con respecto a una unidad de peso de azcar con respecto a una unidad de peso de pectina" bajo
condiciones especficas de manera que d lugar a la formacin de un gel. Segn Kopsic (1978) es
posible calcular el grado de una pectina segn frmula:
G =
%A
%Ms P
Donde
G=Grado
% A = Porcentaje de azcar
%Ms P =% materia seca de preparado pectnico con el cual se consigue la consistencia normal del gel
A excepcin de la pectina lquida (grado aprox. 5) las slidas tienen un rango de 100 - 250 grados
entre los cuales se han establecido valores de equivalencias. Las pectinas al ser comercializadas se les
dan un "grado comercial", una definicin exacta sobre esta denominacin no ha sido dada, ya que son
muchas las variables que afectan su determinacin.
Una pectina antes de llegar al consumidor es normalizada y estandarizada, especialmente las en polvo,
las cuales se estandarizan mezclndolas con otras de diferentes grados, adicionando una cantidad
calculada de hidrato de dextrosa (D- glucosa) o algn otro azcar de grado comercial que se halle ms
convenientemente en la prctica, y la adicin de extractos como regulador de pH. Variables que
afectan la determinacin del grado:
Variables que afectan la determinacin del grado:
24
La temperatura de asentamiento de una pectina est influenciada por el pH; un incremento en el pH
significa una disminucin en la temperatura, tambin influye la presencia de iones metlicos y la
concentracin de slidos.
En las pectinas de rpida gelacin el tiempo de asentamiento a 90 - 95 C es de unos pocos minutos, lo
cual es deseado para aquellos productos que contienen trozas de frutas y se desea que se distribuyan
homogneamente dentro de la masa del gel. (Francis, 1975). Un gel de asentamiento normalmente
rpido alcanza cerca del 97% de su asentamiento total en un da. El tiempo de asentamiento de
pectinas de gelacin lenta es de aproximadamente 1 hora a 50 -60 C. (Francis, 1975)
.2.3.8.3. CARACTERIZACIN FUNCIONAL DE LA PECTINA
Capacidad de retencin de agua (CRA)
Existe el uso inconsecuente y confuso de los trminos de ligue de agua (Wter binding) o posesin de
agua (Water holding) por el cual prefirieron utilizar el trmino de retencin de agua siendo definida
como la cantidad de agua que permanece atada a la fibra hidratada despus de la aplicacin de una
fuerza externa, como la presin o centrifugacin (Robertson et al., 2000; Raghavendra et al., 2004,
Tosh y Yada 2010).Es un trmino que se emplea frecuentemente para describir la eficacia de una
matriz de molculas, normalmente macromolculas presentes a bajas concentraciones ,para atrapar
fsicamente grandes cantidades de agua, inhibiendo la exudacin (Fenema.,2000).
La retencin de agua afecta la viscosidad de los productos facilitando o dificultando su procesamiento
(Baquero y Bermdez, 1998, citado por Snchez, 2005).Entre los factores que influyen en la capacidad
de retencin de agua en una fibra se encuentran el tamao de las partculas de fibra se asocio a una
reduccin de la capacidad de retencin de agua (Sangnark y Noomhorm, 2003).
Capacidad de absorcin de grasa (FAC)
La capacidad de absorcin de grasa conocida como la capacidad de adsorcin de molculas orgnicas
o capacidad de adsorcin de grasa es la medida de retencin de grasa en los alimentos que
normalmente es afectada por la coccin(Raghavendra et al.,2006 y Femenia et al.,1997).Para
Scheeman,(1989) es la mxima cantidad de aceite en gramos , que puede ser retenida por gramo de
material seco en presencia de un exceso de aceite bajo la accin de una fuerza (Zuiga,2005).Esta
capacidad para secuestrar e incluso unirse qumicamente a sustancias orgnicas como cidos biliares
,colesterol y sustancias cancergenas pueden tener un papel importante en determinados efectos
fisiolgicos que se le atribuyen a la fibra alimentaria(Aparicio,2008).
La grasa es atrapada en la superficie de la fibra principalmente por medios mecnicos (Snchez,
2005).Cuanto menor sea el tamao de las partculas, mayor es la capacidad de retencin de aceite
(Viuda-Martos et al., 2010 y Raghavendra et al., 2006).
En los alimentos principalmente en productos crnicos la retencin elevada de aceite imparte
jugosidad y sabor mejorando la textura, en cambio una baja retencin proporciona una sensacin no
grasosa en productos fritos (Snchez, 2005 y Raghavendra et al., 2006).
Capacidad de Hinchamiento (CH)
Se refiere a la capacidad del producto para aumentar su volumen en presencia de un exceso de agua
(Tamayo y Bermdez, 1998). Es la proporcin del volumen ocupado cuando la muestra es sumergida
al agua en exceso despus del equilibrio al peso actual (Robertson et al., 2000 y Raghavendra et al.,
2004); mientras Aparicio (2008), define como la primera parte de solubilizacin debido a la entrada de
agua que expande las macromolculas hasta que son completamente extendidas y dispersadas, despus
25
del cual para que se solubilice.Esta caracterstica es resultado de la influencia de la cantidad de los
componentes polisacridos, porosidad y tamao de la partcula de la fibra(Femenia et al.,1997).
Capacidad de adsorcin de agua (CAd)
Es la capacidad de una estructura para la adsorcin del agua de manera espontanea cuando se expone a
una atmosfera de humedad relativa constante (Vzquez-Ovando et al., 2009).La determinacin de la
CAd se basa en el equilibrio del vapor de agua del medio con respecto al alimento y es til para
predecir la estabilidad y cambios deteriorativos de la fibra durante su almacenamiento (Sanchez.,
2005).
Capacidad de absorcin de agua (CAb)
Es un indicativo de la aptitud de una estructura para absorber agua de forma espontanea cuando se
pone en contacto con una superficie constantemente hmeda o cuando se sumergen en el agua, al
principio es un fenmeno superficial, pero a niveles de hidratacin ms altos puede ocurrir dentro de
la estructura ,llevando al hinchamiento y solubilizacin eventual(Vzquez-Ovando et
al.,2009).Tambin se define como la cantidad de agua que una fuente de fibra es capaz de absorber
cuando se coloca una cantidad suficiente de la misma, siendo importante esta propiedad cuando la
fibra ha de emplearse en productos extruidos, ya que el material debe ser humectado antes del proceso
y durante el mismo(Sanchez,2005).
26
El espectro infrarrojo de la pectina muestra unos picos caractersticos en ciertas longitudes de onda
como se observ en las figuras 22 y 23, tales picos son:
Grupo caracterstico
3300-3400
-OH
2942
(CH)
2653
1730-1760
1645
1600-1640
1403
1380
1335
(OH)COOH
C=O del ster
(H2O)
C=O del cido
;(COH)COOH
C-H
(CH)
27
1253sh
1226
1156
1119
1085
1034
990sh
954
888
830
790
760sh
738
700sh
(CH)
(OH)COOH
(COC) enlaces glucosdicos del anillo
(CC)(CO)
(CO) + (OH)
(CC)(CO)
(COOH)dimeros
(CCH), (COH)
(CCH), (COH)
(COH)anillo
(COH)anillo
Ring breezing
(COH)COOH
(COH)anillo
682
%Ta
33.42
18.76
%Te
32.56
19.17
Ta
Relacin = T e
% Ta > % Te = Rapid set
% Ta < % Te = Slow set
Relacin
1.026
0.978
28
.2.3.9. VARIABLES DEL PROCESO PARA LA EXTRACCION DE PECTINA
a) Variedad de fruta
La proporcin en volumen etanol: solucin de pectina necesaria para precipitarla, depende en
gran medida de la concentracin de etanol a utilizar, para concentraciones de 70%v/v en adelante
es por lo general 1:1, por lo que se tomar la misma para los ensayos a realizar.
b) Temperatura de extraccin
Ser una de las variables cuyo efecto se desea sobre el rendimiento, las altas
temperaturas (mayores a 80C) tienden a demetilar la pectina cuando se sostienen por perodos
prolongados de tiempo, dando como resultado pectinas con pobres caractersticas
gelificantes, la velocidad de demetilacin se incrementa con la temperatura, cuando stas
condiciones se combinan con pH muy bajos (cercanos a 1) se tiene tambin depolimerizacin de
la misma disminuyendo su peso molecular promedio (Constenla y Lozano, 2003).
c) pH
Es la siguiente variable de investigacin, como se mencion en la seccin de las propiedades
qumicas, las pectinas disueltas experimentan desesterificacin y depolimerizacin en sistemas
acuosos; en medio cido los valores de pH utilizados para la extraccin varan segn la materia de
la cual se extraen.
En general valores de pH extremadamente bajos tienden a bajar la calidad de la pectina obtenida
cuando se combina con un tratamiento a alta temperatura por tiempos mayores a 60 minutos
(Constenla y Lozano, 2003).
El pH de mayor estabilidad es cercano a 4 por lo que es necesario luego de la extraccin
subir el pH a este valor, para evitar posterior degradacin de la pectina.
d) Tiempo de extraccin.
Otra de las variables que se estudiarn para ver su efecto en el rendimiento de pectina obtenida, es
el tiempo de la etapa hidrlisis cida en medio acuoso. Los rangos de tiempos son variados
dependiendo de la materia prima utilizada para la extraccin y el tipo de pectina que se desea
obtener. Los tiempos de prueba se seleccionan en base a resultados documentados de extracciones
de pectina, donde se estima intervalos con buenos resultados para el producto.
e) Temperatura y tiempo de secado.
Debido a que la temperatura afecta la velocidad de demetilacin y las caractersticas del producto,
no debe secarse la pectina a altas temperaturas, lo recomendable es secar en horno de vaco a
temperatura baja de (30 40) C y (10 15) psi, pero como no se cuenta con uno de este tipo se
fijar la temperatura de secado en 50C en horno con ventilacin, hasta que se seque por obtencin
de peso constante. Si se coloca el gel de pectina en capas delgadas esta se secar en un tiempo
menor. Esto es importante para no someter el producto innecesariamente a calentamiento
prolongado durante el secado, de modo que lo deteriore por la alta temperatura.
22
29
.2.3.10.
A escala industrial el ms utilizado es la hidrlisis acida .Por esta razn se prueba este mtodo con
algunas modificaciones hasta obtener un proceso sencillo y acorde a nuestro medio, as se trabaja
utilizando varios cidos como el sulfrico, clorhdrico tartrico y ctrico. La ventaja principal de la
hidrlisis es su alto rendimiento a comparacin de otros mtodos de extraccin que poseen buena
calidad pero bajo rendimiento aparte de ser muy alto costo de produccin actualmente se conocen
varios mtodos de obtencin de pectina como son:
Hidrlisis acida
El mtodo ms conocido para obtener pectina es la hidrlisis acida, el cual consiste en someter el
sustrato a una coccin en medio acido, posterior filtracin y purificacin, con lo cual se logra
separar la pectina presente del resto de compuestos de las cascaras, par luego secarla y molerla
hasta tener un fino polvo listo para comercializarlo
A la materia prima se la somete a una hidrlisis acida. Generalmente se proponen valores de
temperatura para la extraccin de pectina con HCL que varan de 85 a 90, pH de 1,6 a 2,0 y
tiempos de extraccin de 30 a 60 minutos.
Accin de enzimas pcticas
Las enzimas peptolticas o ppticas, llamadas comnmente pectinasas, constituyen un complejo
sistema de enzimas que incluyen hidrolasas, liasas y oxidasas, que intervienen en la degradacin o
modificacin de la pectina. Se encuentran en la mayora de las plantas superiores y son producidas
tambin por hongos filamentosos, bacterias algunas verduras e insectos.las pectinasas son en su
mayor parte extracelulares, pero otras se localizan intracelularmente y son las responsables del
metabolismo de los productos de degradacin generados por la accin de las pectinasas
extracelulares .Mucho se ha avanzado en el conocimiento de las enzimas involucradas en la
biosntesis de la pectina. Estas incluyen las transferasas, que cumplen la funcin de unir las
unidades monomericas, incorporar los sustituyentes y generar la estructura final (Mohnen, 1999).
Medio alcalino: En el proceso de extraccin de pectina en medio de un proceso alcalino utilizando
Hexametafosfato como secuestrante .Secuestrar cationes (calcio, magnesio, cobre, hierro, etc. de tal
forma que no precipitan en forma de costras o de deposiciones sino que quedan en disolucin .A
estos efectos tambin se pueden utilizar el citrato sdico, fluoruro sdico o el EDTA. Con este
mtodo se puede obtener pectinas de buena calidad debido a que estos elementos forman
compuestos como Pectatos de calcio que mejoran la solubilidad de la pectina pero son de bajo
rendimiento
Extraccin de pectinas asistida por microondas
Las condiciones de extraccin empleadas en el mtodo convencional provocan la degradacin
trmica de protenas, lo cual genera prdidas de cantidad y calidad de la pectina extrada, Los que
se aplican el mtodo de microondas sugieren que el efecto de este calentamiento incide sobre el
rendimiento y la calidad de las pectinas extradas .Esto se debe primero a la desintegracin parcial
del tejido vegetal y a la hidrlisis de la protopectina y en segundo lugar a la rpida inactivacin de
enzimas peptolticas
.2.3.11.
APLICACIONES DE LA PECTINA
22
30
CUADRO N9 APLICACIONES DE LAS PECTINAS EN LOS ALIMENTOS
TIPO
TIPICO USO
CANTIDAD
APROX.
(%)EN
PRODUCTO
FINAL
Pectinas(LM)
metoxil
de
bajo
Jaleas caseras
3 onzas/6-8 vasos
Hasta 0,5
Emulsiones
saborizadas,
ensaladas, postres
Cremas batidas, glaceados,
malteados
de
leche
espesantes
Ensalada y postres(geles)
A)Imitacin de sabor y
color (para consumo casero)
2-3 de fase
Acuosa
B)jugo
de
frutas
y
vegetales(geles y enlatados)
1,0-1,8
0,8-1,5
0,8-1,5
0,85-1,5
0,8-1,5
FACTORES
IMPORTANTES
22
31
En los sorbetes, helados, la pectina puede usarse para controlar el tamao del cristal.
Aplicaciones de la pectina en la industria farmacutica
La base de las aplicaciones farmacuticas de la pectina son sus propiedades hidrocoloidales y
teraputicas. Adems, frecuentemente produce un efecto de sinergia y aumenta la accin de otros
principios activos componentes de la especialidad. (Navarro y Navarro, 1985)
Otras aplicaciones de la pectina
Adems de las aplicaciones expuestas anteriormente, puede citarse otras, (Pagani, 1998) que
tambin son importantes en otros campos. As, se utiliza pectina en:
Uso en odontologa
Productos cosmticos
Manufactura de cigarrillos
Medios de cultivos en microbiologa
Conservacin del suelo
Alimentacin animal.
Industria farmacutica
Industrias lcteas
La pectina es, en consecuencia, algo ms que el material que se produce mermelada. Es una
materia verstil y sin peligro para la salud que se deriva de fuentes naturales y puede ciertamente
pretender ser un aditivo alimentario con una imagen muy saludable que contrasta con las
implicaciones en los riesgos sobre la salud de muchos aditivos. (May, 1990).
.3. MARCO CONCEPTUAL
Acido galacturonico: monosacrido correspondiente a la forma oxidada de la D-galactosa. Es el
principal componente de las pectinas.
Biopolmero: Especie qumica de alto peso molecular, forma parte de las paredes celulares de las
plantas
Esterificacin: proceso por el cual se sintetiza un ester .Un ester es un compuesto derivado
formalmente de la reaccin qumica entre un oxcido y un alcohol
Hidrlisis: reaccin qumica del agua con una sustancia que produce un desplazamiento del
equilibrio de disociacin del agua y como consecuencia se modifica el valor de pH.
Mesocarpio: capa media de las tres capas que forman el pericarpio de los frutos: por ejemplo la
parte carnosa del melocotn
Metoxilo: un grupo funcional consistente en un grupo metilo unido a un oxigeno, con formula -OCH3
Monosacridos: azucares simples, glcidos ms sencillos que contienen de tres a seis tomos de
carbono. Su formula emprica es (CH2O)n donde n 3.
Oligosacridos: polmeros de monosacridos con un nmero de unidades monomericas entre 2 y
10.
22
32
Pectatos: sales de cidos ppticos (cidos pectnicos desmetoxilados sus propiedades y sus usos
son comparables a los de las pectinas.
Pectinatos: sales de los cidos pectnicos (cidos poligalacturnicos parcialmente metoxilados
Polisacridos: biomolculas formadas por la unin de una gran cantidad de monosacridos y se
encuentran en la pared celular de las plantas
CAPTULO IV
HIPOTESIS Y VARIABLES
4.1. FORMULACIN DE HIPTESIS
4.1.1.HIPTESIS GENERAL
Los parmetros de extraccin de pectina a partir de la cascara de tuna (Opuntia ficus)
por hidrlisis acida influyen en el rendimiento y en sus caractersticas
(fisicoqumicas y funcionales).
.1.2. HIPTESIS ESPECFICAS
.2.
4.2.1.INDICADORES
4.2.1.1.
NDICES
Los ndices de los indicadores tienen dos niveles en cada parmetro de extraccin de pectina por
hidrlisis acida. Estos ndices planteados son de acuerdo a los tratamientos ms eficientes
encontrados en las revisiones bibliogrficas
Cuadro N10: Operacionalizacin de las variables e indicadores de la investigacin
VARIABLES
INDEPENDIENTES
Influencia de
los
parmetros de extraccin
de pectina a partir de la
INDICADORES
Temperatura
Ph
INDICES
UNIDADES
T1 = 60
T2 = 80
pH =1.5
pH =3.0
22
33
cascara de la tuna
(Opuntia
ficus)
por
hidrlisis cida
VARIABLES
DEPENDIENTES
Tiempo
t1 = 30
t2 = 60
Min
INDICADORES
INDICES
UNIDADES
1. Rendimiento
pectina
de
2. Propiedades fsicas
de la pectina
Rendimiento
,
caracterizacin
fisicoqumica
y
funcional de la pectina
.5. Temperatura
de
gelificacin
.1. Capacidad de retencin de
3. Propiedades
agua
.2.
Capacidad de hinchamiento
funcionales de la
pectina
.3. Capacidad de adsorcin de
aceite
4.1. Peso equivalente
.2. Ac. Galacturnico
4. Propiedades
qumicas de .3.
la Grado de esterificacin
.4. Metoxilos
pectina
.5. Humedad
.6. Cenizas
%
Cp
SAG
Min
g de agua/g de
muestra seca
ml de agua/g de
muestra seca
g de aceite/g de
muestra seca
g/eq
%
%
%
%
%
CAPTULO V
METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN
.1. TIPO Y NIVEL DE INVESTIGACIN
5.1.1.TIPO
El presente proyecto de investigacin de acuerdo a su inters tiene condiciones
metodolgicas de una investigacin tecnolgica aplicativa o practica, debido a la propuesta
del aprovechamiento de las cascaras de tuna para la obtencin de pectinas mediante
hidrlisis acida para la inclusin como espesante alimenticio
5.1.1.2.
NIVEL
De acuerdo a la naturaleza de la investigacin, pertenece a un estudio explicativo
experimental; debido a la manipulacin de las variables independientes. Su inters se
22
34
centra en explicar cmo influyen los parmetros de extraccin por hidrlisis acida en las
caractersticas de la pectina
.2. MTODO Y DISEO DE INVESTIGACIN
5.2.1.MTODO DE INVESTIGACIN
El presente proyecto de investigacin se fundamenta en el mtodo experimental, por el uso
de equipos y reactivos de laboratorio para obtener pectina a partir de la cascara de la tuna,
utilizando el mtodo de hidrlisis acida a diferentes parmetros de extraccin (pH, la
temperatura y el tiempo), las muestras obtenidas sern evaluadas para conocer el efecto de
las variables independientes sobre las variables dependientes (Rendimiento, propiedades
funcionales y fisicoqumicas de la pectina).El proceso de extraccin se realizara en el
laboratorio de Qumica y operaciones unitarias de la Escuela Acadmico Profesional de
Ingeniera Agroindustrial de la UNAMBA, mientras que la caracterizacin de la pectina
seca se realizara en los laboratorios de qumica de la UNSAAC. Los datos sern analizados
mediante diseos estadsticos para determinar el nivel de significancia y as contrastar la
hiptesis, todo ello se resume en el plan experimental de la investigacin que se muestra en
la Figura.
22
35
Figura 6. Plan experimental del estudio de la extraccin y caracterizacin de pectina a partir de la cascara de tuna
Humedad
Cenizas totales
Protenas
Fibra cruda
Carbohidratos
Grasa total
Acidez titulable
Azucares reductores
Azucares totales
ndice de madurez
TUNA
Anlisis qumico proximal
CASCARA DE TUNA
SELECCIN Y CLASIFICACIN
PRETRATAMIENTO
EXTRACCIN DE PECTINA POR HIDRLISIS ACIDA
T2
T1
pH1
t1
pH2
t2
t1
pH1
t2
t1
pH2
t2
t1
t2
FILTRACION
PRECIPITACIN
SECADO
Viscosidad (Cp)
Tiempo de gelificacin(min)
Grado de pectina
Temperatura de gelificacin ()
Determinacin de
propiedades fsicas
las
MOLIENDA Y TAMIZADO
Determinacin
de
las
propiedades funcionales
PECTINA SECA
Determinacin
del
rendimiento de pectina
Leyenda
T: temperatura del agua acidulada
pH: pH del agua acidulada
t: tiempo de extraccin por hidrlisis acida (min)
Determinacin
de
propiedades qumicas
las
Humedad
Cenizas totales
Peso equivalente
%Metoxilos
%cido galacturnico
% Grado de esterificacin
36
37
.5. DESCRIPCIN DE LA EXPERIMENTACIN
Para llevar a cabo la investigacin y as comprobar la hiptesis planteada se utilizara un
diseo factorial 2K =23 en el cual 2 es la cantidad de niveles por cada factor y K es la
cantidad de factores que se evaluaran estos factores que se evaluaran estos factores son
temperatura, tiempo y pH).
Los datos obtenidos se analizaran por medio de anlisis de varianza (ANOVA) para
determinar si existe efectos del proceso de extraccin en el rendimientos, propiedades
fisicoqumicas y funcionales de la pectina obtenidas a partir de la cscara de la tuna ,as
mismo se evaluara el coeficiente de variacin para determinar si el experimento realizado
es vlido o no. Detectada las diferencias significativas en los tratamientos se proceder a
realizar las pruebas de Tukey, pruebas de rango mltiple de Duncan y otras pruebas
estadsticas segn sea necesario.
.5.1. CARACTERISTICAS DE LOS EXPERIMENTOS
Proceso de extraccin de pectina
Nmero de repeticiones: 3
Numero de tratamientos: 8
Nmero de unidades experimentales: 24
T= Temperatura = (60-85)
pH= pH= (1.5-3.0)
t= Tiempo = (30 -60) min
Temperatura
pH
Tiempo
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
60
60
60
85
85
85
60
60
60
85
85
85
60
60
60
85
85
85
60
60
60
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
1.5
3.0
3.0
3.0
30 min
30 min
30 min
30 min
30 min
30 min
30 min
30 min
30 min
30 min
30 min
30 min
60 min
60 min
60 min
60 min
60 min
60 min
60 min
60 min
60 min
Mp/agua
acidulada(cte.)
Cascara de
tuna(g)
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
500g
Pectina
seca(g)
38
22
23
24
85
85
85
3.0
3.0
3.0
60 min
60 min
60 min
500g
500g
500g
Las muestras fueron transportadas del distrito x, provincia x hasta las instalaciones de laboratorio
de qumica de la escuela acadmico profesional de ingeniera agroindustrial de la universidad
nacional Micaela bastidas de Apurmac ubicado en el distrito de Tamburco, provincia de Abancay,
regin de Apurmac. Las muestras de tuna fueron debidamente acondicionadas para el anlisis
fisicoqumico de la materia prima.
5.6.1.1.3.
ETAPA III: ANALISIS ORGANOLEPTICO Y PROXIMAL DE LA
CASCARA DE TUNA
ANLISIS ORGANOLPTICO DE LA CASCARA DE TUNA:
Se determin en una muestra constituida por 15 cascaras de tuna a estudiar. Se utilizo los sentidos
como color, olor, sabor, textura, el peso total medio y dimetro promedio, se utilizo una balanza
analtica y un vernier; para as evaluar la variabilidad en sus caractersticas, estas mediciones se
realizan por triplicado
39
Se har un anlisis proximal de la cascara de tuna, estos anlisis se determinaran en el estado
pintn de la cascara de tuna
Determinacin de Humedad (Mtodo de la A.O.A.C., 1995)
Se describe en el anexo N 04
Determinacin de Cenizas Totales (Mtodo de la A.O.A.C., 1995)
Se describe en el anexo N 05
Determinacin de Protenas (Kjeldahl) (Mtodo A.O.A.C 1998)
Se describe en el anexo N 06
Determinacin de Fibra cruda (Mtodo A.O.A.C., 1984)
Se describe en el anexo N 07
Determinacin de Carbohidratos
Se describe en el anexo N 08
Determinacin de Grasa total (Mtodo soxhlet)
Se describe en el anexo N09
Determinacin de Grados Brix
Se pesaran 10 g de pulpa de cascara de tuna de las que se obtuvo una muestra la cual se coloco en
el refractmetro para la medida de los Brix, esta medida se realizo por triplicado
Determinacin de Acidez Titulable( Mtodo de la (A.O.A.C.,2005)
Se describe en el anexo N 11
Determinacin de ndice de Madurez
Se describe en el anexo N14
Determinacin de pH
Mtodo: potenciomtrico (A.O.A.C.2005)
Procedimiento.
Se preparo la muestra como se indica en la metodologa anterior, para medir el porcentaje de
acidez. Teniendo las muestras en alcuotas de 30 ml, se calibro el potencimetro e inmediatamente
se coloco el electrodo para medir el pH, se espero que el registro numrico en la pantalla del pHmetro se estabilice por completo, entonces se registro el pH de la pulpa de cascara de tuna.
40
Determinacin de Azucares reductores
A.O.A.C. 2005)
Se describe en el Anexo N 12
Determinacin de Azucares totales
A.O.A.C.2005)
Se describe en el Anexo N 13
41
5.6.1.1.4.
ETAPA IV:EXTRACCION DE PECTINA A PARTIR DE LA CASCARA DE
TUNA
Se utilizo el siguiente diagrama de flujo para la extraccin de pectina
Materia prima (tuna)
Recepcin
m.p: agua
1:2 (85-90 x 5
min)
HCL
(0.03, 0.001 N)
Seleccin/Clasificacin
Fruta no
apta
Inactivacin de
enzimas
Agua
residual
Pelado y despepado
(Albedo de la cascara)
Hidrlisis acida
Vapor de
agua
T de: 60, 85
Tiempo de hidrlisis de: 30,60 min
Relacin cascara de tuna: agua
acidulada 1:4
Filtracin
Etanol 96 %
Precipitacin de la
pectina
Concentracin
Calor (45*6h)
Pulpa y pepas
Secado
Bagazo
Molienda
Tamizado
Pectina seca
Malla N 60
42
5.6.1.1.1. Descripcin de las operaciones para la extraccin de pectina a partir de la
cascara de tuna
Recepcin. La materia prima se obtendr de la provincia de x la misma ser recepcionada en las
instalaciones del laboratorio de qumica de la escuela acadmico profesional de ingeniera
agroindustrial, previa la verificacin de peso y la calidad del producto
Seleccin: Se selecciona la cascara de tuna en funcin al estado de madurez (verdes pintones y
sobre maduros), de los que se eligi los frutos pintones del mismo modo se descarto frutos con
signos de picadura y de enfermedades. El estado intermedio de madurez de los frutos pintones es
de importancia para el proyecto de investigacin.
Lavado: Se realiza el lavado con la finalidad de retirar cualquier tipo de materia extraa (polvo,
paja, espinillas, etc.) que pudieran estar presentes con los frutos. Para tal efecto se utilizo agua
potable y escobillada para retirar impurezas adheridas a la superficie del fruto
Pelado: De forma manual empleando un cuchillo se proceder al pelado de la cascara donde se
retira las pepas y la pulpa de la tuna como bagazo restante; donde las cascaras utilizadas son
troceadas y se irn poniendo en un recipiente con una solucin de acido ctrico (0,005%) con el
objetivo de reducir la oxidacin enzimtica.
Escaldado: el objetivo de esta operacin es inactivar las enzimas como la polifenoloxidasa
causante del pardeamiento enzimtico y eliminar microorganismos (mohos y levaduras) que vienen
como flora natural del fruto, al mismo tiempo del escaldado facilita la operacin del pelado de la
cascara. se realizo la operacin de escaldado a 86 durante 5 min
Hidrlisis acida: La hidrlisis tiene por objetivo desdoblar la protopectina en pectina para facilitar
la extraccin de la misma. Las pectinas estn considerados dentro de las fibras solubles y su
extraccin es posible por diferentes mtodos de hidrlisis en esta investigacin se decidir por el
mtodo de hidrlisis acida por ser el ms adecuado y eficaz para la extraccin de pectinas.
Filtracin: Se filtrara la solucin hidrolizada con ayuda de un tamiz (colador plstico), para
separar la torta (fibra restante) y se separara la mayor cantidad de extracto o licor pptico.
Precipitacin con alcohol: Se prefieren utilizar alcohol porque las pectinas generalmente se usan
en la industria de alimentos y se deben evitar residuos generados al emplear sales para la
precipitacin. La pectina presente en la solucin liquida anteriormente obtenida se precipito con
etanol de 96% y un volumen de alcohol equivalente al 45 % de la solucin liquida. Se utilizara
aproximadamente 80 ml de alcohol
Concentracin: se someti el precipitado de pectina a concentracin (temperatura de 50 por 10
min para reducir el 50 % de la carga inicial de agua y facilitar el secado de la misma
Secado: El objetivo del secado es eliminar los residuos del alcohol y evaporar el agua libre y
ligeramente ligada. Par esta operacin se utilizaran placas petri cada una contendr muestras de
pectina hmeda, las cuales se colocaran en la estufa en una corriente de aire caliente de 45 por 6
horas.
Molienda: S realizara la operacin molienda en un molino den funcionamiento manual para
homogenizar el tamao de la partcula y mejorar la apariencia de la pectina seca, logrando obtener
partculas muy pequeas.
43
Tamizado: Esta operacin se realiza utilizando un tamiz de malla N60(0.25mm de dimetro), por
donde se atravesaran las partculas de pectina ms pequeas, la operacin se realizara hasta
homogenizar toda la pectina, finalmente se pesara la pectina para calcular el rendimiento. Esta
misma ser empleada para determinar sus caractersticas fisicoqumicas y funcionales.
5.6.1.1.5.
Existen varias maneras de caracterizar la pectina, en esta investigacin se realizara los siguientes
anlisis. Determinacin del rendimiento, Humedad, Cenizas, Peso equivalente, % Metoxilo,
%Acido galacturnico, % Grado de esterificacin, Grado de pectina, Tiempo de gelificacin,
Viscosidad relativa, Espectroscopia infrarroja (IR) todos estos anlisis se harn con el fin de
determinar su calidad y si esta cumple con los parmetros internacionales, se describen a
continuacin
5.6.1.1.1. RENDIMIENTO
Se describe en el anexo N 04
5.6.1.1.1.1.5.2.2.
Se describe en el anexo N 05
5.6.1.1.1.1.5.2.3.
Peso Equivalente =
peso muestra en mg
meq de NaOH
peso muestraen mg
= ml de alcali x normalidad
44
5.6.1.1.1.1.5.2.4.Determinacin del contenido de metoxilos(Mtodo de Owens et al,1952)
% Metoxilo =
x100
V1 )
V2 )
Clculos
mg de acido galacturonico =A.U.A
mg A.U.A=19,41 *(
V 1 + V 2
Los mg de acido obtenido es el contenido de 1/10 de la muestra secada y pesada. Para calcular el
porcentaje se efecta
%AUA =mg AUA*1000/X
Donde:
X: El peso en mg de la muestra lavada y secada
5.6.1.1.1.1.5.2.6. Determinacin del grado de esterificacin (Mtodo de valoracin de
Schultz y Schweiger 1965)
45
Valor B
Procedimiento:
Tarar la vasija (para cocinar) vaca y la cuchara de jalea. Aadir 320 ml de agua destilada
fra
Pesar 500 g de azcar, como el grado de gelificacin asumido de pectina fue 150 , se
peso 3,33 g de pectina ver cuadro N2,3; y se mezcla dicha pectina con cerca de cinco
veces su peso de azcar.
Con el agua en la olla, aadir 0,5 ml de acido ctrico y 1 ml de solucin de citrato de
sodio .luego aadir la mezcla pectina-azcar en el agua, agitando para asegurar la
dispersin. colocar la mezcla sobre el fuego , calentando rpidamente hasta ebullicin,
mientras se agita constantemente para prevenir los grumos o que se pegue en los lados de
la olla, se hierve por 30 segundos , se agita(sacando de la llama ), hasta que se solubilize
completamente la pectina para luego agregar el remanente de azcar , se calienta
nuevamente las solucin hasta hervir(a fuego lento), agitando continuamente hasta el peso
neto sea de 770 g, se separa ocasionalmente para controlar el peso, de lo contrario mucha
agua podra evaporarse. Cuando el peso correcto sea obtenido, se separa del fuego y a
continuacin la jalea se enfra por 30 segundos, se agita (sacando de la llama), hasta que se
solubilize completamente la pectina para luego agregar el remanente de azcar, se calienta
nuevamente la solucin hasta hervir(a fuego lento), agitando continuamente hasta el peso
neto sea de 770g, se separa ocasionalmente para controlar el peso, de lo contrario mucha
agua podra evaporarse. Cuando el peso correcto sea obtenido, se separa del fuego y a
continuacin la jalea se enfra por 30 segundos, tiempo en el que se hace la separacin de
la espuma
Se vierte la jalea caliente en vasos en los que previamente se ha aadido 2ml de acido
ctrico y 0,5 g de citrato de sodio, a cada uno.se agita durante 2 a 3 segundos con una
varilla de vidrio para asegurar una buena mezcla de acido ctrico, citrato de sodio y jalea
caliente. Se anota el tiempo despus de vaciar la jalea caliente a los vasos
Las muestras se dejan a temperatura durante 18 horas, al trmino de este periodo, se
trasvasa la jalea a una superficie plana, se compara la firmeza y grado de resistencia de
dicha jalea con la jalea estndar, preparada en condiciones similares, as mismo se toma un
pedazo de jalea comprimindola entre el pulgar y el ndice hasta que la jalea se rompa,
comparndola igualmente con la jalea estndar.
46
Peso(g)
50
25
16,66
15,50
10,0
8,33
7,14
6,25
5,55
5
4,55
Grado
120
130
140
150
160
170
180
190
200
210
220
Peso(g)
4,17
3,85
3,57
3,33
3,12
2,94
2,78
2,63
2,50
2,38
2,27
Pesar exactamente 0.1 g de sustancia pptica (en base libre de humedad y cenizas) y
disolverla en 50ml. De agua destilada, ajustando a pH 4, 8, agtela por 2 horas.
Agregar 0,8 g de NaCl y 0,2 g de Hexametafosfato de sodio o benceno neutro en 15 ml de
agua destilada y agitarla por una hora. Ajustar a pH 6,00,2.
Enjuagar los electrodos del Ph-metro en la solucin, transferir a una fiola de 100 ml y
enrazar.
Agitar rpida y vigorosamente por 1 minuto y tapar el frasco.
Si la solucin contiene polvo o fibras, centrifugar en tubos cubiertos o filtrar.
Determinar la viscosidad de la solucin dentro de una hora despus de ajustar el Ph, usando
un viscosmetro Ostwald-Cannon Fenske N50 con 10 ml. De solucin a 25 0,03.
.1.1.1.1.5.4.1.
47
Determinar el tiempo de flujo en ese mismo instrumento para el solvente (0,8 % de cloruro
de calcio y 0,2 % de Hexametafosfato de sodio en solucin).
Debido a que la diferencia de densidad entre la solucin y el solvente es solo 4 partes en
1000
Clculos
n1
n2
1t
= 2t
Donde
n1 =viscosidad de la muestra
n2 =viscosidad del solvente
1 =densidad de la muestra
2 =densidad del solvente
t 1 =tiempo transcurrido de la muestra
t 2 =tiempo transcurrido del solvente
48
P0 P
Pf
=
WRC
P0 = Peso inicial
Pf = Peso final
Materiales y Equipos
Balanza analtica
Centrifugadora
Tubos graduados 35-40 ml
Cronometro
Vaso precipitado
Matraz
Reactivos
Agua destilada
Balanza analtica
Centrifugadora
Tubos graduados 20 ml
Cronometro
Vaso precipitado
Pipeta
Reactivos
Aceite de maz
5.6.1.1.1.1.5.4.3. Capacidad de hinchamiento (CH)
49
Se determinara segn la tcnica descrita por Robertson et al.,(2000); Raghavendra et al.,(20042006);Ubando et al.,(2005);Escalada et al.,(2007) Lecumberri et al.,(2007); Saw et al.,(2008);Tosh
y Yada (2010);Para ello se colocaron 500 mg de fibra en un tubo graduado y se proceder a medir
el volumen ocupado por el producto (V 0).Se aadir 10 ml de agua y se agitara suavemente .Se
dispondr en una superficie nivelada a temperatura ambiente durante 18 horas. Pasado este tiempo
se medir el volumen final de la muestra (V f).La capacidad de hinchamiento se expresara en ml/g
de peso seco.
SC =
V f (ml)V 0 (ml)
Pm
Donde:
V0 =Volumen inicial
Vf =Volumen final
Pm =g de muestra original en peso seco
Materiales y Equipos
Balanza analtica
Centrifugadora
Tubos graduados 20 ml
Cronometro
Vaso precipitado
5.6.1.1.1.1.5.4.4. Capacidad de adsorcin de agua(CAd)
Se determinara siguiendo la tcnica de Chen et al.(1984),descrito por Snchez(2005) y Alfredo et
al.,(2009);para ellos se colocaran un gramo de muestra (b.s)en un micro-ambiente de 98 % de
humedad relativa en el equilibrio , el cual se lograra colocando 20 ml de solucin salina saturada de
sulfato de potasio en frascos de vidrio hermticamente cerrados y colocando a estos en desecadores
en 25.La muestra se dejara en el microambiente hasta alcanzar peso constante
(72h),reportndose la CAd como la ganancia en peso expresada en gramos de agua por gramo de
muestra seca.
g de agua adsorbidos
%CAd=
x100
g de muestra
Materiales y Equipos
Balanza analtica
Desecador
Vaso precipitado
Reactivos
Sulfato de potasio
5.6.1.1.1.5.5. DETERMINACIN DEL TIPO DE PECTINA POR ESPECTROSCOPA
POR INFRARROJO(TECNICA ATR)
50
Se tomo una pequea muestra de las pectinas a evaluar, se coloca en el lente
de cristal de Znse de simple reflexin para alta sensibilidad, se espera unos
minutos y la computadora nos brinda las bandas de absorcin que se obtiene
de dicha muestra. Se efectan las espectroscopias infrarrojas para determinar
en primera instancia que el producto obtenido sea pectina y el anlisis de
grupos esteres presentes de acuerdo al porcentaje de transmitancia (%T) y del
mismo modo definir si la pectina obtenida es de accin rpida (Rapidset) o
accin lenta (Slowset).
Trat
1
2
3
4
5
6
7
8
Tratamientos
Rendimiento
Repeticiones
Tratamiento
1
2
3
Promed
T1 pH1 t1
T2 pH1 t1
T1 pH2 t1
T2 pH2 t1
T1 pH1 t2
T2 pH1 t2
T1 pH2 t2
T2 pH2 t2
Donde:
T: Temperatura del tratamiento en grados centgrados () con dos niveles
pH: pH de la solucin acida en el proceso de extraccin con dos niveles
51
t: Tiempo de inmersion en minutos (min) con dos niveles
Tratamientos
1
2
3
4
5
6
7
8
T1 pH1 t1
T2 pH1 t1
T1 pH2 t1
T2 pH2 t1
T1 pH1 t2
T2 pH1 t2
T1 pH2 t2
T2 pH2 t2
Donde:
T
:
pH
:
t
:
Visc :
SAG :
t.gel :
T.gel :
Propiedades fsicas
3
Visc(Cp)
SAG
t.gel
T.gel
52
Trat
1
2
3
4
5
6
7
8
Tratamientos
Repeticiones
1
2
3
Propiedades funcionales
WRC
SC
FAC
CAd
T1 pH1 t1
T2 pH1 t1
T1 pH2 t1
T2 pH2 t1
T1 pH1 t2
T2 pH1 t2
T1 pH2 t2
T2 pH2 t2
Donde:
T:
pH:
t:
WRC:
SC :
FAC :
CAd :
Trat
Tratamientos
Repeticione
s
1
1
2
3
4
5
6
7
8
Propiedades qumicas
%Hu
m
%Ce
n
P.eq
%Me
t
%AG
A
%G.E
T1 pH1 t1
T2 pH1 t1
T1 pH2 t1
T2 pH2 t1
T1 pH1 t2
T2 pH1 t2
T1 pH2 t2
T2 pH2 t2
Donde:
T
pH
t
%Hum
53
%Cen
P.eq
%Met
%AGA
%G.E
:
:
:
:
:
Porcentaje de cenizas
Peso equivalente
Porcentaje de metoxilos
Porcentaje de acido galacturnico
Porcentaje de grado de esterificacin
5.8.1.1.2.
HIPTESIS NULA(H0)
HIPTESIS ALTERNA(Ha)
54
5.8.2.SELECCIN DE LAS PRUEBAS ESTADSTICAS
Se aplicara el anlisis de varianza ANOVA de F calculado al 5 % y luego el clculo del
nivel de significancia determinara la continuacin de los anlisis por las pruebas Tukey y
Duncan. Par los anlisis respectivos se utilizaran el software estadstico Statgraphics
centurin XVI, y el SPSS.
5.8.3.CONDICIONES PARA RECHAZAR O ACEPTAR LA HIPTESIS
Para la seleccin de prueba estadstica el nivel de aceptacin de error representa un tanto de
error que se puede admitir en el anlisis y en las etapas de la experimentacin, en este caso
la evaluacin se dar a un nivel de =5% ( =0.05).
CAPTULO VI
ADMINISTRACION DEL ANTEPROYECTO
6.1. CRONOGRAMA DE ACTIVIDADES
Las actividades secuenciales que desarrollaran a lo largo de la investigacin estn sujetas al
desarrollo de cada etapa planteada, ellas nos indicaran el tiempo necesario para la
realizacin de la investigacin, incluyendo algunos imprevistos que pueden suceder
durante cada etapa
En el siguiente cuadro se muestra las etapas y el tiempo que tomara realizar cada una de
ellas.
Cuadro 17: Actividades y tiempos necesarios para cumplir las etapas de experimentacin
ETAPAS
Etapa I
Nombre de la
etapa
Recoleccin y
transporte de la
materia prima
Etapa II
Preparacin de
la muestra
Etapa III
Anlisis
organolptico y
proximal de la
cascara de tuna
Actividades
Tiempo(semanas)
1
*Recepcin
*Seleccin/clasificacin(tuna en
estado de madurez pintn
*Determinacin de caractersticas
organolpticas: olor, color, sabor,
textura, peso total y dimetro medio.
*Anlisis proximal: Brix, acidez
titulable, ndice de madurez, pH,
azucares reductores, azucares totales,
% humedad. % cenizas totales, %
protenas, % fibra cruda, %
carbohidrato, % grasa.
55
Etapa IV
Etapa V
Extraccin
de
pectina a partir
de cascara de
tuna
Caracterizacion
fisicoqumica y
funcional de la
pectina
*Inactivacin de enzimas
*Pelado y despepado
*hidrlisis acida
*Filtracin
*Precipitacin de la pectina
*Concentracin
*Secado
*Molienda
*Tamizado
*Envasado
*Determinacin
de
las
caractersticas fsicas: Viscosidad
(cp.), Grado de pectina, Tipo de
pectina, Tiempo de gelificacin,
Temperatura de gelificacin.
*Determinacin de la composicin
qumica:
Peso equivalente (g/eq), % de
Esterificacin, (%) de Metoxilos, %
de humedad, % cenizas totales.
III
IV
V
1
5
6
7
8
Tiempo (semanas)
10
11
12
13
56
CUZCO, Los equipos de laboratorio y algunos materiales diversos sern proporcionados por la
UNAMBA en uso temporal hasta la conclusin del proyecto; sin embargo algunos reactivos,
materiales de escritorio y otros sern adquiridos con financiamiento propio del investigador. El
detalle de los precios de los equipos, materiales y reactivos se indican en el cuadro x con sus
respectivas fuentes de financiamiento
tem
01.00
01.01
02.00
Descripcin
Unidad
Cant.
Precio
Unitario
S/.
Precio
Parcial
S/.
Fuente de
Financiamiento
Propio
UNAMBA
RECURSOS HUMANOS
Asesor de tesis
PER
0,00
0,00
0,00
0,00
MATERIALES DE LABORATORIO
02.01
Termmetro
UND
60,20
120,4
120,4
02.02
Cronometro
UND
15,00
15,00
15,00
02.03
Vaso precipitado
UND
15,40
77,00
77,00
02.04
Pipeta
UND
15,60
78,00
78.00
02.05
Placas petri
UND
28
5,00
140,00
140,00
02.06
Cuchillo
UND
5,00
02.07
Baln de gas
UND
98,00
98,00
02.08
UND
12
10,00
120,00
120,00
02.09
Tubos graduados 20 ml
UND
12
9,00
108,00
108,00
02.10
Desecador
UND
410,00
410,00
410,00
02.11
Brixometro
UND
750,00
750,00
750,00
02.12
Crisol vacio
UND
12
25,00
300,00
300,00
02.13
Coladores
UND
12
2,00
24,00
24,00
02.14
Ollas industriales
UND
70,00
210,00
02.15
UND
15
1,00
15,00
15,00
02.16
Tubos de ensayo
UND
28
1.50
42,00
42,00
02.17
Tamiz malla N6
UND
20,00
20,00
20,00
02.18
pH-metro
UND
270,00
270,00
270,00
03.00
Total S/.
15,00
98,00
210,00
EQUIPOS
03.01
Balanza analtica
UND
584,10
584,10
584,10
03.02
Estufa
UND
6906,90
6906,90
6906,90
2812.4
57
03.03
Centrifugadora
UND
5533,30
5533,30
5533,30
03.04
Cocina elctrica
GLOBAL
964,20
964,20
964,20
03.05
Equipo de titulacin
UND
120,00
120,00
120,00
03.06
Bao mara
UND
5138,90
5138,90
5138,90
03.07
Anlisis E. infrarrojo
UND
03.08
Horno de calcinacin
UND
2800,00
2800,00
2800,00
03.09
UND
3000,00
3000,00
3000,00
03.10
Molino manual
UND
250,00
250,00
LITRO
100
1,00
100,00
250
0,24
60,00
60,00
04.00
1700,00
250,00
REACTIVOS
04.01
Agua destilada
04.02
Hidrxido de sodio
04.03
Aceite de maz
LITRO
40,00
40,00
40,00
04.04
Acido clorhdrico
LITRO
100,00
100,00
100,00
04.05
Fenoftaleina
Ml
100
0,50
50,00
50,00
04.06
Ml
500
0,15
75,00
75,00
04.07
Etanol 96%
LITRO
60
3,30
198,00
198,00
04.08
Azcar rubia
Kg
10
2,30
23,00
23,00
04.09
Acido ctrico
50
0,10
5,00
5,00
04.10
Solucin Fheling A y B
Ml
10
0,30
3,00
3,00
05.00
100,00
Impresora
UND
400,00
400,00
400,00
05.02
Papel bond
MILLAR
30,00
30,00
30,00
05.03
Cuaderno
UND
2,00
4,00
4,00
05.04
Lapicero
UND
1,00
2,00
2,00
05.05
LITRO
50,00
100,00
100,00
05.06
Cd en blanco
UND
1,00
5,00
5,00
05.07
Empastado
UND
20,00
80,00
80,00
05.08
Fotocopias
UND
1000
0,1
100,00
100,00
05.09
Libros
UND
10,00
40,00
40,00
05.10
Tesis
UND
15,00
30,00
30,00
05.11
Revistas Cientficas
UND
10
1,50
15,00
15,00
05.12
Folders
UND
12
0.50
6,00
6,00
Recoleccin de muestras
PASAJE
10
10,00
100,00
100,00
06.02
Viajes a cuzco
PASAJE
10
20,00
200,00
200,00
HORA
150
1,00
150,00
150,00
07.01
812
TRANSPORTE
06.01
07.00
654
MATERIALES DE ESCRITORIO
05.01
06.00
26997.4
COMUNICACIONES
Internet
300
58
07.02
08.00
08.01
Telefona mvil
MIN
60
0,50
30
30,00
180
250,00
250,00
250
OTROS
Imprevistos
Total
5100,4
26905,4
32005.8
16%
84%
100%
Fuente: Precios en base a cotizaciones de ANKOM Technology, Merck KGaA Peruano y Alquimia
Laboratorio Central S.A.C.distribuidor autorizado de CIMATEC.
BIBLIOGRAFA
1. Alfredo VO, Gabriel RR, Luis CG, David BA.2009.Physicochemical Properties of a
Fibrous Fraction from Chia (Salvia hispanica L.).LWT-Food Science and Technology
42:168-173.
2. Aparicio IM.2008.Aprovechamiento de Subproductos de Leguminosas Para la Obtencin
de productos Funcionales. Comparacin de metodologas para la Caracterizacion de la
Fibra Alimentaria. Tesis (Dr.).Universidad Complutense de Madrid.
3. Canteri-Schemin,M.H;Ramos Fertonani, H.C; Waszczynskyj, N; y Wosiacki, G.
(2005).Extraction of pectin from Apple pomace.Brazilian Archives of Biology and
Technology.48, p.259-266.
4. CORONA, M; DAZ, A. (1994).Extraccin y caracterizacin de pectina de la corteza de
parchita .Trabajo de tesis .Facultad de Ingenieria. Universidad del Zulia. Maracaibo,
Venezuela.3-40.
5. Constenla, D y lozano, J.E. (2003).Kinetic model of pectin demethylation.Latin American
applied Research, 4, p.91-96.
6. Escalada Pla MF, Ponce NM, Stortzb CA, Gerschenson LN, Rojas AM.2007 Composition
and Functional Properties of Enriched Fiber Products Obtained from Pumpkin (Cucurbita
moschata Duchesne ex Poiret).LWT 40:1176-1185.
7. Femenia A, Lefebvre AC, Thebaudin JY, Robertson JA, Bourgeois CM.1997, Physical and
Sensory Propertie of Model Foods Supplemented with Cauliflower Fiber. Journal of Food
Science.62,653-639
8. Habibi y Heyraud 2004, Structural features of pectic polysaccharides from the skin opuntia
ficus-indica prickly pear fruits Carbohydrate Research, 339, 1119-127.
9. KAMNEV,ALEXANDER A.(1998).Comparative spectroscopic characterization of
different pectins and their sources.Food Hydrocolloids.12.pp.263-271
10. Lecumberri E, Mateos R, Izquierdo MP, Ruprez P,Goya L,Bravo L.2007.Dietary Fibre
Composition, Antioxidant Capacity and Physico-Chemical Properties of a Fibre-Rich
Product from Cocoa(Theobroma cacao L).Food Chemistry 104:948-954.
11. Lunn J, Buttriss LJ.2007.Carbohydrates and Dietary Fibre.Bristish Nutrition Foundation
Nutrition Bulletin 32:21-64.
12. Miyamoto, A. y K.C.Chang.Extraction and physicochemical characterization of pectin
from sunflower head residues.Journal of Food Science 57, 1992.
13. Noor Aziah AA, Komathi CA.2009.Physicochemical and Functional Properties of Peeled
and Unpeeled Pumpkin Flour. Journal of Food Science 74(7):S328-S333
14. PAGAN J (1998).Degradacin enzimtica y caractersticas fsicas y qumicas de la pectina
del bagazo del melocotn .Tesis de grado Universidad de Lleida pp.16-17
59
15. Raghavendra SN, Rastogi NK, Raghavarao KS, Tharanathan RN.2004.Dietary Fiber from
Coconut Residue: Effects of Different Treatments and Particle Size on the Hydration
Properties.Eur Foods Res Technol 218:563-567.
16. Raghavendra SN, Ramachandra SSR, Rastogi NK, Raghavarao KSMS, Sourav K,
Tharanathan RN.2006.Grinding Characteristics and Hydration Properties of Coconut
Residue: A Source of Dietary Fiber. Journal of Food Engineering, 72:281-286.
17. Rodriguez R, Jimnez A, Fernndez JB, Guilln R, Heredia A.2006.Dietary Fibre from
Vegetable Products as Source of Functional Ingredients. Trends in Food Science&
Technology 17:3-15.
18. Robertson JA, Morendon F, Dysseler P,Guillon F,Amado R,Thibault JF.(2000).Hydration
Properties of Dietary Fiber and Resistant Starch: a European Collaborative Study.
Lebensmittel Wissenchaft-und-Technologie, 33:72-79.
19. Rodrguez MI.2006.Caracterizacion Qumica de Fibras de Plantas Herbceas utilizadas
para la fabricacin de Pastas de Papel de Alta calidad. Tesis (Dr.) Universidad de Sevilla.
20. Saenz, C.2000.Processing tecnologies: an alternative for cactus pear (Opuntia spp.)fruits
and cladodes.Journal of Arid Enviroments, 46,209-225.
21. Snchez SB.2005.Caracterizacion Fisicoqumica y Funcional de la Fibra Diettica del
Fruto de Nspero (Eriobotrya japnica) y de la cascara de mango Obo (Mangifera indica
L).Tesis (Ing.) Universidad Tecnolgica de la Mixteta.
22. Sangnark A, Noomhorm A.2004.Chemical, Physical and Baking Properties of Dietary
Fiber Prepared from Rice Straw. Food Research International 37:66-74
23. Saw YH, Janaun J, Subbarao D.2008.Hydration Properties of Palm Kernel Cake Journal of
Food Engineering 89:227-231.
24. SIERRA FERNANDA (2007).Diseo de un proceso para la obtencin y purificacin de
pectina a partir de los productos secundarios del caf. Tesis grado Universidad Medelln
pp:24,30,50
25. Tosh SM, Yada S.2010.Dietary Fibres in Pulse Seeds and Fractions: Characterization,
Functional Attributes, and Applications. Food Research International 43:450-460.
26. Ubando RJ, Navarro OA, Valdivia LM.2005.Mexican Lime Peel: Comparative Study on
Contents of Dietary Fibre and Associated Antioxidant Activity. Food Chemistry 89:57-61.
27. Vzquez-Ovando
A,
Rosado-Rubio
G,Chel-Guerrero
L,Betancur-Ancona
D.2009.Physicochemical properties of a fibrous fraction from chia (Salvia hispanica
L.).LWT-Food Science and Technology 42:168-173.
28. Viuda-Martos M, Lpez-Marcos MC.Fernndez-Lpez J.Sendra E, Lpez-Vargas JH,
Prez-lvarez JA.2010.Role of Fiber in Cardiovascular Diseases: A Review.
Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety 9:240-258
29. Ziga MM.2005.Caracterizacin de Fibra Dietaria en Orujo y Capacidad Antioxidante en
vino, Hollejo y Semilla de uva. Tesis (Lic.) Universidad de Chile.
60
ANEXOS
Anexo 1: ndice tentativo para la tesis
INDICE DE CONTENIDO
Contenido
Pagina
ndice de figuras
ndice de cuadros
Resumen
Summary
I.
II.
III.
INTRODUCCION
HIPTESIS 4
OBJETIVOS 4
3.1.Objetivo general 4
3.2.Objetivos especficos 4
IV.
MARCO TERICO 4
V.
PARTE EXPERIMENTAL
4
.1. Lugar de ejecucin
4
.1. Campos de cultivo y toma de muestras
4
.1. Materiales equipos y reactivos 4
5.3.1. Materiales 4
5.3.2. Equipos
4
5.3.3. Reactivos
4
.2. Metodologa
4
VI.
RESULTADOS Y DISCUSIONES 4
VII.
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
BIBLIOGRAFIA
ANEXOS
APENDICES 4
61
62
17. Rodriguez R, Jimnez A, Fernndez JB, Guilln R, Heredia A.2006.Dietary Fibre from
Vegetable Products as Source of Functional Ingredients. Trends in Food Science&
Technology 17:3-15.
18. Robertson JA, Morendon F, Dysseler P,Guillon F,Amado R,Thibault JF.(2000).Hydration
Properties of Dietary Fiber and Resistant Starch: a European Collaborative Study.
Lebensmittel Wissenchaft-und-Technologie, 33:72-79.
19. Rodrguez MI.2006.Caracterizacion Qumica de Fibras de Plantas Herbceas utilizadas
para la fabricacin de Pastas de Papel de Alta calidad. Tesis (Dr.) Universidad de Sevilla.
20. Saenz, C.2000.Processing tecnologies: an alternative for cactus pear (Opuntia spp.)fruits
and cladodes.Journal of Arid Enviroments, 46,209-225.
21. Snchez SB.2005.Caracterizacion Fisicoqumica y Funcional de la Fibra Diettica del
Fruto de Nspero (Eriobotrya japnica) y de la cascara de mango Obo (Mangifera indica
L).Tesis (Ing.) Universidad Tecnolgica de la Mixteta.
22. Sangnark A, Noomhorm A.2004.Chemical, Physical and Baking Properties of Dietary
Fiber Prepared from Rice Straw. Food Research International 37:66-74
23. Saw YH, Janaun J, Subbarao D.2008.Hydration Properties of Palm Kernel Cake Journal of
Food Engineering 89:227-231.
24. SIERRA FERNANDA (2007).Diseo de un proceso para la obtencin y purificacin de
pectina a partir de los productos secundarios del caf. Tesis grado Universidad Medelln
pp:24,30,50
25. Tosh SM, Yada S.2010.Dietary Fibres in Pulse Seeds and Fractions: Characterization,
Functional Attributes, and Applications. Food Research International 43:450-460.
26. Ubando RJ, Navarro OA, Valdivia LM.2005.Mexican Lime Peel: Comparative Study on
Contents of Dietary Fibre and Associated Antioxidant Activity. Food Chemistry 89:57-61.
27. Vzquez-Ovando
A,
Rosado-Rubio
G,Chel-Guerrero
L,Betancur-Ancona
D.2009.Physicochemical properties of a fibrous fraction from chia (Salvia hispanica
L.).LWT-Food Science and Technology 42:168-173.
28. Viuda-Martos M, Lpez-Marcos MC.Fernndez-Lpez J.Sendra E, Lpez-Vargas JH,
Prez-lvarez JA.2010.Role of Fiber in Cardiovascular Diseases: A Review.
Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety 9:240-258
29. Ziga MM.2005.Caracterizacin de Fibra Dietaria en Orujo y Capacidad Antioxidante en
vino, Hollejo y Semilla de uva. Tesis (Lic.) Universidad de Chile.
63
ANEXO N03 Matriz de consistencia del proyecto de investigacin
EXTRACCIN Y CARACTERIZACIN
DE PECTINA A PARTIR DE LA CSCARA DE TUNA
Problemas
Objetivos
Hiptesis
Variables
OG:
Determinar
los
parmetros de extraccin
de pectina a partir de la
cascara de la tuna (Opuntia
ficus) por hidrlisis y su
influencia
en
el
rendimiento
y
sus
caractersticas
(fisicoqumicas
y
funcionales).
OE1: Determinar si el pH
de la solucin cida en el
proceso de extraccin de
pectina a partir de la
cascara de tuna influye en
el rendimiento y en sus
caractersticas
(fisicoqumicas
y
funcionales).
OE2: Correlacionar la
influencia
de
la
temperatura de la solucin
cida en el proceso de
extraccin de pectina a
partir de la cascara de tuna
con el rendimiento y sus
caractersticas
(fisicoqumicas
y
funcionales).
OE3:Determinar el tiempo
de extraccin de pectinas
por solucin cida a partir
de la cascara de tuna y su
influencia
en
el
rendimiento y en sus
caractersticas
(fisicoqumicas
y
Variable
independientes
extraccin de pectina a
partir de la cascara de la
tuna (Opuntia ficus) por
hidrlisis cida
Variables dependientes
Rendimiento de pectina
Propiedades fsicas de la
pectina
Indicadores
- Temperatura
- pH
- Tiempo
Cuantificacin de pectina
% de pectina
Cp
Grado de pectina
Tipo de pectina
(Espectrofotometra
infrarrojo)
Tiempo de gelificacin
Capacidad de retencin de
agua
Propiedades qumicas de
la pectina
T()
: 60 , 80
pH
:1.5 , 3.0
1 (min) :30 , 60
Viscosidad
Temperatura de
gelificacin
Propiedades funcionales
de la pectina
ndices
Mtodos
Tipo y nivel de
investigacin:
Tipo: Aplicada
Nivel: Explicativo
experimental
Mtodo y diseo de
investigacin
Mtodo: Experimental
Diseo: Cuasi
experimental
min
Capacidad de
hinchamiento
ml de agua/g de muestra
seca
Capacidad de adsorcin de
aceite
g de aceite /g de muestra
seca
Peso equivalente
g/eq
Ac galacturnico
Grado de esterificacin
Metoxilos
Humedad
Cenizas
Poblacin
Tuna existente en el distrito
X, Abancay
Muestra:
Frutos de tuna
homogneas a un mismo
estado de
madurez(pintn)tomadas
al azar en los campos de
cultivo =48 Kg
Diseo experimental
Diseo
factorial
23,3
factores con 2 niveles cada
uno y con 3 repeticiones
.En total 24 unidades
experimentales
64
funcionales)
65
ANEXO N04
DETERMINACIN DE HUMEDAD (Mtodo de la estufa de aire)
Mtodo: gravimtrico (A.O.A.C.2005)
Procedimiento: En tres placas petri, se coloco 10 g de muestra (cascara de tuna) para cada placa,
previamente se registro los pesos iniciales de la placa seca y de la muestra en estudio .luego se
colocan las placas petri destapadas y las tapas en la estufa de desecacin durante 1hora a la
temperatura 1022.luego del tiempo transcurrido se coloco la tapa sobre la placa y se llevo al
desecador, se dejo enfriar a temperatura ambiente y se registro el peso, esta operacin se repiti por
3 veces, hasta que los pesos de la muestra sea constante(no difieran en ms de 0,0005 g).
Calcular la humedad mediante la siguiente formula
% de Humedad =
M 1M 2
*100
M3
Donde:
M1 =masa inicial en gramos, de la placa seca mas la muestra
M2 =masa final en gramos de la placa y su tapa mas la muestra
M3 =masa, en gramos de la muestra utilizada para el anlisis
ANEXO N05
DETERMINACIN DE CENIZAS TOTALES (Mtodo A.O.A.C 1998)
Materiales y equipos
Crisol de porcelana
Procedimiento:
Pselo tan pronto como sea posible para prevenir la absorcin de humedad, usando siempre
pinzas de metal para manejar los crisoles despus de que se incineran o secan.
Pesar por diferencia de 1.5 a 2,0 g de muestra en el crisol tarado. Colocarlo en la mufla y
mantenerlo a temperatura de 600 aproximadamente 8 horas.
66
% cenizas =
Bureta de 25 ml
Matraz de erlenmeyer
Balones de digestin
Estufa de digestin
Procedimiento
Luego se procede la titulacin con HCL valorado (aproximadamente 0,05N) tomar nota
del gasto.
Calculo:
67
Cantidad de nitrgeno
%Nitrgeno =
V HCLN HCLmeq N
x 100
peso muestra
ANEXO N07
DETERMINACIN DE FIBRA CRUDA (Mtodo A.O.A.C 1984)
Materiales reactivos y equipos
Vasos de 600 ml
Estufa elctrica
Embudo de Buchner
Matraz kitasato
Bomba de vacio
Procedimiento
Digestin acida: pesar 3g de muestra (exenta de grasa) en un vaso de 600 ml aadir 200 ml
de H2SO4 al 1,25. hervir suavemente 30 min de hervido, filtrar el contenido del baln
haciendo uso del embudo Buchner y el kitasato, lavar con agua caliente para neutralizar la
acidez.
Digestin alcalina: aadir 200 ml de NaOH al 1,25 %, hervir exactamente 30 minutos, con
el mismo cuidado que en la ebullicin con acido .Filtrar el contenido del erlenmeyer,
lavando con agua destilada hirviendo, lavar con agua caliente tres veces. Luego desecar a
100 en una estufa por 2 horas .Pesar el crisol vacio, colocar la muestra en un crisol y
pesar (P1).Secar a 600 durante 3 horas. Enfriar el crisol en desecador y volver a pesar
crisol mas muestra (P2).
Calculo
%Fibra bruta =
(P 2P1)
Peso muestra
x 100
68
ANEXO N08
DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS
Los carbohidratos se determinaron por diferencias despus de que se han completado los anlisis
para humedad, cenizas, fibra cruda, extracto etreo y protena cruda.
Calculo:
%Carbohidrato = 100-(humedad +cenizas+ fibra +extracto etreo+ %protena) %
ANEXO N09
DETERMINACIN DE GRASA TOTAL (METODO SOXHLET)
Segn la A.O.A.C (1998)
Reactivos, materiales y equipos
Procedimiento
Para este mtodo se utilizan muestras deshidratadas se secan en una estufa los balones
esmerilados a usar por el intervalo de una hora, luego enfriar en un desecador y pesar.
Pesar 5g de muestra seca, empaquetarla en un pedazo de papel de filtro Whatman N
02,hacer un cartucho
Colocar el cartucho en el cuerpo del aparato soxhlet y agregar el solvente orgnico
(hexano) a utilizar hasta que una parte del mismo sifonee hacia al baln. Seguidamente
conectar a la estufa elctrica
Controlar la velocidad de goteo , de 45 a 60 gotas por minuto
El proceso dura aproximadamente 6 horas. El baln debe sacarse del aparato cuando
contenga poco solvente, es decir momentos antes que este sea sifoneado desde el cuerpo.
Evaporar el solvente remanente en el baln de la estufa y enfriar en el desecador. Pesar y
anotar
Calculos
69
%Grasa =
W
( qW v )
x 100
Wm
Donde:
W m = peso de la muestra
ANEXO N10
PREPARACIN DE LA JALEA DE PRUEBA (METODO I.F.T.1959)
Disuelva 48.8 g de cristales de acido tartrico en agua destilada y afrela en fiola de 100 ml
Calcule el peso de pectina a usarse dividiendo 650 entre el valor del grado asumido de la
pectina a probarse
Las jaleas deben tener 65 % SST(650g de solidos solubles totales en 1,000 g de jalea)
La proporcin de peso existente de pecina en relacin al de la azcar en la jalea se define
como grado asumido para la pectina en la jalea
Por lo tanto el peso de pectina a usarse es 650/grado asumido, ejemplo si el grado asumido
es 150 , requieren 4,33g(650/150) de pectina
Pese 646 g de azcar y 4,33 g de pectina
Mezclar la pectina con cerca de 20-30 del azcar pesada en un Beaker seco de 150 ml
Anote el peso del agitador y cacerola de acero inoxidable
Vierta 410 ml de agua destilada en la cacerola , seguido de la mezcla pectina azcar
Agite suavemente por 2 minutos
Lleve la cacerola a la cocinilla .lleve el contenido hasta ebullicin total
Agregue el resto de azcar , contine calentando y agitando hasta que el azcar se disuelva
Contine la ebullicin hasta que el peso de la jalea sea 1,015 g ,neto
Si este peso fuera menor agregue un ligero exceso de agua destilada y hirvala
moderadamente hasta corregir el peso
El tiempo de coccin total no debe exceder de 5-8 minutos
Despus de retirar la jalea de la balanza djele reposar por 1 minuto y luego ladee la
cacerola de modo que el contenido pueda fluir
Elimine la espuma o nata. Retire el agitador, coloque un termmetro en el recipiente y
agtelo ligeramente hasta que la temperatura sea exactamente 95.
Enseguida vierta rpidamente la jalea a los vasos (*)del ridgelimetro conteniendo cada uno
2 ml de la solucin de acido tartrico
Mientras est llenando los vasos, agite la jalea vigorosamente con una bagueta .vierta la
jalea rpidamente hasta que los vasos estn llenos en parte y luego hgalo ms lento hasta
que se llenen completamente hasta el punto rebose. La solucin acida logra mezclarse con
la jalea cuando se hace el vertido rpido
Despus de 15 min , cubra los vasos con tapas metlicas que se fijen hermticamente
70
Guarde las jaleas de 20-24 horas a una temperatura de 25 para hacer la medicin de la
fuerza del gel.
ANEXO N 11
DETERMINACIN DE ACIDEZ TITULABLE
Mtodo: Acidez titulable (A.O.A.C.2005)
Procedimiento: Pesar 10 g de cascara de tuna, se trituro hasta obtener el cremogenado, luego se
aforo a 250 ml de agua destilada, se tomo un volumen de 20 ml para nuevamente aforar a 100 ml,
luego se separo en tres alcuotas de 30 ml para la correspondiente titulacin por triplicado previa
adicin de 3 gotas de Fenoftaleina, finalmente se titulo con NaOH 0.1 en agitacin, anotando el
volumen gastado del hidrxido de sodio.
Clculos
Los resultados se expresaron en porcentaje de acidez (expresado en acido ctrico) teniendo en
cuenta el factor de dilucin
V 1 . N . meq . f
% de acidez =
V2
x 100
Siendo
ANEXO N12
DETERMINACIN DE AZUCARES REDUCTORES
Mtodo. Volumtrico de Lane y Eynon (A.O.A.C.2005)
71
Fundamento. Propiedad de los azucares de la muestra de reducir el cobre de la solucin Fheling en
proporcin volumtrica y formacin del oxido cuproso en solucin alcalina cuprosa
Preparacin de la muestra: Se peso 75 g de pulpa de nspero (w) triturarlo en un mortero y
homogenizar con 100 ml de agua.se transfiri a un baln de 500 ml diluyndolo con agua hasta el
aforo (d) y se filtro
Clarificacin: se transfiri una alcuota(c) de 25 ml a un baln volumtrico de 250 ml. Se diluyo
aproximadamente 100 ml de agua. Se agrego 1 a 2 ml de solucin acetato de plomo, luego se
mezclo y enrazo el baln. Se filtro y se descarto las primeras porciones, el filtrado debe ser
completamente transparente.
Titulacin: En un matraz erlenmeyer de 250 ml se coloco 5 ml de solucin Fheling A y 5ml de
Fheling B.se diluyo hasta 40ml con agua calentar hasta ebullicin
Se titulo con la solucin clarificada y filtrada, colocada en una bureta hasta que el color azul se
haga muy tenue (se aprecio la formacin de un precipitado rojo oxido cuproso).
Entonces se agrego 1ml de azul de metileno al 0.2 %(3 a 4 gotas)
Se calculo los azucares reductores presentes en 100 ml de la solucin problema. Estos clculos se
facilitan mediante el uso de tablas especiales. El manual de mtodos AOAC (1975), presenta tablas
de equivalencia para diferentes azucares, cuando se utilizan 10 o 25 ml de la solucin Fehling. El
numero de miligramos del azcar indicado en la tabla (factor de equivalencia) y se calcula
porcentualmente as:
mg de azcar en 100 ml =
factor de equivalencia
x 100
ml gastado
Para calcular el porcentaje de azucares reductores en la muestra original (pulpa cascara de tuna)
aplicando las siguientes formulas
Azucares reductores (%) =
Fbd100
awc1000
Donde
F: factor de equivalencia (mg de azcar que reducen 10 ml de solucin de Fehling) ejemplo.47.5mg
de glucosa.
a: ml solucin problema (filtrado) gastados para titular la solucin fehling (para 10 ml)
b: volumen a que se llevo la solucin de azucares durante la clarificacin
c: alcuota tomada de la solucin de azucares para la clarificacin
d: volumen que se llevo la muestra original
w: peso de la muestra original
Si se ajusta la tcnica especficamente a los volmenes estipulados en el procedimiento, la formula
se abrevia de la siguiente manera:
72
F250500100
Azucares reductores (%) = aw251000
ANEXO N13
DETERMINACIN DE AZUCARES TOTALES
Mtodo. Volumtrico de Lane y Eynon (A.O.A.C.2005)
Fundamento. Propiedad de los azucares de la muestra de reducir el cobre de la solucin Fheling en
proporcin volumtrica y formacin del oxido cuproso en solucin alcalina cuprosa
Se transfiri con una pipeta volumtrica, 50 ml de filtrado clarificado, a un baln volumtrico de
100 ml.se agrego 5ml de HCL 1:1
Luego se calent a 70 durante 5 min, se dejo enfriar a temperatura ambiente y se neutralizo con
NaOH 1N, usando Fenoftaleina como indicador, se diluyo con agua hasta la seal de enrace.
Se titula y calcula el porcentaje de azucares totales, siguiendo el mismo procedimiento sealando
para azucares reductores pero multiplicando el resultado final por 2 para compensar la dilucin
adicional (100/50ml).
ANEXO N14
DETERMINACIN DE NDICE DE MADUREZ
Se realizaron las pruebas para determinar los Brix con ayuda del refractmetro y acidez titulable
por medio de titulacin con NaOH 0.1 N, para el estado de madurez del fruto fresco, y finalmente
se determino el valor del ndice de madurez con la relacin (Brix/acidez titulable)
Brix
ndice de madurez = acidez titulable
Estado verde
Estado maduro
73
ANEXO N15
Agar
Alginatos
Almidn
Es de los hidrocoloides con mayor uso en la industria de los
Usos tpicos en
alimentos
Medios microbiolgicos,
gelatinas, geles de carnes
sintticas.
Anlogos frutales, en
productos crnicos,
extrusin de protenas.
Aderezos,
productos
productos
salsas,
crnicos,
lcteos,
74
alimentos. A menudo adquirido como aditivo bsico
Carragenina
CM
CMC
Gelana
Gelatina
rellenos
para
panificacin,
flanes,
pudines,
alimentos
instantneos.
Pudines rellenos para
panadera,
yogurt,
helados
postres
congelados,flanes,formul
aciones
infantiles,
estabilizacin de bebidas
de chocolate, aderezos,
formulas
infantiles,
control de sinresis en
alimentos instantneos,
etc.
Farmacuticos
en
conjunto con la levadura
de cerveza se elaboran
alimentos
complementarios
(dietticos
y
para
deportistas).
Farmacuticos,
en
conjunto con la levadura
de cerveza se elaboran
alimentos
complementarios(diettic
os y para deportistas)
Gelatinas
mermeladas,
confituras,
glaseados,
postres
instantneos,
helados
malteados,
yogurt, pudines
Gelatinas, productos de
confitera
,productos
crnicos,
productos
lcteos refrigerados
Retardacin
de
la
75
Goma arbiga
Goma casia
Goma de
algarrobo
Pectina
Tragacanto
Xantana
Alimentos casia
Postres
quesos
embutidos
congelados,
frescos,
Mermeladas,
jaleas,
formulaciones
frutales
para productos lcteos,
estabilizacin de bebidas
lcteas y jugos de frutas,
rellenos de pastelera,
merengues y glaseados.
Estabilizante de salsas
,sopas, helados derivados
lcteos y productos de
repostera
76