BUENAS TCNICAS DE PIPETEO

COPIA CONTROLADA

REDUCIR ERRORES DE PIPETEO

Una buena Tcnica incrementa la Precisin entre 0,1% a 5%
Optimizar el rango de volumen (seleccionar el volumen correcto de la micropipeta puede mejorar la precisin en 1%)
Trabajar en el 35% al 100% del rango de volumen, mejora la exactitud y precisin.
Velocidad de aspiracin (una tcnica correcta puede mejorar la precisin entre 0,2% a 5%)
Use un ritmo de pipeteo constante.
Pipetee con una velocidad y suavidad constantes al presionar y soltar el mbolo.
Excesiva velocidad puede producir salpicaduras hacia el interior, daando el sello, el anillo y el pistn.
Angulo de inmersin de la punta (una tcnica correcta puede mejorar la precisin entre 0,5% hasta 5% para micro volmenes)
Mantenga un ngulo de inmersin los ms cercano posible a la posicin vertical o dentro de 20 de la posicin vertical.
Profundidad de inmersin de la punta (una tcnica correcta puede mejorar la precisin entre 1% a 5% para micro volmenes)
Si la punta se sumerge demasiado,
ms lquido ser aspirado debido al
incremento de presin.
Si la punta no se sumerge lo suficiente,
el aire puede ser aspirado, generando
burbujas de aire y un volumen incorrecto.
Angulo Correcto

Angulo Incorrecto

Tiempo de inmersin de la punta ( una tcnica correcta puede mejorar la precisin en 1% para volmenes grandes)
Mantenga la punta dentro de la muestra por al menos 2 segundos luego de la aspiracin
y retrela lenta y suavemente tocando la pared interna del recipiente.
El lquido continua fluyendo hacia el interior de la punta despus de que el mbolo se detiene.
Pre-enjuague de las puntas de la micropipeta (una tcnica correcta puede mejorar la precisin en 0,2%)
Pre-enjuague la punta 2 veces con el mismo lquido que est siendo dispensado.
Aspire la muestra y dispnsela en el recipiente de desecho.
El pre-enjuague incrementa la humedad dentro de la punta, reduciendo as la evaporacin.
Ajuste del micrmetro Tcnica del dial hacia abajo (una tcnica correcta puede mejorar la precisin en 0,2%)
Cuando decremente el volumen simplemente ubique el micrmetro en el volumen deseado.
Cuando incremente el volumen gire el micrmetro 1/3 de vuelta por encima del volumen
deseado y ubquelo en el volumen deseado.
La tcnica "dial hacia abajo" reduce los efectos de la reaccin mecnica o
el deslizamiento de los engranajes del micrmetro y asegura una mayor precisin.
Efectos del calentamiento manual (una tcnica correcta puede mejorar la precisin entre 0,2% a 0,5%)
Cuando pipetea por perodos prolongados de tiempo, su mano puede calentar el aire en el interior
de la micropipeta (el volumen de aire se expande, generando resultados imprecisos)
Use pipetas hechas de polmeros PVSF de alto grado.
No mantenga continuamente la micropipeta en su mano entre ciclos de pipeteo
Despus de pipetear, siempre coloque la micropipeta de vuelta en su soporte.
Tcnica de dispensado recomendada (una tcnica correcta puede mejorar la precisin en 1%)
Dispense el lquido contenido en la pipeta llevando el mbolo
de la micropipeta hasta el segundo tope y tocando suavemente
la punta de la micropipeta contra la pared interna del
recipiente receptor por encima de la superficie del lquido en
un ngulo de aproximadamente 30 a 45 y retirndola
aproximadamente de 8 mm a 10 mm a lo largo de la pared
interna de dicho recipiente para eliminar cualquier gota
alrededor del orificio de la punta. Mantener el mbolo de la
micropipeta presionado hasta el segundo tope mientras se retira
la micropipeta del recipiente receptor.
NO SE DEBE HACER!
NO sumerja otra cosa que la punta de la micropipeta dentro de la muestra
Una vez llena, NO coloque la pipeta en posicin horizontal o en un ngulo de ms de 20 de la posicin vertical.
NO gire el volumen por encima del mximo de la micropipeta.
Si la micropipeta se cae, NO asuma que est funcionando correctamente, revsela!.
NO gire el volumen sin desbloquear la micropipeta antes.
QU DEBE HACERSE!
Revise y limpie el conjunto sello/anillo y pistn regularmente.
Limpie la pipeta si los aerosoles o salpicaduras de agua se producen sin el uso de una punta con filtro.
Siempre seque completamente los componentes de la micropipeta antes de re ensamblar.

Cdigo: D-GA-24, Versin 01. Aprobado: 2012-06-07

Las pipetas son la base de muchos

experimentos; si la pipeta no est
funcionando correctamente, sus
resultados estarn comprometidos.