Manual ABCE Ed2 180812

Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Facultad de Estudios Superiores Cuautitln

Departamento de Ciencias Biolgicas
Seccin de Ciencias de la Salud Humana
Licenciatura en Bioqumica Diagnstica
Clave: 105-39
Manual de Prcticas de Laboratorio de
Anlisis Bioqumicos Clnicos

Especiales
Clave 1635
Autores
QFB Martha Patricia Campos Pen
QFB Ren Damin Santos
M en C Gloria Leticia Arellano Martnez
QFB Beatriz Luca Gonzlez Maldonado
QFB Luis Antonio Gordillo Resndiz
Agosto, 2012
Edicin 2
Manual de Prcticas de Laboratorio de Anlisis Bioqumicos Clnicos Especiales
Contenido
Alcance
ii
Presentacin
ii
Vinculacin de las prcticas de laboratorio con el

contenido del temario de la asignatura
iii
Objetivo general de la asignatura
iv
Objetivo del manual
iv
Introduccin del manual
Reglamento de laboratorio
vii
Prctica 1. Elaboracin de cartas control
Prctica 2. Obtencin de valores de referencia
Prctica 3. Espermatobioscopa directa
12
Prctica 4. Evaluacin del lquido cefalorraqudeo
22
Prctica 5. Diferenciacin de exudados y
31
trasudados
Prctica 6. Examen coprolgico
37
Prctica 7. Equilibrio hidroelectroltico y cido-base 47

Prctica 8. Electrolitos del metabolismo mineral
51
Prctica 8. Determinacin de hormonas
56
Anexo A
59
Anexo B
60
ALCANCE
El presente manual debe ser utilizado por los profesores asignados al laboratorio de Anlisis Bioqumicos
Clnicos Especiales, como fuente de informacin bsica, debido a que contiene las actividades a realizar
en cada una de las prcticas correspondientes a este laboratorio de enseanza experimental.
Asimismo, los alumnos inscritos en este laboratorio deben utilizar y consultar este manual, como parte de
las actividades cotidianas que se evaluarn en su desempeo dentro del laboratorio.
PRESENTACIN
El presente manual consta de las prcticas Elaboracin de cartas control, Obtencin de valores de
referencia, Espermatobioscopa directa, Evaluacin del lquido cefalorraqudeo, Diferenciacin de
exudados y trasudados, Examen coprolgico, Cuantificacin de electrolitos y Determinacin de hormonas.
Cada una de las prcticas est redactada bajo el siguiente esquema:
1. la introduccin que introduce al estudiante a los conocimientos previos de la prctica; a
continuacin, una serie de preguntas, bajo el rubro informacin complementaria, que el alumno
debe contestar despus de haber consultado bibliografa actual, para complementar el marco
terico;
2. el objetivo (u objetivos) indica los conocimientos o habilidades que el estudiante debe adquirir al
terminar la prctica;
3. los materiales divididos en biolgicos, por equipo, por grupo y reactivos, para que el alumno
conozca el material que le ser entregado para hacer la prctica;
4. la metodologa, donde se describe el fundamento, el significado clnico y la tcnica de cada
determinacin a realizar durante la prctica;
5. la disposicin de residuos, basada en la NOM-087-SEMARNAT-2002.
Para cumplir con los requisitos que indica el Sistema de Gestin de la Calidad Corporativo de la Facultad
de Estudios Superiores Cuautitln (SGC-C FESC), el manual debe contener espacios para que el alumno
escriba los resultados, la discusin, las conclusiones y las referencias que haya consultado. El grupo
acadmico de profesores ha observado que es adecuado que el documento se divida en un Manual de
prcticas, que contiene toda la informacin indicada en los cinco puntos anteriores y que la informacin
que el alumno obtenga sea registrada en un documento llamado Cuaderno de Prcticas, que complementa
al presente documento.
Los alumnos de la asignatura reciben la versin electrnica en formato PDF (protegido contra cambios) de
este Manual; se les indica que estn en libertad de manejarlo en este formato o de imprimirlo, segn lo
prefieran. El Cuaderno de prcticas debe imprimirse en hojas de papel bond blanco, dos pginas por hoja
en negro.
ii
VINCULACIN DE LAS PRCTICAS DE LABORATORIO CON EL CONTENIDO DEL

TEMARIO DE LA ASIGNATURA
En el siguiente cuadro se indica la vinculacin de las prcticas que se desarrollan en la enseanza
experimental con el temario correspondiente a esta asignatura.
Unidad
(nmero
y Prctica con la que se Contenido que permite la vinculacin
nombre)
vincula
1. Control de calidad
1. Elaboracin
en
el
laboratorio
de En la teora se abordan los conceptos bsicos del
cartas control
control de calidad interno (CCI) del laboratorio clnico;
clnico
en la prctica se elaboran cartas control y se conocen

los principios para la preparacin de sueros control,
que son dos elementos que forman parte de la etapa
analtica del CCI.
1. Control de calidad
2. Obtencin
en el laboratorio clnico
valores
de Como parte de la calidad que ofrece cada laboratorio,

de deben
seminal
los
valores
de
referencia
considerando la poblacin a la que brinda servicio.
referencia.
2. Estudio de lquido
obtenerse
3. Espermatobioscopa
directa
En la unidad se aborda la anatoma y fisiologa y

patologas relacionadas con el aparato reproductor
masculino;
en
el
laboratorio
se
realiza
una
espermatobioscopa directa, estudio con el que se

inicia la evaluacin de la fertilidad del varn.
3. Estudio de lquido
cefalorraqudeo
4. Evaluacin
del En la teora se estudia el proceso de formacin del
lquido
lquido cefalorraqudeo y se resalta la importancia de
cefalorraqudeo
su evaluacin en patologas relacionadas con el

encfalo; en el laboratorio se realizan las pruebas
fsicas, qumicas y microscpicas de este lquido
corporal.
4. Estudio
de
los
lquidos serosos
5. Diferenciacin
exudados
de En la teora se explica la funcin de los lquidos

y serosos, se conocen los principales sitios de derrame
trasudados
de estos lquidos corporales; en el laboratorio se

realizan
las
principales
pruebas
que
permiten
identificar el origen del derrame.

5. Estudio
de
la
6. Examen coprolgico
En la unidad se conocen la anatoma, fisiologa y
evaluacin
alteraciones relacionadas con el tracto gastrointestinal;
gastrointestinal
en la prctica se realiza el estudio de las heces para

detectar
iii
indicios
de
alteracin
(inflamatoria,
de

absorcin, de digestin) del sistema digestivo.
6. Evaluacin
del
7. Equilibrio
Tanto en la teora como en la prctica se describe la
equilibrio
hidroelectroltico
hidrolectroltico
cido-base
8. Electrolitos
7. Las hormonas y el
y funcin de los electrolitos; en el laboratorio se realiza

la
cuantificacin
de
iones
relacionados
con
el
del metabolismo mineral y se explica el fundamento de la
metabolismo
determinacin de los electrolitos relacionados con la
mineral
polarizacin de las membranas biolgicas.
9. Hormonas
laboratorio
En la teora se abordan la funcin de las hormonas de

importancia diagnstica; en el laboratorio se discuten,
mediante exposiciones de parte de los alumnos, los
fundamentos de los mtodos de determinacin de las
hormonas, complementando con el estudio de casos
clnicos de perfiles hormonales, que tambin dirigen
los alumnos.
OBJETIVO DE LA ASIGNATURA
Conocer y seleccionar las pruebas especiales del laboratorio clnico en patologas especficas, a travs de
diferentes metodologas para desarrollar un criterio en la tcnica de mayor especificidad al menor costo,
ofreciendo un diagnstico ms exacto y confiable, pero con un alto control de calidad.
OBJETIVO DEL MANUAL

Describir las pruebas y las determinaciones a realizar en cada sesin correspondiente al laboratorio de
Anlisis Bioqumicos Clnicos Especiales, as como tambin sus fundamentos y utilidad clnica, con la
finalidad de que el alumno tenga informacin precisa y accesible para desempearse satisfactoriamente
durante el desarrollo de la enseanza experimental.
iv
INTRODUCCIN DEL MANUAL

La asignatura de Anlisis Bioqumicos Clnicos Especiales forma parte del plan de estudios de la carrera
de Licenciado en Bioqumica Diagnstica, impartida en la Facultad de Estudios Superiores Cuautitln,
FESC, UNAM.
Se trata de una asignatura primordial en el aprendizaje de los estudiantes de esta carrera, debido a que
describe en su contenido una serie de pruebas y procedimientos realizados en los laboratorios clnicos
como pruebas especiales, es decir, aquellas que no forman parte del trabajo de rutina.
El laboratorio de enseanza experimental correspondiente a esta asignatura permite que el alumno,
adems de conocer los principios, fundamentos y utilidad clnica de las pruebas especiales de laboratorio
clnico en patologas especficas, obtenga las habilidades necesarias para llevarlas a cabo de manera
correcta, de tal manera que en su desempeo profesional pueda aplicarlas oportunamente, apoyando al
diagnstico de los pacientes.
Asimismo, se adentra al estudiante en el proceso de control de calidad en el laboratorio, para que
reconozca la importancia de realizar adecuadamente los procedimientos con la finalidad de ofrecer un
diagnstico ms exacto y confiable.
Para apoyar a las actividades del laboratorio se cuenta con el presente Manual de prcticas, que cumple
adecuadamente con los requisitos que indica el Sistema de Gestin de Calidad Corporativo de la FESC,
debido a que la enseanza experimental en los laboratorios de la FESC est en proceso de certificacin
bajo la norma ISO-9001-2008.
El presente manual consta de las siguientes prcticas:
1. Elaboracin de cartas control, donde se describe el procedimiento para realizar y analizar las cartas
control, que se utilizan en el control de calidad interno de laboratorio; asimismo se conoce el
principio para preparar un suero control, adems de los cuidados necesarios en su preparacin
cuando se trate de un suero comercial.
2. Obtencin de valores de referencia, en esta prctica se describen las caractersticas necesarias de
la poblacin y dos mtodos para la obtencin de valores de referencia.
3. Espermatobioscopa directa, en esta prctica se detalla el estudio del lquido seminal, como prueba
especfica para iniciar la evaluacin de la infertilidad masculina; tambin se da a conocer su
importancia en el seguimiento post- vasectoma.
4. Evaluacin del lquido cefalorraqudeo, donde se describen los exmenes fsico, qumico y
microscpico de esta muestra, adems de resaltar la importancia de su estudio.
5. Diferenciacin de exudados y trasudados, que son derrames de lquido seroso, debido a causas
mecnicas o inflamatorias; la importancia de diferenciar su origen se basa en la finalidad de apoyar
a un adecuado tratamiento.
6. Examen coprolgico, se trata de un estudio de las heces con la finalidad de determinar si el
paciente presenta alteraciones en el funcionamiento gastrointestinal.

7. Cuantificacin de electrolitos, donde se estudia el fundamento de la determinacin de los
electrolitos relacionados con la polarizacin de las membranas biolgicas, sodio y potasio; adems
se realiza la determinacin de los electrolitos relacionados con el metabolismo mineral, a travs de
mtodos espectrofotomtricos.
8. Determinacin de hormonas, la cual se trata de una prctica terica donde, por medio de
exposiciones que los alumnos realizan, se explican los fundamentos de los mtodos para
determinar hormonas; tambin se estudian casos clnicos de los perfiles hormonales ms
importantes.
Por lo anteriormente descrito, este manual no solamente pretende ser una fuente de informacin que sirva
de gua para la realizacin de la prctica, sino adems una herramienta de trabajo durante las sesiones
prcticas de este laboratorio.
vi
REGLAMENTO
El presente reglamento es copia fiel del documento Reglamento General para los laboratorios,
perteneciente al Sistema de Gestin de la Calidad Corporativo de la FESC.
UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLGICAS
CODIGO: DOC-CB-DEX-01-00
REGLAMENTO GENERAL
PARA LOS LABORATORIOS
N de REVISIN: 01
1) Este reglamento aplicar para personal acadmico, alumnos y laboratoristas.
2) Para todo trabajo realizado en el laboratorio deber utilizarse bata blanca con manga larga.
3) La tolerancia para el inicio de la sesin de laboratorio ser hasta de 10 minutos a partir de la hora
sealada.
4) Por seguridad, no deben cerrarse las puertas del laboratorio con llave durante las prcticas.
5) En todo momento deber mostrarse una conducta adecuada en el rea de trabajo.
6) Queda prohibido en los laboratorios:

a) Tirar basura fuera del cesto.
b) Ingerir alimentos y/o bebidas.
c) Fumar.
d) Recibir visitas.
e) La entrada a los inter-laboratorios a toda persona ajena a los mismos.
f) Realizar reuniones o convivios en los laboratorios.
g) Salir del laboratorio en el horario asignado para la sesin experimental.
h) Sentarse sobre las mesas de trabajo.
i) Mover el mobiliario de su lugar.
j) Utilizar las gavetas para guardar material que no corresponda a la asignatura.
7) Los residuos peligrosos deben depositarse en los contenedores destinados para tal fin,
entendiendo por residuo peligroso: elementos, sustancias, compuestos, desechos o mezclas de

ellos que en cualquier estado fsico representan un riesgo para el ambiente, la salud o los recursos
vii

naturales, por sus caractersticas corrosivas, reactivas, explosivas, txicas, inflamables o biolgicoinfecciosas (Art. 3 de la Ley General del Equilibrio y Proteccin del Ambiente).
8) Dentro del laboratorio no se permite el uso de telfonos celulares, reproductores de sonido o

cualquier medio electrnico de entretenimiento. El uso de las computadoras porttiles queda
restringido a temticas relacionadas con la asignatura.
9) El acceso al laboratorio se permitir nicamente cuando est presente un profesor.
10) El uso del laboratorio para trabajo extraordinario, deber programarse con el profesor responsable
en un horario que no interfiera con aquel destinado para el desarrollo de las prcticas.
11) Para solicitar material y equipo, es requisito indispensable que el alumno llene debidamente el vale
de material (FPE-CB-DEX-01-09) y lo entregue a la persona responsable, dejando como depsito
la credencial vigente de la UNAM.
12) El alumno deber revisar el material y/o equipo al momento de recibirlo indicando cualquier
anomala (faltante o material daado) y ser devuelto en las condiciones en que se recibi, de no
hacerlo, se har acreedor a las sanciones establecidas en cada laboratorio.
13) Es obligacin de todos mantener limpio y ordenado el lugar de trabajo y todo el laboratorio.
viii
PRCTICA No 1.
ELABORACIN DE CARTAS CONTROL
Beatriz L. Gonzlez M.
1.1 Introduccin
El Laboratorio Clnico es el establecimiento pblico, social y privado, legalmente establecido,

independiente o ligado a otro establecimiento para la atencin mdica de pacientes hospitalarios o
ambulatorios, que tenga como finalidad realizar anlisis fsicos, qumicos o biolgico de diversos
componentes y productos del cuerpo humano, cuyos resultados coadyuvan en el estudio, prevencin,
diagnstico, resolucin y tratamiento de los problemas de salud (NOM-007-SSA3-2011).
El laboratorio clnico debe garantizar que los resultados de estos anlisis sean adecuados para el
propsito que se aplican, para esto las actividades que lleva a cabo deben sustentarse en un proceso
documentado llamado control de calidad, que se basa en una serie de parmetros estadsticos que apoyan
a decir que el resultado es lo suficientemente confiable (Aguirre y Lara, 2001).
Debido a lo complejo que resulta mantener la calidad en el laboratorio clnico, los sistemas del
control de calidad se han dividido en dos: el Control de Calidad Interno (CCI) y la evaluacin externa de la
calidad (EEC). El CCI se divide en tres etapas: preanaltica, analtica y postanaltica, en cada una de ellas
existen variables que pueden afectar el resultado del proceso que se realice (Sez y Gmez-Cambronero,
2006). Estas etapas tambin pueden nombrarse preexamen, examen y postexamen (Sierra, 2006).
En la etapa analtica se utilizan las cartas control, tambin llamadas grficas de Levey-Jennings,
que permiten identificar de manera grfica y estadstica los errores cometidos dentro de esta etapa. Se
utiliza una carta control por cada analito o tipo de anlisis que se realiza en el laboratorio (Westgard, Barry,
Hunt, 1981; Riu, 2005).
Para elaborar estas cartas se utiliza un suero o material control, que puede ser comercial o
preparado en el laboratorio. Este material debe emplearse durante 30 das en las condiciones cotidianas
de trabajo, de manera que refleje adecuadamente lo que se realiza en la rutina. Los datos obtenidos se
tratan estadsticamente para elaborar la carta control en la que se graficarn los resultados del suero
control (Westgard, Barry, Hunt, 1981).
Las cartas control se evalan aplicando las multirreglas Westgard, que son criterios que estn
basados en mtodos estadsticos. La violacin de estas reglas debe activar una revisin de los
procedimientos de la determinacin de la prueba, el estado actual de los reactivos y la calibracin de los
equipos, adems del rechazo de los resultados obtenidos con las muestras de los pacientes en la

determinacin de la prueba realizada. Las causas que llevaron a la aparicin del resultado debern ser
averiguadas para resolverlas y lograr nuevamente resultados confiables (Westgard, Barry, Hunt, 1981).
Siempre que los resultados del suero control no violen las reglas Westgard se garantiza que las
determinaciones realizadas a las muestras de los pacientes son confiables, slo entonces el laboratorio
clnico cumplir fehacientemente su funcin (Sierra, 2006).
1.2 Actividades previas a la prctica
1.2.1 Definir los siguientes conceptos: calidad, control de calidad, sistema de gestin de calidad, control de
calidad interno (CCI), programa de evaluacin externa de la calidad (PEEC).
1.2.2 Indicar las diferencias que existen entre normatividad, certificacin y acreditacin.
1.2.3 Identificar las variables que pueden afectar al resultado en cada una de las etapas del CCI.
1.2.4 Investigar cules son los PEEC que hay en Mxico.
1.2.5 Explicar, en un cuadro, las diferencias que existen entre una solucin control, una solucin blanco y
una solucin patrn.
1.3 Objetivos
1.3.1 Conocer el procedimiento para preparar un suero control que se utilice en el rea de Qumica Clnica.
1.3.2 Elaborar una carta control de algn analito del rea de Qumica Clnica, utilizando un suero control
comercial o preparado, segn convenga, para poder identificar las variables que afectan al proceso
realizado a travs de su evaluacin apoyndose en el uso de las Multirreglas Westgard.
1.4 Materiales, equipos y reactivos

1.4.1 Material biolgico
1 ml de suero control comercial
1 mL de suero obtenido por sistema al vaco de cada integrante del equipo (Solamente en caso de que no se tenga el
suero control comercial, para prepararlo en el laboratorio).
1.4.2 Material por equipo

- 1 gradilla
- papel para limpiar celdas (que no deje residuos)
- 5 tubos de ensaye
- torundas con alcohol (como mnimo, una por alumno)
- 1 ligadura
- 1 sistema al vaco (tubo tapn rojo, aguja) por alumno
1.4.3 Material por grupo

- espectrofotmetro
- puntas para micropipeta
- celdas para el espectrofotmetro
- agitador vrtex
- micropipeta (capacidad mnima 10 L)
- bao mara a 37 C
- matraz Erlenmeyer de 50 mL
1.4.4 Reactivos
Podr utilizarse cualquier reactivo de Qumica Clnica que est disponible y en cantidad suficiente, se
prefieren las determinaciones de glucosa, cido rico, colesterol y triglicridos.
1.5 Procedimiento experimental
1.5.1 Obtencin de la muestra biolgica
1.5.1.1 Preparar el suero control comercial de acuerdo a las indicaciones del manual de uso (inserto).
1.5.1.2 Para la obtencin de la muestra de sangre y separacin del suero ver anexo A (solamente si se
requiere preparar el suero control).
1.5.2 Preparacin del suero control en el laboratorio

1.5.2.1 Principio. Los sueros control preparados por el propio laboratorio consisten en una mezcla de
varios sueros remanentes del trabajo del da, pueden necesitarse diariamente sueros de pacientes sanos
(control normal) o con resultados fuera de valores de referencia (control anormal). Los sueros se guardan y
almacenan en botellas de plstico en el congelador a <20 C. Deben despreciarse las muestras de los
sueros hemolizados, ictricos, lipmicos y contaminados as como tambin los sueros de pacientes que se
conozca o sospeche que tengan el virus de la hepatitis C (VHC) o el virus de la inmunodeficiencia humana
(VIH).
1.5.2.2 Tcnica.
1.5.2.2.1 Realizar una toma de muestra, con sistema al vaco y tubo de tapn rojo de 7 ml, a un integrante
de cada equipo del grupo.
1.5.2.2.2 Obtener el suero y recolectarlo en un matraz Erlenmeyer de 50 mL y homogenizarlo suavemente
(sin formar burbujas) en vrtex.
1.5.2.2.3 Distribuir a cada integrante de los equipos una porcin de la mezcla (aproximadamente 500 L)
para que realicen la determinacin del analito elegido.
1.5.3 Elaboracin de la carta control experimental (grfico de Levey-Jennings)
1.5.3.1 Indicaciones previas. Para realizar la carta control puede utilizarse cualquier analito de Qumica
Clnica; para fines de enseanza experimental, se prefieren aquellos cuya tcnica sea colorimtrica de
punto final (glucosa, cido rico, colesterol, triglicridos) y que estn disponibles en el laboratorio en
cantidad suficiente. Los reactivos deben utilizarse de acuerdo a las indicaciones del fabricante, siguiendo
el manual de uso del reactivo (inserto), donde tambin se pueden consultar los fundamentos de la
determinacin y el significado clnico del analito en cuestin. Ver las recomendaciones del Anexo B.
1.5.3.2 Tcnica
1.5.3.2.1 Determinar al analito elegido siguiendo las indicaciones del manual de uso de reactivo
correspondiente.
1.5.3.2.2 Anotar los resultados en el pizarrn. Los profesores elegirn al menos el 70% de estos datos
para realizar los clculos que se requieren para la elaboracin de la carta control. Los dems
resultados se graficarn en la carta obtenida.
1.5.3.2.3 Calcular el promedio de los resultados elegidos, posteriormente la desviacin estndar y el
coeficiente de variacin de acuerdo a las siguientes frmulas:
CV= /
Estos datos tambin pueden obtenerse utilizando una calculadora que cuente con aplicaciones de
estadstica o en el programa de Excel de Microsoft, segn convenga. La forma de ingresar los datos y
calcularlos depender de la herramienta en cuestin.
1.5.3.2.4 Calcular los rangos de la carta control, con el promedio y las desviaciones estndar obtenidas, de
acuerdo a lo siguiente:
1S = (
- ) (
2S = (
- 2) (
+ 2)
3S = (
- 3) (
+ 3)
Donde (
+ )
- ) es el lmite inferior del rango y (
queremos calcular el 1S y se tiene un
+ ) es el lmite superior del rango. Por ejemplo si
= 89 y una = 12
1S = (89 12) (89 + 12) = 77 101

De esta misma manera se calculan los rangos 2S y 3S.
Nota. El smbolo () no indica resta, sino el rango que se obtiene.
1.5.3.2.5 Graficar los lmites obtenidos como se ilustra en la figura 1.1 (ver pgina 5). Al momento de
graficar es necesario resaltar en color verde el 1S pues este rango nos indica el lmite aceptable,
el 2S se delimita de color amarillo porque es el lmite de alerta y por ltimo el 3S de color rojo
pues nos indica que es el lmite de accin.
1.5.3.2.6 Graficar en la carta control los resultados que no se utilizaron en los clculos (ver numeral
1.5.3.2.2).
Carta control de ___analito___ Mes _______________ nivel del control __________

3DE
2DE
1DE
-1DE
-2DE
-3DE
Da del mes
Figura 1.1 Muestra de una carta control (Tomada del archivo del autor)
1.5.4 Evaluacin de la carta control experimental mediante las Multirreglas Westgard

1.5.4.1 Evaluar la carta control graficada mediante el diagrama lgico de aplicacin de las multirreglas
Westgard (figura 1.2).
Figura 1.2 Diagrama lgico para la aplicacin de la tcnica de control multirreglas Westgard (Adaptado de
Westgard, Barry, Hunt, 1981)
1.5.4.2 Cuando una corrida est fuera de control, investigar el proceso y corregir el problema, en el
siguiente orden.
1.5.4.3 Determinar el tipo de error que ocurre con base a la regla violada. Un error aleatorio es detectado
usualmente por las reglas 1-3S o R-4S, mientras que un error sistemtico es fcilmente indicado
por las reglas 2-2S, 4-1S o 10X.
1.5.4.4 Consultar los manuales de procedimientos para identificar las variables que afectan al proceso
para el tipo de error indicado por la regla de control que ha sido violada.
1.5.4.5 Inspeccionar el proceso de anlisis e identificar las causas del problema.
1.5.5 Elaboracin de la carta control terica
1.5.5.1 Identificar en el manual de uso del suero control comercial utilizado, el rango aceptable del analito
que se determin, ste es el lmite 2S. Algunos insertos indican el promedio y la desviacin
estndar.
1.5.5.2 Calcular el promedio, a partir del lmite 2S; ejemplo: si el lmite es 240 280, el promedio es 260,
es decir el valor medio de este lmite.
1.5.5.3 Calcular la desviacin estndar, a partir del lmite 2S; de acuerdo con el ejemplo anterior, se
obtiene la diferencia entre el lmite superior y el inferior (280 240 = 40), este valor se divide entre
cuatro (40/4 = 10). El resultado es la desviacin estndar (10).
1.5.5.4 Calcular, utilizando el promedio y la desviacin estndar tericos, los lmites 1S y 3S, adems
del coeficiente de variacin. Es recomendable tambin calcular el lmite 4S.
1.5.5.5 Elaborar la carta control terica con los lmites tericos calculados, para compararla con la carta
control experimental e identificar el efecto del coeficiente de variacin en cada una de ellas.
1.6 Disposicin de residuos
1.6.1 Las agujas deben depositarse en el contenedor rgido de residuos peligrosos biolgico-infecciosos
(RPBI); su empaque se desecha a la basura municipal.
1.6.2 Las torundas, guantes, y los materiales de asepsia y aquellos que se utilicen para limpieza del rea
de trabajo deben desecharse en la basura municipal.
1.6.3 En caso de que algn material est empapado de sangre, depositarlo en la bolsa roja de RPBI.
1.6.4 Los tubos que contengan mezclas reactivas sangre y muestra biolgica se depositarn en los
contenedores con cloro dispuestos por el laboratorista para cada fin.
1.6.5 Queda estrictamente prohibido tirar envolturas de alimentos o bebidas en el contenedor de basura
municipal del laboratorio. Estas debern depositarse en los botes ubicados fuera del laboratorio.
1.7 Orientaciones para la elaboracin del reporte

En el cuaderno de prcticas debe elaborarse la carta control experimental y terica; en cada una de estas
se graficarn algunos de los resultados (al finalizar la sesin experimental el profesor responsable de la
prctica indicar los datos a graficar).
Para analizar las cartas control debe calcularse el coeficiente de variacin, para conocer el efecto de la de
la variabilidad de los datos; posteriormente, los puntos graficados deben evaluarse de acuerdo a las reglas
Westgard; en caso de que se presente violaciones, indicar si se trat de un error personal o instrumental,
aleatorio o sistemtico; adems de seguir el procedimiento para conocer las variables que ocasionaron el
error. Es importante que se plantee una posible accin correctiva y una preventiva para evitar que vuelva a
suceder la violacin.
Debe resaltarse la importancia de esta herramienta para el control de calidad interno del laboratorio clnico.
1.8 Referencias
-
Aguirre, E., Lara, E. (2001) El laboratorio clnico rumbo a la excelencia. LAB-acta 13:17-21
NOM-007-SSA3-2011, Para la organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos.
Riu,
J.
(2005).
Grficos
de
control
de
Shewart.
Recuperado
de
http://www.quimica.urv.es/quimio/general/grafics_de_control.pdf
-
Sez, S., Gmez-Cambronero, L. (2006). Sistema de mejora continua de la calidad en el

laboratorio clnico. PUV: Valencia
Sierra, R. (2006). El laboratorio clnico y el control de calidad. Bioquimia 31(002): 39-40
Westgard, J, Barry, P, Hunt, M (1981) A multi-rule Shewart chart for quality control in clinical
chemistry. Clin Chem 27(3):493-501
PRCTICA No 2.
OBTENCIN DE VALORES DE REFERENCIA
2.1 Introduccin
Adems de que el laboratorio clnico cuente con un sistema de CCI que le permita entregar un
resultado oportuno y confiable, debe obtener los valores de referencia propios de la poblacin a la que
ofrece servicio (NOM-007-SSA3-2011). Establecerlos para cada analito es tan importante debido a que el
mdico est interesado en determinar si el resultado del paciente es normal o anormal y en qu magnitud,
comparndolo con los valores que se obtienen de la poblacin en la que el paciente se encuentra
(Snchez-Rodrguez, 2007).
Los valores de referencia son aquellos que se obtienen por una observacin o medicin de un tipo
particular de magnitud o de un individuo perteneciente a un grupo muestra de referencia; estos valores son
dependientes de la gentica, la raza, los estilos de vida y ambientales, y en ocasiones, hasta la edad;
adems, el mtodo analtico utilizado y el equipo tambin pueden afectar.
Los valores de referencia son una gua de los que se podran considerar pacientes normales, pero
el hecho de encontrarse fuera de ellos no indica una enfermedad, simplemente que el valor obtenido no
est dentro del 95% de la poblacin con la que se calcularon. Debido a lo anterior, se dice que no es vlido
utilizar los valores de referencia reportados en los insertos de las casas comerciales, ya que fueron
obtenidos, la mayora de las veces, de poblaciones muy diferentes a las usuarias del laboratorio (Ceriotti y
Henny, 2008).
El panel de expertos de la Federacin Internacional de Qumica Clnica (IFCC, por sus siglas en
ingls) desarroll en 1986, la llamada teora de los valores de referencia, donde describe los lineamientos
para establecerlos, pero hasta la fecha el concepto no es bien comprendido, pues se manejan en forma
indistinta los conceptos valores de referencia, lmites de referencia y lmites de decisin (Horowitz, 2008).
Para la obtencin de estos valores es necesario buscar una poblacin lo ms homognea posible,
respecto a las variables que los afectan, y clnicamente sana, establecer los criterios de inclusin y
exclusin de los individuos, el procedimiento de recoleccin idneo de la muestra, el sitio de puncin ms
recomendable, las condiciones de almacenamiento y transporte de muestras y el mtodo de anlisis
ptimo de acuerdo a los parmetros del control de calidad (Winkel y Statland, 1991).
La determinacin de valores de referencia implica: obtener datos, ordenarlos, procesarlos
estadsticamente y obtener conclusiones. Cuando la distribucin es simtrica (el 95% de los pacientes es
aparentemente sana), se emplea estadstica paramtrica; si se trata de distribucin asimtrica se usa la
descriptiva, abarcando el percentil 2.5 al 97.5 (Winkel y Statland, 1991).

La importancia de la obtencin de los valores de referencia no solo radica en hacer una
comparacin adecuada de los resultados del paciente con respecto a la poblacin en la que se ubica, sino
que adems se cumple con la normatividad oficial en Mxico (NOM-007-SSA3-2011) que indica que el
informe de resultados debe incluir los valores de referencia de cada analito que se determine en el
laboratorio.
2.2.1 Definir los siguientes conceptos: lmites de referencia, lmites de decisin clnica, lmites de corte;
mtodos estadsticos paramtricos y no paramtricos; normalidad estadstica.
2.2.2 Explicar cmo afectan las diversas variables (relacionadas con el paciente, el equipo y mtodo a
utilizar) en la obtencin de valores de referencia.
2.3 Objetivos
2.3.1 Conocer el procedimiento correspondiente para realizar la obtencin de valores de referencia en una
poblacin homognea.
2.3.2 Obtener los valores de referencia en una poblacin de estudiantes (grupo de Anlisis Bioqumicos
Clnicos Especiales) de algn analito de Qumica Clnica, segn convenga, mediante el mtodo 2S
y el mtodo de percentiles, para comparar los resultados obtenidos y determinar cul es el ms
adecuado de acuerdo a la poblacin estudiada.

1 ml de suero obtenido por sistema al vaco de cada integrante del equipo

- 1 gradilla
- 5 tubos de ensaye
- torundas con alcohol (como mnimo una por alumno)
- 1 ligadura
- 1 sistema al vaco (tubo tapn rojo de 4 ml, aguja) por alumno

- espectrofotmetro
- puntas para micropipeta
- celdas para el espectrofotmetro
- agitador vrtex
- micropipeta (capacidad mnima 10 L)
- bao mara a 37 C
2.4.4 Reactivos
Podr utilizarse cualquier reactivo de Qumica Clnica que est disponible y en cantidad suficiente, se
prefieren las determinaciones de glucosa, cido rico, colesterol y triglicridos.

2.5.1 Obtencin del material biolgico
2.5.1.1 Para la obtencin de la muestra y separacin del suero ver Anexo A.
Nota. Cada alumno procesar la muestra que obtuvo.
2.5.2 Indicaciones previas. Para calcular los valores de referencia en la poblacin estudiada y para fines
de enseanza experimental, se prefieren determinar aquellos analitos cuya tcnica sea colorimtrica de
punto final (glucosa, cido rico, colesterol, triglicridos) y que estn disponibles en el laboratorio en
cantidad suficiente. Los reactivos deben utilizarse de acuerdo a las indicaciones del fabricante, siguiendo
el manual de uso del reactivo (inserto), donde tambin se pueden consultar los fundamentos de la
determinacin y el significado clnico del analito en cuestin. Ver las recomendaciones del Anexo B.
2.5.3 Clculo de valores de referencia: mtodo 2S
2.5.3.1 Procedimiento
2.5.3.1.1 Clasificar los resultados de acuerdo al gnero (resultados de hombres y resultados de mujeres).
No es necesario realizar esta clasificacin en caso que el nmero de alumnos en el grupo no
permita que la poblacin sea estadsticamente significativa.
2.5.3.1.2 Obtener el promedio y la desviacin estndar, como se menciona en el numeral 1.5.3.2.3.
2.5.3.1.3 Calcular el rango 2S, como se obtiene para las cartas control (ver numeral 1.5.3.2.4). Este
intervalo es el valor de referencia.
2.5.5 Clculo de valores de referencia: mtodo de percentiles 2.5 y 97.5
2.5.5.1 Procedimiento
2.5.5.1.1 Ordenar los resultados del analito utilizado en 1.4.2.1 en forma ascendente.
2.5.5.1.2 Evaluar el primero y el ltimo valor por la frmula de Dixon, para determinar estadsticamente que
pertenecen a la serie de datos:
D R/3,
donde D es la diferencia del valor evaluado menos el valor inmediato (considerndose el valor absoluto) y
R es la diferencia entre el ltimo y el primer valor.
2.5.5.1.3 Eliminar el valor evaluado en caso de que no se cumpla la frmula de Dixon.
2.5.5.1.4 Calcular ((n+1) x 0.025), donde n es el nmero total de datos. Expresar el resultado sin
dcimas.
2.5.5.1.5 Eliminar, al principio y final de cada serie de datos, el nmero obtenido en el numeral 2.4.5.1.4.
2.5.5.1.6 Los resultados de los extremos son los valores de referencia para esa poblacin.
10

2.6.2 Las torundas, los guantes, y los materiales de asepsia y aquellos que se utilicen para limpieza del
rea de trabajo deben desecharse en la basura municipal.
2.6.3 En caso de que algn material est empapado de sangre, depositarlo en la bolsa roja de RPBI.
2.6.4 Los tubos que contengan mezclas reactivas, sangre y muestra biolgica se depositarn en los

En el cuaderno de prcticas se realizarn los clculos pertinentes para obtener los valores de
referencia con los mtodos 2S y percentiles.
Considerar cul de los dos mtodos es el ms apropiado para obtener los valores de referencia en la
poblacin utilizada, explicando si se presentaron variables preanalticas, analticas y postanalticas que
pudieran afectar el proceso.
Comparar los valores obtenidos con algunos tericos, indicando la referencia consultada, verificando
si existe alguna diferencia significativa entre ellos, apoyndose en alguna prueba estadstica.
2.8 Referencias
-
Ceriotti, F., Henny, J. (2008) Are my laboratory results normal? Considerations to be made
concerning
reference
intervals
and
decision
limits.
eJIFCC
19(2)
Recuperado
de
http://www.ifcc.org/index
-
Horowitz, G. (2008) Reference Intervals: practical aspects. eJIFCC 19(2). Recuperado de

http://www.ifcc.org/index
NOM-007-SSA3-2011, Para la organizacin y funcionamiento de los laboratorios clnicos.
Snchez-Rodrguez, M. (2007) Valores de referencia o valores de corte clnico: qu criterio tomar

en el laboratorio clnico actual? Bioquimia 32(2):37-38
Winkel, P., Statland, B. (1991). Interpretacin de los resultados de laboratorio: valores de referencia
y toma de decisiones. En Henry, J.B. (Ed) Diagnstico y tratamiento clnicos por el laboratorio.
Salvat: Mxico.
11
PRCTICA No 3.
ESPERMATOBIOSCOPA DIRECTA
Luis A. Gordillo R.,

3.1 Introduccin
El semen es una combinacin de espermatozoides suspendidos en las secreciones del testculo y

epiddimo, y las secreciones de la prstata, vesculas seminales y las glndulas bulboureterales que se
mezclan con aquella en el momento de la eyaculacin. El producto final es un lquido viscoso denominado
eyaculado (OMS, 2001).
El estudio del lquido seminal,
conocido como espermatobioscopa, espermiograma o
espermatograma, es el examen diagnstico ms importante y sencillo para iniciar el estudio de la fertilidad

masculina, es de bajo costo y permite realizar una primera impresin diagnstica y evaluar los logros de
los tratamientos mdicos y quirrgicos que se llevan a cabo durante el tratamiento. La espermatobioscopa
tambin tiene aplicaciones en problemas legales, casos de violacin, para verificar la eficacia de la
vasectoma (Tapia y Rojas, 2003).
Existen dos tipos de espermatobioscopa: la directa para la cual se obtiene la muestra por
masturbacin evitando el uso de condn o lubricantes, y la indirecta, tambin llamada prueba de SimsHuhner, cuya muestra es el fluido que se obtiene despus de que la pareja mantuvo coito a trmino. Esta
ltima prueba permite evaluar la compatibilidad del lquido seminal con el moco cervical, debido a que
solamente se evala la capacidad del espermatozoide para moverse en la secrecin vaginal (OMS, 2001).
La espermatobioscopa directa se realiza dividindola en dos tipos de examen: macroscpico, en el
que se evalan el volumen, el pH, licuefaccin, viscosidad, olor, color y el examen microscpico, donde se
determina el nmero de espermatozoides, movilidad, morfologa y vitalidad (OMS, 2001).
Debe considerarse que las muestras fluctan en un rango que vara en funcin de diferencias
individuales, del tiempo de abstinencia y de detalles finos en la recoleccin, as como del intervalo
transcurrido entre la obtencin y el procesamiento de la muestra; por lo tanto, estos factores pueden hacer
variar los resultados. Nunca se deber establecer un diagnstico con la evaluacin de una sola muestra.
Son necesarias cuando menos dos o tres ms para establecer un diagnstico certero (Cardona-Maya, et
al, 2008).
Para que una espermatobioscopia sea interpretada correctamente por el mdico es necesario
indicarle al paciente una informacin clara y completa acerca de como recolectar y manipular la muestra
hasta su entrega al laboratorio; tambin es fundamental que la muestra sea analizada garantizando un
procesamiento correcto, por lo cual se recomienda realizar estos exmenes en un laboratorio de
androloga (OMS, 2001).
12

La OMS (2001) recomienda analizar dos muestras de semen en un lapso no menor a siete das y
no mayor a tres meses, debido a las variaciones normales de la concentracin espermtica. Debido a esto
no es correcto establecer un diagnstico de infertilidad con una sola espermatobioscopa anormal, sino
con dos o ms pruebas anormales.
3.2.1 Definir los siguientes conceptos: astenozoospermia, poliespermia, oligospermia, teratozoospermia,
hiperespermia, aneyaculacin, eyaculacin retrgrada, hematospermia.
3.2.2 Indicar las diferencias entre motilidad y movilidad.
3.2.3 Explicar cmo se obtiene el factor para calcular el nmero de espermatozoides/mL
3.2.4 Explicar cmo se realiza el clculo para determinar el ndice de fertilidad, conocido tambin como
ndice de Hinglais.
3.2.5 Investigar cmo se realiza la espermatobioscopa automatizada.
3.3 Objetivos
3.3.1 Conocer la importancia que tienen las indicaciones que se le dan al paciente para realizar la
recoleccin y el manejo de la muestra para observar el efecto que tienen en los resultados de
espermatobioscopa.
3.3.2 Conocer las pruebas que se realizan al lquido seminal mediante la realizacin de una
espermatobioscopa directa para poder apoyar a un diagnstico adecuado.

Semen humano obtenido por masturbacin

-1 gradilla
-1 tiras de papel pH
-1 aplicador de madera
-2 tubos de ensaye 12x75
-1 hemocitometro con pipeta de leucocitos
-1 pipeta graduada
-1 microscopio
3.4.3 Reactivos
- Tren de tincin de Papanicolau
-Reactivo de Dacie (formol 1%, citrato de sodio 3%)
- Colorante de Wright y buffer de fosfatos (en caso de que no se cuente con el tren de tincin de Papanicolau
13

3.5.1 Instrucciones para la recoleccin de la muestra de semen
3.5.1.1 Abstenerse de tener relaciones sexuales y masturbacin por un periodo de entre 2 a 5 das.
3.5.1.2 Obtener la muestra va masturbacin sin usar lubricante ni condones de ltex ya que pueden
contener espermicidas.
3.5.1.3 Recolectar la muestra en un contenedor de plstico limpio, estril y de boca ancha. Es importante
que se recoja la totalidad del eyaculado. En caso contrario, la muestra debe marcarse
recoleccin incompleta.
3.5.1.4 Dentro de la primera hora de recoleccin de la muestra, llevar el recipiente al laboratorio
mantenindolo en un bolsillo que est cerca del cuerpo.
3.5.1.5 Etiquetar el espcimen con: nombre, fecha y hora de recoleccin
3.5.2 Aspecto y color

3.5.2.1 Significado clnico. El aspecto del lquido seminal es opalescente, el color es gris. La muestra de
semen debe ser examinada inmediatamente despus de su licuefaccin o dentro de los 60 minutos, por
simple observacin a temperatura ambiente. Un aumento o disminucin de la turbidez en el aspecto del
semen carecen de importancia clnica excepto cuando es causado por una leucocitosis en procesos
inflamatorios. Puede parecer menos opaca cuando la concentracin de espermatozoides es muy baja,
marrn cuando contiene eritrocitos, o amarillenta en el caso de un paciente con ictericia o que consume
algunas vitaminas.
3.5.2.1 Tcnica
3.4.2.1.2 Observar la muestra despus de la licuefaccin, mezclndola suavemente.
3.5.3 Licuefaccin
3.5.3.1 Significado clnico. La licuefaccin total de la muestra a temperatura ambiente se realiza de 15-60
minutos. El semen se eyacula lquido, pero al poco tiempo se forma un cogulo, que se rompe entre 10 y
20 minutos debido a la accin de enzimas proteolticas, como la fibrinolisina, posteriomente vuelve a
transformarse en un lquido viscoso. El retraso de la licuefaccin por ms de 2 horas sugiere una
inflamacin de glndulas sexuales accesorias o defectos de enzimas de los productos de secrecin de las
glndulas. Una muestra de de semen normal se lica dentro de los primeros 60 minutos de la eyaculacin
a temperatura ambiente aunque esto suele ocurrir dentro de los primeros 15 minutos. En algunos casos, la
licuefaccin no es completa a los 60 minutos, lo que puede provocar una inmovilizacin completa o parcial
de los espermatozoides, inhibiendo su movimiento a travs del crvix del tero.
14

3.5.3.2 Tcnica
3.5.3.2.1 Mezclar cuidadosamente la muestra en el recipiente original, evitando agitarla vigorosamente.
3.5.3.2.2 Observar que la muestra se lice dentro del periodo de tiempo mencionado. No deben
observarse grumos ni hilos. No debe mezclarse continuamente pues se puede acelerar la
licuefaccin.
3.5.4 Volumen
3.5.4.1 Significado clnico. El volumen normal del eyaculado es de 2 5 mL. Los aumentos de volumen
se relacionan a procesos infecciosos-inflamatorios y a su disminucin a procesos obstructivos
acompaados con la alteracin en el pH. Los volmenes reducidos pueden ocasionar una escasa
penetracin en el moco cervical por parte de los espermatozoides.
3.5.4.2 Tcnica.
3.5.4.2.1 Medir el volumen del eyaculado usando una pipeta de vidrio despus de que la muestra est
totalmente licuada.
3.5.5 Viscosidad
3.5.5.1 Significado clnico. Se dice que una muestra tiene una buena viscosidad cuando la licuefaccin
es adecuada. La viscosidad (a menudo denominada consistencia) puede interferir con la determinacin
de la motilidad y la concentracin de espermatozoides y con las pruebas para la deteccin de anticuerpos
unidos a la superficie de los espermatozoides. Tambin una viscosidad elevada ha demostrado una
invasin excesiva del moco cervical en estudios realizados despus del coito.
3.5.5.2 Tcnica.
3.5.5.2.1 Aspirar la muestra en una pipeta de 5 mL y permitir la libre cada de las gotas. Observar la
longitud del filamento formado. En una muestra normal se observan gotas pequeas y bien
definidas.
3.4.5.2.3 Como mtodo alternativo, la muestra puede ser evaluada introduciendo una varilla de vidrio o un
aplicador de madera. La longitud del filamento que se forma no debe exceder los 2 cm de
longitud.
3.5.6 pH
3.5.6.1 Significado clnico. El pH del lquido seminal es de 7.2 - 8.0. Cuando el pH de una muestra es
<7.0 y adems presenta azoospermia se debe sospechar de una obstruccin de las vas eyaculatorias o
ausencia bilateral congnita de los vasos deferentes. A valores de pH cido se produce mortalidad de los
espermatozoides (el pH de la vagina acta como espermaticida biolgico). Cuando existe un pH cido y un
volumen menor a 2 mL se debe sospechar de una agenesia de vesculas seminales y esta se debe
15

comprobar con una titulacin de fructuosa de semen. Los valores de pH en ciertas regiones geogrficas
son generalmente iguales o superaciones a 8.0 comparados con valores de 7.2 a 8.0 de otras regiones.
Procesos inflamatorios e infecciones crnicas pueden estar relacionados con alteraciones en el pH.
3.5.6.2 Tcnica.
3.5.6.2.1 El pH debe medirse dentro de la primera hora posterior a la eyaculacin.
3.5.6.2.2 Distribuir una gota de semen sobre la tira de papel pH.
3.5.6.2.3 Al cabo de 30 segundos el color de la zona impregnada debe ser uniforme; comparar con la
escala de colores de la caja para determinar el pH de la muestra.
3.5.7 Motilidad
NOTA: Esta prueba y la de movilidad son subjetivas, por lo que deben realizarse por duplicado por dos
analistas diferentes y comparar sus resultados. En caso de discordancia es necesaria la participacin de
un tercer analista.
3.5.7.1 Significado clnico. La motilidad debe ser mayor al 50% de los espermatozoides con motilidad
grado A, o bien, 25% con motilidad grado A y 25% con motilidad grado B. Si no se cumplen estos criterios
la muestra seminal se califica con diagnstico de astenozoospermia. El espermatozoide tiene una
estructura flagelar que permite su desplazamiento en el lquido seminal, en la cavidad vaginal, tero y
trompas uterinas. En la evaluacin de la capacidad reproductiva o frtil del espermatozoide, la motilidad es
un criterio determinante para su normalidad. La motilidad est disminuida por infecciones de transmisin
sexual, por el varicocele testicular, el fro, muchos das de abstinencia, afectaciones mitocondriales de
origen congnito o adquirido, sustancias adictivas como el cigarrillo y el alcohol. Es una alteracin
frecuente en varones con infertilidad. Su tratamiento depende de la causa. En caso de infecciones
(especialmente por Chlamydia) se utilizan antibiticos, cuando hay aumento de la viscosidad del semen se
utilizan los mucolticos, y si hay sospechas de la deficiencia en la cadena respiratoria mitocondrial se
utilizan vitaminas, aminocidos, antioxidantes.
3.5.7.2 Tcnica.
3.5.7.2.1 Colocar una gota de lquido seminal sobre un portaobjetos limpio y seco.
3.5.7.2.2 Cubrir con un cubreobjetos y montar en el microscopio.
3.5.7.2.3 Enfocar la preparacin a 10X y observarla a 40X por lo menos 10 campos.
3.5.7.2.4 Evaluar el porcentaje aproximado de la motilidad de acuerdo a las categoras de la OMS:
Grado A
sus movimientos son rpidos y se desplazan hacia delante
Grado B
son lentos y con desplazamientos no rectilneos (errantes)
Grado C
cuando no hay desplazamiento del espermatozoide pero si hay movilidad
flagelar (movimiento in situ)

Grado D
16
cuando el espermatozoide esta inmvil

3.5.8 Movilidad
3.5.8.1 Significado clnico. Para la poblacin mexicana es 60% de clulas mviles. La movilidad
espermtica es la capacidad que tiene el espermatozoide para moverse pero sin considerar el
desplazamiento debido a su vitalidad.
3.5.8.2 Tcnica
3.5.8.2.1 Evaluar la movilidad de los espermatozoides mientras se realiza la determinacin de la motilidad
3.5.9 Morfologa
La morfologa de los espermatozoides puede observarse en una extensin (frotis) sobre un portaobjetos si
se tien con alguna tcnica apropiada. En los laboratorios de androloga se utiliza la tincin de
Papanicolau para realizar esta observacin, adems de que es la tcnica que la OMS recomienda. Existen
otros mtodos de tincin, tales como la tincin de Shorr, la de Diff-Quick y otros derivados de la tincin de
Romanowsky, sin embargo pueden presentar una tincin de fondo y no tener la misma calidad que la
tincin de Papanicolau. A continuacin, se describe los fundamentos de la tincin de Papanicolau y de
Wright, se realizar la segunda en caso de que no se cuente con los reactivos necesarios para la primera
tcnica.
3.5.9.1 Fundamentos
3.5.9.1.1 Fundamento de la tincin de Papanicolau. La tincin de Papanicolau es un mtodo de tincin
policrmico, la hematoxilina permite la coloracin bsica (afinidad por la cromatina, tie el ncleo),
mientras que el EA-50 (tie el citoplasma de clulas escasmosas o eosinfilas, adems de nuclelos y
cilios) y el naranja G (afinidad por la queratina, penetra rpidamente al citoplasma) logran la tincin cida ;
los pasos de tincin estn entremezclados con soluciones que hidratan, deshidratan y enjuagan las
clulas, finalizando con un paso de aclaramiento con xilol que produce transparencia celular. El paso final
de montaje permite proteger la muestra contra el secado y la oxidacin.
3.5.9.1.2 Fundamento de la tincin de Wright. La extensin de la muestra de lquido seminal (frotis)
permite apreciar mejor la morfologa de los espermatozoides, si se tien con la tcnica de Wright, cuyo
colorante est compuesto de azul de metileno (que tien de color azul las partes cidas de las clulas) y
eosina (que tie las partes alcalinas) disueltos en metanol (que permite la fijacin de las clulas),
adicionando a la preparacin buffer de fosfatos (que rehidrata a las clulas despus de la exposicin al
metanol). De esta manera, es posible realizar la cuenta diferencial de los espermatozoides normales y
anormales, clasificando en anormalidad de cabeza, de pieza intermedia y flagelo.
3.5.9.2 Significado clnico
Debe haber 80% de formas normales. Las infecciones de transmisin sexual, el estrs, las altas
temperaturas, el varicocele, los txicos ambientales, las drogas de adiccin (marihuana, cidos, cocana
17

etc.), el alcohol, el cigarrillo, antibiticos, agropesticidas, radiaciones han sido asociadas con la
teratozoospermia. Tambin existen factores genticos, como los casos de la agenesia del acrosoma y la
ausencia de brazos de dineina en el flagelo (sndrome del cilio inmvil), donde hay inmovilidad de los
espermatozoides.
3.5.9.3 Tcnica de la tincin de Papanicolau
3.5.9.3.1 Colocar hacia la orilla un portaobjetos limpio y seco una gota pequea de la muestra del lquido
seminal.
3.5.9.3.2 Extender la gota hacia el centro del portaobjetos con un aplicador de madera y secar al aire libre.
3.5.9.3.3 Fijar el frotis sumergindolo durante un minuto en metanol.
3.5.9.3.4 Las extensiones fijadas se deben teir de acuerdo al siguiente procedimiento, en cada paso se
retira el excedente de solucin
Etanol al 80%
10 inmersiones
Etanol al 70%
10 inmersiones
Etanol al 50%
10 inmersiones
Agua destilada
10 inmersiones
Hematoxilina de Harris 3 minutos exactos

Agua corriente
3 a 5 minutos
Etanol acidulado
2 inmersiones
Agua destilada
4 minutos
Etanol al 50%
10 inmersiones
Etanol al 70%
10 inmersiones
Etanol al 80%
10 inmersiones
Etanol al 90%
10 inmersiones
Naranja G6
2 minutos
Etanol al 95%
10 inmersiones
EA-50
5 minutos
Etanol al 95%
10 inmersiones
Etanol al 95%
10 inmersiones
Etanol al 95%
10 inmersiones
Etanol al 99.5%
10 inmersiones
Xilol
1 minuto
Xilol
1 minuto
3.5.9.3.5 Montar en resina sinttica y observar al microscopio

Nota. Siempre que se cuente con este tren de tincin se preferir su uso respecto a la tincin de Wright.
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3.5.9.4 Tcnica de la tincin de Wright
3.5.9.4.1 Realizar un frotis como el utilizado en la tincin de Papanicolau
3.5.9.4.2 Teir el frotis cubrindolo de manera uniforme con el colorante de Wright por un periodo de 5
minutos.
3.5.9.4.3 Cubrir con solucin de buffer de fosfatos por un periodo de 10 minutos, sin decantar el colorante.
3.5.9.4.4 Enjuagar con el chorro de agua corriente y secar al aire libre.
3.5.9.4.5 Montar la preparacin en el microscopio, enfocarla a 10X y observarla a 40X.
3.5.9.4.6 Realizar dos conteos de 100 espermatozoides, clasificndolos en espermatozoides normales,
anormales de cabeza, anormales de pieza intermedia y anormalidad de flagelo. Los resultados se
reportan en porcentaje. La figura 3.1 muestra algunas formas anormales de espermatozoides
humanos.
Figura 3.1 Formas anormales del espermatozoide; a, normal, b, cabeza puntiaguda, c, remanente
citoplasmtico, d, cabeza de alfiler, e, macroceflico, f, microceflico, g, cabeza estrellada, h, biceflico, j,
doble flagelo, k, defecto de pieza intermedia (Tomado de Cannon y Henry, 1991).
Con la tincin de Papanicolau, la cabeza aparece teida de azul claro en la regin acrosomal y azul oscuro
en la zona postacrosomal. La pieza media puede mostrarse rojiza, mientras que el flagelo puede ser azul o
rojizo. Las gotas citoplasmticas, usualmente ubicadas detrs de la cabeza en la pieza media, se tien de
verde.
3.5.10 Recuento de espermatozoides: mtodo de la cmara de Neubauer

3.5.10.1 Fundamento. El lquido de Dacie est compuesto por formol al 1%, que es un espermicida y
citrato de sodio al 3%, que funciona como anticoagulante, este lquido se utiliza para mantener inmviles a
los espermatozoides y evitar la coagulacin de la muestra dentro de la cmara de Neubauer, lo que facilita
su conteo.
19

3.5.10.2 Significado clnico. El valor de referencia es de 20 millones/mL a 150 millones numero total de
espermatozoides. Cuando la cantidad de espermatozoides es inferior a 20 millones/mL o menor a 40
millones en recuento total se denomina oligozoospermia; cuando no hay ningn espermatozoide se
denomina azoospermia. En estos casos, el problema puede ser secretor, es decir, no hay o hay pocos
espermatozoides por dao en el testculo causado por inflamaciones, infecciones, varicocele y otras
causas, o excretor, es decir, se producen espermatozoides pero existe una obstruccin de la va de
transporte de espermatozoides desde los testculos a la uretra prosttica.
Las oligozoospermias o azoospermias pueden ser de origen congnito o adquirido. Es importante
determinar en suero el valor de FSH, la cual est relacionada con el nmero de espermatogonias. Cuando
FSH est alta, el dao de la espermatognesis es importante y su pronstico es reservado; cuando FSH
es baja es posible estimular la espermatognesis y se espera un resultado favorable. Si FSH est en
valores normales y hay azoospermia, hay que sospechar de un proceso obstructivo.
3.5.10.3 Tcnica
3.5.10.3.1 Despus de la licuefaccin del semen, se realiza una dilucin 1:20.
3.5.10.3.2 Posteriormente se lleva hasta la marca de 11 con lquido de Dacie.
3.5.10.3.3 Homogenizar la dilucin y proceder al llenado de la cmara de Neubauer.
3.5.10.3.4 Se cuentan 2 cuadros primarios opuestos (aquellos que se utilizan para el conteo de leucocitos,
ver en la figura 3.2 los cuadros marcados con la letra L). El conteo se hace por duplicado y se
obtiene el promedio de los conteos.
3.5.10.5 Reportar el nmero de espermatozoides/mL y el nmero total de espermatozoides en el
eyaculado de acuedo a las siguientes frmulas:
Nmero (no) de espermatozoides (esp)/mL = no de esp X 100000
no total de esp en el eyaculado = no de esp/mL X volumen total de la muestra
Figura 3.2 Posicin de los cuadros primarios para el conteo de espermatozoides en la cmara de Neubauer
(Adaptado de OMS, 2001)
20

3.6.1 El material utilizado que contenga muestra biolgica (pipeta de leucocitos, portaobjetos y
cubreobjetos) se depositar en los contenedores con cloro dispuestos para cada fin.
3.6.2 El sobrante de la muestra biolgica contenida en el recipiente recoleccin, se depositar en la taza
del bao y se accionar la palanca; el recipiente se puede tirar en el bote de la basura del bao.
3.6.3 Los guantes, torundas, papel y dems material desechable contaminados con muestra se
depositarn en el bote de la basura municipal.
municipal del laboratorio. Estas debern depositarse fuera del laboratorio.
En el cuaderno de prcticas se indicarn los clculos pertinentes y los resultados de cada determinacin
realizada; la discusin debe centrarse en la importancia que tiene la realizacin de la espematobioscopa
en el diagnstico de infertilidad, en la donacin de esperma en bancos especializados y como seguimiento
a la realizacin de una vasectoma. Adems de considerar la importancia de cada una de las fases del
control de calidad interno en la emisin de resultados confiables.
Los resultados obtenidos deben analizarse integralmente; en caso de que orienten a problemas de
fertilidad dar recomendaciones tales la pertinencia de una nueva evaluacin, el uso de otras pruebas para
corroborar los resultados, entre otras.
Para las conclusiones haga referencia si los objetivos planteados fueron alcanzados o no, as como sus
consideraciones sobre el aprendizaje adquirido en su formacin profesional.
3.8 Referencias
-
Cannon, D., Henry, J.B. (1991) Lquido seminal. En Henry, J.B. (Ed) Diagnstico y tratamiento
clnicos por el laboratorio. Salvat: Mxico.
Cardona-Maya, W, Berdugo, J, Cadavid, A. (2008) Comparacin de la concentracin espermtica

usando la cmara de Makler y la cmara de Neubauer. Act Urol Esp 32(4):443-445
OMS. (2001) Manual de laboratorio de la OMS para el examen del semen humano y la interaccin
entre el semen y el moco cervical. 4 ED. Ed Mdica Panamericana.
Tapia, R, Rojas, J. (2003) Semiologa del anlisis de semen. Bol Col Mex Urol 2:48-52
21
PRCTICA No 4.
EVALUACIN DEL LQUIDO CEFALORRAQUDEO
M. Patricia Campos P.
4.1 Introduccin
El liquido cefalorraqudeo (LCR) se forma principalmente en los plexos coroideos ventriculares
mediante una combinacin de transporte activo y ultrafiltracin del plasma. Una vez formado circula en
sentido ascendente sobre los hemisferios cerebrales, as como en sentido descendente por encima de la
columna vertebral y las races nerviosas (Tortora, Derrickson, 2007).
Una caracterstica importante de este lquido es el incremento de sodio, cloruro, magnesio y
glutamina en comparacin con el plasma, as mismo se encuentran en menor proporcin la glucosa,
potasio, calcio, colesterol, cido rico, hierro, tiroxina y zinc (Seehusen, D., Reeves, M., Fomin, 2003).
El volumen de LCR en un adulto sano es 90 a 150 ml y de 10 a 60 ml en neonatos, este se forma a
un ritmo aproximado de 500 ml al da, lo que equivale de cinco a seis veces el volumen total del lquido de
todo este sistema (Cabrera, 2003).
Las funciones vitales del LCR son:
Amortiguar el encfalo dentro de la bveda craneal. Por lo tanto, un golpe en la cabeza

moviliza en forma simultnea todo el encfalo, lo que hace que ninguna porcin de ste sea
contorsionada momentneamente por el golpe.
Sirve de transporte para los nutrientes que llegan al cerebro y eliminar los desechos.
Fluir entre el crneo y la mdula espinal para compensar los cambios en el volumen de
sangre intracraneal (la cantidad de sangre dentro del cerebro), manteniendo una presin
constante (Tortora, Derrickson, 2007).
La muestra biolgica puede obtenerse por medio de punciones realizadas en tres sitios diferentes:
lumbar, cisternal o ventricular (Smith, Kjeldsverg, 2010). Cabe aclarar que su composicin vara
dependiendo el sitio de puncin, en la zona ventricular hay una mayor cantidad de protenas respecto a la
zona lumbar (Cabrera, 2003). La puncin lumbar es la primera eleccin en adultos, debe ser realizada por
personal capacitado debido a los riesgos que corre el paciente, los pasos para realizar esta puncin son:
Se coloca al paciente acostado lateralmente con la cabeza y las rodillas flexionadas hacia el
abdomen, con lo que se obtiene una mayor separacin de las apfisis espinosas vertebrales
(son prominencias seas o proyecciones que surgen de la parte posterior de las lminas de
las vrtebras).
Se traza una lnea entre ambas crestas ilacas que pasa, generalmente, entre la tercera y
cuarta apfisis Se elige el espacio ms favorable palpando las apfisis espinosas ya sea por
encima o por debajo de la lnea trazada. Algunos autores refieren que la puncin se puede
22

llevar a cabo entre la 2 y 3 vrtebra lumbar sin que existan complicaciones, aunque se
prefiere entre la 3 y 4 debido a que esta zona tiene una mayor zona de trabajo. Se
desinfecta la piel de la regin lumbosacra con una solucin antisptica (yodo o alcohol).
Inyectar 1-2 ml anestsico local (lidocana 2 %) en el espacio seleccionado.
La aguja se introduce entre ambas apfisis espinosas atravesando el ligamento

nterespinoso perpendicularmente a la piel de la lnea media. El bisel del trocar se debe
disponer en el sentido de las fibras musculares. En ese momento se desva la aguja hacia la
cabeza y se introduce hasta 5- 6 cm alcanzndose el espacio subaracnoideo. Se nota una
ligera resistencia cuando se perforan los ligamentos y el saco dural. Se retira el mandril
fluyendo espontneamente la muestra. Cuando el ligamento nterespinoso est fibrosado o
es muy resistente es necesario practicar la puncin a 1 cm de la lnea media moviendo a la
aguja en sentido ceflico y hacia la lnea media.
La puncin lumbar se indica ante la sospecha de meningitis, aunque tambin puede aportar
informacin relevante en enfermedades malignas, hemorragias cerebrales, convulsiones, enfermedades
metablicas (Smith, Kjeldsverg, 2010). Este tipo de puncin est contraindicada en aquellos pacientes que
presentan sntomas o signos de incremento de la presin intracraneal. En estos casos, existe el riesgo de
herniacin cerebral, al realizar la extraccin. Tambin est contraindicada en los nios con inestabilidad
hemodinmica, coagulopata o que presenten infeccin de los tejidos del lugar donde se va a realizar la
extraccin (Cabrera, 2003).
El estudio del LCR se divide en el examen fsico, evalundose aspecto, color densidad y pH, el
examen microscpico, donde se determina el nmero de leucocitos y su cuenta diferencial y el examen
qumico, realizndose la determinacin de glucosa, cloro y protenas de forma cuantitativa y cualitativa
(Seehusen, D., Reeves, M., Fomin, 2003).
4.2.1 Cundo se utilizan las diferentes zonas de puncin para la obtencin de LCR?
4.2.2 En una tabla indique la composicin bioqumica del LCR, comparndola con la del plasma.
4.2.3 Cmo se distingue una puncin traumtica de un derrame cerebral cuando el aspecto de la muestra
es sanguinolento?
4.2.4 Qu es la xantocroma? En qu casos se presenta?
4.2.5 Porque es importante el cuidado de la presin durante la obtencin del LCR?
4.2.6 Explicar qu son los ndices de IgG, de albmina y de Tourtelotte.
4.2.7 Investigar cmo se utiliza la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) en el estudio del LCR.
4.3 Objetivos
4.3.1 Conocer los mtodos de obtencin del LCR y los cuidados al paciente antes, durante y despus de la
obtencin del mismo.
23

4.3.2 Analizar una muestra de LCR, a travs de las diferentes pruebas que se realizan para su estudio
(fsicas, qumicas, conteo celular y diferencial), y establecer una posible alteracin en su composicin
que apoye al diagnstico mdico.
Muestra de LCR (proporcionada por los profesores del laboratorio)

- 15 Tubos de ensaye 12x75 mm
- 2 Portaobjetos
- 1Propipeta
- 1 Aplicador de madera
- 1 Gradilla
- 1 Cuadro de papel seda
- 1 Microscopio
- 1 Hemocitmetro
- 1 pipeta graduada de 1 ml (1/100)

- 3 Gradilla
- 1 Pipetas graduadas de 1 ml (1/100)
- 1 Centrfuga con balanza
- 3 Pipetas graduadas de 5 ml
- 1 Agitador vortex
- 1 Pipetas graduadas de 2 ml (1/100)
- 1 Bao de incubacin a 37 C
- 2 Vaso de precipitado de 500 ml
- 2 Espectrofotmetro con gradilla
- 1 Micropipeta (5 50 ul)
- 10 celdas para espectrofotmetro
- 2 piseta con agua destilada
- 1 bolsa roja para RPBI
- Refractmetro
4.4.4 Reactivos
- Reactivo para la determinacin Glucosa
- Reactivo de Pandy
- Reactivo para la determinacin Protenas rojo de pirogalol - Reactivo para la
- Reactivo de None-Apelt
determinacin cloruros
- Colorante de Wright
- Hipoclorito de sodio
- Buffer de fosfatos

4.5.1. Obtencin de la muestra
La muestra ser proporcionada por los profesores del laboratorio.
NOTA. La evaluacin de los resultados de las pruebas del examen fsico (aspecto, color, densidad y pH)
puede ser subjetiva, por lo que se requerir de atencin de parte de los integrantes del equipo. En caso de
alguna duda se podr solicitar apoyo a los profesores.
24

4.5.2.1 Significado clnico. El LCR es transparente e incoloro en condiciones normales. Si tiene
apariencia turbia o lechosa, indica un aumento de la concentracin de lpidos y protenas o infeccin
bacteriana. Una apariencia brumosa nos indica la presencia de leucocitos. Un aspecto sanguinolento nos
habla de una posible hemorragia. La apariencia coagulada nos indica la elevacin de protenas o factores
de coagulacin. La presencia de una pelcula en la superficie es un indicio de meningitis bacteriana. La
presencia de color en la muestra se denomina xantocroma. Un color rojizo puede ser causado por la
propia puncin y no debe confundirse con la hemorragia, generalmente va disminuyendo conforme sale el
lquido y la centrifugacin lo elimina por completo al decantarse los eritrocitos. Un color amarillo procede
de
la
hemoglobina
de
procesos
hemorrgicos.
Aparece
excepcionalmente
en
las
ictericias
(bilirrubinorraquia).y en el sndrome de Froin, se observa ms tpicamente por el bloqueo espinal

(compresin medular tumoral), por otro lado, un color rosa indica una cantidad de oxihemoglobina y un
color anaranjado es indicativo de hemlisis intensa.
4.5.2.2 Tcnica
4.5.2.2.1 Homogenizar la muestra por inversin suave.
4.5.2.2.2 Observar la muestra para determinar su aspecto y color
4.5.3 Densidad
4.5.3.1 Significado clnico. La densidad del LCR oscila entre 1.005 y 1.009, debido a que su componente
principal es el agua. La densidad se ve alterada por la presencia de sangre (debido a una puncin
incorrecta o hemorragia), elevacin de protenas lpidos, entre otras.
4.5.3.2 Tcnica
4.5.3.2.1 Calibrar el refractmetro a 1.000 agregando una gota de agua a la cmara y moviendo la perilla
que se encuentra en la parte superior, (si se tienen problemas para visualizar la escala puede
calibrarse con el ocular).
4.5.3.2.2 Limpiar con papel absorbente y agregar gotas de la muestra homogenizada a la cmara y
observar por el ocular.
4.5.3.2.3 Leer la densidad en la escala respectiva, de acuerdo a la lnea de separacin entre el campo
claro y el oscuro.
4.5.4 pH
4.5.4.1 Significado clnico. El pH del LCR es de 7.3 a 7.4, es ligeramente ms alcalino cuando
permanece en reposo, como resultado del desprendimiento de dixido de carbono. El pH es utilizado como
parte del diagnostico diferencial de las diversas meningitis.
25

4.5.4.2 Tcnica
4.5.4.2.1 Introducir una tira de papel pH a la muestra homogenizada.
4.5.4.2.2 Al cabo de 30 segundos comparar con la escala de colores de la caja para determinar el pH de la
muestra.
4.5.5 Conteo celular de leucocitos
4.5.5.1 Significado clnico. En adultos el nmero debe ser inferior a 5/mm3. El significado de un recuento
entre 5 y 10 clulas es dudoso, pero por encima de 10 clulas es inequvocamente patolgico. En nios la
cifra de leucocito aumenta hasta 20-30/mm3, sobre todo en los menores de un ao.
4.5.5.2 Tcnica
4.5.5.2.1 Homogenizar la muestra por inversin suave.
4.5.5.2.2 Llenar la cmara de Neubauer con una pipeta de Thoma o tubo capilar y permitir reposar durante
2 minutos.
4.5.5.2.3 Montar en el microscopio, enfocar con el objetivo de 10X y contar los cuadrantes de leucocitos en
40X.
4.5.5.2.4 En caso de que se dificulte el conteo por el nmero de clulas, hacer una dilucin con la pipeta
de Thoma y lquido de Turck. El factor por el que se multiplica el nmero de clulas se calcula
considerando la dilucin, el volumen de la cmara y los cuadrantes contados.
4.5.6 Cuenta diferencial de leucocitos

4.5.6.1 Fundamento. Se utiliza la tincin de Wright, su fundamento est descrito en el numeral 3.5.9.1.2.
4.5.6.2 Significado clnico. En condiciones normales encontramos en el LCR menos de 5 linfocitos/l,

cuando existe una meningitis purulenta los valores de neutrfilos van de 10-10.000/l, en el caso de
meningitis viral y tuberculosa los valores son mayores a 100/l, con un predominio mononuclear.
4.5.6.2 Tcnica
4.5.6.2.1. Centrifugar el LCR a 2000 rpm por 5 min, recolectar el sobrenadante en otro tubo y guardarlo
para realizar las pruebas qumicas.
4.5.6.2.2 Colocar una gota del sedimento en un portaobjetos y secar a temperatura ambiente.
4.5.6.2.3 Realizar la tincin de Wright de acuerdo a los pasos descritos en 3.5.9.4.2, 3.5.9.4.3 y 3.5.9.4.4.
4.5.6.2.4 Montar la preparacin en el microscopio, enfocarla a 10X y observarla a 100X.
4.5.6.2.5 Contar 100 leucocitos diferenciando cada poblacin presente.
26

4.5.7 Determinacin de glucosa por el mtodo de glucosa oxidasa-POD (enzimtico colorimtrico)
4.5.7.1 Fundamento. La glucosa oxidasa oxida a la glucosa originando cido glucnico y H2O2, este
reacciona con un cromgeno (4-aminoantipirina) por la reaccin de Trinder, para dar una quinona que
absorbe entre 492 y 550 nm. La intensidad de color producida es directamente proporcional a la
concentracin de glucosa.
4.5.7.2 Significado clnico. Los valores normales son de 50-75 y hasta 80 mg/dl en el adulto y en infantes
de 70-90 mg/dl. Al realizar este examen se debe tomar en cuenta si el paciente cursa una hiperglucemia,
de ser as pueden registrarse valores mayores a 60 mg/dl por esta causa. Se puede observar un aumento
de glucosa en encefalitis epidmica (aumento discreto), poliomielitis, meningitis serosas y urmicas e
hipertensin endocraneana. Se observa una disminucin de glucosa en estados de hipoglucemia,
meningitis purulentas (acompaando la pleocitosis y la turbidez), meningitis tuberculosa (el descenso es
lento), en casos graves de sfilis meningovascular, carcinomatosis menngea, sndrome de Reye
(hepatoencefalopatia aguda metavrica), cisticercosis con meningoencefalitis, meningitis reumatoide,
granulomatosa por sarcoidosis y hemorragia aracnoidea.
4.5.7.3 Tcnica
4.5.7.3.1 Revisar el manual de uso del reactivo. Seguir las indicaciones del Anexo B. La longitud de onda
es 505 nm.
4.5.8 Determinacin cualitativa de protenas por los mtodos de Nonne-Apelt y Ross Jones
4.5.8.1 Fundamento. La prueba de Nonne Apelt es especfica de las globulinas, puesto que precipitan por
el sulfato de amonio a media saturacin; no sucede lo mismo con la de Ross Jones pues en el punto de
contacto la concentracin del sulfato de amonio es del 85 %, o sea una solucin saturada, que precipita no
slo las globulinas sino tambin la albmina.
4.5.8.2 Significado clnico. La presencia de un color claro indica cantidad normal de globulinas. La
presencia de precipitado turbio es indicativo del exceso de globulinas. La formacin de un anillo turbio
entre los 2 lquidos se observa en casos patolgicos.
4.5.8.3 Tcnica para la realizacin de la prueba de Nonne Apelt.
4.5.8.3.1 Colocar en un tubo de ensaye 0.5 ml de la solucin de sulfato de amonio saturado y 0.5 ml de
LCR.
27

4.5.8.3.2 Reposar 3 min y leer los resultados de acuerdo a lo siguiente:
La mezcla no cambia de aspecto, reaccin negativa (-).
Opalinidad, reaccin positiva (+).
Enturbiamiento, reaccin positiva (++).
Enturbiamiento fuerte, reaccin positiva (+++).
Enturbiamiento lechoso, reaccin positiva (++++).
4.5.8.4 Tcnica para la realizacin de la prueba de Ross Jones.
4.5.8.4.1 Colocar en un tubo de ensaye 1.0 ml de solucin saturada de sulfato de amonio y 0.5 ml de LCR,
evitando romper la interfase que se forma.
4.5.8.4.2 Observa sobre fondo oscuro el anillo blanquecino que aparece en el punto de contacto. Si l
anillo no aparece a los 2 minutos la reaccin se considera negativa.
4.5.8.4.3 Reportar la intensidad del anillo con cruces (+ a ++++)
4.5.9 Determinacin cualitativa de protenas por el mtodo de Pandy
4.5.9.1 Fundamento. La albmina y globulina precipitan en una solucin de fenol.
4.5.9.2 Significado clnico. Se considera normal si no se observa turbidez alguna. Al igual que las otras
pruebas permite reconocer una inflamacin crnica o incipiente. La presencia de una ligera turbidez indica
una presencia anormal de globulina. La reaccin es un ndice de la fraccin globulnica del LCR. Sin
embargo Pandy dice que es una prueba para albmina y globulinas. En la inmensa mayora de los casos
un Pandy negativo corresponde a albuminorraquias normales.
4.5.9.3 Tcnica
4.5.9.3.1 Agregar una gota de LCR a 0.5 ml de la solucin saturada de fenol.
4.5.9.3.2 Observar sobre fondo oscuro para apreciar la opalescencia o la turbidez producidas. Es
aconsejado por algunos autores, la comparacin con un LCR normal, lo que facilita la apreciacin
de las pequeas opalescencias.
4.5.9.3.3 La forma de reportar los resultado es igual que en las pruebas anteriores.
4.5.10 Determinacin cuantitativa de protenas por el mtodo de rojo de pirogalol (colorimtrico)

4.5.10.1 Fundamento. Las protenas presentes en la muestra reaccionan en medio cido con el rojo de
pirogalol y el molibdato, formando un complejo colorido. La absorbancia a 600 nm debido a la formacin
del complejo colorido es directamente proporcional a la concentracin de protena en la reaccin.
Protena
28
Complejo Rojo
de pirogalol
molibdeno
Complejo protena Rojo de pirogalolmolibdeno

4.5.10.2 Significado clnico. Se consideran normales resultados de 15-40 mg/dl por puncin lumbar, para
el caso de puncin cisternal es de 10-25 mg/dl, y ventricularmente es de 5-15 mg/dl. Debe considerarse
que la presencia de sangre en LCR da lugar a un incremento la concentracin. Las protenas pueden
observarse elevadas cuando existe variacin en la permeabilidad de la barrera hematoenceflica: en
procesos inflamatorios y degenerativos del neuroeje y meninges, daos vasculares del sistema nervioso,
meningitis supuradas, hemorragia cerebral, procesos obstructivos del espacio subaracnoideo y sndrome
de Guillain-Barr.
4.5.10.3 Tcnica
4.5.10.3.1 Revisar el manual de uso del reactivo. Seguir las indicaciones del Anexo B. La longitud de
onda en que se lee es 600 nm.
4.5.11 Determinacin de cloro por el mtodo de tiocianato de mercurio (colorimtrico)

4.5.11.1 Fundamento. Los iones cloruro de la muestra reaccionan con tiocianato de mercurio desplazando
el in tiocianato. El tiocianato libre en presencia de iones frricos forma un complejo colorido medible
espectrofotomtricamente. La intensidad del color, leda entre 440 y 500 nm, es proporcional a la
concentracin de iones cloruro presente en la muestra ensayada.
2 Cl- + Hg (SCN)2
HgCl2 + 2 SCN-
SCN- + Fe3+
FeSCN2+
4.5.11.2 Significado clnico: La cifra normal es de 700 a 750 mg/dl. (120-130 mEq/L) expresados en
NaCl. Se observa un aumento en los procesos en que existe una retencin de cloruros en sangre, en las
nefritis con insuficiencia renal, deshidrataciones puras sin prdida de electrolitos. Se observa una
disminucin en hipocloremias (ocasionado en la neumona por neumococos), Meningitis tuberculosas y
purulentas y en la enfermedad de Heine-Medin y sfilis nerviosa.
4.5.11.3 Tcnica
4.5.11.3.1 Revisar el manual de uso del reactivo. Seguir las indicaciones del Anexo B. La longitud de
onda es 540 nm.
4.6.1 Los tubos con muestra biolgica y los portaobjetos se depositarn en los contenedores con cloro
dispuestos para este fin.
4.6.2 Los guantes, papel y dems materiales desechables empapados con la muestra se depositarn en la
bolsa roja de residuos peligrosos biolgicos infecciosos.
29


En el cuaderno de prcticas realizar los clculos necesarios para obtener los resultados de cada prueba
realizada y compararlos con los valores de referencia correspondiente.
Dado que la muestra es proporcionada por los profesores, debe considerarse si la toma de muestra puede
afectar a las determinaciones realizadas explicando cmo sucedera.
Integrar los resultados para verificar si orientan hacia algn diagnstico; indicar si existen otras pruebas
que puedan complementarlos.
Realizar las recomendaciones necesarias al paciente y al mdico, de acuerdo al probable diagnstico.
Resaltar la importancia del estudio de esta muestra en patologas especficas relacionadas con el sistema
nervioso central.
4.8 Referencias
-
Cabrera, C. (2003) Lquido cefalorraqudeo y la puncin lumbar en el siglo XXI. Rev Posg VIa
Cted Medicina 128. Recuperado de http://med.unne.edu.ar/revista/indice.html#128
Seehusen, D., Reeves, M., Fomin, D. (2003) Cerebrospinal fluid analysis. American Family
Physician. 68 (6): 1103 1108
Smith, G.,
Kjeldsverg, C. (2010). Lquido cefalorraqudeo, sinovial y lquidos serosos del
organismo. En Henry, J.B. Laboratorio en el diagnstico clnico. Marbn: Madrid.

-
Tortora, G. Derrickson, B. (2007). El encfalo y los nervios craneales. En autor Principios de

anatoma y fisiologa. Mdica Panamericana: Mxico, D.F
30
PRCTICA No 5.
DIFERENCIACIN DE EXUDADOS Y TRASUDADOS
Ren Damin S.
5.1 Introduccin
Los lquidos serosos corporales se derivan del plasma y se encuentran en la cavidad pleural,
pericrdica, peritoneal y articular, en estas cavidades corporales estn delimitadas por una membrana
serosa parietal y una visceral que estn constituidas por una capa de tejido conjuntivo con abundantes
capilares y vasos linfticos y una capa superficial de clulas mesoteliales (Tortora y Derrickson, 2007).
Estos lquidos son un ultrafiltrado del plasma que se derivan de una abundante red capilar de la
membrana serosa. Su formacin es similar a la del lquido extravascular y aqu intervienen la presin
hidrosttica, la presin coloidosmtica y la permeabilidad capilar (Tortora y Derrickson, 2007).
En condiciones fisiolgicas hay una pequea cantidad de lquido en cada una de estas cavidades
que permite el movimiento de las vsceras en cada uno de estos espacios. Un sistema complejo regula el
volumen de estos lquidos. Cuando se alteran estos mecanismos responsables de la formacin o
absorcin del lquido se produce un aumento excesivo de estos lquidos, de este modo el lquido se
acumula cuando se aumenta la permeabilidad capilar y la presin hidrosttica o cuando disminuye la
presin coloidosmotica o se obstruye el drenaje linftico. La presin hidrosttica impulsa la salida del
lquido de los capilares hacia el interior de las cavidades (Strasinger y DiLorenzo, 2008).
Las protenas plasmticas son las que producen la presin osmtica y contrarrestan la presin
hidrosttica manteniendo el liquido en los capilares, la diferencia de presin osmtica entre el plasma y el
liquido intersticial es proporcional a la concentracin de protenas, principalmente la albumina. Los vasos
linfticos tambin desempean un papel importante en la absorcin de agua, protenas y otros solutos
desde el espacio extravascular (Strasinger y DiLorenzo, 2008).
Los exudados son lquidos inflamatorios cuya formacin depende de un aumento de la
permeabilidad capilar debido a alteraciones que implican directamente a estructuras de la superficie de
determinadas cavidades (mesotelio, vasos linfticos, capilares y articulaciones). Por ejemplo: tuberculosis,
infecciones bacterianas, tumores, entre otras (Smith, Kjeldsverg, 2010).
Los trasudados son derrames provocados por factores mecnicos que influyen en la formacin o
resorcin de lquido plasmtico, por ejemplo, a causa de la reduccin de la albmina del plasma o
incremento de la presin venosa (presin hidrosttica o coloidosmtica). La diferencia entre un trasudado y
exudado se basa en niveles arbitrarios de decisin clnica que han sido determinados empricamente
(Smith, Kjeldsverg, 2010).
El estudio habitual del derrame pleural y sinovial de etiologa desconocida incluye en general la
determinacin de su aspecto general, nivel total de protenas, recuento de eritrocitos
31
recuento de

leucocitos, recuento diferencial y estudio microscpico con Wright y Gram, cultivo y estudio citolgico
(Smith, Kjeldsverg, 2010; Strasinger y DiLorenzo, 2008).
Otros estudios que resultan de gran utilidad son: la determinacin de glucosa, LDH, pH, fosfatasa
alcalina y biopsia (Smith, Kjeldsverg, 2010). Tambin es importante sealar que existen tcnicas de
imagen, que son importantes para el diagnstico de las diversas patologas relacionadas. La radiografa de
trax permite detectar derrames muy pequeos de hasta 100 ml adoptando diferentes posiciones como el
decbito lateral. En ocasiones es necesario recurrir a la ecografa para localizar un derrame (Strasinger y
DiLorenzo, 2008).
El estudio de estos lquidos serosos proporcionan informacin importante sobre la fisiopatologa de
los rganos y tejidos donde se generan y es funcin del laboratorio la seleccin de magnitud diagnostica
apropiada y con buena capacidad discriminatoria, para que este estudio aporte informacin decisiva en la
prctica clnica.
5.2.1 Describa en un cuadro las caractersticas distintivas de los exudados y trasudados.
5.2.2 Menciona otras pruebas que complementaran la prctica y las situaciones en que se usaran.
5.2.3 Qu enzimas son cuantificadas en el estudio de los exudados y trasudados?
5.2.4 Definir los siguientes conceptos: paracentesis, toracocentesis, artrocentesis, pericardiocentesis.
5.2.5 En un cuadro, indique la composicin, la cantidad, las situaciones en las que aumenta y sus hallazgos
de laboratorio de los lquidos peritoneal, sinovial, pericrdico y pleural.
5.3 Objetivos
5.3.1 Determinar si el lquido seroso proporcionado en la prctica es un exudado o un trasudado mediante
la realizacin de pruebas fsicas, qumicas y microscpicas para conocer la importancia de su
diferenciacin.
Muestra de lquido seroso proporcionada por los profesores del laboratorio

- 3 Cubreobjetos
- 1 Pipeta graduada de 1ml
- 1 Cuadros de papel seda
- 6 Tubos de ensaye de 13 x 100 mm
- 1 Propipeta
- 1 Gradilla
- 3 Portaobjetos
- 1 Microscopio
32

- 1 Bao de incubacin a 37 C
- 1 Centrifuga con balanza
- 1 Micropipeta (200 1000 ml)
- 1 Espectrofotmetro con gradilla
- 5 Frasco gotero con aceite de inmersin
- 10 celdas para espectrofotmetro
- Recipientes para desechos (RPBI)
- 1 Pinzas para portaobjetos
- 3 pipetas graduadas de 5 ml
- 3 gradillas
- 2 Vaso de precipitado de 500 ml
- 1 Dispensador de puntas azules
- 1 Dispensador de puntas amarillas
5.4.4 Reactivos
- Reactivo para la determinacin Glucosa
- Reactivo para la determinacin Protenas totales (Biuret) - Benzal

- cido actico glacial
- Reactivos para la tincin Wright
- Buffer de fosfatos
- Aceite de inmersin

5.5.1 Obtencin de la muestra
La muestra ser proporcionada por los profesores.
5.5.2.1 Significado clnico. Los lquidos amarillentos claros, parecidos al suero o a la orina normal,
pueden corresponder a trasudados de congestin. El lquido puede ser de color amarillento transparente,
turbio por su contenido elevado de clulas, hemtico por la presencia de hemates o quiloso por aumento
de grasas en forma de triglicridos. Una apariencia lechosa fibrinosa puede ser debida a un aumento de
la concentracin celular o lipdica. El examen del sobrenadante tras la centrifugacin permite su
diferenciacin.
5.5.2.2 Tcnica
5.5.2.2.1 Homogenizar la muestra por inversin suave y observarla
5.5.2.2.2 En caso de que la muestra presente turbidez se observa despus de la centrifugacin a 2000
rpm por 5 minutos.
5.5.3 Densidad
5.5.3.1 Significado clnico. El exudado generalmente tiene una densidad superior 1.018 y un trasudado
con una densidad menor a 1.018
33

5.5.3.2 Tcnica
5.5.3.2.1 Seguir la tcnica descrita en 4.5.3.2.
5.5.4 pH
5.5.4.1 Significado clnico. En los exudados el pH es inferior a 7.30 en trasudados el pH es mayor a 7.30.
El pH es inferior a 7.2 en muchos derrames exudativos de diversa etiologa especialmente en empiema
pleural y derrames neoplsicos. Sin embargo en los derrames quilosos y los secundarios a embolismo
pulmonar no desciende por debajo de este lmite.
5.5.4.2 Tcnica
5.5.4.2.1 Seguir la tcnica descrita en 4.5.4.2.
5.5.5 Prueba de Rivalta

5.5.5.1 Fundamento. Se usa para distinguir exudados de trasudados. Los exudados contienen una
protena que es la seromusina esta precipita con cido actico, la presencia de dicha protena en una
muestra de liquido filtrado, se revela por una muestra de precipitado o floculacin cuando se le adiciona
cido actico.
5.5.5.2 Tcnica
5.5.5.2.1 Colocar en un tubo de ensaye 2 ml de cido actico diluido.
5.5.5.2.2 Agregar una o dos gotas del lquido de puncin analizado.
5.5.5.2.3 Si las gotas se hunden dejando un rastro claramente visible de precipitado blanco se puede
afirmar que es un exudado. Si se disuelven inmediatamente se trata de un trasudado.
5.5.6 Determinacin de protenas por el mtodo de Biuret (colorimtrico)
5.5.6.1 Fundamento. En medio alcalino, los grupos amino terminales de los enlaces peptdicos de las
protenas se unen al cobre, formando un tetracomplejo (4 amino terminales y un cobre) generando un
intenso color violeta azulado. La intensidad del color formado, leda entre 540 y 560 nm es proporcional a
la concentracin de protena total en la muestra ensayada.
5.5.6.2 Significado clnico. Una cifra mayor a 3 g/dl es significativa de un exudado, por debajo de 3 g/dl
es indicativo de un trasudado. Una ascitis rpida muy rica en protenas es sospechosa de trombosis
supraheptica. La fibronectina aumenta en la ascitis maligna, por carcinomatosis peritoneal. Tambin en
derrames pleurales tuberculosos o en conectivopatas (son un grupo de enfermedades que se caracterizan
por ser generalmente procesos multisistmicos. Los rganos diana varan en cada proceso lo que les da
una entidad propia a cada una de ellas. En todas ellas se presume una etiopatogenia comn, la aparicin
34

de autoanticuerpos especficos). La beta-2 microglobulina est presente en los derrames debidos a
procesos hematolgicos.
5.5.6.3 Tcnica
5.5.6.3.1 Revisar el manual de uso del reactivo. Seguir las indicaciones del Anexo B. La longitud de onda
es 540 nm.
5.5.7 Determinacin de glucosa en la muestra control por el mtodo de glucosa oxidasa-POD
(enzimtico colorimtrico).
5.5.7.1 Fundamento. El fundamento est descrito en el numeral 4.5.7.
5.5.7.2 Significado clnico. La determinacin de la glucosa sirve para el diagnstico diferencial de los
exudados. Cuando la glucosa es menor de 60 mg/dl sugiere derrame pleural paraneumnico, tuberculosis,
neoplasia o artritis reumatoide. Los valores bajos de glucosa se deben al consumo excesivo por parte del
metabolismo celular o bacteriano. En los derrames paraneumnicos complicados valores de glucopleura
inferiores a 40 mg/dl son indicacin de drenaje. En neoplasias, la glucosa baja indica gran nmero de
clulas neoplsicas y mayor probabilidad de obtener citologa positiva. En la artritis reumatoide la
glucopleura baja se debe a un bloqueo del paso de la misma desde la sangre al espacio pleural.
5.5.8 Examen microscpico
5.5.8.1 Fundamento. Se realiza una observacin del sedimento sin realizar tincin, bajo el microscopio a
40X, buscando la presencia de clulas mesoteliales y de la inflamacin, adems de cristales. En aquellos
casos en que se identifique una cantidad considerable de leucocitos, el sedimento se observar tindolo
con Wright (para el fundamento ver 3.4.9.2 y la tcnica ver 3.4.9.4).
5.5.8.2 Significado clnico. El sedimento de los derrames trasudados puede presentar algunas clulas
mesoteliales de descamacin, cuyo nico inters estriba en la posible confusin con clulas atpicas, por
su alteracin y degeneracin en los derrames crnicos. El conteo celular aumenta en las infecciones
bacterianas. La presencia de cristales de urato en fagocitosis se observa con gota artrtica. En lupus
eritematoso sistemtico se observan clulas LE. Los linfocitos predominan en derrames tuberculosos pero
tambin los podemos encontrar en neoplsicos. Polinucleares en exudados de origen bacteriano no
tuberculosos por cocos generalmente. Eosinfilos son elevados en enfermedades como periartritis nodosa;
Churg Straus, etc. que tambin se le llama enfermedad del colgeno, pero tambin abundan en derrames
parasitarios o alrgicos, incluso en la tuberculosis o cncer.
5.5.8.3 Tcnica
5.5.8.3.1 Centrifugar la muestra a 2000 rpm durante 5 min.
35

5.5.8.3.2 Decantar el sobrenadante en otro tubo.
5.5.8.3.3 Resuspender la pastilla, colectar una gota del lquido con una pipeta Pasteur y colocarla sobre un
portaobjetos, cubrir con cubreobjetos.
5.5.8.3.4 Montar la preparacin en el microscopio, enfocar en 10X y observar a 40X.
5.5.8.3.5 Buscar y registrar la presencia de clulas mesoteliales, leucocitos, bacterias y cristales.
5.5.8.3.6 Reportar la presencia de estas clulas como negativo, escasos, moderados, abundantes e
incontables.
5.5.8.3.7 En caso que los leucocitos se encuentren de moderados a incontables, realizar un frotis
colocando una gota del sedimento homogenizado, extendiendo suavemente sobre un
portaobjetos. Secar al aire y teir con Wright (ver 3.5.9.4).

5.6.1 Los tubos y portaobjetos con muestra biolgica se depositarn en los contenedores con cloro
5.6.2 Los guantes, papel y dems material desechable contaminado con muestra se depositarn en la
bolsa roja de RPBI.
5.6.3 Los guantes y su envoltura se desecharn en el bote de la basura si no estn contaminados.

En el cuaderno de prcticas que entregarn despus de haber terminado la parte experimental y con base
a los resultados de las pruebas realizadas al lquido en estudio, se analizar si se trata de un exudado o
trasudado; tambin es pertinente sugerir pruebas complementarias para la clasificacin y para conocer el
origen de la posible patologa del lquido seroso. Debe resaltarse la importancia de diferenciar el origen del
lquido, para iniciar un tratamiento, dar un seguimiento y valorar posibles patologas relacionadas con el
derrame.
5.8 Referencias
-
Smith, G.,
Kjeldsverg, C. (2010). Lquido cefalorraqudeo, sinovial y lquidos serosos del
organismo. En Henry, J.B. Laboratorio en el diagnstico clnico. Marbn: Madrid.

-
Strasinger, S. DiLorenzo, M. (2008). Lquidos serosos. En autor Anlisis de orina y de los lquidos
corporales. Mdica Panamericana: Buenos Aires
Tortora, G. Derrickson, B. (2007). Principios de anatoma y fisiologa. Mdica Panamericana:

Mxico, D.F
36
PRCTICA No 6.
EXMEN COPROLGICO
Ren Damin S.
6.1 Introduccin
La eliminacin de los productos de desecho de la digestin es indispensable para la salud. Dichos
productos excretados se conocen como excremento o heces. Un adulto excreta entre 100 a 300 gr de
materia fecal por da, la excrecin depende de una serie compleja de procesos de absorcin, secrecin y
fermentacin. El examen de estas se realiza con frecuencia en la evaluacin de trastornos
gastrointestinales y sus resultados ayudan a descubrir un sinfn de enfermedades como pueden ser,
sangrado y obstruccin gastrointestinal, ictericia obstructiva, enfermedades parasitarias, disentera, colitis
ulcerosa y en los sndromes de mala absorcin y mala asimilacin (Tortora y Derrickson, 2007).
El intestino delgado mide aproximadamente 7 m de longitud y est divido en duodeno, yeyuno e
ilion; mientras que el intestino grueso mide de 1.2 a 1.5 m. En el intestino delgado se degrada las grasas,
las protenas y los carbohidratos ingeridos a unidades que sean absorbibles, las secreciones pancreticas,
gstricas y biliar ayudan a este proceso, para preparar su trasporte activo a travs de las mucosa. Otras
sustancias activas que se absorben, son vitaminas liposolubles, hierro y calcio, tambin se absorbe agua y
electrolitos para posteriormente regresarlo al torrente sanguneo. El contenido del intestino delgado
(quimo) principia su paso hacia el recto en tan solo 2 a 3 h despus de haber comido, pero el proceso no
es completo sino hasta 6 a 9 h despus de la comida (Tortora y Derrickson, 2007).
El intestino grueso realiza funciones menos complejas que el intestino delgado. El colon proximal o
recto absorbe la mayor parte del agua restante. La absorcin colnica del agua y electrolitos es un proceso
pasivo. Despus de comer hay movimientos de mayor actividad propulsiva (peristaltismo). Estas ondas
peristlticas tienen su origen en reflejos gastroclicos y duodenoclicos, los cuales se inician despus de
la comida, se producen al llenarse el duodeno con el alimento proveniente del estomago. Los msculos del
colon estn inervados por el sistema nervioso autnomo. El sistema nervioso parasimptico estimula el
movimiento, y el simptico inhibe este movimiento. Varias veces al da se presenta peristaltismo masivo, lo
cual hay distencin del recto y se inicia la urgencia de la defecacin. En personas con motilidad normal y
con ingestin de una dieta mixta, el tiempo de transito o de paso (desde la ingesta del alimento hasta de
defecacin) es de 24 a 48 h. De esta forma, la funcin normal del colon encierra 3 procesos fisiolgicos: 1)
absorcin de lquidos y electrolitos; 2) contraccin que mezclan que mezclan el contenido, lo exponen a la
mucosa y lo transportan al recto, y 3) defecacin (Tortora y Derrickson, 2007; Garca y Lpez, 2007).
El examen coprolgico completo debe incluir el anlisis de las propiedades fsicas, qumicas y
microscpicas de los elementos contenidos en la muestra. Tambin existen otros exmenes como son el
coproparasitoscpico y el coprocultivo, el primero se realiza para la observacin de parsitos en sus
diferentes fases del ciclo de vida, en una muestra fresca; el segundo, la muestra se siembra en medios de
37

cultivos selectivos para el desarrollo e identificacin de las bacterias entricas patgenas (Heisig, Threatte,
Henry, 2010; Strasinger y DiLorenzo, 2008).
Para el estudio del examen coprolgico el paciente debe realizar un rgimen alimenticio durante 3
das antes de la recoleccin de la muestra; existen diferentes regmenes alimenticios, pero se puede
utilizar el siguiente:
Desayuno: un tazn de leche con cereal y azcar, pan blanco ligeramente tostado, untado con
mantequilla.
Comida: un plato de pur espeso de papas, un bistec de ternera de 150 g. algo crudo por dentro,
un huevo pasado ligeramente por agua en tortilla blanda, un pan blanco con mantequilla, sin
postres de ninguna clase.
Merienda: en caso de acostumbrarla, igual que el desayuno.
Cena: igual que la comida, exceptuando la carne (Garca y Lpez, 2007).
Cuando se recolecte la muestra debe evitarse mezclarla con orina o sangre menstrual, debe llevarse
lo ms pronto posible al laboratorio y el clnico la examinar por s mismo antes de registrarla.
El examen coprolgico se indica cuando el paciente padece alteraciones inflamatorias, infecciosas o
fisiolgicas en donde se ven comprometidas las funciones de asimilacin y la digestin (Heisig, Threatte,
Henry, 2010; Strasinger y DiLorenzo, 2008).
Las pruebas que se realizan a las heces en este examen se dividen en fsicas (color, olor, consistencia
y forma), qumicas (sangre oculta) y microscpica, donde se evala la funcin gastrointestinal, a travs de
la observacin de los residuos alimenticios, presencia de bacterias, parsitos o clulas sanguneas (Heisig,
Threatte, Henry, 2010).
6.2 Actividades complementarias a la prctica

6.2.1 Esquematizar completo el aparato digestivo.
6.2.2 Mencionar y esquematizar imgenes de los artefactos y de restos de alimentos que se observan en el
examen microscpico de heces.
6.2.3 Definir creatorrea, esteatorrea, melena, espre, acolia, aquilia, amilorrea y meconio.
6.2.4 Cmo se recolecta una muestra para la determinacin cuantitativa de grasa? Cmo se realiza esta
determinacin?
6.2.5 Cmo se determinan el urobilingeno y pigmentos biliares en las heces?
6.2.6 Indicar el fundamento de la determinacin de azcares reductores. Investigar la utilidad de las tabletas
Clinitest en esta determinacin.
6.3 Objetivos
38

6.2.1 Examinar una muestra de heces a travs de las pruebas que conforman un examen coprolgico para
conocer la importancia de su correcta evaluacin en la determinacin de alteraciones de los procesos y
rganos involucrados en la digestin.
Muestra de heces (aproximadamente 5 g)

- 3 Tubos de ensaye 13x100
- 5 Portaobjetos
- 1 Gradilla
- 5 Cubreobjetos
- 2 Pipetas Pasteur con bulbo
- 1 Cuadro de papel seda
- 1 Abatelenguas
- 1 Aplicador de madera
- 1 Microscopio
- 1 Tira indicadora de pH
- 1 Tubo de ensaye 15x150

- 1 Gradilla
- 5 Pipetas Pasteur
- 5 Bulbos para Pipeta Pasteur
6.5.4 Reactivos
- Azul de metileno al 0.1%
- Tarjetas Hema screen
- cido actico al 3%
- Tabletas reactivas Clinitest
- Sudn III
- Lugol
- SSF
- Benzal

6.5.1 Obtencin de la muestra
6.5.1.2 Como se mencion anteriormente debe seguirse el rgimen de prueba indicado, evitando el
consumo excesivo de carne pues puede afectarse el resultado de la deteccin de sangre oculta.
6.5.1.2 El paciente debe orinar en la taza del bao.
6.5.1.3 La defecacin se realiza en un cmodo recipiente escrupulosamente limpios, evitando la
contaminacin con sangre (proveniente de fisuras anales o menstruacin) u orina.
6.5.1.4 Existen tubos de plstico con tapas que tienen adaptadas unas cucharillas con las que se pueden
recolectar aproximadamente de 5 a 10 g de heces. En caso de no contar con estos tubos, puede
utilizarse un abatelenguas estril para realizar la recoleccin. Si se trata de paciente peditrico, la
muestra se recoge del paal, pero debe evitarse el uso de talco o pomadas en la piel del beb.
39

6.5.1.5 Las muestras pueden ser examinadas una hora despus de la evacuacin, aunque puede ser
posible refrigerarlas el tiempo que sea indispensable hasta su evaluacin.
6.5.2 Consistencia, apariencia y color

6.5.2.1 Significado clnico. Normalmente, la deposicin debe ser slida, cilndrica y consistente para
mantener esta forma despus de excretada. El rgimen de prueba sin celulosa puede dar lugar a unas
heces algo ms blandas, pero normales. Los estreimientos provocan deposiciones pequeas, duras y a
menudo en bolas. Las falsas diarreas de los constipados se caracterizan por la deposicin mixta,
compacta la primera parte y pastosa al final. En la diarrea son fluidas, pastosas o lquidas. En el clera se
han comparado con la "sopa de arroz", y en la tifoidea con el "pur de guisantes", pero esta ltima es
inconstante en su presentacin. La deposicin de los enfermos con insuficiencia gstrica descompensada
parece una "papilla". En las esteatorreas de origen biliar, pancretico o entrico (espre y diarreas
esprueiformes, celiaqua) es cremosa y pegajosa, como "mantequilla". En la dispepsia de fermentacin son
generalmente pastosas, esponjadas y espumosas.
Normalmente y con dieta mixta, la deposicin es de color pardo o marrn ms o menos oscuro en el
adulto, oscurecindose a medida que pasa el tiempo expuesta al aire. La estercobilina es el pigmento biliar
responsable de este color. Con dieta lctea y en los lactantes es amarillo canario. Con dieta crnica se
hace marrn oscuro. Una alimentacin rica en verduras tie las heces de un color verdoso, mientras que si
preponderan las papas y el pan, las heces se aclaran hacia un marrn amarillento. En la acolia de las
ictericias obstructivas y en la fase aguda de las hepticas son blanco-grisceas. Las "diarreas de
fermentacin" y en las esteatorreas del esprue, insuficiencia pancretica provocan heces amarillentas, con
diferentes matices. El ruibarbo, sen, santonina y otras plantas tien de amarillo las deposiciones. En las
diarreas duodenales se observan de color verde, por la biliverdina. Las heces negras suelen indicar
presencia de sangre proveniente de la parte superior del tracto gastrointestinal que abarca el esfago, el
estmago o la primera parte del intestino delgado. La razn es que la sangre presenta una apariencia
tpica de alquitrn despus de haber estado expuesta a los jugos digestivos del cuerpo. Las heces color
marrn o rojo vivo por lo general sugieren que la sangre proviene de la parte inferior del tracto
gastrointestinal, aunque algunas veces, un sangrado masivo o muy rpido en el estmago causa tambin
heces de color rojo brillante. La sangre en forma de estras en la superficie indica hemorroides o
anormalidades anales. Tambin pueden observarse negruzcas despus de la ingesta de sangre, moras,
mosto de uva, vino tinto o de tomar preparados de carbn, hierro, bismuto, sales de plata, por lo tanto
deben evitarse 3 a 5 das antes de la recoleccin de la muestra.
6.5.2.2 Tcnica.
6.5.2.2.1 Observar la muestra inmediatamente despus que llega al laboratorio.
40

6.5.3 Olor
6.5.3.1 Significado clnico. El olor fecal caracterstico (reportado como sui gneris), vara de acuerdo a la
ingesta, aunque se hace ftido en todos los procesos que cursan con putrefaccin de las protenas
ingeridas o endgenas (lo cual puede ocurrir, aunque no obligadamente, en pacientes con insuficiencia
gstrica, biliar o pancretica, colitis, cncer, etc.), y sobre todo en las melenas, en el cncer de colon y en
el absceso abierto en el intestino grueso. En las "diarreas de fermentacin" con trnsito rpido a partir del
ciego son de olor rancio, agrio. Durante el tratamiento con antibiticos no emiten olor. Las diarreas
urmicas y en las fstulas rectovesicales provocan un olor amoniacal.
6.5.3.2 Tcnica.
6.5.3.2.1 Detectar el olor de las heces en cuanto se abre el frasco donde se recolectaron.
6.5.4 Cantidad
6.5.4.1 Significado clnico. La muestra utilizada en el examen coprolgico no es representativa para
determinar la cantidad. Es necesario que el paciente recoja las heces en un periodo de tres das para
calcular los gramos producidos en 24 h. La cantidad depende fundamentalmente de los residuos
alimenticios procedentes de la dieta, segn su contenido en verduras y frutas, as como de la existencia de
estreimiento o diarrea en el enfermo. Con una alimentacin corriente, se eliminan normalmente entre 150
y 250 g por da de heces. Con un rgimen vegetariano se llega a 370 g, mientras que con un rgimen
crnico se excretan slo unos 60 g. diarios.
En estados patolgicos, como el megacolon o la esteatorrea, pueden excretarse un kilogramo diario, y si
se trata de diarreas agudas graves, pueden eliminarse varios litros diarios. En el estreimiento y tumores
del intestino grueso y recto disminuye la cantidad y el nmero de deposiciones diarias.
6.5.5 pH
6.5.5.1 Significado clnico. Los valores normales van de 7.0 8.0, aunque depende de mltiples factores,
dietticos y endgenos, por lo que este dato es de escaso valor clnico. Si es menor a 7.0 puede tratarse
de una dispepsia fermentativa, mientras que en la diarrea e insuficiencia gstrica es mayor a 8.0.
6.5.5.2 Tcnica
6.5.5.2.1 Humedecer una tira de papel pH, con agua destilada.
6.5.5.2.2 Poner el papel en contacto con las heces en varios puntos de la superficie y tambin el interior,
usando solo un lado de la tira de papel.
6.5.5.2.3 Comparar el lado de la tira de papel pH que no estuvo en contacto con las heces con la escala de
colores de la caja de las tiras para determinar.
6.5.6 Deteccin de sangre oculta por el mtodo del guayaco (HemaScreen)
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6.5.6.1 Fundamento. La prueba se basa en la oxidacin de los compuestos fenlicos presentes en el
guayaco con la produccin de quinonas de color azul. Debido a su similitud con los grupos prostticos de
la peroxidasa, la porcin hematina de la molcula de hemoglobina puede funcionar en una manera
pseudoenzimtica, catalizando la oxidacin del guayaco.
Hemoglobina + Revelador
Oxidacin del guaiaco
6.5.6.2 Significado clnico: En condiciones normales este parmetro es negativo. La prueba positiva es
indicativa de sangre oculta y sangrado masivo del tracto gastrointestinal. La sangre en las heces puede
provenir de cualquier parte a lo largo del tracto intestinal desde la boca hasta el ano. Cuando hay
suficiente sangre como para cambiar la apariencia de las heces, el mdico particularmente querr saber el
color exacto con el fin de tratar de estimar el sitio del sangrado (ver 6.5.2.1). En presencia de carcinoma
gstrico o intestinal, la sangre que proviene de los tumores muchas veces es degradada a porfirina, que no
es detectada por las pruebas qumicas.
6.5.6.3 Tcnica
6.5.6.3.1 Escribir la informacin requerida en la parte frontal de la tapa de la tarjeta Hema-Screen y abrir la
tapa.
6.5.6.3.2 Con un aplicador de madera tomar con un extremo un poco de muestra superficial y con el otro
de la parte interna.
6.5.6.3.3 Distribuir las muestras en cada una de las ventanas y cerrar la tapa con ayuda de la pestaa.
Secar a temperatura ambiente.
6.5.6.3.4 Abrir la parte trasera de la ventana perforada y agregar 2 gotas de revelador en la parte trasera
de las ventanas. La presencia de sangre provoca la formacin de un halo verde-azulado en torno
a las heces.
6.5.7 Determinacin de azcares reductores en heces

6.5.7.1 Fundamento. Esta determinacin debe utilizarse en caso de que la muestra sea de paciente
peditrico y lo ms pronto posible despus de emitida, pues la glucosa y otros azcares son consumidos
por bacterias. Se utilizan las tabletas reactivas Clinitest para la determinacin cuantitativa de azcar en
orina de Bayer, con algunos cambios en la tcnica. El sulfato de cobre de las tabletas Clinitest reacciona
con los azcares reductores (glucosa, fructosa, galactosa y pentosa) presentes en la muestra,
42

reducindolo a xido cuproso. El color resultante va desde azul verdoso a naranja, dependiendo de la
cantidad de azcar presente. El hidrxido de sodio proporciona el medio alcalino necesario para que se
lleve a cabo la reaccin. El calor requerido es proporcionado por la reaccin del hidrxido de sodio con el
agua y con el cido ctrico. El carbonato de sodio y el cido ctrico ayudan a disolver la tableta.
6.5.7.2 Significado clnico. En condiciones normales no deben existir azcares reductores en la muestra,
pues son digeridos y absorbidos en su totalidad en el intestino. Pueden presentarse en intolerancia a la
lactosa, mala digestin por falta de actividad enzimtica, mala absorcin o distrofia de la mucosa intestinal.
6.5.7.3 Tcnica
6.5.7.3.1 Realizar en el recipiente de la muestra una emulsin con un volumen de agua destilada y una
pequea cantidad de la muestra.
6.5.7.3.2 Colocar la emulsin en un tubo de ensaye de 13x100 con ayuda de una pipeta Pasteur. Esta
emulsin se utilizar en las observaciones al microscopio.
6.5.7.3.3 Transferir 15 gotas de la emulsin a un tubo 15x150 y adicionar una tableta de Clinitest sin agitar.
6.5.7.3.4 Esperar 15 segundos y agitar suavemente para mezclar el contenido. PRECAUCIN: evitar el
contacto con la piel, los ojos, las membranas mucosas y la ropa pues la reaccin es exotrmica.
6.5.7.3.5 La lectura se realiza comparando el color del lquido contenido en el tubo con la carta de colores
del manual de uso de las tabletas.
6.5.8 Examen microscpico directo
6.5.8.1 Significado clnico. Si la muestra es observada dentro de la primera hora de la deposicin, puede
evidenciarse la presencia de parsitos vivos o bacterias. Los primeros deben ser negativos, mientras que
las bacterias son escasas.
6.5.8.2. Tcnica
6.5.8.2.1 En un portaobjetos, colocar una gota de la emulsin (ver 6.5.7.3.1) y colocarle un cubreobjetos,
para despus montar la preparacin en el microscopio.
6.5.8.2.2 Enfocar a 10X y realizar la observacin a 40X, buscando parsitos vivos y evaluando la cantidad
de bacterias como escasas, moderadas o abundantes.
6.5.9 Fibras musculares en heces

6.5.9.1 Fundamento. Las fibras musculares en contacto con el cido actico se hinchan, lo cual permite
su visualizacin
6.5.9.2 Significado clnico. Deben ser negativas o escasas. Existe creatorrea en la insuficiencia gstrica
con aquilia, en la insuficiencia pancretica debida a pancreatitis crnica o neoplasias.
43
6.5.9.3 Tcnica
6.5.9.3.1 En un portaobjetos colocar una gota de emulsin de realizada (ver 6.5.7.3.1) y agregarle una
gota de cido actico al 10%, mezclndola con un aplicador de madera.
6.5.9.3.2 Enfocar la preparacin a 10X y observar a 40X, buscando fibras musculares rectangulares con
estriacin cruzada claramente evidente.
6.5.10 Presencia de grasas neutras en heces
6.5.10.1 Fundamento. Las grasas neutras en heces son detectadas por hidrlisis mezclando una o dos
gotas de Sudn III con la muestra, mientras que los cidos grasos y jabones se observan con el azul de
metileno. Esta es una prueba cualitativa, para saber la cantidad de grasa en heces debe de hacerse una
cuantificacin en una muestra de 72 h. La grasa puede reconocerse macroscpicamente siempre y
cuando la excrecin de grasa sea considerable.
6.5.10.2 Significado clnico. La grasa en las heces debe ser negativa o escasa. La esteatorrea en las
deposiciones puede deberse a uno o varios mecanismos como lo son: trnsito acelerado, dficit
enzimtico de su digestin, dficit de absorcin o hipersecrecin endgena. Unas veces predomina la
grasa neutra, sin desdoblar, y en otros casos los cidos grasos y jabones.
6.5.10.3 Tcnica
6.5.10.3.1 En dos portaobjetos colocar una gota de emulsin de realizada en cada uno (ver 6.5.7.3.1) y
agregarle una gota de azul de metileno al primero y de Sudn III al segundo, mezclando las
preparaciones con un aplicador de madera.
6.5.10.3.2 Enfocar a 10X y observar a 40X. En la preparacin de azul de metileno se buscan cidos grasos
o jabones, que se manifiestan como agujas azules. Las grasas neutras se observan en la
preparacin de Sudn III como esferas rojas.
6.5.11 Presencia de restos parasitarios
6.5.11.1 Fundamento. El yodo tie de amarillo los ncleos de quistes.
6.5.11.2 Significado clnico. La presencia de parsitos debe ser negativa. Entre los protozoarios que
afectan a los humanos se encuentran las amebas, los flagelados del tipo de Giardia lamblia y Chilomastix,
y los ciliados, como el Balantidium coli. Pueden aparecer las formas activas o sus quistes. Tambin puede
evidenciarse la presencia de huevos de helmintos. Estos parsitos pueden ocasionar diarrea o
estreimiento, comprometiendo la asimilacin y la digestin.
44
6.5.11.3 Tcnica
6.5.11.3.1 En un portaobjetos colocar una gota de emulsin de realizada en cada uno (ver 6.5.7.3.1) y
agregarle una gota de lugol mezclndolas con un aplicador de madera.
6.5.11.3.2 Enfocar la preparacin a 10X y observar a 40X, buscando restos parasitarios.
6.5.12 Presencia de almidn
6.5.12.1 Fundamento. El yodo tie de caf las vacuolas que contienen glucgeno y de azul los grumos de
almidn en presencia de lugol, debido a una adsorcin o fijacin del yoduro sobre las unidades de glucosa
de la amilasa.
6.5.12.2 Significado clnico. La bsqueda de amilorrea tiene menos inters clnico que el de los dems
pero sirve principalmente para evidenciar un trnsito acelerado a travs del colon. Aparece cuando hay
una ingestin excesiva de fculas con o sin defectos de insalivacin y masticacin. Cuando existe una
Insuficiencia pancretica la coexistencia de esteatorrea y creatorrea en este sndrome global confirma el
diagnstico. La amilorrea puede faltar en pancreopatas evidentes.
6.5.12.3 Tcnica
6.5.12.3.1 Para realizar la bsqueda de vacuolas con glucgeno y restos de almidn, puede utilizarse la
preparacin para la bsqueda de parsitos (ver 6.5.11.3.1)

6.6.1 La suspensin debe regresarse al contenedor original de la muestra, que junto con el resto de la
muestra biolgica depositar en la taza del bao y se accionar la palanca, el contenedor puede
tirarse en el bote de la basura del bao.
6.6.2 Los guantes, papel y dems material desechable contaminado se depositarn en la bolsa de la
basura municipal.
6.6.3 Las cajas petri y portaobjetos con muestra biolgica se depositarn en los contenedores con cloro
En el cuaderno de prcticas que entregarn despus de haber realizado la parte experimental, con base a
los resultados obtenidos (de los exmenes fsico, qumico y microscpico), indicarn si el paciente padece
alguna patologa gastrointestinal, relacionada con una malabsorcin, malasimilacin, maladigestin o de
45

otra ndole como, cncer gstrico, ulcera gstrica etc. Es conveniente que se sugieran otras pruebas que
puedan complementar el probable diagnstico.
6.8 Referencias
-
Garca, P., Lpez, G. (2007). Evaluacin de la absorcin y metabolismo intestinal. Nutricin

Hospitalaria 22(Suppl 2): 5-13
Heisig, D., Threatte, G., Henry, J.B. (2010) Diagnstico de laboratorio de las alteraciones
gastrointestinales y pancreticas. En Henry, J.B. Laboratorio en el diagnstico clnico. Marban:
Madrid
Strasinger, S. DiLorenzo, M. (2008). Anlisis de heces. En autor Anlisis de orina y de los lquidos
corporales. Mdica Panamericana: Buenos Aires
Tortora, G. Derrickson, B. (2007). El aparato digestivo. En autor Principios de anatoma y fisiologa.

Mdica Panamericana: Mxico, D.F
46
PRCTICA No 7.
EQUILIBRIO HIDROELECTROLTICO Y CIDO BASE
Luis A. Gordillo R.
G. Leticia Arellano M.
7.1 Introduccin
Los electrolitos son iones que existen en los lquidos corporales; el metabolismo resulta afectado
por las concentraciones absolutas y relativas de estos electrolitos constituyendo importantes factores de la
osmolalidad, los potenciales de membrana el estado de hidratacin y del pH de los lquidos intracelular
(LIC) y extracelular (LEC) (Singer y Brenner, 2008).
Los electrolitos de importancia clnica son: sodio (principal catin extracelular), potasio (principal
catin intracelular), cloro (principal anin extracelular), fsforo, magnesio y calcio (iones inorgnicos
relacionados con el metabolismo mineral).
Los anlisis para la evaluacin del equilibrio hidroelectroltico y cido-base son los procedimientos
ms comnmente realizados en los laboratorios de qumica clnica; en conjunto, estos anlisis se agrupan
frecuentemente en un perfil metablico bsico.
De manera que es importante conocer la fisiologa de los rganos relacionados con el equilibrio
hidroelectroltico y cido-base, rin y pulmn, para poder interpretar adecuadamente los resultados de los
electrolitos sricos, trmino bajo el cual se han conjuntado al sodio, cloro y potasio. Estos se relacionan
con el equilibrio hidroelectroltico, debido a que mantienen la distribucin del agua entre los lquidos
extracelulares e intracelulares.
Los desrdenes de electrolitos son comunes en pacientes adultos hospitalizados en terapia
intensiva, con frecuencia, secundarios al tratamiento de diferentes alteraciones comunes, pues los
medicamentos utilizados en estos pacientes pueden alterar su absorcin, han sido asociados con
incremento de la morbilidad y mortalidad, la alteracin ms comn es la mielosis pontina, que degenera en
edema cerebral. Estas alteraciones pueden prevenirse si se usa una adecuada administracin intravenosa
de fluidos y nutrientes, por ejemplo, si se observa hiponatremia se contraindica el uso de fluidos
intravenosos hipotnicos, mientras que si hay hipernatremia se administra agua (Singer y Brenner, 2008).
Las alteraciones crnicas de los electrolitos, sumadas a la presencia de otras patologas pueden
ocasionar arritmias atriales. Adems, los electrolitos cumplen una funcin primordial en la hidratacin, de
tal manera que tambin deben monitorearse en aquellos pacientes que se someten a ejercicio extenuante,
dado que debido a su prdida a travs del sudor pueden generar alteraciones.
La determinacin de sodio, cloro y bicarbonato como electrolitos, adems de la evaluacin del CO2
y del pH, permiten evaluar al equilibrio cido-base, con la finalidad de definir el origen, metablico o
respiratorio, de las alteraciones relacionadas (Heitz y Horne, 2005).
47

El mtodo ms utilizado para determinar al sodio, potasio y cloro es el de ion selectivo
(automatizado), que se fundamenta en un mtodo potenciomtrico que emplea electrodos "ion-selectivo".
Estos electrodos consisten en membranas permeables a una determinada especie inica. La diferencia de
potencial que se establece en la interfase de la membrana y la muestra en solucin, es directamente
proporcional al logaritmo de la actividad o concentracin inica segn lo establecido por la ecuacin de
Nernst. Adems de este mtodo, se ha utilizado la flamometra, aunque la necesidad de gas propano ha
disminuido su uso (Heitz y Horne, 2005).
La gasometra es el mtodo de eleccin para evaluar al equilibrio cido-base, a travs de la medicin de
bicarbonato, CO2 y del pH. No obstante, su ejecucin no forma parte de las pruebas de rutina, como lo
puede ser la determinacin de electrolitos sricos; sin embargo, se reconoce su importancia clnica como
apoyo al diagnstico (Heitz y Horne, 2005).

7.2.1 Explicar qu muestras se utilizan para la determinacin de sodio, cloro y potasio.
7.2.2 Investigar el fundamento de la determinacin de sodio, cloro y potasio por flamometra.
7.2.3 Investigar qu es la gasometra? para qu se utiliza? cul es la muestra idnea para realizarla?
7.3 Objetivo
Estudiar el papel de la determinacin de electrolitos en las patologas relacionadas con el equilibrio
hidroelectroltico y cido-base a travs del estudio de los fundamentos de su determinacin y de casos
clnicos que permitan valorar la importancia.
Cuaderno de prcticas
Casos clnicos relacionados con alteraciones cido-base y del equilibrio hidroelectroltico.
7.5.1 Asignar a los equipos uno de los siguientes temas:
Mtodos de cuantificacin de electrolitos
-
Ion selectivo
Flamometra
Gasometra
Casos clnicos
-
Deshidratacin
Acidosis tubular renal
Hiper e hiponatriemia
Hipovolemia
48

-
Cetoacidosis (alcholica y diabtica)
Puede considerarse la opcin de asignar un tema por mesa en caso de que el nmero de equipos y de
sesiones calendarizadas as lo requieran.
7.5.2 Los puntos que deber contener la presentacin son los que se indican en la siguiente tabla:
Mtodo de cuantificacin
Caso clnico
Titulo
Titulo
Fundamento: anotar reacciones qumicas
Introduccin
necesarias.
Caractersticas del (los) paciente(s)
Ejemplo de metodologa: describir pasos,
Metodologa: describir pasos, hacer
hacer diagrama de flujo utilizar los esquemas
diagrama de flujo, utilizar los
necesarios.
esquemas necesarios
Muestra(s) biolgica(s) que se puede(n)
Resultados
emplear.
Discusin (considerando la
Sensibilidad y especificidad.
importancia de la evaluacin de los
Unidades de reporte
electrolitos para estos casos)
Ejemplos de electrolitos que se cuantifiquen
Conclusiones
por ese mtodo

-
Costos
7.5.3 Al trmino de cada exposicin, los alumnos deben responder las dudas que se hayan generado de
parte de los alumnos y de los profesores del grupo, a fin de complementar y resaltar los puntos
importantes de la exposicin.

Debido a que se trata de una prctica terica no habr generacin de residuos.

Este punto no aplica debido a que la prctica se cumple con presentaciones orales que los alumnos
preparan con antelacin.
49

7.8 Referencias
-
Buckley, MS, Leblanc, JM, Cawley, MJ. (2010) Electrolyte disturbances associated with commonly
prescribed medications in the intensive care unit. Crit Care Med 38(6 Suppl):S253-64
Heitz, U., Horne, M. (2005). Fluidos, electrolitos y equilibrio cido-base. Elsevier Mosby: Madrid
Sedlacek, M, Schoolwertj, AC, Remillard, BD. (2006) Electrolyte disturbances in the intensive care
unit. 19(6):496-501
Singer, G., Brenner, B. (2008) Alteraciones de lquidos y electrolitos. En Fauci, A., Braunwald, E.,
Kasper, D., Hauser, S., Longo, D., Jameson, L., Loscalzo, J. Principios de Medicina Interna. Mc
Graw Hill: Mxico.
50
PRCTICA NO. 8
ELECTROLITOS DEL METABOLISMO MINERAL
Luis A. Gordillo R.
8.1 Introduccin
Como la piel, el hueso se forma antes del nacimiento, pero despus se renueva en forma continua
(Tortora, 2007), lo que provoca que el esqueleto sea un rgano metablicamente activo que sufre
remodelacin a lo largo de la vida (Hristova, 2010). Para que se produzca el crecimiento del hueso son
necesarias grandes cantidades de calcio (Ca) y fosforo (P) y pequeas cantidades de flor (F), magnesio
(Mg), hierro (Fe) y manganeso (Mn) (Tortora, 2007). La remodelacin esqueltica puede ser estimulada
por la respuesta hormonal a los cambios de Ca y P.
El Ca es el catin de mayor concentracin en el cuerpo humano, tiene gran importancia en la
mineralizacin del hueso, adems de ser un componente importante en diversos procesos fisiolgicos
como la coagulacin sangunea, la transmisin neuronal, la excitabilidad muscular, por lo cual la
concentracin srica de calcio debe mantenerse entre los 8 mg/dL y los 11 mg/dL. Entre las metodologas
que se emplean para su cuantificacin se encuentra el anlisis colorimtrico con indicadores
metalocrmicos, el marcado fluorescente en unin con EDTA o EGTA y la espectrometra de absorcin
atmica (Hristova, 2010).
El P es el mayor anin intracelular, es esencial en diferentes funciones celulares y fisiolgicas,
adems de participar en vas metablicas de carbohidratos, lpidos y protenas, tambin es responsable de
la produccin y almacenamiento de energa mediante los compuesto fosforilados de alta energa y no
olvidemos que es importante en la estructura sea, la sntesis de colagena y la homeostasis del Ca (Viana,
2012), cerca del 85% de fosfato en adultos se encuentra como sales de fosfato de calcio, el 15% restante
se encuentra ionizado (Tortora, 2007). Los mtodos ms empleados en la determinacin de fosfato
inorgnico son reacciones de est con molibdato de amonio para dar un complejo de fosfomolibadato
(Hristova, 2010).
El catin intracelular ms abundante, pero el segundo en importancia es el Mg, est involucrado en
aproximadamente 300 reacciones enzimticas como cofactor metlico (Viana, 2012). Casi el 54% del Mg
forma parte de la matriz sea como sales de magnesio y el 46% restante se encuentra en forma de iones
Mg2+ en el LEC y el LIC. Es esencial para la actividad neuromuscular, la transmisin sinptica y la funcin
del miocardio, adems de participar en la secrecin de PTH (Tortora, 2007). El mtodo de referencia para
la determinacin de Mg es la espectrometra de absorcin atmica, sin embargo se han utilizado varias
tcnicas analticas (Hristova, 2010).
Los electrolitos relacionados con el metabolismo mineral (fsforo, magnesio y calcio total) pueden
determinarse mediante mtodos espectrofotomtricos usando el rango UV-visible del espectro
electromagntico.
51

8.2.1 Explique la diferencia entre el calcio total y el calcio ionizado.
8.2.2 Investigar las interferencias relacionadas con las determinaciones de calcio, fsforo y magnesio.
8.3 Objetivos
8.3.1 Realizar la determinacin de los electrolitos relacionados con el metabolismo mineral mediante
mtodos espectrofotomtricos para conocer los cuidados en el procedimiento, as como su importancia en
el apoyo al diagnstico.
1 ml de suero obtenido por sistema al vaco de cada integrante del equipo

- 1 gradilla
- 6 tubos de ensaye
- torundas con alcohol (como mnimo, una por alumno)
- 1 ligadura
- 1 sistema al vaco (tubo tapn rojo, aguja, adaptador)

- 2 espectrofotmetro
dispensador
de
puntas
- 10 celdas para el espectrofotmetro
micropipeta
- 1 micropipeta (capacidad mnima 10 L)
- 1 dispensador de puntas amarillas para
- 1 agitador vrtex
micropipeta
- 1 bao mara a 37 C
8.4.4 Reactivos
Equipo para la determinacin de:
-
Fsforo inorgnico
Calcio total
- Magnesio
- Cloro
NOTA: El mtodo a utilizar depender de los reactivos disponibles en el laboratorio.

8.5.1 Obtencin del material biolgico
52
azules
para

NOTA: Para conocer la tcnica, el valor de referencia y las precauciones durante la determinacin de cada
electrolito que se realizar, es necesario consultar el manual de uso de los reactivos disponibles en el
laboratorio en el momento de la prctica.
8.5.2 Determinacin de fsforo inorgnico
8.5.2.1 Fundamento. Existen dos mtodos para la determinacin de fsforo inorgnico:
8.5.2.1.1 Mtodo colorimtrico: determina fsforo inorgnico. El fosfato inorgnico reacciona en medio
cido con el molibdato para dar fosfomolibdato, que es reducido por el cido ascrbico a azul de
molibdeno, desarrollndose el color en medio arsenito/citrato. El arsenito/citrato se combina con el exceso
de molibdato impidiendo su reaccin posterior con el fosfato liberado de los steres lbiles. El color
obtenido se mide entre 620 y 650 nm.
8.5.2.1.2 Mtodo UV: El fsforo inorgnico (Pi) reacciona en medio cido con el molibdato para dar un
complejo fosfomolbdico que se mide espectrofotomtricamente a 340 nm.
8.5.2.2 Significado clnico. El fsforo se encuentra en el organismo formando parte de compuestos
orgnicos (protenas, lpidos, carbohidratos, cidos nucleicos) o como fosfatos inorgnicos, cumpliendo
diversas funciones (transporte de energa, estructura de los tejidos, mantenimiento del pH de los lquidos
corporales). Los tejidos seo y muscular lo contienen como constituyente esencial y es notable su
participacin en la composicin del tejido nervioso. Su concentracin en circulacin est regulada entre
otros factores por los niveles de vitamina D y las glndulas endocrinas, observndose variaciones
fisiolgicas de acuerdo a la edad, ingesta, actividad fsica, embarazo, etc. Existen situaciones patolgicas
en las que se altera este equilibrio, producindose anormalidades en la concentracin de fsforo
circulante. Niveles elevados de fsforo srico son atribuidos a la dieta, metstasis de huesos, alteraciones
en el hgado, alcoholismo, diarreas y vmitos, en el hipoparatiroidismo, mientras que el hiperparatiroidismo
conduce a la situacin contraria. Tambin puede encontrarse hiperfosfatemia por hipervitaminosis D y
diversos trastornos renales, mientras que la hipofosfatemia se relaciona con deficiencias de vitamina D y
defectos en la reabsorcin de fsforo a nivel renal.
8.5.3 Determinacin de magnesio (Mg): mtodo colorimtrico

8.5.3.1 Fundamento. El Mg, en medio alcalino, reacciona con un cromgeno (xylidyl blue o calmagita)
formando un complejo de color prpura cuya intensidad es proporcional a la concentracin de Mg presente
en la muestra. La incorporacin del complejante EGTA al reactivo elimina la interferencia de los iones
calcio.
8.5.3.2 Significado clnico. El Mg es el segundo catin intracelular ms abundante en el organismo
humano despus del potasio, siendo esencial en gran nmero de procesos enzimticos y metablicos. El
53

60% del Mg del organismo se encuentra en los huesos y el resto est repartido entre msculos y otros
tejidos blandos. El Mg cumple un rol muy importante en la fisiologa humana. Participa en el metabolismo
energtico a travs de la activacin del ATP, en la transferencia de fosfatos de alta energa y es el ion
activador de muchas enzimas involucradas en el metabolismo de lpidos, carbohidratos y protenas. El Mg
es un mediador en mecanismos de conduccin y transporte a travs de membranas. Es esencial en la
preservacin de estructuras macromoleculares de DNA, RNA y ribosomas y en la formacin del hueso y el
mantenimiento de la presin osmtica. La hipomagnesemia est muy asociada a la deficiencia de otros
iones como el P, K y Ca. Las causas de hipomagnesemia son mltiples: diarreas crnicas y agudas,
sndromes de mala absorcin, succin nasogstrica prolongada y vmitos, fstulas intestinales y biliares,
deterioro
de
la
conservacin
renal,
diabetes
mellitus
(acidosis
diabtica),
hipertiroidismo,
hiperaldosteronismo primario, alcoholismo crnico, administracin de diurticos o aminoglucsidos,

hiperparatiroidismo. El exceso de Mg puede darse por incorporacin o administracin excesiva de sales de
Mg y en general se asocia a falla renal. Otras patologas asociadas a hipermagnesemia son: hipercalcemia
hipocalcirica, hipotiroidismo, deficiencia de mineralocorticoides, enfermedad de Addison o terapia
intensiva con anticidos. El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos clnicos
y de laboratorio.
8.5.4 Determinacin de calcio total
8.5.4.1 Fundamento. Existen dos mtodos colorimtricos para la determinacin de calcio:
8.5.4.1.1 Mtodo del arsenazo III: El calcio reacciona con arsenazo III (cido 1,8-dihidroxi-3,6-disulfo-2,7naftalenen-bis(azo)-dibenzenarsnico)
dando
un
complejo
de
color
azul
que
se
mide
fotocolorimtricamente a 650 nm.

8.5.4.1.2 Mtodo de o-cresolftalena. El calcio reacciona con la cresolftalen complexona (o-CPC) a pH
11, dando un complejo de adicin color magenta que se mide fotocolorimtricamente a 570 nm.
8.5.4.2 Significado clnico. El calcio es el mineral ms abundante e importante del cuerpo humano, el 99
% se halla en los huesos. Es esencial en la mayora de las reacciones de la coagulacin sangunea y en la
regulacin de la excitabilidad de las fibras musculares. Su concentracin en suero y orina est regulada
por la accin de factores tales como niveles de parathormona, vitamina D y fsforo, observndose
fluctuaciones fisiolgicas debidas a edad, sexo, embarazo, actividad fsica, cambios estacionales (por
accin de la luz solar). La hipercalcemia est relacionada con distintas patologas: hiperparatiroidismo,
neoplasias seas, intoxicaciones con vitamina D, aumento de la retencin renal, osteoporosis, sarcoidosis,
tirotoxicosis. La hipocalcemia se asocia con desrdenes tales como hipoparatiroidismo, deficiencia de
vitamina D, malnutricin o malabsorcin. Una disminucin de los niveles de albmina causa una
disminucin del calcio en suero.
54

8.6.2 Las torundas, los guantes, y los materiales de asepsia y aquellos que se utilicen para limpieza del
rea de trabajo deben desecharse en la basura municipal. En caso de que estos materiales estn
empapados de sangre, depositarlos en la bolsa roja de RPBI.
8.6.3 Los tubos que contengan mezclas reactivas, sangre y muestra biolgica se depositarn en los

En el cuaderno de prcticas se harn los clculos necesarios para obtener el resultado de cada analito
determinado; la discusin se basar en el anlisis de la influencia que tienen los electrolitos determinados
en el impacto del estudio del tejido seo principalmente, sin dejar de considerar que cada uno de ellos
tambin tienen otras funciones que pueden verse alteradas en caso de su aumento o disminucin.
Analizar las ventajas y desventajas de los mtodos de determinacin empleados, haciendo comentarios de
cmo afectaran la calidad en los resultados as como sugerencias para corregir los posibles errores en lo
que se incurri.
En las conclusiones debe considerarse si los objetivos planteados fueron alcanzados, si la prctica otorg
aprendizaje significativo y valor agregado a la formacin del estudiante.
8.8 Referencias
-
Hristova, L.N, Henry, J.B. (2010).Intermediarios metablicos, iones inorgnicos y marcadores

bioqumicos del metabolismo del hueso. En Henry, J.B, Davey, F. Herman, C. McPherson, R.
Pincus, M. Threatte, G. Woods, G. Laboratorio en el diagnostico clnico. Marbn: Madrid
Tortora, G. Derrickson, B. (2007). Homeostasis hidroelectroltica y acido-base. En Tortora, G.

Derrickson, B. Principios de anatoma y fisiologa. Mdica Panamericana: Mxico, D.F
Viana, L. Burgos, M.G.P, Silva, R. (2012). Refeeding sndrome: clinical and nutritional relevance.
ABCD. Arquivos Brasileiros de Cirugia Digestiva. 25(1), 56 59.
Gattineni, J. Baum, M. (2012). Genetic disorders of phosphate regulation. Pediatric Nephrology.

27(9): 1477 1487. DOI: 10.1007/s00467-012-2103-2
55
PRCTICA No 9
DETERMINACION DE HORMONAS
G. Leticia Arellano M.
9.1 Introduccin
El sistema endocrino comprende parte del sistema de comunicacin intra y extracelular encargado
de controlar la reproduccin, diferenciacin sexual, crecimiento, desarrollo, regulacin del metabolismo y
aporte de nutrimentos en un individuo. Este sistema funciona a base de una serie de glndulas
encargadas de elaborar un grupo de mensajeros qumicos llamados hormonas, que interactan con
receptores especficos en las clulas blanco. Aunque no existe relacin anatmica entre las diversas
glndulas endocrinas, existen ciertas relaciones hormonales de interdependencia, por lo que se habla de
ejes hormonales (Kaplan, 2003).
En general la secrecin de una hormona depende de su concentracin o de la concentracin de
algn producto de su accin, en plasma o en el lquido extracelular, es decir, son reguladas por
retroalimentacin. La secrecin hormonal no tiene lugar de forma continua y uniforme, sino pulstil, con
perodos de secrecin (pulsos) y otros de reposo. Las caractersticas de los pulsos pueden variar a lo largo
del da o en diversas circunstancias fisiolgicas o patolgicas. Cuando la secrecin vara ostensiblemente
a lo largo del da se habla del ritmo circadiano (Henry, 2001).
Las anormalidades en la secrecin hormonal son generalmente definidas en trminos de los niveles
sricos de las mismas (aumento o disminucin), o en la demostracin de alteracin directamente en la
glndula en la que se producen. Excesiva cantidad de hormona pude ser secretada por tumores, que la
retroalimentacin no funcione, ingestin deliberada o por indicacin teraputica. En tanto que la
disminucin puede resultar de la carencia en su sntesis o dao en la glndula que la produce (Kaplan,
2003).
Una complicacin en el estudio de la secrecin hormonal es que no se debe exclusivamente al
dao de la glndula productora, sino que como existen ejes de regulacin, el dao en alguna parte del eje
tendr como consecuencia que se daen los de otra. Es por ello generalmente se evalan en perfiles o
conjunto de hormonas que regulan una determinada funcin (Henry, 2001).
El progreso de la endocrinologa ha ido ligado al desarrollo de ensayos que permiten medir las
hormonas. La endocrinologa clnica est limitada a la medicin de la concentracin de las hormonas en
suero u otros fluidos tales como la orina o saliva. En los laboratorios clnicos se tiene acceso a una amplia
variedad de ensayos con diferentes grados de sensibilidad y especificidad que ayudan a interpretar la
severidad del dao, la mayora de estos son inmunoensayos, entre los que se encuentran: el
radioinmunoanlisis (RIA), el anlisis inmunorradiomtrico (IRMA), el inmunoensayo ligado a enzimas
(ELISA), la quimioluminiscencia (QLM) y el fluoroinmunoanlisis incrementado por la disociacin de
lantnidos (DELFIA) (Kaplan, 2003).
56

Para la interpretacin de los ensayos deben ser considerados los siguientes factores: el estado
clnico del paciente, la concentracin de la variable regulada por la hormona, la concentracin de otras
hormonas que participen en el mecanismo de retroalimentacin, la naturaleza pulstil de la secrecin
hormonal (anotar la hora del da a la cual se toma la muestra), el estado de estrs del paciente, as como
la naturaleza qumica de la hormona y su vida media, ya que todos estos factores pueden afectar los
niveles de hormonas (Henry, 2001).
9.2 Actividades complementarias a la prctica
9.2.1
Esquematizar las glndulas que forman parte del sistema endocrino, indicando las hormonas
producidas por cada una de ellas.
9.2.2
Investigar cul es la naturaleza qumica de las hormonas, mencionando un ejemplo de cada una.
9.2.3
Describir un ejemplo de la respuesta que una hormona puede desencadenar cuando se une a su
receptor en la clula blanco.
9.3 Objetivos
9.3 Conocer la importancia clnica de la determinacin de hormonas a travs de la exposicin de los
mtodos empleados en la cuantificacin de las mismas, as como describir sus fundamentos para poder
aplicarlos en el diagnstico de patologas que involucren alteraciones en la secrecin hormonal.
9.4.1 Muestra biolgica
1 ml de suero no hemolizado (slo en caso de que estn disponibles los reactivos necesarios para realizar
las determinaciones en el laboratorio)
9.4.2 Material por equipo y por grupo
Video proyector (para realizar las presentaciones); adems del que se pueda requerir para la prctica.
NOTA. Se notificar con una semana de anticipacin en caso de contar con reactivos para la prctica.
9.5 Metodologa
9.5.1 Obtencin de la muestra biolgica
9.5.2 Cuantificacin de hormonas
La que indique el fabricante, pues depender de la disponibilidad de reactivo al momento de la prctica.
9.5.3 Exposiciones por parte de los alumnos
9.5.3.1 Asignar a cada equipo un mtodo de cuantificacin o un caso clnico.
57

9.5.3.2 El equipo realizar una exposicin oral.
9.5.3.3 Los puntos que deber contener la presentacin son los que se indican en la siguiente tabla:
Mtodo de cuantificacin
Caso clnico
Titulo
Titulo
Fundamento: anotar reacciones
Introduccin
qumicas necesarias.
Caractersticas del (los)
Ejemplo de metodologa: describir

pasos, hacer diagrama de flujo utilizar
paciente(s)
-
Metodologa: describir pasos,
los esquemas necesarios.
hacer diagrama de flujo, utilizar
Muestra(s) biolgica(s) que se
los esquemas necesarios
puede(n) emplear.
Resultados
Sensibilidad y especificidad.
Discusin
Unidades de reporte
Conclusiones
Ejemplos de hormonas que se

cuantifiquen por ese mtodo
Costos
9.5.3.4 Al trmino de cada exposicin, los alumnos deben responder las dudas que se hayan generado de
parte de los alumnos y de los profesores del grupo, a fin de complementar y resaltar los puntos
importantes de la exposicin.

9.6.1 En caso de que se realice la determinacin de hormonas, seguir las indicaciones de la prctica 1 (ver
1.6).
Este punto no aplica debido a que la prctica se cumple con presentaciones orales que los alumnos
presentan.
9.8 Referencias
-
Henry, J. B. (2001) Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods. 20th. W.B.
Saunders Co: U.S.A.
Kaplan, Lawrence A., Pesce, Amadeo J., Kazmierczak, Steven C. (2003). Clinical Chemistry. 4th
Mosby: USA.
58

Anexo A
Mtodo para la obtencin de sangre venosa por sistema de tubo al vaco
A.1 Lavarse correctamente las manos con jabn lquido (preferentemente) y agua.
A.2 Seleccionar e identificar la vena para realizar la puncin:
A.2.1 Vena media baslica
A.2.2 Vena ceflica
A.3 Enroscar la aguja al adaptador del sistema al vaco.
A.4 Preparar el tubo indicado para cada caso:
A.4.1 Tubo con tapn rojo o tapn dorado: Sangre coagulada para obtencin de suero
A.4.2 Tubo con tapn lila: Sangre entera anticoagulada con EDTA
A.5 Ligar el brazo a 5 cm aproximadamente del lugar de puncin.
A.6 Realizar asepsia con una torunda impregnada con alcohol.
A.7 Introducir la aguja de puncin en la vena con una inclinacin de 30 C aproximadamente.
A.8 Colocar el tubo, verificar que la sangre comienza a salir y retirar la ligadura.
A.9 Dejar llenar el tubo y retirarlo, sosteniendo con firmeza el adaptador.
A.10 Retirar la aguja y presionar con una torunda impregnada con alcohol el sitio de la puncin.
A.11 En caso de que el tubo sea para la obtencin de sangre anticoagulada (tapn lila), invertirlo
suavemente 15 veces, para homogenizarla con el anticoagulante.
A.12 Si se trata del tubo de tapn rojo o dorado, debe colocarse durante 10 minutos en bao de agua a 37
C para coagular la muestra; posteriormente se le quita el tapn cubrindose con papel parafilm y se
centrifuga a 2500 rpm/10 min para separar el suero.
A.13 Disponer los residuos generados de la siguiente forma
A.13.1 Depositar la aguja de puncin en el contenedor rojo rgido
A.13.2 Depositar las torundas con alcohol y los tapones de la aguja en el bote de basura municipal.
59

Anexo B
Indicaciones bsicas para realizar las determinaciones colorimtricas
B.1 Rotular tres tubos de ensayo, cada uno como blanco, estndar y muestra con un marcador de tinta
indeleble, no se recomienda utilizar cinta adhesiva tipo masking tape ya que en el momento de la
incubacin puede desprenderse del tubo y ocasionar confusin.
B.2 El tubo marcado como blanco lo realizar el primer equipo que lea en el espectrofotmetro y el tubo
marcado como estndar ser preparado por tres personas del grupo.
B.3 Los tubos se preparan e incuban de acuerdo a la tabla que viene en el manual de uso (inserto) del
reactivo con que se cuente en el momento de la prctica, siguiendo el orden y las cantidades que se
indiquen. Esto se debe a que la forma de preparar los tubos puede cambiar de acuerdo a la marca del
reactivo.
B.4 Ajustar el espectrofotmetro a la longitud de onda indicada en el fundamento y llevar a cero de
absorbancia con el tubo blanco.
B.5 Leer la absorbancia de los 2 tubos restantes (estndar y problema) y realizar el clculo
correspondiente, de acuerdo a la siguiente frmula.
.
.
La concentracin del estndar se proporcionar en el momento de la realizacin de la prctica pues

depende de la determinacin a realizar y la marca del reactivo que se vaya a utilizar.
60

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Manual de Prcticas de Laboratorio de

Anlisis Bioqumicos Clnicos

Manual de Prcticas de Laboratorio de Anlisis Bioqumicos Clnicos Especiales

Vinculacin de las prcticas de laboratorio con el

Objetivo general de la asignatura

Objetivo del manual

Introduccin del manual

Prctica 1. Elaboracin de cartas control

Prctica 2. Obtencin de valores de referencia

Prctica 3. Espermatobioscopa directa

Prctica 4. Evaluacin del lquido cefalorraqudeo

Prctica 5. Diferenciacin de exudados y

Prctica 7. Equilibrio hidroelectroltico y cido-base 47

Prctica 8. Determinacin de hormonas

Manual de Prcticas de Laboratorio de Anlisis Bioqumicos Clnicos Especiales

Manual de Prcticas de Laboratorio de Anlisis Bioqumicos Clnicos Especiales

VINCULACIN DE LAS PRCTICAS DE LABORATORIO CON EL CONTENIDO DEL

y Prctica con la que se Contenido que permite la vinculacin

de En la teora se abordan los conceptos bsicos del

control de calidad interno (CCI) del laboratorio clnico;

en la prctica se elaboran cartas control y se conocen

de Como parte de la calidad que ofrece cada laboratorio,

considerando la poblacin a la que brinda servicio.

En la unidad se aborda la anatoma y fisiologa y

espermatobioscopa directa, estudio con el que se

del En la teora se estudia el proceso de formacin del

lquido cefalorraqudeo y se resalta la importancia de

su evaluacin en patologas relacionadas con el

de En la teora se explica la funcin de los lquidos

de estos lquidos corporales; en el laboratorio se

identificar el origen del derrame.

En la unidad se conocen la anatoma, fisiologa y

alteraciones relacionadas con el tracto gastrointestinal;

en la prctica se realiza el estudio de las heces para

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Tanto en la teora como en la prctica se describe la

y funcin de los electrolitos; en el laboratorio se realiza

del metabolismo mineral y se explica el fundamento de la

determinacin de los electrolitos relacionados con la

polarizacin de las membranas biolgicas.

En la teora se abordan la funcin de las hormonas de

OBJETIVO DEL MANUAL

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INTRODUCCIN DEL MANUAL

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1) Este reglamento aplicar para personal acadmico, alumnos y laboratoristas.

5) En todo momento deber mostrarse una conducta adecuada en el rea de trabajo.

6) Queda prohibido en los laboratorios:

entendiendo por residuo peligroso: elementos, sustancias, compuestos, desechos o mezclas de

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8) Dentro del laboratorio no se permite el uso de telfonos celulares, reproductores de sonido o

9) El acceso al laboratorio se permitir nicamente cuando est presente un profesor.

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El Laboratorio Clnico es el establecimiento pblico, social y privado, legalmente establecido,

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1.4 Materiales, equipos y reactivos

1.4.2 Material por equipo

- papel para limpiar celdas (que no deje residuos)

Carta control de _analito_ Mes _____ nivel del control