UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad
del Per,
DECANA
DE AMRICA)
CTEDRA DE TOXICOLOGA
Y QUIMICA
LEGAL
-TOXICOLOGA
GRUPO: MARTES
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
EAP FARMACIA Y BIOQUMICA

Ao de la Promocin de la Industria Responsable y del Compromiso Climtico

CTEDRA DE TOXICOLOGA Y QUIMICA LEGAL
TOXICOLOGA
GRUPO: MARTES

IDENTIFICACIN DE INSECTICIDAS RGANO FOSFORADOS, RGANO

CLORADOS Y RGANO CARBMICOS

Fecha Prctica: 19-05-2014; Hora: 10 a.m. - 2 p.m.

INTEGRANTES

HUAYHUA ABREG, Jhonny

10040072
HERNNDEZ LOLI, Mara
09040096
HUERTA CRUZ, Evelin
09040064
TRUJILLO DOMINGUEZ, John 10040128
VALLE GARCA, Alex
VSQUEZ GONZALES, Alan
07040001
PROFESOR:
LIZANO GUTIERREZ, JESS VCTOR
Ao Acadmico: 5to Ao
SEMESTRE:
2014-I

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CLORADOS Y RGANO CARBMICOS

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INTRODUCCION

Segn la OMS, un pesticida o plaguicida es cualquier sustancia o

mezclas de sustancias, de carcter orgnico o inorgnico, que est
destinada a combatir insectos, caros, roedores y otras especies
indeseables de plantas y animales que son perjudiciales para el hombre
o que interfieren de cualquier otra forma en la produccin, elaboracin,
almacenamiento, transporte o comercializacin de alimentos,
produccin de alimentos, productos agrcolas, madera y productos de
madera o alimentos para animales, tambin aquellos que pueden
administrarse a los animales para combatir insectos arcnidos u otras
plagas en o sobre sus cuerpos.

CLASIFICACION: Segn la especie a combatir

MINERALES

INSECTICID ORGANICOS DE
SINTESIS
AS
MINERALES
A BASE DE ACEITES
MINERALES

Compuestos arsenicales
Compuestos fluorados
Azufre
Derivados del selenio
Organofosforados
Organoclorados
Carbamatos
Aceites antracnicos
Aceites de petrleo

DE ORIGEN
VEGETAL

Nicotina
Piretrina
Rotenona

MINERALES

Sales de NH4+, Ca++, Cu++, Fe+++,

Mg++, K+, Na+, en forma de
sulfatos, nitratos, cloruros,
cloratos.

HERBICIDAS
ORGANICOS

Fitohormonas
Derivados de la urea
Triazinas y Diazinas
Derivados de los fenil sustituidos y
las quinoxalinas
Derivados de la oxiquinolena
Derivados de las tiadizinas y
tiadiazoles

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MINERALES

Sales de cobre
Compuestos arsenicales
Aceites minerales

ORGANOMETALICO
FUNGUICID
Derivados rganomercuriales
S
AS
Carbamatos y ditiocarbamatos
Derivados del benceno
ORGANICOS
Amicidas
Benzonitrilos
RODENTICI
DAS

Derivados
cumarnicos
Inorgnicos

Warfarinas
Sales de talio

El trmino plaguicida incluye tambin los siguientes tipos de sustancias:

reguladores del crecimiento de las plantas, defoliantes, desecantes,
agentes para reducir la densidad de la fruta, agentes para evitar la cada
prematura de la fruta y sustancias aplicadas a los cultivos antes o
despus de la cosecha, para proteger el producto contra el deterioro,
durante el almacenamiento y transporte.
Desde el punto de vista de la toxicologa, es importante sealar que las
formulaciones de plaguicidas adems del principio activo incluyen
sustancias transportadoras, diluyentes como agua o solventes
orgnicos, aditivos e impurezas, que pueden tener potencial txico por si
mismas.
El anlisis de plaguicidas puede clasificarse en diversas reas:
-Forense
-Diagnstico de urgencia
-Control de poblaciones expuestas y no expuestas.
-Contaminacin ambiental.
Si el plaguicida fue causa de muerte, estar en alta concentracin, al
igual que en una intoxicacin aguda grave. En las dos ltimas reas se
trabaja con muestras con niveles muy bajos de plaguicidas (menores de
0,1 ppm), se habla de residuos de plaguicidas. De todos ellos
estudiaremos los insecticidas organoclorados, organofosforados y
carbamatos, por ser los ms utilizados actualmente y producir efectos
txicos muy caractersticos.
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OBJETIVOS
Comprender y poner en prctica
Bioseguridad.

las normas de

Conocer el efecto toxicolgico de las distintas formas de

los plaguicidas en el organismo humano.
Identificacin De Insecticidas rgano Fosforados, rgano
Clorados Y rgano Carbmicos mediante reacciones
especficas y cromatografa en capa fina.

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MARCO TERICO
PROPIEDADES FISICOQUMICAS
Estas propiedades son las determinantes de su cintica ambiental. El
aire, el agua, el suelo y los alimentos retienen gran parte de los
pesticidas y stos llegarn a los seres vivos.
Constituye un problema actual su persistencia en el medio ambiente, su
concentracin y transformacin en organismos vivos.
ORGANOFOSFORAD
ORGANOCLORADO
O
Estabilidad

Muy Baja

Elevada

Persistencia

Baja

Alta

Efectos
bioacumulativo

No Posee

Muy Grande

Toxicidad aguda

Alta

Baja

Solubilidad en
agua

Alta

Baja

Hidrofobicidad

Bajo

Alto

Costo

Alto

Bajo

Selectividad

Alta

Baja

ETIOLOGIA: Las intoxicaciones accidentales son generalmente de

origen profesional, afectando al los obreros que trabajan en la
preparacin de los insecticidas o a los peones rurales durante o
inmediatamente despus de la aplicacin en cultivos.
Las intoxicaciones alimentarias se deben al consumo de alimentos
tratados impropiamente con pesticidas. Las intoxicaciones casuales se
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deben generalmente a confusiones, manejo imprudente y falta de

vigilancia de los nios.
Las intoxicaciones suicidas y criminales se han hecho ms frecuentes
debido a su alta toxicidad y fcil adquisicin.

1.-PLAGUICIDAS ORGANOCLORADOS
Desde el punto de vista estructural, constituyen un grupo de sustancias,
muy heterogneo, teniendo en comn la presencia de estructuras
monocclicas o policclicas con distinto nmero de sustituyentes cloro.
Incluyen varios grupos:
a) Grupo de los Ciclodienos:Aldrn y su epxido, el Dieldrn, Mirex
b) Grupo del DDT (dicloro-difenil-tricloroetano): p-p-DDT, o-p-DDT, p-p
-Metoxiclor.
c) Grupo del Hexaclorociclohexano (HCH) y Hexaclorobenceno(HCB):
HCH, -HCH, HCB.
d) Grupo de los indenos clorados: hepatacloro, a-Clordano.
e) Grupo de los terpenos clorados: Toxafeno.

Absorcin
Por va digestiva principalmente; a travs de la piel cuando estn en
solventes lipdicos y a travs de la va respiratoria por su aplicacin en
forma de pulverizaciones.
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Mecanismo de accin
Poseen accin neurotropa, aunque no se conoce bien el mecanismo
sobre el sistema nervioso. A largo plazo, inducen las enzimas
microsomales hepticas. Son inductores en cantidades residuales, del
orden de las que pueden estar acumuladas en el tejido adiposo.
En el hombre, al igual que en el medio ambiente, se degradan
lentamente y se pudo determinar que tienen una gran afinidad por los
tejidos grasos. Estas cantidades acumuladas en grasas preocupan, pues
por ejemplo, en el caso de adelgazamiento brusco pasan a la circulacin
general y producen sntomas de intoxicacin.
Preocupa tambin, porque pasan en cantidades considerables a la grasa
de la leche. Los recin nacidos se pueden ir contaminando, debido a los
residuos de pesticida presentes en su alimento natural.
Muestras
La sangre es la muestra ms adecuada para la bsqueda de plaguicidas
organoclorados ya que por su gran liposolubilidad rara vez aparecen en
orina. Se colectan 8-10 ml de sangre en tubo de centrfuga heparinizado.
Jugo gstrico: evitar el agregado de carbn vegetal . Conservar en la
heladera.
Distintos tipos de alimentos, principalmente de origen vegetal,
productos crneos y aguas. Los alimentos son considerados como la
principal va de acceso de los pesticidas organoclorados al organismo
(80-90% del ingreso diario de plaguicidas segn Kaphalia, 1985)

2.- PLAGUICIDAS ORGANOFOSFORADOS

Son sustancias biodegradables en la naturaleza, sin tendencia a
acumularse en las grasas del organismo, pero con gran actividad
neurotxica que va a producir intoxicaciones agudas de gravedad. Son
los insecticidas, junto con los carbamatos y piretroides, ms
ampliamente utilizados en la actualidad.
Sus estructuras qumicas derivan de la sustitucin por restos orgnicos
en el fsforo pentavalente. Pueden clasificarse como:
a) Derivados de la molcula del cido fosfrico. Si los dos primeros
oxhidrilos se esterifican con radicales alqulicos se obtienen los alquilfosfatos o alquil-pirofosfatos (ejemplo: dichlorvos) . Si dichos oxhidrilos
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se sustituyen por amidas se obtienen las fosforamidas (ejemplos:

metamidofs, acefato).
b) Derivados de la molcula del cido fosforotinico: De este cido
derivarn a su vez numerosos steres tiofosfricos (ejemplo: paratin).
c) Derivados del cido fosforotiolotinico. (ejemplo: malatin).
d) Derivados del cido fosforotilico (ejemplos: malaoxn, demeton-Smetil.).

Mecanismo de accin
Los insecticidas organofosforados actan combinndose con gran
afinidad con cierto tipo de esterasas, con la consecuencia de su
inactivacin. Esta reaccin, en el contexto de la fisiologa de sus
funciones, es irrevesible. Los oxofosforados (enlaces P=O) son
fuertemente inhibidores, mientras que los tiofosforados (P=S) no son
fuertemente inhibidores y necesitarn de una biotransformacin a la
forma oxo para actuar como inhibidores.
En particular, la inhibicin de las colinesterasas es la que va a derivar en
los sntomas y signos de la intoxicacin aguda. El papel fisiolgico de la
colinesterasa consiste en la hidrlisis de la acetilcolina, mediador
qumico en la transmisin del impulso nervioso. Se acumulan as
grandes cantidades de acetilcolina en las sinapsis.

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Existen dos tipos de colinesterasas: la colinesterasa verdadera,

presente en eritrocitos y tejido nervioso y la pseudocolinesterasa
presente en suero o plasma.
Ambas enzimas son inhibidas por los compuestos organofosforados,
pero la eritrocitaria es la que mejor refleja el estado de inhibicin de la
colinesterasa del sistema nervioso, por lo que se utiliza para evaluar el
estado de intoxicacin aguda de un paciente. Por otro lado, la
colinesterasa plasmtica o pseudocolinesterasa es la que ms tarda en
regenerarse, por lo que se utiliza en la evaluacin de la exposicin
crnica a organofosforados.

Absorcin:
Los steres fosforados se absorben fcilmente a travs de la piel y ms
rpidamente por va digestiva. La absorcin respiratoria es casi
instantnea.
Muestras
La muestra ms utilizada para la determinacin de organofosforados y
sus metabolitos es orina de 24 hrs, colectada en envase de vidrio y
conservada en heladera.
Tambin, como ndice de la intoxicacin, puede determinarse la
actividad de las colinesterasas sanguneas: plasmtica o eritrocitaria.
La determinacin de residuos se realiza, por un lado, en distintos tipos
de alimentos, principalmente de origen vegetal, productos crneos y
aguas de bebida, y por otro lado en muestras ambientales como aguas
superficiales y suelos.
3.-CARBAMATOS
Forman parte de una gran familia de plaguicidas entre los que se hallan
herbicidas, fungicidas e insecticidas. Todos ellos derivan del cido
carbmico:

Se los divide en tres grupos:

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1-N-metil carbamatos: uno de los hidrgenos del grupo amino es

reemplazado por un grupo metilo (ejemplos: Aldicarb, Carbaryl,
Carbofuran).
2-N,N, dimetil Carbamato: ambos hidrgenos del grupo amino son
reemplazados por grupos metilos (ejemplos: Isolan, Pirolan).
3-N-fenil Carbamatos: un grupo fenilo sustituye a uno de los
hidrgenos del grupo amino.
Mecanismo de accin
Es equivalente al mecanismo de accin de los organofosforados,
unindose a las colinesterasas e inactivndolas. Pero sta unin es
reversible espontneamente en menos de una hora, de manera que en
el curso de una intoxicacin aguda por carbamatos se manifiestan los
mismos signos y sntomas de la intoxicacin por organofosforados pero
con un curso ms rpido hacia la recuperacin

Muestras
Se los encuentra en orina de 24 horas. Tambin se los halla en distintos
tipos de alimentos contaminados, principalmente de origen vegetal.

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FOSFORADOS, RGANO CLORADOS Y RGANO
CARBMICOS

I.

Parte Experimental
I.I. REACTIVOS y MATERIALES
1. Muestra problema previo tratamiento (extraccin
directa con benceno y hexano)
2. Reactivos de Identificacin:
Cloruro de Paladio
Tricloruro de Hierro
Nitrato de Plata amoniacal
P-dimetilaminobenzaldehdo al 1% en etanol
cido sulfrico
Hidrxido de Sodio (reaccin de Folidol)
3. Cromatografa en capa fina:
Soporte: Silicagel-G (ms especificidad)
Sistema solvente: Benceno: metanol (6:1)
4. Reveladores:
Verde brillante al 0.5% en acetona (alta
sensibilidad)

REACCIONES DE IDENTIFICACIN
1.-Reaccin general del paration con el p- nitrofenol
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Fundamento
La unin del paraoxon con la acetilcolinesterasa hace que este libere
metabolitos como el p-nitrofenol lo que nos permite realizar la identificacin
preliminar de compuestos organofosforados.
El p- nitrofenol es incoloro en disolucin acida, pero se vuelve de intenso color
amarillo cuando la disolucin se alcaliniza. Esto debido a que la molcula
original no ionizada es incolora, pero el ion negativo correspondiente es
coloreado. En disolucin alcalina el exceso de base separa al ion H+ de la
molcula y la disolucin se vuelve amarilla a causa del anin liberado.
Reaccin qumica

Mtodo operatorio
a.Adicionar en la capsula de porcelana I Gta. MP (Orina)
b. Luego agregar 1mL NaOH 10%
c. Llevar a B.M. x 5minutos
Resultado
Rx. Positiva para ORGANOFOSFORADOS si:

COLORACIN AMARILLO INTENSO

Conclusin
Posible presencia de compuestos organofosforados

1. CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

2.1 Fundamento
Los plaguicidas organofosforados a separar se desplazan en una
direccin predeterminada por medio de un material slido insoluble
inorgnico: Silicagel G 60 como fase estacionaria y la fase mvil que en
este caso es la mezcla de hexano: acetona: alcohol isoproplico los
cuales van a migrar a travs de la superficie de la placa.

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La fase mvil va arrastrar a los plaguicidas organofosforados por un

proceso de reparto mltiple que se da en toda sustancia de mediana o
baja polaridad como es el caso de los plaguicidas organofosforados.

2.2 Sensibilidad del mtodo de cromatografa de capa fina (CCF):

Es de 0.5 microgramos
2.3 CROMATOGRAFA Y RELEVADO DE LOS ORGANOFOSFORADOS
Revelado con verde brillante 0.5%

Mtodo de deteccin especfico para cidos carboxlicos.

Cloruro de paladio 1% en HCl 5%
La principal aplicacin del paladio es su uso como catalizador el cual
acta permitiendo una reaccin de acoplamiento C-C. El primer paso
consiste en la activacin del enlace C-X por la insercin de paladio,
seguido de la coordinacin al doble enlace (al anillo en caso de arilos
metlicos) y la formacin del enlace C(sp2)-C(sp2) con la consiguiente
salida del tomo de paladio.

Revelado con tricloruro frrico (FeCl3)

Vapores de bromo permite la bromacin de compuestos enlicos y
fenlicos

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Se logra observar una coloracin de va desde el amarillo hasta rojo.

El exceso de bromo se elimina con acido sulfosalicilico.
El cloruro frrico permite la formacin de quelatos

2.4

CROMATOGRAFA Y REVELADO DE LOS CARBMICOS

REVELADO CON P-DIMETILAMINOBENZALDEHDO

Reactivo de visualizacin que permite la identificacin de sulfonamida.

2.5 Mtodo operatorio
Comenzamos primero diluyendo nuestro vial R3, con residuos de txicos
neutros, con 1 ml de metanol.
Luego pasamos a sembrar en las placas preparas para la
cromatografa, a la altura de la siembra correspondiente al
estndar.

Despus de ello pasamos a incubar las placas sembradas en la cmara de

Sembrado
en todas
separacin para cromatografa
de capa
fina, las
hasta que suba totalmente
placas
(aproximadamente 45 minutos a 1 hora).
- Soporte: Silicagel g, coadyuvante yeso.
- S. Solvente: benceno: metanol en una

proporcin de 6:1
Al haber transcurrido el tiempo, pasamos a sacar cada una de las placas y
empleamos los reveladores para poder comprobar la presencia o no de los
plaguicidas organofosforados.
a) Revelador verde brillante 0.5% en acetona: (muy sensible)

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T.O. Para ello rociamos la placa con cloruro de verde brillante y luego

lo exponemos a
los vapores de bromo.

Aadido
de
revelador
verde
brillante.

Placas despus del

tiempo de incubacin
Llevado
nuevamente a la
cmara.
Exposicin de vapores de
bromo

b) Revelador de cloruro de paladio (ClPd) 1% en cido clorhdrico

(HCl) 1%:
T.O. Obtenida nuestra placa, rociamos la placa con el cloruro de
paladio y vemos lo
sucedido.

Rociamos el cloruro de paladio

c) Revelador de cloruro hierro en etanol

T.O. Sacamos la placa sembrada transcurrido el tiempo, y exponemos
a los vapores de
bromo durante 10 minutos y se forman machas marrones/naranja.
Luego de ello, rociamos cido sulfoclico 1% en etanol (elimina el
exceso de bromo en la

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placa y dejamos en reposo durante 10 minutos. Pasado el tiempo,

rociamos con
tricloruro de hierro (Cl3Fe) 0.1% en etanol.

Placas despus

Exposicin de vapores de

del tiempo de

bromo

incubacin
Nuevamente se
lleva a la
cmara.

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V.

BIBLIOGRAFIA

Fernndez R. Marcha toxicolgica de urgencia.Argentina.2007.Disponible

en:http://www.bvsde.paho.org/bvstox/e/fulltext/marcha_toxicologica.pdf

Giannuzzi L. Manual de Tcnicas Analticas en el Laboratorio de Toxicologa.

Argentina. Disponible en: http://www.slideshare.net/adnestelamartin/captulo-37409408.

MILLA, Manuel; PALOMINO, Rodolfo. Niveles de colinesterasa serica en

agricultura de la localidad de Coropongo(Peru) y determinacion de residuo de
plaguicidas inhibidores de la acetilcolinesterasa en frutas y hortalizas cultivadas.
Tesis para optar el titulo. Lima. UNMSM.2002. Disponible en:

http://sisbib.unmsm.edu.pe/bibvirtualdata/tesis/salud/Milla_C_O/t_completo.pdf

Reactivos de visualizacin en cromatografa de capa fina. Disponible en:

http://lcso.epfl.ch/files/content/sites/lcso/files/load/TLC_Stains.pdf

HERNANDEZ, F. Y BELTRAN,J. Analisis de residuos plaguicidas en aguas.

Disponible en;
http://abe.ufl.edu/carpena/files/pdf/zona_no_saturada/avances_en_la_inv
estigacion_v2/c23_p321_356.pdf

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