Ecotoxicologa Aislamiento de Txicos Orgnicos Fijos

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UNTECS
CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERA AMBIENTAL

Asignatura: ECOTOXICOLOGA
Laboratorio No.:12
Tema: Determinacin de Plaguicidas
Nombre del profesor:
APESTEGUA INFANTES JOS ALFONSO
Integrantes del Grupo:
- Aquio Poma Carla Paola
- Coria Benavides Kassandra Geraldine
- Falconi Castilla Cristhian
- Jara Jara Hans
- Moreno Fuentes Denisse
- Ramos Parco Jonatan
- Utane Choque Carlos
- Marcos Rivera Carlos Alfonso
- Huisacayna Arias Miguel ngel
- Nez Lpez Manuel


Carrera: Ingeniera Ambiental
Horario: viernes de 8:30 10:10
Fecha: 04 -07-2014




Ecotoxicologa Aislamiento de Txicos Orgnicos Fijos

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1.- INTRODUCCIN
Sabemos por nuestra vida universitaria que los plaguicidas han sido utilizados
por ms de 50 aos, proporcionando tratamientos econmicos y efectivos para
un gran nmero de cultivos. Sin embargo algunos residuos de estos
plaguicisdas persisten en los alimentos y constituyen un riesgo para la salud
humana.
Los plaguicidas o pesticidas son sustancias destinadas a matar, repeler, atraer,
regular o interrumpir el crecimiento de algunos seres vivos considerados como
plaga. Pueden ser producidos mediante sntesis qumica, biolgica o ser
productos naturales. Entre los plaguicidas ms comunes estn los
organofosforados y organoclorados adems de los piretroides.
Es por ello que se ha hecho este informe para la determinacin de estos
plaguicidas a travs de reveladores y utilizando una cuba cromatogrfica
viendo su fase estacionaria.

2.- RESUMEN
En el presente informe se determinaremos la presencia de plaguicidas
organoclorados y organofosforados utilizando el mtodo de cromatografa de
capa fina.
Este mtodo se realiza normalmente de modo ascendente, esto es, al permitir
que un eluyente ascienda por una placa casi en vertical, por la accin de la
capilaridad. La cromatografa se realiza en una cubeta. Para conseguir la
mxima saturacin posible de la atmsfera de la cmara, las paredes se
impregnan del eluyente.
Luego del proceso a realizar calcularemos los valores de Rf de varias
sustancias y correlacionaremos a la seleccin adecuada del eluyente y
deduciendo la relacin que existe entre la polaridad de la sustancias que se
analizan y la de los eluyentes utilizados.
3.- MARCO TERICO
Plaguicidas
La misin de los plaguicidas es abatir o, al menos controlar todo tipo de plagas.
Se encuentran numerosas aplicaciones tanto industriales para impregnar la
madera, como agrcolas para el control de insectos, maleza, hongos y
roedores.
El empleo de plaguicidas en la agricultura se inici hace algo ms de cien aos
y su consumo ha ido aumentando, sobre todo cuando en 1939 se descubre las
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propiedades insecticidas del DDT (C14 H9 C15). El comienzo de los
plaguicidas sintticos comenz durante la poca de 1940 y favoreci el
incremento de la produccin alimentaria, tambin contribuyo a la salud humana
a travs del control de insectos vectores de enfermedades, luego a partir de
1960 comenzaron a manifestarse sus impactos adversos al medio ambiente a
la salud humana.
Los plaguicidas son el grupo ms amplio de qumicos potencialmente txicos
que se han introducido voluntariamente al medio ambiente, e incluyen
insecticidas, herbicidas, fungicidas, entre otros.
Clasificacin
Los plaguicidas se pueden clasificar segn los siguientes criterios:
Concentracin: ingrediente activo, plaguicidas tcnico, plaguicida
formulado
Organismos que controlan: insecticidas, acaricidas, bactericidas,
rodenticidas, etc.
Modos de accin: de contacto, repelentes, de ingestin, defoliantes,
fumigantes.
Composicin qumica: organoclorados, organofosforados, triazinas,
compuestos de cobre, piretroides, organuzufrados.
Presentacin de formulaciones: solidos, liquidos y gases
Uso al que se destinan: agrcola, urbano, pecuario, industrial, forestal,
domstico.
Los principales productos utilizados como plaguicidas de inters en la
toxicologa:
Insecticidas Organoclorados, organofosforados, carbamatos,
piretrinas, nicotina
Herbicidas Triclorodiclorofenoxil herbicidas, derivados de la
rea, carbamatos
Fungicidas Carbamatos, organofosforados, captano, captofol,
pentaclorofenol, sulfuro elemental
Rodenticidas Cumarinicos, anticoagulantes de accin corta,
fosforo, cianuro, estricnina
Nematocidas Bromuro y cloruro de metilo, fosfina.

Compuestos organofosforados
Los organofosforados son sustancias orgnicas de sntesis, conformadas por
un tomo de fsforo unido a 4 tomos de oxgeno o en algunas sustancias a 3
de oxgeno y uno de azufre. Una de las uniones fsforo-oxgeno es bastante
lbil y el fsforo liberado de este grupo libre se asocia a la acetilcolinesterasa
inhibiendo la transmisin nerviosa y provocando la muerte. Sus caractersticas
principales son su alta toxicidad, su baja estabilidad qumica y su nula
acumulacin en los tejidos, caracterstica sta que lo posiciona en ventaja con
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respecto a los organoclorados de baja degradabilidad y gran bioacumulacin.
Se trata de compuestos, en general, marcadamente apolares, lo que significa
que desde el punto de vista qumico la mayora son escasamente solubles en
agua, aunque con grandes diferencias de un compuesto a otro, y desde el
punto de vista biolgico tienden a disolverse en grasas. Por tal motivo, la piel,
donde se encuentra una importante capa de tejido con elevado contenido en
lpidos, puede constituirse en una importante va de entrada. La estabilidad de
los organofosforados depende del pH del medio; a pH fuertemente alcalino se
descomponen, lo que puede ser utilizado para destruirlos.
Exposicin
Destaca el personal de empresas dedicadas a la aplicacin de plaguicidas de
tipo agrcola, de tipo ambiental (en interior de locales), trabajadores de
empresas agrcolas que manipulan o aplican tales productos; en la industria
alimentaria; trabajadores de unidades de salud pblica, centros veterinarios;
pilotos y personal auxiliar que interviene en las aplicaciones agrcolas area,
trabajadores de aplicaciones forestales y de tratamientos estructurales de
edificios; trabajadores de la desinfeccin de barcos o grandes almacenes, y
desde luego, los que se dedican a la fabricacin, formulacin y/o envasado de
organofosforados, es decir, su produccin industrial.
Aun sin manipular ni utilizar estos productos en ningn momento, puede estar
laboralmente expuesto de manera accidental (por circunstancias que no son
inherentes a la propia actividad y como consecuencia de tratamientos
incorrectos realizados por terceras personas): el personal que trabaja en
centros hospitalarios, al que se considera como grupo de alto riesgo de
exposicin por las frecuentes y programadas aplicaciones de insecticidas, el
de hostelera, oficinas, centros docentes, recreativos, residencias de ancianos,
entre otros.
As mismo, pueden estar expuestas las personas que a tales centros acuden
como pacientes (enfermos), simples ciudadanos, nios, adultos o ancianos,
muchos de ellos ms susceptibles por sus caractersticas o condiciones de
salud que la mayora de la poblacin general, lo que constituye un problema de
salud pblica adicional al que debe prestarse especialsima atencin.
Vas de exposicin
En el mbito laboral, la exposicin puede tener lugar por las tres vas clsicas:
digestiva, inhalatoria y drmica. La va digestiva directa se suele considerar
como accidental (ingestin de una solucin por error o con fines suicidas, o de
alimentos directa o indirectamente contaminados). Deber, por tanto, evitarse
en todo momento el contacto de alimentos (y su almacenamiento) con tales
productos, as como comer, beber o fumar durante su manipulacin o sin
lavarse previamente las manos y la cara.
Organoclorados
Los organoclorados conforman un grupo de pesticidas artificiales desarrollados
principalmente para controlar las poblaciones de insectos plaga. Su origen se
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remonta a la fabricacin del DDT (diclorodifeniltricloroetano) en 1943. De ah en
adelante y por muchas dcadas, dicho clorado fue un arma importante en la
lucha qumica y una casi ineludible en el control del
mosquito Anopheles transmisor de la malaria.
Los organoclorados son, en esencia, hidrocarburos con alto contenido de
tomos de cloro y fueron los insecticidas ms criticados por los grupos
ecologistas. El DDT fue casi un smbolo de veneno qumico, debido a su difcil
degradacin y su gran acumulacin en el tejido animal, caracterstica sta que
comparte con los dems integrantes del grupo.
Existen casos de resistencia de insectos a organoclorados, principalmente al
DDT, dado el gran uso que se ha hecho del mismo. Como en el caso de los
carbamatos y los organofosforados, es recomendable un uso moderado de
estos productos.
Aldrn, clordano, dieldrn, endrn, heptacloro, HCH (hexaclorociclohexano),
lindano y toxafeno son organoclorados integrantes de la llamada docena
sucia que engloba a aquellos pesticidas que ms problemas ambientales han
generado. Actualmente los organoclorados estn prohibidos en Argentina y en
casi todo el mundo y para casi todos los usos, debido a sus problemas de
acumulacin, a su alta estabilidad qumica, su gran estabilidad a la luz y su
difcil degradacin biolgica. En algunos casos inclusive, se ha comprobado
que son carcinognicos y mutagnicos.
Lamentablemente existe un uso clandestino de los organoclorados, incluido el
DDT, debido a su entrada por contrabando y un uso agrcola con escasos
controles internos.
4.- OBJETIVOS
Determinar principalmente la presencia de plaguicidas
organoclorados y organofosforados utilizando el mtodo de
cromatografa de capa fina.
Conocer la tcnica de cromatografa en capa fina, (ccf), sus
caractersticas y los factores que en ella intervienen.
Calcular valores de Rf de varias sustancias y correlacionarlo a la
seleccin adecuada del eluyente y deducir la relacin que existe
entre la polaridad de la sustancias que se analizan y la de los
eluyentes utilizados.
5.- MATERIALES
Estufa
Cloruro de paladio (PdCl2)
Ddimetil amino benzaldehido
Etanol
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Reveladores
Capilares
Cuba cromatogrfica
Placa cromatogrfica










6.- METODOLOGA Y PROCEDIMIENTO
6.1.-METODOLOGA









RESIDUO
ACIDO
Plaguicidas (IOF,
IOC, IOCl, piretroides,
warfarina)

ST ST MP1 MP2
IOF IOC
Fase estacionaria
silicagel




. . . .
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FUENTE
SOLUTO









. . . .
Cuba cromatogrfica
Fase mvil Metanol:acetona
5:1
Despus de pasar por la estufa se
evidenciaran los resultados. Sern
de color : rojo naranja o amarillo.
1) I.O.F. -> PdCl2 al 0.1 %
2) I.O.C. -> P.DAB al 1 %
DAB: dimetil amino benzaldehdo





. . . .
FUENTE SOLVENTE
Segn los resultados dados , se halla el RF.
Para poder hallarlo se hace una divisin
simple.

RF = Fuente Soluto/Fuente Solvente
y el resultado siempre es menor que 1 .

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6.2.- PROCEDIMIENTO
-Prepara las placas cromatogrficas con Silica gel G60.

- Se tiene 4 muestras, 1 de insecticidas organofosforado, carbmico
y 2 muestras problemas (G1, G2, G3, G4)


- Se procede a echar alcohol etlico a los viales. Luego en las placas ya
cubiertas con, se cultiva con los capilares de vidrio, las 4 muestras
(dejando un margen del borde de 2cm).
-

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- Las muestras estndar se cultiva 3 veces (organofosforado y carbanico)
y 6 veces las 2 muestras problemas. (Las muestras problema G1,G2
,G3,G4 se echan el doble de volumen debido a que no muestran la
misma pureza que el grupo estndar.)

- En la placa ms pequea se cultiva una de las muestras estndares y
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las 2 muestras problemas, en la otra placa se cultiva las 2 muestras
estndares y las 2 muestras problemas.

- En el recipiente de vidrio se vierte el metanol acetona. Y se coloca las 2
placas hasta que corra las partes (El envase de vidrio se cierra casi
hermticamente para evitar prdidas de material voltil. Y que las
muestras no tengan algn contacto de contaminacin la cual puedan
alterar el procedimiento normal de ms mismas).

- Despus de un tiempo, se ve en las placas que las muestras se han
desplazado hacia arriba (frente de solvente)


- En la primera placa se rosea cloruro de paladio, y en la placa ms
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grande se rosea cloruro de paladio y p-dimetilaminobenzaldehido, ya
que esta placa tiene muestras.
DETECTA REACIVO COLOR
ORGANOFOSFORADOS cloruro de paladio Naranja o marrn
CARBMICOS p-dimetilaminobenzaldehido
(PABA)
Amarrillo intenso
- Finalmente se dibuja los centros de cada mancha, y se coloca el origen,
con estos puntos se mide: frente de soluto (cm) y el total que es frente
de solvente (cm). Y se hace el clculo respectivo.

7.-RESULTADOS

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8.- CONCLUSIONES
Este mtodo nos proporcion gran ayuda en determinar los compuestos
qumicos en un residuo bsico y acido ya sea en una muestra liquida o
slida.
Se observ la formacin de dos tipos de filtrado, el primer filtrado fue
fundamental para separar la fase orgnica con la fase acuosa esta
ltima nos dio un residuo, pero bsico determinando algunos alcaloides
y derivados del benceno, pero no solamente se puede obtener residuos
bsicos sino otro residuo, pero acido que tambin se observ algunos
compuestos como salicatos, compuestos fenlicos, organoclodorados,
etc. Es as que el compuesto para dar un residuo base fue el reactivo
hidrxido de amonio NH4 (OH).
8.- RECOMENDACIONES
Es recomendable utilizar los equipos de seguridad como guantes
quirrgicos para no contaminar la muestra.
Las medidas de precaucin deben ser las mximas posibles durante el
traslado de las muestras y en la aplicacin de los mtodos.
Un mal manejo de la tcnica puede derivar en errores, por lo que se
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recomendara en caso de duda y si la circunstancias lo permiten, repetir
el examen aunque lo ms apropiado sera seguir al pie de la letra la
metodologa e instrumentacin propuesta para obteber resultados
confiables.
Buen uso y manejo de las placas
9.- PREGUNTAS
INDICAR OTRAS FASES ESTACIONARIAS?
FLORISIL
Antes de su uso, el Florisil se activa en el laboratorio por un tiempo mnimo de
5 horas a 130'C. Su fuerza de adsorcin se verifica por la elucin de 1 ml de
una mezcla de testigos de plaguicidas para identificar el porcentaje de
recuperacin, as como para establecer las mezclas de solventes idneas para
la recuperacin cuantitativa de los plaguicidas y la recuperacin menor posible
de sustancias que interfieren en la determinacin cromatografa.
Para mejorar la separacin de los plaguicidas de los carotenos y los sulfatos
orgnicos procedentes de las muestras, cubrieron la superficie del Florisil con
nitrato de plata (Beyer, 1981 y Thier, 1981 citados por Waliszewski, 2001 y
Suzuki et al. 1979).
La purificacin de los extractos en las columnas empacadas con Florisil se
recomienda para los plaguicidas no polares o moderadamente polares
(Viersino et al. 1971). Por ello, la estandarizacin del Florisil se realiza con
compuestos relativamente no polares.
Los plaguicidas polares, como el Metamidofs, debido a su fuerte enlace con
el adsorbente, son casi imposibles de recuperar. Cierta variacin en la fuerza
adsorbente del Florisil entre los lotes diferentes puede afectar la elucin de los
plaguicidas estudiados, lo que indica cambios importantes en el volumen de
elucin, especialmente para los plaguicidas ms polares. Al cambiar a un lote
nuevo, se recomienda realizar un estudio de elucin para determinar el
volumen de retencin para los plaguicidas estudiados y evaluar el porcentaje
de recuperacin durante el proceso de purificacin de la muestra.
XIDO DE ALUMNIO
El xido de aluminio se introdujo en el anlisis de residuos de plaguicidas
sustituyendo al Florisil, con la ventaja de su menor precio y condiciones
constantes de adsorcin. Para recuperar los residuos de plaguicidas de una
columna de xido de aluminio se utilizan los mismos solventes orgnicos
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recomendados para el Florisil; para mejorar la recuperacin de los plaguicidas
de una columna de xido de aluminio, se procede a la desactivacin previa
con una determinada cantidad de agua.
As, para el anlisis Greve et al. (1974) citados por Waliszewski (2001),
utilizaron xido de aluminio Woelm bsico desactivado con 9% de agua.
SILICAGEL
El gel de slice o cido silcico es uno de los ms utilizados, es dbilmente
cido, su pH oscila entre 4-5. Con lo cual no se deber utilizar con sustancias
que se corrompan con los cidos. Los geles de slice normales suelen contener
impurezas de hierro y/o aluminio, este factor tambin se debe tener en cuentas
respecto al uso de componentes. El tamao del grano suele ser de 10 a 40
micras () y el tamao de poro vara de 20 a 150.
Generalmente lleva incorporado un agente aglomerante, yeso (sulfato de
clcico semihidratado), para proporcionar firmeza al adsorbente. Tambin han
sido incorporados dos indicadores del ultravioleta, juntos o por separados
(amarillo y/o verde), en diversos tipos de gel de slice.
Se trata de un adsorbente polar, pero puede ser tratado con hidrocarburos para
neutralizar los grupos -OH, de forma que se haga apto para separar
componentes lipfilos (esteroides, cidos grasos, ceras, vitaminas liposolubles,
etc.). A este proceso se le denomina cromatografa de fase reversa.
10.- BIBLIOGRAFA
http://www4.ujaen.es/~esiles/TEMA3PROTEINASalumno.pdf
http://www.scielo.org.ve/scielo.php?pid=S0378-
78182004000300006&script=sci_arttext
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vila Z. G. et a/. Qumica Orsnica. Experimentos con un enfoque
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Direccin General de Publicaciones y Fomento Editorial, UNAM, Mxico,
200'1.
Bates R.8., Schaefer J.P. Tnicas de lnvestiqacin en Qumica Orsnica,
Prentice-Hall lnternacional. Madrid. 1977.