RECUENTO DE PLAQUETAS

OBJETIVO -Evaluar el nmero de plaquetas presentes en la sangre, a travs de la observacin de un frotis coloreado, con el fin de comparar con el conteo directo. Realizar el conteo de plaquetas existentes en un milmetro cbico de sangre total Identificar morfolgicamente las plaquetas coloreadas con Wright en extendidos de sangre perifrica y apreciar su nmero por campo. Correlacionar la prctica con la teora expuesta en clase.

MARCO TEORICO

Las plaquetas o trombocitos constituyen el elemento forme ms pequeo de la sangre; su evaluacin en el hemograma manual usualmente slo se realiza en los extendidos coloreados. En el electrnico, su estudio aporta, adems del valor numrico, otros parmetros de importancia diagnstica, tales como promedio del volumen plaquetario e histograma plaquetario. A esta valoracin la llamamos plaquetograma. Significado clnico. Las plaquetas son clulas no nucleadas provenientes de la mdula sea ricas en grnulos que tiene como funcin mantener la hemostasia e iniciar la reparacin del tejido luego de la injuria vascular y durante el proceso inflamatorio. Ante una lesin del vaso sanguneo, el endotelio es el primero en reaccionar produciendo vasoconstriccin, a continuacin las plaquetas se adhieren y agregan en la zona injuriada para formar el tapn plaquetario. Estas clulas poseen una vida media de 7-10 das. Existen dos mtodos para el conteo de plaquetas: manual (directo) y electrnico (indirecto). El conteo de plaquetas se realiza en sangre anticuagulada con EDTA y diluida con oxalato de amonio al 1% mediante el uso de la pipeta para dilucin de hemates y el hemocitmetro.

Evaluar el nmero de plaquetas presentes en la sangre, a travs de la observacin de un frotis. Observar si se encuentran en cantidades aproximadamente normales (de tres a ocho plaquetas por cien glbulos rojos). La disminucin de las plaquetas en un frotis puede deberse a la manera de realizarlo, pero su falta o su disminucin considerable, en un frotis bien hecho pueden hacer sospechar de trombocitopenia. Debe observarse si las plaquetas que se encuentran parecen normales o existen muchas formas gigantes (macro-plaquetas)o notablemente pequeas. Para llevar a cabo la prctica se requiere, Frotis de sangre coloreado con Wright, Aceite de inmersin, un Microscopio. PROCEDIMIENTO: - Colocar la lmina coloreada en la platina del microscopio. - Observar con el objetivo a 4x, 10x y enfocar. -Observar con el objetivo 40x. - Colocar una gota de aceite de inmersin en la lmina coloreada. - Observar con el objetivo 100x. - Contar las plaquetas en 10 campos situados entre el cuerpo y la cola del frotis (los campos deben contener aproximadamente 100 glbulos rojos).

FUENTES DE ERROR: - Hacer el conteo en los mrgenes del frotis. - Aceite de inmersin de mala calidad o contaminado. -Coloracin defectuosa del frotis. - Observar el extendido con un objetivo diferente al de inmersin. - Equipo en mal estado.

La membrana plasmtica cumple varias funciones, entre las cuales las ms importantes son las siguientes:

-media la interaccin plaquetaria -provee la superficie fosfolipdica para la activacin del sistema de coagulacin -posee glicoprotenas que se asocian con dos etapas de formacin del tapn hemosttico: adhesin y agregacin plaquetaria. -posee receptores para diferentes agonistas (colgeno, trombina, epinefrina, adenosin difosfato) que producen liberacin de los grnulos plaquetarios.

En el citosol plaquetario encontramos: Lisosomas: contiene heparitinasa. endopeptidasa, exopeptidasas, glicosidasas cidas,

Grnulos a: contienen fibringeno, trombospondina, fibronectina, albmina, Factor V, Factor de von Willebrand, antitrombina (AT), PAI 1 (inhibidor del activador del plasmingeno 1). Grnulos densos: ATP, ADP, calcio, magnesio, serotonina, fsforo. Sistemas membranosos como el sistema tubular denso y el sistema canalicular abierto que es una invaginacin de la membrana plasmtica. El tapn hemosttico se forma teniendo en cuenta dos etapas: 1- Adhesin: De las plaquetas al colgeno subendotelial a travs de la glicoprotena Ib (GPIb) que se une principalmente al factor de von Willebrand presente en la matriz extracelular del subendotelio. 2- Agregacin: Las plaquetas adheridas se agregan a otras plaquetas. A travs de la GP IIb/ IIIa (GP IIb/IIa). Esta GP se puede unir a fibringeno (que es el nexo plaquetaplaqueta) al factor de von Willebrand y a la fibronectina.

Utilidad clnica:

Diagnstico de trombocitopenias asociadas o no a otras patologas. Screening prequirrgico. Diagnstico de prpura mucocutnea (trombocitopnica o no). Exclusin de un desorden hemorrgico. Monitoreo durante la quimioterapia y durante el tratamiento con heparina. Evaluacin de enfermedades de la mdula sea. Evaluacin de destruccin plaquetaria o consumo de plaquetas. Variables preanalticas:

Aumentado: Hemlisis, crioaglutininas, ciruga. Disminuido: Menstruacin, embarazo. Variable por enfermedad: Aumentado: Desrdenes mieloproliferativos, trombocitemia esencial, artritis reumatoidea, osteomielitis, anemia, enfermedad de Hodgkin, post esplenectoma (dos meses). Disminuido: Sndrome de Wiskott-Aldrich, sndrome de Bernard Soulier, sndrome de Fanconi.