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PRACTICA NO.

8 RECUENTO TOTAL DE GLBULOS BLANCOS

OBJETIVO: Que el alumno aprenda a efectuar el recuento de leucocitos utilizando el mtodo manual (mtodo del hematocitometro) el cual es una determinacin bsica en el laboratorio de hematologa. FUNDAMENTO: Los estudios cuantitativos son los elementos formes de la sangre se refieren a la concentracin de cada uno de ellos en microlitro (milmetro cubico) de sangre. Para el recuento de leucocitos se efecta la dilucin exacta de la sangre con una solucin hipotnica de acido actico que destruye a los eritrocitos. El azul de metileno o violeta de genciana permite reconocer fcilmente el lquido y observar mejor a los glbulos blancos, a los que tie ligeramente. Los norboblastos no se destruyen por lo que se debe tomar en cuenta para corregir los resultados. Se lleva a cabo el recuento en un volumen determinado de la muestra utilizando la cmara de neubauer y posteriormente se hacen los clculos. GENERALIDADES: Los leucocitos o glbulos blancos son un conjunto heterogneo de clulas sanguneas que son los efectores celulares de la respuesta inmunitaria, as intervienen en la defensa del organismo contra sustancias extraas o agentes infecciosos (antgenos). Se originan en la mdula sea y en el tejido linftico. Los leucocitos son clulas mviles que se encuentran en la sangre transitoriamente, as, forman la fraccin celular de los elementos figurados de la sangre. Son los representantes hemticos de la serie blanca. Todos lo mtodos para contar automticamente los leucocitos necesitan un agente hemolizante que elimine los eritrocitos que superan a los leucocitos unas mil veces. Para ello se utilizan diluciones de 1/500 en un agente ltico. Es obvio que una lisis incompleta de los eritrocitos conducir a concentraciones de leucocitos falsamente elevadas. Por otro lado, un ajuste inadecuado del discriminador producir, en general, perdidas en el recuento. En los analizadores hematolgicos que utilizan el mtodo de la impedancia elctrica , las aperturas de los canales de recuento y anlisis del tamao de leucocitos, son de unos 100 micras de dimetro por 50 micras de longitud. Se producen incrementos falsos del recuento de leucocitos en presencia de eritrocitos nucleados, un apelotamiento de plaquetas, eritrocitos sin lisar y crioglobulinas. Por el contrario, la coagulacin de la sangre da lugar a falsas disminuciones de los recuentos leucocitarios. En el recuento de leucocitos totales no existe distincin entre los seis tipos de clulas normales (neutrofilo y

bandas, linfocitos, monocitos, eosinofilos, y basofilos). Cada tipo de celula tiene su funcin particular en la defensa del organismo contar las amenazas exgenas; aqu nos referimos tan solo a la concentracin total de leucocitos en la sangre. MATERIAL EQUIPO Y REACTIVOS: - Material necesario para la extraccin de sangre -2 tubos de ensaye de 13 x 100 -1 pipeta de thoma para glbulos blancos con boquilla - cmara de Neubauer con cubreobjetos -Microscopio -Agitador mecnico para pipetas -Reactivos -E.D.T.A al 10% -Liquido de turk 8 liquido diluyente). TCNICA: 1.- Se aspira con cuidado la sangre hasta la marca 0.5 en una pipeta de toma para glbulos blancos. 2.-Se seca la parte exterior de la punta de la pipeta con papel para retirar la sangre adherida; se aspira lquido diluyente hasta la marca 11, obteniendo una dilucin 1:20. 3.- Se agita la pipeta durante 3 minutos, se desechan las primeras gotas del lquido diluyente y se carga la cmara de recuento. 4.- El diafragma del condensador del microscopio estar parcialmente cerrado para poder contemplar con claridad los leucocitos con un objetivo de poco aumento (10x). Si la distribucin de los leucocitos en los cuatro cuadros de las esquinas no es uniforme, el mtodo debe repetirse con un hematocitometro y pipetas limpios. 5.- Se cuentan los leucocitos en cada uno de los cuatro cuadros grandes de las esquinas, cada uno de los cuales esta dividido para mayor comodidad en 16 cuadros mas pequeos. Se suman los resultados y dicha suma ser N.

OBSERVACIONES:

RESULTADOS: Valores de referencia: Adultos...5,000 a 10,000/mm3

Nuestra paciente se encuentra entre los niveles normales de Leucocitos. Paciente: Elizabeth Celestino tornero Sexo: Femenino Edad: 17 aos. CONCLUSIONES: Los leucocitos son las clulas sanguneas que dentro del organismo participan desarrollando diferentes funciones como son: fagocitosis, defensa inmunolgica especfica o inespecfica Este examen se hace para diagnosticar una infeccin, anemia y leucemia. BIBLIOGRAFAS: Tcnicas y mtodos de laboratorio clnico Gonzales de Buitrago, Jos Manuel 2da Edicin Pg. 306