Manual Limpieza Desinfeccion y Esterilizacion Materiales Laboratorio Clinico

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Manual de limpieza, desinfeccin y esterilizacin de materiales en el laboratorio clnico

1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. Introduccin Definiciones Factores que influyen en la velocidad de destruccin de los microorganismos Limpieza de material reusable no contaminado Flujograma de trabajo en la desinfeccin y esterilizacin de materiales de laboratorio Tratamiento y eliminacin de materiales potencialmente contaminados Mtodos de desinfeccin y esterilizacin Ventajas y desventajas de los mtodos Recomendaciones generales para el uso de los desinfectantes Los tipos de germicidas y sus mecanismos de accin Control de la esterilizacin Rotulado del material esterilizado Almacenado Vigencia de la esterilizacin Bioseguridad Agradecimiento Revisin bibliografa de referencia
1. INTRODUCCIN
Durante la rutina de trabajo diario que se realizan en todas las secciones del laboratorio clnico, se manipulan diferentes tipos de muestras, los cuales pueden contener agentes infecciosos importantes, que requieren ser eliminados antes de descartar los envases respectivos. Por otro lado, existen materiales de laboratorio reusables que requieren posterior a su utilizacin, de una limpieza y esterilizacin apropiada, tal que puedan ser utilizados posteriormente. En todas estas situaciones, el personal de limpieza, desinfeccin y esterilizacin del laboratorio clnico, realiza calladamente una labor extraordinaria en beneficio de todo el personal tcnico, el cual en muchos casos no es valorado en su justa medida. Es importante recordar que al realizar cualquier procedimiento de limpieza y desinfeccin, se deben tener presente las precauciones universales, los equipos de bioseguridad requeridos y considerar TODAS las muestras como de alto riesgo. Concientes de la necesidad de proporcionar una gua de limpieza, desinfeccin y esterilizacin para los compaeros que realizan sta misin, ponemos a su disposicin el presente trabajo que rene una revisin bibliogrfica de la literatura especializada y la opinin de expertos en la materia, metodologas aplicadas en hospitales forneos y en otros casos recomendaciones personales.
2. DEFINICIONES
a) Esterilizacin : Proceso que destruye toda forma de vida microbiana. Un objeto estril (en sentido microbiolgico) est libre de microorganismos vivos. b) Desinfeccin : Es la destruccin, inactivacin o remocin de aquellos microorganismos que pueden causar infeccin u ocasionar otros efectos indeseables; la desinfeccin no implica necesariamente esterilizacin. c) Desinfectante : Agente usualmente qumico, que mata las formas en crecimiento de los microorganismos, pero no necesariamente las esporas. El trmino se refiere a sustancias utilizadas sobre objetos inanimados.
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d) Antisptico : Sustancia que impide el crecimiento o la accin de los microorganismos, ya sea destruyndolos o inhibiendo su crecimiento y actividad. Se aplica sobre superficies corporales. e) Sanitarizante : Agente que reduce la poblacin microbiana a niveles seguros, segn los requerimientos de salud pblica. Se aplica en objetos inanimados de uso diario, por ejemplo utensilios y equipos para manipular alimentos, vasos, platos y otros objetos de uso similar. f) Germicida : Agente que mata a los microorganismos, pero no necesariamente a sus esporas. g) Bactericida : Agente que mata a las bacterias. h) Bacteriosttico : Agente que inhibe el crecimiento de las bacterias, mientras permanece en contacto con ellas. i) Fungicida : Agente que mata los hongos. j) Fungisttico : Agente que inhibe el crecimiento de los hongos, mientras permanece en contacto con ellos. k) Virucida : Agente que destruye los virus.
3. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA VELOCIDAD DE DESTRUCCIN DE LOS MICROORGANISMOS

a) Temperatura: Las temperaturas elevadas tienen efectos dainos sobre los microorganismos y se debe tener en cuenta que cuando, adems de la temperatura, tambin se utiliza un agente antimicrobiano, los incrementos en la temperatura aceleran la destruccin de los microorganismos. Por ejemplo, la muerte de una suspensin bacteriana por fenol es mucho ms rpida a 42C que a 30C. b) Tipo de microorganismos: Las especies de microorganismos difieren en su susceptibilidad a los agentes fsicos y qumicos. En las especies formadoras de esporas, las clulas vegetativas son mucho ms susceptibles que las formas esporuladas. c) Estado fisiolgico de las clulas: El estado fisiolgico de los microorganismos puede influenciar la susceptibilidad a un agente antimicrobiano. Las clulas jvenes, metabolicamente activas, son ms fcilmente destruidas que las clulas viejas cuando el agente acta interfiriendo con el metabolismo. d) Ambiente. Las propiedades fsicas y qumicas del medio o sustancia donde se encuentran los microorganismos, tambin tienen una profunda influencia sobre la eficacia de la destruccin microbiana, por ejemplo, el calor es mucho ms eficaz en materiales cidos que en materiales alcalinos. La consistencia del material influye notablemente en la penetracin del agente. La presencia de material orgnico puede reducir significativamente la eficacia de un agente qumico, ya sea inactivndolo o protegiendo de l a los microorganismos si estn presentes.
4. LIMPIEZA DE MATERIAL REUSABLE NO CONTAMINADO

La limpieza se define como el proceso de remover, a travs de medios mecnicos y/o fsicos, el polvo, la grasa y otros contaminantes de las superficies, equipos, materiales, personal, etc. Este proceso, junto con un adecuado proceso de desinfeccin, es indispensable para controlar la presencia de los microorganismos en el ambiente. El primer paso del proceso de desinfeccin es la limpieza. La limpieza remueve restos de tejido, moco, sangre, etc., que podran interferir con la accin del desinfectante.
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Para realizar una limpieza adecuada se deben considerar el tipo de accin del agente utilizado (remocin mecnica, disolucin o detergente), las condiciones requeridas para aplicar la solucin limpiadora y el tiempo de contacto necesario para que sta ejerza su efecto. Los instrumentos con partes removibles debern desensamblarse de acuerdo con las instrucciones del fabricante, para asegurarse que todas las superficies se expondrn al procedimiento de limpieza. Aproximadamente 99.8% del material orgnico puede ser removido con una limpieza meticulosa. La limpieza puede ser acompaada de lavado manual o mecnico. Debe haber en el laboratorio cuatro tipos importantes de recipientes para productos potencialmente infectados : Cestos o bolsas autoclavables de un solo uso para recibir cultivos y muestras. Vasijas de un solo uso para recibir portaobjetos, pipetas Pasteur y pequeos artculos a desechar. Vasijas altas para pipetas graduadas (reusables). Bolsas de plstico para materiales combustibles tales como cajas para muestras y envoltorios que puedan estar contaminados. Todos estos recipientes deben ir a la seccin de limpieza y esterilizacin para el tratamiento final y esterilizacin de aquellos potencialmente contaminados. Eleccin del recipiente : Las vasijas de desechos deben ser fuertes y esterilizables por autoclave y los recipientes ms adecuados son los bocales de 1 litro de polipropileno o los tarros del mismo material con tapa a rosca. Son suficientemente profundos para mantener sumergidas la mayora de las cosas que es probable se desechen, son irrompibles y resisten muchas esterilizaciones por autoclave. Son mejores los tarros de polipropileno con tapa a rosca, ya que pueden cerrarse despus de su uso, invertirse para asegurar que el desinfectante est en contacto con el material. Un recipiente de desecho de 1 litro debe contener 750 mi de desinfectante diluido, dejando espacio para que ascienda el nivel sin que se derrame ni que gotee cuando se traslade. Los supervisores de la seccin debe asegurarse de que no se coloquen en las vasijas de desecho cosas inapropiadas. Nunca deben aadirse grandes volmenes de lquido a los desinfectantes diluidos. Lquidos tales como los sobrenadantes de la centrifugacin, deben verterse en vasijas de desecho, que contienen el volumen usual de desinfectante puro, a travs de un embudo adaptado en la parte superior de la boca. Esta disposicin impide se derramen gotas y se formen aerosoles. No debe agregarse a los desinfectantes artculos que contengan grandes cantidades de protena, sino que deben desinfectarse en el autoclave o incinerarse. Ningn material debe dejarse en el desinfectante de la vasija de desecho durante ms de 24 horas, ya que en caso contrario se desarrollarn las bacterias supervivientes. Por tanto, todas las vasijas deben vaciarse una vez al da, aunque es una cuestin particular s se hacen al final del da o a la maana siguiente. Deben vaciarse incluso las vasijas que hayan recibido poco o ningn material al llegar ese momento. Las vasijas para las pipetas recuperables deben estar hechas de polipropieno o de goma. Son de mayor seguridad que el vidrio. Las vasijas deben ser suficientemente altas para permitir que las pipetas se sumerjan totalmente sin que se derrame el desinfectante. Debe aadirse al desinfectante un detergente compatible para facilitar la limpieza de las pipetas en la fase final Ref: Esterilizacin, desinfeccin y tratamiento de los materiales infectados . http://html.rincondelvago.com/esterilizacion-y-desinfeccion-de-instrumentos-de-laboratorio.html El agente seleccionado de limpieza deber: 1. Ser capaz de remover tejido orgnico. 2. Capaz de prevenir depsitos flotantes. 3. Con baja formacin de espuma. 4. Capaz de ser enjuagado completamente. 5. Compatible con los materiales que estn siendo limpiados. Los detergentes enzimticos estn especficamente diseados para penetrar y desbaratar las protenas y la materia orgnica. Los agentes de limpieza debern ser preparados de acuerdo con las recomendaciones del fabricante en cuanto a dilucin, compatibilidad con los artculos, el uso adecuado y la temperatura de la solucin.
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Enjuague y secado: Despus de la limpieza los instrumentos que se desinfectarn debern ser enjuagados vigorosamente para remover cualquier residuo de detergente. Hay que secar cuidadosamente cada instrumento usando aire para secar orificios y ranuras pequeas para prevenir la dilucin del desinfectante. Desinfeccin De acuerdo a su definicin, la desinfeccin se emplea cuando se tratan los instrumentos de uso mdico, utensilios, paredes y pisos de las habitaciones de los enfermos, etc., con el propsito de evitar una posible infeccin. Para realizar este proceso se usan agentes qumicos (desinfectantes) o procesos fsicos como el calor. El trmino sanitarizacin usualmente se refiere al proceso empleado para reducir el contenido de microorganismos viables remanentes en una superficie limpia. En la industria se emplea este trmino cuando se tratan, con agentes qumicos o fsicos, las reas de produccin y los equipos empleados en la elaboracin de productos, con el propsito de reducir el contenido microbiano hasta niveles insignificantes. Limpieza de Equipos : El personal de limpieza y desinfeccin tambin ser responsable de la limpieza de los equipos de laboratorio, tales como las refrigeradoras, autoclave ( reas no tcnicas ), hornos, etc , lo cual debe realizarse al menos una vez al mes y en coordinacin con los jefes de cada seccin del laboratorio.
5. FLUJOGRAMA DE TRABAJO EN LA DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN DE MATERIALES DE LABORATORIO
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6. TRATAMIENTO Y ELIMINACIN DE MATERIALES POTENCIALMENTE CONTAMINADOS

En primer lugar, todo material sucio de laboratorio, deber considerarse como de alto riesgo con el potencial de transmitir infecciones. Por lo que se deben tomar las medidas adecuadas en su manejo y descontaminacin. Existen tres mtodos prcticos para el tratamiento de los materiales de laboratorio desechados y de los desechos contaminados: La esterilizacin por autoclave. La incineracin ( no utilizada en los laboratorios ) La desinfeccin qumica. La eleccin se realiza atendiendo a la naturaleza de los materiales; si es desechable o recuperable y, en este ltimo caso, si se ve afectado por el calor. Con ciertas excepciones, ninguno de estos mtodos excluye a los dems. Puede verse en la ms abajo que la incineracin sola nicamente puede aconsejarse si el incinerador se halla bajo el control del personal del laboratorio. La desinfeccin sola es aconsejable nicamente para las pipetas graduadas recuperables. Organizacin del rea de desinfeccin y descontaminacin : Los diseos del rea de limpieza y esterilizacin para tratar los materiales de laboratorio desechados deben incluir autoclaves, un trituradora, una unidad de eliminacin de basura conectada por tubera de plomo al alcantarillado pblico, fregaderos hondos, mquinas para lavar material de vidrio, estufas de desecacin, estufas de esterilizacin y mesas grandes de acero inoxidable. Estas habitaciones deben tener disposicin adecuada para evitar cualquier posible mezcla de materiales contaminados y descontaminados. Los arquitectos deben trabajar por tanto, sobre un diagrama de flujo o un plano de vas crticas, tomando especial cuidado en la eliminacin del vapor del autoclave. El material contaminado llega en sus recipientes de color codificado a una bancada o una zona designada y utilizada nicamente para este fin. Se separan seguidamente de acuerdo con su color y se envan al incinerador o se cargan en el autoclave. No hay ningn cruce en esta zona. Tras la esterilizacin en el autoclave, los contenedores se llevan a la mesa de separacin Antes de ser esterilizado al autoclave, deben quitarse las tapas desechables y despus incluidas en la carga del autoclave de manera que no dificulten la penetracin del vapor. Deben quitarse las ligaduras de las bolsas de plstico y abrir por completo las bolsas en las cestas o cubos que las mantienen. Materiales de vidrio contaminados : Despus de esterilizarlos al autoclave, los medios de cultivo pueden verterse o extraerse y los tubos, frascos, etc., se lavan a mano o mecnicamente con un detergente adecuado. El tipo de lquido o polvos de lavado que se utilice depender de la dureza del agua suministrada y del mtodo de lavado. Deben tenerse en cuenta las recomendaciones de varios fabricantes de detergentes de laboratorio. Los laboratorios con mucho trabajo precisan mquinas de lavado de material de vidrio. Antes de adquirir una de estas mquinas es preferible estudiar varias de ellas y preguntar a otros laboratorios cules son los modelos de que disponen que consideran satisfactorios. No todas las mquinas de lavado de material de vidrio son tan buenas como proclaman sus fabricantes. Un requisito previo es un buen aporte de agua destilada o desionizada. Si se realiza el lavado a mano, son necesarias piletas dobles, para el lavado y para el aclarado posterior y adems, cuencos de plstico o de acero inoxidable para el aclarado final en agua destilada. El agua destilada de alambiques no revestidos, independiente de la conduccin de vapor, es raro sea satisfactoria para el trabajo bacteriolgico. La tecnologa moderna tiene a disposicin maquinas lavadoras automatizadas para ste fin y otras por el mtodo de sonificacin. Los revestimientos de goma de los tapones a rosca deben separarse y lavarse por separado los revestimientos y los tapones y unirlos despus. Son tiles para esto los coladores o tamices fabricados de polipropileno. El material de vidrio nuevo, excepto el fabricado de borosilicato o material similar, puede requerir neutralizacin. Cuando se esterilizan al autoclave lquidos en tubos o frascos de vidrio sdico puede liberarse lcali y alterar el pH. La inmersin durante varias horas en cido clorhdrico al 2-3% es por lo general suficiente, aunque es conveniente comprobar una muestra llenndolos de agua destilada neutra ms unas gotas de un indicador apropiado y esterilizndolos en el autoclave. Vasijas de desechos :
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Despus de dejarlas toda la noche para permitir que acte el desinfectante, debe verterse cuidadosamente el contenido de las vasijas a travs de un colador de polipropileno. El colador y su contenido se ponen en un cesto desechable y se esteriliza al autoclave. Deben utilizarse guantes de goma para estas operaciones. Las vasijas de desecho vacas se esterilizan al autoclave antes de volver al laboratorio para su uso posterior. Pueden tener contaminacin residual. Pipetas reutilizables : Tras sumergirlas totalmente en desinfectante y detergente durante toda la noche, deben retirarse las pipetas con las manos enguantadas. Antes de lavar las pipetas, deben retirarse los tapones de algodn hidrfilo. Esto se puede hacer insertando su punta en un tubo de goma fijado al grifo de agua corriente. Los tapones que presenten dificultades para retirarlos pueden quitarse con un ganchillo. Se fabrican diversas excelentes mquinas lavapipetas que se fundan en la presin del agua y/o en la accin de sifn, aunque el lavado final debe hacerse en agua destilada. Ref: Esterilizacin, desinfeccin y tratamiento de los materiales infectados. http://html./esterilizacion-y-desinfeccion-de-instrumentos-de-laboratorio.html
7. METODOS DE DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN

7.1 Mtodos Fsicos: -- Calor Hmedo (Ej. Autoclave). -- Calor Seco (Ej. Horno). -- Radiaciones (Ej. Ultravioletas). -- Filtracin (Ej. Filtros Millipore ). 7.2 Mtodos Qumicos: -- Antispticos (Ej. Alcohol). -- Desinfectantes / Esterilizantes (Ej. Cloro).
8. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS MTODOS

8.1 Mtodos Fsicos: 8.1.1 Calor Hmedo: Autoclave El Autoclave es el aparato ms comnmente utilizado en los laboratorios para esterilizar cultivos y soluciones que no se desnaturalicen a temperaturas mayores a 100C. Una temperatura de 121 C ( 15 Lbs de presin) con un tiempo de exposicin de 15 minutos sirve para destruir microorganismos, incluso los formadores de esporas. Ventajas del calor hmedo: Rpido calentamiento y penetracin. Destruccin de bacterias y esporas en corto tiempo. No deja residuos txicos. Hay un bajo deterioro del material expuesto. Econmico.
Desventajas del Calor Hmedo:
Es corrosivo sobre ciertos instrumentos metlicos. Materiales que se pueden esterilizar con vapor: - Material textil - Material de vidrio
No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua.
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- Material de goma - Instrumental quirrgico de acero inoxidable - Soluciones acuosas - Todo aquel material cuyo fabricante certifique pueda ser esterilizado por vapor. Materiales que no se pueden esterilizar con vapor: - Sustancias oleosas - Sustancias grasas - Polvos - Instrumental quirrgico cromado o niquelado - Artculos elctricos sin cobertura especial - Todo material que no tolera la exposicin al calor y a la humedad.
AUTOCLAVE
MOVIMIENTO DEL VAPOR DENTRO DE LA AUTOCLAVE Relacin de Presin Vs Temperatura en el Autoclave
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Presin ( Libras ) Temperatura ( C ) 5 108 10 116 15 >>>>>>>>>>> 121 20 127 25 131 30 134 Resumen de un ciclo esterilizacin en autoclaves: 1. Se abre la vlvula de admisin de vapor a la camisa precalentando la cmara. 2. Al terminar de salir el aire de la camisa, se abre la vlvula que comunica camisa y cmara permitiendo la entrada de vapor a la cmara. 3. Cuando el vapor ocupa totalmente la cmara y el termmetro marca la temperatura establecida empieza el ciclo de esterilizacin. 4. Al terminar el ciclo se expulsa el vapor de acuerdo a necesidades: lentamente si se trata de lquidos para evitar una descompresin rpida o rpidamente si se trata de otras cargas. 5. Una vez expulsado el vapor se abre la vlvula que comunica la camisa con la atmsfera. Se produce presin negativa y se realiza el secado por medio de la succin de aire en la cmara. En los autoclaves de desplazamiento por gravedad que son los primeros modelos fabricados, el tiempo de penetracin es prolongado por una incompleta penetracin de aire y por lo tanto los tiempos de esterilizacin tambin son mayores. En la actualidad an cuando funcionan con el mismo principio, facilitan su operacin y aumentan el nivel de seguridad por medio de la incorporacin de controles automticos, bomba de vaco y microprocesadores. 8.1.2 Calor Seco: Horno Todos los microorganismos son susceptibles en distinto grado, a la accin del calor. El calor provoca en ellos coagulacin y desnaturalizacin de sus protenas. La efectividad del calor como mtodo de esterilizacin depende de : -- Temperatura -- Tiempo de exposicin La estufa de esterilizacin ( Horno ), es el artefacto utilizado en los laboratorios para esterilizar por calor seco. Se requiere mayor temperatura y tiempo de exposicin que el autoclave. La temperatura vara entre 120 y 180C, requirindose distintos tiempos de exposicin. A 140C se necesitan por lo menos 5 horas de exposicin, mientras que a 160C se requieren al menos 2 horas de exposicin.
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HORNO Ventajas del Calor Seco: No es corrosivo para metales e instrumentos. Permite la esterilizacin de sustancias en polvo y no acuosas, y de sustancias viscosas no voltiles. Desventajas del Calor Seco: Requiere mayor tiempo de esterilizacin, respecto al calor hmedo, debido a la baja penetracin del calor. Materiales que pueden esterilizarse por calor seco. - Instrumental quirrgico cromado - Materiales de vidrio, aluminio o porcelana - Aceites, parafina, sustancias grasas, vaselina - Polvos (talco). Materiales que NO se pueden esterilizar por calor seco - Material textil (algodn, sedas, lino, etc.) - Gomas - Materiales sintticos - Todo material que se altere a la temperatura trabajo. Temperatura La temperatura de esterilizacin por Calor Seco deber estar entre 160 C 170 C. Tiempos El tiempo de exposicin del material se determina mediante la correspondiente validacin del ciclo. El material a esterilizar se deber cargar con el esterilizador fro, teniendo en cuenta las siguientes recomendaciones: Cada unidad deber quedar separada de las vecinas Los materiales no debern estar en contacto con las paredes, piso y techo del esterilizador. La carga del esterilizador ser homognea y no deber superar el 80% de la capacidad total de la cmara Etapas del ciclo de esterilizacin por calor seco : 1. Colocar el material dentro del Esterilizador 2. Encender el Esterilizador 3. Verificar que los instrumentos de control de ciclo, tiempo y temperatura se encuentren en la posicin correcta 4. Esperar hasta que los instrumentos de medicin registren la temperatura seleccionada para el ciclo 5. Cuando se alcance la temperatura seleccionada, se comenzar a descontar el tiempo de esterilizacin 6. Cumplido el tiempo de exposicin se apagar el Esterilizador 7. La descarga del Esterilizador se efectuar una vez que el material se haya enfriado Precauciones Durante el ciclo de Esterilizacin no deber abrirse la puerta del Esterilizador porque ello implicara abortar el ciclo, debiendo en este caso recomenzarlo. Otros agentes fsicos: - Radiaciones ionizantes (rayos Gamma) - Luz ultravioleta - Filtracin (Filtros Millipore ) - Ultrasonido 8.2 Mtodos Qumicos: La efectividad de estos agentes depende de las condiciones bajo las que actan: Concentracin: vara con el tipo de agente y de microorganismo, pues una misma concentracin del agente puede producir un efecto diferente en distintos microorganismos. Tiempo: Los microorganismos no son susceptibles a un agente en la misma forma, por lo que no todos los microorganismos mueren al mismo tiempo.
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pH: el pH determina el grado de disociacin y la efectividad del agente qumico, pues a menor disociacin, mayor permeabilidad y mayor efectividad.
Listado de Desinfectantes (agrupados por su radical qumico)
Compuestos Fenlicos: Fenoles Cresoles

Alcoholes: Etlico Isoproplico Halgenos: Yodo Cloro Oxidantes: Perxido de hidrgeno Permanganato de potasio Colorantes: Azul de metileno Giemsa Acridina Metales Pesados: Bicloruro de mercurio Nitrato de plata Vapores y Gases: Formaldehdo (2 5 %) Ozono (O3) Oxido de etileno Glicol. cidos: cido actico (1%) cido brico
9. RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL USO DE LOS DESINFECTANTES

No deben mezclarse en un mismo recipiente productos antispticos o desinfectantes de distinta composicin. No se debe modificar la concentracin establecida para cada procedimiento. Nunca se deben tapar utilizando cubiertas de metal, algodn, gasa, corcho o papel. Usar la tapa original. Una vez que se vierte el contenido del desinfectante o antisptico, no deben retornarse a su envase original.
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Nunca debe llenarse un envase semivaco a partir de otro. Las diluciones deben hacerse a la temperatura, y segn el procedimiento indicado por el fabricante. Deben almacenarse en reas secas, ventiladas y protegidas de la luz.
Vigilar y controlar la fecha de vencimiento de los antispticos y desinfectantes Seleccin de un desinfectante : Tipo y cantidad aproximada de microbios. Tipo y cantidad de materia orgnica presente. Tiempo de contacto. Tipo de superficie a ser desinfectada. Descripcin de la fecha de eficacia e instrucciones de su uso. Seguridad y aceptabilidad ambiental del producto. Buena actividad residual. Costos. No necesariamente lo mejor es lo ms costoso. TAMPOCO AHORRE DINERO A COSTA DE LA SEGURIDAD PERSONAL
10. LOS TIPOS DE GERMICIDAS Y SUS MECANISMOS DE ACCIN

10.1 Inorgnicos : 1.- Metales: Los ms efectivos son el mercurio, plata ,cobre y zinc. Actan inactivando las protenas celulares al combinarse con ellas. Entre los compuestos de mercurio que se emplean como antispticos en heridas superficiales de la piel y mucosas estn el mercurocromo (mercromina) y el mertiolato. Entre los compuestos de plata utilizados como antispticos est el nitrato de plata (AgNO3) . Entre los compuestos de cobre se encuentra el sulfato de cobre (CuSO4) que se utiliza como algicida en los recipientes abiertos que contienen agua. Los compuestos de zinc tambin son fungicidas por lo que se utilizan para tratar el pie de atleta 2.- Acidos y lcalis: Actan alterando la permeabilidad y coagulando las protenas. En general los cidos son ms eficaces que los lcalis. Dentro de estos compuestos se encuentran el sulfrico (H2SO4), ntrico (HNO3), hidrxido sdico (NaOH) e hidrxido potsico (KOH). 3.- Compuestos inorgnicos oxidantes: actan oxidando los componentes de la membrana y enzimas. El agua oxigenada (H2O2) al 6% (20 volmenes) se utiliza como antisptico en pequeas heridas de la piel. 4.- Halgenos: Los halgenos especialmente el cloro y el iodo son componentes de muchos antimicrobianos. Los halgenos son agentes fuertemente oxidantes por lo que son altamente reactivos y destructivos para los componentes vitales de las clulas microbianas. El iodo es un antisptico y el cloro un desinfectante. a) Cloro: La muerte de los microorganismos por accin del cloro se debe en parte a la combinacin directa del cloro con las protenas de las membranas celulares y los enzimas. El cloro es un desinfectantes que actan sobre protenas y cidos nucleicos de los microorganismos. El producto clorado ms utilizado en desinfeccin es el Hipoclorito de sodio ( NaOCl ), que es activo sobre todas las bacterias, incluyendo esporas. El hipoclorito de sodio al 1% se puede utilizar como desinfectante domstico y hospitalario, y de hecho es el ms barato, pero tambin el ms efectivo. La nica desventaja reconocida es su relativa toxicidad provocando reacciones alrgicas en algunas personas. Aparte se describen los sntomas ( Pgina No. 34 ). Concentracin del cloro puro casero : 5.25 % Concentracin til : 1 al 2 %
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El Cloro es un biocida de amplio espectro barato y eficaz, que se utiliza en disoluciones de 500- 5000 ppm para desinfeccin medioambiental Sin embargo, una vez disuelto, los tomos de cloro tienen una vida media muy corta y para que el formulado tenga efecto, debe ser preparado in situ antes de su utilizacin. NOTA: Si la solucin comercial de Hipoclorito de Sodio es al 5.25%, la solucin al 1% se prepara mezclando 1 litro de solucin comercial y 4.25 litros de agua. Tambin se puede utilizar el siguiente mtodo: Ejemplo: Tenemos Cloro comercial al 5% y deseamos preparar un litro al 0.5% (5000 ppm). FORMULA : CD x VD V = -------------CC VD : Volumen deseado. CD : Concentracin deseada. CC : Concentracin conocida. 0.5% x 1000 c.c. V = -------------------- = 100 c.c. 5% Por tanto, se debe agregar 100 c.c. de hipoclorito de sodio al 5% a 900 c.c. de agua para tener 1000 c.c. de una dilucin al 0.5%. Compuestos de amonio cuaternarios : Son agentes desinfectantes por su accin detergente, rompen la membrana citoplasmtica debido a que disuelven las capas lipdicas, adems desnaturalizan las protenas. Son detergentes catinicos eficaces contra bacterias vegetativas y algunos hongos, aunque no contra las mycobacterias ni esporas. Son inactivados por las protenas y por una diversidad de materiales naturales y plsticos, por los detergentes no inicos y por el jabn. Su utilizacin en el laboratorio es por tanto limitada, aunque tienen la clara ventaja de ser estables y de no corroer los metales. Se emplean generalmente a diluciones de 1-2% para la limpieza de superficie e instrumentos. Los compuestos de amonio cuaternario no son txicos y son inofensivos para la piel y los ojos. Ej. Cetrimida, Cloruro de benzalconio, etc. b) Iodo: El mecanismo mediante el cual el iodo ejerce su accin antimicrobiana es debido a su accin oxidante. El iodo se puede utilizar como antisptico bajo dos formas: i) tintura de iodo, es una solucin alcohlica (tintura) de iodo (I2) ms ioduro potsico (KI) o ioduro sdico (NaI). ii) ii) iodforos, son mezclas de iodo (I2) con compuestos que actan como agentes transportadores y solubilizadores del iodo. Por ejemplo, la povidona iodada (Betadine) es un complejo de iodo y polivinil pirrolidona (PVP). Los agentes alquilantes actan aadiendo pequeas cadenas de tomos de carbono a las enzimas, que como consecuencia quedan inactivadas, lo que ocasiona la muerte de las clulas. El formaldehdo, la formalina y el glutaraldehdo son algunos de estos compuestos. El xido de etileno es un compuesto gaseoso que se utiliza como agente esterilizante para el tratamiento de material termosensible y objetos voluminosos que no pueden ser esterilizados mediante otros sistemas. Sin embargo, es un compuesto muy txico para la especie humana y su uso ya ha sido reemplazado por otros ms seguros. 10.2 Orgnicos : a) Alcoholes: Los alcoholes actan desnaturalizando las protenas, disolviendo las capas lipdicas y como agentes deshidratantes. Se recomienda la utilizacin del Alcohol Etlico, no desnaturalizado, o Alcohol Isoproplico al 70%. La accin deshidratadora de ambos alcoholes al 95% limita su utilidad, ya que las protenas deshidratadas resisten la desnaturalizacin. El etanol al 70% se usa como antisptico de la piel y como desinfectante en los termmetros clnicos orales y algunos instrumentos quirrgicos. El etanol y el
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isopropanol son utilizados como desinfectantes y antispticos clnicos. Tomar en cuenta que el alcohol etlico al 70% tiene un efecto bacteriosttico y que al 95% su efecto es bactericida. Su actividad cae bruscamente en concentraciones menores al 50%. Las bacterias sometidas a la accin de alcohol concentrado sufren destruccin de la pared celular, permitiendo el paso de contenido intracelular y componentes de la pared celular al medio externo (endotoxinas). Las bacterias sometidas a la accin de alcohol al 70% sufren una deshidratacin menos violenta, conservando la integridad celular. El alcohol se considera un desinfectante de nivel intermedio y se usa en la desinfeccin de superficies y artculos no crticos El alcohol tiene la ventaja de no ser corrosivo. El alcohol Isoproplico es hasta cierto grado ms germicida que el Etlico, pero es altamente deshidratante. Las desventajas de los alcoholes en los equipos son que daan la cubierta de los lentes, tienden a alterar y endurecer el material de goma y plstico, se inactivan en presencia de materia orgnica y se evaporan rpidamente. Esto condiciona que no se deben usar alcoholes como mtodo de desinfeccin de alto nivel ni para materiales en inmersin. b) Fenol y compuestos fenlicos: Una solucin acuosa al 5% de fenol mata rpidamente a las clulas vegetativas de los microorganismos. Sin embargo, las esporas son mucho ms resistentes al fenol. Debido a que el fenol es txico y tiene un olor desagradable ya casi no se usa como desinfectante o antisptico, siendo reemplazado por compuestos fenlicos que son sustancias derivadas del fenol menos txicas y ms activas frente a los microorganismos. Lysol es una mezcla de compuestos fenlicos que se utiliza para desinfectar objetos inanimados como los suelos, paredes y superficies. El fenol y compuestos fenlicos actan alterando la permeabilidad de la membrana citoplsmica as como desnaturalizando protenas. El hexaclorofeno es un compuesto fenlico que ha sido reemplazado por la clorhexidina, menos txica para la especie humana. Recomendaciones generales : a) No deben mezclarse en un mismo recipiente productos antispticos o desinfectantes de distinta composicin. b) No se debe modificar la concentracin establecida para cada procedimiento. c) Nunca se deben tapar utilizando cubiertas de metal, algodn, gasa, corcho o papel. Usar la tapa original. d) Una vez que se vierte el contenido del desinfectante o antisptico, no deben retornarse a su envase original. e) Nunca debe llenarse un envase semivaco a partir de otro. f) Las diluciones deben hacerse a la temperatura, y segn el procedimiento indicado por el fabricante. g) Deben almacenarse en reas secas, ventiladas y protegidas de la luz. h) Vigilar y controlar la fecha de vencimiento de los antispticos y desinfectantes
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Para efectuar los procedimientos de desinfeccin de alto nivel siempre deben cumplirse los siguientes aspectos: 1. - El material que ser sometido a desinfeccin de alto nivel debe estar totalmente libre de materia orgnica, porque sta interfiere en el proceso de desinfeccin. 2. - Los agentes qumicos utilizados deben corresponder a los aprobados por el Ministerio de Salud. 3. - La solucin debe estar vigente. Para estos efectos se debe consignar la fecha de vencimiento en el contenedor o bidn. 4. - Las soluciones se deben manipular con proteccin adecuada para evitar exposicin laboral del personal que los manipula.
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5. - El tiempo de desinfeccin de alto nivel debe ser establecido de acuerdo a las caractersticas propias de cada desinfectante. 6. - Si se trata de un procedimiento por medio de agentes qumicos se deben sumergir completamente los materiales a desinfectar. Si los materiales tienen canales o tubos se debe verificar que el desinfectante llene el lumen y tenga contacto con todas las superficies a desinfectar. 7. - Los contenedores deben mantenerse tapados para evitar la evaporacin y vapores txicos en el ambiente. 8. - Pasado el tiempo de exposicin se deben sacar los artculos manipulndolos con tcnica asptica (guantes estriles) y enjuagarlos con agua estril o destilada cuidando de no contaminarlos. En caso que los productos no sean utilizados de inmediato deben secarse por medio de aire filtrado o compresas estriles y guardarse envueltos en paos estriles siguiendo iguales recomendaciones que para el almacenamiento de material estril. Se debe tener presente que bajo ninguna circunstancia los artculos pueden almacenarse hmedos. 9. - Se debe utilizar controles qumicos que midan la concentracin del desinfectante en la medida que exista disponibilidad de ellos. 10. - Los procedimientos de desinfeccin de alto nivel deben ser realizados en reas bien ventiladas a fin de evitar exposicin del personal a vapores producidos por el agente qumico. 11. - No es recomendable enjuagar los artculos desinfectados de alto nivel con agua corriente debido a la posibilidad de contacto con superficies contaminadas. En caso de no contar con agua estril para este fin debe usarse alcohol etlico o isoproplico para el ltimo enjuague. Este producto eliminar microorganismos residuales y contribuir en el proceso de secado.
11. CONTROL DE LA ESTERILIZACIN

Los controles de esterilizacin pueden ser: fsicos, qumicos y biolgicos. Controles fsicos. Se trata de controlar el funcionamiento mecnico mediante termoelementos, manmetros, higrmetros, termmetros, de que estn dotados la mayora de los distintos sistemas de esterilizacin, as como las grficas. Indicadores qumicos. Llamados termocromos e indicadores colorimtricos, se trata de compuestos principalmente a base de sales de diferentes metales. Indicadores biolgicos. Los controles microbiolgicos confirman si el proceso es capaz de alcanzar la pequesima probabilidad de supervivencia microbiana (10-6), considerada en toda la legislacin internacional como garanta de esterilidad. Existen muy diversos tipos de controles biolgicos con esporas bacterianas, como: a) tiras de papel impregnadas de esporas en envases individuales b) ampollas con tiras o discos de papel inoculados de esporas y provistas de un medio de cultivo incorporado c) suspensiones de esporas dosificadas para inocular los productos a esterilizar. d) suspensiones de esporas en el propio caldo de cultivo. Las esporas utilizadas provienen de Bacillus subtilis como control biolgico de la esterilizacin por calor seco y xido de etileno y de Bacillus stearothermophilus para la esterilizacin por vapor de agua. Ref. Nurses and hospital infection control: knowledge, attitudes and behaviour of Italian operating theatre staff. Angelillo IF, Mazziotta A, Nicotera G J Hosp Infect 1999, Jun;42(2):105-12
12. ROTULADO DEL MATERIAL ESTERILIZADO

El rotulado de los materiales envasados puede ser: manual o mecnico El rotulado mecnico se har con mquinas o plantillas destinadas a este fin.
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Si el rotulado se hace manualmente, hacerlo con etiquetas autoadhesivas o etiquetas previamente impresas. Habr que tener mucho cuidado de no daar el envoltorio al escribir. En caso que esto suceda, habr que descartarlo y envasar nuevamente. Tener mucho cuidado que las tintas de escritura no manchen el material. Evitar escribir sobre papel que constituye la envoltura del material. El material deber estar identificado con los siguientes datos: a) Nombre del material b) Destino c) Fecha de elaboracin y/o d) Validez del producto f) Cdigo del responsable g) Nmero de lote
13. ALMACENADO
El producto terminado y esterilizado se deber colocar en canastos o contenedores, preferentemente plsticos, que se encuentren identificados externamente y que se puedan apilar para el ahorro de espacio fsico. A su vez estos contenedores se colocarn dentro de armarios cerrados, higinicos, frescos, y secos. Se deber evitar la manipulacin innecesaria de todos los materiales procesados.
14. VIGENCIA DE LA ESTERILIZACIN :

Si bien se acepta universalmente que la validez de la esterilizacin est condicionada a los eventos a los que el material est expuesto, hasta tanto podamos tener un control estricto del material almacenado, se sugiere tener en cuenta las siguientes recomendaciones del CDC, segn el tipo de envoltorio y el lugar donde se almacenan los materiales esterilizados (solamente vlido para almacenamiento dentro del Servicio de Esterilizacin). Este cuadro es orientador y slo bajo las condiciones ambientales y controladas en el Servicio de Esterilizacin DURACION DE LA ESTERILIDAD TIPO DE ENVOLTORIO Tela simple Tela doble Papel simple Papel crep simple Sobre tela simple Bolsa plstica termosellada Mnimo 1 ao EN ARMARIO CERRADO 1 semana 7 semanas 8 semanas EN ARMARIO ABIERTO 2 das 3 semanas 3 semanas 10 semanas
Ref. Recomendaciones y gua de tratamiento en la desinfeccin y esterilizacin. Sociedad Argentina de Infectologa.
15. BIOSEGURIDAD
Los principios de BIOSEGURIDAD se pueden resumir en:
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a) Universalidad: Las medidas deben involucrar a todo el personal, el cual debe seguir las precauciones estndares rutinariamente para prevenir la exposicin de la piel y de las membranas mucosas, en todas las situaciones que puedan dar origen a accidentes, estando o no previsto el contacto con sangre o cualquier otro fluido corporal de los paciente. b) Uso de barreras: Comprende el concepto de evitar la exposicin directa a sangre y otros fluidos orgnicos potencialmente contaminantes, mediante la utilizacin de materiales adecuados que se interpongan al contacto de los mismos. La utilizacin de barreras (ej. guantes) no evitan los accidentes de exposicin a estos fluidos, pero disminuyen las consecuencias de dicho accidente. c) Medios de eliminacin de material contaminado: Comprende el conjunto de dispositivos y procedimientos adecuados a travs de los cuales los materiales utilizados en la atencin de pacientes, son depositados y eliminados sin riesgo. Equipo protector personal : Cada institucin tiene la obligacin de proveer equipo de proteccin adecuado (EPA) para los trabajadores, que estn en contacto con materiales qumicos o contaminados. Es responsabilidad del personal que trabaja en el rea donde los Instrumentos estn siendo descontaminados, limpiados y procesados, vestir los artculos de proteccin para el trabajo que se est realizando. El EPA deber minimizar la transferencia de microorganismos a los artculos que estn siendo limpiados. El EPA deber proteger a los trabajadores de organismos potencialmente patgenos que puedan estar presentes en los artculos contaminados. El EPA deber incluir: - Bata de manga larga o delantal para prevenir el contacto directo con artculos contaminados y las superficies de trabajo. - Gorro desechable o reusable que se lava diariamente. - Mascarilla para proteger boca y nariz del contacto con gotas o aerosoles. - Lentes protectores con cubierta lateral. - Guantes de trabajo rudo con manga larga, que pueden ser hipoalergnicos, sin ltex o talco para disminuir la posibilidad de sensibilizacin. - Zapatos adecuados para disminuir la posibilidad de resbalones o cadas. Los accidentes biolgicos se producen generalmente por: - Inoculacin accidental. - Ingesta accidental. - Derrames y salpicaduras. - Derrames en la recepcin de muestras. - Salpicaduras en cara y ojos. - Salpicaduras y contacto directo. - Salpicaduras en la superficie de trabajo. - Aerosoles. - Por el aire. - Deliberados. - De origen desconocido. La mayora de los accidentes potenciales en el rea de limpieza y esterilizacin, son por la naturaleza del espcimen, de origen biolgico. Para que se produzca un accidente por agente biolgico deben concurrir bsicamente cuatro elementos:
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a) Un husped susceptible b) Un agente infeccioso c) Una concentracin suficiente de ste d) Una ruta de transmisin apropiada. El primer principio de bioseguridad es la contencin. El trmino contencin se emplea para describir los mtodos que hacen seguro el manejo de materiales infecciosos en el laboratorio. El propsito de la contencin es reducir al mnimo la exposicin del personal de los laboratorios, otras personas y el entorno, con agentes potencialmente peligrosos. Accidentes por exposicin a sangre o lquidos corporales : Se denomina a todo contacto con sangre o fluidos corporales y que lleva una solucin de continuidad (pinchazo o herida cortante) o un contacto con mucosas o con piel lesionada (eczema, escoriacin, etc.). Agentes infecciosos transmitidos por accidentes ocupacionales : Numerosos agentes infecciosos en la sangre o fluidos corporales de lo que se denomina "fuente", pueden ser transmitidos en el curso de un accidente. El riesgo de transmisin depende de numerosos factores, fundamentalmente de: la prevalencia de la infeccin en una poblacin determinada la concentracin del agente infeccioso la virulencia del mismo el tipo de accidente En la prctica cualquier agente microbiano es capaz de producir una infeccin ocupacional, en embargo, es aceptado que los agentes ms frecuentemente comprometidos son: Virus de la Inmunodeficiencia humana (VIH), el riesgo de infectarse por este virus en un accidente laboral a travs de una aguja que tiene sangre contaminada es estimado en 0.3-0.4%. En un contacto mucoso con sangre contaminada baja a un 0.05%. Virus de la Hepatitis B (HBV), el riesgo de infectarse por este virus en un accidente laboral a travs de una aguja que tiene sangre contaminada es promedio un 15%, llegando hasta un 40%. Virus de la Hepatitis C (HCV), el riesgo en este caso no est todava bien precisado citndose cifras de hasta un 10% Algunos componentes del programa de salud laboral del personal de Limpieza y Esterilizacin : Examen de salud al ingreso Barreras de proteccin del operador especficas por tipo de equipo Condiciones de planta fsica donde estn ubicados los equipos. Evaluacin de los limites permisibles ponderados (LPP). Vacunacin anti Hepatitis B e Influenza. Vigilancia de exposiciones laborales
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16. AGRADECIMIENTO
Quisiera agradecer al personal de limpieza y esterilizacin del Laboratorio Clnico del CHMDrAAM, por sus atinadas recomendaciones en la elaboracin de ste Manual. De igual manera, quisiramos agradecer y valorar en su justa medida la labor callada pero eficiente de la seccin de lavado y esterilizacin, que con su trabajo diario ayudan a evitar infecciones ocasionadas por los materiales contaminados, pensando en todo momento en la salud del personal.
17. REVISIN BIBLIOGRAFA DE REFERENCIA :

1. The Pharmacopeia of the United States of America. Cap 1211 Sterilization and Sterility. Assurance of Compendial Articles. 31 Edition. Rockville: USP; 2008. 2. Favero MS and Bond WW. Chemical Disinfection of Medical and surgical Materials . In SS, Block (Ed) Sterilization and Preservation (4th Edition) Philadelphia Lea & Febiger, 1991 Pg 617 641 3. Rowe D PhD. Principles of Sterilization in: Disinfection Sterilization and Antisepsis in Health Care. Edited by W. Rutala. 1997
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4. Rutala WA Apic. Guideline for selection and use of disinfectantes . Am. J. Infect. Control 1990: 18:99. 5. Rutala WA Gergen MF Weber DJ. Sporicidal activity of chemical sterilants used in hospitals . Infect Control Hosp. Epidemiol 1993; 15: 36-39. 6. Caballero E. Manual de bioseguridad en microbiologa. 2002. http://www.monografias.com 7. Marimargaret Reichert, Jack H Young. Sterilization Technology for the Health Care Facility . Second Edition 1997. Chap 5-11 8. Gua para preparar y esterilizar paquetes envueltos . Especialistas en Esterilizacin y envases. Mxico 9. Manual Normas de Esterilizacin y Desinfeccin. Minsal Santiago Chile 1995 10. Materiales de empaque en Esterilizacin. E.U. Marcia Jofr M. Asoc. Chilena de Seguridad, Hospital del Trabajador Concepcin 1998. 11. Manual de Esterilizacin y Desinfeccin. Ministerio de Salud, Chile. 2002 12. Esterilizacin, desinfeccin y tratamiento de los materiales infectados . http://html.rincondelvago.com/esterilizacion-y-desinfeccion-de-instrumentos-de-laboratorio.html Autor: Lic. Eric Caballero J Junio del 2011

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Manual de limpieza, desinfeccin y esterilizacin de materiales en el laboratorio clnico

3. FACTORES QUE INFLUYEN EN LA VELOCIDAD DE DESTRUCCIN DE LOS MICROORGANISMOS

4. LIMPIEZA DE MATERIAL REUSABLE NO CONTAMINADO

5. FLUJOGRAMA DE TRABAJO EN LA DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN DE MATERIALES DE LABORATORIO

6. TRATAMIENTO Y ELIMINACIN DE MATERIALES POTENCIALMENTE CONTAMINADOS

7. METODOS DE DESINFECCIN Y ESTERILIZACIN

8. VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS MTODOS

Desventajas del Calor Hmedo:

No permite esterilizar soluciones que formen emulsiones con el agua.

MOVIMIENTO DEL VAPOR DENTRO DE LA AUTOCLAVE Relacin de Presin Vs Temperatura en el Autoclave

Listado de Desinfectantes (agrupados por su radical qumico)

Compuestos Fenlicos: Fenoles Cresoles

9. RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL USO DE LOS DESINFECTANTES

10. LOS TIPOS DE GERMICIDAS Y SUS MECANISMOS DE ACCIN

11. CONTROL DE LA ESTERILIZACIN

12. ROTULADO DEL MATERIAL ESTERILIZADO

14. VIGENCIA DE LA ESTERILIZACIN :

Ref. Recomendaciones y gua de tratamiento en la desinfeccin y esterilizacin. Sociedad Argentina de Infectologa.

17. REVISIN BIBLIOGRAFA DE REFERENCIA :

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