Manual

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL
ESCUELA SUPERIOR DE MEDICINA

DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA
MANUAL DE LABORATORIO DE
BIOQUÍMICA MÉDICA I
Segundo Semestre 2008-2009
Enero 2009
Alumno:
Profesor:
Grupo: Grado: Equipo:
Escuela Superior de Medicina Laboratorio de Bioquímica Médica I
Departamento de Bioquímica
Academia de Bioquímica Médica I
Reglamento Interno de Bioquímica Médica I
CAPITULO I. DE LA INSCRIPCIÓN Y ORGA- que complementan la teoría, y resuelven pro-
NIZACIÓN DE LOS ALUMNOS blemas aplicativos.
Artículo 1. La materia de Bioquímica Médica I es Artículo 8. Las actividades complementarias,
impartida por los profesores de la Academia de versarán sobre tópicos de interés para la forma-
Bioquímica Médica I del Departamento de Bio- ción de los alumnos.
química. CAPITULO III. DE LA ASISTENCIA
Artículo 2. Para quedar inscritos y tener derecho Artículo 9. Como se indica en los incisos IV y VI
a asistir al curso, los alumnos deberán: del artículo 107 del Reglamento Interno del
a) Aparecer en las listas oficiales del Sistema I.P.N., es obligación de los alumnos asistir con
Institucional de Gestión y Unificación Escolar puntualidad y regularidad a las clases de teoría
del IPN. y prácticas de laboratorio en los horarios que
b) Llenar y entregar una forma de registro y con- les serán notificados al inicio del curso.
trol interno que les proporcionarán los profe- Artículo 10. Los profesores controlarán la asis-
sores de grupo el primer día de clases. tencia a clases de teoría y laboratorio, llamando
c) Entregar una fotografía reciente, de tamaño lista de presentes al inicio de las sesiones, con
infantil. un periodo de tolerancia de 10 minutos. No hay
Artículo 3. Los incisos b y c mencionados en el retardos. En las sesiones de laboratorio, los
artículo anterior, deben cumplirse a más tardar alumnos que lleguen después del periodo de to-
una semana después de iniciado el curso. lerancia no podrán permanecer en la sesión.
Artículo 4. Cada grupo deberá elegir en la prime- Artículo 11. Los alumnos asistirán a las clases de
ra semana de clases un representante, que se- teoría, prácticas de laboratorio y exámenes con
rá su vocero oficial, quien tratará los asuntos uniforme blanco y portando en la solapa iz-
académicos relacionados con el curso ante sus quierda del uniforme su credencial de alumno
profesores o la Academia. vigente, como lo marca el inciso VII del artículo
CAPÍTULO II. DE LA ORGANIZACIÓN DEL 107 del Reglamento Interno del I.P.N. Quien no
CURSO cumpla con este requisito no podrá perma-
necer en la sesión, y se hará acreedor a la
Artículo 5. El curso de Bioquímica Médica I es
falta correspondiente.
Teórico-Práctico y se desarrolla mediante tres
tipos de actividades: Artículo 12. Durante las sesiones tanto de Teoría
como Laboratorio, los alumnos deberán activar
a) Clases de Teoría. Se imparten en las aulas
el modo silencioso de sus teléfonos celulares,
de la Escuela Superior de Medicina, asigna-
para no interrumpir el trabajo.
das a cada grupo al inicio del curso.
b) Prácticas de Laboratorio. Que se realizan en Artículo 13. Las inasistencias a teoría y laborato-
los Laboratorios de enseñanza del Departa- rio se podrán justificar dentro de los tres días
mento de Bioquímica. hábiles siguientes, con la documentación oficial
c) Actividades complementarias. Las que sean pertinente. Debido a la falta de recursos, en ca-
asignadas por los profesores, y que comple- so de no asistir al laboratorio, el alumno po-
menten las actividades académicas. drá justificar la falta pero no reponer la prác-
tica.
Artículo 6. En las clases de Teoría se desarrollan
los temas del programa con la participación ac- Artículo 14. Las actividades de otras materias,
tiva de los alumnos. realizadas en el horario correspondiente a Bio-
química Médica I, no se consideran justifican-
Artículo 7. En las prácticas de Laboratorio los
tes de falta.
alumnos realizan experimentos sobre temas
mlvm / maov / i
CAPÍTULO IV. DEL TRABAJO EN EL LABO- riores a 6, las fracciones decimales serán con-
RATORIO sideradas nulas.
Artículo 15. Por razones de disciplina y seguri- Artículo 24. La evaluación parcial ordinaria de la
dad, ninguna persona podrá trabajar en el labo- materia se hará tomando en cuenta los resulta-
ratorio sin bata larga de laboratorio blanca. El dos obtenidos en:
alumno que no cumpla este requisito deberá a) El examen parcial departamental de los te-
abandonar el recinto y se hará acreedor a la fal- mas revisados en el aula.
ta respectiva. b) La calidad de su trabajo en el laboratorio y de
Artículo 16. Queda estrictamente prohibido fumar sus informes de las prácticas.
e ingerir alimentos o bebidas en el laboratorio. c) Las actividades académicas complementa-
En la misma forma, los alumnos deberán abste- rias.
nerse de recibir visitas, así como sentarse en Artículo 25. Los exámenes departamentales or-
las mesas de trabajo, o realizar cualquier tipo dinarios, extraordinario y a título de suficiencia,
de acciones indisciplinadas. se realizarán en el lugar, fecha y hora que se
Artículo 17. Para trabajar en el laboratorio los dará a conocer al inicio del curso.
alumnos formarán equipos, con base en las ins- Artículo 26. Todos los grupos deberán iniciar los
trucciones que reciban del profesor al inicio del exámenes departamentales a la hora progra-
curso. mada. Los sinodales de examen controlarán la
Artículo 18. Cada equipo de trabajo será respon- asistencia, llamando lista de presentes al inicio
sable del material de vidrio, utensilios, reactivos, del examen, con un periodo de tolerancia de 15
aparatos, etc. que utilice durante el desarrollo minutos, los alumnos que lleguen después del
de la práctica. Antes de iniciar la práctica debe- periodo de tolerancia no podrán presentar exa-
rán revisar cuidadosamente dicho material y men.
anotar en el vale cualquier anomalía que obser- Artículo 27. Durante los exámenes, los alumnos
ve, ya que de no hacerlo se harán responsables no podrán llevar consigo teléfonos celulares.
de los daños que presente el material y deberán
Artículo 28. Para tener derecho a presentar cada
reponerlo en un plazo máximo de quince días,
uno de los exámenes departamentales ordina-
con nota de compra.
rios, los alumnos deberán tener un mínimo del
Artículo 19. Al terminar la práctica, el equipo de- 80% de asistencia global (en teoría y laborato-
berá dejar la mesa de trabajo limpia y en orden, rio) en el periodo examinado, siempre y cuando
como la recibió. no hayan acumulado más del 20% de faltas en
Artículo 20. Los alumnos no podrán abandonar el el laboratorio (del total de prácticas del curso).
laboratorio hasta que la práctica termine, o Artículo 29. Cuando por causa justificada (ver ar-
cuando sean autorizados por el maestro. Sí un tículo 13 del presente Reglamento) un alumno
alumno abandona el laboratorio sin autoriza- no pueda asistir a presentar un examen ordina-
ción, se hará acreedor a la falta de ese día. rio, deberá proceder según el artículo 29 del
Artículo 21. El alumno deberá entregar un repor- Reglamento de Estudios Escolarizados.
te escrito de la práctica, que formará parte de Artículo 30. Cada evaluación departamental or-
su evaluación de laboratorio. dinaria se integrará por el 50% de la calificación
CAPITULO V. DE LA EVALUACIÓN del examen de teoría, más 30% de la califica-
Artículo 22. La evaluación final de la materia, se ción de laboratorio, más 20% de la calificación
hará con base en tres Evaluaciones Parciales de actividades complementarias del periodo co-
Ordinarias, y los Exámenes Extraordinario y a rrespondiente.
Título de Suficiencia. Artículo 31. La calificación final de la materia de
Artículo 23. Las calificaciones quedarán registra- Bioquímica Medica I se obtendrá promediando
das en el acta de examen correspondiente con las tres evaluaciones parciales ordinarias. La
un número entero de cero a diez. En calificacio- calificación mínima aprobatoria es de 6 (seis).
nes superiores a 6 con fracciones de cinco dé- Artículo 32. Cuando un alumno no apruebe o in-
cimas o más, la calificación se aumentará al en- tente mejorar su calificación ordinaria, deberá
tero inmediato superior. En calificaciones infe- presentar el Examen Extraordinario, presentan-
do el total de los contenidos de la materia.
mlvm / maov / ii
Artículo 33. Para tener derecho a presentar el Artículo 35. Los alumnos que al término del cur-
Examen Extraordinario de la materia, los alum- so tengan calificación reprobatoria y como mí-
nos deberán contar con un mínimo de 80% de nimo 50% de asistencia a las sesiones de teoría
asistencia a las clases de teoría y también 80% y prácticas de laboratorio, tendrán derecho a
de asistencia a las prácticas de laboratorio, del presentar el Examen a Título de Suficiencia.
total de clases del curso. CAPITULO VI. OTROS
Artículo 34. La calificación mínima aprobatoria Artículo 36. Cualquier caso no contemplado en
del Examen Extraordinario será de 6 (seis). este Reglamento deberá someterse por escrito,
Cuando un alumno presente este examen para a la Academia de Bioquímica Médica I, para su
mejorar la calificación ordinaria obtenida, su ca- discusión y resolución inapelable.
lificación final será la más alta.
LA ACADEMIA DE BIOQUÍMICA MÉDICA I
Enero 2008
mlvm / maov / iii

Reglamento de Laboratorio de Bioquímica Médica I
Capítulo I. Del Material de Trabajo. Artículo 8. La segunda hoja será el Reglamento
Artículo 1. Cada grupo deberá entregar en el la- Interno de la materia, seguido del presente re-
boratorio 1000 hojas de papel Bond Xerox digi- glamento y la las Reglas de Seguridad del La-
tal de 75 g/m2, tamaño carta, para copiadoras e boratorio.
impresoras laser y de inyección de tinta, antes Artículo 9. El día anterior a la práctica, en el mo-
de la primera sesión de práctica. mento de tomar lista, cada equipo de laboratorio
Artículo 2. Durante las sesiones de práctica cada entregará un Formato de Reporte de Práctica,
equipo de trabajo deberá contar con el material impreso en computadora o escrito a máquina,
siguiente: Franela, cerillos, marcador indeleble, rotulado con los siguientes datos en la primera
lápiz graso, rollo de papel higiénico, 1 litro de hoja:
agua destilada y un tubo de tiras reactivas para a)Nombre del laboratorio.
medir pH, con escala de 1 a 14. b)Título de la práctica.
Artículo 3. Para trabajar en el laboratorio cada c)Número de equipo.
alumno debe contar con el equipo de protección d)Nombre de los integrantes del equipo que
siguiente: una pre-pipeta, mascarilla de protec- participaron en la elaboración.
ción, guantes de cirujano. e)Nombre del profesor.
f)Fecha de la práctica.
Capítulo II. De la Asistencia. Artículo 10. El resto del formato debe incluir:
Artículo 4. Los(as) alumnos(as) que lleguen des- a)Objetivo y fundamento generales para toda
pués del periodo de tolerancia, TENDRÁN FAL- la práctica.
TA Y NO PODRÁN PERMANECER EN EL LA- b)Objetivo y fundamento específicos de cada
BORATORIO. NO HAY RETARDOS. experimento.
Artículo 5. Los(as) alumnos(as) que abandonen c)Cuestionarios resueltos, incluyendo reaccio-
el laboratorio sin autorización del profesor, nes y cálculos.
TENDRÁN FALTA Y NO PODRÁN PERMANE- d)Espacios apropiados para:
CER EN EL LABORATORIO. i.registro de resultados (Tablas, Cuadros,
Artículo 6. Cuando sea necesario tomar muestra, Gráficos, etc.)
y no haya sido previamente designado algún o ii.elaboración de datos experimentales (cál-
algunos donadores con un fin específico, el do- culos, transformaciones, etc.)
nador de cada equipo será el último(a) alum- iii.discusión y conclusiones de cada experi-
no(a) que llegue a esa sesión. mento, y de la práctica completa.
e)Bibliografía consultada.
Capítulo III. Del Trabajo en el Laboratorio.
Artículo 11. Los equipos que no entreguen el
Artículo 7. Al asistir a las sesiones de práctica,
Formato de Reporte de Práctica, en la forma y
los alumnos deberán entrar al laboratorio con
momento que se solicite, se harán acreedores a
bata blanca puesta y llevar consigo su manual
una calificación de cero en esta parte de su
de laboratorio engargolado con gusano de plás-
evaluación.
tico y cubiertas de plástico transparente, debi-
damente rotulado con los siguientes datos en la Artículo 12. Al inicio de la sesión de laboratorio,
primera hoja: los equipos que hallan entregado en tiempo y
forma su Formato de Reporte de Práctica, lo re-
a)Nombre del laboratorio.
cibirán para que agreguen la información que se
b)Nombre del alumno.
indica en el Artículo13.
c)Nombre del profesor.
d)Número de equipo. Artículo 13. Al final de la sesión de laboratorio y
e)Grupo y grado. antes de retirarse, cada equipo entregará el
mlvm / maov / iv
Formato de Reporte de Práctica completo, in- Artículo 17. Trabajo Individual en el Laboratorio.
cluyendo: Representa hasta el 50% de la calificación. In-
a)Para cada experimento: cluye
i. Nombre del alumno(a) que lo efectuó. a)Puntualidad en la asistencia.
ii. Registro de resultados. b)Resultados prácticos, obtenidos en los pro-
iii. Elaboración de datos experimentales. blemas asignados en el laboratorio.
iv. Discusión de resultados. c)La velocidad, orden, limpieza y disciplina con
v. Conclusión. que cada alumno realice su trabajo en el la-
b)Conclusiones generales de la práctica. boratorio.
Artículo 14. Al terminar su trabajo y después de Artículo 18. Reporte de práctica. Representa
haber entregado el material de la práctica y su hasta el 20% de la calificación. Se evalúa bási-
reporte, los integrantes de cada equipo aban- camente:
donarán el laboratorio, para no distraer a sus a)Puntualidad en la entrega
compañeros, dejando su lugar de trabajo limpio b)Discusión.
y ordenado. c)Conclusiones.
Artículo 15. El día siguiente a cada sesión de d)Respuestas de los cuestionarios.
práctica, en el salón de clase se realizará la dis- e)Elaboración e interpretación de cálculos y
cusión de resultados, para lo cual los alumnos gráficas.
deberán contar con los datos experimentales. Artículo 19. Participación en la sesión de discu-
sión de resultados. Representa hasta el 10% de
Capítulo IV. De la Evaluación. la calificación. Se toma en cuenta:
Artículo 16. Formato Reporte de Práctica y
muestras por Equipo. Es hasta el 20% de la ca- a)Participación en la discusión.
lificación. Se evalúan: b)Calidad de la exposición.
Artículo 20. La calificación parcial ordinaria de
a)Puntualidad en la entrega. Laboratorio será el promedio aritmético de las
b)La calidad de los objetivos y fundamentos de calificaciones obtenidas en las prácticas reali-
cada experimento. zadas durante el periodo evaluado, Ajustadas a
c)Respuesta de cuestionarios. valores enteros, como se indica en el Regla-
d)Elaboración de cálculos. mento Interno de la materia.
e)Que la(s) muestra(s) sea(n) adecuada(s).
Artículo 21. PROFESORES DE TEORÍA Y LABORATORIO
GRUPOS 2CM4, 2CM5 Y 2CMA
ENERO 2009
mlvm / maov / v
Reglas de Seguridad en el Laboratorio de Bioquímica Médica I
El manejo inapropiado de sustancias, materia- 2. Material biológico y animales de laborato-
les y equipo que se encuentran en el laboratorio
rio, representa peligro tanto a la salud de las o Para el manejo de estos materiales pretéjase
personas, como a la integridad de las instala- adecuadamente según sea el caso. Usando
ciones y equipo de trabajo. Es por ello que se guantes, cubre boca, etc.
deben obedecer las Reglas de seguridad que o Para la manipulación y el sacrificio de los
se enlistan a continuación, clasificadas en los animales de experimentación siga las indica-
siguientes grupos: ciones del Profesor.
1. Sustancias químicas o Maneje cuidadosamente las muestras bioló-
2. Material biológico y animales de laboratorio gicas (sangre, orina, saliva, etc.) para evitar
3. Material de vidrio contaminaciones de personas y materiales.
4. Equipo eléctrico e instalaciones de gas o Todo el material biológico, equipos y de de-
5. Orden y limpieza secho (cadáveres, muestras biológicas, algo-
1. Sustancias químicas. dón, gasas, guantes, jeringas, etc.) deberán
o Cada sustancia debe tener etiqueta de identi- ser incinerados adecuadamente, para lo cual,
ficación, si no es así no los utilice. deberá usted seguir las instrucciones del Pro-
o Antes de utilizar una sustancia, verifique que fesor para dejarlos convenientemente prepa-
se trata del reactivo correcto y que tiene la rados.
concentración requerida. 3. Material de vidrio
o Identifique la naturaleza de la sustancia y el o Debe examinar todo el material de vidrio an-
tipo de peligro que implica su manejo; ¿es tes de utilizarlo, para detectar la existencia de
veneno?, ¿qué tan tóxico es?, ¿es inflama- grietas o roturas. En el caso de que encuen-
ble?, ¿es corrosivo? tre material defectuoso, repórtelo de inmedia-
o Evite el contacto o exposición innecesaria con to al encargado del laboratorio para que se lo
sustancias químicas, utilice el equipo de pro- cambie.
tección adecuado y disponible: bata larga, o No use el material de vidrio con orillas cortan-
lentes, guantes, campana extractora, etc. tes, con cuarteadoras, o en general en mal
o No pipete sustancias químicas directamente. estado.
Siempre utilice la prepipeta. o Debe transportar, mover o manipular sólo la
o Evite inhalar productos químicos y sus vapo- cantidad de material de vidrio que pueda ma-
res. nejar con seguridad.
o Trabaje y mantenga bajo la campana los re- o Use pinzas, franela o guantes de asbesto pa-
activos corrosivos o volátiles. ra transportar o mover recipientes de vidrio
o Los hidrocarburos ligeros y solventes deben calientes.
manejarse lejos del fuego u otras fuentes de o Nunca deje material roto para ser lavado, re-
calor. Empleé baño maría para calentarlos. pórtelo y tírelo a la basura.
o Para diluir los ácidos, estos deben verterse o No deje vidrios rotos sobre la mesa o en
lentamente en el agua, agitando cuidadosa- cualquier otro lugar en donde pueda causar
mente. accidentes.
o No vierta agua directamente sobre el ácido o Al calentar recipientes de vidrio, use llama
porque provocará salpicaduras suave al principio del calentamiento.
o No deje sobre la mesa tapones de frascos de o Limpie inmediatamente los materiales que go-
ácidos u otras sustancias corrosivas, porque teen o se derramen, mediante uso de la fra-
se pueden contaminar o dejar residuos corro- nela u otros materiales para embeber el líqui-
sivos que podrían causar quemaduras. do y evitar que se disperse.
mlvm / maov / vi
o En caso de líquidos tóxicos derramados, pre- 5. Orden y limpieza
téjase adecuadamente y ventile el área. o Una vez verificado el buen estado del mate-
4. Equipo eléctrico e instalaciones de gas. rial de vidrio, lávelo para asegurar su limpie-
o No use equipo eléctrico defectuoso. za.
o Verifique que los enchufes y conexiones es- o Mantenga siempre limpia y en orden su área
tén en buenas condiciones; en caso de que de trabajo.
existan cables desnudos o en mal estado, re- o No intercambie el contenido de los frascos de
pórtelos inmediatamente. reactivo. Use sólo los tapones de los recipien-
o Maneje el equipo eléctrico y sus conexiones tes correspondientes.
con las manos secas y cerciórese que el piso o Cuando requiera volver a llenar sus frascos
se encuentra seco. Mantenga seco el espacio reactivos, transfiera del frasco de almacena-
alrededor del equipo eléctrico. miento, la cantidad necesaria a través de un
o Antes de encender el mechero, revise que vaso de precipitados, no devuelva el sobrante
tanto éste como la manguera se encuentren al envase original, busque otro frasco reactivo
en buen estado, verifique que esté adecua- y vierta el sobrante. Nunca emplee pipetas
damente conectado a la tubería de gas (tubos para efectuar este procedimiento.
de color amarillo) y retire todo material infla- ACADEMIA DE BIOQUÍMICA MÉDICA I
mable cercano. Enero 2007
o En caso de accidente, retírese inmediatamen-
te y cierre la llave de paso que se encuentra
bajo la tarja de cada mesa.
mlvm / maov / vii


Elizabeth Barbosa Cabrera
Claudia Calzada Mendoza
Francisco Javier Castañeda Ibarra
Luz María Chirino Castillo
Arturo Díaz Martínez
Eunice Dalet Farfán García
María del Rosario León Reyes
Maria Teresa López Venegas
Sandra Gissela Márquez Ramírez
Jessica Elena Mendieta Wejebe
Alfredo Montiel Márquez
Juan Guillermo Ordorica Vargas
Miguel Ángel Ordorica Vargas
Leticia Araceli Ramírez Durán
Martha Cecilia Rosales Hernández
Sandra Sánchez Barbosa
Feliciano Tamay Cach
José Guadalupe Trujillo Ferrara
María de la Luz Velázquez Monroy
Io Stephanie Zamudio Vega
Personal Técnico del Laboratorio

José Luis Martínez Vázquez
Josefina Tinajero Gracilazo
Mariano Bravo Ballinas
mlvm / maov / viii

Contenido
Reglamento Interno de Bioquímica Médica I i
Reglamento de Laboratorio de Bioquímica Médica I iv
Reglas de Seguridad en el Laboratorio de Bioquímica Médica I vi
Tabla de Contenido ix
INTRODUCCIÓN AL LABORATORIO DE BIOQUÍMICA MÉDICA I 11

Distribución de alumnos 11
El Vale de material de laboratorio. 11
Manejo del mechero Fisher. 2
Como calentar un líquido en un tubo de ensaye. 2
Manejo de reactivos líquidos. 3
Manejo de reactivos sólidos. 4
Como tarar tubos para centrifugación. 4
SOLUCIONES 6
Medida de la presión osmótica. Método directo 6
Preparación de una solución de NaCl 2% p/v 6
Diálisis 7
Preparación de una solución de CH3COOH 0.5M 8
Titulación directa 9
Difusión en líquidos 10
SOLUCIONES ELECTROLÍTICAS y pH 11
Disociación de una sal y Electrolisis del agua 11
Conducción de corriente en electrolitos fuertes y débiles 11
Diferencia de conductividad entre electrolitos débiles y fuertes 12
Preparación de soluciones de pH conocido con electrolitos fuertes y débiles. 13
Acidez de titulación 14
SOLUCIONES REGULADORAS 15
Apreciación del poder regulador y efecto de la concentración 15
Curva de titulación de Glicina 16
Preparación de soluciones amortiguadoras de pH conocido. 17
PROTEÍNAS 18
Determinación del punto isoeléctrico de la Caseína 18
Reacción de Ninhidrina. 19
Reacción del Biuret 19
Reacción Xantoprotéica 20
Reacción de Millon 20
Reacción de aminoácidos azufrados. 21
Precipitación de proteínas por metales pesados 22
Precipitación de proteínas por ácidos fuertes. 23
Precipitación por alcohol 23
CINÉTICA QUÍMICA Y CATÁLISIS 25
Comprobación de la ley de acción de masas 25
mlvm / maov / ix
Velocidad de descomposición del H2O2 25
Influencia de la temperatura sobre la velocidad de una reacción química 26
Efecto del pH sobre la velocidad de una reacción química. 27
Efecto de un catalizador inorgánico sobre la velocidad de hidrólisis de la Sacarosa28
Efecto de un catalizador biológico sobre la velocidad de degradación de la Sacarosa
29
CINÉTICA ENZIMÁTICA 31
Preparación de la solución de Amilasa 31
Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática 31
Efecto del pH sobre la actividad enzimática. 32
Efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad de una reacción
enzimática. 33
Efecto de la concentración de enzima sobre la velocidad de una reacción
enzimática. 34
GLÚCIDOS 36
Determinación de la estructura cristalina de glúcidos. 36
Formación de Osazonas 36
Reacción de Molisch-Udransky 37
Reacción de Fehling 38
Reacción de Barfoed 38
Reacción de Bial 39
Reacción de Seliwanoff 39
Reacción de Lugol 40
OXIDACIONES BIOLÓGICAS 42
Oxidación por pérdida de electrones 42
Oxidación por deshidrogenación 43
Obtención de la fracción mitocondrial del tejido 43
Determinación de la actividad de Deshidrogenasa Succínica 44
Determinación de la actividad de Citocromo-Oxidasa. 45
LÍPIDOS 47
Reacción de Hanus o Índice de yodo 47
Extracción de lípidos de Cerebro. 48
Identificación de fosfolípidos de cerebro por cromatografía en capa fina. 48
Identificación de cerebrósidos. 49
Reacción de la Acroleína. Identificación de acilglicéridos. 49
Reacción de Liebermann-Burchards 50
Grado de permeabilidad de una capa lipídica 50
ÁCIDOS NUCLEICOS 52
Obtención de DNA del bazo 52
Identificación y Cuantificación de DNA. 53
Identificación y Cuantificación de RNA 54
Identificación y Cuantificación de Fosfato Total 55
APÉNDICE I. Curva Tipo de Azucares Reductores 57
APÉNDICE II. Puente de Wheatstone 58

mlvm / maov / x
INTRODUCCIÓN AL LABORATORIO DE
BIOQUÍMICA MÉDICA I
Distribución de alumnos
Desarrollo
a) Antes de entrar al laboratorio, todos los alumnos deberán tener puesta y abotonada su
bata de laboratorio. También deben tener listo su material de trabajo.
b) Cuando el profesor lo indique, los alumnos colocarán su mochila en el lugar que les sea
designado.
c) Siguiendo las instrucciones de su profesor, localice su mesa de trabajo e inmediatamen-
te diríjase a ella.
d) En su mesa, localice tomas de corriente, desagües, tuberías y sitios donde puede traba-
jar.
e) Ubique la posición de su mesa de trabajo, respecto de la mesa de la campana, instala-
ciones de seguridad, extintores, zonas de seguridad y rutas de evacuación.
f) Con base en la explicación recibida, identifique el uso de cada una de las tuberías que
encuentre en su mesa de trabajo y márquelas con masking tape. Espere a que su pro-
fesor confirme que su etiquetado es correcto.
g) Localice la posición de las válvulas de seguridad de cada tubería.
Cuestionario
1. Elabore un esquema de su mesa señalando la posición de las tomas de corriente, de-
sagües y válvulas de flujo.
2. Elabore un esquema del laboratorio e indique en él, las zonas de seguridad, la posición
del equipo de seguridad y marque la ruta de evacuación desde su mesa.
3. En el esquema de la mesa de trabajo que, marque la posición de las válvulas de segu-
ridad.
El Vale de material de laboratorio.
Desarrollo
a) Tomando como referencia el vale de laboratorio, que se encuentra en la charola de ma-
terial, identifique y revise cuidadosamente, cada una de las piezas que se le proporcio-
naron, indicando en el vale, cualquier defecto que encuentre.
b) Rotule cada pieza identificada con una etiqueta de masking tape. Reúna en la charola el
material de nombre y/o empleo desconocidos, o de cuyo estado tenga duda, y pregún-
telo a su profesor. Espere a que su profesor compruebe que su marcado es correcto.
c) Una vez revisado todo el material, complete la información que se solicita en el vale y
entréguelo al personal técnico de laboratorio.
Cuestionario
1. ¿Para qué se emplea cada una de las piezas de material de laboratorio siguientes?
mlvm / maov / xi
Tubo de ensaye
Pipeta
Bureta
Probeta
Mortero
Manejo del mechero Fisher.
Desarrollo
a) No encienda el mechero hasta que su profesor se lo indique.
b) Asegúrese que el tornillo de control de flujo de gas esté abierto aproximadamente a la
mitad de su capacidad total. El flujo de gas se disminuye girando el tornillo en el sentido
de las manecillas del reloj y se aumenta en sentido contrario.
c) Si es necesario, conecte el tubo de hule del mechero a la llave de gas, la llave debe es-
tar completamente cerrada, con la manija en posición transversal respecto de la salida
del gas. Recuerde que la tubería de gas es de color amarillo.
d) Abra la llave de gas, colocando la manija en un ángulo aproximado de 45 grados res-
pecto de la salida del gas. Escuchará un ligero zumbido provocado por el flujo del gas.
e) Encienda el mechero, aproximando la flama de un cerillo o encendedor al borde de la
parte superior del mechero, no coloque la flama del cerillo en el centro del mechero
porque el flujo de gas la apagaría. Tenga cuidad de no acercar su rostro ni objetos
inflamables al mechero al momento de encenderlo, ni mientras esté encendido.
f) Ajuste la cantidad de aire que entra, usando el arillo de control de flujo de aire, para
cambiar el tamaño de las aberturas de la parte inferior, hasta que la flama tenga una
zona central de color azul claro, rodeada de otra de color azul oscuro o violeta, la parte
más caliente de la flama se encuentra en la punta de la zona azul claro interna. Cuando
la combustión es incompleta, por falta de oxígeno, la flama tiene color amarillo.
g) Deje el mechero encendido para usarlo en el ejercicio siguiente
Cuestionario
1. Elabore un esquema del mechero Fisher, en el que se indique la posición del tornillo de
control de flujo de gas, el arillo de control de flujo de aire y la entrada del gas.
Como calentar un líquido en un tubo de ensaye.
Desarrollo
a) En este ejercicio es aconsejable que todos los miembros del equipo se coloquen los
lentes de protección.
b) Llene su tubo de ensaye, aproximadamente hasta el 20% de su capacidad, con agua de
la llave y sujételo con las pinzas para tubo de ensaye. Si es necesario, quítese los
guantes de látex antes de iniciar el calentamiento.
c) Coloque el tubo sobre la flama del mechero, en posición inclinada, aproximadamente 70
grados, cuidando que la flama caliente la parte superior del líquido. Nunca caliente un
Introducción al Laboratorio de Bioquímica Médica I mlvm / maov / 2

tubo de ensaye en el fondo, o en posición vertical, porque se puede proyectar su
contenido.
d) Mueva el tubo cuidadosamente, sin sacarlo de la flama, para que todo el líquido se ca-
liente de la manera más uniforme posible.
e) Durante el calentamiento, dirija la boca del tubo hacia un lugar en que no se en-
cuentre ninguna persona o material que se pueda dañar.
f) Jamás mire directamente la boca de un tubo de ensaye que se está calentando,
aunque esté fuera de la flama del mechero.
g) Continúe el calentamiento hasta lograr que el agua hierva, sin proyectarse.
h) Nunca caliente solventes orgánicos en tubo de ensaye, directamente en la flama
del mechero; siempre se hace en baño maría.
Cuestionario
1. Elabore un esquema de la forma correcta de calentar un líquido en un tubo de ensaye.
Manejo de reactivos líquidos.
Desarrollo
a) Cuando se miden cantidades pequeñas de reactivos líquidos, se usan pipetas gradua-
das o volumétricas. Para manejar con seguridad reactivos líquidos con pipeta, se
usa siempre la pre-pipeta.
b) Al abrir un frasco de reactivo, coloque el tapón sobre la mesa para evitar contaminación.
c) Para extraer el líquido utilice una pipeta o un gotero limpios, Nunca vierta reactivos, di-
rectamente del frasco para evitar escurrimientos.
d) Usando la pipeta de 10 mL, transfiera 5 mL de agua de un vaso de precipitados a un tu-
bo de ensaye. Repita la maniobra hasta que pueda realizarla con seguridad.
e) Para manejar cantidades mayores de líquidos se usa la bureta. Siguiendo las instruc-
ciones de su profesor, monte la bureta en el soporte universal. La graduación debe
quedar hacia adelante.
f) Usando un vaso de precipitados, llene completamente la bureta con agua de la llave.
No importa que rebase la graduación, pero tenga cuidado de que el agua no se derra-
me.
g) Coloque el vaso de precipitados debajo de la bureta y usando la mano izquierda abra
completamente la llave de esta para que el agua salga con velocidad y arrastre todo el
aire del cuerpo de la bureta y de la llave.
h) Vuelva a llenar la bureta y ajuste el nivel superior a la graduación.
i) El uso más frecuente de la bureta es la titulación, en la cual se añade el reactivo gota a
gota. Usando un matraz Erlenmeyer para recibir el agua, practique a abrir la llave de la
bureta, siempre con la mano izquierda, hasta obtener velocidades de goteo constantes
y a cerrarla cuando sea necesario. Es conveniente que al realizar esta maniobra utilice
guantes de cirugía porque los reactivos que se usarán en las prácticas de laboratorio
pueden causar daño al entrar en contacto con la piel.

j) El otro uso de la bureta es para añadir cantidades medidas de reactivo. Coloque un va-
so de precipitados debajo de la bureta y practique a vaciar la bureta, 5 mL cada vez.
Recuerde que la llave se maneja únicamente con la mano izquierda. Nunca debe dejar
que la bureta se vacíe completamente, pero si esto llegara a suceder, debe reiniciar el
trabajo, en la forma como se indicó en los incisos f, g y h de este ejercicio.
Cuestionario
1. Escriba la forma como preparó su pre-pipeta.
2. Elabore un esquema de la forma correcta de montar la bureta.
3. Explique porque se maneja la llave de la bureta con la mano izquierda.
Manejo de reactivos sólidos.
Desarrollo
a) Prepare una “charola de papel”, usando una hoja de papel limpio, si es posible encera-
do. La charola se prepara doblando el papel, aproximadamente a un centímetro de cada
borde, y colocándolos en ángulo recto para formar una pared alrededor del papel. El
tamaño de la charola depende de la cantidad de reactivo a pesar.
b) Encienda la balanza y espere a que se estabilice la lectura, si no está en cero, ajústela
usando el botón de tarar (T)
c) Coloque la charola de papel en el plato de la balanza. Cuando se estabilice la lectura,
tare a cero la balanza.
d) Abra el recipiente de reactivo y coloque la tapa sobre la mesa, boca arriba para evitar
contaminación.
e) Usando una espátula, saque el reactivo del recipiente y colóquelo sobre la charola de
papel. Si se rebasa la cantidad deseada, regrese el exceso de reactivo a su recipiente,
usando la espátula. Nunca regrese al recipiente original un reactivo que se derrame fue-
ra de la charola de papel o sobre la mesa.
f) Al terminar de pesar, cierre inmediatamente el frasco de reactivo para evitar que se
hidrate y contamine.
g) Pese la cantidad de Cloruro de Sodio (NaCl, sal de mesa) que le indique su profesor y
colóquela en el sobre de papel que se le proporcione. Escriba en el sobre, la cantidad
de reactivo que contiene y entréguelo a su profesor.
Cuestionario
1. Elabore un diagrama de la balanza, señalando la posición del botón de encendido y
apagado, del botón de tara y el de registro (R).
2. ¿Cuál es la función del botón de registro?
Como tarar tubos para centrifugación.
Desarrollo
a) En este ejercicio se usará la balanza de dos platillos.
b) Coloque las pesas de medición en la posición de cero. Asegúrese que la aguja o fiel de
la balanza esté en posición cero. Si no lo está gire cuidadosamente las pesas de ajuste
en el sentido que sea necesario, hasta lograr el equilibrio.

c) Coloque un frasco Gerber en cada platillo, cuidando que el más pesado quede en el
platillo del lado izquierdo.
d) Deslice las pesas de medición de la balanza, hasta lograr que el fiel vuelva a la posición
de equilibrio.
e) Coloque en cada frasco, una camisa de la centrífuga con un tubo de centrifuga que con-
tenga 5 mL de agua.
f) Si el fiel de la balanza sale de equilibrio, usando una pipeta, añada agua de la llave, en-
tre la camisa y el tubo de ensaye más ligero, hasta lograr que el fiel de la balanza re-
grese al equilibrio.
g) Coloque los tubos tarados en la centrifuga, en posiciones simétricas y póngala a funcio-
nar al máximo de revoluciones durante 3 minuto.
Cuestionario
1. Elabore un esquema de la balanza de platillo, señalando la posición de las pesas de
ajuste y las de medición.
2. Escriba la razón por la que es necesario tarar los tubos antes de centrifugar.

SOLUCIONES
Medida de la presión osmótica. Método directo
Material Reactivos
Saco de colodión grande Sacarosa 6 M con rojo de Fenol
Tubo capilar con tapón (ρ = 1.325 g / cm3)
Vaso de precipitados de 500 mL Agua
Soporte Universal
Pinza para bureta
Desarrollo
a) El osmómetro que se encuentra en la mesa al frente del laborato-
rio, consiste en el cuerpo de una jeringa, cerrada con una membra-
na de colodión grande previamente preparado, conteniendo Saca-
rosa 6 M, teñida con rojo neutro. En la jeringa se fija un tubo capi-
lar. El dispositivo se sumerge en un vaso de precipitados con agua.
b) Marque el nivel inicial de la Sacarosa en el tubo capilar.
c) Observe el nivel de la solución cada 10 minutos, hasta que se de-
tenga el proceso, anotando la altura ascendida en cada intervalo
en la tabla siguiente.
Tiempo Altura Tiempo Altura Tiempo Altura
min cm min cm min cm
10 50 90
20 60 100
30 70 110
40 80 120
Cuestionario
1. ¿Cuándo debe detenerse la ósmosis?
2. ¿La presión en el osmómetro depende de la altura o del radio de la columna de solu-
ción?
3. Con los datos obtenidos, calcule la presión osmótica () a cada tiempo sabiendo que la
densidad de la solución de Sacarosa es 1.088 g/mL y la aceleración de la gravedad es
9.81 m s-2. Anote los resultados en la tabla siguiente.
Tiempo  Tiempo  Tiempo  Tiempo 
min Pa min Pa min Pa min Pa
10 40 70 100
20 50 80 110
30 60 90 120
4. Construya la gráfica de presión osmótica en función del tiempo.
Preparación de una solución de NaCl 2% p/v

Material Reactivos
Matraz aforado de 50 o 25 mL NaCl (cloruro de sodio) sólido
Pipetas de 10, 5 y 1 mL agua destilada
Soluciones mlvm / maov / 6
Desarrollo
a) Calcule el volumen de una solución de NaCl de concentración 2%, que se puede prepa-
rar con la cantidad de cloruro de sodio sólido que le proporcionen, considerando que el
reactivo tiene 100% de pureza.
b) Anote a continuación los mL de solución de NaCl que preparara.
gramos de NaCl ______________ g

Volumen de solución __________ mL
c) En un vaso de precipitados de 100 mL disuelva el cloruro de sodio en una cantidad de
agua destilada menor que el volumen final de solución y viértalo en un matraz aforado
del volumen adecuado.
d) Con un vaso de precipitados de 100 mL llene el cuerpo del matraz aforado con agua
destilada, sin llegar al cuello. Para llenar el matraz hasta la marca de aforo, utilice una
pipeta de 5 ó 10 mL
e) Guarde esta solución porque la utilizará en el experimento de Diálisis.
Cuestionario
1. Describa detalladamente los cálculos realizados.
2. Considerando que la solución es exactamente 2%, calcule su concentración en:
Molaridad
Normalidad
Osmolaridad
mEq/mL
mg/mL
moles %
Diálisis
Material Reactivos
Saco de colodión pequeño NaCl 2% preparado por su equipo
Pipeta 10 o 5 mL Almidón 2%
Vaso de precipitados de 500 mL Solución de Lugol
hilo de algodón Solución de AgNO3 (nitrato de plata)
12 tubos de ensayo agua destilada
Desarrollo
a) En este experimento se utilizará la solución de NaCl 2% que preparó su equipo.
b) Humedezca un saco pequeño de colodión en agua destilada (mínimo 10 minutos) y ate
un extremo con el hilo de algodón que se le proporcionará.
c) Con las pipetas apropiadas, coloque 1 mL de NaCl 2% y 10 mL de Almidón 1% y ate
cuidadosamente el otro extremo del saco

d) Llene un vaso de precipitados de 500 mL con H2O destilada
hasta 2/3 partes de su capacidad
e) Prepare dos tubos de ensayo, uno con 2 mL de NaCl al 2%
y agréguele 2 gotas de AgNO3 (nitrato de plata), al otro tu-
bo agréguele 2 mL de solución de almidón al 1% y 2 gotas
de solución de Lugol. Rotúlelos como testigo + de cloru-
ros y almidón respectivamente
f) En un tubo de ensaye coloque 2 mL del agua contenida en
el vaso y añada 2 gotas de Lugol. En ausencia de almidón
la solución se torna de color amarillo.
g) En otro tubo coloque 2 mL del agua contenida en el vaso y
añada 2 gotas de AgNO3 Sin cloruros, la solución permanece translúcida.
h) Coloque el saco con Almidón y NaCl en el vaso de precipitados.
i) Después de introducir el saco, determine la presencia de Almidón y/o Cl- en el agua
destilada cada 30 minutos, como hizo en los incisos e y f, hasta completar 2 horas.
j) Los testigos negativos t(-) para Almidón y Cl-, serán las muestras tomadas a tiempo
cero, antes de introducir el saco.
k) Anote los resultados en la tabla siguiente.
Tiempo/min 0 Testigo (-) 30 60 90 120 Testigo (+)
Cl–
Almidón
l) No deseche los tubos, para comparar los resultados a los diferentes tiempos.
Cuestionario
1. Escriba si al final dializaron el Almidón y los Cl- a través de la membrana.
2. Anote las reacciones químicas que usó para detectar Almidón y Cl-.
Preparación de una solución de CH3COOH 0.5M
Material Reactivos
Matraz aforado de 100 mL CH3COOH (ácido acético) grado reactivo
Pipetas de 10,5 y 1 mL Agua destilada
Desarrollo
a) Calcule el volumen de una solución de CH3COOH comercial, con PM = 60, pureza =
99.7% y densidad a 20° C de 1.06 g/mL, que necesita para preparar 100 mL de solu-
ción 0.5M de CH3COOH
b) Anote el volumen de CH3COOH que usará para preparar la solución.
mL de CH3COOH = __________ mL
c) Usando una pipeta, mida el volumen calculado de ácido acético y colóquelo en un ma-
traz aforado de 100 mL limpio y seco. Mida la cantidad con la mayor precisión y cuidado
posibles.

d) Con un vaso de precipitados de 100 mL llene el cuerpo del matraz aforado con agua
destilada, sin llegar al cuello. Para llenar el matraz hasta la marca de aforo de 100 mL,
utilice una pipeta de 5 ó 10 mL.
e) Rotule y guarde esta solución porque la utilizará en el experimento de Titulación
directa.
Cuestionario
1. Describa detalladamente los cálculos que realizó para conocer el volumen de
CH3COOH concentrado que utilizó para preparar 100 mL de dicha solución.
2. Considerando que la solución es exactamente 0.5M calcule su concentración en:
% (p/v)
Normalidad
Osmolaridad
mmoles/L
mg/L
mEq%
Titulación directa
Material Reactivos
Matraz aforado de 100 mL CH3COOH 0.5M preparado por su equipo
Pipeta volumétrica de 10 o 5 mL indicador de Fenolftaleína
Bureta NaOH (hidróxido de sodio) 0.2N
agua destilada
Desarrollo
i.En este experimento se utilizará la solución de CH3COOH 0.5 M que preparó su equipo.
ii.En un matraz Erlenmeyer de 250 mL coloque 10 mL de la solución de CH3COOH 0.5 M,
usando una pipeta volumétrica.
iii.Añada 3 gotas de Fenolftaleína.
iv.Monte la Bureta en el soporte universal, usando la pinza para bure-
ta.
v.Usando un vaso de precipitados de 100 mL, llene la bureta con
NaOH (hidróxido de sodio) 0.2 N. Recuerde que no debe dejar
burbujas de aire dentro de la bureta.
vi.Titule dejando caer gota a gota el hidróxido dentro del matraz Er-
lenmeyer, hasta que la solución adquiera un ligero color rosa,
que persista por 30 segundos. Anote el volumen hasta ese mo-
mento y añada una gota más, la solución debe tomar un color ro-
sa intenso.
vii.Anote los mL de NaOH 0.2N que gastó para neutralizar los 10 mL
de CH3COOH.

Resultado = _______________ mL de NaOH 0.2N
Cuestionario
1. Considerando que la solución de NaOH es exactamente 0.2N, calcule la verdadera
normalidad del CH3COOH problema.
Difusión en líquidos
Material Reactivos
Probeta de 100 mL Azul de Metileno en polvo
Mechero Bunsen agua
Desarrollo
a) Llene casi completamente una probeta de 100 mL con
agua de la llave.
b) Espolvoree una pequeña cantidad de azul de metile-
no sobre la superficie y observe. Anote sus observa-
ciones.
c) Caliente ligeramente un punto de la probeta y observe

lo que sucede. Anote sus observaciones.
d) Observe el descenso del colorante a través de la columna de agua, anote si es unifor-

me o no antes y después de calentar.
Cuestionario
1. Escriba el concepto de disolución, difusión y convección.
2. Elabore una tabla donde resuma 3 características que permitan diferenciar los tres fe-
nómenos anteriores

SOLUCIONES ELECTROLÍTICAS y pH
Disociación de una sal y Electrolisis del agua
Material Reactivos
Cristalizador NaCl 10% (50 mL)
Puente de Wheatstone Azul de Bromofenol
Electrodos de carbón agua destilada
matraz de 500 mL
Probeta de 50 mL
Desarrollo
a) Coloque el cristalizador sobre un fondo
blanco y agregue 50 mL de solución de
NaCl 10%.
b) Introduzca en la solución los electrodos
de carbón conectados a una fuente de
energía como el Puente de Wheatstone
(ver esquema ).
c) Observe si se desprende o no, gas en los
electrodos y anote en cual.
d) Agregue 3 gotas de Azul de Bromofenol como indicador. Este indicador es amarillo a

pH por debajo de 3 y azul o púrpura a pH mayor
e) Observe los cambios de coloración cerca de los electrodos y anótelos.
Cuestionario
1. Anote a que se deben los cambios de color del indicador.
2. Escriba las reacciones químicas que se llevan a cabo en cada electrodo.
Conducción de corriente en electrolitos fuertes y débiles
Material Reactivos
Vaso de precipitados de 100 mL Solución de HCl (ácido clorhídrico) 0.5 M
caimanes con alambre Solución de CH3COOH (ácido acético) 0.5 M
Puente de Wheatstone
Electrodos de carbón
Soluciones Electrolíticas y pH mlvm / maov / 11

Desarrollo
a) Coloque la solución de CH3COOH 0.5 M
en un vaso de precipitados, en cantidad
suficiente para cubrir la tercera parte de
los electrodos.
b) Introduzca los electrodos conectados a
una fuente de energía (ver esquema ).
c) Registre la intensidad de la luz emitida por
el foco
d) Aproxime los electrodos, sin que se to-
quen y observe la intensidad de la luz
emitida.
d) Devuelva la solución de CH3COOH 0.5 M al frasco correspondiente.
Cuestionario
1. Escriba que relación existe entre la intensidad luminosa y la distancia que separa los
electrodos, y explique porqué.
Desarrollo (continuación)
e) Lave bien el material y repita el experimento, incisos a, b, c y d, usando HCl 0.5 M.
f) Compare la intensidad de la luz emitida al usar esta solución respecto del CH3COOH.
Anote sus observaciones.
g) Devuelva la solución de HCl 0.5 M al frasco correspondiente.
Cuestionario (continuación)
2. Anote a que se deben las diferencias en la intensidad de la luz emitida
Diferencia de conductividad entre electrolitos débiles y fuertes
Material Reactivos
Pipetas de 10 mL Solución de HCl 0.5 M
Medidor de Conductividad Solución de CH3COOH 0.5M

Desarrollo
a) Siguiendo las instrucciones de su profesor determine la conductividad de HCl 0.5 M y
CH3COOH 0.5 M.
b) Cuando termine de usar cada solución devuélvala al frasco correspondiente.
Cuestionario
1. Compare los valores de conductividad y concluya respecto de la fuerza de cada electro-
lito.
Preparación de soluciones de pH conocido con electrolitos fuertes y

débiles.
Material Reactivos
Matraz aforado de 250 y 100 mL CH3COOH grado reactivo
vaso de precipitados de 100 mL HCl grado reactivo
Pipetas de 1 y 10 mL H2O destilada
Desarrollo
a) Empleando la fórmula para ácidos débiles, calcule la concentración de cinco soluciones
de CH3COOH de pH 2.72, 2.87, 3.02, 3.17 y 3.37.
b) Calcule los volúmenes de CH3COOH con 99.7% de pureza, densidad = 1.06 g/mL y
pKa = 4.74, necesarios para preparar 250 mL de cada una de las cinco soluciones de
pH conocido calculadas en el inciso anterior (a).
c) Empleando la fórmula para ácidos fuertes, calcule la concentración de cinco soluciones
de HCl de pH 0.7, 1, 1.3, 1.6 y 2
d) Calcule los volúmenes de HCl con 37% de pureza y densidad = 1.18 g/mL, necesarios
para preparar 250 mL de cada una de las cinco soluciones de pH conocido calculadas
en el inciso anterior (c).
e) Prepare las soluciones de HCl y CH3COOH que le indique su profesor y mida el pH de
cada solución por el método potenciométrico.
Solución pH Teórico pH Potenciométrico

CH3COOH
HCl
f) Guarde las soluciones preparadas para usarlas en el experimento siguiente.

Acidez de titulación
Material Reactivos
Matraz Erlenmeyer de 250 mL Solución de NaOH 0.1N
Bureta Solución de HCl preparada por su equipo
Solución de CH3COOH preparada por su equipo
Fenolftaleína
Desarrollo
a) Mida exactamente 10 mL de la solución de CH3COOH, preparada
en el experimento anterior y colóquelos en un matraz Erlenmeyer
de 250 mL.
b) Añada 3 gotas de Fenolftaleína y titule la muestra con NaOH
0.1N.
c) Mida exactamente 10 mL de la solución de HCl, preparada en el
experimento anterior y colóquelos en un matraz Erlenmeyer de
250 mL.
d) Añada 3 gotas de Fenolftaleína y titule la muestra con NaOH
0.1N.
e) Anote sus resultados en el cuadro siguiente.
Solución pH Gasto de NaOH 0.1N

CH3COOH
HCl
Cuestionario
1. Describa los conceptos de acidez total y acidez verdadera.
2. Explique sus resultados experimentales, tomando como base los conceptos anteriores.

SOLUCIONES REGULADORAS
Apreciación del poder regulador y efecto de la concentración
Material Reactivos
12 tubos de ensayo KCl (cloruro de potasio) 0.5M
Pipeta de 10 ó 5 mL KH2PO4 (fosfato de potasio monobásico)
Pipeta de 1 mL 0.01 M y 0.1M
Na2HPO4 (fosfato de sodio dibásico) 0.01 M
y 0.1M
Indicador de Rojo de Fenol
Indicador de Verde de Bromocresol
Indicador de Azul de Timol
HCl 0.01N y 0.1N
NaOH 0.01N y 0.1N
Fenolftaleína
Desarrollo
a) Prepare 3 series de cuatro tubos cada una con la composición siguiente.
Serie
Tubo I II III
1 5 mL H2O hervida 5 mL H2O hervida 5 mL H2O hervida
2 5 mL KCl 0.5M 5 mL KCl 0.5M 5 mL KCl 0.5M
2 mL KH2PO4 0.01M + 2 mL KH2PO4 0.01M + 2 mL KH2PO4 0.01M +
3
3 mL Na2HPO4 0.01M 3 mL Na2HPO4 0.01M 3 mL Na2HPO4 0.01M
2 mL KH2PO4 0.1M + 2 mL KH2PO4 0.1M + 2 mL KH2PO4 0.1M +
4
3 mL Na2HPO4 0.1M 3 mL Na2HPO4 0.1M 3 mL Na2HPO4 0.1M
Indicador Rojo de fenol Verde de Bromocresol Azul de timol
b) Serie I. Compruebe que el pH es neutro añadiendo a cada tubo 5 gotas de Rojo de Fe-
nol. Este indicador vira de amarillo a rojo en el rango de pH de 6.4 a 8.0. A pH neutro es
rosa pálido.
c) Serie II. Añada a cada uno de los tubos, 5 gotas de Verde de Bromocresol. Este indica-
dor vira de amarillo a verde en el rango de pH de 3.8 a 5.4, y a azul a pH mayor. Añada
al tubo 1, 10 gotas de HCl 0.01N, y observe el cambio de color. Cuente el número de
gotas, de HCl 0.01N que debe agregar al tubo 2 para igualar el color del tubo 1. Para
los tubos 3 y 4 cuente las gotas de HCl 0.1N que debe agregar para igualar el color del
tubo 1. Anote sus resultados en la tabla siguiente, multiplicando el número de gotas del
HCl 0.1N por diez para poder comparar con los tubos 1 y 2.
d) Serie III. Agregue a los cuatro tubos, 5 gotas de Azul de Timol. Este indicador vira de
amarillo a azul en el rango de pH de 8.0 a 9.6. Agregue al tubo 1, 10 gotas de NaOH
0.01N. Cuente el número de gotas de NaOH 0.01N que debe agregar al tubo 2 para
igualar el color del tubo 1. Para los tubos 3 y 4 cuente las gotas de NaOH 0.1N que de-
be agregar para igualar el color del tubo 1. Anote sus resultados en la tabla, multiplican-
do el número de gotas del NaOH 0.1N por diez, para poder comparar con los tubos 1 y
2.
Soluciones Reguladoras mlvm / maov / 15

Serie Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4

II
III
Cuestionario
1. Escriba que indica el cambio de color en cada una de las series y la razón de la diferen-
cia, en las cantidades ácido y base que hay que agregar a los tubos 2, 3 y 4 de cada
serie, para igualar la coloración con el tubo 1.
2. Escriba las reacciones que ocurren al añadir, el ácido y la base fuertes al sistema amor-
tiguador de fosfatos de las series II y III.
Curva de titulación de Glicina
Material Reactivos
2 vasos de precipitados de 100 mL Glicina 0.1N
Pipeta de 10 mL NaOH 0.1N
Probeta de 50 mL HCl 0.1N
Agitador magnético
Potenciómetro
Bureta
Desarrollo
a) En un vaso de precipitados de 100 mL, coloque 30
mL de Glicina 0.1N.
b) Introduzca en la solución una barra magnética y co-
lóquela sobre el agitador.
c) Determine el pH de la muestra con el potenciómetro.
(ver esquema )
d) Titule añadiendo los volúmenes de HCl 0.1N que se
indican en la tabla siguiente.
e) Registre sus resultados en la tabla.
mL agregados de pH de la mL agregados de pH de la
HCl 0.1N solución de HCl 0.1N solución de
Añadido Acumulado Glicina Añadido Acumulado Glicina
0 0 4 15
0.5 0.5 5 20
0.5 1 5 25
1 2 2 27
2 4 1 28
3 7 1 29
4 11 1 30
f) En un vaso de precipitados limpio de 100 mL, coloque 30 mL de Glicina 0.1N.
g) Introduzca en la solución una barra magnética y colóquela sobre el agitador.

h) Determine el pH de la muestra con el potenciómetro.
i) Titule añadiendo los volúmenes de NaOH 0.1N que se indican en la tabla siguiente.
j) Registre sus resultados en la tabla.
mL agregados de pH de la mL agregados de pH de la
NaOH 0.1N solución de NaOH 0.1N solución de
Añadido Acumulado Glicina Añadido Acumulado Glicina
0 0 4 15
0.5 0.5 5 20
0.5 1 5 25
1 2 2 27
2 4 1 28
3 7 1 29
4 11 1 30
Cuestionario
1. Elabore la gráfica de pH en función del volumen acumulado de HCl y NaOH.
2. En la curva de titulación, calcule los pKa de los grupos amino y carboxilo.
3. Compare los pKa obtenidos en la curva, con los valores teóricos para Glicina y calcule el
punto isoeléctrico real y experimental.
Preparación de soluciones amortiguadoras de pH conocido.
Material Reactivos
2 vasos de precipitados de 100 mL KH2PO4 0.1M
Pipeta de 10 mL Na2HPO4 0.1M
Probeta de 50 mL
Potenciómetro
Desarrollo
a) Calcule los volúmenes de KH2PO4 0.1M y Na2HPO4 0.1M necesarios para preparar 50
mL de soluciones amortiguadoras con pH de: 6.2, 6.6, 7.0, 7.2, 7.4, 7.8 y 8.2. El pKa del
par conjugado es de 7.2.
b) Tomando como base el resultado de sus cálculos, prepare la solución que le indique su
profesor y compruebe el valor de pH con el potenciómetro.
Cuestionario
1. Describa el procedimiento de preparación de la solución.

PROTEÍNAS
Determinación del punto isoeléctrico de la Caseína
Material Reactivos
10 tubos de ensayo Caseína 5% en CH3COONa 0.1N
Pipetas de 10 mL CH3COOH 1N
Pipetas de 5 mL CH3COOH 0.1N
Pipetas de 1 mL CH3COOH 0.01N
H2O Destilada
Desarrollo
a) Preparar una serie de 10 tubos de ensayo, con las soluciones que se indican en la tabla
de la página siguiente.
Tubo
Solución 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
mL de Caseína 5% en CH3COONa
0.1N 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
mL de H2O Destilada 8.4 7.8 8.8 8.5 8.0 7.0 5.0 1.0 7.4 9.0
mL de CH 3COOH 1N 1.6
mL de CH 3COOH 0.1N 0.2 0.5 1.0 2.0 4.0 8.0
mL de CH 3COOH 0.01N 0.6 1.2
pH Teórico
Observación a 15 min.
Observación a 30 min.
b) Mezcle completamente el contenido de cada tubo.

c) Observe el grado de turbidez o la precipitación que se produce en cada tubo inmedia-
tamente después de prepararlo y transcurridos 15' y 30', anotando en la tabla con cru-
ces.
d) Si no se observa diferencia en el grado de turbidez de los tubos, coloque las soluciones
en tubos de centrífuga y centrifugue 10 minutos a 1000 r.p.m. y anote las diferencias de
tamaño del precipitado de cada uno de los tubos.
Cuestionario
1. Calcule el pH teórico de cada tubo y anótelo en la tabla, marcando el punto Isoeléc-
trico de la Caseína.
Proteínas mlvm / maov / 18

Reacción de Ninhidrina.
Material Reactivos
Papel Whatman #1 Ninhidrina en Butanol al 0.1%
Glicina 2%
Peptona 2%
Gelatina 2%
Caseína 2%
Albúmina 2%
agua destilada
Desarrollo
¡PRECAUCIÓN! Use guantes o pinzas para mani-
pular el papel.
a) Numere 7 rectángulos de papel filtro Whatman #
1 y coloque 3 gotas de: (1) H2O como testigo ne-
gativo, (2) Glicina, (3) Peptona, (4) Gelatina, (5)
Caseína, (6) Albúmina y (7) la sustancia proble-
ma. Todos al 2%.
b) Con lápiz, anote debajo de cada muestra el nom-
bre del compuesto y añádale una gota de solu-
ción de Ninhidrina en Butanol al 0.1%.
c) Coloque las muestras en el horno a 110 °C du-
rante 5 min, cuidando que no disminuya la temperatura.
d) Anote la intensidad de la coloración obtenida, en la tabla resumen que se encuentra al
final del capítulo.
Cuestionario
1. Escriba la reacción química efectuada.
2. Escriba los nombres de otras sustancias que dan positiva la reacción de Ninhidrina,
además de proteínas, péptidos y aminoácidos.
Reacción del Biuret
Material Reactivos
6 tubos de ensayo CuSO4 (sulfato de cobre)1%
Pipetas de 5 mL NaOH 10%
Peptona 2%
Gelatina 2%
Caseína 2%
Albúmina 2%
agua destilada
Desarrollo
a) Numere 6 tubos de ensaye y agregue 2 mL de: (1) H2O como testigo negativo, (2) Pep-
tona, (3) Gelatina, (4) Caseína, (5) Albúmina y (6) la sustancia problema. Todos al 2%.
b) Añada a cada tubo, 2 mL de solución NaOH al 10%.
¡¡¡PRECAUCIÓN!!!

c) Añada 3 gotas de solución de CuSO4 al
1%, a cada tubo.
d) Mezcle completamente el contenido de
los tubos y déjelos reaccionar en reposo.
La aparición de una coloración violeta o
rosa, máximo en 20 minutos, se conside-
ra prueba positiva. La intensidad del co-
lor es proporcional al número de enlaces
petídicos.
e) Anote la intensidad de la coloración obtenida en la tabla resumen que se encuentra al
Reacción Xantoprotéica
Material Reactivos
6 tubos de ensayo HNO3 concentrado
Pipetas de 5 mL NH4OH (hidróxido de amonio) concentrado
Peptona 2%
Gelatina 2%
Caseína 2%
Albúmina 2%
agua destilada
Desarrollo
b) Con cuidado, añada al tubo uno, 1 mL de HNO3 concentrado, mezcle completamente.
c) Caliente ligeramente con precaución y observe si aparece una coloración amarilla.
d) Deje enfriar la solución y añada, resbalando por la pared del tubo, lenta y cuidado-
samente para estratificar, 15 gotas de NH4OH concentrado, para obtener alcalinidad,
observe si en la interfase aparece un anillo de color naranja.
e) Repita el experimento (incisos b, c y d) con el resto de los tubos.
f) Anote sus resultados en la tabla resumen que se encuentra al final del capítulo.
Cuestionario
1. ¿Se puede considerar esta reacción general para todas las proteínas?
2. Explique por qué se tiñe de amarillo la piel al contacto con el HNO3.
Reacción de Millon
Material Reactivos
6 tubos de ensayo Reactivo de Millon
Pipetas de 5 mL Peptona 2%
Gelatina 2%
Caseína 2%
Albúmina 2%
agua destilada

Desarrollo
a) Numere 6 tubos de ensaye y agregue 2 mL
de: (1) H2O como testigo negativo, (2) Pep-
tona, (3) Gelatina, (4) Caseína, (5) Albúmi-
na y (6) la sustancia problema. Todos al
2%.
b) Añada 5 gotas del reactivo de Millon a cada
tubo y mezcle completamente.
c) Con sumo cuidado, caliente cada tubo
hasta que empiece a hervir
¡¡¡PRECAUCIÓN!!!!
La presencia de Tirosina se pone de mani-
fiesto por la aparición de un precipitado
blanco que por acción del calor se vuelve
rojo. La presencia de sales, así como solu-
ciones muy alcalinas puede interferir en esta reacción.
d) Anote en que soluciones apareció el precipitado y su coloración, en la tabla resumen
que se encuentra al final del capítulo.
Cuestionario
1. Escriba la composición del reactivo de Millón.
2. Anote la reacción química que se llevó a cabo en este experimento.
Reacción de aminoácidos azufrados.
Material Reactivos
6 tubos de ensayo NaOH 10%
Pipetas de 5 mL Pb(CH3COO)2 (acetato de plomo)
Vaso de Precipitados de 500 mL Peptona 2%
Gelatina 2%
Caseína 2%
Albúmina 2%
agua destilada
Desarrollo
a) Numere 7 tubos de ensaye y agregue 2
mL de: (1) H2O como testigo negativo,
(2) Peptona, (3) Gelatina, (4) Caseína,
(5) Albúmina y (6) la sustancia problema.
Todos al 2%.
b) Añada a cada tubo 2 mL de solución de
NaOH al 10% y caliéntelo ligeramente.
¡PRECAUCIÓN!
c) Añada a todos los tubos, 0.5 mL de so-
lución de Pb(CH3COO)2.
d) Coloque los tubos en baño María a ebu-
llición por 5 min. El oscurecimiento de la

solución o la formación de un precipitado negro, indica la presencia de aminoácidos
azufrados.
e) Anote sus resultados en la tabla resumen que se encuentra a continuación.
Cuestionario
1. Escriba la reacción química que se ha efectuado.
2. Escriba algunas sustancias que pueden interferir en esta reacción
Resumen de propiedades químicas de aminoácidos

Solución Ninhidrina Biuret Xantoprotéica Millon Aa azufrados
Glicina
Peptona
Gelatina
Caseína
Albúmina
Problema
Precipitación de proteínas por metales pesados

Material Reactivos
6 tubos de ensayo FeCl3 (cloruro férrico) 3%
Pipetas de 5 mL AgNO3 2%
HgCl2 (cloruro mercúrico) 2%
Pb(CH3COO)2 2%
Peptona 2%
Gelatina 2%
Caseína 2%
Albúmina 2%
Desarrollo
a) Prepare una serie de 6 tubos de ensaye numerados y agregue 2 mL de: (1) H2O como
testigo negativo, (2) Peptona, (3) Gelatina, (4) Caseína, (5) Albúmina y (6) la sustancia
problema. Todos al 2%. H2O. Esta será su serie testigo en este y los experimentos si-
guientes.
b) Prepare otra serie de tubos igual a la del inciso anterior. A cada tubo de esta serie añá-
dale 2 gotas de solución de FeCl3 al 3%.
c) Observe y anote. A continuación añada a cada tubo exceso de FeCl3 (5 gotas más) si
no ocurre precipitación compruebe el pH.
d) Repita los incisos b y c utilizando AgNO3, HgCl2 y Pb(CH3COO)2, todos al 2%.
e) Anote sus resultados en la tabla resumen que se encuentra al final del capítulo.
Cuestionario
1. ¿Qué efecto tiene el pH en la precipitación de las proteínas con metales pesados?
2. ¿Todos los metales pesados tienen el mismo efecto precipitante?, ¿Por qué?

Precipitación de proteínas por ácidos fuertes.
Material Reactivos
6 tubos de ensayo CCl3COOH (ácido tricloroacético) 5%
Gelatina 2%
Caseína 2%
Albúmina 2%
Desarrollo
Su testigo negativo será la serie preparada en el inciso a del experimento anterior.
b) Añada 2 mL de CCl3COOH al 5%, a cada tubo.
c) Anote sus resultados en la tabla resumen que se encuentra al
Cuestionario
1. Anote el mecanismo del efecto desnaturalizante del CCl3COOH
y, en general, de cualquier ácido.
Precipitación por alcohol

Material Reactivos
6 tubos de ensayo Alcohol de 96°
Gelatina 2%
Caseína 2%
Albúmina 2%
Desarrollo
Su testigo negativo será la serie preparada en el inciso a del experimento de precipita-
ción por metales pesados.
b) A cada tubo, agregue resbalando cuidadosamente por la pared, 3 mL de alcohol de 96°
para estratificar, y observe lo que ocurre en la interfase.
c) Anote sus resultados en la tabla resumen que se encuentra a continuación.
Cuestionario
1. Anote si se presenta turbidez o precipitación en todos los tubos.

Agente
Solución Fe Hg Pb Ag CCl3COOH Alcohol
Peptona
Albúmina
Gelatina
Caseína
Problema

CINÉTICA QUÍMICA Y CATÁLISIS

Comprobación de la ley de acción de masas
Material Reactivos
1 vaso de precipitados de 500 mL NH4SCN (sulfocianuro de amonio) 0.2M
4 vasos de pp. de 100 mL FeCl3 0.2M en HCl 0.1N
Probeta de 100 mL NH4Cl (cloruro de amonio) 3M
Pipetas de 1 mL H2O Destilada
Desarrollo
a) En un vaso de precipitados de 500 mL, coloque 100 mL de H2O destilada, más 1 mL de
solución de NH4SCN 0.2M y 1 mL de solución de FeCl 3 0.2M en HCl 0.1N, y agite vigo-
rosamente hasta mezclar completamente. Se observará la aparición de un color rojo,
debido a la formación de Sulfocianuro férrico (Fe(SCN)3). Esta será la mezcla reaccio-
nante (M.R.)
b) Numere cuatro vasos de pp. de 100 mL, y coloque en cada uno, 25 mL de la M.R.
c) Agregue a cada vaso el volumen de la sustancia indicada en la tabla siguiente:
vaso mL de FeCl3 0.2M mL de NH4SCN 0.2M mL de NH4Cl 3M Color

1 0.5 0.5
2 1.0 1.0
3 5.0
4 Solución M.R. (testigo)
Cuestionario
1. Observe la intensidad de la coloración en cada vaso y anótela en la tabla.
2. Explique sus resultados, con base en la ley de Acción de Masas.
3. Para cada uno de los vasos, escriba la reacción química que se ha efectuado, y su di-
rección.
Velocidad de descomposición del H2O2
Material Reactivos
3 matraces Erlenmeyer de 250 mL solución problema de H202 (peróxido de
Pipetas de 10 mL hidrógeno)
Vaso de precipitados de 250 mL H2SO4 (ácido sulfúrico) 1:6
Probeta de 100 mL KMnO4 (permanganato de potasio) 0.01M
Sangre desfibrinada al 0.06%
H2O Destilada
Desarrollo
a) En un matraz Erlenmeyer de 250 mL, coloque, 5 mL de la solución problema de H202
(Peróxido de hidrógeno) y 2 mL de H2SO4 (Ácido sulfúrico) 1:6.
b) Caliente la mezcla CASI a ebullición. ¡PRECAUCIÓN, SE LIBERAN GASES IRRITAN-
TES!.
c) En caliente, titule con una solución de KMnO4 0.01M. El punto final de la titulación lo
observará cuando persista un color rosa ligero, por exceso de la solución de perman-
Cinética Química y Catálisis mlvm / maov / 25

ganato. El H2SO4, y el calentamiento tienen por objeto impedir la formación de MnO2
(Óxido de Manganeso) café.
d) Repita los incisos a, b y c, para tener la medición por duplicado.
e) Anote el promedio de los dos gastos en la tabla resumen, como gasto a tiempo cero.
f) A continuación en un vaso de precipitados de 250 mL, coloque 50 mL de sangre desfi-
brinada al 0.06 % y 50 mL de la solución problema de H202, mezcle perfectamente.
g) 5 minutos después de preparar la mezcla, tome una alícuotas de 10 mL y transfiérala, a
un matraz Erlenmeyer de 250 mL, añada 2 mL de solución de H2SO4 1:6. Titule en con
solución de KMnO4 0.01 M, como en el inciso (c)
h) Repita el procedimiento del inciso anterior (g) 10, 20, 30 y 40 minutos, después de pre-
parada la mezcla, anotando los gastos de KMnO4 en la tabla siguiente.
Tiempo/min gasto de KMnO4 0.01M (mL) H2O2 / M

0
5
10
20
30
40
Cuestionario
1. Escriba las reacciones químicas que se han efectuado.
2. Determine el orden de reacción.
Influencia de la temperatura sobre la velocidad de una reacción química
Material Reactivos
1 matraz Erlenmeyer de 250 mL KI (yoduro de potasio) sólido
Bureta 50 mL H2SO4 1:6
Pipetas de 10 mL solución de Almidón
Pipetas de 5 mL Na2S2O3 (tiosulfato de sodio) 0.02N
5 vasos de precipitados de 150 mL H202 0.2 %
H2O Destilada
Desarrollo
a) En un matraz Erlenmeyer de 250 mL, co-
loque 0.25 g de KI y añada 25 mL de so-
lución de H2SO4 1:6 (DE UNA BURETA
DE 50 mL QUE USARA TODO EL
GRUPO) Agite hasta disolución completa
y agregue 25 mL de H2O destilada para
completar 50 mL. Esta solución se de-
nominará "solución de HI (ácido yod-
hídrico)" y se utilizará en este experimen-
to y en el próximo.

b) En un vaso de precipitados de 100 mL coloque 5 mL de la solución HI y añada 1.5 mL
Na2S2O3 0.02N y 5 gotas de solución de Almidón. Mezcle perfectamente el contenido.
c) Agregue 2 mL de H202 0.2 %, agite rápidamente hasta homogeneizar. Deberá medir
con la mayor precisión posible, el tiempo desde el momento en que añadió el H2O2 al
0.2 %, hasta que aparece súbitamente un color azul intenso (puede ser café o amarillo)
Este resultado corresponde al vaso 2 de la tabla siguiente (temperatura ambiente)
Solución Vaso 1 Vaso 2 Vaso 3 Vaso 4 Vaso 5

HI (mL) 5 5 5 5 5
Na2S2O3 0.02N (mL) 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5
Almidón (gotas) 5 5 5 5 5
T en °C, de pre-incubación 0 (hielo) 20 (ambiente) 40 60 80
H2O2 0.2% (mL) 2 2 2 2 2
d) Repita los incisos b y c utilizando las temperaturas indicadas en la tabla para los vasos
1, 3, 4 y 5. Cuando la mezcla haya alcanzado la temperatura deseada, dispare la re-
acción añadiendo 2 mL de H2O2 al 0.2 %, manteniendo el vaso en incubación a la
temperatura indicada.
e) Escriba sus resultados en la tabla siguiente.
Temperatura (ºC) 0 (hielo) 20 (ambiente) 40 60 80
Tiempo de reacción (s)
Cuestionario
1. Escriba las reacciones químicas que se han efectuado.
3. Con los datos de esta tabla trace la gráfica, de la inversa del tiempo de reacción en fun-
ción de la temperatura.
Efecto del pH sobre la velocidad de una reacción química.

Material Reactivos
Pipetas de 10 mL Solución "HI" del experimento anterior
Pipetas de 5 mL solución de Almidón
5 vasos de precipitados de 150 mL Na2S2O3 0.02N
H202 0.2 %
H2O Destilada
Desarrollo
a) En un vaso de precipitados de 100 mL co-
loque 5 mL de la solución “HI" preparada
en el experimento anterior, añada 1.5 mL
Na2S2O3, 5 mL de H2O destilada y 5 gotas
de solución de Almidón. Mezcle perfecta-
mente el contenido.
b) Agregue 2 mL de H202 0.2 %, agite rápi-
damente hasta homogeneizar. Deberá me-
dir con la mayor precisión posible, el tiem-
po desde el momento en que añadió el

H2O2 al 0.2 %, hasta que aparece súbitamente un color azul intenso. Este resultado co-
rresponde al vaso 1 de la tabla siguiente.
Solución Vaso 1 Vaso 2 Vaso 3 Vaso 4 Vaso 5

HI (mL) 5 5 5 5 5
Na2S2O3 0.02N (mL) 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5
Almidón (gotas) 5 5 5 5 5
Agregar 5 mL de: H2O HCl 0.01N HCl 0.1N HCl 1N HCl 2N
H2O2 0.2% (mL) 2 2 2 2 2
c) Repita los incisos (a) y (b) sustituyendo el agua del inciso (a) por 5 mL de HCl con las
concentraciones indicadas en la tabla para los vasos 2, 3, 4 y 5.
d) Anote sus resultados en la siguiente tabla.
[H+] 1 x 10-7 1 x 10-2 1 x 10-1 1 2

Tiempo (s)
Cuestionario
1. Trace la gráfica del tiempo de reacción en función de la [H+]
2. Trace la gráfica de inversa del tiempo de reacción en función del pH
Efecto de un catalizador inorgánico sobre la velocidad de hidrólisis de
la Sacarosa
Material Reactivos
Pipetas de 10 mL Sacarosa 0.05M
Pipetas de 5 mL H2SO4 1:6
5 tubos de ensayo NaOH 10%
Baño María a Ebullición Solución de Fehling “A"
Solución de Fehling "B"
H2O Destilada
Desarrollo
a) Prepare cuatro tubos de ensayo, siguiendo las
instrucciones de la tabla siguiente. Recuerde
mezclar completamente el contenido de los
tubos después de añadir cada reactivo.
Tubo 1 2 3 4
Sacarosa 0.05 M / mL 5 5
H2O destilada / mL 5 5
H2SO4 1:6 / gotas 6 6
b) Coloque todos los tubos en un Baño María a
ebullición, durante 15 minutos.
c) Neutralice el ácido de los tubos 1 y 3 añadiendo 2 mL de NaOH 10%. (la normalidad
aproximada de las soluciones es de 5.9 para el H2SO4 1:6 y 2.5 para el NaOH 10%).
Compruebe que se ha neutralizado el ácido, usando papel indicador de pH.

d) Añada a cada tubo 2 mL de Reactivo de Fehling “A” y 2 mL de Reactivo de Fehling “B” y
mezcle completamente.
e) Coloque todos los tubos en un Baño María a ebullición, durante 5 minutos.
f) Esta prueba se considera positiva con la presencia de precipitado rojo de Cu2O (óxido
cuproso). Anote sus resultados en la tabla siguiente.
Tubo 1 2 3 4
Resultado
Cuestionario
1. Anote la reacción de Fehling, sus resultados y conclusiones.
2. ¿Actúa el ácido sulfúrico como catalizador?. ¿Por qué?
Efecto de un catalizador biológico sobre la velocidad de degradación de
la Sacarosa
Material Reactivos
Pipetas de 10 mL Sacarosa 0.1N
Pipetas de 5 mL Regulador de CH3COONa pH = 4.7
5 tubos de ensayo Solución de Invertasa
Baño María a 40 °C Solución de Fehling “A"
Baño María a Ebullición Solución de Fehling "B"
H2O Destilada
Desarrollo
a) Prepare cuatro tubos de ensayo, siguiendo las instrucciones de la tabla siguiente. Re-
cuerde mezclar completamente el contenido de los tubos después de añadir cada reac-
tivo.
Tubo
Solución 1 2 3 4
Sacarosa 0.1N / mL 5 5
H2O destilada / mL 5 5
Sol. reguladora, pH = 4.7 1 1
b) Preincubar todos los tubos en Baño María a 40° durante el tiempo que sea necesario
para que la solución alcance la temperatura de 40°.
c) Añadir a todos los tubos 0.2 mL de solución de invertasa y mezclar completamente y
volver a colocar los tubos en el Baño Maria.
d) Incubar todos los tubos a 40° durante 15 minutos.
e) Añada a todos los tubos 2 mL de Reactivo de Fehling “A” y 2 mL de Reactivo de Fehling
“B” y mezcle completamente.
f) Coloque todos los tubos en Baño María a ebullición, durante 5 minutos.
g) Esta prueba se considera positiva con la presencia de precipitado rojo de óxido cupro-
so.
h) Anote sus resultados en la siguiente tabla:

Tubo 1 2 3 4
Resultado
Cuestionario
1. Compare los resultados con los del experimento anterior, anote sus observaciones.

CINÉTICA ENZIMÁTICA
Preparación de la solución de Amilasa
Material Reactivos
Matraz aforado de 100 mL Regulador de fosfatos pH 7
Una Pipeta de 10 mL Amilasa en polvo
Vaso de precipitados de 100 mL
Baño de hielo
Desarrollo
a) En un vaso de precipitados, disuelva la enzima que le proporcionen, en la mínima canti-
dad posible de regulador de fosfatos de pH 7. Vacíe la solución a un matraz aforado de
100 mL y afore con solución reguladora.
b) Conserve esta solución en baño de hielo. Esta es la solución de Enzima que se usará
en todos los experimentos.
Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática

Material Reactivos
7 tubos de ensaye Solución de enzima
2 pipetas de 1 mL Sustrato de almidón
2 pipetas de 5 mL Regulador de fosfatos de pH 7
1 vaso de precipitados de 600 mL Ácido 3,5-dinitrosalicílico
2 tubos Klett Agua destilada
Desarrollo
a) Prepare una serie de 7 tubos siguiendo las instrucciones de la tabla siguiente. Recuerde
mezclar perfectamente los tubos al añadir cada reactivo.
b) El tubo 1 será el testigo negativo t(-) por lo que antes de colocarle la enzima, se le
agrega 1 mL de ácido 3,5-dinitrosalicílico que actúa como inhibidor y como revelador de
color.
Tubo
Solución 1 t(-) 2 3 4 5 6 7
Sustrato de Almidón (8 mg/mL) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Solución reguladora de fosfatos 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5
0.02M pH = 7
Agua destilada 3 3 3 3 3 3 3
Preincubar 5 minutos a: 20°C 0°C 20°C 40°C 50°C 60°C 92°C
Ácido 3,5-dinitrosalicílico 1
Enzima 0.5 (b) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Incubar 15 minutas a: 20°C 0°C 20°C 40°C 50°C 60°C 92°C
Ácido 3,5-dinitrosalicílico 1 1 1 1 1 1
Baño María ebullición por 10 minutos
c) Después de los 10 minutos en baño María a ebullición, los tubos se enfrían al chorro
de agua y se leen en el espectrofotómetro a 540 nm, empleando el tubo 1 como
blanco para ajustar a cero.
Cinética Enzimática mlvm / maov / 31
d) En caso de que las lecturas salgan de la escala, es necesario diluir la mezcla reaccio-
nante 1 a 6 con agua destilada (1 mL de solución más 5 de agua), antes de leer.
e) Convierta la Densidad óptica en concentración molar de azucares reductores [AR],
usando la curva tipo que se le proporcionará. Sí es necesario, multiplique la concentra-
ción calculada por la dilución (por 6)
f) Escriba sus resultados en la tabla siguiente.
Tubo 1 2 3 4 5 6 7
Densidad óptica 0
[AR] 0
Cuestionario
1. Elabore la gráfica de [AR] en función de la Temperatura
2. En la gráfica obtenida, ubique la temperatura óptima de la enzima.
Efecto del pH sobre la actividad enzimática.
Material Reactivos
2 pipetas de 5 mL Regulador de fosfatos de pH 5, 6, 7, 8, 9
Desarrollo
a) Prepare una serie de 6 tubos, siguiendo las instrucciones de la tabla siguiente. Recuer-
de mezclar perfectamente los tubos al añadir cada reactivo.
agrega 1 mL de ácido 3,5 dinitrosalicílico que actúa como inhibidor y como revelador de
color.
Tubo
Solución 1 t(-) 2 3 4 5 6
Sustrato de Almidón (8 mg/mL) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
4 mL de Sol. Reg. de Fosfato
7 5 6 7 8 9
0.2M y NaCl 0.05M a pH de
Preincubar 5 minutos a 40°C
Enzima 0.5 (b) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Incubar 15 minutos a 40° C
Ácido 3,5-dinitrosalicílico 1 1 1 1 1
Baño María ebullición por 10 minutos
e) Convierta la Densidad óptica en [AR], usando la curva tipo que se le proporcionará. Sí
es necesario, multiplique la concentración calculada por la dilución (por 6)
Tubo 1 2 3 4 5 6
Densidad óptica 0
[AR] 0
Cuestionario
1. Elabore la gráfica de [AR] en función del pH
2. En la gráfica obtenida, ubique el pH óptimo de la enzima.
Efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad de una reac-
ción enzimática.
Material Reactivos
2 pipetas de 10 mL Regulador de fosfatos de pH 7
Desarrollo
color.
Tubo
Solución 1 t(-) 2 3 4 5 6 7 8 9
Sustrato de Almidón (8
7.5 0.5 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 6.0 7.5
mg/mL)
Sol. Reg. de Fosfato 0.02M.
0.5 7.0 6.5 5.5 4.5 3.5 2.5 1.5 0.5
pH = 7
Enzima 0.5 (b) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Incubar 15 minutos a 40°C
Ácido 3,5-dinitrosalicílico 1 1 1 1 1 1 1 1
Baño María a ebullición por 10 minutos
Tubo 1 2 3 4 5 6 7 8 9
Lectura Densidad óptica 0
{AR] 0
Cuestionario
1. Elabore la gráfica de [AR] en función de [S] en mg/mL.
2. Determine los valores de KM y VMAX para el sistema, en estas condiciones.
KM = ____________mg de Almidón/L VMAX = ______________[AR]/min
Efecto de la concentración de enzima sobre la velocidad de una reac-
ción enzimática.
Material Reactivos
2 pipetas de 5 mL Regulador de fosfatos de pH 6.9
Desarrollo
color.
Tubo
Solución 1 t(-) 2 3 4 5 6
Sustrato de Almidón (8 mg/mL) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Sol.Reg. de Fosfato 0.02M pH=7 1 1 1 1 1 1
H2O destilada 3.4 4.9 4.8 4.6 4.2 3.4
Enzima 1.6 (b) 0.1 0.2 0.4 0.8 1.6
Incubar 15 minutos a 40°C
Ácido 3,5-dinitrosalicílico 1 1 1 1 1
Baño María a Ebullición por 10 minutos
f) Escriba sus lecturas en la tabla siguiente.
Tubo 1 2 3 4 5 6
Densidad óptica 0
[AR] 0
Cuestionario
1. Trace la gráfica de [AR] en función de [E] en mg/mL
2. Calcule el Número de Recambio de la enzima, en el experimento.

GLÚCIDOS
Determinación de la estructura cristalina de glúcidos.
Material Reactivos
Microscopio Glucosa sólida
Portaobjetos Sacarosa sólida
Almidón
Celulosa
Desarrollo
a) Examine al microscopio muestras sólidas de los siguientes glúcidos: Glucosa, Sacaro-
sa, Almidón, Celulosa y el resto que le sean proporcionados.
Cuestionario
1. Dibuje los esquemas correspondientes.
Glucosa Sacarosa Almidón Celulosa

2. Anote los glúcidos que presenten estructura cristalina.
3. ¿Qué relación existe entre la estructura de un glúcido y su peso molecular?.
Formación de Osazonas
Material Reactivos
3 tubos de ensaye Glúcido en sólido
Pipetas de 5 mL Clorhidrato de Fenilhidrazina
Vaso de precipitados de 600 mL Acetato de Sodio
Agua destilada
Desarrollo
a) Coloque en un tubo de ensaye: 0.1 g de un
carbohidrato, más 0.2 g. de clorhidrato de
Fenilhidrazina, más 0.3 g de acetato de
sodio cristalizado y 4 mL de agua. Agitar
enérgicamente y tapar el tubo, con un ta-
pón de papel, que permita la salida de va-
por.
b) Coloque el tubo en baño María a ebullición,
agitando ocasionalmente. Observe el tiem-
po que tardan en aparecer los cristales. Sí
en 20 minutos de calentamiento, no se han
formado cristales, retire el tubo del Baño María y déjelo reposar en frío
c) Anote el tiempo de cristalización y si fue en frío o en caliente.
Glúcidos mlvm / maov / 36

d) Observe al microscopio, los cristales de osazona preparados por TODOS los equipos
del grupo. Dibuje esquemas de cada uno de los cristales.
Cuestionario
1. Escriba la reacción que se efectúa.
2. Escriba la razón por la que Glucosa, Manosa y Fructosa forman la misma osazona.
Reacción de Molisch-Udransky
Material Reactivos
8 tubos de ensaye Solución de Formaldehído
Pipetas de 5 mL Solución de Glucosa
Solución de Fructosa
Solución de Arabinosa
Solución de Sacarosa
Suspensión de Almidón
Agua destilada
Reactivo de Molisch-Udransky
H2SO4 concentrado
Desarrollo
a) Numere 8 tubos de ensaye, y coloque, 3 mL
de las soluciones siguientes: (1) H2O destila-
da, (2) Formaldehído, (3) Glucosa, (4) Fruc-
tuosa, (5), Arabinosa (6) Sacarosa, (7) Almi-
dón y (8) la muestra problema.
b) Añada a todos los tubos, 6 gotas de reactivo
de Molisch-Udransky (solución de alfa-naftol
al 5% en alcohol) Mezcle completamente.
c) Posteriormente añada a todos los tubos, 1
mL de H2SO4 concentrado, inclinando el tubo
y dejando resbalar cuidadosamente el áci-
do por las paredes para estratificar. La reac-
ción es positiva si aparece en la interfase un anillo de color violeta (NO café)
Cuestionario
1. Anote las soluciones que den positiva la reacción, en la tabla al final del capítulo.
2. Escriba si esta reacción se puede usar para diferenciar un glúcido de otro y porqué.
3. Escriba la reacción química que se efectúa.

Reacción de Fehling
Material Reactivos
8 tubos de ensaye Solución de Formaldehído
Pipetas de 5 mL Solución de Glucosa
Vaso de precipitados de 600 mL Solución de Fructosa
Solución de Arabinosa
Solución de Sacarosa
Suspensión de Almidón
Solución A de Fehling
Solución B de Fehling
Agua destilada
Desarrollo
a) Numere 8 tubos de ensaye, y coloque en cada uno, 2 mL de solución A y 2 mL de la so-
lución B del reactivo de Fehling. Mezcle completamente.
b) Coloque en el tubo respectivo, 3 gotas de las soluciones de: (1) H2O destilada, (2) For-
maldehído, (3) Glucosa, (4) Fructuosa, (5), Arabinosa (6) Sacarosa, (7) Almidón y (8) la
muestra problema.
c) Coloque los tubos en baño María a ebullición durante 3 minutos.
d) Deje enfriar los tubos a temperatu-
ra ambiente (no enfriar con agua).
la reacción es positiva si se forma
un precipitado rojo ladrillo de Óxido
cuproso (Cu2O)
Cuestionario
1. Anote sus resultados en la tabla al
2. Anote por que algunos azúcares
dan negativa la reacción.
3. Mencione 3 sustancias que usted
considere puedan dar positiva la
reacción de Fehling y no sean azú-
cares.
4. Escriba la reacción química que se
efectúa.
Reacción de Barfoed
Material Reactivos
6 tubos de ensaye Solución de Glucosa
Pipetas de 5 mL Solución de Arabinosa
Vaso de precipitados de 600 mL Solución de Lactosa
Solución de Maltosa
Reactivo de Barfoed
Agua destilada

Desarrollo
a) Numere 6 tubos de ensaye y agregue a ca-
da uno 3 mL de reactivo de Barfoed.
b) Coloque en los tubos, 1 mL de la solución
correspondiente: (1) H2O destilada, (2) Glu-
cosa, (3) Arabinosa, (4), Lactosa (5) Malto-
sa y (6) la muestra problema.
c) Coloque los tubos en baño María a ebulli-
ción.
Cuestionario
1. En la tabla al final del capítulo, anote el
tiempo que tarda en aparecer un precipitado
color, rojo de óxido cuproso.
2. ¿Qué diferencia hay en el tiempo de reac-
ción de Monosacáridos y Disacáridos?
Reacción de Bial
Material Reactivos
Pipetas de 5 mL Solución de Arabinosa
Vaso de precipitados de 600 mL Reactivo de Bial
Butanol
Agua destilada
Desarrollo
a) Numere 4 tubos de ensaye GRANDES, en cada uno coloque, 3 mL del reactivo de Bial.
¡¡¡ PRECAUCIÓN !!!
b) Añada a los tubos, 0.2 mL de la solución correspondiente: (1) H2O destilada, (2) Gluco-
sa, (3) Arabinosa y (4) la muestra problema.
c) Caliente los tubos ligeramente sobre la flama del mechero; cuando se inicie la ebulli-
ción, inmediatamente retire el tubo de la flama.
d) Diluya cada tubo con 10 mL de H2O destilada y agregue 5 mL de butanol. Agite enér-
gicamente los tubos y deje reposar. Mida el tiempo que tarda en aparecer el color.
Cuestionario
1. Anote sus resultados en la tabla al final del capítulo.
3. ¿Cuál es la diferencia entre pentosas y hexosas?
Reacción de Seliwanoff
Material Reactivos
Pipetas de 5 mL Solución de Fructosa
Vaso de precipitados de 600 mL Reactivo de Seliwanoff
Agua destilada
Desarrollo
a) Numere 4 tubos de ensaye.
b) Coloque en los tubos 1 mL de la solución correspon-
diente: (1) H2O destilada, (2) Glucosa, (3) Fructosa y
(4) la muestra problema.
c) Agregue a cada tubo, 0.5 mL del reactivo de Seliwa-
noff.
d) Caliente todos los tubos en baño María a ebullición,
exactamente 60 segundos. Anote cual glúcido cambió
de color en la tabla al final del capítulo.
e) Continúe calentando durante 5 minutos y anote el tiempo al que se observa el cambio
de color.
Cuestionario
1. Escriba sus resultados en la tabla al final del capítulo.
2. Escriba la reacción que se efectúa.
3. ¿Cuál es la diferencia entre cetosas y aldosas?
Reacción de Lugol
Material Reactivos
4 tubos de ensaye Solución de Almidón
Pipetas de 5 mL Solución de Glucógeno
Vaso de precipitados de 600 mL Lugol
Agua destilada
Desarrollo
a) Numere 4 tubos de ensaye.
b) Coloque en los tubos 2 mL de: (1) H2O destilada, (2) Almidón, (3) Glucógeno y (4) la
muestra problema.
c) Añada a cada tubo una gota de Lugol y mezcle, anote el color que se produce, en la ta-
bla al final del capítulo.
d) Caliente los tubos en Baño María a ebullición, y déjelos enfriar nuevamente observando
lo que ocurre con la coloración durante el calentamiento y después de este.
e) Escriba sus resultados en la tabla al final del capítulo.
Cuestionario
1. Escriba porqué el complejo almidón-yodo es termolábil.
2. Anote si la reacción del Lugol, es característica para cualquier polisacárido.

Molisch- Seliwanoff
GLÚCIDO Fehling Barfoed Bial Lugol
Udransky 1a 2a
Formaldehído
Glucosa
Fructosa
Arabinosa
Sacarosa
Lactosa
Maltosa
Almidón
Glucógeno
Problema

OXIDACIONES BIOLÓGICAS
Oxidación por pérdida de electrones
Material Reactivos
2 Matraces Erlenmeyer de 250 mL 0.5 g de fibra de Fe
Tapón con válvula de Bunsen H2SO4 al 10%
Pipeta 10 ó 5 mL agua destilada
Pipeta 1 mL K3[Fe(CN)6] (ferricianuro de potasio) 0.5%
2 Cápsulas de porcelana KSCN (sulfocianuro de potasio) 0.5%
1 Probeta de 50 mL KMnO4 0.1M
Desarrollo
a) Coloque en un matraz provisto de tapón con válvula de Bunsen abierta, 0.5 g de fibra
de Fe y 15 mL de H2SO4 al 10%; mezcle enérgicamente para tratar de disolver el hierro
(lo más posible), antes de calentar.
b) Caliente a ebullición hasta la disolución del Fe, evitando que se evapore completamente
la mezcla. Si es necesario añada más ácido.
c) Enfríe al chorro del agua en la tarja; disuelva el residuo de FeSO4 (sulfato ferroso), en
50 mL de agua destilada.
d) Prueba para sales ferrosas. Se coloca en una cápsula de porcelana 1 mL de solución
de FeSO4 y unas gotas de K3[Fe(CN)6] 0.5%. La obtención de una coloración ó precipi-
tado azul indicará la presencia de sales ferrosas.
e) Prueba para sales férricas. En otra cápsula de porcelana, coloque 1 mL de la solución
de FeSO4 y unas gotas de solución de KSCN 0.5%, un color rojo es indicio de la pre-
sencia de sales férricas.
f) Oxidación de la sal ferrosa a sal férrica. Coloque en un matraz Erlenmeyer 10 mL de
la solución de FeSO4 y 3 mL de H2SO4 1 N, caliente a ebullición (evitando que se eva-
pore) y en caliente, agregue gota a gota KMnO4 0.1M hasta que persista un color rosa
muy pálido.
g) Para comprobar el paso de sal ferrosa a sal férrica, repita las reacciones de los incisos
(d) con K3[Fe(CN)6] 0.5% y (e) con KSCN 0.5%.
h) Anote sus resultados en la siguiente tabla.
Soluciones de: K3[(Fe(CN)6)] KSCN

FeSO4
Fe2(SO4)3
Cuestionario
1. ¿Qué gas es el que escapa durante la disolución del Hierro?
2. Escriba las reacciones químicas, en cada caso.
3. Si el KMnO4 es capaz de oxidar al FeSO4 ¿Qué compuesto se reduce?
4. Escriba la reacción de oxido-reducción efectuada.
Oxidaciones Biológicas mlvm / maov / 42

Oxidación por deshidrogenación
Material Reactivos
7 tubos de ensaye azul de metileno diluido
3 pipetas de 5 mL Na2S2O4 (hidrosulfito de sodio)
vaselina
H2O2 0.4%
FeCl3 1%
Desarrollo
a) Prepare una serie de 7 tubos de ensaye y numérelos.
b) Añada a cada uno, 5 mL de la solución de azul de metileno diluido.
c) Agregue a cada uno de los tubos, gota a gota una solución recién preparada de
Na2S2O4, no debe estar turbia; cuente el número de gotas necesario para decolorar
completamente la solución de azul de metileno.
d) El tubo 1 es el testigo en reposo; a temperatura ambiente anote el tiempo que tarda en
recuperar el color azul
e) Los tubos 2, 3, 4 y 5 se someten a los tratamientos indicados en la tabla siguiente. Anote
el tiempo necesario para que recuperen el color azul en la tabla.
Tubo 1 2 3 4 5
Tratamiento Reposo 0.5 mL vaselina Baño de hielo Baño María a Agitación
estratificando ebullición
Tiempo
f) A los tubos 6 y 7, sin agitarlos y a temperatura ambiente, agregue los reactivos indica-
dos en la tabla siguiente, contando el número de gotas necesario para que recuperen el
color azul, anote el resultado en la tabla.
TUBO 6 7
TRATAMIENTO H2O2 0.4% FeCl3 1%,
No de Gotas
Cuestionario
1. Escriba la reacción química que se ha efectuado.
Obtención de la fracción mitocondrial del tejido
Material Reactivos
Estuche de disección KCl (cloruro de potasio) 0.15 M
Mortero Hielo
Tubos de centrifuga
Centrífuga
pipetas de 5 y 10 mL
Desarrollo
a) Mate una rata, diseque el hígado y el corazón y manténgalos en baño de hielo hasta el
momento de utilizarlo.
b) Pese los órganos extraídos y manténgalo en baño de hielo.
c) Trabajando en baño de hielo, fraccione la muestra finamente con tijeras y prepare un
homogeneizado en un mortero FRIÓ, añadiendo 9 mL de KCl 0.15M FRIÓ por cada
gramo de tejido.
d) Centrifugue el homogeneizado en frío, a 500 rpm por 15 minutos.
e) Decante el sobrenadante en un recipiente limpio y FRÍO, y deseche el residuo.
f) Vuelva a centrifugar el sobrenadante, pero ahora a 3000 rpm por 15 minutos.
g) De los tubos de centrífuga, decante el sobrenadante en un recipiente limpio y guarde el
precipitado para usarlo más adelante. (inciso i)
h) Etiquete el recipiente con sobrenadante como "SOBRENADANTE DE HÍGADO" o
“SOBRENADANTE DE CORAZÓN” según corresponda y consérvelo en frío.
i) El precipitado de la última centrifugación (inciso g) se suspende en un volumen de KCl
0.15M igual al del sobrenadante, y también se conserva en frío, etiquetado como
"SUSPENSIÓN DE HÍGADO" o “SUSPENSIÓN DE CORAZÓN”, según corresponda.
Determinación de la actividad de Deshidrogenasa Succínica

Material Reactivos
8 tubos de ensaye Azul de metileno 0.002 M
5 pipetas de 5 mL Succinato de sodio 0.1 M
Malonato de sodio 0.1 M
Agua destilada
Suspensión de Hígado o Corazón
Sobrenadante de Hígado o Corazón
a) Prepare una serie de 6 tubos de ensaye, como se indica en la tabla siguiente.
TUBO
Reactivos en mL 1 2 3 4 5 6
Azul de metileno 0.002M 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
Succinato de sodio 0.1M 0.0 0.5 0.5 0.0 0.5 0.5
Malonato de sodio 0.1M 0.0 0.0 0.5 0.0 0.0 0.5
H2O destilada 1.5 1.0 0.5 1.5 1.0 0.5
Mezclar bien y preincubar a 37° por 10 minutos
Suspensión de Hígado o Corazón 0.5 0.5 0.5 0.0 0.0 0.0
Sobrenadante de Hígado o Corazón 0.0 0.0 0.0 0.5 0.5 0.5
b) Mezcle enérgicamente el contenido de cada tubo y añada, resbalando por la pared, 1

mL de vaselina para formar una capa sobre la solución. NO AGITE LOS TUBOS DES-
PUÉS DE AÑADIR LA VASELINA.
c) Mantenga los tubos en incubación en Baño María a 37C, observe el color de los tubos
al inicio del experimento y anote sus lecturas respecto a los cambios de coloración, en
los tiempos señalados en el cuadro siguiente.
Tubo No
Tiempo / minutos 1 2 3 4 5 6
0
15
30
60
Cuestionario
1. Escriba en cuál de las preparaciones de hígado o corazón considera usted que se en-
cuentran las mitocondrias y por qué.
2. Describa como actúa el Malonato de sodio.
Determinación de la actividad de Citocromo-Oxidasa.
MATERIAL REACTIVOS
6 tubos de ensaye alfa-Naftol 0.15 % en etanol al 10%
4 pipetas 5 mL dimetil-para-fenilendiamina 0.15 %
KCN (cianuro de potasio) 0.01%
Agua destilada
Suspensión de Hígado o Corazón
Sobrenadante de Hígado o Corazón
Desarrollo
a) Prepare una serie de 6 tubos de ensaye como se indica en la tabla siguiente:
TUBO No
Reactivos en mL 1 2 3 4 5 6
alfa-Naftol 0.15 % en Etanol 10% 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Dimetil-para-Fenilendiamina 0.15% 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
H2O destilada 1.0 2.0 0.5 1.0 2.0 0.5
Mezclar bien y preincubar a 37° por 10 minutos
KCN 0.01% ((0.5 mL = 16 GOTAS)
0.5 0.5
¡¡¡PELIGRO, VENENO NO PIPETEAR!!!
Sobrenadante de Hígado o Corazón 1 1
Suspensión de Hígado o Corazón 1 1
b) Mantenga los tubos en incubación en Baño María a 37C, agitándolos con frecuencia.
c) Observe cualquier cambio de color, en el inicio, a los 15, 30 y 60 ó más minutos.
d) Resuma sus datos en la tabla siguiente.

Tubo No
Tiempo / minutos 1 2 3 4 5 6
15
30
60
Cuestionario
1. Describa la reacción química que se ha efectuado.
2. Escriba la razón por la que no se usó vaselina en este experimento.
3. Escriba el nombre del inhibidor para cada enzima.
4. Anote la fracción en que se encontraron las enzimas y cual es la razón.

LÍPIDOS
Reacción de Hanus o Índice de yodo
Material Reactivos
5 Tubos de ensaye Cloroformo
Pipetas de 5 mL Aceite de algodón 10% en Cloroformo
Aceite de cártamo10% en Cloroformo
Monoestearil glicerol10% en Cloroformo
Reactivo de Hanus
Desarrollo
a) Numere 5 tubos de ensaye, limpios y secos, prepare las mezclas que se describe en
la tabla siguiente.
Tubo No
REACTIVO (mL) 1 (t-) 2 3 6 5
Cloroformo 6
Aceite de algodón en cloroformo 6
Aceite de cártamo en cloroformo 6
Monoestearil-glicerol en cloroformo 6
Lípido problema en cloroformo 6
5 gotas de reactivo de Hanus SI SI SI SI SI
MEZCLAR ENÉRGICAMENTE
Cubrir con aluminio SI SI SI SI SI
Cuestionario
1. Anote en la tabla siguiente, cada 30 min (durante 2 horas) el grado de decoloración de
cada tubo, con respecto al testigo negativo de cloroformo.
2. Escriba la razón por la que se utiliza como índice, el grado de decoloración de la solu-
ción.
3. Escriba la reacción química que se lleva a cabo.
TIEMPO / minutos
Lípido 30 60 90 120
Lípido problema
Aceite de Algodón
Aceite de Cártamo
Monoestearilglicerol
Lípidos mlvm / maov / 47

Extracción de lípidos de Cerebro.
Material Reactivos
5 g de cerebro mezcla cloroformo-metanol-HCl (200:100:1)
Mortero con mano HCl 1N
2 Tubos de centrífuga
Pipeta Pasteur
Pipetas de 5 mL
Desarrollo
a) Triture perfectamente 5 g de cerebro, en un
mortero con 15 mL de una mezcla de cloro-
formo-metanol-ácido clorhídrico (200:100:1)
por 10 minutos.
b) Agregue 3 mL de HCl 1N, mezcle completa-
mente y centrifugue a 2000 r.p.m. durante 10
minutos.
c) Separe la fase metanólica (transparente),
decantándola con cuidado a un tubo de ensa-
ye, rotule para uso posterior.
d) La fase clorofórmica (café claro), la obten-
drá, perforando con un hisopo de madera la
capa intermedia (sedimento) y por el orificio que se forma, introducir cuidadosamente
una pipeta Pasteur para tomar el líquido que se encuentra en la parte inferior del tubo y
rotule para su uso posterior. Deseche el sedimento.
Identificación de fosfolípidos de cerebro por cromatografía en capa fina.

Material Reactivos
Placa de cromatografía Cloroformo
Pipeta Pasteur Fase clorofórmica
Cámara de cromatografía Ninhidrina
Desarrollo
a) En un tubo de ensaye coloque 0.5 mL del líquido de la
fase clorofórmica obtenida en la extracción de lípidos
del cerebro, y agréguele 0.5 mL de Cloroformo.
b) Utilizando una pipeta Pasteur, aplique 1 gota de esta di-
lución en 3 puntos equidistantes en una cromatoplaca
previamente preparada, a 2 cm de altura de la base.
c) Permita que el Cloroformo se evapore e introduzca la
placa en una cámara de cromatografía que contenga
como solvente de elusión, una mezcla de cloroformo–
metanol-ácido acético-agua (65: 25:8:4)
d) Deje desarrollar el cromatograma hasta que el solvente
alcance el frente del solvente ya marcado; saque la placa de la cubeta y déjela secar.
e) En esta forma se tendrán 3 cromatogramas en la misma placa, los cuales se rocían con
Ninhidrina, que revela fosfoaminolípidos.
f) Coloque la placa de cromatografía tratada en el horno a 100C, por 10 minutos para
efectuar la reacción.
Cuestionario
1. Calcule los valores de Rf de cada una de las manchas, identifíquelas (con respecto a
los valores conocidos que se le proporcionen para las diferentes fracciones), anotándo-
las en una tabla.
Identificación de cerebrósidos.
Material Reactivos
1 Tubo de ensaye Fase metanólica
Pipetas de 5 mL Reactivo de Molisch-Udransky
H2SO4 concentrado
Desarrollo
1. Utilizando 1 mL del líquido de la fase meta-
nólica, obtenido en la extracción de lípidos
de cerebro, trate de demostrar la presencia
de cerebrósidos utilizando la reacción de Mo-
lisch-Udransky cuya técnica y fundamento
fue descrito en la práctica de Glúcidos.
Cuestionario
1. Anote el resultado.
2. ¿Qué porción de los cerebrósidos se identifica con esta reacción?
Reacción de la Acroleína. Identificación de acilglicéridos.
Material Reactivos
3 Tubos de ensaye Glicerina
Pipetas de 5 mL Aceite de algodón
KHSO4 (bisulfato de potasio)
Desarrollo
a) Coloque en 3 tubos de ensaye limpios, secos y numerados un poco de KHSO4.
b) Añada al tubo 1, 5 gotas de glicerina, al tu-
bo 2, 5 gotas de aceite de algodón, cárta-
mo o girasol (sin solvente) y al tubo 3, 5
gotas del lípido problema.
c) Caliente cuidadosamente y huela indirec-
tamente los vapores. Anote su resultado.
Cuestionario
1. Se puede considerar esta reacción general
para cualquier lípido, ¿Por qué?
2. Escriba la reacción que se ha efectuado.

Reacción de Liebermann-Burchards
Material Reactivos
4 Tubos de ensaye Cloroformo
Pipetas de 5 mL Colesterol en cloroformo
Fase clorofórmica
Anhídrido acético
H2SO4 concentrado
Desarrollo
a) Prepare 4 tubos de ensaye, siguiendo las instrucciones de la tabla.
Tubo No
REACTIVO (mL) 1 (t-) 2 3 4
Cloroformo 3
Sol. Clorofórmica de colesterol puro 3
Fase clorofórmica 3
Problema 3
Anhídrido acético. Usar en la campana 1 1 1 1
MEZCLAR COMPLETAMENTE
H2SO4, ¡Precaución! deslizar por la pared lentamente 1 1 1 1
Resultado
Cuestionario
1. Observe los cambios de coloración que se producen con respecto al testigo negativo de
cloroformo y anote sus resultados en la tabla.
Grado de permeabilidad de una capa lipídica
Material Reactivos
4 Tubos de ensaye Azul de metileno más monoestearato de glicerilo en Butanol
Pipetas de 5 mL Azul de metileno más colesterol en Butanol
Azul de metileno en Butanol
extracto clorofórmico
Desarrollo
a) Evapore a sequedad 2 mL del líquido de la
fase clorofórmica obtenida en la extrac-
ción de lípidos del cerebro. Evaporar agi-
tando, o en Baño María, sin hervir.
b) El residuo obtenido se disuelve con 2 mL de
azul de metileno en butanol. Marque la
muestra como Fosfolípidos en butanol.
c) Prepare 4 tubos de ensaye como se indica
en la tabla siguiente. Las soluciones se
agregan al agua, resbalando lentamente
por las paredes del tubo, para estratificar.
Tubo No
Reactivos / mL 1 2 3 4
Agua 5 5 5 5
Azul de metileno más monoestearato de glicerilo en Butanol 2 -- -- --
Azul de metileno más fosfolípidos en Butanol -- 2 -- --
Azul de metileno más colesterol en Butanol -- -- 2 -
Azul de metileno en Butanol -- -- -- 2
c) Deje los tubos en reposo, procurando moverlos lo menos posible.
d) Observe la difusión del azul de metileno después de que transcurran 1, 2, 4 y 24 horas.
e) Registre el grado de difusión del azul de metileno con respecto al tiempo, en la siguien-
te tabla.
Tiempo (horas)
Permeabili-
Reactivos (mL) 1 2 4 24
dad Final
Agua
Azul de metileno más monoestearato de glicerilo en
Butanol
Azul de metileno más fosfolípidos en Butanol
Azul de metileno más colesterol en Butanol
Azul de metileno en Butanol
Cuestionario
1. Anote a que se debe la diferencia, en cuanto al grado de difusión del azul de metileno,
con respecto al tipo de lípido usado.
2. Escriba la relación que existe, entre la difusión del colorante con respecto al grado de
permeabilidad de las capas lipídicas utilizadas.

ÁCIDOS NUCLEICOS
Obtención de DNA del bazo
Material Reactivos
2 Tubos de centrífuga Bazo
Pipetas de 5 mL Solución reguladora de citrato 0.01 M en
Vaso de precipitados de 500 mL NaCl 0.14 N, pH 7.2
NaCl 2.6 M
alcohol etílico al 95%
Desarrollo
a) Coloque en un vaso de licuadora frío, 450 mL de solución reguladora de citratos-NaCl.
b) Ponga a funcionar la licuadora y vaya añadiendo los trozos de bazo congelado uno a
uno, esperando a que se homogeneice completamente el primero, antes de añadir el
segundo y así sucesivamente SIN QUE SE CALIENTE LA MEZCLA. Una vez termina-
da la adición, continúe homogeneizando por 60 segundos.
c) Coloque el homogeneizado en tubos de centrifuga adecuados y tárelos.
d) Centrifugue por 15 minutos a 5000 r.p.m. (si es posible, en la centrifuga refrigerada)
Deseche el sobrenadante y conserve el residuo 1.
e) En cada tubo, lave el residuo de la centrifugación anterior con 15 mL de solución regu-
ladora de citratos, agitando hasta resuspender con ayuda de una agitador de vidrio.
f) Vuelva a tarar los tubos y nuevamente centrifugue por 5 minutos a 5 000 r.p.m. El se-
gundo sobrenadante también se desecha.
g) Al residuo de la segunda centrifugación de cada tubo, añádale 15 mL de NaCl 2.6M frío
y homogenice por agitación.
h) Nuevamente tare los tubos y centrifugue el homogenizado a 8 000 r.p.m. por 30 minu-
tos. El líquido sobrenadante contiene el DNA, SE ROTULA Y SE GUARDA PARA
LA OBTENCIÓN DEL DNA. El residuo que contiene restos celulares y proteínas inso-
lubles, se desecha.
i) El líquido sobrenadante con DNA, se coloca en un vaso de precipitados de 150 mL y
se añaden lentamente por la pared del vaso, 2 volúmenes de alcohol etílico al 95%,
procurando que la fase alcohólica quede en la parte superior. Se deberá observar
la formación de un precipitado blanco denso en la interfase.
j) Introduzca un agitador, con salientes pequeñas hasta el fondo del vaso de precipitados,
gírelo y extráigalo lentamente del vaso procurando enrollar sobre él las fibras de DNA
precipitado.
k) En la forma anterior recolecte todo el DNA que sea posible y transfiéralo a un frasco
Gerber que contenga 10 mL de agua. (El DNA debe disolverse) Esta es la solución
problema para determinar DNA en el siguiente experimento.
Cuestionario
1. Elabore un esquema de las fibras de DNA obtenidas.
2. Anote la razón de utilizar el bazo como fuente de DNA.
Ácidos Nucleicos mlvm / maov / 52

3. Escriba si es conveniente o no, utilizar regulador de fosfatos para la extracción del DNA
y ¿porqué?
4. Escriba la razón por la que se lleva a cabo la extracción a baja temperatura.
Identificación y Cuantificación de DNA.
Material Reactivos
6 Tubos de ensaye Solución patrón de DNA 1 mg/mL
Pipetas de 5 mL Solución DNA problema
Vaso de precipitados de 500 mL Reactivo de Dische
2 Tubos Klett
Desarrollo
a) Prepare una serie de 6 tubos de ensaye, numerándolos.
b) Tubo 1, coloque únicamente 2 mL de H2O destilada como testigo negativo.
c) Tubo 2, coloque 2 mL de solución patrón de DNA [1 mg/mL]
d) Tubo 3, coloque 2 mL de H2O destilada, más 2 mL de solución patrón de DNA [0.5
mg/mL] y mezcle completamente.
e) Tubo 4, coloque 2 mL de H2O destilada, más 2 mL de la solución del Tubo 3 [0.25
f) Tubo 5, coloque 2 mL de H2O destilada, más 2 mL de la solución del Tubo 4 [0.125
mg/mL] y mezcle completamente. Deseche 2 mL.
g) Tubo 6, coloque 2 mL de solución DNA problema, obtenida en la extracción del DNA
del bazo.
h) Para desarrollar color, siga las instrucciones de la tabla siguiente.
TUBO No
Reactivo / mL 1(t-) 2 3 4 5 6 (p)
Reactivo de Dische (en la campana extractora) 4 4 4 4 4 4
Agitar vigorosamente
Incubar 10 minutos en BAÑO MARÍA. a ebullición
Enfriar 5 minutos en baño de hielo, (color azul transparente)
i) Mida la intensidad del color en el espectrofotometro a 600 nm, AJUSTÁNDOLO A 0

CON EL TUBO 1.
j) Anote sus resultados en la tabla siguiente.
TUBO No
1 (t-) 2 3 4 5 6 (p)
DENSIDAD ÓPTICA (D.O.) 0
Concentración (mg/mL) 0 1.0 0.5 0.25 0.125

Cuestionario
1. Grafique D.O. en función de la concentración de DNA en mg/mL.
2. Interpole el valor de D.O. de la solución problema y obtenga la concentración del DNA
en mg/mL de la solución problema.
Identificación y Cuantificación de RNA
Material Reactivos
6 Tubos de ensaye Solución patrón de RNA 0.3 mg/mL
Pipetas de 5 mL Solución RNA problema
Vaso de precipitados de 500 mL Reactivo de Orcinol ácido
2 Tubos Klett Reactivo de Orcinol alcohol
Desarrollo
a) Prepare una serie de 6 tubos de ensaye, numerándolos.
b) Tubo 1, únicamente 3 mL de H2O destilada. (t(-), amarillo)
c) Tubo 2, coloque 3 mL de sol. patrón de RNA [0.3 mg/mL]
d) Tubo 3, coloque 3 mL de H2O destilada, más 3 mL de solución patrón de RNA [0.15
e) Tubo 4, coloque 3 mL de H2O destilada, más 3 mL de solución del Tubo 3 [0.075] y
mezcle completamente.
f) Tubo 5, coloque 3 mL de H2O destilada, más 3 mL de solución del Tubo 4 [0.0375] y
mezcle completamente. Deseche 3 mL.
g) Tubo 6, únicamente 3 mL del RNA problema.
h) A continuación, aplique a los tubos el tratamiento de la tabla siguiente.
TUBO No
Reactivo / mL 1 2 3 4 5 6
Reactivo de Orcinol ácido (en la campana extractora) 6 6 6 6 6 6
Reactivo de Orcinol alcohol (en la campana extracto- 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
ra)
Agitar vigorosamente
Incubar 20 minutos en BAÑO MARÍA. a ebullición
Incubar 5 minutos en baño de hielo (color verde esmeralda)
i) Mida la intensidad del color en el espectrofotómetro a 660 nm, AJUSTANDO A CERO

CON EL TUBO 1.
j) Anote sus resultados en la tabla siguiente.
TUBO No
1 (t-) 2 3 4 5 6 (p)
Concentración (mg/mL) 0 0.3 0.15 0.075 0.0.375
Cuestionario
1. Grafique D.O. en función de la concentración de RNA en mg/mL.
2. Interpole el valor de D.O. de la solución problema y obtenga la concentración de RNA
en mg/mL, de la solución problema.
Identificación y Cuantificación de Fosfato Total
Material Reactivos
6 Tubos de ensaye Buffer acetatos 0.1N pH= 4
Pipetas de 5 mL Reactivo de Molibdato 2.5%
Vaso de precipitados de 500 mL Vitamina C 1% (reciente)
2 Tubos Klett Sol. tipo de PO4 1M
Sol. tipo de PO4 2.5M
Sol. tipo de PO4 5M
Problema de DNA
Problema de RNA
Agua destilada
Desarrollo
a) Prepare una serie de 6 tubos como se indica en la tabla siguiente.
TUBO No
Reactivo /mL 1 t- 2 3 4 5 6
Buffer acetatos 0.1M pH= 4 7 7 7 7 7 7
Reactivo de Molibdato 2.5% 0.5 o.5 0.5 0.5 0.5 0.5
Vitamina C 1% (reciente) 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
H2O destilada 2
Sol. tipo de PO4 1? M/mL 2
Sol. tipo de PO4 2.5? M/mL 2
Sol. tipo de PO4 5? M/mL 2
Problema de DNA 2
Problema de RNA 2
Reposar 30 minutos a temperatura ambiente (color azul)
b) Mida la intensidad del color desarrollado en el espectrofotómetro a 660 nm, usando
como blanco el tubo 1.
c) Anote sus resultados en la tabla siguiente.
TUBO No
1 (t-) 2 3 4 5 (DNA) 6 (RNA)
Concentración (M/mL) 0 1.0 2.5 5.0

Cuestionario
1. Grafique D.O. en función de la concentración de Fosfato.
2. Interpole los valores de D.O. de las soluciones problema (DNA y RNA) y obtenga la
concentración de Fosfato, en ? M/mL.
3. Anote como afecta el medio ácido y el básico los enlaces 3'-5' diéster fosfato.

APÉNDICE I.
Curva Tipo de Azucares Reductores
Material Reactivos
1 matraz aforado de 100 mL Glucosa (Dextrosa) grado reactivo
3 pipeta de 5 o 10 mL Regulador de fosfatos de pH 7
2 celdas para fotocolorímetro
11 tubos de ensayo
Desarrollo
a) Solución estándar (0.1 M) Disuelve 1.8 g de Glucosa en 100 mL de agua.
b) Solución tipo (0.02 M) Diluye 20 mL de la solución estándar a 100 mL con agua desti-
lada.
c) Prepara una serie de 11 tubos de ensaye como se indica en la tabla siguiente.
Solución Testigo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
mL de solución tipo 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
mL regulador de fosfato pH = 7 10 9 8 7 6 5 4 3 2 1 0
Ac. 3,5-dinitrosalicílico 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
d) Coloca todos los tubos en baño maría a ebullición durante 5 minutos.
e) Enfría los tubos al chorro del agua y lee la coloración en el fotocolorímetro a 540 nm
(filtro verde), empleando el tubo 1 como blanco para ajustar a cero.
f) Registra tus resultados en la tabla siguiente:
Tubo No Testigo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
U.K. 0
MA.R. 0
Cuestionario
1.Calcula la concentración molar de azucares reductores (MA.R.) en cada tubo. Anota el
resultado en la tabla anterior
2.Dibuja la gráfica de la curva tipo que obtuviste, en unidades Klett en función de la con-
centración molar de azúcares reductores.
3.Calcula la ecuación de la recta obtenida, para calcular la concentración de azucares re-
ductores de los problemas.
Apéndice I. Curva Tipo de Azucares Reductores mlvm / maov / 57

APÉNDICE II.
Puente de Wheatstone
COMPONENTES
A)Escala del Galvanómetro H)Terminales de la Batería
B)Botón del Seguro de Galvanómetro I)Perilla de Rango de la Resistencia
C)Botón de Ajuste del Galvanómetro J)Perilla de Millares
D)Botón de Corriente del Galvanómetro K)Perilla de Centenas
E)Terminales para Medir Resistencia L)Perilla de Decenas
F)Terminales para Medir Corriente M)Perilla de Unidades
G)Interruptor de Encendido
INSTRUCCIONES DE OPERACIÓN
I. Como fuente de poder
1.Conecte el aparato a la toma de corriente.
2.Conecte los cables conductores a las terminales de batería, (B.A.)
3.El paso de corriente es inmediato, al accionar el interruptor de encendido (G).
II. Medición de la Resistencia
1.Conecte el aparato a una toma de corriente.
2.Libere el galvanómetro deslizando el botón de seguro (B), en dirección de la escala (A).
Ajuste la aguja a cero girando el botón de ajuste (C).
Apéndice II. Puente de Wheatstone mlvm / maov / 58

3.Conecte la resistencia problema a las terminales para medir resistencia (E). El orden
no es importante.
4.Ajuste la perilla de Rango de resistencia (H) a su máximo valor (1000). El resto de las
perillas (I a L) ajústelas a 9.
5.Presione el botón de corriente del galvanómetro (D) y observe si la aguja de la escala
se mueve a la derecha (+) o a la izquierda (-).
6.Mueva la perilla H al valor de 100, vuelva a presionar el botón D y observe si la aguja
se mueve en la misma dirección que antes. Si es así, mueva la perilla H al valor inferior
siguiente (10) y vuelva a realizar la observación; continúe disminuyendo el valor, hasta
que la aguja del galvanómetro cambie de dirección.
7.Después del cambio de dirección, devuelva la perilla H al último valor en que la aguja
se desplazó en la dirección original.
8.A continuación, mueva la perilla de millares (I) de 9 a 8, presione el botón D y observe
si el movimiento de la aguja cambia de dirección. Nuevamente, si no hay cambio, dis-
minuya los valores de la perilla I, hasta encontrar una valor en el cual la dirección del
movimiento cambie.
9.De la misma manera, ajuste los valores de las perillas de centenas (J) decenas (K) y
unidades (L) en ese orden, hasta que la aguja no se mueva.
10.Una vez logrado el equilibrio, el valor de la resistencia, en ohms, se calcula sumando
los valores de obtenidos para las perillas millares, centenas, decenas y unidades, y
multiplicando el resultado por el valor del RATIO.
Resistencia = (Millares + Centenas + Decenas + Unidades) x RATIO
Apéndice II. Puente de Wheatstone mlvm / maov / 59

Manual

Cargado por

Información del documento

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Manual

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA SUPERIOR DE MEDICINA

mlvm / maov / iii

mlvm / maov / vii

Academia de Bioquímica Médica I

Personal Técnico del Laboratorio

mlvm / maov / viii

Reglamento de Laboratorio de Bioquímica Médica I iv

Reglas de Seguridad en el Laboratorio de Bioquímica Médica I vi

INTRODUCCIÓN AL LABORATORIO DE BIOQUÍMICA MÉDICA I 11

APÉNDICE II. Puente de Wheatstone 58

Introducción al Laboratorio de Bioquímica Médica I mlvm / maov / 2

Introducción al Laboratorio de Bioquímica Médica I mlvm / maov / 3

Introducción al Laboratorio de Bioquímica Médica I mlvm / maov / 4

Introducción al Laboratorio de Bioquímica Médica I mlvm / maov / 5

Preparación de una solución de NaCl 2% p/v

gramos de NaCl ______________ g

Soluciones mlvm / maov / 7

Soluciones mlvm / maov / 8

Soluciones mlvm / maov / 9

Resultado = _______________ mL de NaOH 0.2N

c) Caliente ligeramente un punto de la probeta y observe

d) Observe el descenso del colorante a través de la columna de agua, anote si es unifor-

Soluciones mlvm / maov / 10

d) Agregue 3 gotas de Azul de Bromofenol como indicador. Este indicador es amarillo a

Soluciones Electrolíticas y pH mlvm / maov / 11

d) Devuelva la solución de CH3COOH 0.5 M al frasco correspondiente.

g) Devuelva la solución de HCl 0.5 M al frasco correspondiente.

Soluciones Electrolíticas y pH mlvm / maov / 12

Preparación de soluciones de pH conocido con electrolitos fuertes y

Solución pH Teórico pH Potenciométrico

Soluciones Electrolíticas y pH mlvm / maov / 13

Solución pH Gasto de NaOH 0.1N

Soluciones Electrolíticas y pH mlvm / maov / 14

Soluciones Reguladoras mlvm / maov / 15

Serie Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4

Soluciones Reguladoras mlvm / maov / 16

Soluciones Reguladoras mlvm / maov / 17

b) Mezcle completamente el contenido de cada tubo.

Proteínas mlvm / maov / 18

Proteínas mlvm / maov / 19

Proteínas mlvm / maov / 20

Proteínas mlvm / maov / 21

Resumen de propiedades químicas de aminoácidos

Precipitación de proteínas por metales pesados

Proteínas mlvm / maov / 22

Precipitación por alcohol

Proteínas mlvm / maov / 23

Solución Fe Hg Pb Ag CCl3COOH Alcohol

Proteínas mlvm / maov / 24

CINÉTICA QUÍMICA Y CATÁLISIS

vaso mL de FeCl3 0.2M mL de NH4SCN 0.2M mL de NH4Cl 3M Color

Cinética Química y Catálisis mlvm / maov / 25

Tiempo/min gasto de KMnO4 0.01M (mL) H2O2 / M

Cinética Química y Catálisis mlvm / maov / 26

Solución Vaso 1 Vaso 2 Vaso 3 Vaso 4 Vaso 5

Efecto del pH sobre la velocidad de una reacción química.

Cinética Química y Catálisis mlvm / maov / 27

Solución Vaso 1 Vaso 2 Vaso 3 Vaso 4 Vaso 5

[H+] 1 x 10-7 1 x 10-2 1 x 10-1 1 2

Cinética Química y Catálisis mlvm / maov / 28

Cinética Química y Catálisis mlvm / maov / 29

Cinética Química y Catálisis mlvm / maov / 30

Efecto de la temperatura sobre la actividad enzimática