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01 - Microbiologia Industrial-Temas y Contenidos
01 - Microbiologia Industrial-Temas y Contenidos
VENTAJAS DE LOS MICROORGANISMOS COMO UNIDADES DE PRODUCCIN Rapido crecimiento debido a la favorable relacin rea/ volumen Diversidad metablica Estabilidad genetica Crecimiento en gran escala y separacion facil de productos y sustratos * Adaptabilidad a distintos ambientes y condiciones de crecimiento (sustratos slidos, lquidos, frascos, fermentadores) Incrementar la productividad * Facilidad de manipulacin gentica Modificar los productos finales * Habilidad para sintetizar enantimeros especficos. * Tecnologias limpias
Unidades de Biotransformacion
METABOLITOS PRIMARIOS
1- Componentes esenciales y productos formados por los microorganismos: proteinas, acidos nucleicos, polisacaridos (dextranos, alginatos, gelanos, xantanos) y poliesteres (PHB y plasticos), acidos grasos (saturados e insaturados), esteroles (ergosterol) 2- Derivados del metabolismo intermedio: azucares (fructosa, ribosa, sorbosa), cidos organicos (gluconico, cido lctico, ctrico, acetico, propionico, succinico, fumarico), alcoholes (xilitol, etanol, glicerol, sorbitol, butanol), aminoacidos (Lys, Thr, Glu, Trp, Phe), vitaminas (carotenos, B2, B12), nucleotidos saborizantes (acidos inocinico y guanilico), polisacaridos y poliesteres de reserva. Microorganismos productores: bacterias, levaduras y hongos.
Etanol
Producido por : 1- Levaduras * Saccharomyces (a partir de hexosas) * Kluyveromyces fragilis (a partir de lactosa) * Cndida o Pichia (a partir de pentosas) 2- Bacterias* Clostridium (a partir de celulosa) (termfilos, anaerobios) * Zymomonas
3- RecombinantesE.coli recombinante: Introduccin de los genes Alcohol deshidrogenasa y piruvato decarboxilasa de Zymomonas.
Pir
acetaldehido
etanol
Aminocidos
Principales productores: Bacterias de los gneros Corynebacterium y Brevibacterium * Mutantes auxotrofas y regulatorias * Mutantes alteradas en la secrecion * Cepas recombinantes
Toneladas/ ao
Vitaminas
Vitamina B12Microorganismos productores: Bacterias de los generos Propionibacterium shermani y Pseudomonas denitrificans. Produccin: 150 mg/ L. BiotinaMicroorganismo productor: cepas modificadas (mutantes) de Serratia marcescens.Produccin: 150-600 mg/ L. Vitamina B2 (Riboflavina)Microorganismos productores: -hongos (Eremothecium ashby y Ashbya gossypii) Candida sp Bacillus subtilis recombinante Produccin: 20 -30 g/ L
ANTIBIOTICOS
Desde 1940 se han introducido una gran variedad de molculas con actividad antibitico para su uso en medicina y agricultura. En el mercado hay 160 antibiticos en uso por un valor de 23,000 millones de U$S. Se han descripto 6,000 antibiticos de los cuales 4,000 se han aislado de Actinomycetes, y se describen alrededor de 500 antibiticos nuevos por ao. Una sola cepa de Streptomyces hygroscopicus produce aproximadamente 200 antibiticos. Muchos nuevos antibioticos se obtienen por semi-sintesis, es decir, por modificacion de antibioticos existentes
INHIBIDORES ENZIMATICOS Ej. Estatinas y acido zaragozico Inhibidores competitivos de la HMGCo A reductasa y escualeno ciclasa, por lo cual se emplean como anti- colesterolemicos. Microorganismo productor: Aspergillus terreus (hongos) Ej. Acido clavulanico (inhibe penicilasas) Ej. Acarbosa: Inhibidor de la glucosidasa intestinal. Disminuye la hiperglucemia y tambin la sntesis de triglicrido en los tejidos adiposos, el hgado y las paredes intestinales de individuos obesos, diabticos o con trastornos de la lipemia. Microorganismo productor: Actinoplanes (actinomycetes)
BIOPESTICIDAS Se aislaron en un principio como agentes antibiticos y luego, en las sucesivas investigaciones, surgieron nuevos usos o usos mas especficos. Fungicidas: kasugamycin, polyoxins, anfotericina Insecticidas: toxina de Bacillus thuringiensis Herbicidas: bialaphos antihelminticos: avermectinas Reguladores del crecimiento de plantas: giberellinas Inmunosupresores: ciclosporinas Agentes antitumorales: mitomycin, bleomycin Antivirales: inhibidores de la transcriptasa reversa y de la proteasa de HIV (ritonavir, nevirapine, etc)
EMPLEO DE LOS MICROORGANISMOS COMO VECTORES DE GENES HETEROLOGOS Los principales huespedes que se emplean para la produccion de proteinas recombinantes son E. coli, B. subtilis, S. cerevisiae, Pichia pastoris, Hansenula polimorpha y Aspergillus niger. Quimosina recombinante (Clonado del gen de la quimosina bovina en una levadura). Se emplea para la coagulacion de la caseina, en la obtencion de quesos.
Insulina humana (en E.coli) Hormona de crecimiento humana (en E.coli y levaduras) Vacuna Hepatitis (en levaduras ) Farmacos (interferon 2 alfa)
EMPLEO DE PLANTAS TRANSGENICAS CON GENES BACTERIANOS CLONADOS (bt)
MAIZ Y ALGODON BT
* Epoxidaciones
* Desaturaciones * Rupturas oxidativa de anillos
Reducciones
Reacciones hidroliticas Condensaciones
Resolution of pipecolic acid by oxidation with D-amino acid oxidase and recycling of the achiral oxidation product.
Overexpression in E.coli
PRINCIPALES PRODUCTOS
PRODUCTO ORGANISMO PRODUCCION (Ton/ao) 20 millones 2000 500,000 50,000
PRODUCTO Enzimas Proteasas Alfa-Amilasas Glucoa-amilasa Glucosa isomerasa Pectinasa Renina otras Vitaminas B12 Riboflavina Vacunas Difteria Tetanos Pertussis Polio Rubola Hepatitis B
ORGANISMO
Bacillus spp Bacillus amyloliquefasciens Aspergillus niger Bacillus coagulans Aspergillus niger Mucor o levaduras recombinantes
Corynebacterium diphteriae Clostridium tetani Bordetella pertussis Virus atenuado crecido en rion de mono o celulas diploides humanas Idem anterior Antigenos de superficie expresados en levadura Claviceps paspali
< 0.1
PRODUCTO Pigmentos Shikoninas Beta-carotenos Proteinas de uso teraputico Insulina Hormona de crecimiento Eritropoyetina FactorVIII-C Activador del plasminogeno Interferon alfa2
ORGANISMO
Lithospermum (plantas) Levaduras E. coli recombinante E. coli recombinante o celulas de mamfero recombinante celulas de mamfero recombinante celulas de mamfero recombinante E. coli recombinante
< 0.1
Antibioticos Penicilinas Cefalosporinas Tetraciclinas Macrolidos (eritromicina) Polipeptidicos (gramicidina) Aminoglicosidos (estreptomicina) Aromticos (griseofulvina) Insecticidas Esporas bacterianas Anticuerpos monoclonales
Penicillum chrysogenum Cephalosporium acremonium Streptomyces aureofaciens Streptomyces erythreus Bacillus brevis Streptomyces griseus Penicillum griseofulvum