PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A LOS ANTIMICROBIANOS (ANTIBIOGRAMA)

DEFINICIN.
Antibitico: sustancias qumicas sintetizadas por microorganismos que poseen accin antimicrobianas. Antimicrobianos: Sustancias qumicas naturales, con modificaciones sintticas.

EFECTO DE LOS ANTIMICROBIANOS SOBRE EL CRECIMIENTO Y LA VIABILIDAD BACTERIANA.

Bacteriostticos. Bactericidas.

DE ACUERDO A SU EFECTO.
Bacteriostticos: Aquellos cuya mxima concentracin no txica, nicamente impiden el desarrollo y multiplicacin de los microorganismos, sin destruirlos. Complementan los mecanismos del defensa del hospedero.

DE ACUERDO A SU EFECTO.
Bactericida: Su accin es letal sobre un microorganismo bacteriano.

ESPECTRO DE ACTIVIDAD.

Amplio: Actan sobre un gran nmero de especies bacterianas (Tetraciclinas). Intermedio: Actan sobre un nmero limitado de microorganismos (Macrlidos). Reducido: Actan sobre un pequeo nmero de especies microbianas. (Polimixina)

MECANISMOS DE ACCIN

--Membrana Polimixina

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD A LOS ANTIMICROBIANOS (ANTIBIOGRAMA)

EL ANTIBIOGRAMA ES UNA PRUEBA QUE PERMITE DETERMINAR LA SUSCEPTIBILIDAD O RESISTENCIA A UN AGENTE ANTIMICROBIANO.
ESTAS

PRUEBAS ESTAN INDICADAS PARA MICROORGANISMOS QUE CAUSAN INFECCIONES INTRAHOSPITALARIAS.

PARA ORGANISMOS REPORTADOS COMO RESISTENTES. INFECCIONES

CRONICAS

CUADROS

CLINICOS

DE

REPETICION.
PARA SELECCIONAR EL ANTIBIOTICO MAS ADECUADO EN

PACIENTES DE EDAD AVANZADA O HIPERSENSIBLES A LOS ANTIBIOTICOS.

NO TODOS LOS MICROORGANISMOS SON SENSIBLES A LOS

AGENTES ANTIMICROBIANOS, ALGUNOS LLEGAN A SER RESISTENTES A AGENTES A LOS QUE COMNMENTE ERAN SENSIBLES.

MICROORGANISMOS QUE DESARROLLAN RESISTENCIA A ANTIMICROBIANOS CON MAYOR FRECUENCIA

Staphylococcus aureus Pseudomonas aeruginosa Haemophilus influenzae Neisseria gonorrheae Streptococcus pneumoniae Proteus sp.

Resistencia bacteriana.
Aparicin de resistencia a drogas antimicrobianas en algunos patgenos humanos

PRUEBAS UTILES PARA REALIZAR ANTIBIOGRAMA

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD POR DIFUSION EN DISCO PRUEBA PARA DETERMINAR CONCENTRACIN MINIMA INHIBITORIA (MIC) PRUEBA PARA DETERMINAR CONCENTRACIN MNIMA BACTERICIDA. PRUEBAS DE PRODUCCIN DE BETA LACTAMASA PRUEBAS PARA DETECTAR LA RESISTENCIA A OXACILINA (METACILINA) EN Staphylococcus.

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD POR MICRODILUCION EN CALDO PARA BACTERIAS ANAEROBIAS.

PRUEBAS ESPECIALES PARA CARACTERIZAR LA SENSIBILIDAD A ANTIMICROBIANOS

INDUCCION DE BETA LACTAMASA PARA BACILOS GRAM NEGATIVOS. PRUEBAS DE CLORANFENICOL ACETILTRANSFERASA. PRUEBA DE CMI POR DILUCION EN AGAR PARA BACTERIAS ANAEROBIAS. PRUEBA DE CMI POR DILUCION EN CALDO PARA MICOBACTERIAS DE CRECIMIENTO RPIDO.

PRUEBAS DE DILUCION EN AGAR (Mtodo de las proporciones, modificado para micobacterias de crecimiento lento).

PRUEBA DE CMI POR MICRODILUCIN EN CALDO PARA Nocardia. PRUEBAS RADIOMTRICAS (BACTEC) (para micobacterias de crecimiento lento).

CMI (MIC) = CONCENTRACION MINIMA INHIBITORIA

TIPOS DE ANTIBIOGRAMA

LOS ANTIBIOGRAMAS SE CLASIFICAN SEGN LA FORMA DE INCORPORACIN DEL AGENTE ANTIMICROBIANO Y SEGN EL MEDIO DE CULTIVO EMPLEADO.

ANTIBIOGRAMA POR DILUCIN En medio lquido En medio slido

ANTIBIOGRAMA POR DIFUSIN En medio slido

ANTIBIOGRAMA POR ELUCIN EN DISCO PRUEBA DE LA BETA - LACTAMASA

ANTIBIOGRAMA POR DILUCIN:

EN MEDIO LQUIDO

SE BASA EN UN ESTUDIO CUANTITATIVO, EMPLEANDO DISTINTAS CONCENTRACIONES DEL AGENTE ANTIMICROBIANO. INTERPRETACIN: SE OBSERVA EL CRECIMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS MEDIANTE LA APARICIN DE TURBIDEZ EN EL MEDIO, O MEDIANTE CAMBIO DE COLOR DEBIDO AL VIRAJE DEL INDICADOR PREVIAMENTE ADICIONADO AL MEDIO.

EN MEDIO SLIDO

PUEDE DETECTAR LA ACCIN DEL ANTIMICROBIANO FRENTE A VARIOS MICROORGANISMOS A LA VEZ EN UNA MISMA PLACA DE PETRI. SE DIVIDE LA PLACA EN DISTINTAS PARTES Y SE INOCULAN DIFERENTES MICROORGANISMOS EN CADA UNA DE ELLAS. INTERPRETACIN: SE OBSERVA EN LA PLACA LA CONCENTRACIN MNIMA DEL ANTIMICROBIANO, CAPAZ DE INHIBIR EL CRECIMIENTO DE LOS MICROORGANISMOS

Muy Sensible

Sensible

CONCENTRACIN MNIMA BACTERICIDA (CMB):

Medianamente Sensible

Resistente

PERMITE IDENTIFICAR LA CONCENTRACIN MNIMA DE ANTIBITICO QUE MATA A LAS BACTERIAS.

PRUEBA DE CONCENTRACIN MNIMA INHIBITORIA (MIC CMI): CONCENTRACIN MNIMA DE ANTIBITICO QUE IMPIDE EL CRECIMIENTO DE UNA CEPA BACTERIANA (CMI50 Y CMI90,,Inhiben el 50 y 90% de las bacterias, respectivamente).

ENTRE MS BAJOS SEAN ESTOS VALORES, EXPRESADOS EN microgramos /ml mg/ml, MS POTENTE SER EL ANTIBITICO CONTRA UNA DETERMINADA CEPA BACTERIANA.

 ANTIBIOGRAMA POR ELUCIN EN DISCO:

PERMITE IDENTIFICAR CUANDO UN MICROORGANISMO ES CAPAZ DE RESISTIR LA ACCIN DEL AGENTE ANTIMICROBIANO Y CRECER, SIENDO AS RESISTENTE A DICHO AGENTE. INTERPRETACIN: SI ES CAPAZ DE CRECER EL

MICROORGANISMO SE CONSIDERA RESISTENTE.

PRUEBA DE LA BETA-LACTAMASA:

ALGUNOS MICROORGANISMOS SON CAPACES DE PRODUCIR ENZIMAS BETA-LACTAMASAS DESTRUYENDO AL GRUPO BETA LACTMICO DE LAS PENICILINAS. TAMBIN PUEDEN ACTUAR LAS PENICILASAS, CEFALOSPORINASAS Y ENZIMAS R-TE QUE DESTRUYEN PENICILINAS, AMPICILINAS Y CEFALOSPORINAS Staphylococcus aureus, Haemophilus influenzae y Neisseria gonorrhoeae

TECNICA KIRBY - BAUER

ANTIBIOGRAMA POR DIFUCIN EN MEDIO SLIDO SLIDO:

CONSISTE

EN

COLOCAR

DISCOS

DE

PAPEL

IMPREGNADO CON ANTIBIOTICOS SOBRE EL MEDIO DE AGAR, EL CUAL HA SIDO ANTES INOCULADO CON EL MICROORGANISMOS PROBLEMA. INTERPRETACIN: A MEDIDA QUE EL/LOS

ANTIBIOTICOS SE DIFUNDEN DESDE LOS DISCOS VAN MATANDO LAS BACTERIAS SENSIBLES,

OBSERVANDOSE HALOS DE INHIBICIN ALREDEDOR DE LOS DISCO, CUYO DIMETRO ES PROPORCIONAL A LA ACCIN DEL AGENTE ANTIMICROBIANO.

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD POR DIFUSIN EN DISCO (MEDIO DE CULTIVO MLLER-HINTON)

METODOLOGA.

1. SESIN

M Ajustar el inoculo a Escala de McFARLAN

a Comparar la turbidez del tubo estndar (envuelto en papel aluminio) con los tubos de cultivo de Escherichia coli y Staphylococcus aureus. a Si no es igual, aadir 1 - 4 gotas de solucin salina a los tubos de E coli y S aureus, hasta ajustar la turbidez.

ESCALA DE McFARLAN: Turbidez originada de la reaccin de c. sulfrico con cloruro barico formando un precipitado blanco de sulfato de bario.

METODOLOGA.

1. SESIN

N Inoculacin de la placa en Medio de cultivo Mller Hinton

Tomar un hisopo estril y mojarlo en la suspensin bacteriana (tubos

cultivo de Escherichia coli y Staphylococcus aureus), quitando el exceso del lquido presionando el hisopo contra las paredes del tubo.
Sembrar en tres direcciones. Dejar secar 5 10 minutos. Depositar los discos con unas pinzas estriles y presionarlos ligeramente contra el agar, PROCURANDO NO PERFORAR EN AGAR. Esperar 5 10 minutos, invertir la placa e incubar a 35C durante 16-18 hrs

Colocacin de sensidiscos en la placa con Meller Hinton.

2. SESIN
Medir con una regla o vernier los dimetros de las zonas de inhibicin completa. Determinar la sensibilidad del microorganismo (S,I,R) Comparar los resultados con las tablas del Manual de Prcticas y/o en libros de Microbiologa. Reportar los resultados.

S: Sensible. I: Intermedio. R: Resistente.

Multidiscos.

Dilucin seriada en tubo.

Prueba de sensibilidad.

Reporte de resultados.

Autores.
Yolanda Guevara Gmez. Rafael Garca Gonzlez. Aurora Candil Ruiz