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Liquidos Serosos 1 Comp

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ESTUDIO CITOQUÍMICO DE LIQUIDOS SEROSOS

Lic. Mercedes Catani Dr. Isidoro Prudente Dra. Rosario San Martín Dra. Silvia Zunino Torres

Hospital de Clínicas. Departamento de Laboratorio Clínico. Repartición Hematología y Citología.

LÍQUIDO SEROSO:

Se denomina así al líquido que normalmente se encuentra en las cavidades serosas: -Cavidad pleural: 10-20 ml -Cavidad peritoneal: 50 ml -Cavidad pericárdica: 100 ml

DERRAME SEROSO:

Acumulación patológica de líquido en una cavidad serosa Pleural (derrame pleural)  Pericárdica (derrame pericárdico)  Peritoneal (ascitis) 

c. linfático Presión hidrostática

Capilar sistémico

Presión coloidosmótica

Capilar pulmonar

serosa parietal

serosa visceral

MECANISMOS DE FORMACIÓN DE DERRAMES SEROSOS 

p. hidrostática p. coloidosmótica

Insuficiencia Cardíaca Congestiva S.nefrótico Cirrosis

TRASUDADO  

permeabilidad capilar

Infecciones E.. Inflamatorias Neoplasias

EXUDADO 

obstrucción del drenaje linfático
Neoplasias Traumatismo

Los derrames serosos pueden presentarse como complicación de distintas patologías.  Su estudio citoquímico y bacteriológico no sólo proporciona una orientación diagnóstica sino que en algunas situaciones determina conductas terapéuticas.  .

derrames neoplásicos. traumatismos.Examen macroscópico ASPECTO Hemorrágico Punción traumática. TEP No tiene valor diagnóstico Sobrenadante límpido: células Sobrenadante turbio: bacterias lípidos Derrames quilosos y seudoquilosos. Hemático o serohemático Turbio Opalescente. lechoso .

Examen químico 1. Parámetros bioquímicos utilizados para diferenciar trasudados y exudados Parámetros bioquímicos para determinar la etiología de un exudado 2. .

Criterios de Light  Proteínas líquido pleural Proteínas séricas  LDH > 0.5 liquído pleural LDH sérica > 0.6 > 200 UI / L  LDH en líquido pleural Se considera que el líquido es un exudado cuando cumple uno o más de estos criterios .

PARÁMETROS BIOQUÍMICOS UTILIZADOS PARA DIFERENCIAR TRASUDADOS de EXUDADOS PLEURALES Trasudado Proteínas LDH Colesterol * 30 g / L 200 U / L 60 mg / dl Exudado u 30 g / L u 200 U / L u 60 mg / dl * Sólo en líquidos pleurales . en líquidos de ascitis se utiliza como criterio para diferenciar derrames neoplásicos de no neoplásicos .

PARAMETROS UTILIZADOS EN LIQUIDOS DE ASCITIS  Gradiente de  Albúmina Albúmina sérica ± albúmina líquido :  >= 1.1 g/l = no HTP .1 g/l = HTTP  < 1.

Etiología de un exudado pleural Parámetros bioquímicos  GLUCOSA  pH  TRIGLICÉRIDOS  AMILASA  CREATININA .

‡DERRAMES  REUMÁTICAS ‡NEOPLASIAS .GLUCOSA  Su concentración es similar a la plasmática en los trasudados y en la mayoría de los exudados Valores 60 mg/dl pueden verse: PARANEUMÓNICOS COMPLICADOS ‡BK ‡ENF.

2 pueden observarse en: PARANEUMÓNICOS COMPLICADOS ‡BK ‡Enf. Reumáticas ‡Neoplasias ‡Acidosis sistémica ‡DERRAMES .pH   Sólo tiene valor diagnóstico cuando se determina en las mismas condiciones que el pH arterial Valores 7.

Permite diferenciar: .derrames quilosos (obstrucción del drenaje linfático con acumulación de linfa ±neoplasias-) -seudoquilosos ( por acumulación de colesterol ± BK.Triglicéridos   Su determinación está indicada en líquidos de aspecto opalescente o lechoso y en aquellos con sobrenadante turbio. AR-). quiloso TG  seudoquiloso 50 mg/dl " 110 mg/dl Valores entre 50-110 mg/dl : estudio de quilomicrones .

1 g/l = no HTP .1 g/l = HTTP  < 1.Líquido de Ascitis Parámetros Bioquímicos  Gradiente de  Albúmina Albúmina sérica ± albúmina líquido :  >= 1.

Amilasa  Valores de amilasa mayores al límite superior normal en suero pueden verse en derrames causados por: ‡Pancreatitis ‡Rotura esofágica ‡Neoplasias .

.  Se encuentran valores aumentados de urea y creatinina en el líquido seroso y valores normales de creatinina en sangre.Urea y creatinina  Su determinación está indicada ante la sospecha de presencia de orina en la cavidad serosa (estallido vesical. posoperatorio de cirugía abdominal).

Citología de líquidos de cavidades serosas .

Citología de líquidos de cavidades serosas Normalmente procedentes de: ‡ ‡ ‡ revestimiento seroso : célula mesotelial sistema monocítico / macrofágico capilares subserosos .

Célula mesotelial NORMAL ‡ ‡ ‡ ‡ ‡ ‡ Redondeada 18 a 40 u (25 u) Núcleo central ovoide 2 a 3 nucléolos Citoplasma denso adelgazado en periferia Aisladas o en grupos de menos de 12 células (ventana) .

Célula mesotelial REACTIVA ‡ Mayor basofilia citoplásmica ‡ Bordes bien delimitados ‡ Discreto grado de anisocariosis .

Célula mesotelial ‡ ‡ INVOLUTIVA Derrames crónicos Degeneración vacuolar .

finamente vacuolado (encaje) Material fagocitado Formas multinucleadas y gigantes sólo en serositis reumática . claro. (CD68+) 15 ± 100 u (30 u) Núcleo excéntrico arriñonado Citop.Macrófago ‡ ‡ ‡ ‡ ‡ ‡ 45 % células normales en peritoneo.

Procesos benignos: Formas T NA. % variable. TBC. Infarto. PMN. viral. Inflamación.Células procedentes de capilares subserosos ‡ ‡ ‡ ‡ Glóbulos rojos. . neoplasias Eosinófilos. parasitaria. Htx. Ntx. TEP. Punción (1 ul/mm3) Hemorragia. mesenquimopatías. (10%) Infección viral. Linfocitos.

Inespecífica . Específica TBC TEP Cirrosis hepática Derrames neoplásicos .Cuadros citológicos patológicos Células en proporciones variables dependiendo de la causa. ‡ ‡ ‡ ‡ ‡ Inflamación . duración y complicaciones del derrame.

-células mesoteliales y PMN .DPCA: GB > 100/ mm3 50% PMN .Inflamación ‡ Inespecífica.NA .sobreinfección PMN +50%: .pleura: empiema .IC .ascitis: PBE : recuento en cámara de Neubauer PMN > 250/ mm3 .

m. eosinófilo.macrófagos .cél. mesoteliales y eosinófilos ‡ .cél. .Inflamación .LE 30% pleuritis lúpica.LES .material necrótico granular Específica. .AR . gigantes multinucleados .

En peritoneo . .infiltrado linfocitario crónico con reacción mesotelial y macrofágica.infiltrado linfocitario crónico sin reacción mesotelial.TBC ‡ En pleura ‡ .

reacción mesotelial a/v con alt. .PMN y linfocitos.TEP Necrosis hemorrágica subpleural con reacción inflamatoria perilesional.macrófagos con gránulos de hemosiderina.fondo hemorrágico. . . citomorfológicas. . ‡ Citología pleomórfica : .

linfocitos. Puede observarse hepatocitos como células epiteliales poliédricas con núcleo central y disposición acinar (no debe confundirse con metástasis) . y PMN. macrófagos.Cirrosis hepática Celularidad pleomórfica: células mesoteliales.

ovario. cuyas células presentan variadas atipías citomorfológicas.Derrame neoplásico ‡ ‡ ‡ Mayor frecuencia corresponde a adenocarcinomas de pulmón. El mesotelioma ( neoplasia de la serosa ) es muy poco frecuente. Tendencia a formar grupos celulares cohesivos. tridimensionales o seudoacinos. . mama.

MARCADORES TUMORALES .

y permite conocer la presencia. Al 1º grupo dedicaremos nuestra atención. evolución o respuesta terapéutica de un tumor maligno. Incluye: 1)productos detectables in situ en el tumor o sus metástasis y 2) productos liberados a la sangre y detectables en suero.MARCADORES TUMORALES ‡ ‡ ‡ Sustancia producida por la célula neoplásica que refleja su crecimiento y/o actividad. .

.INMUNOCITOQUIMICA ‡ ‡ ‡ .Definición: técnica que hace visible una reacción antígeno .Aporta mayor sensibilidad diagnóstica a los criterios exclusivamente morfológicos. . .anticuerpo en muestras citológicas.Inmunohistoquímica (IHQ): si dicha reacción se realiza sobre tejidos.

METODOLOGIA ‡ ‡ ‡ Se utilizan Ac Monoclonales (Moabs): poseen alta homogeneidad de lugares específicos de unión con el antígeno. . Fijador: debe estar en función de los grupos reactivos antigénicos que se pretende demostrar. Los antígenos no deben ser destruidos ni enmascarados por los procedimientos técnicos.

Aplicable a PAAF. IFI). Se clasifican: 1) actúan por precipitación 2) actúan estableciendo uniones cruzadas. .METODOLOGIA ‡ ‡ ‡ ‡ Fijador: debe buscar un equilibrio entre la preservación de la morfología y la inmunoreactividad. bloques celulares. improntas. derrames. etc. Sistemas de revelado: hacen visible la reacción (IFD.

Enzimas e inhibidores: NSE. CA15-3. MUC3A. (CIFRA.PANELES DE ANTICUERPOS ‡ ‡ ‡ ‡ ‡ ‡ Los paneles de Moabs se realizan siguiendo 2 líneas: 1) por ANTIGENOS a estudiar 2) por TUMORES a detectar. Citoqueratinas: 8. (CA-125. MUC2. . Mucinas: MUC1. CA 27-29). CEA. 19. 1)Por Antígenos a detectar: Ag Oncofetales : AFP. SCC. TPA). 18. TPS.

Tumores a estudiar CQ Carcinoma + Linfoma Sarcoma Melanoma VM LCA HMB 45 + + + + + + + .

3 Desmina + + + + Mesotel.Adenocarcinoma vs Mesotelioma AdenoC CEA CQ B Peso CQ A Peso CD 15 B 72. + + + .

PROTOCOLO DE PROCESAMIENTO DE LIQUIDOS SEROSOS .

.PROTOCOLO DE PROCESAMIENTO DE LIQUIDOS SEROSOS ‡Recepción de la muestra Los líquidos obtenidos por punción serán remitidos rápidamente al laboratorio en 4 tubos a) tubo estéril para estudio bacteriológico. c) tubo con anticoagulante para estudio citológico. d) tubo en anaerobiosis para determinación de pH. b) tubo seco sin anticoagulante para estudio bioquímico.

Procesamiento 1) Macroscopía ‡ color ‡ aspecto ‡ presencia o no de coágulo ‡ presencia de restos tisulares 2) Centrifugación ‡ convencional 2500 rpm 10¶ .

capa blanca celular .volumen .características -hemático .aspecto ‡ sedimento .Procesamiento 3) Postcentrifugado ‡ sobrenadante .color .

amilasa.Procesamiento 4) Estudio bioquímico del sobrenadante ‡ glucosa ‡ proteínas totales ‡ colesterol ‡ LDH ‡ Tg (sobrenadante turbio) ‡ otras determinaciones . iones. etc. urea. .

Procesamiento 5) Citología ‡ Frotis del sedimento resuspendido de centrifugación convencional. . o con una gran capa celular en el sedimento convencional. Se resuspende el sedimento en 250ul de sobrenadante y se carga la cápsula. ‡ Citocentrifugación Se realiza de rutina excepto en líquidos muy hemorrágicos o purulentos.

Disposición celular en monocapa evitando el solapamiento. Permite realización de técnicas inmunocitoquímicas. .Ventajas de la citocentrifugación ‡ ‡ ‡ ‡ Mayor concentración celular. Conserva intacta la morfología celular.

36 % resultaron positivos para citocentrifugación. ‡ . De una serie de citologías de líquidos serosos que fueron negativas para atipías citomorfológicas mediante centrifugación convencional .‡ La citocentrifugación siempre debe ser realizada en forma paralela a la centrifugación convencional que aporta la noción cuantitativa de los elementos celulares.

debiéndose acortar a la mitad la etapa de Giemsa. .Procesamiento 6 ) Secado de lo frotis al aire y tinción con MGG. Los tiempos de tinción son similares a los empleados en extendidos hematológicos.

Confección del informe ‡ ‡ ‡ ‡ ‡ ‡ ‡ Nombre del paciente Procedencia Datos filiatorios Tipo de material Estudio realizado .macroscopía .citología .bioquímica .en suma diagnóstico Fecha Firma responsable .

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