ESTUDIO CITOQUÍMICO

DE
LIQUIDOS SEROSOS

Lic. Mercedes Catani Dra. Rosario San Martín

Dr. Isidoro Prudente Dra. Silvia Zunino Torres

Hospital de Clínicas.
Departamento de Laboratorio Clínico.
Repartición Hematología y Citología.
LÍQUIDO SEROSO:

Se denomina así al líquido que

normalmente se encuentra en las
cavidades serosas:

-Cavidad pleural: 10-20 ml

-Cavidad peritoneal: 50 ml
-Cavidad pericárdica:  100 ml
DERRAME SEROSO:

Acumulación patológica de líquido en

una cavidad serosa

 Pleural (derrame pleural)

 Pericárdica (derrame pericárdico)
 Peritoneal (ascitis)
 c. linfático

Presión
hidrostática

Capilar Capilar
sistémico Presión pulmonar
coloidosmótica

serosa serosa
parietal visceral
MECANISMOS DE FORMACIÓN DE DERRAMES
SEROSOS
Insuficiencia
 p. hidrostática Cardíaca
Congestiva TRASUDADO
 p. coloidosmótica S.nefrótico
Cirrosis

Infecciones
 permeabilidad capilar E.. Inflamatorias
Neoplasias
EXUDADO
 obstrucción del drenaje linfático
Neoplasias
Traumatismo
 Los derrames serosos pueden presentarse
como complicación de distintas patologías.
 Su estudio citoquímico y bacteriológico no
sólo proporciona una orientación
diagnóstica sino que en algunas situaciones
determina conductas terapéuticas.
Examen macroscópico
ASPECTO
Hemorrágico Punción traumática, derrames
neoplásicos, traumatismos,
TEP
Hemático o serohemático No tiene valor diagnóstico

Turbio Sobrenadante límpido: células

Sobrenadante turbio: bacterias
lípidos
Opalescente, lechoso Derrames quilosos y
seudoquilosos.
Examen químico

1. Parámetros bioquímicos utilizados para

diferenciar trasudados y exudados

2. Parámetros bioquímicos para

determinar la etiología de un exudado
 Criterios de Light
 Proteínas líquido pleural
Proteínas séricas
> 0.5

 LDH liquído pleural

LDH sérica
> 0.6

 LDH en líquido pleural >200 UI / L

Se considera que el líquido es un exudado cuando cumple uno o
más de estos criterios
 PARÁMETROS BIOQUÍMICOS UTILIZADOS PARA
DIFERENCIAR TRASUDADOS de EXUDADOS
PLEURALES
Trasudado Exudado

Proteínas  30 g / L  30 g / L

LDH  200 U / L  200 U / L

Colesterol *  60 mg / dl  60 mg / dl

* Sólo en líquidos pleurales , en líquidos de ascitis se

utiliza como criterio para diferenciar derrames
neoplásicos de no neoplásicos
PARAMETROS UTILIZADOS EN LIQUIDOS
DE ASCITIS

 Gradiente de Albúmina

 Albúmina sérica – albúmina líquido :

 >= 1.1 g/l = HTTP
 < 1.1 g/l = no HTP
Etiología de un exudado pleural
Parámetros bioquímicos
 GLUCOSA
 pH
 TRIGLICÉRIDOS
 AMILASA
 CREATININA
GLUCOSA
 Su concentración es similar a la plasmática en
los trasudados y en la mayoría de los exudados

 Valores  60 mg/dl pueden verse:

•DERRAMESPARANEUMÓNICOS
COMPLICADOS
•BK

•ENF. REUMÁTICAS
•NEOPLASIAS
pH
 Sólo tiene valor diagnóstico cuando se
determina en las mismas condiciones que el pH
arterial
 Valores  7.2 pueden observarse en:

•DERRAMESPARANEUMÓNICOS
COMPLICADOS
•BK

•Enf. Reumáticas
•Neoplasias

•Acidosis sistémica
 Triglicéridos
 Su determinación está indicada en líquidos de aspecto
opalescente o lechoso y en aquellos con sobrenadante
turbio.
 Permite diferenciar:
- derrames quilosos (obstrucción del drenaje linfático con
acumulación de linfa –neoplasias-)
-seudoquilosos ( por acumulación de colesterol – BK, AR-).

quiloso seudoquiloso
TG  110 mg/dl  50 mg/dl

 Valores entre 50-110 mg/dl : estudio de quilomicrones

 Líquido de Ascitis
Parámetros Bioquímicos

 Gradiente de Albúmina

 Albúmina sérica – albúmina líquido :

 >= 1.1 g/l = HTTP
 < 1.1 g/l = no HTP
Amilasa
 Valores de amilasa mayores al límite superior
normal en suero pueden verse en derrames
causados por:

•Pancreatitis

•Rotura esofágica
•Neoplasias
Urea y creatinina
 Su determinación está indicada ante la sospecha
de presencia de orina en la cavidad serosa
(estallido vesical, posoperatorio de cirugía abdominal).

 Se encuentran valores aumentados de urea y

creatinina en el líquido seroso y valores normales
de creatinina en sangre.
Citología de líquidos de
cavidades serosas
 Citología de líquidos de
cavidades serosas

Normalmente procedentes de:

• revestimiento seroso : célula mesotelial

• sistema monocítico / macrofágico

• capilares subserosos
 Célula mesotelial
NORMAL

• Redondeada
• 18 a 40 u (25 u)
• Núcleo central ovoide
• 2 a 3 nucléolos
• Citoplasma denso adelgazado en periferia
• Aisladas o en grupos de menos de 12 células
(ventana)
 Célula mesotelial
REACTIVA
• Mayor basofilia citoplásmica
• Bordes bien delimitados
• Discreto grado de anisocariosis
 Célula mesotelial

INVOLUTIVA
• Derrames crónicos
• Degeneración vacuolar
 Macrófago
• 45 % células normales en peritoneo. (CD68+)
• 15 – 100 u (30 u)
• Núcleo excéntrico arriñonado
• Citop. claro,finamente vacuolado (encaje)
• Material fagocitado
• Formas multinucleadas
y gigantes sólo en
serositis reumática
 Células procedentes de
capilares subserosos
• Glóbulos rojos. Punción (1 ul/mm3)
Hemorragia.
• PMN. % variable. Inflamación.
Infarto.
• Linfocitos. Procesos benignos: Formas T
NA. viral, TBC, neoplasias
• Eosinófilos. (10%) Infección viral, parasitaria,
mesenquimopatías, TEP, Ntx, Htx.
 Cuadros citológicos patológicos
Células en proporciones variables dependiendo de
la causa, duración y complicaciones del derrame.

• Inflamación . Inespecífica
. Específica
• TBC
• TEP
• Cirrosis hepática
• Derrames neoplásicos
 Inflamación
• Inespecífica. -células mesoteliales y PMN
- IC
- NA
- sobreinfección
PMN +50%:
- pleura: empiema
- ascitis: PBE : recuento en
cámara de Neubauer
PMN > 250/ mm3
- DPCA: GB > 100/ mm3
50% PMN
 Inflamación

- AR - macrófagos
- m. gigantes multinucleados
- material necrótico granular
• Específica. eosinófilo.

- LES - cél.LE 30% pleuritis lúpica.

- cél. mesoteliales y eosinófilos
 TBC
• En pleura - infiltrado linfocitario crónico sin
reacción mesotelial.
• En peritoneo - infiltrado linfocitario crónico con
reacción mesotelial y macrofágica.
 TEP
Necrosis hemorrágica subpleural con reacción
inflamatoria perilesional.

• Citología pleomórfica :
- fondo hemorrágico.
- reacción mesotelial a/v con
alt. citomorfológicas.
- macrófagos con gránulos
de hemosiderina.
- PMN y linfocitos.
 Cirrosis hepática

Celularidad pleomórfica: células mesoteliales,

macrófagos, linfocitos, y PMN.

Puede observarse hepatocitos como células

epiteliales poliédricas con núcleo central y
disposición acinar (no debe confundirse con
metástasis)
 Derrame neoplásico

• Mayor frecuencia corresponde a adenocarcinomas

de pulmón, mama, ovario.
• Tendencia a formar grupos celulares cohesivos,
tridimensionales o seudoacinos, cuyas células
presentan variadas atipías citomorfológicas.
• El mesotelioma ( neoplasia de la serosa ) es muy
poco frecuente.
MARCADORES
TUMORALES
 MARCADORES
TUMORALES
• Sustancia producida por la célula neoplásica
que refleja su crecimiento y/o actividad, y
permite conocer la presencia, evolución o
respuesta terapéutica de un tumor maligno.
• Incluye: 1)productos detectables in situ en
el tumor o sus metástasis y 2) productos
liberados a la sangre y detectables en suero.
• Al 1º grupo dedicaremos nuestra atención.
 INMUNOCITOQUIMICA
• .Definición: técnica que hace visible una
reacción antígeno - anticuerpo en muestras
citológicas.
• .Inmunohistoquímica (IHQ): si dicha
reacción se realiza sobre tejidos.
• .Aporta mayor sensibilidad diagnóstica a
los criterios exclusivamente morfológicos.
 METODOLOGIA
• Se utilizan Ac Monoclonales (Moabs):
poseen alta homogeneidad de lugares
específicos de unión con el antígeno.
• Los antígenos no deben ser destruidos ni
enmascarados por los procedimientos
técnicos.
• Fijador: debe estar en función de los grupos
reactivos antigénicos que se pretende
demostrar.
 METODOLOGIA
• Fijador: debe buscar un equilibrio entre la
preservación de la morfología y la
inmunoreactividad.
• Se clasifican: 1) actúan por precipitación
2) actúan estableciendo uniones cruzadas.
• Sistemas de revelado: hacen visible la
reacción (IFD, IFI).
• Aplicable a PAAF, derrames, bloques
celulares, improntas, etc.
 PANELES DE
ANTICUERPOS
• Los paneles de Moabs se realizan siguiendo 2
líneas: 1) por ANTIGENOS a estudiar
2) por TUMORES a detectar.
• 1)Por Antígenos a detectar:
• Ag Oncofetales : AFP, CEA.
• Mucinas: MUC1, MUC2, MUC3A, (CA-125,
CA15-3, CA 27-29).
• Citoqueratinas: 8, 18, 19, (CIFRA, TPS, TPA).
• Enzimas e inhibidores: NSE, SCC.
 Tumores a estudiar
CQ VM LCA HMB
45
Carcinoma + - - -
Linfoma - + + -
Sarcoma - + + -
Melanoma - + + +
 Adenocarcinoma vs
Mesotelioma
AdenoC Mesotel.
CEA + -
CQ B Peso + +
CQ A Peso - +
CD 15 + -
B 72.3 + -
Desmina - +
 PROTOCOLO DE
PROCESAMIENTO DE
LIQUIDOS SEROSOS
 PROTOCOLO DE
PROCESAMIENTO DE
LIQUIDOS SEROSOS
•Recepción de la muestra
Los líquidos obtenidos por punción serán
remitidos rápidamente al laboratorio en 4 tubos
a) tubo estéril para estudio bacteriológico.
b) tubo seco sin anticoagulante para estudio
bioquímico.
c) tubo con anticoagulante para estudio citológico.
d) tubo en anaerobiosis para determinación de pH.
 Procesamiento

1) Macroscopía
• color
• aspecto
• presencia o no de coágulo
• presencia de restos tisulares
2) Centrifugación
• convencional 2500 rpm 10’
 Procesamiento

3) Postcentrifugado
• sobrenadante - color
- aspecto

• sedimento - volumen
- características -hemático
- capa blanca celular
 Procesamiento

4) Estudio bioquímico del sobrenadante

• glucosa
• proteínas totales
• colesterol
• LDH
• Tg (sobrenadante turbio)
• otras determinaciones - amilasa, urea, iones, etc.
 Procesamiento
5) Citología
• Frotis del sedimento resuspendido de
centrifugación convencional.

• Citocentrifugación
Se realiza de rutina excepto en líquidos muy
hemorrágicos o purulentos, o con una gran capa
celular en el sedimento convencional.
Se resuspende el sedimento en 250ul de
sobrenadante y se carga la cápsula.
 Ventajas de la citocentrifugación

• Mayor concentración celular.

• Disposición celular en monocapa evitando el
solapamiento.
• Conserva intacta la morfología celular.
• Permite realización de técnicas inmunocito-
químicas.
• La citocentrifugación siempre debe ser realizada
en forma paralela a la centrifugación
convencional que aporta la noción cuantitativa de
los elementos celulares.

• De una serie de citologías de líquidos serosos que

fueron negativas para atipías citomorfológicas
mediante centrifugación convencional , 36 %
resultaron positivos para citocentrifugación.
 Procesamiento

6 ) Secado de lo frotis al aire y tinción con

MGG.
Los tiempos de tinción son similares a los
empleados en extendidos hematológicos,
debiéndose acortar a la mitad la etapa de
Giemsa.
 Confección del informe
• Nombre del paciente
• Procedencia
• Datos filiatorios
• Tipo de material
• Estudio realizado - macroscopía
- bioquímica
- citología
- en suma diagnóstico
• Fecha
• Firma responsable