CAPITULO

13

Vitaminas y coenzimas

Ademas de sus componentes mayoritarios -proteinas, acidos nucleicos, glucidos y lipidos~ las celulas vivas contienen tambien unas sustancias organicas que actuan en cantidades minimas, las vitaminas. Aunque estas sustancias son vitales para much as form as de vida, su importancia bio16gica se manifest6 debido a que algunos organismos no las pueden sintetizar, y deben adquirirlas, por tanto, de procedencia ex6gena.

La historia de las vitaminas, uno de los episodios mas importantes en la historia de la bioquimica, ha afectado profundamente a la salud y al bienestar humanos asi como a nuestra comprensi6n de los procesos cataliticos que se desarrollan en el metabolismo de los organismos vivientes. Que la dieta se hallaba relacionada con la enfermedad, era un hecho reconocido desde la Antigiiedad. Asi, se supo pronto que el higado curaba la ceguera nocturna. En el siglo XVII se utiliz6 por primera vez el aceite de higado de bacalao para el tratamiento del raquitismo, y mas tarde se descubri6 que el jugo de lima era un preventivo para los sin tom as del escorbuto entre los marinos de la Armada britanica (de ahi que se les conociera por el apodo de «Iimeys»}. P ero no fue hasta el afio 1912 en que el inqles F. G. Hopkins demostr6 experimentalmente que los animales necesitan algo mas que proteinas, grasas y glucidos en la dieta para su normal crecimiento. Postu16 que uno 0 mas «factores accesorios» presentes en los alimentos naturales eran tambien necesarios para la nutrici6n animal. En el mismo afio, Casimir Funk obtuvo un concentrado de una amina a partir de la cascarilla del arroz que aliviaba los sin tom as del beriberi, enfermedad corriente entonces entre los marineros japoneses Iimitados a una dieta de arroz molido o descascarillado. Acun6 el nombre de oitemine; indicativo de amina esencial para la vida (conservamos el nombre en Ia actualidad aunque muchas de las sustancias de esta clase no son aminas). Poco tiempo despues se puso claramente de manifiesto que deberian existir varias vitaminas, cuando el norteamericano E. V. McCollum descubri6 que las ratas j6venes precisan tanto de factores liposolubles como hidrosolubles para su crecimiento.

Estos descubrimientos iniciales condujeron en ultimo termino al desarrollo de un abordaje sistematico del aislamiento de los factores necesarios en cantidades minimas para la ali-

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PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

mentacion de la rata y de otros animales de laboratorio. Se administraron a animales jovenes unas dietas sinteticas preparadas a partir de proporciones especlficas de compuestos quimicos conocidos, tales como proteinas 0 aminoacidos, gra~ sas, glucidos y minerales. Aunque estos componentes no bastan por si solos para proporcionar ritmos normales de erecimiento, cuando la racion se suplementa con alimentos naturales, ricos en factores de crecimiento se observan incrementos en estos ritmos de crecimiento. Mediante un Iraccionamiento sistematico de las fuentes naturales de los factores de crecimiento, y ensayando la pot en cia de los concentrados sobre el ritmo de crecimiento de los ani males se loqro finalmente obtener dichos factores en forma pura, 10 cual permiti6 su identificacion quimica. Ademas del ritmo decrecimiento v/» los sintomas deficitarios, se han empleado otros criterios, tales como la escamosidad de la piel, deslustre del pelo, alteraciones motrices, etc., para determinar la pot en cia de los concentrados vitaminicos. La determinacion de las cantidades precisas de vitamina exoqena que necesitan los animales experimentales o el hombre es siempre complicada, debido a que parte 0 toda la demanda de la misma puede obtenerse gracias a la presencia de los microorganism os intestinales, que pueden sintetizar algunas de las vitaminas.

Se produjo un cambio profundo a mediados de la decada de los afios 30, en que fueron aisladas por primera vez algunas vitaminas, y se establederon sus estructuras moleculares, hazafia de laboratorio de propordones heroicas en aque ... lla epoca, ya que sola mente pod ian obtenerse cantidades miliqramaticas de las sustancias puras, a menudo partiendo de centenares de kilogramos -en realidad, de toneladas- del material de partida. Se identificaron en unos afios la tiamina (vitamina: !lJ), que es la sustancia antiberiberi,· la riboflavi~ na (vitamina: B?,) y el acido nicotinico, que es el factor antipelagra. Poco despues se descubri6 que estas vitaminas actuan como componentes fundamentales de algunos coenzimas. Por ejemplo, el enzima que ahora recibe el nombre de piruvato~ descerboxilese, que cataliza la descarboxilaclcn del acido piruvico a acetaldehido y CO2, una etapa en la Iermentacion alcoholics del azucar por la levadura, precis a de un cofactor orqanico termoestable llama do cocerboxilese, cuyo aislamiento consiguieron K. Lohmann y P. Schuster en 1936. Poco tiempo despues descubrieron que la cocarboxilasa contiene una molecula de tiamina, 0 vitamina B1• Muy pronto identificaron a la riboflavina y al acido nicotinico como componentes importantes de otros coenzimas, necesarios para la oxidacion enzimatica de los gluddos. Estos descubrimientos demostraron no solamente el papel biol6gico de muchas vitaminas y por. que actuan en cantidadesminimas, sino que han sefialado ademas el camino para la comprension molecular del mecanismo mediante el cual los coenzimas y los enzimas aceleran la velocidad de las reacciones quimicas.

En este capitulo se describiran las principales vitaminas que se conocen en la actualidad, la naturaleza de sus efectos biologicos, los coenzimas de los cuales las vitaminas son componentes esenciales, y se daran ejemplos de la funcicn coenzimatica en las rea cci ones metabolicas especificas catalizadas por los enzimas.

342

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

Tipo

TABLA 13-1. Vitaminas y sus formas coenzlmaticas,

Funci6n promovida

Coenzima 0 forma ectioe

Hidrosolubles Tiamina Riboflavina

Acido nicotinico

Acido pantotenico Piridoxina

Biotina

Acido folico Vitamina B12 Acido lipolco

Acido ascorbico

Liposolubles Vitamina A Vitamina D Vitamina E Vitamina K

Pirofosfato de tiamina (TPP) Flavln-mononuclectido (FMN) Flavfn-adenln-dmucleotido (FAD) Dinucleotido de nicotinamida y de adenina

(NAD)

Dlnucleotido de nicotinamida y de aden ina

fosfato (NADP) Coenzima A (CoA) Fosfato de piridoxal Biocitina

Acido tetrahldrofolico Coenzima B12 Lipcil-Iisina

Transferencia de grupo aldehldo Transferencia de atomo de hidroqeno (electron) Transferencia de atomo de hidr6geno (electron) Transferencia de atomo de hidr6geno (electron)

Transferencia de atomo de hldroqeno (electron)

Transferencia de grupo acilo

Transferencia de grupo amino

Transferencia de carboxilo

Transferencia de grupo monocarbonado Desplazamiento 1,2 de atomos de hidr6geno Transferencia de atomo de hidroqeno y de

grupo acilo

Cofactor de hidroxilacion

l l-crs-Retinal 1,25-Dihidroxicolecalciferol

Ciclo visual

Metabolismo del calcio y del fosfato Antioxidante

Biosintesis de protrombina

Clasificaci6n de las vitaminas

Las vitaminas se clasifican en dos gran des grupos, las hidtosolables y las liposolubles (tabla 13~ 1 ). La funci6n coenzimatica de todas las vitaminas hidrosolubles es razonablemente bien conocida, con excepci6n de la vitamina C. Se necesitan ademas otras varias sustancias hidrosolubles como factores de crecimiento para algunos organismos, pero se encuentran en. cantidades mayores que ellas; se incluyen en este grupo el inositol, la colina y la cernitine.

Las vitaminas liposolubles comprenden a las vitaminas A, D, E y K. Solamente los animales superiores parecen precisarlas de procedencia ex6gena; no se ha podido establecer todavia claramente el papel esencial de las vitaminas liposolubles en los vegetales y en los microorganismos. No parece que sirvan de componentes de los coenzimas, sino que actuan por otros caminos que precisan solamente cantidades minimas de ellas.

Tiamina (vitamina B,) y pirofosfato de tiamina

La tiamina se necesita en la dieta de la mayor parte de los vertebrados y de algunos microorganismos. Su deficiencia produce el beriberi en el hombre y la polineuritis en las aves. Despues del exito inicial de Funk al lograr concentrar el factor antiberiberi, en 1925, B. C. P. Jansen consigui6 su cristalizaci6n; su estructura molecular Iue establecida Iinalmente por el bioquimico americana R. R.Williams y sus colaboradores en 1935. La tiamina esta constituida por una pirimidina sustituida unida mediante un puente metileno a un tiazol sustituido (fig. 13~ 1 ). La tiamina aparece en las celulas, mayormente en su forma de coenzima activo, el pirotostato de tiamina, llamado antiguamente cocarboxilasa (pag. 344).

El pirofosfato de tiamina desempefia el papel de coenzima en dos clases de reacciones enzimaticamente catalizadas de la

343

PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

FIGURA 13-1

Tiemina y piroiosleto de tiemine.

El tiezol sustituido (en color) es la poecion ectioe.

0-

I O=p-O-

I

~

NH2 ~ O=p-O-

t C-S I

N?' 'C-CH2-Nf" 2 I ~

I II "C=C-CH2-CH2

H3C-C""'N./CH I

CH" Pirofosfato de tiamina

fH2 ~

C C-S

N?' 'C-CH _ +f"2 I OH

I II 2 N" I

H C-C CH C=C-CH2--CH2

3 ""'./ I

N CH"

Tiamina (vitamina B,)

corriente principal del metabolismo de los glticidos, en las que se separan grupos aldehido y/o se transfleren: 1) la descarboxilacion de los a-oxoacidos, y 2) la formacion 0 deqradacion de los a-cetoles. En estas reacciones, el anillo de tiazol del pirofosfato de tiamina actua como transportador transitorio de un gropo aldehldo «activo» unido covalentemente. Se necesita tambien Mg2+ como cofactor.

El punto de vista actual sobre el mecanismo por el que el pirofosfato de tiamina actua como coenzima surgio del descubrimiento de que la tiamina promueve por si sola la descarboxilacion no enzimatica del piruvato para rendir acetaldehido y C~. Los estudios efectuados sobre esta reaccion modele revelaron que el atomo . de hidroqeno en la posicion 2 del anillo de tiazol (fig. 13-1), se ioniza Iacilmente para dar un carbani6n, que reacciona con el atomo de carbono carbonilico del piruvato a temperaturas elevadas para rendir CO2 y el hidroxietil derivado del anillo tiazolico. Entonces, el grupo hidroxietilo puede experimentar hidrolisis, para rendir acetaldehido, 0 llegar a oxidarse, con 10 que forma un grupo ad- 10 (fig. 13-2). A consecuencia de la predicci6n efectuada a partir de esta reacci6n modelo, se ha descubierto que se forma pirofosfato de hidroxietilamina (fig. 13-1) cuando la piruvatodescarboxdasa de levadura acttia sobre el piruvato en presencia de pirofosfato de tiamina.

Mas adelante se descrlben detalles ulteriores sobre el papel del pirofosfato de tiamina en la descarboxilaci6n del piruvato (pag. 460), sobre la oxidacion de los a-oxoacidos (pag. 466) y sobre la formaci6n y empleo de los a-cetoles por parte de las transcetolasas (pag. -479).

Cuando se retira la tiamina de Ia dieta de los ani males experimentales, la capacidad de los diferentes tejidos para utilizar el piruvato no declina uniformemente, indican do que en dertos tejidos el pirofosfato de tiamina quese halla unido queda tenazmente retenldo, mientras que en otros se pierde

344

FIGURA 13-2

Etapas de le eccion del pirofosfato

de tiamina en la descerboxilecion del pituveto por la pituveto-descetboxilese.

H

I c-s

_N~2 I

C=CI

CH"

\~CH3-C-COOH

~ Ptruvato

CH3-~(COOH)-OH

c-s

+f"2 I

-N

"C=CI

CH3

Anillo

tiaz6lico del pirofosfato de tiamina

CH3-1H-OH c-s

+ f" 2 I Derivado

-N" 2-hidroxietilico

C=C-

I

CH3

l_ CH -C-H Acetaldehido

17 3 II

o H

\

c-s

-N~ I

c=cI

CH3

FIGURA 13~3

R.iboflavina y enzimas flavinicos.

o II C N C

CH -C9" "C/ """C/ "NH

3 I " I I

CH3-C~ /C" /~ /C=O C N N

H I

C~

I HCOH

I HCOH

I HCOH

I C~OH

Rlboflavfna

H

H

Dinucleotido de adenina y flavina

Forma reducide del anillo de isoaloxacina de los nucleotidos flavinicos.

R represents el resto de la molecule del coenzime.

o " C N C

CH -C9" "C/ """C/ "NH

3 I " I I

CH3-C~ /C" /C"':::,__/C=O

C N -N

H I

CH2

I HCOH

I HCOH

I HCOH

I

CH20P032-

Fosfato de riboflavina (mononucleotido de flavina, FMN)

H

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

Modelo espacial compacto de fosfato de riboflavina

mas facllmente por deqradacion metabolica 0 por excrecion. Por ejemplo, en pichones que han sido privados de tiamina, la capacidad para la utilizacion del piruvato se ve debilitada de manera mas visible en eI cerebro debido a la perdida del coenzima, mientras que la actividad del tejido muscular se ve solo ligeramente afectada. Esta diferencia en el comportamiento de los tejidos explica por que los primeros sintomas que se perciben en la deficiencia de tiamina en los pichones son defectos en la actividad del sistema nervioso irelacionados con la postura y la coordinacion: de aqui el termino de polineuritis aplicado a la deficiencia de tiamina en las aves. Consideraciones semejantes son aplicables a las demas vitaminas hidrosolubles: los tejidos mas sensibles a la privacion; difieren de una vitamina a otra, y en muchos casos, de una especie animal a otra.

Los sin tom as de la deficiencia de tiamina pueden ser inducidos por administracion de ciertos analoqos de la tiamina, tales como la piritiam.ina, en la cual el grupo tiazol esta sustituido por piridina, y la oxitiam.ina, en la que el grupo amina de la porcion de pirimidina se halla sustituido por un grupo hidroxilo. Probablemente estos analoqos, que no poseen por si mismos actividad vitaminica, compiten 0 desplazan al pirofosfato de tiamina de los enzimas a los que se halla normalmente unido. El enzima tiam.inasa, que esta presente en los microorganismos intestinales, inactiva a la tiamina escindiendol a entre los anillos. Este enzima es el responsable de la paralisis de Chastek, enfermedad de los zorros en cautividad y de losvisones alimentados con entrafias de ganado. En gene~ ral, el consumo humano de tiamina tiende a ser escaso, y a algunos alimentos, como por ejemplo el pan blanco. se les adiciona frecuentemente la vitamina.

Riboflavina (vitamina B2) y Havfn-nucleotidos

Los pigmentos amarillos de los cuales sabemos hoy dia que estan relacionados con la riboflavina, fueron aislados primeramente de los tejidos animales, de los huevos y de la leche. El aislado de la leche, llamado al principio lactoflavin a y posteriormente ribo[lav:ina, se via que era un factor de crecimiento

345

PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

para el perro y otros mamiferos. En 1935 se establecio la estructura de la riboflavina por los quimicos europeos R. Kuhn y P. Karrer (fig. 13~3) determinandose que se trataba de un derivado de la isoaloxacina: La riboflavina es sintetizada por todas las plantas y muchos microorganismos, pero no por los animales superiores,

La teoria de que los pigmentos flavinicos amarillos actuan como coenzimas habia sido deducida anteriormente por el sueco H. Teorell y por el aleman O. Warburg, quienes descubrieron que un enzima que participa en la oxidacion de los nucleotidos de piridina reducidos (pag. 497) contiene un grupo prostetico amarillo, identificado posteriormente por Theorell como 5'~fosfato de riboflavina, tambien llamado flavin~mono~ nucleotido (FMN). Mas tarde, en 1938, Warburg descubrio una segunda forma coenzimatica de riboflavina, el flavin~ adenin~dinucle6tido (FAD). EI FMN no es un verdadero nucleotide, ya que no contiene el resto de azucar pentosa; en su lugar, 10 mismo que el FAD, contiene el azucar-alcohol llama do ribitol.

Los Ilavin-nucleotidos actuan como grupos prosteticos de los enzimas de oxidacion-reduccion conocidos como flavoenzi~ mas 0 flavoproteinas. Estos enzimas funcionan en la deqradacion oxidativa del piruvato (pag. 460), de los acidos grasos (pag. 560) y de los aminoacidos (pag. 578), asi como en el proceso de transporte electronico (pag. 496). En muchos Ilavoenzimas, el Ilavin-nucleotido se halla fuertemente unido, aunque la union no es covalente, a la proteina; constituye una excepcicn la succinato-deshidroqenasa (pag. 469), en la que el nucleotide FAD esta covalentemente unido a un resto de his tid ina de Ia cadena polipeptidica. Las metaloflavoproteinas contienen uno 0 mas metales como cofactores adicionales. Los flavin-nucleotidos experimentan una reduccion reversible del anillo isoaloxacinico en el ciclo catalitico de las flavoproteinas, para rendir los nucleotidos reducidos representados por FMNH2 y FADH2, respectivamente.

Las formas oxidadas de los diferentes flavoenzimas son intensamente coIoreadas; poseen coloraciones caracteristicas, amarilla, roja 0 verde, debidas a fuertes band as de absorcion en la zona del espectro visible. Cuando se reducen, los flavoenzimas experimentan decoloracion con un cambio caracteristico en el espectro de absorcion (fig. 13~4), 10 cuaI resulta util para la medida de su actividad.

Acido nicotinico (niacina) y nucleotidos de piridina

La deficiencia de acido nicotinico (fig. 13~5) conduce a Ia enfermedad llamada pelagra en el hombre, y lengua negra en el perro. La pelagra constituyo una enfermedad endemica entre los nifios del sur de los Estados Llnidos, a principios de siglo. Finalmente. en los afios 1915~1920 fue reconocida como una enfermedad carencial gracias a los clasicos estudios de nutricion efectuados con nifios de orfelinatos por Joseph Goldberger, un medico del U. S. Public Health Service. Este investigador demostro que la enfermedad no era infecciosa, que se hallaba asociada con diet as Feculentas, pobres, y que podia prevenirse suplementando la dieta con carne. huevos y leche. Sin embargo, no se reconocio al acido nicoti -: nico como factor dietetico responsable hasta 1937, al prose-

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FIGURA 13-4

Espectro de ebsorcion de los nucle6tidos t[avinicos (lomla oxidada). La Teducci6n psovoce [a desaparici6n del pico de

~50 nm.

300 350 400 450 500 550

A,nm

FIGURA 13-5

Acido nicotinico y nucleotidos de nicotinamide,

O-COOH N

Acido nicotinico (niacina)

O-CONHa N Nicotinamida

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

Dinucleotide de adenine y nicotinamida (NAD). La potcion de nicotinamide, que es la que experimenta reduccion reversible, eperece en color. En el fosfato del dinucleotide de adenina y nicotinamida (NADP), el hidroxilo 2', indicado por

le flecha coloreeda, se halla esteriiicedo con iJcido fosforico.

4

'(:+-CONH2

hll __ JJ

o IN+

-O-~-O-~O~

~

OH OH

o

NH2

I

C N

NP 'C/ '\ InCH HC"", ........ C......._ /

N N

-O-X-O-~~O

HH HH

2'

OH OH

Modelo espacial compacto de la forma extendida de NAD

guir pistas derivadas de una linea enteramente independiente de investigacion bioquimica comenzada en 1904. cuando los bioquimicos britanicos A. Harden y W. J. Young descubrieron que se precisaba de un cofactor dializable y termoestable para la fermentacion alcoholic a del azucar par los extractos de levadura (paqs. 430 y 348). Este cofactor. que en principia recibio el nombre de cozimasa a coenzima I. fue finalmente aislado en 1933 par el sueco H. von Euler. Otro coenzima intimamente relacionado, llamado mas tarde coenzima II. fue aislado par Warburg y W. Christian en 1934. Poco despues identificaron la nicot.inamida, (fig. 13-5). amida del acido nicotinico, como componente de ambos coenzimas. Este descubrimiento condujo rapidamente a la identificacion del acido nicotinico como factor de nutricion que evitaba la aparicion de la lengua negra en los perras y la pelagra en el hombre. par los bioquimicos americanos C. A. Elvehjem y D. W. Woolley en 1937. El acido nicotinico se designa de este modo porque es un componente de la nicotina del tabaco, un alcaloide texico: desde entonces se Ie ha asignado el nombre vulgar y no asociativo, de niacine, para el usa no profesional.

En realidad, los vegetales y la mayor parte de los animales pueden sintetizar acido nicotinico a partir de otros precursores, sabre todo del aminoacido triptofano (pag. 729). Si se administra a los animales una cantidad suficiente de proteinas ric as en triptofano, no muestran deficiencia cuando se les retira el acido nicotinico de la dieta. Sin embargo. si el contenido proteico de la dieta es bajo, y el organismo no dispone de suficiente triptofano para la produccion de niacina, entonces se produce tal deficiencia. Aunque la pelagra es debida, en gran

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PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

parte, a la carencia de acido nicotinico, su aparicion esta ge~ neralmente complicada con deficiencias de otras vitaminas y acidos grasos esenciales.

La figura 13~5 muestra las estructuras de los dos coenzimas que contienen nicotinamida como componente esencial, el dinu .. cle6tido de nicotinamida y de adenina (N AD), llamado tambien difosfopir.idin~nucle6tido (DPN) y el fosfato del dinu~ cle6tido de nicotinamida y de aden ina (NADP), llamado tambien trifosfopiridin~nucle6tico (TPN). [Los nombres antiguos de coenzima I (0 cozimasa) y coenzima II ya no se emplean.] Estos dos coenzimas se designan tambien como coenzimas de piridina 0 nucle6tidos de piridina, ya que la nicotinamida es un derivado de la piridina.

Los nucleotidos de piridina actuan como coenzimas de un gran mimero de oxidorreductasas (paq. 491), llamadas colectivamente deshidrogenasas dependientes de la piridina (tabla 13~2). Estos coenzimas se hallan unidos a la proteina de la deshidrogenasa de un modo relativamente debil durante el ciclo catalitico. y por ello fun cion an mas como sustratos que como grupos prosteticos (pag. 491). Actuan como aceptores electronicos durante la eliminacion enzimatica de atom os de hidroqeno procedentes de moleculas de sustrato especificas. Un atomo de hidroqeno del sustrato se transfiere en forma de ion hidruro a la porcion nicotinamida de las formas oxidadas de estos coenzimas (simbolizados por NAD+ y NADP+) para rendir los coenzimas reducidos (simbolizados por NADH y NADPH, respectivamente): el otro atomo de hidrcqeno del sustrato se transforma en un ion hidroqeno (fig. 13~6). Un ejemplo de reaccion catalizada por una deshidrogenasa piridindependiente es la oxidacion de malato a oxalacetato catalizada por la malato~deshidrogenasa (fig. 13~6), etapa importante en la oxidacion de los hidratos de carbono por la via de los acidos tricarboxilicos (pag. 470). La malato-deshidroqenasa de higado es especiftca del NAD+ como coenzima, y no acepta al NADP+. En general. las deshidrogenasas piridin-dependientes son especlficas, bien del NAD+ 0 del NADP+, pero unas cuantas, como la glutamato~deshidrogenasa, actuan con ambos. Generalmente, las reacciones catalizadas por las piridin-nuclectidodeshidroqenasas son reversibles (pag. 491). Las formas reducidas del NAD+ y del NADP+ poseen un maximo de absorcion caracteristico a 340 nm, que se emplea para seguir el curso de las reacciones llqadas, a (0 dependientes de) los nucleotidos de piridina (paqs. 214 y 492). La figura 13~6 muestra que las posiciones 1 y 4 del anillo de piridina del NAD+ y del NADP+, se reducen por transferencia de un ion hidruro del sustrato.

Otras propiedades importantes de los piridin-nucleotidos y de las deshidrogenasas a ellos ligadas se detallan en los capitulos 17 (pag. 466) y 18 (pag. 491).

Acido pantotenico y coenzima A

El acido pantotenico (fig. 13£';7), fue identificado por primera vez por R. J. Williams como un factor de crecimiento que contenia azufre. Es sintetizado por las plantas y muchos microorganismos, pero es necesario en la dieta de los vertebrados. Poco despues de su descubrimiento, se observe que el acido pantotenico se encontraba en los tejidos en una forma

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TABLA 13-2. Deshidrogenasas dependientes de la piridina.

Dependientes del NAD Isocitrato D-,8-Hidroxibutirato Gliceraldehtdo-Sefosfato Dihidrolipoamlda

L- ,8-Hidroxiacil-CoA Etanol

Lactato Glicero-S-fosfato L-Malato

Dependientes del NADP ·Isocitrato Glucosa-S-fosfato

NAD 0 NADP t-Glutamato

FIGURA 13-6

Reaccion de le meleto-deshidroqenese, mostrando el camino que siguen los atomos de hidroqeno separados por el enzime. Uno de ellos es transferido en forma de ion hidturo a le posicion 4 del anilio de piridine: el otro aparece como ion hidroqeno en el medio.

cooI

HO-C-H

I

TH.

COO+

H

&CO,NH, N

I

R

Malato

1l

cooI

C=O

I

CH.

I COO-

+

UCONH,

N I

R

+

Oxalacetato

FIGURA 13~7

ACido peniotenico y coenzima A. El

grup9 tiol (en color) se esteeiiic« con un gl'upO ecilo para dar un tioester durante

le actividad de los enzimas que utilizan el coenzima A como transportador de

qtupos ecilo,

CHa--'-C-S-CoA

. "

o

Acetfl-coenzima A

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

CHaOH 0

I I II

HO-CH2-C-CH-C-N-CH -CH -COOH

I I 2 •

CHa H

Acido pantotenico

ll:j

fJ-Mercaptoetilamina

CH.

I

NH

I c=o

I

CH2

I

CH.

I NH

t=O Acido pantotenico

I CHOH

I

CH-C-CH

a I a

CH.

I o I

-o=r--eo

I

o NH2

I I

-o-p=o N C

I I 'C/ ~N Adenina

o HC " I

I \ ....--C <, "",CH

CH. N N

~ 3'-I~I,to de ribosa o OH

I

PD,2-

Coenzima A

combinada de bajo peso molecular. pero hasta 1948. no fue identificado como el coenzima A (A de acetilo) por N. O. Kaplan y F. Lipmann, quienes habian descubierto anteriormente que algunas reacciones enzimaticas de acetilaci6n necesitaban un coenzima termoestable.

La funci6n del coenzima A es la de actuar como transportador de grupos acilo en las reacciones enzimaticas implicadas en la oxidaci6n de los acidos grasos (paq. 556). en la sintesis de los acidos grasos (pag. 673). en la oxidaci6n del piruvato (pag. 460) y en las acetilaciones biol6gicas (pag. 350). El mecanisme quimico preciso mediante el cual el coenzima A transporta los grupos acilo fue establecido por el bioquimico aleman F. Lynen, en 1951. Aisl6 una forma «activa» de acetate procedente de la levadura, demostrando que estaba constituida por un tioester del acido acetico con el grupo sulfhidrilo o tiol del coenzima A (fig. 13~7). El coenzima A se designa abreviadamente como CoA(o CoA~SH. en que se hace resaltar la funci6n tiol).

349

PARTE COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

EI acetil-coenzima A (acetil-Co.A] ... se forma durante la oxidaci6n enzimatica del piruvato 0 de los acidos grasos; puede originarse a partir del acetato libre en presencia del enzima acetil-CoA-sintetasa:

A TP + coenzima A + acetato :;=:

AMP + acetil ... CoA + pirofosfato

EI aceul-CoA asi formado puede reaccionar entonces enzimaticamente con un aceptor de grupos acilo, tal como la colina, para rendir acetil-colina (pag. 224), 0 con el acido oxalacetico, para rendir acido citrico, como se muestra en las reacciones

cohn ..

Acetil-CoA + colina acetilasa ~ acetilcolina + CoA-SH

Acetil-CoA + acido oxalacetico + H20

citrate-

sintasa ~ citrato + CoA-SH

En reacciones-modelo no enzhnaticas, los tioesteres como el acetil-Co.A son agentes acilantes mas eficaces que los correspondientes esteres oxigenados, ya que el enlace tioester muestra menos estabilizacion por resonancia que el enlace oxiester. Las reacciones enzimaticas en las que interviene el coenzima A, se describen con detalle mas adelante (pags. 460, 558, 573 y 673).

Vitamina B6 Y coenzima de piridoxina

La vitamin a B6 fue identificada como esencial por vez primera, en la nutrici6n de la rata para la prevenci6n de una dermatitis llamada acrodinia. En 1938 se aislo e identific6 una sustancia cristalizada que poseia esta actividad, la pir.idoxina (ftg. 13-8). EI subsiguiente trabajo de E. Snell y de sus colaboradores revelo que la piridoxina se convierte biol6gicamente en otros

CH20H HO~CH20H

HacJL_.J

N

Piridoxina

CHO HO~CH20H

HacJL_.J

N

Pirldoxal

CHO 0-

~~D-~~o-t-o

N

Fosfato de piridoxal

CH2NH2 HO~CH20H

HacJL_J

N

Piridoxamina

CH2NH. 0-

~~~~~o~t-o-

JL) 0

Fosfato de pirtdoxamina

350

FIGURA 13-8

Piridoxina (vitamina 86) y sus formas de coenzima.

FIGURA 13~9

La funci6n del fosfato de piridoxal en las aminotransferasas. El grupo amino del a-eminoecido reacciona con el grupo carbonilo del fosfato de pirldoxel, unido intimamente al enzime, para dar una base de Schiff intermedia. Esta se transforma en su forma teutomem, que experimenta hidr61isis posterior, para rendir el correspondiente a-oxoecido, abandonando el enzima con el grupo amino unido covalentemente en forma de fosfato de piridoxamina. Por inversion de esta secuencia de reecciones, la forma aminada de la aminotransferasa puede transferir entonces su grupo amino a otro a-oxoecido, para producir el eminoecido correspondiente.

H

I R-C-COOH , I

NH.

+ O=C-@

I H

+H,O 1l-H,o

R,-CH-N=C-@

I I COOH H

1l

R,-C=N-CH.-@ I

COOH

-H201l +H20

H.N--'--CH2-@ + R-C-COOH , "

o

a~Aminoacido

Enzima-fosfato de piridoxal

Base de Schiff intermedia

Enztma-fosfato de piridoxamina

«-oxoactdc

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

dos compuestos. el piridoxal y la piridoxamina, que son factores de crecimiento para las bacterias mucho mas potentes y precursores mas directos de las formas activas de esta vitamina. Las formas coenzimaticas activas de la vitamina B6 son el fosfato de pir.idoxal y el fosfato de piridoxamina (fi~ gura 13~8).

Los coenzimas de piridoxina son muy versatiles, actuan en gran numero de diferentes reacciones enzimaticas en las que los aminoacidos 0 los grupos amino se transforman 0 se transIieren. EI tipo mas corriente de reaccion enzimatica que precisa del fosfato de piridoxal como coenzima es la trenseminecion, transferencia del grupo a~amino de un amlnoacido al atomo de carbono a de un o-oxoacido. Los enzimas que catalizan tales reacciones se llaman transaminasas 0 eminotrens[erases. El conocimiento actual del papel de estos coenzimas procede de los experimentos modelo efectuados por Snell y sus colaboradores, en los que se encontr6 que el piridoxal reacciona no enzimaticamente a 1000C con el acido glutamico y produce piridoxamina y acido a~oxoglutarico. Esta y otras observaciones condujeron a Snell. asi como a A. Braunstein en la Union Sovietica, a proponer que el fosfato de piridoxal funciona como un coenzima en virtud de la capacidad de su grupo aldehido de reaccionar con el grupo a~amino del aminoacido sustrato, para rendir una base de Schiff entre el fosfato de piridoxal unido al enzima y el aminoacido (fig. 13~9). A continuacion, el grupo amino se separa del aminoacido, que se convierte asi en un a~oxoacido: el fosfato de piridoxamina unido resultante, que se halla ligado al enzima, reacciona despues con otro a~oxoacido. llamado el aceptor del grupo amino, sequn una reaccion que es la inversa de la anteriormente descrita, para rendir un nuevo aminoacido y el enzima-fosfato de piridoxal. Debe recordarse que la reaccion de la transaminasa constituye un ejemplo de reaccion de doble desplazamiento (pag. 211).

En las paginas 576. 586. 711 y 713 se describen diversos ejemplos especificos y mas detalles de la accion del fosfato de piridoxal.

( pj0tina y biocitina ~y

La biotine (fig. 13~10) fue aislada por vez primera por el bioquimico holandes F. KogI. en 1935. a partir de un concentrado de higado que se sabia contenia factores de crecimiento para la levadura. Su estructura fue resuelta por V. de Vigneaud y colaboradores. La biotina contiene los anillos del imidazol y del tiofeno condensados. Protege a los animales contra la toxicidad caracteristica producida al alimentarlos con clara de huevo cruda. AI ser sintetizada por las bacterias intestinales, la deficiencia de biotina no puede producirse facH ... mente. solo mediante supresion de la vitamina en la dieta. Sin embargo. la clara de huevo cruda induce una deficiencia en biotina porque contiene una proteina, la eoidine; que se une de un modo especlfico a la biotina e impide su absorci6n por el 'Intesttno. Se ha demostrado que padecen deficiencia de biotina los individuos que consumen cantidades grandes de huevos crudos.

El modo de actuacion de la biotina ha permanecido oscuro durante muchos alios. pero finalmente se encontro su funci6n

351

PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

en la transferencia enzimatica 0 incorporacion del dioxide de carbono. M. D. Lane y Lynen descubrieron que la biotina est a presente en eI grupo prostetico covalentemente unido de la propionil-CoA-carboxilasa. La molecula de biotina esta combinada, en forma de una amida sustituida, con el grupo € -amino de un resto especifico de lisina de la proteina enzimatica, formando el compuesto llamado biotinil-lis:ina 0 biocitina (fig. 13-10). La biotina unida desempefia el papel de transportador intermediario de dioxide de carbono durante la accion de algunos enzimas carboxilantes, por ejemplo, la propionil-Co.Ascarboxilasa y la acetrl-Co.Ascarboxilasa, en forma de un derivado muy labil, la carboxibiotina (fig. 13-10). El curso global de estas reacciones de carboxilacion viene indicado por las ecuaciones

ATP + HC03- + biotinil-enzima ~

ADP + Pi + carboxibiotinil-enzima

Carboxibiotinil-enzima + sustrato ~

biotinil-enzima + sustrato carboxilado

Acido f6lico y sus formas coenzimaticas

El acido folico (del latin folium, «hoja»), que se encontro primeramente en las hojas de espinaca, esta ampliamente distribuido en las plantas; su deficiencia en los mamiferos provoca una disminucion del crecimiento, y la aparicion de diversas formas de anemia. Contiene tres sillares caracteristicos: 1) una pteridina sustituida, 2) ;kido p-aminobenzoico y 3). acido glutamico. El acido folico es conocido tambien por el nombre de addo pteroilglutamico 0 folacina (fig. 13-11). La pteridina es el compuesto nitrogenado biciclico originario de las pterinas, que son derivados de la 2-amino-4-hidroxipteridina. Algunas pterinas, tales como la xantopterina (fig. 13-12), ac-

FIGURA 13-11

Estructura del acido [olico y del acido tetrehidroiolico. Los cueiro atomos de hidroqeno adicionados para formal' acido tetrehidroiolico aparecen en color. Los Momos de nitroqeno N5 y NIO participan en la transferencia de grupos monocarbonados.

OH

I 0

"",C,-- /N~ -0-11

N C C-CH2-N:-.. /, C-N-CH-CH2-CH2-COOH

I II I H \\ II H I

H2N-C~ ,/C....... """CH COOH

N N

2-Amino-4-hidroxi- 6-metil ptertdina

Acido p-aminobenzoico

Acido glutamico

Acido pteroico

Acido pteroilqlutamico (acldo follco)

OH H

I I 0

"",C,-- _)N <, 6 9 1°-0-11

N3 4 C H-C-CH2-N x /, C-N-CH-CH2-CH2-COOH

I II I 7 H \\ II H I

H2N-C~1,/C <, H/CH COOH

N Ns

I H

Acido tetrahidrofolico

352

FIGURA 13-10

La biotina y le forma carboxilada del derivado biotinilico de uti resto de lisina que puede trensierir su grupo cetboxilo (en color) al acetil-CoA u otros aceptores.

COOH I

CH2

I

CH2

I

CH2

I

CH2

I H CH-C-NH

! I 'c=0

\ I

CH2-C--NH

H

Biotina

COO+ I HN-C-H

3 I

CH2

I

CH2

I

CH2

I

CH2

I

NH

I C=O

I

CH2

I

CH2

I

CH2

I

h-NH u)_o

I COO-

N -Carboxibioti~il-lisina

FIGURA 13-12

Xantopterina (2-amino-4.6-dihidroxipteridina)

FIGURA 13-13

Derioedos monocarbonados del tetrahidrofolato (para su estructura completa vease fig. 13-11).

CH3 5 I

N

/ "6 9 10

C-CH2-N-

H/I H

/CH2

NS -Metilretrahidrofolato

N10-Formiltetrahidrofolato

H I

C=o

51

/N" 10

C-CH2-N-

H/I H

/CH2

NS -Formiltetrahtdrofolato

NH II JH

N

/ <, 10

C-CH2-N-

H/I H

/CH2

NS -Formiminotetrahfdrofolato

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

tuan como pigmentos en los oj os y alas de los insectos. La pterina presente en el acido f6lico es la 6~metilpterina. En algunas especies, el acido folico se halla unido por el grupo y~carboxilo del acido glutamico a uno 0 mas restos de acido glutamico adicionales, unidos mediante enlaces peptidicos en los que intervienen los grupos y~carboxilo de los restos de acido glutamico. Algunos organismos necesitan solamente la porci6n p-aminobenzoico del acido Iolico y pueden sintetizar acido folico si disponen de acido p-aminobenzoico.

EI sintoma bioquimico mas sobresaliente de la deficiencia de acido Iolico es el impedimento de la biosintesis de las pu~ rinas y de la timina, una pirimidina. Los estudios realizados sobre enzimas y metabolismo indican que la forma coenzimatica del acido folico actua en la transferencia de ciertos Iraqmentos monocarbonados utilizados en esta y en otras rutas blosinteticas. EI acido folico se convierte, por reducci6n en dos etapas, en su forma de coenzima, el acido tetrahidrof61ico (fig. 13~ 11 ). El tetrahidrofolato, designado con frecuencia en su forma abreviada FH4 actua como transportador intermediario de grupos hidroximetilo (-CH20H), formilo (-CHO) o metilo (- CH3), en gran numero de reacciones enzimaticas en las que tales grupos se transfieren desde un metabolito a otro 0 son interconvertidos. En la figura 13~13 se muestran las estructuras del NS, NIO~metilentetrahidrofolato y otros tipos de derivados monocarbonados del tetrahidrofolato enzimaticamente activos. Se describen algunas de estas complejas reacciones de transferencias de un carbono en conexi6n con el metabolismo intermediario de los aminoacidos (paqs. 579 y 726), de las purinas (pag. 741) y de las pirimidinas (pag. 749) .

. A continuaci6n damos un ejemplo de una secuencia de reacciones enzimaticas en las que el grupo hidroximetilo del aminoacido serina es separado enzimaticamente para formar el NS, NI0~metilen~derivado del tetrahidrofolato, que es reducido al derivado NS~metilico. Este ultimo cede su grupo metilo a la homocisteina, para rendir metionina. El tetrahidrofolato actua como de lanzadera a la que un grupo monocarbonado esta unido covalentemente aunque de modo transitorio:

NS~metil~FH4 + homocisteina ~ FH4 + metionina

Acido lipoico

Llamado a veces acido tiotico, fue aislado por primera vez en su forma cristalizada en 1953 a partir de extractos de higado por los bioquimicos americanos L. J. Reed e I. C. Gunsalus y sus colaboradores. De varias toneladas de higado se obtuvieron solamente unos pocos miligramos. Existen dos formas de esta vitamina mas bien simple de ocho atom os de carbono (fig. 13~ 14); el acido lipoico, un disulfuro ciclico, y su forma de cadena abierta reducida, el acido dihidrolipoico, que posee dos grupos sulfhidrllo en las posiciones 6 y 8. Ambas formas se interconvierten con facilidad por reacciones de oxidacionreduccion.

353

PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

FIGURA 13-14

Aeido lipoieo y sus deeioedos. Los gropos tiol y disuliuro apareeen en color.

HI /C...._S

IftC H I

~...-s

I

r ?lft

r ~

COOH

Acido lipoico (forma oxidada]

Lisina

Acido lipoico

Clit-SH I

?lft

CH-SH I

?lft

CH2

I

CHI

I

?lft

COOH Acido dihidrolipoico

El acido lipoico acttia como uno de los coenzimas de la descarboxilaci6n oxidativa del piruvato y de otros a~oxoacidos, complejas reacciones en las que participan diversos coenzimas (pag. 460). El piruvato experimenta, en primer lugar la perdida del grupo carboxilo (fig. 13~15) para rendir el derivado hidroxietllico del pirofosfato de tiamina unido al enzima (pag. 344). Este ultimo reacciona despues con el acido lipoico unido al enzima dihidt'olipoil~tt'ansacet,ilasa con transferencia de electrones y del grupo acilo para rendir el acido 6~acetildi~ hidro-lipoico. En las reacciones subsiguientes. que se describen mas adelante (pag. 460), el acido lipoico se regen era despues de la transferencia del grupo acetilo al coenzima A, y de la reoxidaci6n de los grupos tioles por transferencia de electrones al NAD+, para producir la forma disulfuro ciclica, u oxidada, del acido lipoico. El acido lipoico se halla unido covalentemente, mediante un enlace amida, al grupo € -amino de un res to especifico de lisina de la dlhidrolipoil-transacetilasa; el res to de lipoil-lisina se conoce tambien por el nombre de lipoamida (fig. 13~14).

e-N-Lipoil-lisina

Vitamina B12 Y coenzima a,

La historia de la vitamin a B12 es de extraordinario interes, ya que el aislamiento, estructura y modo de actuaci6n de est a vitamina, han venido siendo problemas dificillsimos de resolver. En 1926, los medicos americanos G. R. Minot y W. P. Murphy descubrieron que la administracion de higado en las dietas curaba a los en£ermos de anemia perniciosa. A pesar de muchos intentos e£ectuados durante varios aiios para aislar

354

FIGURA 13-15

Transfereneia de atomos de hidrogeno ,

y de un gropo aeetilo del pirofosfato de tiemine al aeido lipoico, Esta etapa de reeccion sueede en la desearboxilaci6n oxidetive del piruueto (pag. 460). eompleja reaeei6n que precise de la eccion secuencisl de tres enzimas. Veanse tambiEm las figuras 13-1 y 13-2 (pag. 344).

CH -CH-OH

3 I '

C-j

+11

-N

\ C=C-

I

CHa

"I

H Htdroxtetil Tdertvadc

del anillo de tiazol del pirofosfato

de tiamina, unido a la plruvatodeshidrogenasa

+

Anillo disulfuro del resto de actdo lipoico en la dihidrclipoil-transacetilasa

1

H C-S

+11 I

-N\

C=CI

CHa

+

Porclon de tiazol libre del pirofosfato de tiamina

CH2-SH

I

CH2

I CH-S-C-CH I II a

o

Anillo disulfuro abierto del acido 6-acetil-dihidrolipoico

FIGURA 13~16

Yitamina B'2 (cobalamina) y sus derivedos. En la cianocobalamina

R. = cienuro, La cobalamina forma complejos designados de modo anillogo con los lanes sulfito, hidroxilo y nitrito, En la desoxiedenosil-cobelemine

(coenzima B12) R. es eUgrupo 5' -desoxiedenosilo (en color).

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimil$

el factor hepatico, se consiguieron muy pocos avances. ya qUE la enfermedad no podia producirse en animales de laboratoric y hubo que ensayar el poder de accion de los concentrados de factor hepatico en los mismos pacientes. Sin embargo. en 1948 se aisle finalmente el factor hepatico llamado vitamina B12• en forma crlstalizada, por los grupos de E. L. Smith en Inglaterra y E. Rickes y K. Folkers en los Estados Unidos.

EI conocimiento de la estructura de la vitamina Bn (figu~ ra 13~ 16) constituyo realmente un problema diftcil, resuelto finalmente por una combinacion de metodos quimicos y de difraccion de rayos X. La vitamina B12• conocida tambien como cianocobalamina, posee dos componentes caracteristicos. EI mayor es el sistema de anillos de corrina, que se parece al sistema deIa porfirina de la hemoglobina (pag. 500) en que contiene cuatro anillos del tipo pirrol, pero en el cual un par de estos anillos de cinco terminos se halla unido directamente en lugar de solo por medio de un puente de meteno. Coordinado con' los cuatro atomos de nitrogeno Internes del sistema anular de la corrina hay un atomo de cobalto que es conocido desde hace tiempo por su importancia esencial en el crecimiento. EI segundo componente principal de la vitamina B12 es un ribonucleotido, que es excepcional por su contenido como base del 5,6~dimetilbenzimidazol, unido por el infrecuente enlace a~N~glucosilico con la n-ribosa en lugar del enlace {J

Grupo R. 5~Desoxiadenosilo del coenzima B12

Sistema anular de la corrina

Ribonucle6tido del 5.64imetilbencimidazol

355

PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

presente en la mayor parte de los demas nucleotidos. Este ribonucleotide se halla unido a la corrina por un enlace de coordinacion entre el otro atomo de nitroqeno del nucleotide y el atomo de cobalto y por un enlace ester entre el grupo 3' -Iosfato del ribonucleotide y una cadena lateral del anillo de corrina. El cianuro ocupa una de las posiciones de coordinacion del atomo de cobalto; de ahi el nombre de cianocobalamina. Sin embargo. el cianuro esta presente como artefacto de aislamiento; se conocen complejos semejantes con los iones nitrite, sulfite e hidroxilo, En el coenzima B1'2. e1 ligando de cianuro esta sustituido por el grupo 5~desoxiadenosilo (figu~ ra 13~ 16 ). Existe otra forma de vitamina B1:2 la seudovitamina B1:2. que tambien aparece como un coenzima y que se descrlbira mas adelante.

Ni los animales ni los vegetales pueden sintetizar vitamina B1:2; solo 10 hacen ciertos microorganismos. La vitamina B12 se precisa solamente en cantidades minimas en los animales; la sangre humana normal contiene solamente 0.0002 p.g de vitamina B12 por mililitro. La anemia perniciosa no es simplemente el resultado de una deficiencia de vitamina B12 en la dieta, sino que esta en realidad motivada por la incapacidad del paciente para absorber vitamina B12 de los alimentos ingeridos, debido a la carencia de una glucoproteina especifica en el jugo gastrico llamada factor intrinseco. Esta proteina capta una molecula de vitamina B1:2 y la transporta a las celulas intestinales, desde las que. en union de otras proteinas, llamadas trenscobelemines, es transportada a los tejidos perifericos.

La vitamina B1:2 es esencial para la maduracion normal y el desarrollo de los eritrocitos. La base molecular de su accion permanecio oscura hasta 1958. cuando H. A. Barker descubrio que el derivado 5' -desoxiadenosilo de la seudovitamina B12 es un cofactor esencial en la conversion enzimatica del acido glutamico en acido p~metilaspartico en la bacteria anaerobia del lodo Clostridium tetenomorphum. La seudovitamina B1:2 contiene adenina en lugar de 5.6~dimetilbenzimidazol en su rlbonucleotido: est a variante de la vitamin a B12 se encentro en el Clostridium tetenomorphum, y en algunos otros microorganismos que son incapaces de sintetizar 5.6~dinietil~ benzimidazol, pero pueden sintetizar adenina. EI derivado de la seudovitamina B1:2. que Barker encontro que posee actividad de coenzima, contiene el grupo 5~desoxiadenosilo como ligando del atomo de cobalto. Las formas coenzimaticas de la seudovitamina B12. y de la vitamina B1:2. poseen dos mitades nucleotidicas cada una: la primera contiene dos nucleotidos de adenina, y la ultima un nucleotide de benzimidazol y otro de adenina, unidos en cada caso al atomo de cobalto mediante enlaces de coordinacion.

EI coenzima B12 0 5' ~desoxiadenosilcobalamina es necesario para la actuacion de diversos enzimas (pags. 568 y 749). Las reacciones enzimaticas que precisan del coenzima B12 tienen como denominador com un un desplazamiento 1.2 de un atomo de hidrogeno desde un atomo de carbono de la molecule del sustrato al siquiente, acompafiado, habitualmente, por un desplazamiento inverso 2.1 de alqtm otro grupo como un hidroxilo, un amino. un alquilo 0 un carboxilo (fig. 13 ... 17). EI mecanismo preciso de la reaccion es de una gran. complejidad y todavia no ha sido completamente definido. Parece probable. sin embargo. que el coenzima B1:2 reaccione con un ion hidruro

356

FIGURA 13~ 17

Desplazamiento 1.2 de un atomo de hidtogeno en intercembio con el· grupo X. provocedo POt los enzimas dependientes del coenzima B/2.

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

separado de la molecula del sustrato por el enzima, de tal modo que el ion hidruro desplace al carbono metilenico del grupo 5' -desoxiadenosilo de su enlace con el atomo de cobalto. El ion hidruro es transferido despues al atomo de carbono adyacente del sustrato, acompafiado por el desplazamiento del otro grupo transferido. En est as reacciones el atomo de cobalto permanece probablemente en forma de Co(II). Otra reaccion import ante del coenzima B12 es la reduccion del atomo de carbono 2' del ribonucleoside 5' -trifosfato al correspondiente 2'~desoxirribonucleosido trifosfato (pag. 749).

En una segunda clase de reacciones enzimaticas, la vitamina B12 funciona como coenzima con la sexta posicion de coordinacion del atomo de cobalto ocupada por un grupo metilo en lugar del grupo 5' -adenosilo: e1 compuesto resultante es la metilcobalamina. En estas reacciones, la metilcobalamina funciona como un transportador de un grupo metilo procedente del N5~metiltetrahidrofolato (pag. 353) a ciertas molecules de aceptor, particularmente la homocistelna, que se metila para transformarse en metionina (pag. 713). Las reacciones enzimaticas que se realizan con intervencion de los coenzimas de la vitamin a B12• se describen con mas detalle en otro lugar (pags. 568. 713 y 749).

O=?~

HOC I

II 0

H09_j

HC

I HOCH

I

CH20H

Acido t-ascorbtco

Vitamina C

La vitamina C 0 acido ascorbico (pag. 265). fue aislada por primera vez en forma pura y cristalizada a partir del jugo de limon por los bioquimicos americanos. C. G. King y W. A. Waugh. en 1932. Es una de las vitaminas de estructura mas sencilla, pues se trata de la lactona de un azucar-acido (£igu~ ra 13~ 18 ). El acido ascorbico solo se precisa en la dieta de unos pocos vertebrados -el hombre, los monos. el cobaya, el murcielago frugivoro de la India y algunos peces-. Algunos insectos y otros invertebrados necesitan tambien acido ascorbico, pero la mayor parte de los demas animales superiores y de los vegetales pueden sintetizar el acido ascorbico a partir de Ia glucosa y de otros precursores sencillos. EI acido ascorbico no esta presente en los microorganismos y por tanto. no parece serles necesario.

EI acido ascorbico es un potente reductor, pierde con facilidad atomos de hidroqeno y se transforma en acido deshi~ droascorbico, que tambien posee actividad de vitamina C:

Sin embargo. la actividad vitaminica se pierde cuando el anillo lactonico del acido deshidroascorbico se hidroliza para rendir acido dicetogulonico (fig. 13~ 18 ). EI acido ascorbico presente en los alimentos se destruye, en su mayor parte. por coccion.

En los tejidos de los vegetales y de los animales, se encuentran cantidadesbastante grandes de acido ascorbico. en comparacion con otras vitaminas hidrosolubles: por ejemplo, el plasma sanguineo humane contiene alrededor de 1 mg de acido ascorbico por cada 100 ml. EI acido ascorbico abunda, especialmente, en los frutoscitricos y en los tomates. Aunque los sintomas del escorbuto en el hombre pueden ser eliminados tan solo por administracion de unos 20 mg de acido ascorbico diaries, existe cierta evidencia de que puedan necesitarse cantidades mayores para una fun cion fisioloqica y un bienestar completamente normales.

A pesar de la concentracion relativamente elevada de acido

FIGURA 13-18

Acido escorbico y sus derioedos.

O=?~

O=C I

I 0

O=?_j

HC

I HOCH

I

CH20H

Acido t-deshtdroascorbtco (activo)

COOH I O=C

I O=C

I HCOH

I HOCH

I CH20H

Acido t-dioxoqulonlco (inactivo)

357

PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

ascorbico existente en los tejidos y de su estructura mas bien sencilla, su funclon Hsioloqica no es conocida todavia. Actua como cofactor en la hidroxilacion enzlmatica de la prolina a hidroxiprolina (pag. 708) y en otras reacciones de hidroxilacion (pag. 582). pero no es especifico en estas reacciones y puede sustituirse por otros agentes reductores carentes de actividad antiescorbutica.

Otros factores de crecimiento hidrosolubles

Ademas de las vitaminas hidrosolubles anteriormente descritas, exist en otros diversos factores esenciales como elementos nutritivos, pero tan solo se precisan en la dieta de unas pocas especies, 0 en circunstancias especiales. El azucar ciclico mioinositol (fig. 13~19) es necesario en la dieta normal de los ratones para el crecimiento normal desu pelo, asi como para evitar la aparicion en las ratas de marcas oculares «que parecen anteojos». Resulta curiosa que el inositol. que es sinte .. tizado facilmente por la rata a partir de la glucosa. al parecer 10 hace en cantidades Insuficientes. El inositol no es sillar de ningun coenzima conocido, pero se halla en cantidades bastante grandes en los tejidos animales como componente de los fosfogliceridos de inositol (pag. 294).

La colina (fig. 13~19). es tambien un componente de una de las clases de fosfogliceridos, eneste caso los fosfogliceridos de colina (pag. 294). Aunque no se le conoce ninguna Funcion como coenzima, este factor se necesita en la dieta de las ratas alimentadas con cantidades inadecuadas de aminoacidos, en particular de metionina.vque es normalmente un pre .. cursor de la colina. La deficiencia en colina provoca la infiltracion grasa del higado y el rinon hemorragico.

La camitina es un factor esencial de crecimiento para el escarabajo de la harina Tenebtio molitor, pero no para los mamiferos que la pueden sintetizar; es especialmente abundante en el tejido muscular. La carnitina es un componente necesario para el mecanisme de lanzadera necesario para que los acid os grasos atraviesen la membrana mitocondriaI. en la etapa preparatoria de su oxidacion enzimatica (pag. 558).

Vitaminas lipcsolubles

Las cuatro rvitaminas Iiposolubles, A. D. E y K. son todas compuestos isoprenoides (pag. 302). Aunque han sido estu ... diadas con intensidad y ampliamente empleadas en la nutricion humana, sabemos menos sobre su funcicn biologica espectfica que sobre las vitaminas hidrosolubles en si mismas. No se ha encontrado todavia ninguna Iuncion especifica como coenzima para ninguna de las vitaminas liposolubles y tan s610 est amos acercandonos al conocimiento de la base molecular de la accion de las vitaminas A yD.

Vitamina A

La vitamina A, aparece en dos formas comunes: oitemine AJ o retinol, (fig. 13~20). que es la forma mas corriente en los tejidos de los mamiferos y peces marinos, y vitamina Az, 0 retinolz. comun en los peces de agua dulce. Ambas son compuestos isoprenoides que contienen un anillo carbociclico de

358

FIGURA 13~19

Otros [ectores de crecimiento.

~: ~H

HO H

H OH

mio~Inositol

CHa +1

CH -N-CH -CU -OH

a 1 2'"

CHa

Colina

CHa +1

CH -N-CH -CH-Cu -COOH

a 1 2 1 ...

CHa OH

Carnitina

FIGURA 13~20

Vitamina AJ (retinol) y fJ-caroteno, su precursor. La escisi6n oxidante (flecha coloreede}, rinde dos molecules de

Vitam ina A. Las unidades de isoprene se ha11an seperedes poe trezos coloreedos,

La vitamina A2 posee un segundo doble enlace, situado entre los atomos de cerbono 3 y 4 del enillo; por 10 demss, es identtc« a la vitamina Aj.

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

/CH2/ ....- 4 "i(

CH2 /3CH2

c~l: 2CI C

/C;,.(_ 1/ - H.

CH. / C

I HC -jj.CH I

C-CH.

II HC

I CH

-*-

HC

I

C-CH.

II

HC

I C~OH

Vitamina AI

/CH~

CH2 / CH.

C~I I'

/C;,.(_ /C-CH, CH. I C

I HC -jj.CH I

C-CHa

II HC

I CH

-~-

HC

I C-CH,

II

HC

I CH

11-

HC

I

HC

II C-CH I a

HC -~-

CH

I

HC

II C-CH I 3

HC -lJ.CH

I

CHa \ C

""C)( '-C-CH,

cfIal I

CH2 XCH2 ""-CH2\

fJ-caroteno

Modelo de vitamina AI

seis miembros y una cadena lateral de once atomos de carbono. La actividad de vitamina A en los mamiferos se debe no solamente a los retinoles, sino tambien a ciertos carotenoides ampliamente distribuidos en los vegetales, en particular 105 a, f3 y y-carotenos. Los carotenos no poseen actividad intrinseca de vitamina A por si mismos, pero se convierten en vitamina A mediante reacciones enzimaticas en la mucosa intestinal y en el higado. EI ,8-caroteno, cuya molecula es simetrica, se escinde por su centro y rinde dos molecules de retinol (fig. 13-20). EI retinol se encuentra en los tejidos de los mamiferos y es transportado por la sangre en forma de esteres de 105 acidos grasos de cadena larga.

La deficiencia en vitamina A fue reconocida por vez primera en la rata, pero todos los mamiferos incluyendo al hombre sonsusceptibles a ella, con poca variacion en los sintomas. Bajo deficiencia de vitamina A, los animales j6venes no erecen, 105 hues 05 y el sistema nervioso no consiguen desarrollarse de un modo satisfactorio, la piel se seca y engrosa, los rifiones y diversas glandulas experimentan degeneraci6n y tanto los machos como las hembras se vuelven esteriles. Aunque todos los tejidos resultan alterados por la deficiencia de vitamina A, los oj 05 son los que resultan afectados de modo mas sobre-

359

PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

saliente. En los lactantes y nifios pequefios, el estado patologico conocido como xeroftalmia (eojos secos»), constituye un sintoma temprano de esta deficiencia y es causa corriente de ceguera en algunas zonas tropicales, en las que la nutricion es generalmente escasa, En los adultos, uno de los primeros signos de deficiencia en vitamina A es la ceguera nocturna, dificultad de adaptacion a la oscuridad que se emplea Irecuentemente como prueba para el diaqnostico. Los animales jovenes son mas susceptibles a la deficiencia en vitamina A, la cual no se produce facilmente en los adultos porque eI higada puede almacenar suficiente vitamina A para varios meses e incluso afios.

Las necesidades de vitamina A en el hombre -menos de un miligramo diario- son satisfechas en gran parte por las hortalizas verdes y amarillas, tales como la lechuga, la espinaca, los boniatos y las zanahorias que son ricas en carotenos. Los aceites de higado de pescado son particularmente ricos en vitamina A. Sin embargo, el consumo excesivo de vitamina A es toxico y conduce a huesos fragiles y de Iacilfractura en los nifios, asi como a un desarrollo anormal del feto.

Aunque la fun cion bioloqica mas general de la vitamina A no se conoce, disponemos de detallada informacion sobre su papel en el cicio visual de los vertebrados, la secuencia de acontecimientos moleculares implicadas en: 1) la absorcion de la energia luminosa por un pigmento de las celulas Iotorreceptoras de la retina para producir un producto fotoquimico especifico, 2) la iniciacicn del impulso nervioso por el Fotoproducto, y 3) la reqeneracion del pigmento visual de la forma sensible a la luz (fig. 13~21).

La retina humana, como la de otros mamiferos, contiene dos tipos de celulas fotorreceptoras, sensibles a la luz: las celulas bastoncillo que se hallan adaptadas a la percepcion de intensidades luminicas bajas, pero no de los calores: son las celulas implicadas en la vision nocturna, cuya funcion resulta dificultada por la deficiencia de vitamina A; y las celulas llamadas conos 0 celules conicas. que perciben los colores y estan adaptadas a intensidades luminosas elevadas. El ciclo visual de los bastoncillos ha sido investigado con intensidad, particularmente por G. Wald de la Universidad de Harvard, cuyos trabajos han desarrollado el esquema del conocimiento actual del papel de la vitamin a A en esta Iuncion.

Los bastoncillos de la retina conti en en much as vesiculas membranosas discoidales, apiladas, paralelas a la superficie receptora de la retina; estas vesiculas actuan como receptores luminicos. Cerca de la mitad de la proteina de la membrana de estas vesiculas' esta constituida por la proteina conjugada rodopsina (anteriormente Hamada purpura visual), capazde absorber la luz y cuyo peso molecular es de unos 28 000. La rodopsina es insoluble en el agua pero puede extraerse de las vesiculas con detergentes. El espectro de absorcion de la rodopsina purificada en el intervalo del visible es muy semejante a la curva de sensibilidad del ojo frente a luz debil, indican do que la rodopsina es el principal receptor luminoso de las celulas bastoncillo. La rodopsina esta constituida por una proteina, la opsina, e intimamente unido a ella se halla el 11 -cisretinal, que es eI aldehido de la vitamina A, el cual contiene cuatro enlaces dobles carbono-carbono en su cadena lateral; tres de los dobles enlaces estan en forma trans, y el cuarto,

360

FIGURA 13-21

Ciclo visual en los bastoncillos.

Rodopsina

l l-cts-retlnal

Retmal-todo-eraas

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

FIGURA 13-22

Isomerizaci6n inducida pot la luz del l l-cis-retinel.

Energia luminosa

Ll-cis-retinal

Retinal-todo-rrans

entre las posiciones 11 y 12, es de la confiquracion cis (figu-' ra 13-22). Se recordara que los enlaces dobles en la mayor parte de los compuestos isoprenoides son trans (pag. 302). Cuando la rodopsina se expone a la luz, el l I-cis-retinal Iiqado, experimenta la transformacion en retinal-todo-rrans. que provoca uncambio sustancial en la confiquracion de la molecula de retinal (fig. 13-22)'. Esta reaccion es no enzimatica: es una reaccion puramente fotoquimica que puede tener lugar a la temperatura del nitrcqeno liquido. La isomerizacion del retinal va ~eguida de una serie de otros cambios moleculares, que terminan en la disociacion de la rodopsina decolorada para rendir opsina libre y retinal-todo-rrans, el cual funciona como un gatillo para interrumpir el impulso nervioso (vease mas adelante).

Con objeto de regenerar la rodopsina a partir de la opsina y del retlnal-todo-rrans, este ultimo experimenta de nuevo la isomerizacion a l l-cis-rerinal. El Ienomeno ocurre en una secuencia de reacciones catalizadas por dos enzimas:

retinal ..

Retinal-todo-rrans + NADH + H+ reductasa

retinol-todo-zrans + NAD+

retinol ...

Retinol-todo-zrans isomerasa l l-czs-retinol

retinal-

ll-cis-retinol + NAD+ reductasa) Ll-czs-retinal + NADH + H-

El l l-cis-retinal asi formado se recombina despues con la opsin a y rinde rodopsina, completando de este modo el cicIo visual.

La parte crucial del ciclo visual es el mecanisme por el que la decoloracion de la rodopsina inicia el impulso nervioso en la retina, de modo que la luz es realmente percibida por el cerebro. Investigaciones recientes indican que la absorcion de la luz por las vesiculas de la membrana, semejantes a discos aplanados y situ ados en las celulas bastoncillo, provoca que las moleculas de rodopsina experimenten un cambio de conformacion que acompaiia a la conversion del l l-cis-retinal en retinal-todo-rrans, Este cambio altera la permeabilidad de la membrana vesicular, a ambos lad os de la cual existe, normalmente, una diferencia de potencial, de modo que los iones Ca2+ pueden fluir hacia fuera de las' vesiculas, disparando de este modo. el impulso nervioso. El Ca2+ desempeiia el papel de mensajero 0 mediador para acoplar el estimulo excitador a la fun cion del sistema receptor, 10 mismo que el Ca2+ acopla el

361

PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

impulso nervioso excitador al sistema contractil del musculo (pagina 770).

Puesto que la deficiencia de vitamina A afecta a todos los tejidos de los mamiferos y no solamente a la retina, el papel del retinal en el ciclo visual no representa, por tanto, la acci6n total de la vitamina A. Es posible que esta vitamin a desempefie un papel general en el trans porte de Ca2+ a traves de ciertas membranas, por analogia con su papel en las celulas bastoncillo; un papel mas general y de este tipo podria explicar los efectos de la deficiencia y del exceso en vitamina A, sobre los huesos y los tejidos conectivos.

Vitamina D

Desde hace mucho tiempo se sabia que el raquitismo, enfermedad del crecimiento de los huesos que produce .arqueamiento de las piernas y el pecho de paloma, es corriente en zonas de inviernos prolongados, donde los niiios se hallan poco expuestos a la luz solar, y que la ingesti6n de aceites de higado de pescado puede impedir los sintomas del raquitismo. Estas pistas condujeron al aislamiento e identificaci6n de varios compuestos que poseian actividad de vitamina D 0 de activi ... dad potencial de la misma. Los mas importantes son la vitamina D2, Hamada ergocalciferol, y la vitamina D3 0 colecalciferol (fig. 13~23), que es la forma que se encuentra corrientemente en los mamiferos. Estos compuestos pueden ser considerados como esteroides (pag. 304) en los que el anillo B se ha roto. Puesto que la irradiaci6n de ciertos alimentos con luz ultravioleta produce tambien sustancias con actividad de vitamina D, la busqueda de precursores de la vitamina D mostr6 que el 7 -deshidrocolesterol, que es corriente en los tejidos animales, se convertia en colecalciferol por irradiaci6n. De

FIGURA 13-23

Formacion de la vitamina D a partir de sus ptecursores,

Formacion de la vitamina D3 en los animales.

CH3

I

HC-CH2-CH2-CH2

I

CH3 CH -CH·

3 I

ca,

irradiacl6n de la piel

HO

7 -Deshldrocolesterol

Formecion de la vitamina D2 del ergosterol.

CRa CH3

I I

HC-CH=CH-CH

I

CRa CH3-CH

I

CH3

irradiaci6n

HO

Ergosterol

362

CH3

I

HC-CH2-CH2-CH.

I

CH3, CRa-CH

I

CH3

HO

Vitamina D3 (colecalctferol)

CRa CH3

I I

HC-CH=CH-CH

I CRa-CH

I

CH3

HO

Vitamina D2 (ergocalciferol)

FIGURA 13-24

Conversion del colecelciierol (vitamina D3) en 25-hidroxicalciferol. y despues en 1,25-dihidroxicolecalciferol, la forma active,

HO

! h1~ado

HO

!riii6n

HO

H

1 qCHal.

Colecalciferol

OH

251 qCHaJ.

25-Hidroxicolecalciferol

OH

251

qCHal.

1.25-Dihidroxicolecalciferol

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

manera semejante el ergosterol. esterol de la levadura, se convierte por irradiacion en ergocalciferol (fig. 13~23). A partir de estos descubrimientos se sabe ahora que el 7 -deshidrocolesterol de la piel es el precursor natural del colecalciferol en el hombre; esta conversion requiere irradiacion de la piel por la luz solar. En unadieta normal, no suplernentada, esta esla ruta principal por la cual los individuos adquieren habitual ... mente la vitamina D. La mayor parte de los alimentos naturales contienen muy poca 0 ninguna cantidad de vitamina D; la que se halla preformada en la dieta proviene en gran parte de los aceites de higado de pescado 0 de fuentes naturales irradiadas. Las preparaciones de vitamina D asequibles coo, mercialmente son productos de la irradiaci6n ultravioleta del ergosterol de la levadura. Un adulto necesita diariamente 20 p.g de vitamina D. La vitamina puede almacenarse en can" tidad suficiente en el higado con una simple dosis que es suficiente para varias semanas. Lo mismo que ocurre con la v.itamina A. el consumo excesivo de vitamina D provoca la fragilidad osea y que se experimenten fracturas multiples. 10 cual da a entender que ambas vitaminas desempefian alqun papel en el transporte biol6gico y en el dep6sito del calcio.

Aunque se sabe desde hace ya mucho tiempo que la vitamina D se halla relacionada con la calcificacion adecuada de los huesos, su papel bioquimico especifico no comienza a ser conocido hasta ahora, como resultado de recientes investigaciones. en particular las efectuadas por H. F. DeLuca y sus colaboradores. Las primeras claves importantes proceden de un estudio del sino metabolico del colecalciferol radiactivo preparado sinteticamente, de actividad especifica muy elevada, que se inyecta en animales en cantidades de microgramos y en las que es Hsioloqicamente activo. Un derivado etiquetado del colecalciferol, el 2S ... hidroxicolecalciferol, aparece en los tejidos yen la sangre (fig. 13 ... 24). Este producto es mas activo bioloqlcamente que el colecalciferol y se ha descubierto desde entonces que es la forma principal de circulaci6n por parte de la vitamina D en los animales, formada en el higado. DeLuca y sus colaboradores inyectaron 25 ... hidroxicolecalciferol radiactivo a animales y vieron que se metabolizaba ulteriormente a 1.2S-dihidroxicolecalciferol (fig. 13-24). Este compuesto es todavia mas activo; su administracion produce un estimulo de la absorci6n del Ca2+ por el intestino. Ulteriores experimentos efectuados por E. Kodicek, probaron que el rinon es el lugar de Iormacion del 1.25-dihidroxicolecalciferol. considerado en la actualidad como .la forma biol6gicamente activa de la vitamina D capaz de actuar directamente sobre sus objetivos principales, el intestino delgado y los huesos.

DeLuca ha postulado que el 1,25-dihidroxicolecalciferol es, en realidad, una hormona, sequn la definicion clasica de hormona considerada como un mensajero quimico producido en' un organa 0 glandula y transportado por la sangre al objetivo especifico de los tejidos en donde ejerce su fun cion reguladora. Asi, el 1,25-dihidroxicolecalciferol se forma en los rifiones y es transportado por la via sanguinea a sus objetivos, el intestino y los huesos. Diflere de otras hormonas solamente en que su precursor, tiene que ser aportado por la dieta si el animal es incapaz de convertir el 7 -hidroxicolesterol endogene, en colecalciferol,

Otras investigaciones han mostrado que el 1.25-dihidroxico-

363

PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

lecalciferol promueve la absorcion de Ca2+ desde el intestino a la sangre, gracias a su capacidad de estimular la biosintesis de proteinas especificas que participan en el transporte 0 union del Ca2+ en la mucosa intestinal. Este papel del 1,25.dihidroxicolecalciferol, se halla integrado con la accion de la hormona paratiroidea. Cuando la concentracion de Ca2+ de la sangre, se hace inferior a la normal, las glimdulas para~ tiroides segregan cantidades grandes de hormona paratiroidea, un polipeptido con 84 restos aminoacidos. Esta hormona actua sobre el rifion, estimulandolo a excretar mas fosfato en la orina y a producir mas 1 ,25~dihidroxicolecalciferol a partir de su precursor el 25~hidroxicolecalciferol. La hormona paratiroidea puede comportarse asl como una hormona tropica del 1 ,25~dihidroxicolecalciferol; una hormona tropica es aquella que estimula la sintesis 0 secrecion de otra hormona (pag. 818). La figura 13~25 compendia todas estas relaciones.

Vitamina E

Fue reconocida por primera vez como un factor presente en los aceites vegetales que restaura la fertilidad de las ratas alimentadas exclusivamente con leche de vaca y que de otro modo se muestran incapaces del estado de gestacion. Se aisle del germen de trigo y se le asigno el nombre de tocoferol (del griego tokos, alumbramiento). En las plantas se han encontrado varios tocoferoles diferentes con actividad de vitamina E; el mas activo y abundante es el a~tocoferol (fig. 13~26).

La funcion bloloqica del tocoferol es todavia oscura. Una de las razones es que su deficiencia produce en las ratas machos y hembras otros muchos slntomas, ademas de la esterilidad; por ejemplo, la deqeneracion de los rifiones, la aparicion de pigmentos pardos en los depositos lipidicos, la necrosis del higado y la distrofia 0 merma de los rmisculos esqueleticos, principalmente en los animales herbivores. tales como el cobaya. No se sabe si la deficiencia de tocoferol provoca la esterilidad en el ser humano.

FIGURA 13-25

Resumen de los precutsores, metabolismo y [uncion de la vitemine DJ•

7 -Deshidrocolesterol

1 piel

(trredlecton ul travioleta)

Colecalciferol (DJ)

1 higado 25-Hidroxicolecalciferol

jrifiOn

{promov ido por Ia hormona paratiroide:a y bajo contenido de fosfato en sangre)

1,25-Dihidroxicolecalciferol

/

\

En el intestino promueve la absorcion de Ca2+ (efecto primario)

En el hueso promueve la eliminacion del Ca2+

FIGURA 13-26

Vitamina E y vitemine K. Ambas son compuestos isoprenoides; las unidades

de isopreno se hallan separadas pot trazos coloreados.

CHa

HOW CHa CHa CHa

7" \ I I I . I I I

. I ~~~-~-rn-~~~-~-rn-~~~-~-rn-~

CH:; ~ 0 CHa

rna '

Vitamina E (a-tocoferol)

Vitamina KI

o

~CHa ra

~CH2-CH=c-rn2)nH

o

Vitamina K2 [n, puede ser 6, 7, 8, 9 o 10, sequn la especie)

364

o

w~

o

Vitamina K3 (menadiona)

FIGURA 13-27

Dicumerol [3,3' -metilenbisi 4-hidroxi- 1,2-benzopirona)J, antagonista de la vitamina K.

OH OH

I I

CXC~C--CH--C<"".cX)

I 2 I I

O/C=O O=C",-O ~

Capitulo 13 Vitaminas y coenzimas

Se ha descubierto que los tocoferoles pose en actividad an ... tioxidante, es decir, que impiden la auto-oxidacion de los acidos grasos muy insaturados [paq. 287) cuando se halIan expuestos al oxigeno molecular. Tal auto-oxidacion da por resultado la polimerizacion de los acidos grasos insaturados, proceso que es semejante al que ocurre en el «secado» del aceite de linaza en las pinturas, para producir un producto polimero, insoluble, tenaz y duro. Algunos sintomas de la deficiencia de tocoferol en los animales pueden, de heche, ser impedidos por otros compuestos con actividad antioxidante, algunos de los cuales, como la N,N-dimetil-p-fenilendiamina, no poseen una relaclon estructural clara con el tocoferol, ni se encuentran bioloqicamente. Una de las funciones del tocoferol puede ser la de proteger a los acidos grasos muy ins aturados presentes en los Iipidos de las membranas contra los efectos nocivos del oxigeno molecular. Normalmente, los productos de auto-oxidacion de las grasas insaturadas no aparecen en los tejidos, pero en el caso de deficiencia de tocoferol, son detectables en las grasas de deposito, en el higado y en otros orqanos. Sin embargo, no parece probable que sea esta la (mica accion biologic a del tocoferol. El coenzima Q y algunos de sus derivados (pag. 503) poseen tambien actividad semejante a la de aquel.

Vitamina K

La vitamina K (de la inicial danesa K, de coaqulacion] fue descubierta por H. Dam, en Dinamarca, como factor nutritivo necesario para la coagula cion de la sangre en polIos alimentados con una dieta productora de una tendencia a las hemorragias. Su aislamiento y la determinacion de su estructura, fueron lIevados a cabo por E. A. Doisy y colaboradores en 1939 en los Estados Unidos. Se conocen, por 10 menos, dos formas de vitamina K (fig. 13-26), y se cree que la vitami ... na K2 es la forma activa. La menadiona. 0 vitamina K3, es un producto sintetico que carece de una larga cadena lateral. La deficiencia en vitamina K no puede inducirse con facilidad en las ratas y en otros mamiferos, debido a que esta vitamina es sintetizada por las bacterias intestinales.

El unico resultado conocido de la deficiencia de vitamina Kl es la incapacidad del hiqado, para la sintesis del enzima procqnvertina. Este enzima cataliza una etapa de una secuen ... cia compleja de reacciones implicadas en la formacion de la protrombina, que es el precursor de la trombine, proteina que acelera la conversion del iibrinogeno en [ibrine: esta ultima es la proteina insoluble que constituye la porcion fibrosa de los coaqulos de sangre. El dicumerol, compuesto analoqo a la vitamina K (fig. 13-27), produce en los animales sintomas semejantes a los que provoca la deficiencia de vitamina K; en realidadse cree que bloquea la actuacion de la vitamina K. El dicumarol se emplea en medicina clinica para impedir la coaqulacion en los vasos sanguineos.

Puesto que la vitamin a K se produce en muchos microorqanismos y en la mayor parte de las plantas y ademas se encuentra en los tejidos de todos los organismos, ha surgido la cuestion de si no poseera otra actividad biologic a mas general, que la de ser un factor de coaqulacion san guinea. Cierta evidencia indica que puede actuar como coenzima en

365

PARTE 1 COMPONENTES MOLECULARES DE LAS CELULAS

una ruta especializada de trans porte electronico en los tejidos animales: como quiera que la vitamina K es una quinona que puede reducirse reversiblemente a quinol, puedeque actue como transportador electronico.

Resumen

Las vitaminas son sustancias orqamcas, que actuan en cantidades mimmas y son esenciales en la functon de la mayor parte de las formas de vida •. pero que algunos organismos son incapaces de sintetizar y deben consequirlas, por tanto. de fuentes exoqenas, -Se claslfican en hidrosolubles y llposolubles.

La mayor parte de las vitaminas hldrosolubles, actuan como sijkIres necesarios componentes de cierto numero de diversos coenztmas importantes en las rutas metabolicas centrales. La tiamina (vitamina Bt). cuya deficiencia provoca el beriberi en el hombre. es el componente activo del pirofosfato de tiamina, un coenzima necesario para la descarboxilacion enzlmatlca de los a-oxoacidos. La riboflavina (vitamina 8,) es un componente de los coenzimas flavin-monucleotido (FMN) y flavin-adenindinucleottdo (FAD) que actuan como grupos prosteticos transportadores de hidroqeno en ciertos enzimas de oxidaclon, El acido nicotinico, cuya deficiencia provoca la pelagra. es un componente de los dlnucleotidcs de nicotinamida y de adenina (NAD y NADP). 'que Iuncionan como transportadores de electrones para las deshidrogenasas dependientes de la piridina. El acldo pantotenico es un componente esencial del coenzima A. que aetna como transportador de grupos acilo durante la oxidaclon enzimatlca y sintesis de los acidos grasos. La vitamina B6 (piridoxina) es un precursor esencial del coenzima fosfato de plridoxal, que sirve como grupo prostetico de las transaminasas y otros enzimas transformadores de aminoacidos. La biotina funciona como grupo prostetico de ciertas carboxilasas; sirve como transportador de dloxido de carbono. El acido folico es el precursor del acldo tetrahidrofohco, un coenzimaque funciona en la transferencia enzimatica de algunos compuestos monocarbonados. El actdo lipoico desempeiia el papel de transportador de atomos de hldroqeno y de grupbs acilo en la descarboxilacion oxidativa de los e-oxoactdos, La vitamina BI2 0 cobalamina, que es esencial para la nutricion de la mayor parte de los organismos superiores, posee un sistema anular de corrina complejo. Su derivado 5'-desoxiadenosilico. llamado coenzima Bu. interviene en la catalisis enzimatlca de los desplazamientos 1.2. de atomos de hidroqeno, entre atomos de carbono adyacentes. La metilcobalamina interviene en cierto numero de reacciones de transferencias de grupos metilo.

Las vitaminas liposolubles no actuan como componentes de los coenzlmas, pero desempefian otros papeles importantes. La vitamina A. cuyo precursor es el p-caroteno. es un pigmento receptor sensible a la luz, que interviene en el ciclo visual y se halla en los bastoncillos de los vertebrados. La vitamina D es un derivado esteroide formado por irradiacion del 7 -deshidrocolesterol: es el precursor bioloqlco principal del 1.25-dihtdroxlcolecalclferol, que ejerce una accion de caracter hormonal en 1a actlvacion de la fijacion y transporte del Ca2•• en el intestino y en los huesos. La deficiencia de vitamina E. 0 tocoferol, en la dleta produce una variedad de sintomas en los vertebrados. La vitamina K. una quinona con una cadena lateral Isoprenotde, esta implicada en la biosintesis de los componentes del mecanisme de coaqulaclon de la sangre. y probablemente, tiene otras funciones.

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