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OBJETIVOS
o Comprender el concepto de colonia bacteriana, medio de cultivo y halo de
inhibición
o Conocer las técnicas de siembra y cultivo de bacterias
o Ser consciente de la importancia de la higiene y el cuidado en la manipulación
de materiales biológicos.
o Comprender la importancia de la eliminación de los residuos orgánicos
o Conocer el instrumental de laboratorio necesario en microbiología y los
procedimientos para su utilización
MATERIALES
o Depresor de lengua
o Torunda estéril
o Placas de agar-sangre
o Asa de siembra
o Rotulador de vidrio
o Cinta adhesiva
o Contenedor de residuos orgánicos
DESARROLLO DE LA PRÁCTICA
Antes de empezar
o No se puede tocar nada que vaya a tomar contacto con la muestra biológica con
las manos (depresor, asa de siembre, torunda,...) para evitar contaminaciones.
o Una vez utilizado este material ha de ser eliminado en un contenedor especial.
Estos contenedores serán llevados posteriormente a una planta de tratamiento de
residuos biológicos, donde serán incinerados.
o Todos los materiales o muestras tomadas deben estar
perfectamente identificados: nombre, grupo, fecha e
indicativo del tipo de muestra.
o Las placas sembradas deben sellarse con cinta adhesiva al
finalizar para evitar su contaminación o la nuestra.
o Al acabar la práctica, se deben lavar bien las manos.
Toma de la muestra
o Se abre con cuidado, por un extremo, el depresor de madera,
sin tocar el otro extremo para mantenerlo estéril.
o Distribuidos por parejas, uno de los miembros de la pareja
sujeta con el depresor la lengua del otro, colocándola pegada
al suelo de la boca, manteniendo despejada la abertura
bucal.
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Departamento de Ciencias Naturales IES Alpajés
Siembra
o A continuación se toma una placa de agar-sangre y se procede a la
siembra del material recogido con la torunda. Se extrae la funda de
la torunda y se pasa SUAVEMENTE por la superficie, cubriendo
el área señalada en el dibujo como (A)
o Al finalizar, se tira la torunda al contenedor de desechos
orgánicos.
Aislamiento
o Para intentar que las colonias crezcan separadas tomamos un asa de
siembra y se realizan resiembras en dos zonas:
o (B) Tocando con el asa la zona (A) se realiza una línea zig-
zagueante SUAVEMENTE sobre la superficie (no hay que
perforar la superficie del agar-sangre)
o (C) Sin tocar las anteriores zonas.
o Se tapa y se sella la placa con cinta adhesiva.
o Se rotula la tapa indicando el nombre del donante, su grupo-clase,
la fecha y la F (de frotis faríngeo).
Incubación y observación
Se llevan las placas a incubar a 37ºC (temperatura corporal), durante
24 horas. Tras este período se recogen las placas y SIN ABRIR se observa
el crecimiento bacteriano.
Al finalizar la práctica se entregan las placas al profesor para que sean destruidas
junto con el resto de material empleado.
OBSERVACIÓN
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RESULTADOS
Dibuja la placa representando las colonias que han crecido en
ella. Responde a las siguientes preguntas:
1) ¿Se observa un único tipo de colonias o hay varios tipos
distintos?
En caso de que haya tipos distintos describe las
diferencias entre las colonias
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