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Turbidimetria
Turbidimetria
encuentran absorbancias muy diferentes por partcula o por UFC cuando los
tamaos de las clulas bacterianas son diferentes. Por esta razn, para estimar el
nmero de microorganismos totales o el nmero de microorganismos viables de una
suspensin bacteriana debe realizarse una "curva de calibracin" con cada tipo de
microorganismo, slo de esta forma es posible relacionar Absorbancia (Densidad
ptica) con el nmero de microorganismos totales o con UFC.
Peso seco: Concentracin celular bacteriana expresada en unidades de peso seco
(g/ml-mg/ml).
La relacin directa entre la absorbancia y el peso seco slo se aplica para
suspensiones diluidas de bacterias. Estas suspensiones no deben tener una
absorbancia mayor a 0.3, ya que valores mayores producen desviaciones de la ley
de Beer. Sin embargo, el inconveniente de utilizar suspensiones diluidas puede
involucrar un mayor error de pipeteo y menor sensibilidad por el bajo nivel de
absorcin.
VENTAJAS Y DESVENTAJAS DEL METODO DE CUANTIFICACION DE BIOMASA
Los mtodos de dispersin de la luz son las tcnicas ms utilizadas para monitorear
el crecimiento de los cultivos bacterianos. Son muy tiles y poderosos pero pueden
llevar a resultados errneos. Principalmente, dan informacin sobre el peso seco
(contenido macromolecular).
Ventajas
- Son mtodos rpidos.
- La turbidimetra puede realizarse en espectrofotmetros de radiacin visible o
UV.
- La fuente de radiacin ms frecuentemente usada es la lmpara de
wolframio, pero pueden utilizarse otras fuentes de radiacin visible.
Desventajas
- Cuantificar microorganismos vivos y muertos.
- til para densidades microbianas bajas de microorganismos unicelulares y
tamaos de unos cuantos micrmetros.
- Para microorganismos ms grandes y productores de polisacridos esta
metodologa no es adecuada.
BIBLIOGRAFA:
1. http://www.ucm.es/info/mfar/pdfs/guias/Guia_Indus.pdf
2. http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioRecuento.htm
3. http://www.ugr.es/~eianez/Microbiologia/12crecimiento.htm#_Toc58934319