UNIVERSIDAD CENTRAL DE ECUADOR FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS ESCUELA DE BIOQUIMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA Nombre: Cristhian Narvaez Curso: Noveno Semestre Alimentos Fecha: 2011-04-16

Mtodos de cuantificacin de Biomasa. Ventajas Densidad ptica (Absorbancia).

y desventajas de la Turbidimetria y

La Turbidimetra mide la reduccin de la transmisin de luz debido a partculas de una suspensin y cuantifica la luz residual transmitida. Estudios tericos y experimentales han mostrado que soluciones diluidas de diferentes tipos de bacterias, independientemente del tamao celular, tienen casi la misma absorbancia por unidad de concentracin de peso seco. Esto quiere decir que, en soluciones diluidas, la absorbancia es directamente proporcional al peso seco, independientemente del tamao celular del microorganismo. Entre las ventajas mas destacables de los mtodos de dispersin de luz estn: El mtodo turbidimetrico puede realizarse tanto en el rango de luz visible, como el de ultravioleta dando un gran espectro de accin Se puede trabajar con densidades microbianas bajas, de microorganismos de tamao de unos cuantos nanmetros.

Las desventajas por su parte son: Las suspensiones con las que se trabajan no deben tener una absorbancia mayor a 0.3, ya que valores mayores producen desviaciones de la ley de Beer. El trabajar con suspensiones diluidas puede involucrar un mayor error de pipeteo y menor sensibilidad por el bajo nivel de absorcin.

Existe una relacin directamente proporcional entre la absorbancia y el peso seco, no as entre la misma y el nmero total de microorganismos. En estos grficos se puede apreciar que suspensiones diluidas de dos microorganismos diferentes con igual peso seco tienen la misma absorbancia, mientras que para el mismo nmero de microorganismos totales la absorbancia de cada suspensin es distinta Cabe recordar, que se encuentran absorbancias muy diferentes por partcula o por UFC (Unidad Formadora de Colonia) cuando los tamaos de las clulas bacterianas son diferentes. Por esta razn, para estimar el nmero de microorganismos totales o el nmero de microorganismos viables de una suspensin bacteriana debe realizarse una "curva de calibracin" con cada tipo de microorganismo, slo de esta forma es posible relacionar Absorbancia (Densidad ptica) con el nmero de microorganismos totales o con UFC.

Absorbancia en funcin del Peso Seco

Absorbancia en funcin del Nmero de Microorganismos Totales Bibliografa www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioRecuento.htm www2.udec.cl/~pasantias/publicacion/10.pdf http://es.scribd.com/doc/22450159/eq-8-cuantificacion-y-aislamiento-de-microorganismosmicrobiologia