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Toxicidad Dermica
Toxicidad Dermica
ROEDORES
1. INFORMACIN PRELIMINAR
Requisitos previos
Definiciones
Toxicidad drmica subcrnica: es los efectos adversos que se producen como resultado
de la aplicacin drmica diaria repetida de un producto qumico a animales
experimentales para la parte (no superior a 10 por ciento) de un perodo de vida.
Dosis en una prueba cutnea: es la cantidad de sustancia de ensayo que se aplica a la piel
(se aplica a diario en las pruebas subcrnica). La dosis se expresa como el peso (g, mg),
en peso de la sustancia de ensayo por unidad de peso del animal (por ejemplo, mg / kg).
Nivel sin efecto Nivel Bajo / no-txico-efecto / sin efecto adverso: es la dosis mxima
utilizada en una prueba que no produce efectos adversos. Un nivel de efecto se expresa
en trminos del peso de una sustancia dada a diario por unidad de peso del animal (mg
/ kg).
Toxicidad acumulativa: son los efectos adversos de dosis repetidas que se producen como
resultado de una accin prolongada en, o aumento de la concentracin de la sustancia
administrada o sus metabolitos en, tejido susceptible.
Preparativos
Se mantiene a los animales en las condiciones de alojamiento y alimentacin
experimentales durante al menos 5 das previos a la prueba. Antes de comenzarla, se
distribuye al azar a los animales, que sern jvenes y sanos, para formar grupos de
tratamiento y de control. Antes de proceder a la aplicacin, se elimina el pelo de la regin
dorsal del tronco de los animales. Puede emplearse afeitado, pero deber practicarse
aproximadamente 24 horas antes de la prueba. Suelen ser necesarios cortes o afeitados
reiterados del pelo, ms o menos a intervalos semanales. Al practicarlos, hay que cuidar
de no lesionar la piel. Deber dejarse despejada, para la aplicacin de la sustancia en
estudio, una superficie no inferior al 10% de la corporal. Para decidir la zona que debe
despejarse y las dimensiones de la superficie a tratar, se tendr en cuenta el peso del
animal. Cuando se prueben slidos, que pueden pulverizarse si se considera oportuno,
se humedecer lo suficiente la sustancia estudiada con agua o, en caso necesario, un
vehculo apropiado para garantizar un buen contacto con la piel. Las sustancias lquidas
se emplean por lo general sin diluir. Se practican aplicaciones diarias 5 7 das a la
semana.
Animales de experimentacin
Seleccin de especie
Pueden emplearse ratas, conejos o cobayas adultos. Es posible emplear otras especies,
pero su uso exigira justificacin. Al principio de la prueba, los pesos no diferirn en un
porcentaje superior al 20% del peso medio en ratas, de 200 a 300 g; conejos, 2,0 a 3,0
kg; cobayas, 350 a 450 g. Cuando se realice una prueba drmica subcrnica como
preliminar a una de ndole crnica, se utilizar en ambas las misma especie y cepa.
Nmero y sexo
Se utilizarn al menos 20 animales (10 hembras y 10 machos) con piel sana para cada
dosis. Las hembras sern nulparas y no estarn preadas. Si est previsto el sacrificio
de algunos animales durante la prueba, debe aumentarse su nmero en una cantidad
igual a la de los que vayan a sacrificarse antes de terminar el estudio. Adems, puede
tratarse a un grupo satlite de 20 animales (10 de cada sexo) con la dosis ms alta durante
90 das para observar en ellos la reversibilidad, la persistencia o la aparicin tarda de
efectos txicos durante 28 das tras el tratamiento.
Alojamiento y alimentacin
Los animales deben ser alojados en jaulas individuales. La temperatura en el cuarto de
experimentacin debe ser de 22 C ( 3 ) para los roedores o 20 C ( 3 ) para los
conejos y la humedad relativa del 30-70 por ciento. Cuando la iluminacin es artificial,
la secuencia debe ser de 12 horas de luz y 12 horas de oscuridad. Para la alimentacin,
las dietas de laboratorio convencionales se pueden usar con un suministro ilimitado de
agua potable.
sustancia estudiada, los animales del grupo de control deben recibir un trato idntico al
de los integrantes del grupo de prueba. Cuando se utilice un vehculo para facilitar la
administracin, el grupo de control lo recibir de igual modo que los grupos tratados, y
en cantidad igual a la administrada al grupo con dosis ms alta. La dosis ms alta debe
originar efectos txicos, pero producir pocos fallecimientos, o ninguno. La dosis ms baja
no debe originar signo alguno de toxicidad. Cuando se disponga de una estimacin vlida
de la exposicin humana, la dosis mnima ser superior a ese valor. Lo ideal sera que la
dosis media produjera el efecto txico mnimo observable. Si se emplea ms de una dosis
intermedia, la diferencia entre dosis ser suficiente para que los efectos txicos
resultantes sean escalonados. En los grupos con dosis bajas e intermedias, as como en
los controles, la mortalidad debe ser baja, a fin de permitir una evaluacin significativa
de los resultados.
Si la aplicacin de la sustancia probada provoca una irritacin cutnea grave, se
reducirn las concentraciones, lo que quiz origine una reduccin, o la ausencia, de otros
efectos txicos con la dosis alta. Si la piel ha sufrido lesiones importantes, quiz sea
necesario dar por concluido el estudio y emprender uno nuevo a concentraciones
menores.
Ensayo lmite
Si un ensayo con una sola dosis de al menos 1000 mg kg de peso corporal / (en funcin
de la exposicin humana esperada puede indicar la necesidad de utilizar una dosis alta),
utilizando los procedimientos descritos en este estudio, no produce ningn efecto txico
observable y si la toxicidad no lo hara esperarse sobre la base de datos de compuestos
estructuralmente relacionados, realizar un estudio completo con tres dosis puede no ser
considerada necesaria.
Perodo de observacin
Un cuidadoso examen clnico debe hacerse por lo menos una vez al da.
Las observaciones se deben hacer todos los das de manera que se minimizar la prdida
de los animales para el estudio, por ejemplo, autopsia o refrigeracin de los animales
muertos, as como aislamiento o sacrificio de los animales dbiles o moribundos.
Es preciso observar a diario a los animales de experimentacin en busca de signos de
toxicidad. Hay que tomar nota del momento del fallecimiento y de los de aparicin y
desaparicin de signos de toxicidad.
Procedimiento
Patologa
Autopsia
Se practicar en todos los animales una autopsia completa que comprenda la inspeccin
de la superficie externa del cuerpo, todos sus orificios y las cavidades craneal, torcica y
abdominal y sus contenidos. Hgado, riones, suprarrenales y testculos deben pesarse
frescos lo antes posible tras la diseccin, a fin de evitar la desecacin. Se conservarn en
un medio adecuado para un posible examen histopatolgico posterior los rganos y
tejidos siguientes: todas las lesiones macroscpicas, el cerebro incluidos cortes de
bulbo/protuberancia, corteza cerebelosa y enceflica, hipfisis, tiroides/paratiroides,
tejido tmico (trquea), pulmones, corazn, aorta (glndulas salivares), hgado, bazo,
riones, suprarrenales, pncreas, gnadas, tero, rganos genitales accesorios, vescula
biliar (si existe), esfago, estmago, duodeno, yeyuno, leon, ciego, colon, recto, vejiga
urinaria, ganglio linftico representativo (glndula mamaria femenina) (musculatura del
muslo), nervio perifrico (ojos) (esternn con mdula sea) (fmur, incluida superficie
articular) (mdula espinal a tres niveles: cervical, mesotorcico y lumbar) y (glndulas
lagrimales exorbitarias). Los tejidos que aparecen entre parntesis slo se examinarn si
as lo aconsejan los signos de toxicidad o afectacin del rgano diana.
Examen histopatolgico
a) Se sometern a un examen histopatolgico completo la piel normal y la tratada, y los
rganos y tejidos de los animales de los grupos de control y los de dosis mxima.
b) Se examinarn todas las lesiones macroscpicas.
c) Se examinarn los rganos efectores de los animales de grupos con otras dosis.
d) Si se utilizan ratas, se sometern los pulmones de los animales integrantes de los
grupos con dosis mnimas e intermedias a examen histopatolgico en busca de signos de
infeccin, ya que esta medida permite una evaluacin cmoda del estado de salud de los
animales. Es posible que en los animales de estos grupos no sean necesarios por sistema
exmenes histopatolgicos complementarios, pero siempre se llevarn a cabo en los
rganos de los del grupo con dosis mxima que presenten indicios de lesiones.
e) Cuando se utilice un grupo satlite, se practicar un examen histopatolgico de los
tejidos y rganos que presenten signos de toxicidad en los grupos tratados.
3. RESULTADOS Y REPORTE
Tratamiento de datos
Condiciones de la prueba
Descripcin de los
txicos o de otro tipo
efectos
Momento de observacin de
cada signo anmalo y evolucin
de ste
Datos sobre alimentacin y peso
Hallazgos oftalmolgicos
Pruebas
hematolgicas
practicadas y sus resultados
completos
Pruebas de bioqumica clnica
empleadas y sus resultados
Informe de la prueba
4. BIBLIOGRAFIA
Subchronic Dermal Toxicity: 90-day Study; 411 OECD GUIDELINE FOR
TESTING OF CHEMICALS Adopted: 12 May 1981.
Diario Oficial de las Comunidades Europeas; Toxicidad Drmica Subcrnica:
ensayo de 90 das en roedores.
Manuel Repetto Jimnez, Guillermo Repetto Kuhn.
TOXICOLOGA
FUNDAMENTAL; Instituto Nacional de Toxicologa; Universidad de Sevilla.
Cuarta edicin.